目的:探讨微小RNA-122(miR-122)在小鼠急性缺血性脑卒中的影响及其作用机制。方法:80只健康雄性C57BL/6小鼠随机分为4组,假手术组(sham)、大脑中动脉阻塞组(MCAO)、miR-122模拟物注射组(MACO+miR-122 mimics)和miR-122抑制物注射组(MACO...目的:探讨微小RNA-122(miR-122)在小鼠急性缺血性脑卒中的影响及其作用机制。方法:80只健康雄性C57BL/6小鼠随机分为4组,假手术组(sham)、大脑中动脉阻塞组(MCAO)、miR-122模拟物注射组(MACO+miR-122 mimics)和miR-122抑制物注射组(MACO+miR-122 inhibitor)。电凝法建立永久性局灶性小鼠MCAO模型,脑室注射miR-122模拟物、miR-122抑制物后采用Longa神经功能评分评估小鼠神经功能缺损程度;real time RT-PCR检测各组小鼠脑组织NOD样受体蛋白家族炎症小体3(NLRP3)的受体蛋白NLRP3、白介素1β(IL-1β)mRNA的表达差异;2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色评估小鼠脑梗死体积;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测小鼠血清NLRP3、IL-1β蛋白表达。结果:Longa神经功能评分结果显示脑室注射miR-122模拟物后可显著改善小鼠神经功能评分,差异有统计学意义(P<0.05)。与sham组相比MCAO组脑组织NLRP3、IL1βmRNA表达显著升高;real time RT-PCR、ELISA的结果显示脑室注射miR-122模拟物后NLRP3和IL-1β表达量降低,差异均有统计学意义(P<0.05),脑室注射miR-122抑制物后NLRP3和IL-1β表达量增高,差异均有统计学意义(P<0.05);TTC染色结果显示脑室注射miR-122模拟物可减小小鼠脑梗死体积,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:MCAO模型小鼠中miR-122通过下调炎症因子NLRP3和IL-1β的表达发挥神经保护作用,从而减轻小鼠脑梗死体积。展开更多
目的探讨曲美他嗪(TMZ)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导泡沫细胞形成的影响及可能的作用机制。方法应用ox-LDL刺激RAW264. 7细胞建立泡沫细胞模型,分为对照组(培养基)、模型组(60μg/m L ox-LDL刺激)、氯喹(CQ)组(60μg/m L ox-LDL联合1...目的探讨曲美他嗪(TMZ)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导泡沫细胞形成的影响及可能的作用机制。方法应用ox-LDL刺激RAW264. 7细胞建立泡沫细胞模型,分为对照组(培养基)、模型组(60μg/m L ox-LDL刺激)、氯喹(CQ)组(60μg/m L ox-LDL联合10 mmol/L CQ处理)、TMZ联合CQ组(60μg/m L ox-LDL联合80μmol/L TMZ和10 mmol/L CQ处理)。油红O染色评估泡沫细胞形成情况,ELISA试剂盒检测细胞内总胆固醇(TC)及游离胆固醇(FC)含量;单丹磺酰尸胺(MDC)染色观察自噬; Picogreen荧光染色及荧光定量PCR检测巨噬细胞胞外诱捕网(MET)形成及其含量;实时定量PCR检测自噬相关指标微管相关蛋白1轻链3β(LC3B)、泛素结合蛋白P62、含pyrin结构域NOD样受体家族3 (NLRP3)、含胱天蛋白酶结构域凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、胱天蛋白酶1(caspase-1)及胆固醇流出相关基因ATP结合盒亚家族A成员1(ABCA1)、ATP结合盒亚家族G成员1(ABCG1)的mRNA水平。结果与模型组相比,TMZ联合CQ组LC3B表达增加、P62表达减少,同时TC、FC、胆固醇酯(CE)/TC含量降低,此外NLRP3、ASC及caspase-1的mRNA表达水平均显著下调,MET形成增加。CQ组结果相反。结论曲美他嗪可以通过激活自噬、增强巨噬细胞胞外诱捕网(MET)形成并抑制炎性体形成,从而促进泡沫细胞的胆固醇流出。展开更多
文摘目的:探讨微小RNA-122(miR-122)在小鼠急性缺血性脑卒中的影响及其作用机制。方法:80只健康雄性C57BL/6小鼠随机分为4组,假手术组(sham)、大脑中动脉阻塞组(MCAO)、miR-122模拟物注射组(MACO+miR-122 mimics)和miR-122抑制物注射组(MACO+miR-122 inhibitor)。电凝法建立永久性局灶性小鼠MCAO模型,脑室注射miR-122模拟物、miR-122抑制物后采用Longa神经功能评分评估小鼠神经功能缺损程度;real time RT-PCR检测各组小鼠脑组织NOD样受体蛋白家族炎症小体3(NLRP3)的受体蛋白NLRP3、白介素1β(IL-1β)mRNA的表达差异;2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色评估小鼠脑梗死体积;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测小鼠血清NLRP3、IL-1β蛋白表达。结果:Longa神经功能评分结果显示脑室注射miR-122模拟物后可显著改善小鼠神经功能评分,差异有统计学意义(P<0.05)。与sham组相比MCAO组脑组织NLRP3、IL1βmRNA表达显著升高;real time RT-PCR、ELISA的结果显示脑室注射miR-122模拟物后NLRP3和IL-1β表达量降低,差异均有统计学意义(P<0.05),脑室注射miR-122抑制物后NLRP3和IL-1β表达量增高,差异均有统计学意义(P<0.05);TTC染色结果显示脑室注射miR-122模拟物可减小小鼠脑梗死体积,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:MCAO模型小鼠中miR-122通过下调炎症因子NLRP3和IL-1β的表达发挥神经保护作用,从而减轻小鼠脑梗死体积。
文摘目的探讨曲美他嗪(TMZ)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导泡沫细胞形成的影响及可能的作用机制。方法应用ox-LDL刺激RAW264. 7细胞建立泡沫细胞模型,分为对照组(培养基)、模型组(60μg/m L ox-LDL刺激)、氯喹(CQ)组(60μg/m L ox-LDL联合10 mmol/L CQ处理)、TMZ联合CQ组(60μg/m L ox-LDL联合80μmol/L TMZ和10 mmol/L CQ处理)。油红O染色评估泡沫细胞形成情况,ELISA试剂盒检测细胞内总胆固醇(TC)及游离胆固醇(FC)含量;单丹磺酰尸胺(MDC)染色观察自噬; Picogreen荧光染色及荧光定量PCR检测巨噬细胞胞外诱捕网(MET)形成及其含量;实时定量PCR检测自噬相关指标微管相关蛋白1轻链3β(LC3B)、泛素结合蛋白P62、含pyrin结构域NOD样受体家族3 (NLRP3)、含胱天蛋白酶结构域凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、胱天蛋白酶1(caspase-1)及胆固醇流出相关基因ATP结合盒亚家族A成员1(ABCA1)、ATP结合盒亚家族G成员1(ABCG1)的mRNA水平。结果与模型组相比,TMZ联合CQ组LC3B表达增加、P62表达减少,同时TC、FC、胆固醇酯(CE)/TC含量降低,此外NLRP3、ASC及caspase-1的mRNA表达水平均显著下调,MET形成增加。CQ组结果相反。结论曲美他嗪可以通过激活自噬、增强巨噬细胞胞外诱捕网(MET)形成并抑制炎性体形成,从而促进泡沫细胞的胆固醇流出。
