lncRNA SOX2-OT调控miR-215-5p/NOB1通路抑制结直肠癌HCT-116细胞增殖和迁移

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作者 刘丹 程海林 罗剑锋 《中国肿瘤生物治疗杂志》 北大核心 2025年第7期731-737,共7页

目的:探讨lncRNA SOX2-OT是否通过调控miR-215-5p/NIN1/RPN12结合蛋白1同源物(NOB1)信号通路抑制结直肠癌(CRC)HCT-116细胞增殖和迁移。方法:收集2022年6月至2024年5月期间武汉市金银潭医院收治的29例CRC患者的癌及癌旁组织标本,以及CR... 目的:探讨lncRNA SOX2-OT是否通过调控miR-215-5p/NIN1/RPN12结合蛋白1同源物(NOB1)信号通路抑制结直肠癌(CRC)HCT-116细胞增殖和迁移。方法:收集2022年6月至2024年5月期间武汉市金银潭医院收治的29例CRC患者的癌及癌旁组织标本,以及CRC细胞SW480、HCT-116、HP116和LoVo及人结肠上皮细胞HCoEpiC。qPCR法检测CRC组织和细胞中SOX2-OT、miR-215-5p和NOB1 mRNA的表达水平。利用RNA干扰技术分别将敲低或过表达SOX2-OT质粒及阴性对照质粒转染至HCT-116细胞,实验分为对照组、si-NC组、si-SOX2-OT组、si-SOX2-OT+inhibitor(Inh)NC组、si-SOX2-OT+miR-215-5p Inh组、si-SOX2-OT+oe-NC组、si-SOX2-OT+oe-NOB1组。qPCR法检测各组细胞中SOX2-OT、miR-215-5p和NOB1 mRNA表达水平,通过MTT、划痕愈合实验、Transwell实验和流式细胞术分别检测各组细胞的增殖、迁移、侵袭及凋亡水平,WB法检测各组细胞中E-cadherin、N-cadherin、vimentin、Bcl-2、BAX、PCNA、MMP-9和NOB1蛋白表达水平。通过双萤光素酶报告基因实验验证miR-215-5p与SOX2-OT和NOB1之间的靶向关系。结果:CRC组织和细胞中SOX2-OT和NOB1 mRNA均呈高表达、miR-215-5p低表达(均P<0.05)。敲低SOX2-OT表达的HCT-116细胞中SOX2-OT和NOB1 mRNA表达水平、增殖、划痕愈合率和侵袭细胞数量,以及细胞中N-cadherin、vimentin、Bcl-2、NOB1、PCNA和MMP-9蛋白表达均显著降低(均P<0.05),miR-215-5p、细胞凋亡率、E-cadherin和BAX蛋白表达均显著升高(均P<0.05)。敲低miR-215-5p表达或上调NOB1表达均可减弱敲低SOX2-OT表达对细胞的抑制作用(均P<0.05)。miR-215-5p与SOX2-OT和NOB之间存在靶向关系。结论:敲低SOX2-OT表达可促进miR-215-5p表达,抑制NOB1表达进而抑制HCT-116细胞的增殖、迁移、侵袭并促进细胞凋亡。 展开更多

关键词 lncRNA SOX2-OT miR-215-5p/nob1轴 结直肠癌 HCT-116细胞 增殖 迁移 侵袭

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靶向沉默NOB1基因对乳腺癌细胞MCF-7生长和周期分布的影响 被引量：4

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作者 黄伟翼 李宁 陈栋晖 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期452-457,共6页

