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玉米肽KSCAPLAS对乙醇性LO2细胞损伤的拮抗作用研究 被引量:1
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作者 崔宁 李冠龙 +1 位作者 刘晓兰 郑喜群 《中国粮油学报》 北大核心 2025年第6期77-84,共8页
以本项目组前期从玉米蛋白水解物中分离纯化得到的玉米蛋白单肽KSCAPLAS为研究对象,通过构建乙醇诱导LO2细胞损伤模型,探究玉米肽KSCAPLAS的拮抗乙醇性损伤作用。结果表明,KSCAPLAS能够显著降低乙醇诱导损伤的LO2细胞内活性氧(ROS)的含... 以本项目组前期从玉米蛋白水解物中分离纯化得到的玉米蛋白单肽KSCAPLAS为研究对象,通过构建乙醇诱导LO2细胞损伤模型,探究玉米肽KSCAPLAS的拮抗乙醇性损伤作用。结果表明,KSCAPLAS能够显著降低乙醇诱导损伤的LO2细胞内活性氧(ROS)的含量(P<0.05),并显著提高超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽还原酶(GR)活性和还原型谷胱甘肽(GSH)水平(P<0.05),对乙醇性损伤的LO2细胞具有拮抗作用。此外,KSCAPLAS通过上调线粒体呼吸链复合物Ⅰ的含量进而上调细胞内ATP含量。与对照组相比,在肽质量浓度为100μg/mL条件下,细胞内线粒体呼吸链复合物Ⅰ和ATP的质量分数分别提高了63.11%和31.65%。玉米肽KSCAPLAS通过促进乙醇性损伤细胞代谢提供能量,进而缓解乙醇诱导LO2细胞的损伤。 展开更多
关键词 玉米肽 抗氧化 lo2细胞 能量代谢
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转录组分析揭示氯化红霉素消毒副产物对人肝细胞LO2的毒性
2
作者 徐敏华 何进锋 +3 位作者 史梦洁 刘红艳 张勇 姜铁明 《桂林理工大学学报》 北大核心 2025年第4期588-594,共7页
模拟红霉素在淡水环境下被氯化的过程制备氯化红霉素消毒副产物,将LO2细胞暴露于制备的氯化红霉素消毒副产物中,通过细胞增殖实验观测其活性,凋亡实验探究细胞凋亡状况,对转录组分析鉴定出的差异表达基因(DEG)进行了基因本体功能(GO)和... 模拟红霉素在淡水环境下被氯化的过程制备氯化红霉素消毒副产物,将LO2细胞暴露于制备的氯化红霉素消毒副产物中,通过细胞增殖实验观测其活性,凋亡实验探究细胞凋亡状况,对转录组分析鉴定出的差异表达基因(DEG)进行了基因本体功能(GO)和基因途径(KEGG)富集分析,并进行实时荧光定量检测正常肝细胞组和氯化红霉素消毒副产物组中CYP3A4和CYP2C18的基因表达情况,以此探究氯化红霉素消毒副产物对LO2细胞的毒性作用。结果显示:LO2细胞活性随着氯化红霉素消毒副产物的浓度升高而下降;LO2细胞凋亡率随着氯化红霉素消毒副产物的浓度升高而增加,当浓度大于10^(-4)mol/L时将引发显著细胞损伤并导致细胞坏死。与对照组相比,红霉素组共检出1943个DEG。这些DEG与类固醇生物合成、信号转导、细胞增殖、生长因子结合等生物学过程密切相关,在类固醇生物合成、MAPK信号通路、PI3K/AKT信号通路、基底细胞癌等信号通路中显著富集。氯化红霉素消毒副产物组中CYP3A4、CYP2C18 mRNA表达显著增加,影响P450酶功能,对LO2细胞增殖活性产生影响。 展开更多
关键词 氯化红霉素 消毒副产物 lo2细胞 毒性作用 细胞色素P450酶
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4-羟基肉桂酰胺(4-HY)改善油酸诱导的LO2细胞脂质积累
3
作者 陈敏华 彭文元 +3 位作者 曾玉萍 宁功美 吴晓云 字成庭 《热带农业科学》 2025年第4期78-86,共9页
非酒精性脂肪肝病(NAFLD)是世界范围内最常见的慢性肝病,通常与肥胖和2型糖尿病有关。NAFLD是一种多重因素引起的疾病,其发病机制尚不完全清楚。目前还没有批准的用于NAFLD治疗的药物,因此寻找安全、高效的治疗手段和针对NAFLD的药物研... 非酒精性脂肪肝病(NAFLD)是世界范围内最常见的慢性肝病,通常与肥胖和2型糖尿病有关。NAFLD是一种多重因素引起的疾病,其发病机制尚不完全清楚。目前还没有批准的用于NAFLD治疗的药物,因此寻找安全、高效的治疗手段和针对NAFLD的药物研发具有重要的意义。油酸(OA)诱导人正常肝细胞(LO2)创建NAFLD细胞模型,并使用试剂盒检测细胞内甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)的含量;采用实时荧光定量PCR技术检测乙酰辅酶A羧化酶(acc)、过氧化物酶体增殖物激活受体(ppar γ)、脂肪酸合酶(fasn)、硬脂酰辅酶A去饱和酶(scd-1)、甾醇调控元件结合蛋白-1c(srebp-1c)基因m RNA的表达水平;最后采用蛋白免疫印迹(Western Blot)测定SREBP-1c、ACC、FASN、PPAR γ蛋白表达水平,初步探究4-HY改善LO2细胞脂肪累积的机制。MTT(噻唑蓝)结果表明,低于8μmol/L的4-羟基肉桂酰胺(4-HY)处理LO2细胞24 h没有显著细胞毒性;油红O细胞染色结果显示,OA诱导显著增加了细胞内脂滴的形成和数量,表明NAFLD细胞模型创建成功。与空白对照相比,4-HY有效降低OA诱导的LO2细胞内脂质沉积。通过TG、TC试剂盒检测可知4-HY降低了OA诱导的LO2细胞内的TG、TC的含量水平。实时荧光定量PCR结果显示,4-HY下调了脂质代谢相关基因srebp-1c、fasn、acc、scd-1、cd36、ppar γ的表达水平。蛋白免疫印迹结果表明,4-HY抑制了脂质代谢相关蛋白PPAR γ、SREBP-1c、FASN、ACC的表达。结果表明,4-HY通过下调LO2细胞内脂质代谢相关基因和蛋白的表达,抑制LO2细胞内源性脂肪合成途径,降低LO2细胞对游离脂肪酸的摄取,从而减少LO2细胞TG、TC的合成,改善NAFLD细胞模型的脂质积累。 展开更多
