目的 :建立分泌 m MIP- 1α的小鼠肝癌细胞株 ,并观察其体内致瘤性。 方法 :m MIP- 1α c DN A被克隆入 p Babe puro逆转录病毒载体 ,构建的重组逆转录病毒载体 p Babe puro- m MIP- 1α转染包装细胞 ,嘌呤酶素抗性细胞培养上清感染小...目的 :建立分泌 m MIP- 1α的小鼠肝癌细胞株 ,并观察其体内致瘤性。 方法 :m MIP- 1α c DN A被克隆入 p Babe puro逆转录病毒载体 ,构建的重组逆转录病毒载体 p Babe puro- m MIP- 1α转染包装细胞 ,嘌呤酶素抗性细胞培养上清感染小鼠肝癌细胞系 Hepa1- 6 ,RT- PCR和免疫组化分别检测 Hepa1- 6、Hepa1- 6 - m MIP- 1α的 m MIP- 1α m RNA和 m MIP- 1α蛋白的表达。绘制 Hepa1- 6 - m MIP- 1α与 Hepa1- 6的生长曲线观察细胞的生长。琼脂糖凝胶打孔法体外观察 Hepa1- 6 - m MIP- 1α分泌蛋白对小鼠脾细胞的趋化作用。观察 Hepa1- 6 - m MIP- 1α体内致瘤性。结果 :构建了重组逆转录病毒载体 p Babe puro- m MIP- 1α,Hep-a1- 6不表达 m MIP- 1α m RNA及蛋白 ,Hepa1- 6 - m MIP- 1α表达 m MIP- 1α m RNA和蛋白。 Hepa1- 6 - m MIP- 1α与 Hepa1- 6的生长曲线基本一样。 Hepa1- 6 - m MIP- 1α分泌了对小鼠脾细胞有趋化作用的分子。 Hepa1- 6 - m MIP- 1α体内致瘤性降低。 结论 :Hepa1- 6 - m MIP- 1α能产生 m MIP- 1α,m MIP- 1α不改变细胞体外生长状况 ,Hepa1- 6 - m MIP- 1α产生的 m MIP- 1α有趋化活性 ,m MIP- 1α能使 Hepa1- 6 - m MIP- 1α致瘤性降低。展开更多
