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2023年盐城市猪O型口蹄疫免疫抗体水平监测与分析
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作者 陈静华 吴婷婷 +1 位作者 余树培 陈丽珠 《山东畜牧兽医》 2025年第3期1-2,4,共3页
为全面了解盐城市2023年猪O型口蹄疫免疫抗体水平,本研究采用液相阻断酶联免疫吸附方法对全市猪场收集的601份猪血清样品进行检测。结果显示,春防、夏防、秋防的猪O型口蹄疫免疫抗体样品监测合格率分别为98.27%、93.57%、92.61%,场群监... 为全面了解盐城市2023年猪O型口蹄疫免疫抗体水平,本研究采用液相阻断酶联免疫吸附方法对全市猪场收集的601份猪血清样品进行检测。结果显示,春防、夏防、秋防的猪O型口蹄疫免疫抗体样品监测合格率分别为98.27%、93.57%、92.61%,场群监测合格率分别为84.62%、78.95%、85.19%,10个县(市、区)的个体合格率和场群合格率均超过国家标准,免疫效果良好。 展开更多
关键词 o型口蹄疫 ELISA 抗体水平 监测
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O型口蹄疫病毒VLPs疫苗抗体竞争ELISA检测方法的建立 被引量:1
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作者 刘玲 戴伶俐 +7 位作者 李晓艳 付玲芳 康斌 董鹏 武玉梅 尹忠良 吴蒙 李雪峰 《中国兽医杂志》 北大核心 2025年第6期60-66,共7页
为实现对口蹄疫病毒(FMDV)类病毒颗粒(VLPs)疫苗免疫效果的有效评估,建立一种O型FMDV VLPs疫苗抗体竞争酶联免疫吸附测定(ELISA)检测方法。本试验以O型FMDV VLPs作为免疫原免疫小鼠制备单克隆抗体,通过O型FMDV VLPs和O型FMDV灭活疫苗抗... 为实现对口蹄疫病毒(FMDV)类病毒颗粒(VLPs)疫苗免疫效果的有效评估,建立一种O型FMDV VLPs疫苗抗体竞争酶联免疫吸附测定(ELISA)检测方法。本试验以O型FMDV VLPs作为免疫原免疫小鼠制备单克隆抗体,通过O型FMDV VLPs和O型FMDV灭活疫苗抗原筛选,ELISA四参数拟合曲线判定,确定最佳单抗。将O型FMDV VLPs作为包被抗原,辣根过氧化物酶(HRP)标记特异性单抗与被检血清竞争结合,通过优化确定O型FMDV VLPs最佳包被浓度、HRP标记特异性单抗最佳工作浓度和最适封闭液,经计算确定判定标准,并进一步分析该竞争ELISA方法的敏感性和特异性;采用建立的方法检测90份O型FMDV VLPs疫苗免疫猪血清样品,验证其实用性。结果显示,O型FMDV VLPs特异性单抗为1D3单抗,该竞争ELISA检测方法的最佳工作条件为:O型FMDV VLPs最佳包被浓度为0.2μg/mL,HRP标记1D3单抗最佳工作浓度为1∶1000,最适封闭液为1%明胶。竞争ELISA判定标准为:被检血清阻断率≥40%,判为阳性;被检血清阻断率≤32%,判为阴性;被检血清阻断率介于32%~40%,则应在14 d后对动物进行重新检测。敏感性和特异性试验结果显示,建立方法的最低检测限为血清效价1∶1000,仅有O型FMDV VLPs疫苗免疫阳性血清能发生竞争性结合,O型和A型FMDV灭活疫苗免疫猪阳性血清无竞争性结合。90份O型FMDV VLPs疫苗免疫猪血清样品的阻断率结果符合体液免疫应答的一般规律,证明该方法可以有效评估O型FMDV VLPs疫苗免疫后血清抗体水平。本试验建立的FMDV VLPs疫苗抗体竞争ELISA检测方法可为开发更多VLPs疫苗检测技术提供技术支撑。 展开更多
关键词 o型口蹄疫 类病毒颗粒(VLPs) 竞争ELISA
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2022—2024年上海市浦东新区家畜O型口蹄疫免疫效果评估
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作者 李亚锋 何随彬 +6 位作者 刘海 白艺兰 朱爱军 张佩燕 曹杰 徐蕾 龚志亮 《上海畜牧兽医通讯》 2025年第4期38-42,共5页
