4-萜品醇对免疫应激仔猪脾脏细胞、抗氧化酶和细胞因子的调节作用

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作者 尉浩华 丁泽强 +2 位作者 姜政 董丽 喻礼怀 《饲料工业》 北大核心 2025年第14期120-125,共6页

试验旨在研究茶树油主要功能物质4-萜品醇(TER)对仔猪脾脏的抗氧化功能和细胞因子的调节作用。选取40头28日龄仔公猪,随机分为5组,每组8头,单栏饲养。设置对照组(CON组,饲喂基础日粮),脂多糖组(LPS组,饲喂基础日粮),低、中、高剂量TER组... 试验旨在研究茶树油主要功能物质4-萜品醇(TER)对仔猪脾脏的抗氧化功能和细胞因子的调节作用。选取40头28日龄仔公猪,随机分为5组,每组8头,单栏饲养。设置对照组(CON组,饲喂基础日粮),脂多糖组(LPS组,饲喂基础日粮),低、中、高剂量TER组(PLT、PMT、PHT组,饲喂基础日粮+30、60、90 mg/kg TER)。21 d后统计生长性能,LPS组和TER组腹腔注射100μg/kg LPS,CON组注射等体积生理盐水。注射6 h后,每组随机挑选6头仔猪屠宰取样。结果表明:(1)与CON组相比,LPS组仔猪脾脏细胞面积和细胞粒径显著减小(P<0.05);与LPS组相比,TER试验各组仔猪脾脏细胞面积和粒径显著增大(P<0.05);TER各组相比较,PMT组的细胞面积和细胞粒径均有所升高。(2)与CON组相比,LPS组仔猪脾脏过氧化氢酶(CAT)活性和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性有所降低(P>0.05),丙二醛(MDA)含量显著升高(P<0.05);与LPS组相比,PMT组和PHT组的脾脏CAT和GSH-Px活性显著升高(P<0.05),PMT组的MDA含量显著降低(P<0.05)。(3)与CON组相比,LPS组仔猪脾脏中白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子(TNF-α)含量显著增高(P<0.05);与LPS组相比,PLT、PMT组仔猪脾脏中细胞白介素10(IL-10)含量显著增高(P<0.05),PMT、PHT组仔猪脾脏IL-1β含量显著降低(P<0.05)。综上所述,LPS刺激会导致仔猪脾脏细胞面积和粒径变小,引起脾脏氧化损伤和炎症反应,而TER能够缓解LPS对仔猪脾脏形态结构、抗氧化功能和免疫功能造成的不良影响。在仔猪日粮中添加量为60 mg/kg的TER可缓解LPS刺激对仔猪脾脏的损伤,以期为TER在仔猪生产中的应用提供理论参考。 展开更多

关键词 4-萜品醇 脾脏 抗氧化酶 细胞因子 断奶仔猪

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高脂对血管老化烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4沉默信息调节因子2相关酶1通路的影响

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作者 石丹丹 刘美霞 +3 位作者 刘剑刚 郭晓晨 宁梓淇 张瑶瑶 《中华老年心脑血管病杂志》 北大核心 2025年第7期871-876,共6页

目的观察高脂饲料促进载脂蛋白E基因敲除(ApoE^(-/-))小鼠和C57BL/6J小鼠主动脉血管老化烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(nicotinamide adenine dinucleotide phosphatase oxidase 4,NOX4)-沉默信息调节因子2相关酶1(silent mating typ... 目的观察高脂饲料促进载脂蛋白E基因敲除(ApoE^(-/-))小鼠和C57BL/6J小鼠主动脉血管老化烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(nicotinamide adenine dinucleotide phosphatase oxidase 4,NOX4)-沉默信息调节因子2相关酶1(silent mating type information regulation 2 homolog 1,SIRT1)信号通路的蛋白表达变化。方法选取10周龄、雌雄各半的ApoE^(-/-)小鼠及C57BL/6J小鼠共40只,根据随机数表法分为ApoE普食组(ApoE^(-/-)小鼠+普通饮食)、ApoE高脂组(ApoE^(-/-)小鼠+高脂饮食)、C57普食组(C57小鼠+普通饮食)、C57高脂组(C57小鼠+高脂饮食),每组10只,雌雄各半。适应性喂养1周后,各组以相应饮食喂养12周。12周后麻醉后眼眶取血和主动脉弓组织。苏木精-伊红染色及Masson染色观察主动脉弓组织的病理形态,全自动生化分析仪检测三酰甘油(triglyceride,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)含量,酶联免疫吸附测定检测氧化型LDL-C(ox-LDL-C)含量,比色法测定活性氧(reactive oxygen species,ROS)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)、谷胱甘肤过氧化物酶(glutathione peroxidase,GPX)、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide,NAD+)含量,Western blot检测SIRT1、p53、p21、NOX4的表达。结果与C57普食组比较,ApoE普食组可见明显的脂质沉积,胶原纤维增多,TC、TG、HDL-C、LDL-C、ox-LDL-C、ROS、p21表达显著升高,GSH、GPX、NAD+表达显著降低(P<0.05,P<0.01)。与ApoE普食组比较,ApoE高脂组病理可见斑块面积增大,弹性纤维明显减少,胶原纤维明显增多,TC、HDL-C、LDL-C、ox-LDL-C、ROS、p21表达显著升高(P<0.01);与ApoE^(-/-)普食组比较,ApoE^(-/-)高脂组GSH、GPX、NAD+、NOX4表达显著降低[(6.4±0.8)μmol/L vs(9.6±0.8)μmol/L,P<0.01;(242.0±39.0)U/ml vs(362.7±11.1)U/ml,P<0.01;(0.61±0.15)nmol/L vs(1.07±0.20)nmol/L,P<0.01;0.26±0.01 vs 0.32±0.03,P<0.05]。结论高脂饮食可能通过升高血脂及氧化应激水平,降低NAD+及NOX4表达、升高p21表达,从而激活NOX4-SIRT1通路,加速血管老化的进程。 展开更多