关键词 NAFLD 4-羟基肉桂酰胺 脂质累积 lo2细胞 油酸
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阿魏酸对乙醇诱导的LO2肝细胞DNA损伤的修复机制研究
4
作者 钟恒 陈杉彬 +4 位作者 王德良 杨冬莹 温银萍 罗蕊琪 黄丹 《食品与发酵工业》 CAS 北大核心 2025年第1期174-181,共8页
阿魏酸是一种天然化合物,其对肝细胞的影响尚不完全清楚。该研究旨在探讨不同浓度阿魏酸对乙醇诱导的LO2肝细胞DNA损伤的潜在修复机制。通过将不同浓度的阿魏酸作用于LO2肝细胞,并分析其对细胞增殖活性的影响。进一步研究了乙醇对LO2细... 阿魏酸是一种天然化合物,其对肝细胞的影响尚不完全清楚。该研究旨在探讨不同浓度阿魏酸对乙醇诱导的LO2肝细胞DNA损伤的潜在修复机制。通过将不同浓度的阿魏酸作用于LO2肝细胞,并分析其对细胞增殖活性的影响。进一步研究了乙醇对LO2细胞周期的影响及阿魏酸的干预作用,使用Western blot技术检测DNA损伤标记物p-H2AX的表达,以及通过流式细胞仪检测活性氧水平和细胞自噬的变化。结果表明,阿魏酸在低浓度时能促进LO2细胞增殖,中等浓度(0.25~2 mmol/L)能显著减少乙醇诱导的p-H2AX表达,降低活性氧水平,并可能促进细胞自噬。然而,高浓度阿魏酸则显示出对细胞的毒性作用,在DNA修复和自噬方面有潜在抑制效应。该研究表明,在特定浓度范围内,阿魏酸能够对抗乙醇诱导的LO2肝细胞DNA损伤,并可能通过促进细胞自噬机制来增强细胞的修复能力。但在高浓度下,阿魏酸则可能逆转其保护效应,表现出细胞毒性。 展开更多
关键词 阿魏酸 lo2肝细胞 DNA损伤修复 细胞周期 活性氧 细胞自噬 流式细胞仪
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三白草中化学成分对H_2O_2损伤LO2细胞保护作用 被引量:10
5
作者 徐春蕾 李祥 +2 位作者 陈宏降 薛平 吴玉兰 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期163-164,共2页
目的研究三白草中主要化学成分对H2O2损伤人正常肝细胞LO2的保护作用。方法供试品为三白草中木脂素类成分:Rel-(7S,8R,7’R,8’R)-3,3’,4,4’,5,5’-hexamethoxy-7-O-7’,8,8’-llignan、Di-O-methyltetra hydrofuriguaiacin B、里卡灵... 目的研究三白草中主要化学成分对H2O2损伤人正常肝细胞LO2的保护作用。方法供试品为三白草中木脂素类成分:Rel-(7S,8R,7’R,8’R)-3,3’,4,4’,5,5’-hexamethoxy-7-O-7’,8,8’-llignan、Di-O-methyltetra hydrofuriguaiacin B、里卡灵A、里卡灵B、三白草素、二氢愈创木酸;黄酮类成分:异槲皮苷、槲皮苷。LO2细胞接种于96孔板培养,加入100μmol/L的受试成分,培养24h后加入20μL 1.2mmol/L H2O2作用1h。使用MTT法检测各组细胞存活率。结果异槲皮苷和槲皮苷对H2O2损伤LO2细胞有显著保护作用,里卡灵A和二氢愈创木酸对细胞有显著损伤作用。结论该实验可以为三白草保肝作用的研究提供理论基础。 展开更多
关键词 三白草 lo2细胞 存活率
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三黄茵赤方含药血清对LO2细胞DNA氧化损伤的影响 被引量:2
6
作者 代欢 刁建新 +2 位作者 区锦莹 李海叶 杨运高 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期1434-1439,共6页
目的探讨三黄茵赤方含药血清对H2O2诱导LO2细胞DNA氧化损伤的保护作用。方法采集三黄茵赤方含药血清,以LO2细胞株为研究对象,通过H2O2诱导LO2细胞DNA氧化损伤模型,实验分正常对照组、H2O2模型组、三黄茵赤方含药血清5%、10%、15%浓度组... 目的探讨三黄茵赤方含药血清对H2O2诱导LO2细胞DNA氧化损伤的保护作用。方法采集三黄茵赤方含药血清,以LO2细胞株为研究对象,通过H2O2诱导LO2细胞DNA氧化损伤模型,实验分正常对照组、H2O2模型组、三黄茵赤方含药血清5%、10%、15%浓度组、维生素E组,采用倒置显微镜观察各组形态,CCK-8法测定细胞存活率,生化法检测细胞内SOD、CAT和GSH-PX活性,流式细胞仪检测细胞内ROS水平,ELISA检测细胞内8-OHd G含量,彗星实验检测细胞DNA损伤情况。结果与H2O2模型组比较,三黄茵赤方含药血清10%、15%浓度组、维生素E组均能提高细胞存活率(P<0.05),增强细胞内SOD、CAT、GSH-PX活性(P<0.05),改善细胞对ROS清除能力(P<0.01),降低细胞内8-OHd G含量(P<0.01),减低细胞拖尾率、尾长、尾矩及Olive尾矩(P<0.05)。结论三黄茵赤方含药血清对H2O2诱导LO2细胞DNA氧化性损伤具有保护作用,以15%浓度含药血清组作用最显著。 展开更多