为掌握浦东新区家畜O型口蹄疫免疫效果,在2022—2024年每年春防和秋防期间,从17个镇共采集猪、牛、羊血清样品15443份,采用阻断酶联免疫吸附试验法进行检测,统计分析不同年份、季节、畜种以及场点类型家畜O型口蹄疫免疫情况。结果显示:1... 为掌握浦东新区家畜O型口蹄疫免疫效果,在2022—2024年每年春防和秋防期间,从17个镇共采集猪、牛、羊血清样品15443份,采用阻断酶联免疫吸附试验法进行检测,统计分析不同年份、季节、畜种以及场点类型家畜O型口蹄疫免疫情况。结果显示:1)不同年份间比较可知,场群和个体合格率均无显著差异(P>0.05);2022—2024年场群合格率和个体合格率均处于较高水平且保持稳定,2024年个体合格率(95.66%)最高。2)不同季节间比较可知,春、秋季间猪场群和个体合格率均无显著差异(P>0.05);牛场群合格率差异显著(P<0.05),个体合格率无显著差异(P>0.05);羊场群和个体合格率均差异显著(P<0.05)。3)不同畜种间比较可知,猪场群合格率显著高于牛、羊(P<0.05),羊个体合格率显著低于猪、牛(P<0.05)。4)不同场点间比较可知,规模场显著高于专业户与散养户(P<0.05);规模场、专业户和散养户的场群合格率分别为99.21%、82.98%和84.29%,个体合格率分别为97.06%、83.97%和87.59%。结果表明:浦东新区家畜O型口蹄疫整体免疫效果良好,羊只免疫有待加强,建议调整免疫流程,强化集中免疫与日常补免,助力养殖业健康发展。 展开更多
关键词 o型口蹄疫 效果 家畜 浦东新区
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塔什库尔干县帕米尔牦牛O型口蹄疫抗体监测分析
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作者 段新华 热孜瓦尼姑丽·吾甫尔 +2 位作者 姚燕平 王太雨 敖维平 《现代畜牧兽医》 2025年第2期68-72,共5页
为掌握塔什库尔干县帕米尔牦牛O型口蹄疫(foot and mouth disease,FMD)免疫效果,从辖区10个乡镇560个场(点)随机采集帕米尔牦牛血清共3984份,采用液相阻断ELISA方法检测O型FMD免疫抗体效价。结果显示,2021—2024年塔什库尔干县帕米尔牦... 为掌握塔什库尔干县帕米尔牦牛O型口蹄疫(foot and mouth disease,FMD)免疫效果,从辖区10个乡镇560个场(点)随机采集帕米尔牦牛血清共3984份,采用液相阻断ELISA方法检测O型FMD免疫抗体效价。结果显示,2021—2024年塔什库尔干县帕米尔牦牛O型FMD免疫抗体合格率(抗体效价≥1∶128)分别为77.21%、91.21%、86.41%、88.51%,平均免疫抗体合格率为85.72%,均达到农业农村部要求的70%以上的标准。2021—2022年秋季合格率普遍高于春季,2023年后差异不大;2022—2024年免疫抗体合格率相近,均极显著高于2021年(P<0.01)。研究表明,塔什库尔干县2021—2024年帕米尔牦牛FMD免疫工作达到预期效果,但在不同年份和季节,抗体合格率存在一定程度的波动,应继续加强牦牛防疫体系建设,提高牦牛群免疫抗体水平,从而提高免疫效果,为帕米尔牦牛养殖业的持续健康发展提供保障。 展开更多
关键词 帕米尔牦牛 o型口蹄疫 抗体 抗体监测
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2022-2024年会泽县牛A型、O型口蹄疫免疫效果监测
5
作者 付丽 《河南畜牧兽医》 2025年第10期9-10,共2页
2022-2024年,会泽县连续对25个乡镇598个牛养殖场(户)开展A/O型口蹄疫免疫效果监测,结果显示,A型和O型免疫合格率在70%以上的牛场(户)分别占比86.0%和81.1%。其中,2023年O型免疫效果最好,2024年A型表现最佳。疫苗接种质量和覆盖范围稳... 2022-2024年,会泽县连续对25个乡镇598个牛养殖场(户)开展A/O型口蹄疫免疫效果监测,结果显示,A型和O型免疫合格率在70%以上的牛场(户)分别占比86.0%和81.1%。其中,2023年O型免疫效果最好,2024年A型表现最佳。疫苗接种质量和覆盖范围稳步提高,基层防控体系建设取得阶段性成果。建议针对免疫水平波动较大的乡镇实施重点指导,推动防控工作更科学规范,切实提升全县牛口蹄疫防控能力。 展开更多
关键词 A o型口蹄疫 苗接种 效果
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2020—2024年遵义地区牛羊O型口蹄疫免疫抗体血清学调查与分析