关键词 膳食 高脂 nadph氧化酶4 抗衰老酶1 载脂蛋白E类 小鼠

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间充质干细胞影响NADHP氧化酶4抑制氧化应激通路治疗2型糖尿病肾病

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作者 冯淑琪 金国荣 +9 位作者 薛群航 贺敏 王泽航 要嘉欣 陈龙 王玉姣 张安秀 何生 周冰蕊 解军 《中国生物化学与分子生物学报》 北大核心 2025年第5期730-740,共11页

糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)是糖尿病最严重的并发症之一,是终末期肾病的主要原因。DN患者的病理机制与长期血糖控制不佳密切相关,持续高血糖状态通过诱导肾内氧化应激反应,引发足细胞损伤及肾小管间质炎症浸润,进而导致蛋白... 糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)是糖尿病最严重的并发症之一,是终末期肾病的主要原因。DN患者的病理机制与长期血糖控制不佳密切相关,持续高血糖状态通过诱导肾内氧化应激反应,引发足细胞损伤及肾小管间质炎症浸润,进而导致蛋白尿、肾小球硬化和纤维化等不可逆肾损伤。人脐带间充质干细胞(human umbilical cord derived mesenchymal stem cells,hUC-MSCs)因其良好的抗氧化应激作用有望为DN提供新的解决方案。本研究建立了DN小鼠模型,通过尾静脉注射hUC-MSCs(1×10^(6)/只)来达到治疗DN的目的。空腹血糖和腹腔注射葡萄糖耐量实验(intraperitoneal glucose tolerance test,IPGTT)数据显示,hUC-MSCs能显著降低DN小鼠的空腹血糖水平(22.5±3.0 vs 14.7±1.1,P<0.01)并提高其血糖调节能力(P<0.05)。同时,DN小鼠经hUC-MSCs治疗后肾功能得到改善并且氧化应激产物水平下降,例如尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、尿肌酐(urinary creatinine,Ucr)、尿蛋白(urinary protein,PRO)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)的水平均显著降低(P<0.05)。通过苏木素-伊红(hematoxylin-eosin staining,H&E)染色、糖原(periodic acid-schiff stain,PAS)染色和天狼星红染色对肾组织形态学进行分析,经hUC-MSCs治疗后DN小鼠的肾小球间质增生、肾小球肥大和肾小管炎性间质浸润等病理状态均得到减轻。免疫组化、Real-time RT-PCR和免疫印迹等结果显示,hUC-MSCs治疗可降低氧化应激主要相关蛋白酶NADPH氧化酶4(NADPH oxidase 4,NOX4)和硫氧还蛋白相互作用蛋白(thioredoxin interacting protein,TXNIP)的表达(P<0.05),减少活性氧(reactive oxygen species,ROS)的产生。同时,在体外实验中选择人肾皮质近曲小管上皮细胞(human renal proximal tubular epithelial cells,HK-2 cells)进行验证,使用高糖处理,采用hUC-MSCs的条件培养基(mesenchymal stem cell-conditioned medium,MSC-CM)进行处理,免疫印迹结果显示,NOX4和TXNIP的表达都得到抑制(P<0.05),ROS表达降低。综上,hUC-MSCs治疗可以降低DN小鼠的血糖水平,改善肾功能下降以及病理损伤,其作用可能与下调NOX 4的表达从而抑制TXNIP介导的氧化应激有关。 展开更多

关键词 糖尿病肾病 人脐带间充质干细胞 氧化应激 nadph氧化酶4 硫氧还蛋白相互作用蛋白

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NADPH氧化酶Nox2和Nox4在小鼠肠炎中的表达及意义 被引量：2

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作者 肖中岳 轩青霞 高强 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2019年第2期225-230,共6页

目的探讨烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶家族的主要成员NADPH氧化酶2 (Nox2)和Nox4在小鼠肠炎模型结肠组织中的表达及意义。方法选用6～8周龄的129S/SV雄性小鼠建立结肠炎模型,将其随机分为对照组、1. 5%葡聚糖硫酸钠(DSS)组和3... 目的探讨烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶家族的主要成员NADPH氧化酶2 (Nox2)和Nox4在小鼠肠炎模型结肠组织中的表达及意义。方法选用6～8周龄的129S/SV雄性小鼠建立结肠炎模型,将其随机分为对照组、1. 5%葡聚糖硫酸钠(DSS)组和3. 0%DSS组,对照组自由饮水,1. 5%DSS组和3. 0%DSS组分别给予含1. 5%DSS和3. 0%DSS饮用水自由饮用6 d。通过体质量变化、疾病活动指数(DAI)评分和组织病理学评分等方法评估肠道炎症程度。使用酶标仪间接测定小鼠血清中丙二醛(MDA)的含量,以评估实验小鼠的氧化应激程度。采用实时定量PCR技术检测结肠组织中促炎因子白介素-1β(IL-1β)、白介素-6 (IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)以及Nox2和Nox4 mRNA表达情况;采用免疫组织化学法检测结肠组织中Nox2和Nox4蛋白表达情况。结果对照组小鼠未见肠炎表现,1. 5%DSS组小鼠呈轻度肠炎表现,3. 0%DSS组小鼠呈重度肠炎表现。杯状细胞在1. 5%DSS组体积增大、数量减少,在3. 0%DSS组进一步减少,甚至消失(均P <0. 05)。MDA在1. 5%DSS组升高,在3. 0%DSS组进一步升高(均P <0. 05)。Nox2和Nox4 mRNA和蛋白的表达量在不同炎症程度时表达不同。两者mRNA和蛋白的表达量一致,炎症组均显著高于对照组,且均随炎症程度增加表达进一步增加(均P <0. 05)。Nox2蛋白主要表达于浸润的吞噬细胞和中性粒细胞等炎细胞中;Nox4蛋白表达于中性粒细胞和淋巴细胞等炎细胞中。结论 Nox2和Nox4在小鼠肠炎的发病过程中发挥重要作用。 展开更多