关键词 含药血清 lo2细胞 H2O2 DNA氧化损伤
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河蚬酶解物对乙醇诱导肝细胞LO2损伤的保护作用 被引量:2
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作者 任娇艳 尚帅明 +4 位作者 梁明 张婷 周勇 李海龙 袁尔东 《华南理工大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第12期20-26,共7页
通过测定清除DPPH自由基的活性和氧自由基吸收能力实验评价不同蛋白酶酶解河蚬(Corbicula fluminea)所得酶解物的抗氧化性;运用MTT检测法和检测谷丙转氨酶、谷草转氨酶活性研究不同乙醇浓度对LO2细胞的影响,并评价河蚬酶解物对乙醇致LO... 通过测定清除DPPH自由基的活性和氧自由基吸收能力实验评价不同蛋白酶酶解河蚬(Corbicula fluminea)所得酶解物的抗氧化性;运用MTT检测法和检测谷丙转氨酶、谷草转氨酶活性研究不同乙醇浓度对LO2细胞的影响,并评价河蚬酶解物对乙醇致LO2细胞损伤的保护作用;最后对活性高的样品进行了氨基酸分析.结果显示:河蚬酶解物具备一定的抗氧化能力,河蚬酶解物(300~400 mg/L)对LO2细胞的增殖无毒性,且可以抑制乙醇诱导降低LO2细胞存活率的趋势,其中胰酶和复合风味蛋白酶酶解物的保护作用显著优于其他酶解物,同时二者可减缓乙醇导致的LO2细胞ALT和AST的释放,各自含对抗氧化有贡献的氨基酸占其总氨基酸的比例分别是75.69%、75.06%. 展开更多
关键词 河蚬 酶解物 抗氧化活性 乙醇 L02细胞
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清肝降脂方对脂肪变性LO2细胞HO-1、Egr-1基因及蛋白表达的影响 被引量:1
8
作者 何佳 卢秉久 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2017年第6期1583-1586,I0034,共5页
目的:通过建立游离脂肪酸体外诱导的LO2细胞非酒精脂肪肝模型,探讨不同剂量的清肝降脂方对肝脏脂肪变LO2细胞HO-1、Egr-1基因及蛋白表达水平的影响。方法:建立游离脂肪酸诱导脂肪变性LO2肝细胞体外模型。人肝LO2细胞采用含10%胎牛血清的... 目的:通过建立游离脂肪酸体外诱导的LO2细胞非酒精脂肪肝模型,探讨不同剂量的清肝降脂方对肝脏脂肪变LO2细胞HO-1、Egr-1基因及蛋白表达水平的影响。方法:建立游离脂肪酸诱导脂肪变性LO2肝细胞体外模型。人肝LO2细胞采用含10%胎牛血清的RPMI 1640培养基培养,待细胞均匀分布,随机分为6组:正常对照组、模型组、清肝降脂方高剂量组、中剂量组、低剂量组、水林佳对照组,每组6瓶。除正常对照组外,其余5组细胞均以0.5 mmol/L的游离脂肪酸诱导LO2非酒精脂肪肝细胞模型,诱导24 h后,各组随机抽取1瓶进行油红O染色,观察LO2细胞的脂肪化程度。确定模型诱导成功后,正常对照组和模型组分别加入10%正常大鼠血清,低、中、高剂量清肝降脂方药物血清组及水林佳药物血清组添加10%含相对应药物的大鼠血清,培养24h后,收集细胞;采用RT-PCR及Western blot法检测血红素氧化酶-1(HO-1)、早期生长反应因子-1(Egr-1)的基因及蛋白表达水平。结果:与正常对照组比较,模型对照组LO2细胞HO-1、Egr-1 mRNA和蛋白表达有所增加;与模型对照组比较,自拟清肝降脂方三剂量组和对照药物组HO-1 mRNA及蛋白表达有所增高,Egr-1mRNA和蛋白表达明显降低;与对照药物组比较,清肝降脂方高剂量组HO-1 mRNA表达有所增高,Egr-1 mRNA表达有所降低。结论:Egr-1高表达可能会导致肝损伤机制之一;HO-1高表达可能是保护肝损伤机制之一;两者可能都是通过调节TNF-α表达来调节NAFLD细胞的损伤进展。清肝降脂方可明显改善LO2细胞Egr-1、HO-1 mRNA及蛋白的表达,可能为其治疗机制、临床诊断和判断进展参考指标。 展开更多
关键词 清肝降脂方 脂肪变性lo2细胞 HO-1 Egr-1 基因及蛋白表达
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人肝细胞系LO2单纯肝脂肪变性细胞模型的建立 被引量:4
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作者 李姣 石挺 +2 位作者 刘磊 陈志刚 李文平 《中兽医医药杂志》 2016年第5期20-23,共4页