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作者 尹鑫 李星星 +2 位作者 王璐 龙梦瑶 朱大举 《今日畜牧兽医》 2025年第7期11-13,共3页
【目的】系统评估贵州省遵义市牛羊O型口蹄疫(FMD)强制免疫计划的实施效果,探究免疫抗体水平的动态变化规律,为优化本地区FMD防控策略提供科学依据。【方法】2020—2024年,采用多阶段分层随机抽样方法,在遵义市15个县(市、区)的规模化... 【目的】系统评估贵州省遵义市牛羊O型口蹄疫(FMD)强制免疫计划的实施效果,探究免疫抗体水平的动态变化规律,为优化本地区FMD防控策略提供科学依据。【方法】2020—2024年,采用多阶段分层随机抽样方法,在遵义市15个县(市、区)的规模化养殖场和散养户中,采集春秋两季集中免疫后21 d的牛血清样本1091份和羊血清样本2410份。应用固相竞争ELISA法检测所有血清样本中的O型口蹄疫病毒特异性抗体,并对免疫合格率进行年度、畜种及季节间的比较分析。【结果】2020—2024年,遵义市牛羊O型口蹄疫免疫抗体年度平均合格率分别为97.6%、97.1%、94.4%、98.5%和92.9%,5年总体平均合格率为96.1%。其中,牛群免疫合格率在2022年出现低谷(87.9%),羊群则在2024年降至最低(90.5%)。季节性分析显示,春季免疫平均合格率(牛97.4%、羊96.3%)普遍优于秋季(牛95.1%、羊95.5%)。【结论】遵义市牛羊群体已形成较为坚实的O型口蹄疫免疫屏障,总体免疫效果显著,抗体合格率远高于国家标准。但监测结果亦揭示了部分年份和秋季免疫工作中存在潜在的薄弱环节。建议通过实施动态风险监测、强化冷链管理和标准化操作培训等综合措施,进一步巩固和提升免疫质量。 展开更多
关键词 o型口蹄疫 抗体 血清学调查 效果评估
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2017-2023年眉县猪、牛和羊O型口蹄疫免疫抗体监测与分析 被引量:5
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作者 王勃森 张芬芳 李引乾 《动物医学进展》 北大核心 2024年第10期62-67,共6页
为获知近年来眉县猪、牛和羊口蹄疫的免疫情况,对2017-2023年间全县8个镇(街)共7059份猪、牛和羊血清样品进行抗体检测,并从不同年份、不同季节、不同区域等角度对当地口蹄疫免疫抗体合格率进行比较分析。结果显示,2017-2023年眉县全域... 为获知近年来眉县猪、牛和羊口蹄疫的免疫情况,对2017-2023年间全县8个镇(街)共7059份猪、牛和羊血清样品进行抗体检测,并从不同年份、不同季节、不同区域等角度对当地口蹄疫免疫抗体合格率进行比较分析。结果显示,2017-2023年眉县全域猪、牛和羊的口蹄疫免疫抗体合格率均高于70%。其中,牛和羊O型口蹄疫的免疫抗体合格率最高达100%且保持稳定,而猪O型口蹄疫免疫抗体合格率在个别镇(街)较低,低至45%,说明该县近7年间猪、牛和羊口蹄疫免疫抗体合格率总体达到农业农村部的标准(>70%),但针对猪应立即调整现行的免疫流程,加强集中免疫和日常补充免疫,以建立起县域有效的动物免疫保护屏障,确保养殖业健康发展。 展开更多
关键词 o型口蹄疫 抗体 监测与分析
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O型口蹄疫抗体金标检测试纸条判定标准的确立 被引量:3
8
作者 智晓莹 任维维 +3 位作者 祁光宇 吕建亮 梁仲 蒋韬 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1415-1421,共7页
本试验旨在迅速、准确检测口蹄疫阴性血清和阳性血清,确立O型口蹄疫抗体金标检测试纸条的判定标准。通过3批次O型口蹄疫抗体金标检测试纸条,对180份猪、牛、羊口蹄疫阴性血清,197份猪、牛O型口蹄疫弱阳性血清,317份猪、牛、羊O型口蹄疫... 本试验旨在迅速、准确检测口蹄疫阴性血清和阳性血清,确立O型口蹄疫抗体金标检测试纸条的判定标准。通过3批次O型口蹄疫抗体金标检测试纸条,对180份猪、牛、羊口蹄疫阴性血清,197份猪、牛O型口蹄疫弱阳性血清,317份猪、牛、羊O型口蹄疫阳性血清,223份牛Asia 1、A型口蹄疫阳性血清,600份田间血清样品进行检测,同时用O型口蹄疫液相阻断ELISA和O型口蹄疫正向间接血凝2种方法检测相同的血清样品。