关键词 nadph氧化酶 nox2 nox4 炎症性肠病 结肠炎

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姜黄素对大鼠肝星状细胞中TGF-β调节的NADPH氧化酶4的激活及Smad信号通路的影响 被引量：4

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作者 王雅蕊 李俊 +3 位作者 黄成 李小枫 李晓慧 王欢 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2015年第3期319-323,共5页

目的研究姜黄素潜在的抗纤维化作用,以及转化生长因子β(TGF-β)诱导大鼠肝星状细胞(HSC-T6)激活的机制。方法不同浓度的姜黄素(0、5、10、20、40μmol/L)处理HSC-T6后,用MTT法测定其对HSC-T6增殖作用的影响;用RT-PCR法检测其mRNA水平... 目的研究姜黄素潜在的抗纤维化作用,以及转化生长因子β(TGF-β)诱导大鼠肝星状细胞(HSC-T6)激活的机制。方法不同浓度的姜黄素(0、5、10、20、40μmol/L)处理HSC-T6后,用MTT法测定其对HSC-T6增殖作用的影响;用RT-PCR法检测其mRNA水平的表达;用Westem blot法检测表达α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、细胞外基质主要成分α1I胶原(Col1α1)、NADPH氧化酶4(NOX 4)、Smad 2、Smad 3及其磷酸化的水平。结果 40μmol/L的姜黄素组刺激HSC-T6 48 h后,其抑制率达到最大,显著低于仅TGF-β1刺激组、5、10及20μmol/L姜黄素组(P<0.05)。姜黄素可显著降低激活型HSC-T6的α-SMA、α1I胶原mRNA与蛋白表达,从而可以降低细胞外基质的沉积;有效降低了NOX 4的蛋白水平,减少了活性氧的水平;还明显降低Smad2、Smad 3的磷酸化程度,呈浓度依赖性。结论姜黄素在体外能够明显地抑制HSC-T6激活,对肝纤维化的发生发展具有一定抑制作用,其机制可能与抑制TGF-β诱导的NOX4的激活及Smad信号通路有关。 展开更多

关键词 姜黄素 大鼠肝星状细胞 转化生长因子Β nadph氧化酶4 SMAD蛋白

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NOX4/TRPC6在糖尿病肾病足细胞损伤中的作用

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作者 岳汝驰 李惠敏 +1 位作者 胡斌 宋志霞 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第2期250-260,共11页

目的:探讨NADPH氧化酶4(NADPH oxidase 4,NOX4)/瞬时受体电位阳离子通道C亚家族成员6(transient receptor potential channel subfamily C member 6,TRPC6)在糖尿病肾病足细胞损伤中的作用及其机制。方法:(1)将雄性Sprague-Dawley大鼠... 目的:探讨NADPH氧化酶4(NADPH oxidase 4,NOX4)/瞬时受体电位阳离子通道C亚家族成员6(transient receptor potential channel subfamily C member 6,TRPC6)在糖尿病肾病足细胞损伤中的作用及其机制。方法:(1)将雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为对照组、糖尿病肾病组、NOX4抑制剂(GKT137831)组、糖尿病肾病+GKTl37831组,每组8~10只。通过一次性腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)(70 mg/kg)构建1型糖尿病模型,模型构建成功后腹腔注射GKT137831(5 mg/kg)。定期监测血糖和24 h尿白蛋白定量,并收集血液及肾脏组织。(2)使用小鼠肾小球足细胞为体外实验研究对象,细胞分为正常对照组、高糖组、GKTl37831组及高糖+GKTl37831组。体外高糖培养足细胞2周。使用NOX4抑制剂及使用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转染足细胞。免疫印迹、免疫组化及实时荧光反转录PCR(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-qPCR)等技术检测NOX4和TRPC6表达水平。(3)使用荧光共聚焦显微镜观察高糖条件下足细胞线粒体形态变化,通过免疫印迹法检测足细胞中过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α(peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator 1α,PGC1α)、线粒体转录因子A(mitochondrial transcription factor A,TFAM)、细胞色素C氧化酶亚单位I(cytochrome C oxidase subunit I,COX I)和COX IV蛋白表达水平。结果:(1)与正常对照组相比,糖尿病肾病大鼠肾小球显著肥大、基底膜增厚,系膜区增宽,尿白蛋白定量显著增加,免疫印迹及免疫组化结果显示肾组织NOX4蛋白表达水平升高,肾小球足细胞蛋白(nephrin)表达减少,间质细胞标志物如结蛋白(desmin)表达增加,TRPC6表达水平升高(P<0.05);使用GKT137831可降低肾组织desmin表达,保留肾小球nephrin,减少尿白蛋白定量(P<0.05)。(2)在体外足细胞实验中,高糖背景下,足细胞中NOX4和TRPC6表达上调(P<0.05);免疫荧光及免疫印迹检测结果显示GKT137831可减轻足细胞TRPC6和desmin表达,部分恢复nephrin表达(P<0.05);免疫印迹结果显示使用TRPC6 siRNA转染足细胞,可进一步促进GKT137831对足细胞的保护作用(P<0.05)。(3)荧光共聚焦显微镜显示高糖背景下足细胞线粒体形态受损,使用GKT137831及转染TRPC6 siRNA后,线粒体损伤得到部分恢复。免疫印迹结果显示高糖背景下足细胞PGC1α、TFAM、COX I和COX IV蛋白水平降低,使用GKT137831及转染TRPC6 siRNA后PGC1α、TFAM、COX I和COX IV表达水平升高(P<0.05)。结论:在糖尿病肾病的病理过程中,肾脏中NOX4表达增加,在一定程度上通过TRPC6通道介导足细胞的损伤,抑制NOX/TRPC6可改善足细胞线粒体功能障碍。这一发现为糖尿病肾病的临床诊疗提供了新的视角和策略。 展开更多

