基于非标记定量技术的驼乳与牛乳N-糖蛋白质组学比较分析

1

作者 李丹蕾 孔夏冰 +3 位作者 于悦 胡谦 张九凯 陈颖 《食品科学》 北大核心 2025年第17期1-9,共9页

为深入对比驼乳和牛乳中N-糖蛋白的差异特征,采用非标记定量N-糖蛋白质组学技术,详细比较分析两种乳品中N-糖蛋白的组成及其N-糖基化位点的数量,并利用生物信息学分析了两种乳品N-糖蛋白潜在的生物学功能。驼乳中鉴定出137个N-糖蛋白和... 为深入对比驼乳和牛乳中N-糖蛋白的差异特征,采用非标记定量N-糖蛋白质组学技术,详细比较分析两种乳品中N-糖蛋白的组成及其N-糖基化位点的数量,并利用生物信息学分析了两种乳品N-糖蛋白潜在的生物学功能。驼乳中鉴定出137个N-糖蛋白和224个N-糖基化位点;牛乳鉴定出116个N-糖蛋白和183个N-糖基化位点。相较于牛乳,驼乳含有更丰富的N-糖蛋白和N-糖基化位点。在鉴定到的N-糖蛋白中,大多数仅具有1个N-糖基化位点,少数糖蛋白的糖基化程度较高。基因本体论富集分析表明,差异表达的N-糖蛋白主要分布在细胞外区域和细胞外间隙,包含在免疫应答中发挥着重要作用的N-糖蛋白,涉及酶活性、细胞外基质构建、结合作用和信号传导。京都基因与基因组百科全书富集分析显示,差异表达的N-糖蛋白中主要富集于补体和凝血级联反应、溶酶体等代谢通路。上述研究结果为全面解析牛乳和驼乳的糖蛋白组成及糖基化修饰差异提供了科学依据。 展开更多

关键词 驼乳 牛乳 n-糖蛋白质组学 糖蛋白 n-糖基化位点 差异比较

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N-糖基化蛋白质组样品富集策略的研究进展 被引量：6

2

作者 邵文亚 梁玉 +2 位作者 梁振 张丽华 张玉奎 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期1212-1216,共5页

蛋白质的糖基化是生物体内重要的蛋白质翻译后修饰之一,但其丰度通常较低,糖基化蛋白质酶解肽段中仅有2%~5%为糖基化肽段,因此,为实现糖基化蛋白质组的深度覆盖分析,对糖基化蛋白质/肽段进行富集是非常必要的。该文对糖基化蛋白质组样... 蛋白质的糖基化是生物体内重要的蛋白质翻译后修饰之一,但其丰度通常较低,糖基化蛋白质酶解肽段中仅有2%~5%为糖基化肽段,因此,为实现糖基化蛋白质组的深度覆盖分析,对糖基化蛋白质/肽段进行富集是非常必要的。该文对糖基化蛋白质组样品不同富集方法的原理、特点以及最新研究进展进行了综述,同时也对N-糖基化蛋白质组学富集策略的发展前景进行了展望。 展开更多

关键词 糖蛋白质组学 n-糖基化 糖肽 糖蛋白 富集

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运动改善ASMT基因敲除小鼠抑郁行为的海马蛋白质组学机制 被引量：1