对3种方法检测的结果进行分析,并且将试纸条的检测线和质控线的显色情况与O型口蹄疫液相阻断ELISA的抗体滴度相比较。确立了试纸条的诊断标准:试纸条抗体滴度1∶2-为口蹄疫抗体阴性;试纸条抗体滴度1∶8+为O型口蹄疫阳性血清。根据试纸条的显色结果与液相阻断ELISA的结果的关系,绘制了比色卡。试纸条的判定标准检测血清结果与液相阻断ELISA和正向间接血凝结果分别进行统计学分析,试纸条与液相阻断ELISA和正向间接血凝相关性分别为y=1.142x+0.7421,y=1.1845x+0.8623;相关系数(r)分别为0.9221和0.9033。结果显示,O型口蹄疫抗体金标检测试纸条的判定标准的确立和比色卡的绘制,实现半定量分析,更加迅速、准确,适于实验室、基层兽医站和养殖场使用。 展开更多
关键词 o型口蹄疫抗体金标检测试纸条 o型口蹄疫液相阻断ELISA o型口蹄疫正向间接血凝 判定标准 比色卡
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O型口蹄疫Cathay拓扑型病毒单抗制备及双抗体夹心ELISA方法的初步建立 被引量:1
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作者 廖焕程 石正旺 +6 位作者 罗俊聪 王婉莹 冯露 周静 张帆 石鑫泰 田宏 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期4012-4020,共9页
本研究旨在纯化O型口蹄疫Cathay拓扑型病毒抗原,并制备单克隆抗体,为口蹄疫新型Cathay毒株的研究提供生物材料。PEG沉淀法纯化O型口蹄疫Cathay毒株抗原,免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0细胞融合制备杂交瘤细胞,用间接ELISA方法筛选阳性... 本研究旨在纯化O型口蹄疫Cathay拓扑型病毒抗原,并制备单克隆抗体,为口蹄疫新型Cathay毒株的研究提供生物材料。PEG沉淀法纯化O型口蹄疫Cathay毒株抗原,免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0细胞融合制备杂交瘤细胞,用间接ELISA方法筛选阳性细胞,有限稀释法进行亚克隆,获得2株能够稳定分泌特异性针对O型口蹄疫Cathay株病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名为10E6与11C7。叠加试验表明,两株单抗的叠加率为49.45%,识别不同的抗原表位。间接ELISA和IFA试验显示,两株单抗与O型口蹄疫Cathay株病毒具有良好的反应性。单抗特异性检测结果表明,2株单抗均能特异性识别Cathay株口蹄疫病毒,不与其他口蹄疫病毒毒株交叉反应。抗体亚型鉴定结果显示,10E6单抗的轻链为Kappa链,11C7单抗的轻链为Lamda链,两株单抗重链类型均为IgG2a。结果表明,本研究成功制备了两株特异性结合O型口蹄疫Cathay拓扑型病毒的单克隆抗体,两株单抗均具有良好的反应性与特异性。应用两株单抗建立O型口蹄疫Cathay病毒的双抗体夹心ELISA检测方法,该ELISA检测方法特异性、重复性和敏感性良好,为O型口蹄疫Cathay毒株的快速诊断防控与研究建立了基础。 展开更多
关键词 o型口蹄疫病毒 Cathay拓扑 杂交瘤细胞 单克隆抗体 ELISA
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O型口蹄疫病毒和塞内卡病毒双重荧光定量RT-PCR检测方法的建立 被引量:10
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作者 张展 陈信全 +2 位作者 冯国金 黄慧贤 利光辉 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期601-607,共7页