关键词 糖尿病肾病 足细胞损伤 nadph氧化酶4 瞬时受体电位阳离子通道C亚家族成员6

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NADPH氧化酶4抑制剂对贝伐单抗诱导人RPE细胞上皮-间质转化的抑制作用 被引量：2

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作者 谢超慧 郝相慧 +1 位作者 杨玲玲 徐海峰 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期507-513,共7页

目的观察还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化酶4(NOX4)抑制剂对贝伐单抗诱导人视网膜色素上皮(RPE)细胞发生上皮-间质转化(EMT)的影响。方法将人RPE细胞系ARPE-19细胞分为空白对照组、贝伐单抗组、贝伐单抗+VAS2870组和贝伐单抗+GKT137831... 目的观察还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化酶4(NOX4)抑制剂对贝伐单抗诱导人视网膜色素上皮(RPE)细胞发生上皮-间质转化(EMT)的影响。方法将人RPE细胞系ARPE-19细胞分为空白对照组、贝伐单抗组、贝伐单抗+VAS2870组和贝伐单抗+GKT137831组,其中空白对照组不做任何处理,贝伐单抗组、贝伐单抗+VAS2870组和贝伐单抗+GKT137831组培养基中分别加入0.25 g/L贝伐单抗、0.25 g/L贝伐单抗+3μmol/L VAS2870、0.25 g/L贝伐单抗+20μmol/L GKT137831培养72 h,VAS2870和GKT137831均为NOX4抑制剂。采用实时荧光定量PCR和Western blot法测定NOX4和EMT标志物纤维连接蛋白(FN)、波形蛋白(Vimentin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及紧密连接相关蛋白闭锁小带蛋白-1(ZO-1)mRNA和蛋白表达水平;采用细胞免疫荧光染色法验证NOX4和EMT标志物蛋白在各组细胞中的表达情况。结果实时荧光定量PCR和Western blot检测结果显示,空白对照组、贝伐单抗组、贝伐单抗+VAS2870组和贝伐单抗+GKT137831组细胞中FN、Vimentin、α-SMA、ZO-1和NOX4 mRNA和蛋白相对表达量总体比较差异均有统计学意义(mRNA:F=97.07、195.40、722.40、38.56、70.81,均P<0.001;蛋白:F=23.09、64.58、58.19、26.97、63.19,均P<0.001),其中贝伐单抗组FN、Vimentin、α-SMA和NOX4 mRNA和蛋白相对表达量明显高于空白对照组,ZO-1 mRNA和蛋白相对表达量明显低于空白对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。贝伐单抗+VAS2870组和贝伐单抗+GKT137831组FN、Vimentin、α-SMA和NOX4 mRNA和蛋白相对表达量明显低于贝伐单抗组,ZO-1 mRNA和蛋白相对表达量明显高于贝伐单抗组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。免疫荧光染色结果显示,贝伐单抗组FN、Vimentin、α-SMA荧光强度强于空白对照组,ZO-1荧光强度弱于空白对照组;贝伐单抗+VAS2870组和贝伐单抗+GKT137831组FN、Vimentin、α-SMA荧光强度弱于贝伐单抗组,ZO-1荧光强度强于贝伐单抗组。结论NOX4参与了贝伐单抗诱导RPE细胞EMT的发生,NOX4抑制剂可减轻贝伐单抗诱导人RPE细胞的EMT程度。 展开更多

关键词 贝伐单抗 视网膜色素上皮细胞 上皮-间质转化 还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化酶-4 抑制剂

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松油烯-4-醇对家蝇几种代谢酶及酚氧化酶的影响 被引量：8

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作者 马志卿 冯俊涛 +1 位作者 郭志波 张兴 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期509-515,共7页

为进一步探讨松油烯-4-醇的作用机理,以点滴法处理家蝇成虫后,测定兴奋期、痉挛期、麻痹期及复苏期4个中毒阶段试虫的4种代谢酶及酚氧化酶(PPO)活性.结果表明:松油烯-4-醇可明显激活羧酸酯酶(CarE);酸性磷酸酯酶(ACP)表现出先被激活后... 为进一步探讨松油烯-4-醇的作用机理,以点滴法处理家蝇成虫后,测定兴奋期、痉挛期、麻痹期及复苏期4个中毒阶段试虫的4种代谢酶及酚氧化酶(PPO)活性.结果表明:松油烯-4-醇可明显激活羧酸酯酶(CarE);酸性磷酸酯酶(ACP)表现出先被激活后被抑制,在复苏期又被激活的变化过程,而碱性磷酸酯酶(AKP)被明显抑制,各期酶抑制率分别为8.0%2、8.0%、45.0%和33.0%;谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)被明显激活,各期酶比活力分别为对照的1.59、1.19、1.26和2.76倍;松油烯-4-醇可显著抑制细胞色素P450O-脱甲基活性,在麻痹期和复苏期的酶抑制率分别为46.91%和60.89%;离体和活体条件下均可显著激活PPO活性.可见,松油烯-4-醇对家蝇代谢酶系的影响与其毒杀作用有关,而中毒试虫的复苏可能与GSTs的激活有关.该化合物可开发为新型农药或增效剂,在害虫抗性治理中具有潜在的应用价值. 展开更多

关键词 松油烯-4-醇 家蝇 酚氧化酶 代谢酶 作用机理

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4-己基间苯二酚和曲酸对舞毒蛾酚氧化酶的抑制作用 被引量：6

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作者 赵燕 杨龙 +2 位作者 曹露凡 周成刚 罗万春 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第12期95-99,共5页

