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食叶草酵素对HepG2细胞酒精性损伤的保护作用及机制 被引量:1
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作者 李宪秀 何涛 +4 位作者 毛旸晨 毛建卫 赖晓金 邵逸怀 沙如意 《食品科学》 北大核心 2025年第14期179-186,共8页
本实验通过建立HepG2细胞酒精性损伤模型,测定食叶草酵素预处理后细胞存活率、乙醇脱氢酶(alcohol dehydrogenase,ADH)活力、乳酸脱氢酶(lactatedehydrogenase,LDH)活力、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量和超氧化物歧化酶(superoxide d... 本实验通过建立HepG2细胞酒精性损伤模型,测定食叶草酵素预处理后细胞存活率、乙醇脱氢酶(alcohol dehydrogenase,ADH)活力、乳酸脱氢酶(lactatedehydrogenase,LDH)活力、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力,探究食叶草酵素对HepG2细胞酒精性损伤的保护作用;通过气相色谱-质谱技术分析乙醇和食叶草酵素对HepG2细胞代谢产物的影响,鉴定差异代谢物及相关的代谢途径,从细胞代谢组学的角度探究食叶草酵素对HepG2细胞酒精性损伤的保护机制。结果表明,与模型组相比,食叶草酵素能够显著提高细胞的ADH和SOD活力,降低细胞的LDH泄漏率和MDA含量,抑制酒精性损伤造成的细胞死亡;细胞代谢组学共鉴定出11种胞内差异代谢物和16种胞外差异代谢物,其中关键胞内代谢物为L-丙氨酸、L-缬氨酸、L-正亮氨酸、L-脯氨酸、甘氨酸和L-苏氨酸,关键胞外代谢物为琥珀酸、阿拉伯糖醇、D-吡喃半乳糖、硬脂酸和单硬脂酸甘油酯;食叶草酵素通过调节细胞的氨基酸代谢和能量代谢等对HepG2细胞酒精性损伤发挥保护作用。本研究结果可为食叶草酵素在护肝功能性食品中的应用提供理论依据。 展开更多
关键词 食叶草 酵素 HEPG2细胞 酒精性损伤 代谢产物
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细胞色素P450 2E1在酒精性肝损伤中的作用及研究进展 被引量:3
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作者 王晓东 Arthur I.Cederbaum 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第14期1585-1592,共8页
酒精性肝病(alcoholic liver disease,ALD)是由各种肝脏细胞和损伤因子(包括氧化应激、亚硝化应激、凋亡诱导因子、内毒素和细胞因子等)相互作用导致的病理生理学病征。肝脏是药物、毒素、合成化合物及氧化产物进行解毒的重要目标器... 酒精性肝病(alcoholic liver disease,ALD)是由各种肝脏细胞和损伤因子(包括氧化应激、亚硝化应激、凋亡诱导因子、内毒素和细胞因子等)相互作用导致的病理生理学病征。肝脏是药物、毒素、合成化合物及氧化产物进行解毒的重要目标器官[1]。 展开更多
关键词 细胞色素P450 CYP2E1 氧化应激 酒精性损伤 FAS抗体 脂多糖
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海兔素对大鼠原代肝细胞酒精性氧化损伤的保护作用 被引量:4
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作者 苏爱 朱红燕 +2 位作者 徐宏伟 刘颖 梁惠 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期251-257,共7页