目的:探讨建立人肝细胞系LO2单纯肝脂肪变性细胞模型的方法。方法:试验分为正常对照组与试验组,用含10%胎牛血清的1640培养基培养LO2细胞,当细胞处于对数生长期时,正常对照组更换新鲜的1640培养基,试验组用含不同浓度游离脂肪酸(油酸∶... 目的:探讨建立人肝细胞系LO2单纯肝脂肪变性细胞模型的方法。方法:试验分为正常对照组与试验组,用含10%胎牛血清的1640培养基培养LO2细胞,当细胞处于对数生长期时,正常对照组更换新鲜的1640培养基,试验组用含不同浓度游离脂肪酸(油酸∶棕榈酸为2∶1)的1640培养基培养,24 h后油红O染色,观察细胞内脂滴大小,并检测细胞中TG、TC含量的变化及细胞增殖情况。结果:试验组中LO2细胞内有大量的脂滴生成,且甘油三酯水平显著升高,其中,以1.2 mM FFA组脂质沉积最为明显。同时,细胞抑制率小于4%,胆固醇水平无明显升高,均符合单纯脂肪变性模型的特征。结论:采用游离脂肪酸(油酸∶棕榈酸为2∶1)可以成功诱导LO2细胞单纯脂肪变性,其中游离脂肪酸浓度以1.2 m M最为理想。 展开更多
关键词 脂肪肝 lo2细胞 细胞模型 游离脂肪酸
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RBP4分子RNAi载体的制备及对人肝细胞系LO2中ERK信号通路的影响
10
作者 陈冠军 陈利春 +3 位作者 钱磊 陈莉 陈兵 鲁云霞 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2012年第8期883-887,共5页
目的制备人视黄醇结合蛋白4(RBP4)分子RNAi载体,检测其干涉人肝细胞系LO2中RBP4的表达后对ERK1/2表达及磷酸化和葡萄糖摄取的影响。方法分别构建针对RBP4基因表达框5'端和3'端的干涉载体及真核表达载体,经测序和酶切鉴定后将载... 目的制备人视黄醇结合蛋白4(RBP4)分子RNAi载体,检测其干涉人肝细胞系LO2中RBP4的表达后对ERK1/2表达及磷酸化和葡萄糖摄取的影响。方法分别构建针对RBP4基因表达框5'端和3'端的干涉载体及真核表达载体,经测序和酶切鉴定后将载体转染LO2,RT-PCR和Western blot法确定其干涉RBP4表达的效率,选择干涉较高的载体用于后续实验;Western blot检测ERK1/2的表达及磷酸化水平的改变,葡萄糖氧化酶法检测上清液中葡萄糖的残留量。结果构建的真核表达载体和干涉载体经酶切、测序鉴定结果正确,并有明显的高表达或干涉效果。Western blot结果表明ERK1/2的表达量无明显变化,RBP4高表达组其磷酸化显著下降,RBP4干涉组其磷酸化显著上升。胰岛素刺激后RBP4高表达组的葡萄糖摄取明显下降,RBP4干涉组的葡萄糖摄取明显增加。结论成功制备RBP4基因的干涉载体并应用于LO2细胞中ERK1/2通路的研究,为后续RBP4的进一步功能研究奠定基础。 展开更多
关键词 视黄醇结合蛋白4 RNA干涉 lo2细胞 ERK1/2 葡萄糖摄取
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玉米谷蛋白水解物对乙醇诱导损伤LO2细胞的保护作用 被引量:8
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作者 崔宁 刘晓兰 +1 位作者 李冠龙 郑喜群 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期52-57,共6页
采用复合蛋白酶(protamex)和碱性蛋白酶(alcalase)协同水解玉米谷蛋白,制备玉米谷蛋白水解物(corn gluten hydrolysate,CGH),研究了玉米谷蛋白水解物的体外抗氧化活性,利用乙醇诱导LO2细胞氧化损伤模型对玉米谷蛋白水解物的抗氧化应激... 采用复合蛋白酶(protamex)和碱性蛋白酶(alcalase)协同水解玉米谷蛋白,制备玉米谷蛋白水解物(corn gluten hydrolysate,CGH),研究了玉米谷蛋白水解物的体外抗氧化活性,利用乙醇诱导LO2细胞氧化损伤模型对玉米谷蛋白水解物的抗氧化应激作用进行研究。结果表明,玉米谷蛋白水解物具有良好的体外抗氧化活性,其羟自由基(·OH)清除率和DPPH自由基清除率和Fe^(2+)螯合能力的半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC_(50))值分别为0.61、3.96、0.79 mg/mL。玉米谷蛋白水解物能够显著降低(P<0.05)乙醇诱导损伤的LO2细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)的含量,并显著提高(P<0.05)超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽还原酶(glutathione reductase,GR)活性和还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)水平,对氧化应激损伤的LO2细胞具有保护作用。该研究为玉米谷蛋白水解物作为天然抗氧化剂应用在食品工业中奠定了理论基础。 展开更多
关键词 玉米谷蛋白水解物 抗氧化 氧化应激损伤 lo2细胞