背景与目的:NOB1(NIN1/RPN12 binding protein 1 homolog)是2005年新克隆的一个基因,属于RNA结合蛋白,该类蛋白的功能与恶性肿瘤的发生密切相关。本研究旨在观察利用慢病毒介导的RNAi沉默NOB1基因对人乳腺癌MCF-7细胞增殖及细胞周期的... 背景与目的:NOB1(NIN1/RPN12 binding protein 1 homolog)是2005年新克隆的一个基因,属于RNA结合蛋白,该类蛋白的功能与恶性肿瘤的发生密切相关。本研究旨在观察利用慢病毒介导的RNAi沉默NOB1基因对人乳腺癌MCF-7细胞增殖及细胞周期的影响。方法:包装表达NOB1短发夹RNA(shRNA)的慢病毒,感染MCF-7细胞,实时定量PCR和蛋白质印迹法(Western blot)验证NOB1的抑制效率;MTT和克隆形成实验检测NOB1对细胞增殖能力的影响;流式细胞术检测细胞周期的变化。结果:NOB1-shRNA慢病毒感染3 d后,可显著下调MCF-7细胞NOB1 mRNA和蛋白的表达水平,显著抑制细胞增殖和体外成瘤能力,并导致细胞周期分布紊乱,G0/G1期及G2/M期细胞增加,S期细胞减少。结论:NOB1基因通过调节细胞周期分布促进乳腺癌细胞恶性增殖,可能是乳腺癌基因治疗的分子靶点。 展开更多

关键词 nob1 蛋白酶体 增殖 乳腺癌

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NOB1反义寡核苷酸对人卵巢癌细胞生长、凋亡的影响 被引量：2

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作者 黎雁英 田佳 +4 位作者 陈石涛 陆竞艳 金美华 莫文法 周英琼 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2013年第10期1174-1178,共5页

目的研究NOB1反义寡核苷酸(NOB1-ASODN)对人卵巢癌细胞株SKOV3生长、凋亡的影响,观察NOB1-ASODN对NOB1基因表达的作用。方法设计合成针对NOB1 mRNA的特定的ASODN和作为对照的无义寡核苷酸链(NSODN),应用转染载体X-tremeGENE siRNA Trans... 目的研究NOB1反义寡核苷酸(NOB1-ASODN)对人卵巢癌细胞株SKOV3生长、凋亡的影响,观察NOB1-ASODN对NOB1基因表达的作用。方法设计合成针对NOB1 mRNA的特定的ASODN和作为对照的无义寡核苷酸链(NSODN),应用转染载体X-tremeGENE siRNA Transfection Reagent将ASODN及NSODN转染至人卵巢癌SKOV3细胞。采用RT-PCR法检测转染后各组细胞NOB1 mRNA的表达;应用MTT法检测不同作用时间段SKOV3细胞的生长情况;流式细胞学检测细胞的凋亡情况。结果 NOB1-ASODN能下调SKOV3细胞NOB1基因的表达,沉默效率达59.58%;其能抑制细胞的生长,具有时间依赖性,转染后24、48、72 h细胞抑制率分别为(37.02±0.710)%、(56.16±0.986)%、(58.10±0.010)%;沉默目的基因后细胞的凋亡率增加。结论运用NOB1-ASODN特异、有效地抑制NOB1表达,能抑制SKOV3细胞的增殖,可促进SKOV3细胞的凋亡,从而达到抑制肿瘤生长的目的。 展开更多

关键词 卵巢癌 nob1 反义寡核苷酸 凋亡

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结直肠癌中NOB1基因的表达及意义 被引量：6

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作者 吴东平 贺孝文 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期420-422,共3页

目的探讨NOB1在结直肠癌中的表达及其意义。方法用免疫组织化学SP法对60例结直肠癌和癌旁正常组织(距癌组织大于3.0 cm)中NOB1的表达进行检测;并分析其与结直肠癌临床病理因素的关系。结果 NOB1在结直肠癌组织中表达阳性的有32例(53.3%)... 目的探讨NOB1在结直肠癌中的表达及其意义。方法用免疫组织化学SP法对60例结直肠癌和癌旁正常组织(距癌组织大于3.0 cm)中NOB1的表达进行检测;并分析其与结直肠癌临床病理因素的关系。结果 NOB1在结直肠癌组织中表达阳性的有32例(53.3%),NOB1在癌旁正常组织中表达阳性有10例(16.7%),差异有统计学意义(P<0.05)。在结直肠癌组织中NOB1的表达与患者性别、年龄、肿瘤组织的分级和淋巴结转移均无关(P>0.05)。结论 NOB1在结直肠癌中表达升高,可能在结直肠癌的发生发展过程中起重要作用。NOB1能否成为结直肠癌治疗的新靶点,有待进一步研究。 展开更多

