胰腺癌组织中Krüppel样转录因子9表达量与血清肿瘤标志物及病灶内细胞侵袭的相关关系 被引量：9

1

作者 罗洪 《海南医学院学报》 CAS 2017年第9期1241-1243,1247,共4页

目的:探讨胰腺癌组织中Krüppel样转录因子9(KLF9)表达量与血清肿瘤标志物及病灶内细胞侵袭的相关关系。方法:收集2012年6月-2016年5月间本院收治的胰腺癌患者58例,测定胰腺癌组织及癌旁组织中的KLF9表达量并进一步分为KLF9高表达组... 目的:探讨胰腺癌组织中Krüppel样转录因子9(KLF9)表达量与血清肿瘤标志物及病灶内细胞侵袭的相关关系。方法:收集2012年6月-2016年5月间本院收治的胰腺癌患者58例,测定胰腺癌组织及癌旁组织中的KLF9表达量并进一步分为KLF9高表达组、KLF9低表达组各29例。对比不同KLF9表达组患者的血清肿瘤标志物含量、肿瘤组织侵袭及抑癌基因表达量的差异。结果:胰腺癌组织中KLF9表达量显著低于癌旁组织(P<0.05);KLF9低表达组患者血清中肿瘤标志物CA19-9、CA242、CA50、CEA的含量高于KLF9高表达组患者(P<0.05);KLF9低表达组患者病灶内侵袭基因DKK-1、GSK3β、HOXB7的mRNA表达量高于KLF9高表达组患者,抑癌基因Bach2、SIRT3、DPC4、Kiss-1的mRNA表达量低于KLF9高表达组患者(P<0.05)。结论:胰腺癌组织中KLF9表达量降低,且KLF9表达量与肿瘤恶性程度呈负相关。 展开更多

关键词 胰腺癌 krüppel样转录因子9 肿瘤标志物 侵袭 抑癌基因

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Krüppel样转录因子12在结直肠癌患者肿瘤组织和血清中的表达及其意义 被引量：4

2

作者 焦洋 杨冬野 +3 位作者 杨晶 刘飞 康喜荣 张建生 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期1204-1208,共5页

目的:检测Krüppel样转录因子12(KLF12)蛋白在结直肠癌患者肿瘤组织和血清中的表达,并探讨其临床价值。方法:选择120例结直肠癌手术患者作为研究对象(病例组),收集结直肠癌组织和癌旁组织的石蜡标本,选择体检正常者100人作为对照组... 目的:检测Krüppel样转录因子12(KLF12)蛋白在结直肠癌患者肿瘤组织和血清中的表达,并探讨其临床价值。方法:选择120例结直肠癌手术患者作为研究对象(病例组),收集结直肠癌组织和癌旁组织的石蜡标本,选择体检正常者100人作为对照组。免疫组织化学染色检测结直肠癌组织和癌旁肠组织中KLF12、nm23、周期素E1(CyclinE1)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)和MMP-9蛋白的表达情况;ELISA法检测手术前和术后1个月时患者血清中KLF12水平并检测对照组受试者血清中KLF12水平。结果:结直肠癌组织中KLF12、CyclinE1、MMP-2和MMP-9蛋白阳性表达率高于癌旁组织(χ2=66.155,52.795,64.515,52.632;P<0.001),nm23蛋白阳性表达率低于癌旁组织(χ2=13.019,P<0.001)。Spearman相关分析,结直肠癌组织中KLF12蛋白与MMP-2和MMP-9蛋白表达水平呈正相关关系(r=0.396 3,P<0.001;r=0.326 4,P<0.001),与nm23蛋白表达水平呈负相关关系(r=-0.227 3,P=0.013)。病例组结直肠癌患者手术前血清中KLF12蛋白表达水平高于对照组,血清中KLF12蛋白表达水平受试者工作特征曲线(ROC)的最佳cut-off值为3.795μg·L^(-1),曲线下面积为0.834,其对诊断结直肠癌的敏感度和特异度分别为60.8%和94.0%。病例组结直肠癌患者手术后血清中KLF12蛋白表达水平降低,但仍高于对照组(t=2.708,P=0.007);结直肠癌组织中KLF12蛋白表达水平与血清中KLF12蛋白表达水平呈正相关关系(r=0.406 9,P<0.001)。淋巴结转移程度为N3的(N3组)患者血清中KLF12水平最高,N0组患者最低(F=21.731,P<0.001)。结论:KLF12蛋白可能参与了结直肠癌的侵袭转移,检测患者血清中KLF12蛋白表达水平可能对判断病情和预测淋巴结转移有价值。 展开更多