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姜黄素超分子包合物改善乙醇诱导LO2肝细胞DNA损伤的作用机制 被引量:1
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作者 范土贵 曹笑皇 +6 位作者 赵云涛 高加龙 刘颖 刘海 钟赛意 秦小明 陈建平 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期182-189,共8页
该文主要考察了姜黄素超分子包合物(curcumin/β-cyclodextrin polymer inclusion complex,CUR/CDP)保护乙醇诱导LO2肝细胞损伤的分子机制。采用流式细胞仪检测CUR/CDP预处理对乙醇诱导细胞损伤后细胞周期分布的影响;Western blot检测CU... 该文主要考察了姜黄素超分子包合物(curcumin/β-cyclodextrin polymer inclusion complex,CUR/CDP)保护乙醇诱导LO2肝细胞损伤的分子机制。采用流式细胞仪检测CUR/CDP预处理对乙醇诱导细胞损伤后细胞周期分布的影响;Western blot检测CUR/CDP预处理对乙醇诱导细胞内蛋白表达水平变化的影响;活性氧(reactive oxygen species,ROS)试剂盒检测CUR/CDP预处理对乙醇诱导细胞内ROS水平的影响。结果发现,乙醇能显著提高细胞内G_(2)/M期细胞数目,从空白对照组的(8.83±0.46)%提高到(21.86±0.13)%。而经80μg/mL CUR/CDP预处理后乙醇诱导的细胞损伤显著降低,发现其细胞内G_(2)/M期细胞数目从乙醇处理组的(21.86±0.13)%降低到(4.76±0.36)%。进一步研究发现,CUR/CDP能够显著下调乙醇处理组中的p21、p-ATM、p-P53、γ-H2AX以及p-p38MAPK的蛋白表达量和上调cyclin B1和p-MDM2的蛋白表达量。此外,CUR/CDP作用于细胞后其细胞内ROS的荧光强度显著减弱,表明CUR/CDP能够抑制乙醇诱导细胞内ROS的产生。综上所述,CUR/CDP通过抑制细胞内ROS的产生下调细胞内与DNA损伤相关蛋白的表达,从而改善乙醇诱导的肝细胞损伤。 展开更多
关键词 姜黄素超分子包合物 乙醇 lo2肝细胞 DNA损伤 保护机制
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油酰乙醇酰胺改善LO2细胞中脂肪酸诱导的氧化应激
13
作者 陈静 刘元法 李进伟 《中国油脂》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期95-99,共5页
非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是最常见的慢性疾病之一,氧化应激在其发病和发展过程中起着关键作用。油酰乙醇酰胺(OEA)作为一种天然存在的脂质信号分子,具有多种药理学特性。研究探讨了油酰乙醇酰胺对脂肪酸诱导的LO2细胞氧化应激的影响... 非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是最常见的慢性疾病之一,氧化应激在其发病和发展过程中起着关键作用。油酰乙醇酰胺(OEA)作为一种天然存在的脂质信号分子,具有多种药理学特性。研究探讨了油酰乙醇酰胺对脂肪酸诱导的LO2细胞氧化应激的影响及作用机制。通过0.4 mmol/L油酸和棕榈酸混合物(摩尔比2∶1)诱导LO2细胞产生氧化应激,添加不同浓度的OEA共同处理24 h。结果表明,OEA能够显著降低LO2细胞内ROS和MDA含量,提高抗氧化酶(SOD、CAT和GPx)活性。进一步的研究表明,OEA主要通过上调Nrf2和HO-1蛋白及mRNA的表达水平来改善氧化应激。 展开更多
关键词 油酰乙醇酰胺 脂肪酸 lo2细胞 氧化应激 非酒精性脂肪肝
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葡萄籽中白藜芦醇的提取及其对LO2细胞氧化损伤保护及延缓衰老作用 被引量:3
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作者 高原 王福玲 +4 位作者 徐蓓蕾 雒江菡 阎力君 赵莹莹 王越 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期225-229,共5页
通过超声波辅助双水相法提取葡萄籽中白藜芦醇,酒精(100 mmol/L)诱导LO2细胞构建氧化损伤模型,D-半乳糖构建衰老小鼠模型,采用白藜芦醇提取物干预后,对细胞及小鼠肝匀浆超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)、丙二醛(MDA)... 通过超声波辅助双水相法提取葡萄籽中白藜芦醇,酒精(100 mmol/L)诱导LO2细胞构建氧化损伤模型,D-半乳糖构建衰老小鼠模型,采用白藜芦醇提取物干预后,对细胞及小鼠肝匀浆超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)、丙二醛(MDA)含量进行测定。在液料比为1∶10、浸提时间40 min、超声温度50℃、超声功率300 W、超声时间10 min,双水相体系为(乙醇∶硫酸铵=1∶1)白藜芦醇提取率达到2.408±0.088 mg/g。白藜芦醇提取物作用LO2细胞后,能够降低乙醇诱导引起的丙二醛含量升高,能显著提高SOD和GSH-px的活性。白藜芦醇提取物对衰老模型小鼠肝中丙二醛的产生有一定的抑制作用,且能够提升SOD和GSH-px的活性。 展开更多