为建立O型口蹄疫病毒(FMDV-O)和塞内卡病毒(SVV)快速鉴别检测方法,本实验根据FMDV-O VP2基因序列和SVV P3基因序列,采用Primer Express3.0软件分别设计引物与探针,并经各反应条件的优化初步建立了可同时鉴别检测FMDV-O和SVV的双重荧光定... 为建立O型口蹄疫病毒(FMDV-O)和塞内卡病毒(SVV)快速鉴别检测方法,本实验根据FMDV-O VP2基因序列和SVV P3基因序列,采用Primer Express3.0软件分别设计引物与探针,并经各反应条件的优化初步建立了可同时鉴别检测FMDV-O和SVV的双重荧光定量RT-PCR方法。利用该方法检测临床常见猪病毒,结果显示可同时检测出FMDV-O和SVV核酸,且与猪水泡性口炎病毒(VSV)、猪水疱病毒(SVDV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪细小病毒(PPV)、A型口蹄疫病毒(FMDV-A)、A-1型口蹄疫病毒(FMDVA-1)核酸均无交叉反应,并可检测到FMDV-O PanAsia株、cathay株、Ind-2001株和Mya-98株等主要流行株,特异性强;该方法对含FMDV-O和SVV拼接质粒标准品的最低检测限为7.17×10^(2)拷贝/μL,敏感性高;利用该方法检测了同一时间和不同时间提取的3种不同浓度的质粒标准品,结果显示批内和批间重复性试验Ct值的变异系数均小于3%,重复性好。利用本实验所建立的方法对30份临床样品进行检测,结果与各病毒单一荧光定量RT-PCR检测结果一致。本研究建立的FMDV-O和SVV双重荧光定量RT-PCR方法能够快速准确的鉴别检测FMDV-O和SVV,为口岸检疫的快速通关提供了技术手段。 展开更多
关键词 o型口蹄疫病毒 塞内卡病毒 双重RT-qPCR方法 P3基因 VP2基因
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2021—2023年兰州新区羊A型、O型口蹄疫免疫效果评估 被引量:2
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作者 李晓梅 《甘肃畜牧兽医》 2024年第2期133-136,共4页
为科学有效地掌握兰州新区羊口蹄疫疫苗免疫情况,2021—2023年在该辖区采集羊血清2340份,采用液相阻断ELISA法检测A型、O型口蹄疫抗体水平并统计结果,为后期补免工作提供数据依据。结果表明:2021—2023年兰州新区春秋季羊A型口蹄疫免疫... 为科学有效地掌握兰州新区羊口蹄疫疫苗免疫情况,2021—2023年在该辖区采集羊血清2340份,采用液相阻断ELISA法检测A型、O型口蹄疫抗体水平并统计结果,为后期补免工作提供数据依据。结果表明:2021—2023年兰州新区春秋季羊A型口蹄疫免疫抗体合格率分别为75%、70%,78%、89%,70%、78%;羊O型口蹄疫免疫抗体合格率分别为82%、75%,84%、83%,71%、70%;羊A型、O型口蹄疫免疫抗体合格率均≥70%。综上所述,兰州新区羊口蹄疫免疫效果整体良好,但是部分指标仅勉强合格,需要加强补免工作,做到应免尽免,有效落实以免疫为主的综合防控措施,切实做好羊口蹄疫疫情预防工作,推动兰州新区羊产业高质量发展。 展开更多
关键词 羊Ao型口蹄疫 抗体 效果 兰州新区
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山羊O型口蹄疫和小反刍兽疫免疫抗体检测分析 被引量:1
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作者 周勇 徐聪 +1 位作者 金福况 龚国安 《云南农业》 2024年第7期83-85,共3页
为了解元江县山羊O型口蹄疫(FMD-O)和小反刍兽疫(PPRV)疫苗免疫状况,并评估免疫效果,2019—2023年在全县10个乡镇(街道)规模场和散养户中随机采集山羊血清样品,用ELISA法检测免疫抗体。结果显示,不同年份山羊FMD-O/PPRV平均免疫抗体合... 为了解元江县山羊O型口蹄疫(FMD-O)和小反刍兽疫(PPRV)疫苗免疫状况,并评估免疫效果,2019—2023年在全县10个乡镇(街道)规模场和散养户中随机采集山羊血清样品,用ELISA法检测免疫抗体。结果显示,不同年份山羊FMD-O/PPRV平均免疫抗体合格率分别为74.43%和86.27%。不同区域山羊FMD-O免疫抗体合格率61.93%~82.72%;PPRV免疫抗体合格率68.07%~92.97%。FMD-O规模场(户)免疫抗体合格率显著高于散养户,差异极显著(P=0.008<0.01);PRPV规模场(户)抗体合格率略高于散养户,差异不显著(P=0.483>0.05)。 展开更多
关键词 山羊o型口蹄疫 不同养殖规模 抗体检测
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猪塞内卡病毒(SVA)和O型口蹄疫病毒双重荧光RT-PCR检测方法中阳性参考品的制备
