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NADH-细胞色素b5还原酶在视网膜色素变性rds小鼠中的差异表达 被引量:1
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作者 邝志和 张清炯 申煌煊 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第9期817-820,共4页
目的 :寻找遗传性视网膜色素变性动物模型rds小鼠发病时差异表达的基因。方法 :采用差异显示技术比较 2 5drds小鼠和正常对照小鼠的视网膜mRNA。对差异表达的基因片段进行克隆、测序和同源性比较。用基因特异引物RT -PCR观察其在不同日... 目的 :寻找遗传性视网膜色素变性动物模型rds小鼠发病时差异表达的基因。方法 :采用差异显示技术比较 2 5drds小鼠和正常对照小鼠的视网膜mRNA。对差异表达的基因片段进行克隆、测序和同源性比较。用基因特异引物RT -PCR观察其在不同日龄两种小鼠中的表达情况。结果 :rds小鼠与同龄正常对照小鼠相比 ,视网膜存在相当明显的基因表达差异。其中一个差异片段克隆的序列与大鼠NADH -细胞色素b5还原酶 (b5R)的cDNA序列有 91%的同源性 ,可以认为是小鼠b5R的cDNA片段。基因特异引物RT -PCR证实 12d、2 5d和 37drds小鼠视网膜中b5RmRNA水平高于同龄正常对照小鼠。结论 :可能由于某种氧化因素使b5R表达增高 ,大量消耗NADH并生成NAD+ 。 展开更多
关键词 基因表达 小鼠 NADPH 脱氢酶 视网膜细胞凋亡 细胞色素b5R 视网膜色素变性 RDS 遗传性视觉损害
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丙基硫氧嘧啶对甲状腺NADH-细胞色素b_5还原酶活性影响 被引量:2
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作者 黄国良 林芬 高妍 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期685-687,共3页
目的 探讨丙基硫氧嘧啶 (PTU)抗甲状腺作用新的药理机制。方法 以高铁氰化钾和二氯酚靛酚为底物测定NADH 细胞色素b5还原酶 (b5R)活性 ,应用高香草酸荧光分析技术对H2 O2 浓度进行测定 ,观察PTU对甲状腺b5R活性和H2 O2 浓度影响。结果... 目的 探讨丙基硫氧嘧啶 (PTU)抗甲状腺作用新的药理机制。方法 以高铁氰化钾和二氯酚靛酚为底物测定NADH 细胞色素b5还原酶 (b5R)活性 ,应用高香草酸荧光分析技术对H2 O2 浓度进行测定 ,观察PTU对甲状腺b5R活性和H2 O2 浓度影响。结果 PTU可抑制b5R活性 ,且呈浓度依赖性 ,0 0 5mmol·L-1PTU即对b5R活性有抑制作用 ,以后随PTU浓度增加 ,b5R活性逐渐降低 ;H2 O2 浓度则随b5R活性降低而下降。NADH有拮抗PTU对b5R的抑制作用。结论 PTU对甲状腺b5R活性有抑制作用 ,抑制b5R活性从而抑制H2 O2 展开更多
关键词 丙基硫氧嘧啶 DADH-细胞色素b5还原酶 过氧化氢 抗甲状腺药物 甲状腺激素 甲状腺疾病
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膜上斑点洁显示人红细胞b_5还原酶活性 被引量:1
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作者 兰风华 唐玉钗 +1 位作者 朱忠勇 吴玉水 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1996年第4期379-380,共2页
人红细胞NADH-细胞色素b5还原酶是使高铁血红蛋白还原的主要酶类,其缺陷将导致遗传性高铁血红蛋白血症.目前,主要通过分光光度法测定b5还原酶活性.我们将b5还原酶抗体点于硝酸纤维膜上,以此捕获并富集红细胞胞浆b5还... 人红细胞NADH-细胞色素b5还原酶是使高铁血红蛋白还原的主要酶类,其缺陷将导致遗传性高铁血红蛋白血症.目前,主要通过分光光度法测定b5还原酶活性.我们将b5还原酶抗体点于硝酸纤维膜上,以此捕获并富集红细胞胞浆b5还原酶.有b5还原酶活性的斑点用噻唑蓝染色.此法简单直观,可用于b5还原酶的定性和半定量测定,为遗传性高铁血红蛋白血症的诊断提供了一种新的实验手段. 展开更多