关键词 葡萄籽 白藜芦醇 lo2细胞 氧化损伤
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姜黄素超分子包合物对乙醇诱导LO2细胞损伤的保护作用 被引量:4
15
作者 范土贵 陈建平 +2 位作者 高加龙 钟赛意 秦小明 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2021年第18期366-371,共6页
本文考察了姜黄素超分子包合物(Curcumin/Cyclodextrin polymer inclusion complex,CUR/CDP)对乙醇诱导LO2细胞损伤的保护作用。采用MTT法建立乙醇诱导LO2细胞损伤的模型,通过谷氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸... 本文考察了姜黄素超分子包合物(Curcumin/Cyclodextrin polymer inclusion complex,CUR/CDP)对乙醇诱导LO2细胞损伤的保护作用。采用MTT法建立乙醇诱导LO2细胞损伤的模型,通过谷氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPX)、丙二醛(MDA)和活性氧(ROS)等试剂盒考察了CUR/CDP对乙醇诱导LO2细胞损伤的保护效果。结果表明,经CUR/CDP(80μg/mL)处理后,LO2细胞的存活率从54.75%±8.97%(模型对照组)提高到85.27%±2.64%,且细胞培养液中ALT、AST和LDH活力分别从(26.47±0.90)、(41.02±4.41)、(63.77±4.95)U/L(模型对照组)降低到(16.17±0.42)、(22.62±0.79)、(32.25±1.69)U/L(P<0.01),LO2细胞内GSH-PX、SOD活力分别从(21.82±1.34)、(8.45±1.11)U/mg prot(模型对照组)升高到(36.70±0.56)、(16.47±1.27)U/mg prot,LO2细胞内MDA和ROS含量分别从(1.19±0.15)nmol/mg prot、(198.02%±11.76%)(模型对照组)降低到(0.72±0.05)nmol/mg prot、(110.87%±10.22%)(P<0.01)。综上所述,CUR/CDP通过提高LO2细胞相关抗氧化酶的活力和降低细胞内ROS含量来改善乙醇诱导LO2细胞的损伤。 展开更多
关键词 姜黄素超分子包合物 lo2 细胞 乙醇损伤 保护作用 活性氧
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新疆葡萄酒中的酚类物质对LO2细胞自噬的影响 被引量:2
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作者 王妍凌 陈杉彬 +8 位作者 赵文梅 尹丽萍 黎进雪 张海鹏 张金萍 黄翠 吕嘉伟 武运 薛洁 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期118-125,共8页
为了探究新疆葡萄酒酚类物质对肝细胞自噬的影响,该研究使用体外培养的人正常肝细胞(LO2),通过免疫印迹、实时荧光定量、细胞免疫荧光、流式细胞术等方法观察LO2细胞中微管相关蛋白1A/1B-轻链3(microtubule-associated proteins 1A/1B l... 为了探究新疆葡萄酒酚类物质对肝细胞自噬的影响,该研究使用体外培养的人正常肝细胞(LO2),通过免疫印迹、实时荧光定量、细胞免疫荧光、流式细胞术等方法观察LO2细胞中微管相关蛋白1A/1B-轻链3(microtubule-associated proteins 1A/1B light chain3,LC3)和螯合体1(sequestosome 1,P62)的水平变化,初步评估新疆葡萄酒中酚类物质对LO2细胞自噬的影响作用。免疫印迹结果发现,橙皮苷、表儿茶素没食子酸酯,可显著提升LO2细胞中LC3蛋白的表达水平,提示橙皮苷和表儿茶素没食子酸酯或对LO2细胞自噬活性有一定影响作用。进一步通过实时荧光定量方法观察橙皮苷和表儿茶素没食子酸酯对LC3和P62蛋白mRNA的影响作用发现,橙皮苷、表儿茶素没食子酸酯处理细胞后,显著上调了LC3蛋白的mRNA水平,同时降低了P62蛋白的mRNA水平;细胞免疫荧光染色显示橙皮苷、表儿茶素没食子酸酯处理LO2细胞后,绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)和红色荧光蛋白(red fluorescent protein,RFP)标记的LC3蛋白荧光强度增强,提示细胞内形成自噬小体;流式细胞术结果进一步发现,GFP-LC3/RFP-LC3荧光强度比值减小,表明自噬小体成熟。综上所述,橙皮苷、表儿茶素没食子酸酯对LO2细胞自噬活性具有一定的促进作用,但其作用机理尚需要进一步深入研究。 展开更多