3

作者 章森 刘文彬 +5 位作者 夏杰 李玲侠 黄卓淳 邹勇 漆正堂 刘微娜 《上海体育大学学报》 CSSCI 北大核心 2024年第3期36-48,共13页

目的利用定量蛋白质组学技术探究N-乙酰基-5-羟色胺-甲基转移酶(N-acetyl-5-hydroxytryptamine-methyltransferase,ASMT)基因敲除及运动干预对小鼠抑郁行为及海马蛋白质组的影响。方法将雄性ASMT基因敲除小鼠及野生型小鼠随机分为安静... 目的利用定量蛋白质组学技术探究N-乙酰基-5-羟色胺-甲基转移酶(N-acetyl-5-hydroxytryptamine-methyltransferase,ASMT)基因敲除及运动干预对小鼠抑郁行为及海马蛋白质组的影响。方法将雄性ASMT基因敲除小鼠及野生型小鼠随机分为安静组和运动组。5周的游泳运动干预结束后全部进行抑郁行为学检测。行为学结束后进行麻醉处死取海马组织。采用TMT标记定量蛋白质组学技术检测海马组织中的蛋白表达情况,并运用生物信息学方法分析。结果ASMT基因敲除后小鼠具有显著的抑郁行为表型,游泳运动干预后可以显著改善。筛选出的差异蛋白功能集中在突触信号通路、突触化学传递的调控、突触囊泡循环、神经发生、神经系统发育的调控、长时程突触增强、SNARE复合体聚集等。结论ASMT基因敲除可能会通过海马突触前膜的SNARE家族蛋白过度表达诱导谷氨酸的过度释放并产生神经毒性,进而产生抑郁行为;游泳运动可能通过调节突触转运相关蛋白SNAP25维持神经递质稳态,促进神经发生水平和突触可塑性,进而使ASMT基因敲除小鼠抑郁行为得到改善。 展开更多

关键词 n-乙酰基-5-羟色胺-甲基转移酶 游泳运动 抑郁行为 海马 蛋白质组学

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邻近标记技术在弓形虫蛋白质组学研究中的应用进展

4

作者 潘明 李龙娇 +1 位作者 葛层层 黄思扬 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2024年第5期101-106,共6页

弓形虫编码数量众多的分泌蛋白,储存在微线体、棒状体和致密颗粒等虫体特有的细胞器中,于虫体入侵宿主细胞前后分泌到不同部位,并在虫体的感染、寄生和致病过程中发挥重要作用,对这些分泌蛋白的鉴定和功能研究是弓形虫致病机制研究中的... 弓形虫编码数量众多的分泌蛋白,储存在微线体、棒状体和致密颗粒等虫体特有的细胞器中,于虫体入侵宿主细胞前后分泌到不同部位,并在虫体的感染、寄生和致病过程中发挥重要作用,对这些分泌蛋白的鉴定和功能研究是弓形虫致病机制研究中的热点和难点。传统的蛋白质组学技术在弓形虫亚细胞器的分离和组分鉴定上存在样品纯化困难和蛋白质组学信息覆盖率低等不足,且该技术在检测瞬时的或较弱的蛋白质相互作用时灵敏性较低。近年来,快速发展的邻近标记技术(PL)克服了传统技术的局限性。PL是将具有特定催化活性的工具酶与诱饵蛋白进行融合,进而添加生物素或生物素苯酚对诱饵蛋白邻近的靶蛋白进行生物素酰化标记的一门技术。该技术整合了酶促反应效率高的优点,可将特定空间内的蛋白进行高效标记,并可检测较弱的蛋白质相互作用,近年来在生物学研究中被广泛使用。本文对基于生物素连接酶(BirA)和抗坏血酸过氧化物酶(APEX)催化的PL在弓形虫蛋白质组学研究中的应用进行阐述,介绍2种标记方法在弓形虫分泌蛋白的挖掘和蛋白质相互作用研究中的贡献,为弓形虫致病机制的研究和弓形虫病的防控提供参考。 展开更多

关键词 邻近标记技术(PL) 弓形虫 蛋白质组学 生物素连接酶(BirA) 抗坏血酸过氧化物酶(APEX)

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植物糖基化蛋白质组研究技术策略及研究进展

5

作者 孙勇 王丹 +3 位作者 仝征 常丽丽 王力敏 王旭初 《热带生物学报》 2016年第3期402-408,共7页

综述了植物糖基化研究的主要策略以及植物糖蛋白质组学研究的最新进展,旨在为更好地开展植物糖蛋白质组研究提供技术线索及研究思路。

关键词 糖蛋白 蛋白糖基化 n-糖链 糖蛋白质组学 生物质谱

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结构特异N-糖蛋白质组学研究进展

6

作者 毕明 田志新 《质谱学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第5期897-913,I0009,共18页