关键词 结直肠肿瘤 krüppel样转录因子12 侵袭 转移 受试者工作特征曲线

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Krüppel样转录因子8(KLF8)的结构及功能 被引量：7

3

作者 万伟峰 朱继 +2 位作者 方升 籍新潮 吕国伟 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期305-309,共5页

Krüppel样转录因子8(Krüppel-like factor 8,KLF8)是KLFs家族中的一员.KLF8在羧基端含有3个保守的C2H2锌指结构域,用于与DNA结合.KLF8的转录受粘着斑激酶(focal adhesionkinase,FAK)、KLF1(erythroid krüppel-like facto... Krüppel样转录因子8(Krüppel-like factor 8,KLF8)是KLFs家族中的一员.KLF8在羧基端含有3个保守的C2H2锌指结构域,用于与DNA结合.KLF8的转录受粘着斑激酶(focal adhesionkinase,FAK)、KLF1(erythroid krüppel-like factor1)、KLF3(basic Krüppel-like factor)的调控.类泛素化是KLF8翻译后主要的修饰方式.KLF8在氨基端含有特定的PVALS/T基序,与辅助抑制因子C末端结合蛋白(C-terminal binding protein,CtBP)相互作用,抑制调节区含CACCC元件的基因表达.此外,还可以通过招募辅助激活因子p300和p300/CBP相关因子(P/CAF)辅助激活靶基因的表达.同时,KLF8在细胞周期循环、细胞侵袭和上皮-间质转化(epithelial to mesenchymal transition,EMT)、细胞致癌性转化及肿瘤发生发展中发挥作用. 展开更多

关键词 krüppel样转录因子8(KLF8) 上皮-间质转化(EMT) 粘着斑激酶(FAK) 细胞周期素D1

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亲环素A和Krüppel样转录因子2及内皮型一氧化氮合酶在大鼠动脉粥样硬化病变过程中的表达变化 被引量：5

4

作者 黎红华 盛冲霄 《中国脑血管病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期245-249,共5页

目的观察大鼠动脉粥样硬化病变过程中血管壁亲环素A(Cy PA)、Krüppel样转录因子2(KLF2)、内皮型一氧化氮合酶(e NOS)的表达变化。方法将雄性Wistar大鼠32只按数字表法随机分为对照组及动脉粥样硬化8、12、15周组,每组8只。给予动... 目的观察大鼠动脉粥样硬化病变过程中血管壁亲环素A(Cy PA)、Krüppel样转录因子2(KLF2)、内皮型一氧化氮合酶(e NOS)的表达变化。方法将雄性Wistar大鼠32只按数字表法随机分为对照组及动脉粥样硬化8、12、15周组,每组8只。给予动脉粥样硬化组高脂饲料喂养,并给予维生素D3注射液60万IU/kg一次性腹腔注射;给予对照组大鼠基础饲料喂养。在喂养第8、12、15周时处死大鼠,分离腹主动脉,行苏木素-伊红染色,免疫组化法检测动脉壁CyPA、KLF2、eNOS的表达水平。结果随着动脉粥样硬化病变进展,对照组以及动脉粥样硬化8、12、15周组大鼠分别呈现出血管正常结构、内皮细胞破坏、平滑肌细胞增生、粥样斑块形成以及钙化斑块形成等不同的特征。对照组与动脉粥样硬化8、12、15周组间血管壁CyPA、KLF2、eNOS的表达水平差异均有统计学意义(CyPA:0.0037±0.0018、0.0276±0.0090、0.0526±0.0129、0.1080±0.0388;KLF2:0.0932±0.0331、0.0415±0.0076、0.0207±0.0059、0.0014±0.0003;eNOS:0.0358±0.0185、0.0148±0.0080、0.0049±0.0025、0.0037±0.0026;F值分别为36.395、42.108、21.255,均P<0.05),且组间CyPA的表达呈增高趋势,组间两两比较差异有统计学意义(均P<0.05);KLF2表达水平呈进行性下降趋势,组间两两比较差异有统计学意义(均P<0.05);eNOS表达动脉粥样硬化12周组与15周组差异无统计学意义,其他组间差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论伴随动脉粥样硬化病变进展,CyPA的表达进行性增高,KLF2、eNOS表达进行性下降。CyPA可能是致动脉粥样硬化病变的途径之一。 展开更多