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作者 陈信全 张展 +2 位作者 周伟光 张峥嵘 黄慧贤 《广东畜牧兽医科技》 2024年第5期56-60,69,共6页
为制备猪塞内卡病毒(SVA)和O型口蹄疫病毒(FMDV-O)阳性质控品,根据选择的目的基因片段,设计阳性参考品序列,通过基因拼接技术和装甲RNA技术,制备含有口蹄疫O型病毒和塞内卡病毒目的基因的装甲RNA病毒样颗粒,用来作为塞内卡病毒(SVA)和O... 为制备猪塞内卡病毒(SVA)和O型口蹄疫病毒(FMDV-O)阳性质控品,根据选择的目的基因片段,设计阳性参考品序列,通过基因拼接技术和装甲RNA技术,制备含有口蹄疫O型病毒和塞内卡病毒目的基因的装甲RNA病毒样颗粒,用来作为塞内卡病毒(SVA)和O型口蹄疫病毒(FMDV-O)的阳性参考品。结果表明,该阳性质控品无生物传染性,可以真实模拟病毒粒子结构,耐受DNaseI及RNaseA,稳定性高,在-70℃保存18个月,荧光RT-PCR检测结果均无显著差异。本试验制备的含有猪O型口蹄疫病毒和塞内卡病毒目的基因的装甲RNA病毒样颗粒,可以作为SVA和FMDV-O双重荧光RT-PCR检测方法中进行质量控制的阳性参考品。 展开更多
关键词 猪塞内卡病毒 o型口蹄疫病毒 MS2噬菌体 装甲RNA技术 阳性参考品
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特异性转移因子对猪O型口蹄疫免疫抗体水平影响的研究 被引量:1
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作者 陈文贤 王得文 《畜牧兽医杂志》 2015年第3期28-29,共2页
猪O型口蹄疫是由O型口蹄疫病毒引起的猪的一种急性、热性、高度接触性传染病.由于该病传播迅速,发病率高,世界动物卫生组织将其列为必须报告的传染病之一,我国政府也将其归为一类动物疫病.迄今为止,免疫接种是控制口蹄疫的关键措施.当... 猪O型口蹄疫是由O型口蹄疫病毒引起的猪的一种急性、热性、高度接触性传染病.由于该病传播迅速,发病率高,世界动物卫生组织将其列为必须报告的传染病之一,我国政府也将其归为一类动物疫病.迄今为止,免疫接种是控制口蹄疫的关键措施.当猪场或周边出现口蹄疫威胁时,由于普通免疫需要21 d左右群体才能产生有效保护能力,紧急免疫就显得力不从心,所以急需一种免疫佐剂协同提高免疫保护能力.本研究旨在探讨转移因子和猪O型口蹄疫疫苗联合应用,初免和二次免疫后体内抗体水平的影响. 展开更多
关键词 o型口蹄疫病毒 接种 抗体水平 特异性转移因子 猪场 世界动物卫生组织 接触性传染病 o型口蹄疫
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O型口蹄疫病毒免疫层析试纸条检测方法的建立 被引量:18
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作者 蒋韬 梁仲 +6 位作者 陈涓 何继军 吕律 马维民 田宏 刘在新 刘湘涛 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期60-65,共6页
为建立一种快速、准确检测O型口蹄疫病毒(FMDV)抗原的胶体金免疫层析方法,将兔、豚鼠抗O型FM-DV多抗用DEAE-Sephose层析柱纯化。胶体金标记O型豚鼠口蹄疫抗体,形成金标探针并将其喷涂于玻璃纤维上。兔抗O型FMDV抗体和羊抗豚鼠IgG分别标... 为建立一种快速、准确检测O型口蹄疫病毒(FMDV)抗原的胶体金免疫层析方法,将兔、豚鼠抗O型FM-DV多抗用DEAE-Sephose层析柱纯化。胶体金标记O型豚鼠口蹄疫抗体,形成金标探针并将其喷涂于玻璃纤维上。兔抗O型FMDV抗体和羊抗豚鼠IgG分别标记于硝酸纤维素膜上作为检测带和质控带,各部件按顺序装配形成快速诊断试纸条。如果待检样品中含有O型FMDV,它将与玻璃纤维上的胶体金探针和兔抗O型FMDV抗体形成夹心复合物,并在检测带被固定,沉集反应形成肉眼可见的红色条带。在田间试验中,53份试验样本分别用试纸条和反向间接血凝试验进行检测,2种方法的阳性率分别为95.45%和90.91%。评价试验证实,本研究建立的胶体金免疫层析方法简便、快速,具有良好的特异性和敏感性,非常适于基层兽医实验室诊断时使用。 展开更多
关键词 o型口蹄疫病毒 试纸条 胶体金免层析法
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CpG DNA重组质粒对猪O型口蹄疫病毒抗原的免疫佐剂效应 被引量:8