N-连接糖基化修饰是蛋白质上常见的翻译后修饰,发生在特征氨基酸序列N-X-T/S/C(X≠P)中的天冬酰胺上。N-连接糖具有五糖核心结构,包括高甘露糖型、杂合型和复杂型等3种主要类型。N-糖基化在修饰位点上具有微观和宏观不均一性,其功能与... N-连接糖基化修饰是蛋白质上常见的翻译后修饰,发生在特征氨基酸序列N-X-T/S/C(X≠P)中的天冬酰胺上。N-连接糖具有五糖核心结构,包括高甘露糖型、杂合型和复杂型等3种主要类型。N-糖基化在修饰位点上具有微观和宏观不均一性,其功能与修饰位点和N-连接糖结构对应。对蛋白质N-糖基化位点和结构特异性的精准鉴定和定量,是基于质谱的N-糖蛋白质组学发现N-糖蛋白相关疾病诊断和预后标志物、药物靶点,以及研发高效靶向大分子药物的主要任务。随着高效富集材料、液相色谱分离技术、串联质谱和检测技术以及生物信息学数据库搜索方法的逐步发展和成熟,目前N-糖蛋白质组学已能够对体系中的N-糖基化进行高通量位点和结构特异性鉴定和定量。本文主要介绍N-糖蛋白质组学的样本制备、高效液相色谱-质谱联用分析、生物信息学数据处理等基本步骤,以及由这些步骤组成的完整分析流程的代表性应用研究。 展开更多

关键词 n-糖蛋白质组学 LC-MS/MS GPSeeker 结构特异性 鉴定 定量

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糖蛋白质组学中基于化学反应的富集方法研究进展 被引量：14

7

作者 包慧敏 谢力琦 陆豪杰 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1145-1153,共9页

蛋白质糖基化是一种广泛存在的重要的蛋白质翻译后修饰,糖基化肽在总酶解肽中占的比例不超过5%,这使得糖肽的分离富集成为糖蛋白质组学研究发展的关键技术之一。在诸多糖蛋白质组富集技术中,化学方法是富集技术的主导,本文从化学反应的... 蛋白质糖基化是一种广泛存在的重要的蛋白质翻译后修饰,糖基化肽在总酶解肽中占的比例不超过5%,这使得糖肽的分离富集成为糖蛋白质组学研究发展的关键技术之一。在诸多糖蛋白质组富集技术中,化学方法是富集技术的主导,本文从化学反应的角度介绍糖基化蛋白质富集的技术进展。富集过程按照连接和释放分别讨论,在连接过程中,重点介绍硼酸化学法、肼化学法、胺化学法和肟点击法;在释放过程中,以N-糖蛋白的酶释放法和O-糖蛋白的β-消除法为主导,一并介绍了最新的氧化断裂释放的化学法。最后,讨论总体富集策略的发展现状。该文以糖蛋白富集的共价反应为核心,分析不同方法的优缺点以及各技术在糖蛋白质组学研究中的应用和贡献。 展开更多

关键词 糖蛋白质组 蛋白质糖基化 糖蛋白 富集 连接/释放 共价反应 综述

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元蛋白质组学在土壤微生物生态功能研究中的应用! 被引量：2

8

作者 刘文干 吴云 +3 位作者 崔中利 何园球 林先贵 曹慧 《土壤学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期1218-1226,共9页