目的探讨海兔素对大鼠原代肝细胞酒精性氧化损伤保护作用。方法门静脉胶原酶Ⅳ原位灌注及密度梯度离心获得大鼠原代肝细胞。MTT实验检测乙醇和海兔素最佳作用剂量及肝细胞活力。酶学实验检测细胞AST、LDH、SOD、MDA、GSH水平;流式细胞... 目的探讨海兔素对大鼠原代肝细胞酒精性氧化损伤保护作用。方法门静脉胶原酶Ⅳ原位灌注及密度梯度离心获得大鼠原代肝细胞。MTT实验检测乙醇和海兔素最佳作用剂量及肝细胞活力。酶学实验检测细胞AST、LDH、SOD、MDA、GSH水平;流式细胞术检测细胞凋亡情况;单细胞凝胶电泳观察细胞DNA损伤状况;JC-1荧光探针检测细胞线粒体膜电位水平;比色法及Western blot检测细胞CYP2E1活性及蛋白表达。结果经30 mg·L^(-1)。海兔素预作用2 h,再与300 mmol·L^(-1)。乙醇共作用8 h后,肝细胞活力较酒精模型组明显上升,AST和LDH释放也得到明显抑制;同时,肝细胞SOD和GSH水平明显升高,MDA含量则明显降低,差异均具有显著性(P<0.05)。海兔素干预后,肝细胞凋亡率明显降低,DNA损伤及线粒体膜电位水平明显得到改善。海兔素干预后,肝细胞CYP2E1活性及蛋白表达水平明显受到抑制(P<0.05)。结论海兔素对大鼠原代肝细胞酒精性氧化损伤具有保护作用,其作用机制可能与海兔素抑制酒精对CYP2E1的活化,缓解氧化应激,提高机体抗氧化能力有关。 展开更多
关键词 海兔素 大鼠 原代肝细胞 酒精性损伤 抗氧化 凋亡 CYP2E1
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食药同源滇黄精水提物保护酒精性肝损伤的机制 被引量:2
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作者 周兰荠 刘天启 +3 位作者 吕佳瑶 张续梦 王鹏 施琳 《陕西师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期82-96,共15页
滇黄精(polygonatum kingianum coll.et Hemsl.,PK)是我国传世经典食药两用食物,营养物质丰富,具有护肝等功效。九蒸九制是炮制滇黄精的经典方法,但其对滇黄精护肝作用及机制的影响尚无报道。基于LO_(2)细胞酒精性损伤模型,探究九蒸九... 滇黄精(polygonatum kingianum coll.et Hemsl.,PK)是我国传世经典食药两用食物,营养物质丰富,具有护肝等功效。九蒸九制是炮制滇黄精的经典方法,但其对滇黄精护肝作用及机制的影响尚无报道。基于LO_(2)细胞酒精性损伤模型,探究九蒸九制滇黄精水提物(Nine Steaming Nine Drying processed PK extracts,PPK)对酒精性肝损伤的改善作用,采用代谢组学和生物信息数据库联合分析以及分子对接揭示其物质基础及潜在的调控机制。结果表明:PPK可以显著提升酒精诱导损伤的LO_(2)细胞活性,改善氧化应激和炎症指标,提高乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶活性;代谢组学分析联合生物数据库检索发现PPK显著富集芦丁、呋喃酮、咖啡酸、没食子儿茶素等23种代谢物,通过PI_(3)K-Akt、AMPK、NF-κB信号通路调控肝脏氧化应激与炎症;分子对接结果证实PPK的核心代谢物与酒精代谢酶之间具有良好的结合能力。研究结果初步揭示PPK能够通过调控氧化应激、减轻肝脏炎症、增强乙醇代谢功能来缓解酒精性肝损伤,为PPK营养功能的定位提供了科学依据。 展开更多
关键词 食药同源 滇黄精 lo_(2)细胞酒精性损伤 代谢组学 生物信息数据库 分子对接
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P2X7R/NLRP3信号通路在酒精性肝损伤中的作用 被引量:8
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作者 潮蓉 武小娟 +2 位作者 王羽辉 苏倩倩 吕雄文 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期491-495,共5页
目的探讨嘌呤P2X7R及其介导的NLRP3炎性体信号通路在酒精诱导的肝损伤中的作用。方法采用NIAAA法建立小鼠急性酒精性肝损伤模型,将30只♂C57BL/6小鼠随机分为3组(n=10):对照组、模型组、P2X7特异性阻断剂A438079干预组,最后1周,分组进... 目的探讨嘌呤P2X7R及其介导的NLRP3炎性体信号通路在酒精诱导的肝损伤中的作用。方法采用NIAAA法建立小鼠急性酒精性肝损伤模型,将30只♂C57BL/6小鼠随机分为3组(n=10):对照组、模型组、P2X7特异性阻断剂A438079干预组,最后1周,分组进行以下处理,对照组和模型组:给予等剂量的生理盐水腹腔注射(每只约0.2 mL),每日1次;A438079组:根据小鼠体质量,腹腔注射200μmol·kg^(-1)的A438079(按7 g·L^(-1)配制A438079,每只约0.2mL),每日1次。最后1天清晨给予单次31.5%酒精溶液灌胃,剂量为10 mL·kg^(-1)。