关键词 高铁血红蛋白 血症 b5还原酶 细胞 膜上斑点法
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添食氟化物对家蚕中肠组织细胞色素P450和b5含量的影响 被引量:6
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作者 米智 柳照应 +4 位作者 朱勇 李傲祥 曾媛琴 杜文华 隆耀航 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期539-543,共5页
为了探讨家蚕对NaF的代谢机制,以家蚕耐氟品种T6和敏感品种734为材料,5龄起蚕分别添食用200、400mg/LNaF溶液浸泡后的桑叶,检测蚕体内氧化酶系重要成员细胞色素P450和b5的含量变化。添食NaF后的168h内,耐氟品种T6中肠组织的细胞色素P45... 为了探讨家蚕对NaF的代谢机制,以家蚕耐氟品种T6和敏感品种734为材料,5龄起蚕分别添食用200、400mg/LNaF溶液浸泡后的桑叶,检测蚕体内氧化酶系重要成员细胞色素P450和b5的含量变化。添食NaF后的168h内,耐氟品种T6中肠组织的细胞色素P450含量比添食清水对照组高3~7倍,细胞色素b5含量的增长与细胞色素P450含量的增长具有较高的相关性(R2=0.8220);添食不同浓度NaF溶液的差异不显著。添食NaF后的24~48h,敏感品种734中肠组织的细胞色素P450含量迅速增加,为添食清水对照组的1~2倍,随后逐渐下降,细胞色素b5含量的增长与细胞色素P450含量的增长无较好的线性关系(R2=0.4727);添食不同浓度NaF溶液的差异不显著。在氟化物作用下,耐氟品种T6中肠组织的细胞色素P450、b5含量显著增加,对氟化物敏感品种734中肠组织的细胞色素P450、b5含量变化相对较小,推测细胞色素P450和b5与家蚕对氟化物的代谢具有一定关联。 展开更多
关键词 家蚕 耐氟性能 细胞色素P450 细胞色素b5
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家蚕对溴虫腈的耐受性及与体内细胞色素P450和b5含量的关联性 被引量:3
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作者 李涛 刘敏 +4 位作者 刘增虎 陈安利 廖鹏飞 杨海 董占鹏 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期436-441,共6页
溴虫腈是一种广泛应用并明确对家蚕毒性较小的农用杀虫剂。为了探讨家蚕对溴虫腈的耐受性产生机制,采用室内生物测定方法检测溴虫腈对家蚕耐受性品系QBA和敏感品系p50的2~5龄幼虫的毒性,并同时测定幼虫体内细胞色素P450和b5的含量。结... 溴虫腈是一种广泛应用并明确对家蚕毒性较小的农用杀虫剂。为了探讨家蚕对溴虫腈的耐受性产生机制,采用室内生物测定方法检测溴虫腈对家蚕耐受性品系QBA和敏感品系p50的2~5龄幼虫的毒性,并同时测定幼虫体内细胞色素P450和b5的含量。结果表明:随着2个家蚕品系幼虫的发育龄期增加,幼虫对溴虫腈的耐受性也增强,并且溴虫腈对同一龄期幼虫的LC50值是耐受性品系QBA高于敏感品系p50;幼虫体内的细胞色素P450和b5含量也是随着幼虫发育龄期增加,但同一龄期耐受性品系QBA幼虫的细胞色素P450含量高于敏感品系p50,而且QBA的幼虫随着发育龄期对溴虫腈的耐受性增强与细胞色素P450含量的增加具有极显著的正相关性(P<0.01),与细胞色素b5含量的增加则无相关性。初步推测不同家蚕品系对溴虫腈的耐受性与体内细胞色素P450含量可能有一定关联。 展开更多
关键词 家蚕 细胞色素P450 细胞色素b5 溴虫腈 耐受性
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细胞色素b_5 Glu44、Glu56的定点突变和蛋白质结构比较 被引量:3
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作者 孙雨龙 王韵华 +3 位作者 周刚 黄仲贤 谢毅 吴小舟 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1996年第11期1673-1677,共5页