关键词 动脉粥样硬化 亲环素A krüppel样转录因子类 一氧化氮合酶 krüppel样转录因子2

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Krüppel样转录因子2的功能 被引量：7

5

作者 荆堂堂 倪晋泽 +1 位作者 赵玉菲 朱亮 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期376-384,共9页

Krüppel样转录因子2(Krüppel-like transcription factor 2,KLF2)作为KLF家族(KLFs)中重要一员,高表达于血管内皮细胞,参与节血管张力、抗炎、抗血栓和血管形成/血管新生等重要过程,对维持血管稳态至关重要.对KLF家族、KLF2... Krüppel样转录因子2(Krüppel-like transcription factor 2,KLF2)作为KLF家族(KLFs)中重要一员,高表达于血管内皮细胞,参与节血管张力、抗炎、抗血栓和血管形成/血管新生等重要过程,对维持血管稳态至关重要.对KLF家族、KLF2结构特点、KLF2的血流依赖性调节、KLF2在血管内皮以及非血管内皮的作用进行综述. 展开更多

关键词 KLF2/krüppel样转录因子2 内皮细胞 功能

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Sp1/Krüppel样因子的研究进展 被引量：16

6

作者 熊倩 阮修艳 方向东 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期531-538,共8页

Sp1/Krüppel样因子(Sp1-like and Krüppel-like factors,Sp1/KLFs)是一组与真核细胞转录调控密切相关的锌指蛋白。Sp1/KLFs的羧基末端高度保守,含有3个串联的Cys2His2锌指结构,用于结合DNA;其氨基末端在不同的家族成员间存在... Sp1/Krüppel样因子(Sp1-like and Krüppel-like factors,Sp1/KLFs)是一组与真核细胞转录调控密切相关的锌指蛋白。Sp1/KLFs的羧基末端高度保守,含有3个串联的Cys2His2锌指结构,用于结合DNA;其氨基末端在不同的家族成员间存在较大差异,主要是通过结合辅助因子发挥转录调控作用。Sp1/KLFs的表达具有组织、细胞分布以及发育时期的特异性,它们通过调控多种富含GC或CACCC的启动子的基因的表达,参与细胞增殖、分化、凋亡和肿瘤发生、发展等多种生理、病理过程。文章综述了Sp1/KLFs的结构特征、作用机制及生物学功能。 展开更多

关键词 Sp1/krüppel样因子 锌指区 转录调控

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Krüppel样因子7(KLF7)生物学功能研究进展 被引量：3

7

作者 孙婴宁 王维禹 +3 位作者 张志威 邵淑丽 李波 王宁 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2017年第11期972-980,共9页

Krüppel样因子7(Krüppel-like factor 7,KLF7)是Sp1样或Krüppel样转录因子家族(specificity protein/Krüppel-like factor,SP/KLF)成员,在多种生物学过程中发挥重要作用,该基因完全敲除小鼠出生时大部分死亡.KLF7... Krüppel样因子7(Krüppel-like factor 7,KLF7)是Sp1样或Krüppel样转录因子家族(specificity protein/Krüppel-like factor,SP/KLF)成员,在多种生物学过程中发挥重要作用,该基因完全敲除小鼠出生时大部分死亡.KLF7是肥胖症、Ⅱ型糖尿病、心血管疾病、癌症、面部发育异常、氧化磷酸化缺陷和Ⅰ型自身免疫性胰腺炎等疾病的相关基因.功能分析显示,KLF7是神经系统发育和脂肪形成的关键因子,同时也在肌肉再生和造血作用中发挥功能.在SP/KLF家族中,KLF7研究相对较少,大部分作用机制尚不清楚.本文从结构和功能方面详述了KLF7的最新研究进展,为其和KLFs家族深入研究提供重要的科学依据. 展开更多

关键词 krüppel样因子7(KLF7) 转录因子 神经系统 脂肪形成 Ⅱ型糖尿病

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转录因子Klfs家族影响肝细胞癌发生发展的机制研究进展 被引量：3