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作者 景志忠 蒙学莲 +7 位作者 窦永喜 陈国华 房永祥 黄银君 王超英 刘西兰 张军 才学鹏 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期862-866,共5页
作者应用含CpG基序序列的重组质粒(即CpG DNA)作为免疫佐剂,评价其对猪O型口蹄疫病毒抗原疫苗的免疫增强效果。结果表明:CpG DNA重组质粒与猪口蹄疫灭活病毒抗原疫苗配伍免疫小鼠,CpG DNA重组质粒对小鼠具有较强的免疫佐剂效应,能促... 作者应用含CpG基序序列的重组质粒(即CpG DNA)作为免疫佐剂,评价其对猪O型口蹄疫病毒抗原疫苗的免疫增强效果。结果表明:CpG DNA重组质粒与猪口蹄疫灭活病毒抗原疫苗配伍免疫小鼠,CpG DNA重组质粒对小鼠具有较强的免疫佐剂效应,能促进口蹄疫病毒抗原诱导产生较高水平的特异性抗体,其抗体滴度是空载体疫苗对照的2倍。CpG DNA重组质粒与商品化猪口蹄疫灭活疫苗配伍免疫试验猪,其增强抗原诱导的特异性抗体滴度最高可达标准疫苗的4倍以上,也显著高于空载体疫苗对照 与病毒纯化抗原配伍免疫动物,攻毒后其免疫保护效力的PD50高达13.00,远高于标准疫苗对照(PD504.69)。在CpG DNA重组质粒剂量选择试验中,含低剂量的CpG DNA疫苗(50、200μg.头份-1)都比高剂量组(500μg.头份-1)诱导的抗体滴度高,其中50和200μg.头份-1的CpG DNA剂量,在接种后14~32 d诱导的抗体滴度高达1∶1500,是标准疫苗的4~5倍,而500μg.头份-1剂量诱导的抗体仅是标准疫苗的2倍,说明CpG DNA重组质粒在低剂量时即可发挥强烈的佐剂效应。研究表明CpG DNA对猪O型口蹄疫病毒抗原疫苗有较强的免疫佐剂效应,且使用剂量低,应用前景广阔。 展开更多
关键词 CPGDNA o型口蹄疫病毒 抗原 佐剂效应
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5株猪O型口蹄疫病毒结构蛋白VP1基因的克隆与序列分析 被引量:13
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作者 马静云 曹永长 毕英佐 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期70-73,共4页
提取5株猪O型口蹄疫病毒(FMDV)(L1~L5)的RNA,用1对通用引物经RT PCR法扩增了5株病毒VP1基因的DNA片段.克隆后通过测序获得其核苷酸序列,分析表明,除L2株外,其余4株(L1、L3、L4和L5)VP1基因的核苷酸序列同源性在96 7%~99 8%,氨基酸序... 提取5株猪O型口蹄疫病毒(FMDV)(L1~L5)的RNA,用1对通用引物经RT PCR法扩增了5株病毒VP1基因的DNA片段.克隆后通过测序获得其核苷酸序列,分析表明,除L2株外,其余4株(L1、L3、L4和L5)VP1基因的核苷酸序列同源性在96 7%~99 8%,氨基酸序列同源性在99 5%~100%;而L2株与L1、L3、L4和L5株VP1基因的核苷酸序列同源性在82 0%~83 4%,氨基酸序列同源性在89 7%~90 1%.L1、L3、L4和L5株病毒VP1基因的核苷酸序列与已经发表的GD/CHA/86、HKN/1/99、HKN/16/96的同源性较高,核苷酸序列同源性在85 0%~99 8%,属于同一基因型;而与L2、F29/CHINA及国外大多数毒株相比,属于不同的基因型,其核苷酸序列同源性仅为41 0%~82 6%.5株毒株中的L1、L3、L4和L5的主要中和抗原位点140~160、200~213位氨基酸序列完全相同,推测其有相近的中和单抗表位和相同的抗原性. 展开更多
关键词 o型口蹄疫 结构蛋白 病毒 VP1基因 序列分析 基因克隆
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O型口蹄疫病毒VP1基因的克隆与表达 被引量:6
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作者 林瑞庆 罗满林 +2 位作者 黄毓茂 刘镇明 辛朝安 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期92-95,共4页