元蛋白质组学是近年出现的一种基于蛋白质组学对微生物群落进行研究的新技术,其定义为对特定环境的所有微生物蛋白质进行的即时的、大规模的分析。虽然目前对元蛋白质组学的研究还处在起步阶段,但是它已在特定环境的微生物研究中显现出... 元蛋白质组学是近年出现的一种基于蛋白质组学对微生物群落进行研究的新技术,其定义为对特定环境的所有微生物蛋白质进行的即时的、大规模的分析。虽然目前对元蛋白质组学的研究还处在起步阶段,但是它已在特定环境的微生物研究中显现出其强大的功能。本文通过对目前元蛋白质组学常用研究策略和技术进行比较,概述土壤元蛋白质组的提取、纯化、分离与功能鉴定等方面的研究现状,并对土壤元蛋白质组学研究的意义进行了展望。土壤元蛋白质组学的发展深受提取方法的影响,现有的方法很难提供既可成功分离又易于鉴定的蛋白质,而土壤蛋白鉴定的主要问题在于土壤蛋白质含量低,通过质谱分析对蛋白质鉴定时缺乏足够的序列-数据库信息。一旦这些问题得以解决,土壤元蛋白质组学便能在土壤微生物生态功能研究方面得到更加广泛和深入的应用。 展开更多

关键词 元蛋白质组学 环境微生物 微生物群落 功能性生物指示物 稳定同位素探针连接蛋白

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低浓度MNNG诱发FL细胞应答反应的蛋白质组学研究

9

作者 金静华 高志华 +1 位作者 杨军 余应年 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2003年第5期375-379,共5页

目的 :研究低浓度甲基硝基亚硝基胍 (MNNG)对人羊膜 FL细胞蛋白质表达谱的影响 ,以助于阐明环境致癌物引起细胞早期应答反应的分子机制。方法 :FL细胞分别用 MNNG和 DMSO(溶剂对照 )处理后 ,提取细胞总蛋白 ,用双向凝胶电泳分离蛋白质... 目的 :研究低浓度甲基硝基亚硝基胍 (MNNG)对人羊膜 FL细胞蛋白质表达谱的影响 ,以助于阐明环境致癌物引起细胞早期应答反应的分子机制。方法 :FL细胞分别用 MNNG和 DMSO(溶剂对照 )处理后 ,提取细胞总蛋白 ,用双向凝胶电泳分离蛋白质组成分 ,银染染色后用相应的分析软件分析数字化的凝胶图像 ,找出在 MN-NG处理后表达有差异的蛋白斑点 ,用基质辅助的激光解吸 -飞行时间质谱 (MAL DI- TOF)鉴定。结果 :在 MNNG处理后有 6 0多个蛋白斑点出现质和量的变化 ,其中 18个蛋白斑点只能在 MNNG处理的细胞中检测到 ,13个蛋白斑点则在 MNNG处理后消失 ;同时检测到 30个蛋白斑点在表达量上有显著变化 ,其中 16个点表达升高 ,14个点则表达降低。通过数据库的检索 ,初步的鉴定了一批结构和功能各异的蛋白。结论 :在低浓度烷化剂攻击后 ,FL细胞中的蛋白表达谱发生了显著的变化。 展开更多

关键词 FL细胞/遗传学 n-甲基-N'-硝基-n-亚硝基胍 蛋白质组学 凝胶 电泳 双向

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蜜蜂所在蜂王浆糖蛋白质组与生物学功能研究方面获得新突破

10

作者 冯毛 《中国蜂业》 2015年第12期11-11,共1页

近日“蜜蜂蛋白质组学创新团队”在蜂王浆糖蛋白质组与功能研究方面取得新的突破。蛋白质的糖基化修饰对蛋白质生物学功能具有重要影响。尽管蜂王浆蛋白是糖蛋白，但糖基化修饰的特点以及糖基化修饰与蜂王浆蛋白功能的关系仍不十分清楚... 近日“蜜蜂蛋白质组学创新团队”在蜂王浆糖蛋白质组与功能研究方面取得新的突破。蛋白质的糖基化修饰对蛋白质生物学功能具有重要影响。尽管蜂王浆蛋白是糖蛋白，但糖基化修饰的特点以及糖基化修饰与蜂王浆蛋白功能的关系仍不十分清楚。该团队利用糖蛋白质组和功能研究等手段，对中蜂和意蜂蜂王浆的糖基化进行了系统分析。 展开更多