用寡聚核苷酸定点突变的方法将牛肝细胞色素b5基因(编码亲水结构域82个残基)上第44位和56位谷氨酸的密码子GAA变成丙氨酸的密码子GCT,获得突变体E44A、E56A和E44/56A的基因。将它们分别克隆于pUC1... 用寡聚核苷酸定点突变的方法将牛肝细胞色素b5基因(编码亲水结构域82个残基)上第44位和56位谷氨酸的密码子GAA变成丙氨酸的密码子GCT,获得突变体E44A、E56A和E44/56A的基因。将它们分别克隆于pUC19上,转化大肠杆菌JM83后,突变基因得到成功的表达。将含细胞色素b5及其突变体基因的大肠杆菌发酵,酶法裂解细菌,依次用硫酸铵沉淀法、离子交换柱层析、凝胶柱层析进行分离纯化蛋白。用Chou-Fasman法、紫外可见光谱、圆二色谱研究蛋白质,发现定点突变细胞色素b5表面上这2个氨基酸残基对蛋白质的局部二级结构无明显影响。 展开更多
关键词 细胞色素b5 定点突变 蛋白质结构 膜蛋白
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大鼠肝微粒体细胞色素b_5对细胞色素P450在体温调节中作用影响的探讨 被引量:3
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作者 狄军艳 冯甲棣 +1 位作者 张玉霞 王常慧 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期403-404,407,共3页
目的 :通过观察发热、降温和解热时大鼠肝微粒体细胞色素b5(CYb5)含量的变化 ,探讨CYb5对细胞色素P 4 5 0 (CYP 4 5 0 )在体温调节中的作用。方法 :连续监测大鼠体温 ,并用改进的木村和佐藤方法测量第 1次注射不同制剂后 2 4h肝微粒体C... 目的 :通过观察发热、降温和解热时大鼠肝微粒体细胞色素b5(CYb5)含量的变化 ,探讨CYb5对细胞色素P 4 5 0 (CYP 4 5 0 )在体温调节中的作用。方法 :连续监测大鼠体温 ,并用改进的木村和佐藤方法测量第 1次注射不同制剂后 2 4h肝微粒体CYb5含量。结果 :腹腔注射脂多糖后大鼠体温升高 (P <0 .0 5 ) ,注射后 2 4hCYb5含量下降 (P <0 .0 5 ) ;注射丁香酚后大鼠体温下降 (P <0 .0 5 ) ,注射后 2 4hCYb5含量增加 (P <0 .0 5 ) ;腹腔注射脂多糖后 3h再腹腔注射丁香酚大鼠体温先升高然后恢复 ,注射后 2 4hCYb5含量与对照组相比无统计学意义。结论 :随着注射不同试剂大鼠体温变化的同时 ,CYb5含量变化方向与CYP 4 5 0含量方向相同 ,表明CYb5可能影响CYP 4 5 展开更多
关键词 细胞色素b5 体温调节
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矮牵牛细胞色素b5蛋白编码基因difF的克隆及序列分析 被引量:1
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作者 李吉莲 司爱君 +1 位作者 祝建波 邓福军 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期1126-1130,共5页
以紫红色、蓝紫色矮牵牛(Petunia hybrida)的花瓣为材料,提取总RNA,用Oligo(dT)作为引物反转录合成cDNA第一链:以此为模板,用Genebank上的矮牵牛细胞色素b5蛋白DIF-F(difF)的mRNA序列设计成的引物进行PCR扩增,扩增到一条约450 bp的片段... 以紫红色、蓝紫色矮牵牛(Petunia hybrida)的花瓣为材料,提取总RNA,用Oligo(dT)作为引物反转录合成cDNA第一链:以此为模板,用Genebank上的矮牵牛细胞色素b5蛋白DIF-F(difF)的mRNA序列设计成的引物进行PCR扩增,扩增到一条约450 bp的片段,将此片段克隆到pGM—T载体上。对重组克隆进行序列分析,结果表明所克隆到的矮牵牛细胞色素b5蛋白的cDNA的编码区含有450个核苷酸,编码149个氨基酸残基;其核苷酸及氨基酸的序列与Genebank上的同源性分别达到99.93%和100%。 展开更多