以O型口蹄疫病毒(FMDV)流行毒株为研究对象,通过RT PCR扩增出VP1基因,克隆至表达载体pET 32a中,分析比较不同地区O型口蹄疫病毒VP1基因序列,为构建VP1重组基因工程苗奠定基础.经测序表明,目的基因VP1已以正确的阅读框架整合至表达质粒中... 以O型口蹄疫病毒(FMDV)流行毒株为研究对象,通过RT PCR扩增出VP1基因,克隆至表达载体pET 32a中,分析比较不同地区O型口蹄疫病毒VP1基因序列,为构建VP1重组基因工程苗奠定基础.经测序表明,目的基因VP1已以正确的阅读框架整合至表达质粒中,应用大肠杆菌BL21(DE3)为宿主菌,通过IPTG诱导方法,表达包含VP1基因产物的融合蛋白,经SDS PAGE和Western blotting分析,表明表达蛋白表达量高,反应原性良好. 展开更多
关键词 o型口蹄疫病毒 VP1基因 基因克隆 基因表达
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O型口蹄疫抗体金标试纸盒检测免疫动物抗体效价与攻毒保护关系 被引量:6
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作者 祁光宇 任维维 +5 位作者 智晓莹 刘西兰 张军 王宇 梁仲 蒋韬 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期1277-1283,共7页
本研究目的在于用O型口蹄疫金标试纸条研究免疫动物抗体效价与攻毒保护之间的对应关系以及免疫牛抗体消长规律。用金标试纸条检测了口蹄疫O型疫苗质量标准规定的牛、羊和猪免疫和攻毒血清抗体效价及不同免疫程序的牛血清效价。结果显示... 本研究目的在于用O型口蹄疫金标试纸条研究免疫动物抗体效价与攻毒保护之间的对应关系以及免疫牛抗体消长规律。用金标试纸条检测了口蹄疫O型疫苗质量标准规定的牛、羊和猪免疫和攻毒血清抗体效价及不同免疫程序的牛血清效价。结果显示,当牛、猪和羊免疫血清稀释≥1∶8时,试纸条是阳性结果,表示有99%的被免疫动物属于抗体水平保护范围;被检测血清稀释≤1∶2时,是阴性结果,表示被免疫动物抗体水平属于不保护范围;血清稀释1∶2~1∶8时,是阳性结果,表示有50%的被免疫动物属于抗体水平保护范围。牛在首次免疫8周后加强免疫可以获得良好的保护率和保护时间。通过本试验确定了金标试纸条检测免疫动物抗体效价与攻毒保护之间的关系及牛加强免疫最佳的时间。 展开更多
关键词 o型口蹄疫 金标试纸条 抗体效价 攻毒保护 抗体消长
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嵌合O型口蹄疫病毒多表位基因猪细小病毒VLPs载体疫苗的构建 被引量:8
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作者 潘群兴 诸玉梅 +5 位作者 王永山 何孔旺 王晓丽 欧阳伟 毕振威 夏兴霞 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2013年第1期101-107,共7页
综合运用生物信息学和分子生物学技术,模拟PPV VP2蛋白表面不同Loop区插入O型FMDV VP1蛋白上多表位基因(VP1:21~40、141~160和200~213残基)空间构象,并在VP2 N端引入通用型辅助性T淋巴细胞表位(PADRE),人工合成嵌合基因并克隆到杆状... 综合运用生物信息学和分子生物学技术,模拟PPV VP2蛋白表面不同Loop区插入O型FMDV VP1蛋白上多表位基因(VP1:21~40、141~160和200~213残基)空间构象,并在VP2 N端引入通用型辅助性T淋巴细胞表位(PADRE),人工合成嵌合基因并克隆到杆状病毒转移载体pFastBac HTA中,转化E.coli DH10Bac感受态细胞,经三抗筛选,获得重组杆状病毒表达质粒rBac-FMDV VP1∶PPV VP2,用脂质体法转染Sf9细胞。对rBac-FMDVVP1∶PPV VP2感染的Sf9细胞,用间接免疫荧光试验(IFA)检测,具有特异性荧光;用Western-blotting分析,在64 000处出现一条特异蛋白条带;电镜观察,重组VP2蛋白能够自主组装成病毒样颗粒。红细胞凝集试验证实,表达的嵌合蛋白PPV∶VP2-FMDV∶VP1具有与全病毒类似的血凝活性。 展开更多
关键词 猪细小病毒 o型口蹄疫病毒 病毒样颗粒 分子设计
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