8

作者 董笑 李琦 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期348-351,共4页

肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是我国常见的恶性肿瘤之一,死亡率高,其发生与发展的具体分子机制尚不明确。Krüppel样因子家族(Klfs)是具有锌指结构的高度保守的转录因子家族,共包括17个家族成员。近年来,关于Klfs与肝癌... 肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是我国常见的恶性肿瘤之一,死亡率高,其发生与发展的具体分子机制尚不明确。Krüppel样因子家族(Klfs)是具有锌指结构的高度保守的转录因子家族,共包括17个家族成员。近年来,关于Klfs与肝癌发病机制的研究不断深入,发现Klf2、Klf4、Klf5等家族成员参与肝癌细胞的增殖、分化和浸润转移等过程。本文就Klfs家族成员的功能以及在肝癌发生发展中的作用机制进行综述。 展开更多

关键词 转录因子 krüppel样因子 肝细胞癌 抑癌基因 癌基因

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转录因子KLF2在血管内皮中的功能与调控研究进展

9

作者 宋一萌 黎梦涵 +2 位作者 王大为 李肖霞 朱毅 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期445-448,共4页

KLF样转录因子(krüppel-like transcription factors)参与多种基因表达的转录调控过程。KLF家族到目前共发现17个成员,分别命名为KLF1～KLF17。KLF2作为该家族中重要的成员,参与T细胞分化和脂肪分化等重要过程。近年来研究证实KLF... KLF样转录因子(krüppel-like transcription factors)参与多种基因表达的转录调控过程。KLF家族到目前共发现17个成员,分别命名为KLF1～KLF17。KLF2作为该家族中重要的成员,参与T细胞分化和脂肪分化等重要过程。近年来研究证实KLF2在保护内皮细胞功能方面发挥重要的作用,已经成为心血管领域中研究的热点之一。本文拟KLF2的特性、调控机制及在血管内皮中的功能研究进展作一综述。 展开更多

关键词 krüppel样转录因子 转录调控 血管内皮

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结直肠癌中TXNIP和KLF9的表达对患者临床特征及预后的影响

10

作者 杨婕琳 王晓媛 武雪亮 《中国医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第11期1005-1011,共7页

目的探讨结直肠癌(CRC)组织中硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)和Krüppel样转录因子9(KLF9)的表达对患者临床特征及预后的影响。方法选取2017年1月至2020年12月在我院初诊为CRC并手术治疗的患者90例,收集手术切除的癌组织及配对癌旁... 目的探讨结直肠癌(CRC)组织中硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)和Krüppel样转录因子9(KLF9)的表达对患者临床特征及预后的影响。方法选取2017年1月至2020年12月在我院初诊为CRC并手术治疗的患者90例,收集手术切除的癌组织及配对癌旁组织。采用免疫组织化学法检测组织中TXNIP、KLF9蛋白表达水平,用Spearman法分析CRC组织中TXNIP、KLF9表达的相关性,分析CRC组织TXNIP、KLF9蛋白表达与患者临床特征的关系,用Kaplan-Meier生存曲线分析CRC组织TXNIP、KLF9蛋白表达与总生存率的相关性,用Cox回归分析CRC患者预后影响因素。结果直肠腺癌(READ)TXNIP、KLF9 mRNA表达水平明显低于正常组织(P<0.05),且TXNIP、KLF9不同表达水平与READ患者总生存率无关(P>0.05)。CRC癌组织TXNIP阳性表达率(32.22%)、KLF9阳性表达率(37.78%)明显低于癌旁组织(73.33%、76.67%)(P<0.05)。Spearman分析发现,CRC组织中TXNIP与KLF9阳性表达率显著相关(r=0.519,P<0.05);Spearman分析结果显示,TXNIP与KLF9表达呈正相关(P<0.05)。临床分期为Ⅲ期、淋巴结发生转移的患者TXNIP、KLF9阳性表达率低于Ⅰ~Ⅱ期、淋巴结无转移者(P<0.05)。Kaplan-Meier分析显示,TXNIP阳性表达患者总生存率(89.66%)高于阴性表达患者(67.21%),KLF9阳性表达患者总生存率(88.24%)高于阴性表达患者(66.07%)(P<0.05)。多因素Cox回归发现,TNM分期为Ⅲ期(HR=2.752,95%CI:1.531~4.944)、TXNIP表达阴性(HR=2.036,95%CI:1.254~3.302)、KLF9表达阴性(HR=1.862,95%CI:1.236~2.804)是预后危险因素(P<0.05)。结论TXNIP、KLF9在CRC组织中低表达,且与TNM分期、淋巴结转移及较差的生存率有关。 展开更多