关键词 新疆葡萄酒 细胞自噬 酚类物质 肝脏保护 lo2细胞
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魔芋葡甘露聚糖对镉所致的LO2细胞毒性损伤的影响 被引量:2
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作者 李莹馨 原茜 +3 位作者 王震宇 黄磊 覃文君 赵勤 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2019年第8期1918-1923,共6页
[目的]研究魔芋葡甘露聚糖(KGM)对镉导致的L02细胞毒性损伤的影响。[方法]MTT法确定KGM对L02细胞的最适作用浓度和无菌处理方式;设置空白对照组、镉单独作用组、镉先作用3 h再加KGM作用组、KGM先作用3 h再加镉作用组,分别培养不同时间... [目的]研究魔芋葡甘露聚糖(KGM)对镉导致的L02细胞毒性损伤的影响。[方法]MTT法确定KGM对L02细胞的最适作用浓度和无菌处理方式;设置空白对照组、镉单独作用组、镉先作用3 h再加KGM作用组、KGM先作用3 h再加镉作用组,分别培养不同时间段后用MTT法检测L02细胞活力;检测ALT、AST、GSH-Px、MDA水平,并在光镜下进行细胞形态观察。[结果]0.2mg/mL的KGM溶液经121℃30 min灭菌处理后最适作用于L02细胞;L02细胞活力与CdCl2浓度呈明显的剂量-效应关系;CdCl2与KGM联合作用后其细胞活力均高于镉单独作用组,且其ALT、AST、MDA的检测结果均呈极显著差异。[结论]KGM对镉染毒后的L02细胞有一定的保护作用。 展开更多
关键词 魔芋葡甘露聚糖 lo2细胞 细胞活力
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西凤酒全酒干预对LO2细胞和健康小鼠肠道菌群的影响 被引量:1
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作者 付欢 胡峰瑞 +7 位作者 刘丽丽 陈雪峰 贾智勇 闫宗科 陈梦音 周端 赵燕妮 程伟 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期213-222,共10页
西凤酒中微量成分种类丰富,但关于其微量成分的作用及量效关系研究较少。因此,该研究基于细胞和动物实验探讨了西凤酒(以红西凤为代表)中微量成分对LO2细胞和健康小鼠肠道菌群的影响情况。细胞实验结果表明,乙醇浓度越高,细胞增殖抑制... 西凤酒中微量成分种类丰富,但关于其微量成分的作用及量效关系研究较少。因此,该研究基于细胞和动物实验探讨了西凤酒(以红西凤为代表)中微量成分对LO2细胞和健康小鼠肠道菌群的影响情况。细胞实验结果表明,乙醇浓度越高,细胞增殖抑制率、谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)和谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)泄漏量越大,相同乙醇浓度下,红西凤和食用酒精(对照组)干预组之间具有显著性差异(P<0.05)。动物实验结果表明,不同剂量红西凤和食用酒精干预均导致小鼠体重、高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein-cholesterol,HDL-C)含量降低,肝重体重比、AST、ALT、TC、总胆固醇(total cholesterol,TC)、总甘油三酯(total triglycerides,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein-cholesterol,LDL-C)含量升高,肝脏组织出现不同程度脂肪变性,肠道菌群发生明显变化(门水平上,厚壁菌门与拟杆菌门比例下降;属水平上,乳酸杆菌属、毛螺菌属等相对丰度降低,幽门螺杆菌属、链球菌属等相对丰度增加),LEfSe分析结果显示,小鼠肠道菌群存在的差异与红西凤和食用酒精干预剂量有一定关系,且高剂量干预对小鼠肠道菌群的影响有扩大的趋势,然而同剂量下,红西凤干预对小鼠的损伤程度轻于食用酒精,以低剂量红西凤干预对小鼠的影响最轻,推测红西凤中各微量成分可能通过调节小鼠肠道菌群从而减缓对肝脏的损伤程度。以上结果说明,适量摄入红西凤在一定程度上可以缓解酒精对LO2细胞及小鼠肠道菌群的负面影响,该研究将为西凤酒的健康消费提供理论依据。 展开更多
关键词 西凤酒 微量成分 lo2细胞 健康小鼠 肠道菌群
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POR基因敲除、回补及过表达LO2细胞株的构建及作为AFB_(1)染毒模型的初步应用 被引量:1
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作者 王琳 袁建林 +3 位作者 缪昌 马玉晗 曹三杰 赵勤 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2024年第2期272-283,共12页