9 h后小鼠眼眶取血,测定谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、胆固醇(TCHO)、甘油三酯(TG)。HE染色观察肝脏病理变化;免疫组化方法检测肝组织中P2X7R的表达;Western blot法检测肝组织中的P2X7、NLRP3、ASC、IL-1β、IL-18水平。结果与对照组相比,模型组ALT、AST、TG、TCHO含量明显增强,且肝组织损伤明显;与模型组相比,A438079组ALT、AST、TG、TCHO含量明显降低。与对照组相比,模型组P2X7、NLRP3、ASC、IL-1β、IL-18的表达明显升高;与模型组相比,A438079组P2X7、NLRP3、ASC、IL-1β、IL-18的表达水平明显降低。结论酒精诱导的肝损伤可能与P2X7R-NLRP3信号通路有关。 展开更多
关键词 嘌呤P2X7受体 核苷酸结合寡聚化结构域样受体3 炎性小体 细胞介素-1Β 细胞介素-18 酒精性损伤
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枳椇子含药血清对酒精性肝损伤的抗氧化作用 被引量:4
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作者 黄劲 高霄 +3 位作者 雷依丽 胡婷 康颖倩 覃容贵 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2019年第11期104-107,共4页
为探究枳椇子对急性酒精性肝损伤细胞的作用及其机制。首先,SD大鼠枳椇子水提液及生理盐水灌胃后心脏取血,制备枳椇子含药血清及空白血清。然后用酒精诱导人LO_2细胞构建酒精损伤细胞模型,并随机将细胞分为正常组、模型组、空白血清组... 为探究枳椇子对急性酒精性肝损伤细胞的作用及其机制。首先,SD大鼠枳椇子水提液及生理盐水灌胃后心脏取血,制备枳椇子含药血清及空白血清。然后用酒精诱导人LO_2细胞构建酒精损伤细胞模型,并随机将细胞分为正常组、模型组、空白血清组和不同剂量含药血清组,采用MTT法检测细胞存活率;酶标法检测丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)的酶活力,及丙二醛(MDA)含量;WST-1法检测超氧化物歧化酶(SOD)活性,最后分析评估枳椇子对急性酒精性肝损伤的保护作用。结果显示,与空白血清组比较,5%和10%含药血清组肝细胞存活率显著升高(P<0.05);ALT和AST活性显著降低(P<0.05);MDA含量明显降低,SOD活性显著升高(P<0.05)。表明枳椇子对酒精诱导的肝细胞损伤有一定的保护作用,可能通过抗氧化作用的机制来实现其保护作用。 展开更多
关键词 枳椇子 含药血清 lo_2细胞 急性酒精性损伤 抗氧化作用
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基于内质网应激PERK/eIF2α/ATF4/CHOP通路探讨枳葛口服液含药血清对乙醇诱导BRL-3A损伤的保护作用及机制研究
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作者 黄晓平 苟沙沙 +4 位作者 李波 王晓栋 刘友平 李志 魏嵋 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2023年第11期3715-3723,共9页
目的基于内质网应激(Endoplasmic reticulum stress,ERS)信号通路PERK/eIF2α/ATF4/CHOP探讨枳葛口服液含药血清对BRL-3A大鼠肝细胞损伤的保护作用及机制。方法(1)制备含药血清:SD雄性大鼠随机分为3组:枳葛口服液组、美他多辛组、正常组... 目的基于内质网应激(Endoplasmic reticulum stress,ERS)信号通路PERK/eIF2α/ATF4/CHOP探讨枳葛口服液含药血清对BRL-3A大鼠肝细胞损伤的保护作用及机制。方法(1)制备含药血清:SD雄性大鼠随机分为3组:枳葛口服液组、美他多辛组、正常组,分别予以枳葛口服液、美他多辛及生理盐水灌胃,连续干预5天,腹主动脉取血制备含药血清。(2)培养正常BRL-3A大鼠肝细胞,用不同浓度乙醇(1.0%、1.5%、2.0%、2.5%、3.0%、5.0%、7.0%、10.0%)干预细胞24 h后用CCK-8法测定各组细胞存活率。(3)BRL-3A大鼠肝细胞分为正常组,模型组,美他多辛组,枳葛口服液低、中、高剂量组(后简称为低剂量组、中剂量组、高剂量组)。24 h后测定各组细胞上清液中γ-谷氨酰转肽酶(GGT)、乳酸脱氢酶(LDH)水平,CCK-8检测BRL-3A细胞存活率,Real-time PCR及Western blot检测各组细胞内PERK/eIF2α/ATF4/CHOP通路相关mRNA及蛋白表达水平。