关键词 矮牵牛 细胞色素b5蛋白 difF 基因克隆
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细胞色素b_5突变体(E44A/E48A/E56A/D60A)的溶液结构研究 被引量:2
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作者 吴义兵 陆军 +9 位作者 钱程明 李二成 王金凤 唐雯霞 朱德熙 王韵华 王文虎 陆军霞 谢毅 黄仲贤 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2000年第11期1631-1632,共2页
The solution structure of bovine cytochrome b 5 mutant (E44A/E48A/E56A/D60A) has been obtained from 1H NMR spectra measured at 600 MHz. The final RMSD values with respect to the average structure are (0.056±0.009... The solution structure of bovine cytochrome b 5 mutant (E44A/E48A/E56A/D60A) has been obtained from 1H NMR spectra measured at 600 MHz. The final RMSD values with respect to the average structure are (0.056±0.009) nm and (0.105±0.010) nm for backbone and all heavy atoms, respectively. The solution structure, when compared with the X ray structure of wild type, has no significant changes in the whole folding and secondary structure. Small changes are restricted to local conformation near mutated sites. [WT5HZ] 展开更多
关键词 细胞色素b5 突变体 NMR 溶液结构 电子传递
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表面带负电荷氨基酸残基的突变对细胞色素b_5与细胞色素c结合和识别的影响 被引量:1
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作者 钱程明 王韵华 +6 位作者 王文虎 姚勇 胡峻 陆军霞 谢毅 黄仲贤 唐雯霞 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2002年第7期1294-1298,共5页
利用核磁共振方法研究表面带不同负电荷氨基酸残基突变后的细胞色素 b5与细胞色素 c的结合与识别 .结果表明 ,静电作用在细胞色素 b5与细胞色素 c的结合过程中有着重要的贡献 ,而且这些静电贡献在一定程度上具有累加性 ,E48的贡献略大于... 利用核磁共振方法研究表面带不同负电荷氨基酸残基突变后的细胞色素 b5与细胞色素 c的结合与识别 .结果表明 ,静电作用在细胞色素 b5与细胞色素 c的结合过程中有着重要的贡献 ,而且这些静电贡献在一定程度上具有累加性 ,E48的贡献略大于 E44.同时还证明 Brownian dynamics simulations优化出的Glu48— Lys1 3 ,Glu5 6— Lys87,Asp60— Lys86和 heme 6-propionate-Tml72 (细胞色素 b5的残基排在前面 )的结合方式在溶液中的确存在 .细胞色素 b5突变体 (E48,E5 6/ A,D60 / A)及 [Cr(oxalate) 3]3-对细胞色素 c的表面结合竞争实验表明 ,细胞色素 c表面结合区 Site 仍然同细胞色素 b5突变体 (E48,E5 6/ A,D60 / A)有结合作用 ,只是结合强度上相对于野生细胞色素 b5同细胞色素 c的结合有所降低 .这表明除上述的Brownian dynamics simulations模型外 ,尚有其它如 Salemme模型等的结合方式 ,这也揭示出细胞色素 b5和细胞色素 展开更多