关键词 nob1 结直肠癌 免疫组化染色

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RNAi抑制NOB1表达对肝癌BEL-7402细胞增殖及p38MAPK磷酸化水平的影响 被引量：2

5

作者 张斌 刘岳 +2 位作者 林建清 倪亚安 毛盛名 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2019年第2期271-275,共5页

目的:探讨RNAi下调Nin1结合蛋白(NOB1)表达对肝癌细胞增殖及p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)磷酸化水平的影响。方法:以肝癌BEL-7402细胞作为研究对象,将肝癌细胞分为空白对照组、siRNANC组、NOB1 siRNA组3组,其中siRNA-NC组、NOB1 siRN... 目的:探讨RNAi下调Nin1结合蛋白(NOB1)表达对肝癌细胞增殖及p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)磷酸化水平的影响。方法:以肝癌BEL-7402细胞作为研究对象,将肝癌细胞分为空白对照组、siRNANC组、NOB1 siRNA组3组,其中siRNA-NC组、NOB1 siRNA组分别为稳定感染阴性对照慢病毒和NOB1 siRNA慢病毒的肝癌细胞,空白对照组为不做慢病毒感染的肝癌细胞。用qRT-PCR和Western blot检测干扰效果。CCK-8法测定细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,Western blot法检测细胞中磷酸化p38MAPK和活化的Caspase-3蛋白的表达情况。结果:NOB1 siRNA组细胞中NOB1表达水平、细胞增殖活性降低,细胞凋亡率升高,磷酸化p38MAPK和活化的Caspase-3蛋白表达水平升高,与空白对照组、siRNA-NC组比较,差异均有统计学意义(P <0. 05)。结论:下调NOB1表达具有抑制BEL-7402细胞增殖、诱导细胞凋亡、促进细胞中p38MAPK磷酸化的作用。 展开更多

关键词 肝癌 BEL-7402细胞 nob1 P38MAPK

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基因芯片技术检测NOB1对骨肉瘤细胞相关基因的调控作用

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作者 陈炳鹏 任明 +2 位作者 李容杭 韩青 王金成 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期929-934,共6页

目的:探讨应用基因芯片技术筛选出可能受NOB1调控的基因,阐明NOB1对骨肉瘤细胞相关基因表达的调控作用。方法:应用慢病毒介导的短发夹RNA(shRNA)干扰技术建立抑制NOB1 mRNA表达的Lv-shNOB1-U2OS骨肉瘤细胞株,实验分为2组,分别为对照病... 目的:探讨应用基因芯片技术筛选出可能受NOB1调控的基因,阐明NOB1对骨肉瘤细胞相关基因表达的调控作用。方法:应用慢病毒介导的短发夹RNA(shRNA)干扰技术建立抑制NOB1 mRNA表达的Lv-shNOB1-U2OS骨肉瘤细胞株,实验分为2组,分别为对照病毒液感染U2OS骨肉瘤细胞(Lv-shCon-U2OS)组和含NOB1干扰质粒病毒感染U2OS骨肉瘤细胞(Lv-shNOB1-U2OS)组。利用mRNA表达谱芯片对LvshCon-U2OS组和Lv-shNOB1-U2OS组细胞分别行表达谱分析,并利用生物信息学数据库肿瘤基因(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)预测miRNA参与调控的生物学过程、细胞组分、分子功能和信号通路。结果:mRNA表达谱芯片数据显示,NOB1干扰后共有792个基因mRNA表达水平上调,1 059个基因mRNA表达水平下调,总共差异变化基因为1 851个。GO分析,从细胞位置条目的富集程度来看,差异基因编码产物蛋白主要分布于细胞质膜上,占总差异基因的56.9%,分布于细胞外区域的差异基因编码产物蛋白占总差异基因的39.4%,分布于细胞外空间占总差异基因的20%;从分子功能条目的富集程度来看,差异基因编码产物蛋白主要功能为钙离子结合相关功能(占总差异基因的22%),其次功能为转运子活性(占总差异基因的9.2%),第3位功能为肌动蛋白结合活性,(占总差异基因的8.7%);从生化过程条目的富集程度来看,差异基因编码产物蛋白主要参与过程为信号转导(占总差异基因的18.7%),其次参与过程为多种细胞器的生成(占总差异基因的15.6%),第3位过程为细胞黏附过程(占总差异基因的10.2%);KEGG分析,差异分子所编码的蛋白涉及领域包括细胞质膜成分、钙离子结合活性以及信号转导过程。结论:敲除NOB1可以对骨肉瘤细胞相关基因表达产生全方位的影响。 展开更多