以舞毒蛾为材料,分离提取酚氧化酶,研究4-己基间苯二酚(4HR)和曲酸对舞毒蛾酚氧化酶活力的影响。结果表明:4HR对该虫的单酚酶和二酚酶活性均表现很强的抑制作用,其IC50分别为0.00041和0.00035mmol.L-1。其中,4HR对单酚酶活力表达的迟滞... 以舞毒蛾为材料,分离提取酚氧化酶,研究4-己基间苯二酚(4HR)和曲酸对舞毒蛾酚氧化酶活力的影响。结果表明:4HR对该虫的单酚酶和二酚酶活性均表现很强的抑制作用,其IC50分别为0.00041和0.00035mmol.L-1。其中,4HR对单酚酶活力表达的迟滞时间有明显的延长效应,浓度为0.0002mmol.L-1时可使单酚酶活力表达迟滞时间从181s延长到253s;而当浓度为0.0005mmol.L-1时,其迟滞时间则延长至372s。以邻苯二酚为底物时,4HR对二酚酶的抑制作用表现为典型的竞争型抑制类型,抑制常数KI为0.00015mmol.L-1。曲酸对舞毒蛾的单酚酶和二酚酶活性均表现较强的抑制作用,其IC50分别为0.06和0.92mmol.L-1。曲酸对单酚酶活力表达的迟滞时间也有明显的延长效应,浓度为0.1mmol.L-1时可使单酚酶活力表达迟滞时间从306s延长到732s;而当浓度为0.15mmol.L-1时,其迟滞时间则延长至900s。以邻苯二酚为底物时,曲酸对二酚酶的抑制作用表现为典型的竞争型抑制类型,抑制常数Ki为0.51mmol.L-1。 展开更多

关键词 舞毒蛾 酚氧化酶 抑制机制 4-己基间苯二酚(4HR) 曲酸

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4-卤代苯甲酸对马铃薯多酚氧化酶的抑制效应 被引量：12

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作者 林敏 邱凌 +3 位作者 周盛梅 钟雪 王勤 陈清西 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第5期56-59,共4页

马铃薯在储存和加工过程中易褐变,本实验研究了3种4-卤代苯甲酸(4-氟代苯甲酸、4-氯代苯甲酸、4-溴代苯甲酸)对褐变中的关键酶——多酚氧化酶活性的抑制作用。实验表明,4-氟代苯甲酸、4-氯代苯甲酸、4-溴代苯甲酸对该酶均有明显的抑制作... 马铃薯在储存和加工过程中易褐变,本实验研究了3种4-卤代苯甲酸(4-氟代苯甲酸、4-氯代苯甲酸、4-溴代苯甲酸)对褐变中的关键酶——多酚氧化酶活性的抑制作用。实验表明,4-氟代苯甲酸、4-氯代苯甲酸、4-溴代苯甲酸对该酶均有明显的抑制作用,测得使该酶活力下降50%所需的抑制剂浓度(IC50)分别为0.635、0.370、0.300mmol/L。抑制动力学实验表明这三种4-卤代苯甲酸对该酶均表现为可逆的非竞争性抑制作用,其抑制常数分别为0.632、0.365、0.303mmol/L。随着卤族元素分子量的增大,对酶的空间位阻增强,导致抑制效率的显著增强。 展开更多

关键词 马铃薯 多酚氧化酶 4-卤代苯甲酸 抑制作用 动力学

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姜黄素对内毒素诱导的血管平滑肌细胞Toll样受体4/NADPH氧化酶/活性氧信号通路及炎症因子释放的影响 被引量：6

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作者 翟海杰 孟哲 +3 位作者 陶海龙 白中乐 闫超 李凌 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期543-548,共6页

目的：观察姜黄素（curcumin,Cur）对内毒素（lipopolysaccharide,LPS）诱导的血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells,VSMCs）Toll 样受体4（Toll-like receptor4,TLR4）/还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（nicotinamide adenine... 目的：观察姜黄素（curcumin,Cur）对内毒素（lipopolysaccharide,LPS）诱导的血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells,VSMCs）Toll 样受体4（Toll-like receptor4,TLR4）/还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH）氧化酶/活性氧（reactive oxygen species,ROS）信号通路及炎症因子释放的影响。方法原代培养 VSMCs 分为5组：对照组、LPS 组、LPS＋姜黄素5μmol/L 组、LPS＋姜黄素10μmol/L 组、LPS＋姜黄素30μmol/L 组和姜黄素30μmol/L 组。MTT 法测定不同浓度姜黄素对 VSMCs 细胞活性的影响；酶联免疫吸附法（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）测定各组细胞上清液中肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-alpha,TNF-α）和白细胞介素-1（interleukin-1,IL-1）蛋白的表达；Real-time PCR 法及 Wester-blot 检测各组细胞 TLR4、p22phox 蛋白的表达；流式细胞仪测定细胞内 ROS 的表达。结果姜黄素在0~80μmol/L 浓度范围内对细胞活性无显著影响。姜黄素（5、10、30μmol/L）可以有效地抑制 LPS 诱导的 TNF-α和 IL-1过分泌和 TLR4、p22phox、ROS 的高表达并具有浓度依赖性。结论姜黄素能够有效地抑制 LPS 诱导的 VSMCs 炎症因子分泌、TLR4表达及其下游 NADPH 氧化酶、ROS 的生成,姜黄素对 LPS 诱导的 VSMCs 炎症反应的抑制作用可能部分依赖于 TLR4介导的 NADPH 氧化酶/ROS 信号通路。 展开更多

关键词 姜黄素 TOLL样受体-4 活性氧 肿瘤坏死因子-α 白细胞介素-1 炎症因子 nadph氧化酶/ROS信号通路

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哮喘儿童白三烯受体调节剂临床疗效与白三烯C4合成酶及5-脂氧化酶基因的相关性 被引量：14

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作者 袁姝华 殷勇 +4 位作者 董文芳 张皓 王薇 张磊 张静 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1126-1131,共6页