关键词 负电荷 氨基酸残基 识别 细胞色素b5 细胞色素C 突变体 结合 静电作用 核磁共振 电子传递 蛋白质
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细胞色素b_5 S64X突变体对蛋白结构及稳定性的影响
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作者 官墨蓝 王中华 +1 位作者 林英武 黄仲贤 《无机化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第1期47-54,共8页
为了深入了解细胞色素b5(Cyt b5)64位氨基酸残基(Ser64)对血红素辅基微环境及蛋白性质的影响,我们分别对Cyt b5 Ser64进行了保守性突变(S64T)以及非保守性突变(S64K、S64N和S64H),均为亲水性氨基酸残基。对野生型细胞色素b5及其突变体蛋... 为了深入了解细胞色素b5(Cyt b5)64位氨基酸残基(Ser64)对血红素辅基微环境及蛋白性质的影响,我们分别对Cyt b5 Ser64进行了保守性突变(S64T)以及非保守性突变(S64K、S64N和S64H),均为亲水性氨基酸残基。对野生型细胞色素b5及其突变体蛋白S64X(X:T,K,N或H)的热、酸、盐酸胍变性的稳定性研究表明:4个突变体蛋白的稳定性相对于野生型都大大降低了;CD光谱表明,细胞色素b5S64X突变体中的α-螺旋明显减少,芳香性氨基酸残基所处的肽链结构受到了影响;盐酸胍变性荧光光谱表明,Trp22周围的蛋白肽链受到了影响,Trp22暴露于水溶液的程度加大。我们认为Ser64不仅对血红素辅基有稳定作用,同时还对维持蛋白Core 1中的第5个α-螺旋结构有重要的作用,在64位引入其他氨基酸残基影响了第5个α-螺旋的结构,并通过蛋白肽链的相互作用,使得Trp22所在的Core2结构也受到了较为明显的扰动。 展开更多
关键词 细胞色素b5 Ser64突变体 稳定性 Α-螺旋 血红素
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SERRS光谱探究细胞色素b_5在过渡金属镍上的结构与功能
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作者 李俊博 赵冰 韩晓霞 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2016年第S1期257-258,共2页
细胞色素b5(Cyt b5)作为可以与生物体内传输氧气的肌红蛋白(Mb)相互作用的蛋白质,能将肌红蛋白从氧化态还原,这个过程伴随着电子的转移。电子传递是生命体内一项基本而且非常重要的反应,体外研究氧化还原蛋白质的电子传递通常是将蛋白... 细胞色素b5(Cyt b5)作为可以与生物体内传输氧气的肌红蛋白(Mb)相互作用的蛋白质,能将肌红蛋白从氧化态还原,这个过程伴随着电子的转移。电子传递是生命体内一项基本而且非常重要的反应,体外研究氧化还原蛋白质的电子传递通常是将蛋白质吸附在导电材料上。材料的界面性质诸如生物相容性、蛋白质覆盖率及材料与蛋白质间的相互作用等对电子转移反应产生很大影响。过渡金属镍因其界面上存在较低的电场而具有较好的生物相容性,这避免了蛋白质与贵金属电极接触时导致的变性或降解,因此可作为良好的研究蛋白质的基底。本实验利用表面增强共振拉曼光谱(SERRS)探究了Cyt b5在过渡金属镍(Ni)上的电子转移行为及其与Mb间的相互作用。 展开更多
关键词 表面增强共振拉曼光谱 细胞色素b5 肌红蛋白 电子转移
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可视化细胞色素b5蛋白的显色核心片段解析
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作者 展恩玲 盛成旺 +2 位作者 陈煜明 唐涛 赵春青 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期97-102,共6页