关键词 nob1基因 骨肉瘤 基因表达谱 短发夹RNA

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人NOB1基因shRNA慢病毒载体构建与RNAi效率的鉴定

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作者 林杨 崔满华 +1 位作者 滕红 许天敏 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期258-261,I0001,I0002,共6页

目的:构建人NOB1基因的短发夹RNA(shRNA)慢病毒载体并在卵巢癌SKOV3和HEY细胞上鉴定其沉默效率。方法:针对NOB1基因设计特异性siRNA靶点,构建于慢病毒pLVTHM载体,筛选获得的有效shRNA慢病毒载体在293T细胞包装成病毒颗粒,随后将其感染... 目的:构建人NOB1基因的短发夹RNA(shRNA)慢病毒载体并在卵巢癌SKOV3和HEY细胞上鉴定其沉默效率。方法:针对NOB1基因设计特异性siRNA靶点,构建于慢病毒pLVTHM载体,筛选获得的有效shRNA慢病毒载体在293T细胞包装成病毒颗粒,随后将其感染卵巢癌SKOV3和HEY细胞,采用Real-timePCR方法检测靶基因在mRNA水平的沉默效率。结果:构建的慢病毒载体shRNA的PCR鉴定和测序正确,包装病毒后滴度达到8×108PU.L-1。shRNA慢病毒颗粒感染SKOV3和HEY细胞后NOB1基因的mRNA表达量较阴性对照载体慢病毒感染组分别下降了73.5%和82.2%。结论:成功构建NOB1基因的shRNA慢病毒表达载体,该慢病毒表达载体能够在细胞水平有效沉默靶基因。 展开更多

关键词 nob1 短发夹RNA 慢病毒属

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eEF1A1通过正向调控NOB1的表达促进肝癌细胞的侵袭和转移 被引量：11

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作者 张文明 项明峰 +4 位作者 郑楚骞 陈磊峰 戈进 晏琛 刘秀霞 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期1195-1202,共8页

目的探讨真核翻译延长因子1A1(eEF1A1)对肝癌侵袭转移的影响机制。方法采用荧光定量PCR和Western blot法检测多种肝癌细胞系和正常肝脏细胞中eEF1A1和NI1/RPN12结合蛋白1同源物(NOB1)的mRNA和蛋白表达。肝癌细胞中干扰和过表达eEF1A1后... 目的探讨真核翻译延长因子1A1(eEF1A1)对肝癌侵袭转移的影响机制。方法采用荧光定量PCR和Western blot法检测多种肝癌细胞系和正常肝脏细胞中eEF1A1和NI1/RPN12结合蛋白1同源物(NOB1)的mRNA和蛋白表达。肝癌细胞中干扰和过表达eEF1A1后,通过Transwell侵袭实验和RTCA实验观察肝癌细胞侵袭迁移能力的变化,并观察肝癌细胞中NOB1mRNA及蛋白表达变化。在稳定干扰eEF1A1表达的HCCLM3细胞中过表达NOB1,或在过表达eEF1A1的MHCC97h细胞中干扰NOB1的表达,分析eEF1A1和NOB1蛋白表达水平和细胞侵袭迁移能力。结果肝癌细胞中eEF1A1和NOB1表达明显高于正常肝细胞,并呈正相关。肝癌细胞中干扰eEF1A1表达可明显降低肝癌细胞的侵袭迁移能力,同时NOB1的mRNA和蛋白表达也显著被降低(P均<0.01);过表达eEF1A1后明显增加肝癌细胞的侵袭迁移能力,同时也增加NOB1的mRNA和蛋白表达(P均<0.01)。在稳定干扰eEF1A1表达的HCCLM3细胞中过表达NOB1导致NOB1表达和肝癌细胞侵袭迁移能力的恢复(P均<0.01);然而在稳定过表达eEF1A1的肝癌细胞系中降低NOB1导致NOB1表达的下调和肝癌细胞侵袭迁移能力的抑制(P均<0.01)。结论肝癌细胞中eEF1A1正向调控NOB1表达,进而影响肝癌细胞的侵袭和迁移。 展开更多