关键词 蛋白质组学 生物学功能 糖基化 蜂王浆 蜜蜂 修饰 糖蛋白 意蜂

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离子迁移谱-质谱技术及其在蛋白质糖基化研究中的应用 被引量：3

11

作者 付彬 梁宇颖 陆豪杰 《质谱学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2022年第5期564-579,I0004,共17页

糖基化是生物体内重要的蛋白质翻译后修饰(PTM)。基于质谱的检测技术,特别是液相色谱-质谱(LC-MS)联用技术是糖基化研究的常规手段。然而,由于糖基化存在复杂的异构现象,大多数基于质谱的分析技术在区分其异构体时存在困难。离子迁移谱(... 糖基化是生物体内重要的蛋白质翻译后修饰(PTM)。基于质谱的检测技术,特别是液相色谱-质谱(LC-MS)联用技术是糖基化研究的常规手段。然而,由于糖基化存在复杂的异构现象,大多数基于质谱的分析技术在区分其异构体时存在困难。离子迁移谱(IM)是一种基于离子在气相中的形状和电荷进行分离的技术,能够为质谱分析提供新的分离维度。离子迁移谱-质谱(IM-MS)技术具有较强的区分异构体的能力,在蛋白质糖基化研究中的潜力越来越受到重视。本文总结了IM-MS技术的类型和基本原理,及其在蛋白质糖基化研究中的进展,如对完整糖蛋白、完整糖肽和聚糖的研究,并展望了其应用前景。 展开更多

关键词 糖基化 离子迁移谱-质谱(IM-MS) 翻译后修饰(PTM) 糖组学 糖蛋白质组学

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邻位连接技术：一种新的高灵敏度蛋白质检测技术 被引量：1

12

作者 李丹滢 周国华 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期383-389,共7页

蛋白质组学(proteomics)诞生以来,高效准确的蛋白质检测技术受到越来越多的关注.最近,一种高灵敏度的蛋白质检测技术,邻位连接技术(proximity ligation assay,PLA)被建立.该技术采用核酸适体(aptamer)或单/多克隆抗体-核酸复合物作为邻... 蛋白质组学(proteomics)诞生以来,高效准确的蛋白质检测技术受到越来越多的关注.最近,一种高灵敏度的蛋白质检测技术,邻位连接技术(proximity ligation assay,PLA)被建立.该技术采用核酸适体(aptamer)或单/多克隆抗体-核酸复合物作为邻位连接探针(proximity probes).当一对邻位探针同时识别同一个目标蛋白分子时,它们将在空间位置上相互临近,通过连接反应形成一段可扩增的DNA标签序列,该标签序列能够反映待测蛋白的种类及浓度.该技术将对蛋白质的检测转变为对DNA核酸序列的检测,实现了特殊蛋白质的检测,定量及定位.文章从该方法的产生背景,发展过程,原理以及探针制备等方面对该方法进行了系统的介绍,列举了该方法的几种重要应用,并对该方法在蛋白质组学研究领域的应用前景进行了展望. 展开更多

关键词 邻位连接技术 蛋白质组学 蛋白质检测

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鸡蛋清蛋白质糖肽的结构鉴定

13

作者 蔡芝鸿 何洪 +4 位作者 王梅 王郁婷 李述刚 王金秋 耿放 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第21期58-67,共10页