[目的]本文旨在明确含Cyt-b 5类血红素/类固醇结合结构域(Cyt-b 5D)显色片段的最佳长度及其与原核表达载体的普适性,并筛出有效的可视化标签,以期提高载体构建的效率和便捷性。[方法]分析二化螟Cyt-b 5蛋白结构域,将其划分成含Cyt-b 5D... [目的]本文旨在明确含Cyt-b 5类血红素/类固醇结合结构域(Cyt-b 5D)显色片段的最佳长度及其与原核表达载体的普适性,并筛出有效的可视化标签,以期提高载体构建的效率和便捷性。[方法]分析二化螟Cyt-b 5蛋白结构域,将其划分成含Cyt-b 5D的不同长度片段(OA、OB、OC等),并分别与3种原核表达载体pET-28a(+)、pET-41a(+)和pET-30a(+)进行连接和异源表达;将筛选的显色片段与二化螟RDL 1基因融合表达,比较不同表达时间菌液的显色反应和吸光值;用亲和层析法纯化显色片段表达以及与RDL 1表达的融合蛋白,然后进行Western blot检测。[结果]OA片段是最佳的显色片段,在3种原核表达载体中均可表达出红色的蛋白,且与RDL 1融合表达时显色稳定,表明其具有普适性。在420 nm波长下的特征吸收峰可用于实时监测显色菌液的生长状态,而层析柱中的红色变化可用于判断蛋白纯化过程。此外,利用Western blot可检测到目的蛋白,表明显色片段的存在并未干扰目的蛋白的准确鉴定。[结论]Cyt-b 5显色片段(OA)可作为原核表达系统的可视化标签,为蛋白表达和纯化等试验操作提供指示标记,从而提高其操作的便捷性和时效性。 展开更多
关键词 细胞色素b 5 载体构建 原核表达 Western blot 可视化标签
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血根碱对小鼠肝细胞色素P450与b5的影响
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作者 孙卓 伍勇 +5 位作者 王楠 吴巧月 邓海冰 孟奎宇 杨玉娟 刘兆颖 《中兽医医药杂志》 2017年第4期25-27,共3页
研究血根碱对小鼠肝细胞色素P450与b5的影响,为血根碱的兽医临床应用提供实验依据。将血根碱按高剂量[21 mg/(kg·d)]、中剂量[10.5 mg/(kg·d)]、低剂量[2.1 mg/(kg·d)]给小鼠给连续灌胃给药7 d后,采用考马斯亮蓝法测定... 研究血根碱对小鼠肝细胞色素P450与b5的影响,为血根碱的兽医临床应用提供实验依据。将血根碱按高剂量[21 mg/(kg·d)]、中剂量[10.5 mg/(kg·d)]、低剂量[2.1 mg/(kg·d)]给小鼠给连续灌胃给药7 d后,采用考马斯亮蓝法测定小鼠肝微粒体蛋白含量;紫外-可见光分光光度法测定细胞色素P450和细胞色素b5的含量。结果显示,与空白组相比,高、中剂量组小鼠肝微粒体蛋白含量、细胞色素P450和b5活性降低(P<0.05),而低剂量组无显著变化(P>0.05)。结果表明,高、中剂量组血根碱对小鼠肝细胞色素P450和b5有抑制作用。 展开更多
关键词 血根碱 小鼠 肝微粒体 细胞色素P450 细胞色素b5
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兔肝细胞色素b5在大肠杆菌中的表达
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作者 王黎明 AlanW.Steggles 《生物化学杂志》 CSCD 1992年第1期105-109,共5页
利用体外特定点突变技术,将原核生物核糖体结合位点及十碱基间隔子(spacer)引科兔肝经胞色素b_5 cDNA的5′端,并构建了一个兔红血球b_5cDNA克隆,重组入表达载体pKK223-3质粒中,在大肠杆菌中成功地表达了兔肝和红血球两种形式的b_5蛋白... 利用体外特定点突变技术,将原核生物核糖体结合位点及十碱基间隔子(spacer)引科兔肝经胞色素b_5 cDNA的5′端,并构建了一个兔红血球b_5cDNA克隆,重组入表达载体pKK223-3质粒中,在大肠杆菌中成功地表达了兔肝和红血球两种形式的b_5蛋白。产量分别为每毫升培养液1.5μg和4.5μg。 展开更多
关键词 细胞色素b5 特定位点突变 基因表达
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抗阿维菌素小菜蛾的细胞色素P450酶系研究 被引量:6