目的探讨白三烯C4合成酶(LTC4S)与5-脂氧化酶(ALOX5)基因多态性与白三烯受体拮抗剂临床疗效的关系。方法 2011年6月至2013年6月门诊72例中度持续哮喘患儿分为两组,分别予吸入型糖皮质激素激素(ICS)、ICS联合白三烯受体拮抗剂(LTRA)治疗1... 目的探讨白三烯C4合成酶(LTC4S)与5-脂氧化酶(ALOX5)基因多态性与白三烯受体拮抗剂临床疗效的关系。方法 2011年6月至2013年6月门诊72例中度持续哮喘患儿分为两组,分别予吸入型糖皮质激素激素(ICS)、ICS联合白三烯受体拮抗剂(LTRA)治疗12周,然后交叉治疗12周;采用聚合酶链反应—限制性片段长度多态性方法(PCRRFLP),对LTC4S RS730012、ALOX5 RS2115819位点进行基因分型;分析患儿治疗前后肺功能及儿童哮喘控制测试问卷(C-ACT)评分与基因多态性的关系。结果经ICS联合LTRA治疗后,LTC4S RS730012基因组中的A/C、C/C基因型患儿的75%肺活量时的用力呼气流速(FEF75)改善率显著优于A/A型,差异均有统计学意义(P<0.01);A/A基因型患儿在治疗前后改善情况的差异无统计学意义。ICS联合LTRA治疗前后,ALOX5 RS2115819基因组中的不同基因型患儿间的肺功能指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论 LTC4S RS730012不同基因型患儿在哮喘治疗后小气道功能改善有差异,与LTRA相关。 展开更多

关键词 哮喘 白三烯C4合成酶 5-脂氧化酶 基因多态性 白三烯受体拮抗剂

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利用胆固醇氧化酶转化胆固醇制备胆甾-4-烯-3-酮 被引量：20

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作者 吕陈峰 陈毅力 +2 位作者 王龙刚 杨胜利 王武 《无锡轻工大学学报（食品与生物技术）》 CSCD 北大核心 2001年第5期485-488,共4页

用酶法催化氧化胆固醇制备胆甾 4 烯 3 酮相对于化学法合成具有反应简单、成本较低等优点 .作者探讨了在正辛烷作为有机相的两相反应体系中 ,以胆固醇氧化酶催化氧化胆固醇制备胆甾 4 烯 3 酮的方法 .在胆固醇质量浓度为 4 0 g/L ... 用酶法催化氧化胆固醇制备胆甾 4 烯 3 酮相对于化学法合成具有反应简单、成本较低等优点 .作者探讨了在正辛烷作为有机相的两相反应体系中 ,以胆固醇氧化酶催化氧化胆固醇制备胆甾 4 烯 3 酮的方法 .在胆固醇质量浓度为 4 0 g/L ,反应时间 4 0min、反应温度 4 0℃、磷酸缓冲液 正辛烷体积比 3:2、通氧 4 0L/h及搅拌转速 30 0r/min下 ,胆固醇转化率达到 92 % ,经薄板层析及紫外扫描 ,发现转化产物为单一的胆甾 4 烯 3 展开更多

关键词 胆甾-4-烯-3-酮 两相体系 胆固醇 胆固醇氧化酶 生物转化

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2-羟基-4-甲氧基苯甲醛缩苯胺对菜青虫酚氧化酶的抑制作用 被引量：8

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作者 肖婷 薛超彬 +1 位作者 解先业 罗万春 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期900-906,共7页

为筛选对十字花科蔬菜害虫菜青虫Pieris rapae(L.)酚氧化酶具有高抑制活性的化合物,为寻找新型害虫控制剂提供线索,采用酶标仪微量法以室内合成、筛选的高活性化合物2-羟基-4-甲氧基苯甲醛缩苯胺为抑制剂,研究了其对菜青虫酚氧化酶的抑... 为筛选对十字花科蔬菜害虫菜青虫Pieris rapae(L.)酚氧化酶具有高抑制活性的化合物,为寻找新型害虫控制剂提供线索,采用酶标仪微量法以室内合成、筛选的高活性化合物2-羟基-4-甲氧基苯甲醛缩苯胺为抑制剂,研究了其对菜青虫酚氧化酶的抑制活性及抑制类型。结果表明,供试化合物对菜青虫酚氧化酶的抑制中浓度(IC50)为0.116 mmol/L;该化合物为典型的可逆非竞争型抑制剂,抑制常数(Ki)为1.96 mmol/L。该化合物直接对靶标酚氧化酶产生作用,而不是通过影响酶结构内的铜离子来产生作用的。 展开更多

关键词 菜青虫 酶标仪微量法 酚氧化酶 抑制剂 2-羟基-4-甲氧基苯甲醛缩苯胺 抑制动力学

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4-己基间苯二酚对小菜蛾酚氧化酶抑制作用研究 被引量：5

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作者 王树栋 罗万春 +1 位作者 高兴祥 丁琦 《农药学学报》 CAS CSCD 2004年第3期31-36,共6页

以4-己基间苯二酚(4HR)为效应物,研究了其对小菜蛾酚氧化酶单酚酶和二酚酶活力的影响,旨在为寻找新型害虫控制剂提供线索。结果表明:该化合物对小菜蛾酚氧化酶单酚酶和二酚酶活力均有抑制作用,其I50值分别为0.34μmol/L和0.50μmol/L。... 以4-己基间苯二酚(4HR)为效应物,研究了其对小菜蛾酚氧化酶单酚酶和二酚酶活力的影响,旨在为寻找新型害虫控制剂提供线索。结果表明:该化合物对小菜蛾酚氧化酶单酚酶和二酚酶活力均有抑制作用,其I50值分别为0.34μmol/L和0.50μmol/L。该化合物对单酚酶活力表达的迟滞时间有明显的延长效应,对二酚酶的抑制作用表现为典型的可逆竞争性抑制类型,其抑制常数Ki为0.17μmol/L。通过研究金属离子和酶液对4-己基间苯二酚吸收峰的影响后推测,该化合物对小菜蛾酚氧化酶产生的抑制作用可能与直接影响该酶活性中心的铜离子有关。 展开更多