关键词 结直肠癌 硫氧还蛋白相互作用蛋白 krüppel样转录因子9 临床特征 预后

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KLF7通过抑制缺氧诱导因子1α转录影响肉鸡脂肪组织发育 被引量：4

11

作者 金钊 邵淑丽 +6 位作者 谭茗 李金炜 贾炳豪 王维禹 周瑶 崔婷婷 孙婴宁 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期363-371,共9页

Krüppel样转录因子7(Krüppel-like factor 7,KLF7)是脂肪形成的负调控因子,而缺氧诱导因子1(hypoxia-inducible factor 1,HIF1)促进缺氧诱导的哺乳动物脂肪组织发育。本实验室前期利用ChIP-seq技术,发现在鸡的缺氧诱导因子1α... Krüppel样转录因子7(Krüppel-like factor 7,KLF7)是脂肪形成的负调控因子,而缺氧诱导因子1(hypoxia-inducible factor 1,HIF1)促进缺氧诱导的哺乳动物脂肪组织发育。本实验室前期利用ChIP-seq技术,发现在鸡的缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor 1 alpha,HIF1α)基因上游存在1个KLF7的结合峰,提示KLF7可能调控HIF1α基因转录。为此,本研究首先利用ChIP-PCR技术验证ChIP-seq结果,发现KLF7能够与HIF1α基因5′侧翼区结合。双荧光素酶报告基因与qRT-PCR结果显示,过表达KLF7能够显著下调HIF1α(-4432/-4182)的荧光素酶报告基因活性(P<0.01),抑制HIF1α基因表达。与野生型质粒相比,将生物信息学预测的KLF7结合基序"TGCGCAGCAA"(-4300/-4290)缺失突变后,HIF1α(-4432/-4182)报告基因活性显著增强(P<0.01)。此外,选取第19代1~7周龄东北农业大学高、低脂双向选择品系肉鸡(Northeast Agricultural University broiler lines divergently selected for abdominal fat content,NEAUHLF)作为实验材料,利用qRT-PCR检测HIF1α基因在肉鸡腹部脂肪组织中的表达规律。结果显示,HIF1α在1~7周龄高脂系肉鸡中的相对表达量均高于低脂系,提示HIF1α对鸡脂肪组织发育具有促进作用。在永生化鸡前体脂肪细胞系(immortalized chicken preadipocyte cell line,ICP1)诱导分化过程中,HIF1α相对表达量逐渐升高。综上所述,HIF1α是转录因子KLF7的一个靶基因,KLF7可能通过抑制HIF1α基因转录参与鸡脂肪组织发育过程。 展开更多

关键词 鸡 krüppel样转录因子7 缺氧诱导因子1Α 转录 脂肪组织

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肾透明细胞癌尿液中锌指蛋白转录因子4的表达及临床意义 被引量：4

12

作者 杨林 熊波 +3 位作者 罗军 王洪志 张成果 文爽 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期209-212,共4页

目的:探讨肾透明细胞癌尿液脱落细胞中锌指蛋白转录因子4(Krüppel-like factor 4,KLF4)的表达及临床意义。方法:分别收集58例术后病检证实为肾透明细胞癌的肾癌患者及40例健康志愿者尿液。采用RT-PCR技术检测KLF4 mRNA的表达率,Wes... 目的:探讨肾透明细胞癌尿液脱落细胞中锌指蛋白转录因子4(Krüppel-like factor 4,KLF4)的表达及临床意义。方法:分别收集58例术后病检证实为肾透明细胞癌的肾癌患者及40例健康志愿者尿液。采用RT-PCR技术检测KLF4 mRNA的表达率,Western blot检测KLF4蛋白的表达率;分析KLF4因子的表达与肾透明细胞癌患者临床病理参数的关系。结果:肾透明细胞癌患者尿液脱落细胞KLF4表达明显下调,肾透明细胞癌组KLF4表达阴性率为87.9%(51/58),表达阳性率仅12.1%;而对照组KLF4表达阴性率为7.50%(3/40),表达阳性率为92.5%,2组表达阴性率比较有统计学差异(P<0.05)。肾癌患者中KLF4表达下调与患者年龄(χ2=0.369,P=0.544)、性别(χ2=0.705,P=0.401)、肿瘤大小(χ2=3.481,P=0.062)、肾透明细胞癌患者的临床分期(χ2=0.762,P=0.859)、组织分化程度(χ2=0.064,P=0.996)、淋巴结转移(χ2=0.301,P=0.583)均无关。结论:检测尿液KLF4因子可能有助于肾透明细胞癌的诊断及术后监测。RT-PCR为临床可行的检测方法。 展开更多