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作者 黄剑 吕敏 +1 位作者 王群利 吴文君 《农药学学报》 CAS CSCD 2005年第4期316-322,共7页
通过对不同发育时期敏感和抗阿维菌素小菜蛾品系细胞色素P450含量的测定,以及使用不同模式底物对P450单加氧酶活性的比较研究发现:除成虫期外,不同发育时期抗性品系小菜蛾中P450和细胞色素b5的含量都高于敏感品系;抗性品系还原型辅酶Ⅱ(... 通过对不同发育时期敏感和抗阿维菌素小菜蛾品系细胞色素P450含量的测定,以及使用不同模式底物对P450单加氧酶活性的比较研究发现:除成虫期外,不同发育时期抗性品系小菜蛾中P450和细胞色素b5的含量都高于敏感品系;抗性品系还原型辅酶Ⅱ(NADPH)-细胞色素P450还原酶活性是敏感品系的1.97倍;同时发现抗性品系中甲氧试卤灵-O-脱甲基酶(MROD)、乙氧试卤灵-O-脱乙基酶(EROD)、乙氧基香豆素-O-脱乙基酶(ECOD)以及对硝基苯甲醚-O-脱甲基酶(PNOD)的活性均明显高于敏感品系,分别为敏感品系的9.41、4.15、1.67和2.94倍。研究结果表明,细胞色素P450含量和单加氧酶活性的增高是小菜蛾对阿维菌素产生抗性的一个重要机制。 展开更多
关键词 小菜蛾 细胞色素P450 单加氧酶 细胞色素b5 阿维菌素 抗药性
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lncRNA CDKN2B-AS1对黑色素瘤B16-F10细胞恶性生物学行为的影响 被引量:5
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作者 邓利丽 孙素姣 +2 位作者 刘艳 陈燕 陈星 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期25-30,共6页
目的:探讨长链非编码RNA CDKN2B反义RNA1(long non-coding RNA CDKN2B-antisense RNA 1,lncRNA CDKN2B-AS1)通过靶向miR-7-5p影响黑色素瘤B16-F10细胞的恶性生物学行为的影响。方法:选用黑色素瘤B16-F10细胞,构建shRNA CDKN2B-AS1载体... 目的:探讨长链非编码RNA CDKN2B反义RNA1(long non-coding RNA CDKN2B-antisense RNA 1,lncRNA CDKN2B-AS1)通过靶向miR-7-5p影响黑色素瘤B16-F10细胞的恶性生物学行为的影响。方法:选用黑色素瘤B16-F10细胞,构建shRNA CDKN2B-AS1载体并转染到B16-F10细胞,实验分为对照组、sh-CDKN2B-AS1组、miR-7-5p mimics组、miR-7-5p inhibitor组。用RT-PCR检测转染后B16-F10细胞中CDKN2B-AS1表达水平,用克隆形成实验和MTT法检测克隆形成数及细胞的增殖能力,用划痕愈合实验和Transwell实验检测细胞的迁移和侵袭能力。用荧光素酶报告基因实验检证CDKN2B-AS1和miR-7-5p相互间靶向关系。用RT-PCR和Western blotting检测转染miR-7-5p mimics、inhibitor后B16-F10细胞中miR-7-5p和Ki67、cleaved caspase-3、上皮钙黏蛋白(E-cadherin)、神经钙黏蛋白(N-cadherin)、Twist1蛋白的表达水平。结果:与对照组比较,sh-CDKN2B-AS1组B16-F10细胞中CDKN2B-AS1表达水平显著下调(P<0.01),细胞的增殖、迁移及侵袭能力显著下降(均P<0.01)。荧光素酶报告基因实验证明CDKN2B-AS1与miR-7-5p存在靶向作用关系。sh-CDKN2B-AS1组与miR-7-5p mimics组细胞中miR-7-5p和cleaved caspase-3、E-cadherin水平均明显上调(均P<0.05),Ki67、N-cadherin、Twist1水平明显下调(均P<0.05)。结论:CDKN2BAS1通过靶向miR-7-5p促进黑色素瘤发展,干扰CDKN2B-AS1可抑制黑色素瘤B16-F10细胞的恶性生物学行为。 展开更多
关键词 长链非编码RNA CDKN2b-AS1 miR-7-5p 色素 b16-F10细胞 增殖 迁移 侵袭