关键词 4-己基间苯二酚 小菜蛾 酚氧化酶 抑制剂 抑制机理

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4-己基间苯二酚复合防褐剂对马铃薯多酚氧化酶活力的影响 被引量：7

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作者 乔方 王继栋 +1 位作者 黄晓钰 余海虎 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2007年第23期7095-7097,7099,共4页

[目的]为4-己基间苯二酚(4-HR)在食品贮藏与加工中的应用提供理论性依据。[方法]应用二次正交旋转组合设计方法,分析了4-HR与氯化钠、柠檬酸、抗坏血酸的交互防褐作用。[结果]4-HR对抑制马铃薯PPO活性有极显著作用,其次为抗坏血酸、柠... [目的]为4-己基间苯二酚(4-HR)在食品贮藏与加工中的应用提供理论性依据。[方法]应用二次正交旋转组合设计方法,分析了4-HR与氯化钠、柠檬酸、抗坏血酸的交互防褐作用。[结果]4-HR对抑制马铃薯PPO活性有极显著作用,其次为抗坏血酸、柠檬酸和氯化钠,氯化钠抑制作用不明显。各因子对马铃薯PPO活力抑制效果最佳的用量分别为:4-HR 0.019%、柠檬酸0.57%、抗坏血酸0.027%,而氯化钠的水平变化对多酚氧化酶活力几乎没有影响。[结论]4-HR对马铃薯多酚氧化酶活性具有显著的抑制作用,且柠檬酸和抗坏血酸与4-HR的交互作用明显。 展开更多

关键词 4-己基间苯二酚 马铃薯 多酚氧化酶

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GLP-1通过NOX4信号通路拮抗AGE诱导的人脐静脉内皮细胞氧化损伤 被引量：4

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作者 孙慧琳 黄志秋 +3 位作者 曾海龙 张艺能 莫旭旭 陈宏 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期197-201,209,共6页

【目的】探讨NOX4信号通路在胰高血糖素样肽-1(GLP-1)拮抗糖基化终末产物(AGE)诱导的内皮细胞氧化损伤的作用机制。【方法】实验组分为对照组、AGE组、AGE+GLP-1组、AGE+NOX4 si RNA组及AGE+阴性si RNA组,RTPCR检测NOX4 m RNA表达,Weste... 【目的】探讨NOX4信号通路在胰高血糖素样肽-1(GLP-1)拮抗糖基化终末产物(AGE)诱导的内皮细胞氧化损伤的作用机制。【方法】实验组分为对照组、AGE组、AGE+GLP-1组、AGE+NOX4 si RNA组及AGE+阴性si RNA组,RTPCR检测NOX4 m RNA表达,Western Blotting技术检测NOX4蛋白表达情况,流式细胞仪检测细胞凋亡率、ROS生成水平。【结果】与对照组相比,AGE可诱导细胞NOX4蛋白表达(P=0.001)及NOX4 m RNA表达(P<0.05)明显增高;加入GLP-1后,增高的NOX4蛋白(P=0.003)及NOX4 m RNA(P<0.05)明显下降。与AGE组相比,NOX4 si RNA可抑制AGE诱导的ROS生成(P=0.011)、细胞凋亡(P<0.05);阴性si RNA对AGE诱导的ROS生成(P=0.958)、细胞凋亡(P=0.169)无明显影响。【结论】GLP-1至少部分通过抑制NOX4蛋白表达拮抗AGE诱导的人脐静脉内皮细胞氧化损伤。 展开更多

关键词 胰高血糖素样肽-1 nox4蛋白 人脐静脉内皮细胞 氧化损伤

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胃幽门螺杆菌感染与TLR4基因G11367C、NADPH氧化酶基因His72Tyr多态性的交互作用和特发性成年骨质疏松症的关系 被引量：8

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作者 张超贤 郭李柯 +1 位作者 侯文根 秦咏梅 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期515-523,共9页

目的探讨胃幽门螺杆菌(H.Pylori)感染与TLR4基因G11367C、NADPH氧化酶基因His72Tyr多态性的交互作用和特发性成年骨质疏松症(IOIA)的关系。方法选择我院2011年5月至2015年7月收治的IOIA患者160例,以160例健康体检者作为对照组,两组在年... 目的探讨胃幽门螺杆菌(H.Pylori)感染与TLR4基因G11367C、NADPH氧化酶基因His72Tyr多态性的交互作用和特发性成年骨质疏松症(IOIA)的关系。方法选择我院2011年5月至2015年7月收治的IOIA患者160例,以160例健康体检者作为对照组,两组在年龄、性别、民族、籍贯和生活习惯方面无显著性差异,以上述各组患者的外周血白细胞为样本,利用PCR-RFLP技术检测了TLR4基因G11367C和NADPH氧化酶基因His72Tyr多态性。采用^(14)C-尿素呼气试验法(^(14)C-UBT)检测受检者,H.Pylori与^(14)C结合的每分钟衰变数(DPM)以判断H.Pylori感染情况。每位研究对象进行问卷调查,采用非条件Logistic分析,估算G11367C、His72Tyr多态性和H.Pylori感染与LSCC发病风险的调整比值比(OR)及95%可信区间(95%CI),并分析G11367C、His72Tyr多态性与H.Pylori感染的交互作用。结果G11367C(GC)、His72Tyr(HT)和His72Tyr(TT)基因型频率分布在IOIA组分别为70.62%、35.00%和36.25%,在对照组分别为28.12%、13.12%和13.75%,两组之间有显著差异(P均<0.01)。G11367C(GC)基因型者患IOIA的风险均显著增加(OR=6.1442),His72Tyr(HT)和His72Tyr(TT)基因型者患IOIA的风险也显著增加(OR=6.7773,OR=6.4737)。基因突变的协同分析发现G11367C(GC)/His72Tyr(TT)基因型者频率在IOIA组和对照组的分布频率分别为25.63%和3.75%,经χ~2检验在两组之间有显著性差异(P<0.01)。G11367C(GC)/His72Tyr(TT)基因型者患IOIA的风险显著增加(OR=39.5731),G11367C(GC)和His72Tyr(TT)基因型在IOIA发生、发展存在正向的交互作用(γ_2=2.0887,γ_3=1.9856),另外G11367C(GC)和His72Tyr(HT)之间也存在正向交互作用(γ>1)。100≤DPM<500和DPM≥500的H.Pylori感染者频率分布在IOIA组分别为28.75%和40.63%,在对照组分别为15.63%和11.87%,上述H.Pylori感染状况频率在IOIA组与对照组之间均有显著差异(P均<0.01)。100≤DPM<500和DPM≥500的H.Pylori感染者患IOIA的风险性均明显增高(OR=4.4463;OR=8.0238),而DPM≥500的H.Pylori感染者患LSCC的风险性则又明显高于100≤DPM<500的H.Pylori感染者(P<0.01)。H.Pylori感染与G11367C(GC)、His72Tyr(HT)和His72Tyr(TT)基因型与均有正向交互作用(γ均大于1)。结论携带G11367C(GC)、His72Tyr(HT)和His72Tyr(TT)基因型的个体属IOIA高危险人群,这些基因型和H.Pylori感染的交互作用促进了IOIA的发生、发展,应当采取根除H.Pylor或调控基因表达的措施以达到有效预防IOIA的目的。 展开更多