结果(1)不同浓度乙醇(1.0%、1.5%、2.0%、2.5%、3.0%、5.0%、7.0%、10.0%)干预细胞24 h后,细胞存活率随着乙醇浓度的升高呈逐渐下降趋势,当乙醇浓度为5%时,细胞存活率明显下降(P<0.05),故选择乙醇浓度为1.0%、1.5%、2.0%、2.5.0%、3.0%、5.0%进行后续实验。(2)与正常组相比,模型组上清液中GGT、LDH含量显著升高(P<0.05),PERK/eIF2α/ATF4/CHOP通路相关因子mRNA和蛋白的表达显著升高(P<0.05),呈现明显肝损伤状态。(3)与模型组相比,枳葛口服液组及美他多辛组以上指标均呈现不同程度的降低,其中枳葛口服高剂量组效果最显著(P<0.05)。结论枳葛口服液含药血清能够改善乙醇诱导的BRL-3A大鼠肝细胞损伤,其机制可能与抑制内质网应激PERK/eIF2α/ATF4/CHOP信号通路有关。 展开更多
关键词 枳葛口服液 BRL-3A细胞 PERK/eIF2α/ATF4/CHOP信号通路 内质网应激 酒精性损伤
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紫苏籽油中α-亚麻酸的药代动力学研究及其肝脏保护作用研究
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作者 陈雪梅 唐晓姝 +2 位作者 胡博 王小三 张白曦 《天然产物研究与开发》 2025年第9期1627-1637,共11页
探究紫苏籽油(Perilla seed oil,PSO)对α-亚麻酸(α-linolenic acid,ALA)体内药代动力学影响及其肝脏保护作用。选用SD大鼠,按性别分为雌雄两组,每组5只,测定不同时间点血浆中ALA浓度,并使用DAS 2.0软件计算药代动力学参数。同时,将KM... 探究紫苏籽油(Perilla seed oil,PSO)对α-亚麻酸(α-linolenic acid,ALA)体内药代动力学影响及其肝脏保护作用。选用SD大鼠,按性别分为雌雄两组,每组5只,测定不同时间点血浆中ALA浓度,并使用DAS 2.0软件计算药代动力学参数。同时,将KM小鼠随机分为5组,每组10只。通过生化试剂盒检测肝脏中丙二醛(malondialdehyde,MDA)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)和甘油三酯(triglycerides,TG),生化分析仪检测血清中谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)水平,ELISA法检测血清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和IL-21水平。采用HE染色观察小鼠肝脏病理组织变化,油红O染色法观察小鼠肝脏脂质沉积变化。此外,建立人肝癌细胞系Hep G2乙醇(Et OH)损伤模型,采用CCK-8法检测Hep G2细胞的增殖活性,生化分析仪检测细胞ALT、AST和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放量。在抗肿瘤实验中,采用细胞划痕实验检测Hep G2细胞迁移率,Transwell板检测Hep G2细胞侵袭能力。结果显示,ALA药代参数存在显著性别差异,雄鼠血浆中药峰浓度(peak concentration,Cmax)、血药浓度-时间曲线下面积(area under the curve,AUC)(0-t)和AUC(0-∞)分别为雌鼠的10倍、9.7倍和14.5倍,达峰时间(peak time,T_(max))均稳定在360 min。酒精性肝损伤模型中,PSO显著降低酒精性肝损伤小鼠肝脏MDA、TG水平以及血清AST、ALT、TNF-α、IL-6和IL-21水平,同时提高肝脏GSH水平,明显改善肝组织病理损伤,并减少脂质沉积。体外实验证实,PSO可提高Et OH损伤的Hep G2细胞存活率,减少ALT、AST和LDH释放量。在抗肿瘤研究中,PSO显著抑制Hep G2细胞增殖、迁移及侵袭能力。综上所述,雄鼠对PSO中ALA的吸收效率显著优于雌鼠。PSO可缓解酒精性肝损伤,并保护Et OH损伤的Hep G2细胞,这可能与其抗炎和抗氧化应激作用相关。同时,PSO还展现出潜在的抗肿瘤活性。 展开更多
关键词 紫苏籽油 α-亚麻酸 药代动力学 酒精性损伤 Hep G2细胞
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