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Na5SeV5O18·3H2O对K562细胞线粒体凋亡和NF-κB/IκBα信号转导途径的影响
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作者 杨军英 徐存拴 王子仁 《河南师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期96-98,共3页
通过MTT比色法和Westernblot法检测NasSeV5O18·3H2O的抗肿瘤活性及作用机理.结果表明,Na5seV5O18·3H2O(0.625-20mg·L^-1)能抑制K562细胞增殖(P〈0.05);药物处理K562细胞24h,可使胞浆细胞色素C,IκBα含量明... 通过MTT比色法和Westernblot法检测NasSeV5O18·3H2O的抗肿瘤活性及作用机理.结果表明,Na5seV5O18·3H2O(0.625-20mg·L^-1)能抑制K562细胞增殖(P〈0.05);药物处理K562细胞24h,可使胞浆细胞色素C,IκBα含量明显增多,核内NF-κB含量减少.结果提示Na5SeV5O36·3H2O能体外抑制K562细胞增殖,其机理可能与线粒体凋亡和NF-κB/IκBα信号转导有关. 展开更多
关键词 Na5SeV5O18·3H2O MTT比色法 细胞色素C bΑ NF—κb
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红花黄色素B对冈田酸致SH-SY5Y神经元损伤的保护作用 被引量:3
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作者 郝雪言 李刚 +4 位作者 韦瑶 刘敬 张文彦 李忌 马成俊 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期461-468,共8页
本研究目的是考察红花黄色素B(SYB)对冈田酸(OA)致SH-SY5Y神经元损伤的保护作用。采用全反式维甲酸(ATRA)诱导SH-SY5Y细胞分化为成熟神经元,OA诱导神经元损伤,建立Tau蛋白过度磷酸化的神经元突触萎缩模型;Giemsa染色法观察SH-SY5Y细胞... 本研究目的是考察红花黄色素B(SYB)对冈田酸(OA)致SH-SY5Y神经元损伤的保护作用。采用全反式维甲酸(ATRA)诱导SH-SY5Y细胞分化为成熟神经元,OA诱导神经元损伤,建立Tau蛋白过度磷酸化的神经元突触萎缩模型;Giemsa染色法观察SH-SY5Y细胞形态学变化;Western Blot检测Tau蛋白262位点磷酸化水平;流式细胞术检测细胞总活性氧(ROS)和线粒体源ROS水平,以及线粒体膜电位的变化。结果表明,ATRA可诱导SH-SY5Y细胞分化为成熟神经元;OA可致神经元突触萎缩和Tau蛋白在262位点过度磷酸化;SYB能够改善OA所致成熟神经元损伤,降低Tau蛋白在262位点的磷酸化水平,其保护作用机制可能与减少胞内及线粒体源ROS产生,提高线粒体膜电位有关。 展开更多
关键词 红花黄色素b SH-SY5Y人神经母细胞细胞 冈田酸 TAU蛋白
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高铁肌红蛋白还原酶及其对肉色稳定性的作用综述 被引量:8
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作者 孙学朋 《江西农业学报》 CAS 2008年第5期91-93,97,共4页
概述了高铁肌红蛋白还原酶的研究经历、命名,以及几种被人们所识别的高铁肌红蛋白还原酶,阐述了NADH-细胞色素b5还原酶的分子量、细胞定位及还原高铁肌红蛋白的机理,综述了高铁肌红蛋白还原酶的酶学特性,对高铁肌红蛋白还原酶在稳定肉... 概述了高铁肌红蛋白还原酶的研究经历、命名,以及几种被人们所识别的高铁肌红蛋白还原酶,阐述了NADH-细胞色素b5还原酶的分子量、细胞定位及还原高铁肌红蛋白的机理,综述了高铁肌红蛋白还原酶的酶学特性,对高铁肌红蛋白还原酶在稳定肉色方面可能起到的作用进行了讨论。 展开更多
关键词 肉色稳定性 高铁肌红蛋白还原酶 nadh-细胞色素b5还原酶
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