关键词 肾透明细胞癌 krüppel样转录因子类 早期诊断 术后监测 RT-PCR

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敲低线粒体转录因子A(TFAM)通过增强IL-6表达促进人前列腺癌细胞去势抵抗性增殖 被引量：4

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作者 杨帆 刘静 +2 位作者 袁冲 张波 袁建林 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期1111-1119,共9页

目的探索线粒体转录因子A(TFAM)表达下调对前列腺癌细胞去势抵抗性增殖的影响及其机制。方法免疫组织化学染色法检测前列腺癌组织TFAM的表达,分析TFAM在雄激素抵抗性前列腺癌和雄激素敏感性前列腺癌组织中的表达差异及其对雄激素抵抗性... 目的探索线粒体转录因子A(TFAM)表达下调对前列腺癌细胞去势抵抗性增殖的影响及其机制。方法免疫组织化学染色法检测前列腺癌组织TFAM的表达,分析TFAM在雄激素抵抗性前列腺癌和雄激素敏感性前列腺癌组织中的表达差异及其对雄激素抵抗性前列腺癌进展的影响。采用小干涉RNA(siRNA)敲低雄激素敏感性LNCaP前列腺癌细胞中TFAM的表达,四唑氮衍生物MTS细胞增殖试验及集落形成实验检测TFAM对LNCaP细胞在雄激素剥夺培养基中存活及增殖的影响;实时定量PCR检测LNCaP细胞白细胞介素6(IL-6)的mRNA表达,Western blot法和ELISA检测TFAM干涉后,前列腺癌细胞IL-6的分泌。siRNA干涉IL-6表达后,MTS及集落形成实验检测IL-6是否介导TFAM下调诱导的LNCaP细胞去势抵抗性增殖。线粒体DNA(mtDNA)标记试剂PicoGreen和线粒体标记试剂MitoTracker共染色及实时定量PCR检测TFAM干涉能否诱导mtDNA从线粒体外溢,DNA酶Ⅰ去除外溢至细胞质的mtDNA或者利用siRNA干涉Toll样受体9(TLR9)表达,确定IL-6表达及分泌是否受到影响。结果与雄激素敏感性前列腺癌组织相比,在去势抵抗性前列腺癌组织中TFAM的表达显著降低,且TFAM表达越低的前列腺癌患者其进展为去势抵抗性前列腺癌的速度越快;敲低TFAM表达后,LNCaP细胞在雄激素剥夺性培养基中的存活及增殖能力显著增强的同时,IL-6的表达及分泌显著提高;敲低IL-6表达可显著抑制TFAM干涉导致的雄激素抵抗性增殖。敲低TFAM可导致LNCaP细胞的mtDNA外溢至细胞质;DNA酶Ⅰ处理或敲低TLR9可显著抑制TFAM干涉导致的IL-6表达及分泌升高。结论敲低TFAM表达通过增强IL-6表达促进前列腺细胞的去势抵抗性增殖。 展开更多

关键词 线粒体转录因子A(TFAM) 去势抵抗性前列腺癌 白细胞介素6(IL-6) 线粒体DNA(mtDNA) Toll样受体9(TLR9)

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Sublytic C5b-9上调KLF5促进Thy-1肾炎大鼠肾小球系膜细胞生成IL-23的作用

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作者 刘玉 应帅 +4 位作者 罗灿 李玉 荣灿 王迎伟 邱文 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2024年第9期1198-1206,共9页