鸡蛋清中主要蛋白质均为糖蛋白,经胃肠消化后将在消化道内产生大量糖肽,这些糖肽的结构需要被鉴定和明确。本研究采用胰蛋白酶将鸡蛋清消化,然后从水解物中通过亲水相互作用层析富集N-糖肽、以Retain AX层析结合AminoLink树脂吸附富集O... 鸡蛋清中主要蛋白质均为糖蛋白,经胃肠消化后将在消化道内产生大量糖肽,这些糖肽的结构需要被鉴定和明确。本研究采用胰蛋白酶将鸡蛋清消化,然后从水解物中通过亲水相互作用层析富集N-糖肽、以Retain AX层析结合AminoLink树脂吸附富集O-糖肽,运用液相色谱-质谱联用技术对糖肽结构进行解析,并借助生物信息学分析探究蛋清糖蛋白对肠道的潜在作用。经质谱解析,共鉴定到来自于49种N-糖蛋白的1720个N-糖肽结构,以及来自29种O-糖蛋白的565个O-糖肽结构。其中,卵黏蛋白糖肽结构最为多样,共有490个N-糖肽结构和216个O-糖肽结构。京都基因与基因组百科全书通路富集分析发现,含唾液酸修饰的N-糖蛋白主要涉及白细胞介素-17信号通路和铁死亡,而含唾液酸修饰的O-糖蛋白主要涉及胆固醇代谢、维生素消化吸收、低氧诱导因子-1信号通路和肾素-血管紧张素系统。本研究系统解析了鸡蛋清蛋白质的糖肽结构,为后续探究蛋清糖肽对肠道的潜在作用提供了重要的结构信息。 展开更多

关键词 鸡蛋清蛋白质 n-糖基化 O-糖基化 糖蛋白质组学

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N-糖蛋白去糖基化酶(PNGase)的研究进展

14

作者 陈妍雯 袁舒颖 +6 位作者 刘瑞杰 张绍兴 邹琳 芦鑫荣 孔维溧 陈力 孙桂芹 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2022年第9期1630-1637,共8页

N-糖蛋白去糖基化酶(PNGase)是一种广泛存在于真菌、植物、哺乳动物中的去糖基化酶,可以水解N-糖蛋白或N-糖肽上天冬酰胺与寡糖链连接的化学键,并释放出完整的N-寡糖。PNGase在生物体内参与蛋白质降解、器官发育、个体生长等过程。人PNG... N-糖蛋白去糖基化酶(PNGase)是一种广泛存在于真菌、植物、哺乳动物中的去糖基化酶,可以水解N-糖蛋白或N-糖肽上天冬酰胺与寡糖链连接的化学键,并释放出完整的N-寡糖。PNGase在生物体内参与蛋白质降解、器官发育、个体生长等过程。人PNGase基因功能缺陷会导致先天性去糖基化障碍,小鼠PNGase缺陷会导致胚胎致死性,线虫PNGase缺陷使其寿命下降。本文对PNGase在不同物种的分布、蛋白质结构、酶学功能及生物学功能进行阐述,为PNGase的生理病理功能及致病机制的基础研究提供思路,为PNGase作为糖生物学工具酶或药物开发的创新应用研究奠定基础。 展开更多

关键词 n-糖蛋白去糖基化酶 分布 蛋白质结构 酶学功能 生物学功能

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糖蛋白质组技术研究进展概述

15

《生物学教学》 2012年第6期78-78,共1页

据生物通网2012年1月5日报道，蛋白质组学（pro—teomics）无疑已经成为了功能基因组学研究的重点，目前已经能够快速准确地提取并鉴定蛋白，甚至达到了高通量飞克分子量（fmo1）数量级。但是，一个成熟蛋白质的生物学活性需翻译后修饰... 据生物通网2012年1月5日报道，蛋白质组学（pro—teomics）无疑已经成为了功能基因组学研究的重点，目前已经能够快速准确地提取并鉴定蛋白，甚至达到了高通量飞克分子量（fmo1）数量级。但是，一个成熟蛋白质的生物学活性需翻译后修饰，这些修饰对于了解蛋白功能具有十分重要的意义，其中糖基化修饰是最重要的修饰方式之一。因此糖蛋白组学（glycoproteomics）应运而生。 展开更多