关键词 肝细胞性肝癌 eEF1A1 nob1 侵袭和迁移

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NOB1在肝癌组织中的表达及意义 被引量：3

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作者 赵丽娟 李志锋 +2 位作者 石荣亚 杨宁 刘进忠 《临床肝胆病杂志》 CAS 2016年第4期739-741,共3页

目的检测NOB1在肝癌组织中的表达情况,了解NOB1与肝癌临床病理特征的关系。方法收集2011年2月^(-2)015年5月于河北省保定市第一医院行肝癌手术的标本48例,收集肝硬化组织22例、正常肝组织22例作为对照,应用免疫组化SP法检测NOB1在不同... 目的检测NOB1在肝癌组织中的表达情况,了解NOB1与肝癌临床病理特征的关系。方法收集2011年2月^(-2)015年5月于河北省保定市第一医院行肝癌手术的标本48例,收集肝硬化组织22例、正常肝组织22例作为对照,应用免疫组化SP法检测NOB1在不同肝组织中的表达情况,并分析肝癌组织中NOB1的表达与临床病理因素的关系。计数资料组间比较采用χ~2检验。结果 NOB1在肝癌组织中表达的阳性率(72.9%)明显高于肝硬化组织(36.4%)和正常肝组织(31.8%)(P值分别为0.004、0.001);在肝硬化组织和正常肝组织中的表达差异无统计学意义(P>0.05)。NOB1表达阳性率在肿瘤直径>5 cm组明显高于肿瘤直径≤5 cm组(χ~2=4.355,P=0.037),Edmondson分级Ⅲ、Ⅳ级明显高于Ⅰ、Ⅱ级(χ~2=5.127,P=0.024)。与患者年龄、性别、有无微血管浸润、有无淋巴结转移及临床TNM分期无关(P值均>0.05)。结论 NOB1在肝癌组织中高表达,与肝癌的肿瘤大小、Edmondson分级密切相关,可作为肝癌重要的肿瘤标志物。 展开更多

关键词 肝肿瘤 nob1蛋白

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NOB1基因与肿瘤 被引量：3

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作者 董波 邹绍武 艾开兴 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期432-434,共3页

NOB1基因是新发现的一个与细胞周期及转录调节有密切关系的基因。NOB1编码的蛋白质包括一个PIN(PilTamino terminus)结构域和一个ZNRD1(锌带)结构域,PIN结构域和转录相关,而ZNRD1结构域在细胞周期调节中起重要作用。研究发现,NOB1与胃... NOB1基因是新发现的一个与细胞周期及转录调节有密切关系的基因。NOB1编码的蛋白质包括一个PIN(PilTamino terminus)结构域和一个ZNRD1(锌带)结构域,PIN结构域和转录相关,而ZNRD1结构域在细胞周期调节中起重要作用。研究发现,NOB1与胃癌、食管癌、卵巢癌等肿瘤的发生发展有密切关系。本文主要就NOB1基因特点及其在肿瘤发生发展中的作用作一综述。 展开更多

关键词 nob1基因 蛋白酶体 细胞周期蛋白 肿瘤

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上调miR-15a表达对子宫内膜癌细胞增殖、凋亡和NOB1蛋白表达的影响 被引量：2

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作者 王慧 耿玲 +2 位作者 郭威 刘慧源 耿旭景 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2019年第6期840-844,共5页