目的:研究亚溶解型C5b-9(sublytic C5b-9)上调转录因子Krüppel样因子5(Krüppel-like factor 5,KLF5)促进Thy-1肾炎(Thy-1 nephritis,Thy-1N)大鼠肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cell,GMC)产生炎症因子白细胞介素(interl... 目的:研究亚溶解型C5b-9(sublytic C5b-9)上调转录因子Krüppel样因子5(Krüppel-like factor 5,KLF5)促进Thy-1肾炎(Thy-1 nephritis,Thy-1N)大鼠肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cell,GMC)产生炎症因子白细胞介素(interleukin,IL)-23的作用。方法:(1)建立大鼠Thy-1N模型和体外培养大鼠GMC,用Western blot(WB)检查Thy-1N大鼠肾组织和受sublytic C5b-9刺激的GMC中KLF5和IL-23的表达。(2)分别将KLF5过表达质粒(pIRES2-KLF5)或KLF5小干扰质粒(shKLF5)转染GMC,通过实时荧光定量PCR和WB检测KLF5和IL-23的mRNA和蛋白水平。(3)将IL-23全长启动子荧光素酶报告基因质粒(p GL3-IL-23-FL)转染GMC,再给予sublytic C5b-9刺激,或将p GL3-IL-23-FL与pIRES2-KLF5或shKLF5共转染GMC,用荧光素酶报告基因实验检测IL-23启动子活性的变化。(4)将慢病毒(lentivirus,LV)包装的LV-shKLF5和LV-shCTR行肾动脉灌注术导入大鼠肾组织,经小动物脏器可见光三维成像和冰冻切片观察GFP表达,证实LV-shCTR在肾组织中富集效率。之后再复制大鼠Thy-1N,用WB检查肾组织中KLF5和IL-23的蛋白表达。结果:(1)Thy-1N大鼠的肾组织和sublytic C5b-9刺激的GMC中,KLF5和IL-23的表达均显著升高,且KLF5的表达高峰稍早于IL-23。(2)在GMC中过表达或敲低KLF5能分别引起IL-23表达的升高或降低。(3)Sublytic C5b-9刺激或KLF5过表达均可增加GMC中IL-23启动子的活性,但敲低KLF5后可明显下调由sublytic C5b-9刺激GMC诱导的IL-23启动子活性。(4)敲低Thy-1N大鼠肾组织中KLF5的表达后,其肾组织中IL-23的表达水平明显降低。结论:大鼠Thy-1N发病早期,sublytic C5b-9刺激GMC后可通过上调KLF5促进IL-23基因的转录与表达。 展开更多

关键词 THY-1肾炎 亚溶解型C5b-9 肾小球系膜细胞 krüppel样因子5 白细胞介素-23

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骨髓间充质干细胞调节小胶质细胞极化减轻SNI大鼠神经病理性疼痛

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作者 苗杨 宗宁 +2 位作者 何垒 董道松 郭欣欣 《中国医科大学学报》 北大核心 2025年第5期407-413,共7页

目的探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)调节小胶质细胞极化对坐骨神经分支选择性损伤(SNI)大鼠神经病理性疼痛的作用及其机制。方法将50只SD大鼠随机分为sham组(大鼠仅暴露坐骨神经而不结扎)、SNI组(SNI模型建立)、BMSCs组[大鼠SNI造模后连续... 目的探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)调节小胶质细胞极化对坐骨神经分支选择性损伤(SNI)大鼠神经病理性疼痛的作用及其机制。方法将50只SD大鼠随机分为sham组(大鼠仅暴露坐骨神经而不结扎)、SNI组(SNI模型建立)、BMSCs组[大鼠SNI造模后连续3 d经鞘内注射BMSCs(1×10^(6))]、BMSCs+sh-NC组[大鼠SNI造模后连续3 d经鞘内注射BMSCs(1×10^(6)),同时鞘内注射敲减对照腺病毒(2.5×10^(7) IU)]和BMSCs+sh-YY1组[大鼠SNI造模后连续3 d经鞘内注射BMSCs(1×10^(6)),同时鞘内注射敲减YY1腺病毒(2.5×10^(7) IU)],每组10只。采用机械刺激缩足反射阈值(PWT)和热缩足潜伏期(PWTL)评价大鼠神经病理性疼痛程度;免疫荧光染色检测大鼠脊髓组织中CD86、CD206、iNOS和Arg1蛋白阳性率;Western blotting检测大鼠脊髓组织中YY1和KLF4表达。结果与sham组比较,SNI组大鼠PWTL和PWT值降低(均P<0.05);脊髓组织中iNOS和CD86蛋白阳性率增加,CD206和Arg1蛋白阳性率降低,YY1和KLF4表达降低(均P<0.05)。与SNI组比较,BMSCs组和BMSCs+sh-NC组大鼠PWTL和PWT值增加(均P<0.05);脊髓组织中CD86蛋白阳性率降低,CD206蛋白阳性率增加,YY1和KLF4表达增加(均P<0.05);BMSCs组大鼠脊髓组织中iNOS蛋白阳性率降低,Arg1蛋白阳性率增加。与BMSCs组和BMSCs+sh-NC组比较,BMSCs+sh-YY1组大鼠PWTL和PWT值降低(均P<0.05);脊髓组织中CD86蛋白阳性率增加,CD206蛋白阳性率降低,YY1和KLF4表达降低(均P<0.05)。结论SNI大鼠鞘内注射BMSCs可促进脊髓中小胶质细胞M2极化,缓解神经病理性疼痛,其机制可能与上调YY1介导的KLF4表达有关。 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 神经病理性疼痛 小胶质细胞极化 转录因子阴阳1 krüppel样因子4