为了构建POR基因稳定敲除(POR^(KO))、回补(PORCO)、过表达(POR^(OE))的LO2细胞株,以便为后续深入开展POR基因在AFB_(1)致毒性机理中的功能研究提供细胞模型。本研究首先利用CRISPR/Cas9技术设计2条靶向POR基因的sgRNA并克隆至lentiCRIS... 为了构建POR基因稳定敲除(POR^(KO))、回补(PORCO)、过表达(POR^(OE))的LO2细胞株,以便为后续深入开展POR基因在AFB_(1)致毒性机理中的功能研究提供细胞模型。本研究首先利用CRISPR/Cas9技术设计2条靶向POR基因的sgRNA并克隆至lentiCRISPR v2载体,进行慢病毒包装与感染,筛选出LO2 POR^(KO)单克隆细胞后进行测序及Western blot鉴定。其次用同源重组方法构建pcDNA3.1(+)/myc-His B-POR重组质粒,经对POR^(KO)细胞和野生型细胞转染分别构建LO2 PORCO及LO2 POR^(OE)细胞株,以G-418筛选后进行Western blotting鉴定。再用4μmol·L^(-1)及8μmol·L^(-1)AFB_(1)分别对野生型、LO2 POR^(KO)、LO2 PORCO、LO2 POR^(OE)细胞株染毒48 h,观察细胞形态并测定细胞存活率。结果表明,靶向exon5的sgRNA-2可成功敲除POR基因,得到LO2 POR^(KO)细胞株;成功构建表达POR重组蛋白的LO2 PORCO及LO2 POR^(OE)细胞株。对AFB_(1)处理后的各细胞存活率测定结果表明,相较于野生型LO2细胞43.66%±0.58%和27.90%±0.46%的存活率,LO2 POR^(KO)细胞存活率具有极显著性差异,均为100%(P<0.0001);LO2 PORCO细胞存活率仍有显著性差异,分别为57.07%±0.74%和42.54%±0.68%(P<0.05);LO2 POR^(OE)细胞存活率则显著降低,分别为24.58%±0.92%和17.99%±0.81%(P<0.01)。综上所述,本研究成功构建了LO2 POR^(KO)、LO2 PORCO、LO2 POR^(OE)细胞株,并以AFB_(1)染毒处理分别研究了各细胞株的存活率和细胞形态学变化,发现POR基因对AFB_(1)所致细胞毒性的影响巨大。研究结果为后续深入开展POR基因在AFB_(1)致毒性机理中的功能研究奠定了基础。 展开更多
关键词 POR CRISPR/Cas9 lo2细胞 AFB_(1)
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鲍内脏多糖的抗氧化活性 被引量:13
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作者 王姣 魏好程 +2 位作者 何传波 马英 熊何健 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第15期115-121,共7页
为研究鲍内脏多糖的抗氧化活性,采用体外抗氧化实验,评价不同化学组成的鲍内脏多糖对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基和·OH的清除作用,并以人体肝细胞LO2建立过氧化氢损伤模型,探讨鲍内脏多糖... 为研究鲍内脏多糖的抗氧化活性,采用体外抗氧化实验,评价不同化学组成的鲍内脏多糖对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基和·OH的清除作用,并以人体肝细胞LO2建立过氧化氢损伤模型,探讨鲍内脏多糖在细胞水平的抗氧化能力。结果表明:鲍内脏多糖CAVP、AVP1、AVP2具有良好的清除体外自由基能力。多糖CAVP、AVP1、AVP2清除DPPH自由基的半抑制率浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)分别为1.46、1.74、1.55 mg/m L。其清除·OH的IC50分别为7.14、15.27、8.11 mg/m L。另外,细胞模型法评价结果显示,鲍内脏多糖CAVP、AVP1、AVP2在质量浓度0.5~4.0 mg/m L条件下对肝细胞LO2的H2O2氧化损伤有保护作用,3种多糖样品均能显著提高LO2细胞存活率;CAVP(4.0 mg/m L)、AVP1(0.5 mg/m L)和AVP2(0.5 mg/m L)能极显著降低氧化损伤时乳酸脱氢酶的释放;CAVP能极显著提高LO2细胞内谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)(4.0 mg/m L)、过氧化氢酶(catalase,CAT)(0.5 mg/m L)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)(0.5 mg/m L)活力;AVP1质量浓度为4.0 mg/m L时,能极显著提高LO2细胞内GSH-Px、SOD活力,显著提高CAT活力;AVP2分别在质量浓度0.5、4.0 mg/m L时极显著提高LO2细胞内CAT活力;在质量浓度为4.0 mg/m L时,3种多糖样品对降低细胞氧化损伤产生的丙二醛(malondialdehyde,MDA)均有显著作用。因此,鲍内脏多糖是一类潜在的抗氧化物,可用于此类功能食品的开发。 展开更多
关键词 鲍内脏 多糖 抗氧化 lo2细胞
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