关键词 特发性成年骨质疏松症(IOIA) TLR4基因G11367C nadph氧化酶基因His72Tyr 胃幽门螺杆菌(H.Pylori)感染 多态现象

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蛛网膜下腔出血患者烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4水平与脑组织供血及预后的相关性

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作者 孟高强 叶涵斌 +1 位作者 马宝君 叶子 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2024年第8期965-967,共3页

目的探究蛛网膜下腔出血(subarachnoid haemorrhage,SAH)患者血清烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(nicotinamide adenine dinucleotide phosphatase oxidase 4,NOX4)水平与脑组织供血及预后的相关性。方法回顾性选取2021年5月至2023年1... 目的探究蛛网膜下腔出血(subarachnoid haemorrhage,SAH)患者血清烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(nicotinamide adenine dinucleotide phosphatase oxidase 4,NOX4)水平与脑组织供血及预后的相关性。方法回顾性选取2021年5月至2023年11月南通市第一人民医院收治的SAH患者172例。根据改良的Rankin量表(modified Rankin scale,mRS)评分将患者分为预后良好组118例和预后不良组54例。对比2组患者一般临床资料、NOX4水平以及其他实验室指标。采用logistic回归分析影响SAH患者预后的相关因素,并绘制限制性立方条图分析NOX4和患者预后的相关性。结果随访90 d结果显示,预后良好组mRS评分(1.25±0.32)分,预后不良组mRS评分(4.68±1.01)分,预后良好组mRS评分显著低于预后不良组,差异有统计学意义(t=24.400,P=0.000)。预后不良组高敏C反应蛋白、NOX4水平高于预后良好组(P<0.01);多因素logistic回归分析显示,高敏C反应蛋白(OR=62.026,95%CI:3.145~1223.130,P=0.007)、世界神经外科联盟(World Federation of Neurosurgical Societies,WFNS)分级Ⅳ~Ⅴ级(OR=70.769,95%CI:2.034~2462.544,P=0.019)、改良Fisher分级(OR=67.663,95%CI:3.206~1427.932,P=0.007)、迟发性脑缺血(OR=4.023,95%CI:1.977~8.186,P=0.000)、NOX4(OR=41.916,95%CI:4.038~43.149,P=0.002)是影响SAH患者预后的相关因素。结论高敏C反应蛋白、WFNS分级Ⅳ~Ⅴ级、改良Fisher分级、发生迟发性脑缺血及NOX4表达水平均是影响SAH患者预后的相关因素,并且NOX4水平和患者的预后具有相关性。 展开更多

关键词 蛛网膜下腔出血 nadph氧化酶4 预后 数据相关性 LOGISTIC模型

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系统性红斑狼疮患者外周血多形核粒细胞磷脂酶A2、5-脂氧化酶和白三烯A4水解酶mRNA的表达

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作者 徐祖森 梁源 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期15-17,共3页

目的:探讨磷脂酶A2(cPLA2)、5-脂氧化酶(5-LO)和白三烯A4水解酶(LTA4-H)在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血多形核粒细胞(PMNs)中的表达水平,及其在SLE发病机制中的作用及意义。方法:应用反转录(RT)-PCR检测28例活动期SLE患者和25名正常人... 目的:探讨磷脂酶A2(cPLA2)、5-脂氧化酶(5-LO)和白三烯A4水解酶(LTA4-H)在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血多形核粒细胞(PMNs)中的表达水平,及其在SLE发病机制中的作用及意义。方法:应用反转录(RT)-PCR检测28例活动期SLE患者和25名正常人PMNs中cPLA2、5-LO和LTA4-HmRNA的表达水平。结果:活动期SLE患者cPLA2、5-LO和LTA4-H的阳性表达率与正常对照组相比差异无统计学意义;但活动期SLE患者PMNs中的5-LOmRNA的平均表达水平(0.891±0.263)明显高于正常对照组(0.641±0.138),LTA4-HmRNA的平均表达水平(0.6582±0.2804)也明显高于正常对照组(0.3392±0.0751),二者差异均有显著性(P<0.01);活动期SLE组cPLA2的平均表达水平(0.630±0.268)与正常对照组(0.504±0.192)处于同一表达水平,差异无显著性。结论:活动期SLE患者外周血多形核粒细胞中5-LO和LTA4-HmRNA的表达增加,通过诱导白三烯B4(leukotrieneB4,LTB4)的产生参与SLE的发病过程。为特异性5-LO抑制剂或LTB4受体拮抗剂治疗SLE提供了理论依据。 展开更多

关键词 红斑狼疮 系统性 磷脂酶A2 5-脂氧化酶 白三烯A4水解酶 多形核粒细胞

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