目的:研究上调miR-15a表达对子宫内膜癌细胞增殖、凋亡和NOB1蛋白表达的影响。方法:将子宫内膜癌RL-952细胞分为3组,分别给予不转染(空白对照组)、转染miR-15a mimics(miR-15a组)或对照序列(miR-NC组)处理。转染48 h后,qRT-PCR法检测3... 目的:研究上调miR-15a表达对子宫内膜癌细胞增殖、凋亡和NOB1蛋白表达的影响。方法:将子宫内膜癌RL-952细胞分为3组,分别给予不转染(空白对照组)、转染miR-15a mimics(miR-15a组)或对照序列(miR-NC组)处理。转染48 h后,qRT-PCR法检测3组细胞中miR-15a表达水平,CCK-8检测细胞增殖能力,Western blot法检测细胞中Bax和Bcl-2蛋白的表达;平板克隆实验测定细胞克隆形成能力;Annexin V-FITC/PI双染法检测凋亡。利用Targetscan预测NOB1的3′UTR端与miR-15a有结合位点,利用双荧光素酶报告实验鉴定两者的靶向关系。RL-952细胞共转染NOB1过表达载体和miR-15a mimics 48 h后,检测细胞增殖能力、克隆形成能力、凋亡率,以及细胞中Bax、Bcl-2、NOB1蛋白的表达。结果:与空白对照组、miR-NC组比较,miR-15a组细胞中miR-15a表达水平升高,细胞增殖能力和克隆形成率均降低,凋亡率升高,细胞中Bax表达水平升高,Bcl-2表达水平降低(P<0.05)。双荧光素酶报告实验证实miR-15a靶向负调控NOB1的表达。与转染miR-15a mimics的细胞比较,共转染NOB1过表达载体和miR-15a mimics的RL-952细胞增殖能力、克隆形成率升高,Bcl-2、NOB1蛋白表达升高,凋亡率和Bax表达降低(P<0.05)。结论:上调miR-15a表达可能通过靶向下调NOB1,抑制子宫内膜癌细胞的增殖,诱导癌细胞凋亡。 展开更多

关键词 子宫内膜癌 miR-15a nob1 凋亡 增殖

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敲减NOB1基因表达对人结肠癌SW480细胞药物敏感性及侵袭和迁移能力的影响 被引量：4

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作者 窦艳 邱鹏 +1 位作者 马立志 陈江伟 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期614-620,共7页

目的:探讨通过小干扰RNA(small interfering RNA, siRNA)技术敲减NOB1基因表达对人结肠癌SW480细胞活力、药物敏感性、凋亡、细胞周期及侵袭和迁移能力的影响。方法:利用脂质体Lipofectamine 3000将NOB1 siRNA转染至SW480细胞,采用real-... 目的:探讨通过小干扰RNA(small interfering RNA, siRNA)技术敲减NOB1基因表达对人结肠癌SW480细胞活力、药物敏感性、凋亡、细胞周期及侵袭和迁移能力的影响。方法:利用脂质体Lipofectamine 3000将NOB1 siRNA转染至SW480细胞,采用real-time PCR和Western blot检测转染后SW480细胞中NOB1 mRNA和蛋白表达的变化;采用MTT法检测敲减NOB1基因表达后SW480细胞活力及其对不同化疗药物(顺铂、5-氟尿嘧啶、奥沙利铂和卡培他滨)敏感性的变化;流式细胞术检测敲减NOB1基因表达对SW480细胞凋亡和周期的影响;Transwell方法检测敲减NOB1基因表达对结肠癌SW480细胞侵袭和迁移能力的影响。结果:转染NOB1 siRNA后,SW480细胞中NOB1的mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与对照组和阴性对照siRNA组相比,NOB1 siRNA转染组的SW480细胞在24～72 h的细胞活力显著降低,顺铂、5-氟尿嘧啶、奥沙利铂和卡培他滨对该细胞的半数抑制浓度均显著降低,细胞凋亡率显著增加,细胞周期受到阻滞,细胞侵袭和迁移能力显著降低(P<0.05)。结论:NOB1 siRNA转染能够抑制结肠癌SW480细胞活力及侵袭和转移能力,并增强细胞对药物的敏感性,促进细胞凋亡。NOB1能够成为结肠癌诊断和治疗的新靶点。 展开更多

关键词 结肠癌 nob1基因 药物敏感性 细胞凋亡

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