关键词 蛋白质组技术 糖基化 翻译后修饰 功能基因组学 生物学活性 蛋白质组学 蛋白组学 数量级

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siRNA作用后培养的人视网膜色素上皮细胞蛋白质谱分析

16

作者 司艳芳 何守志 王凤翔 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2009年第6期413-415,419,共4页

目的通过抑制人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞缝隙连接蛋白43(connexin 43,cx43)基因的表达,寻找差异蛋白,初步探讨cx43基因对RPE细胞生命活动的意义。方法提取细胞总蛋白并定量分析,第一向电泳是用pH3～10线性IP... 目的通过抑制人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞缝隙连接蛋白43(connexin 43,cx43)基因的表达,寻找差异蛋白,初步探讨cx43基因对RPE细胞生命活动的意义。方法提取细胞总蛋白并定量分析,第一向电泳是用pH3～10线性IPG预制胶条进行等电聚焦,第二向电泳是用SDS-PAGE凝胶再分离蛋白。银染PAGE凝胶、干燥,Powerlook 2100XL扫描凝胶。利用Image Master 2D Elite 4.01图像分析软件进行分析,蛋白斑点相对分子质量和等电点采用二维校正法确定。随机选取图像分析中siRNA转染组与RPE细胞对照组凝胶图中volume值相差≥2倍的7个蛋白质斑点进行胶内酶切,经胶上原位酶切和质谱分析得到肽质量指纹图谱,查寻蛋白质数据库并鉴定差异蛋白质,分析其生物学意义。结果RPE细胞对照组3块凝胶共分离出蛋白质斑点861个,组间匹配率达到92%;siRNA转染组3块凝胶共分离出蛋白质斑点887个,组间匹配率达到93%。经过软件图像分析,发现volume值相差≥2倍的点共78个,其中上调的16个,下调的18个。有19个点在RPE细胞对照组存在而siRNA转染组不存在,25个在siRNA转染组存在而RPE细胞对照组不存在。随机选取7个点进行蛋白质谱分析:SP-H抗原、P27BBP、有丝分裂活性蛋白激酶、次黄嘌呤核苷酸脱氢酶和热休克蛋白70表达上调,β-actin表达下降,电压依赖阴离子通道蛋白在转染siRNA后出现表达。结论通过蛋白质谱发现cx43基因沉默后引起多种蛋白的表达失调,cx43可能参与RPE细胞的多种生命活动。 展开更多

关键词 连接蛋白43 RNA干扰 蛋白质组学

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母乳中糖蛋白种类、功能、检测技术研究进展

17

作者 刘晓佳 张晓梅 +5 位作者 张明辉 李星 高子玥 赵军英 乔为仓 陈历俊 《食品科学》 北大核心 2025年第6期371-380,共10页

母乳中超过70%的蛋白质都会被糖基化,糖基化酶可以切割蛋白质连接聚糖的特定结构,但是人的消化系统并不分泌糖基化酶,所以糖基化蛋白比非糖基化蛋白更有可能在消化系统中完整存活并发挥功能。本文介绍母乳中糖蛋白的种类、组成及含量,... 母乳中超过70%的蛋白质都会被糖基化,糖基化酶可以切割蛋白质连接聚糖的特定结构,但是人的消化系统并不分泌糖基化酶,所以糖基化蛋白比非糖基化蛋白更有可能在消化系统中完整存活并发挥功能。本文介绍母乳中糖蛋白的种类、组成及含量,分析母乳中糖蛋白生物学功能的作用机制,综述糖蛋白组学的研究进展,为进一步研究母乳中糖蛋白的生物学功能提供参考。 展开更多

关键词 母乳 糖蛋白 生物学功能 检测技术 蛋白质组学 糖基化位点

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单克隆抗体药物糖基化修饰分析研究进展 被引量：6

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作者 丛宇婷 胡良海 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1186-1191,共6页

单克隆抗体药物是一类以免疫球蛋白G的结构为基础的大分子糖蛋白药物,为癌症、自身免疫疾病以及病毒感染等多种疾病的治疗提供了全新的途径。单抗药物的糖基化修饰类型及水平对其稳定性、清除率、免疫原性、抗体依赖细胞毒性及补体依赖... 单克隆抗体药物是一类以免疫球蛋白G的结构为基础的大分子糖蛋白药物,为癌症、自身免疫疾病以及病毒感染等多种疾病的治疗提供了全新的途径。单抗药物的糖基化修饰类型及水平对其稳定性、清除率、免疫原性、抗体依赖细胞毒性及补体依赖细胞毒性等都有一定的影响。单抗药物的迅速发展及其在多种疾病治疗中日益凸显的重要性都对单抗药物的研发及用药安全等方面提出了更高的要求。因此,建立规范可靠的单抗药物糖基化修饰分析方法有着十分重要的意义。该综述将简要介绍单克隆抗体药物糖基化修饰及相关的定性、定量分析方法。 展开更多

关键词 单克隆抗体药物 糖基化修饰 质谱 蛋白质组学 综述

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舌癌临床样本N-连接糖链的表达分析

19

作者 郭辉 张健 +2 位作者 杨刚龙 黄如今 郭佳 《生物学杂志》 CAS CSCD 2016年第6期7-14,共8页

从糖组学角度分析健康志愿者和舌癌患者血清中差异表达的N-连接糖链,找出与舌癌密切相关的N-连接糖链结构,为舌癌早期诊断、治疗及预后提供参考依据。以临床血清样品为研究材料,采用滤膜分离全糖蛋白N-连接糖链法(N-glycan-FASP-T)对健... 从糖组学角度分析健康志愿者和舌癌患者血清中差异表达的N-连接糖链,找出与舌癌密切相关的N-连接糖链结构,为舌癌早期诊断、治疗及预后提供参考依据。以临床血清样品为研究材料,采用滤膜分离全糖蛋白N-连接糖链法(N-glycan-FASP-T)对健康志愿者和舌癌患者血清中全糖蛋白N-连接糖链分别进行比较分析,并利用MALDI-TOF/TOF串联质谱解析糖链结构,通过一级、二级质谱方法分析糖链结构和种类,并通过对糖链丰度数据的ROC曲线分析等统计学方法分析确定其表达水平对舌癌的影响。结果表明,与健康志愿者相比,舌癌患者血清糖链特征主要有:杂合型糖链比例升高;在复合型糖链中,三天线比例升高,而二天线及四天线的比例降低;末端Neu5Gc增加;平分型糖链比例升高。统计学分析发现其中有10个糖链结构在疾病发生过程中显著上调(AUC值大于0.50,其中m/z=1256.510/1418.573的两个糖链的AUC值达到了0.75),可以作为潜在的生物标志物并可以进行深入探究,为舌癌早期诊断提供临床参考依据。 展开更多

关键词 舌癌 MALDI-TOF/TOF-MS n-glycan-FASP-T n-连接糖链 糖组学

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糖基化肽段库构建和高通量检索新方法

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作者 刘铭琪 张扬 +1 位作者 陈瑶函 杨芃原 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1916-1918,共3页

随着蛋白质组学的快速发展,蛋白质的翻译后修饰引起了广泛的关注.其中蛋白质的糖基化修饰是最常见、最重要的蛋白质翻译后修饰之一,在许多生理和病理过程中起重要作用.同时获得蛋白糖基化氨基酸位点和糖链结构信息,对了解糖基化的生物... 随着蛋白质组学的快速发展,蛋白质的翻译后修饰引起了广泛的关注.其中蛋白质的糖基化修饰是最常见、最重要的蛋白质翻译后修饰之一,在许多生理和病理过程中起重要作用.同时获得蛋白糖基化氨基酸位点和糖链结构信息,对了解糖基化的生物学意义重大. 展开更多

关键词 蛋白质组学 翻译后修饰 糖基化 串级质谱 搜库软件

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