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KLF4转录水平负调控miR-106a表达对人胃癌细胞BGC-823侵袭能力的影响 被引量：2

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作者 朱萌 张宁 +2 位作者 和水祥 张丹 张志勇 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期356-361,共6页

目的探讨转录因子kruppel样因子4(Krüppel-like factor 4, KLF4)对微小RNA-106a(miR-106a)表达的调控及其相互作用对人胃癌细胞侵袭能力的影响。方法通过转录因子结合位点数据库JASPAR检索与miR-106a启动子区结合的转录因子KLF4。... 目的探讨转录因子kruppel样因子4(Krüppel-like factor 4, KLF4)对微小RNA-106a(miR-106a)表达的调控及其相互作用对人胃癌细胞侵袭能力的影响。方法通过转录因子结合位点数据库JASPAR检索与miR-106a启动子区结合的转录因子KLF4。构建KLF4过表达载体(KLF4-pcDNA)和miR-106a报告基因(pmiR-106a-WT/MUT-luc),双荧光素酶报告基因检测KLF4对miR-106a启动子活性的影响。收集人胃癌和癌旁石蜡包埋-甲醛固定(formalin-fixed paraffin-embedded, FFPE)标本各40例,实时定量PCR和免疫组织化学法检测KLF4表达。人胃癌细胞株BGC-823培养并按miR-106a mimic组、mimic NC组、KLF4+pcDNA组、pcDNA basic组分别进行处理,Transwell法检测各组胃癌细胞侵袭能力变化。结果双荧光素酶报告基因检测显示KLF4-pcDNA具有拮抗miR-106a启动子活性的作用,表现为pmiR-106a-WT-luc荧光素酶活性被抑制(pmiR-106a-WT+pcDNA-basic与pmiR-106a-WT+pcDNA-KLF4比较,P<0.001),但对pmiR-106a-MUT-luc荧光素酶活性影响不明显(pmiR-106a-MUT+pcDNA-basic与pmiR-106a-MUT+pcDNA-KLF4比较,P>0.05)。FFPE样本显示KLF4在胃癌组织中的相对表达量为0.69±0.59,与癌旁组织相比,差异有统计学意义(P<0.001),且与胃癌的细胞分化程度、淋巴转移和浸润深度相关(P<0.05);KLF4阳性表达主要位于胃黏膜上皮细胞核及胞质。Transwell实验表明各处理组胃癌细胞的穿膜数量不全相同(P<0.001),miR-106a mimic组为89.00±14.85,mimic NC组为50.90±17.94,KLF4+pcDNA组为37.70±12.60,pcDNA basic组为66.20±3.19。结论转录因子KLF4与miR-106a启动子区至少存在体外的直接结合,可能通过在上游转录水平负调控miR-106a表达而参与影响胃癌细胞的侵袭转移进程。 展开更多

关键词 胃癌 krüppel样因子4(KLF4) 微小RNA-106a(miR-106a) 转录因子 启动子 侵袭

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尖锐湿疣患者外周血淋巴细胞Foxp3与树突状细胞TLR9、IRF-7水平变化特征 被引量：6

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作者 宣晓梅 陈立荣 +2 位作者 林琳 石丽平 董伟兰 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第20期2012-2016,共5页

目的探讨尖锐湿疣患者外周血淋巴细胞(peripheral blood lymphocyte,PBLC)的转录因子叉头蛋白(forkheadbox protein 3, FOXP3)与树突状细胞(dendritic cells, DC)的Toll样受体9(Toll-like receptor 9, TLR9)、干扰素调节因子(interferon... 目的探讨尖锐湿疣患者外周血淋巴细胞(peripheral blood lymphocyte,PBLC)的转录因子叉头蛋白(forkheadbox protein 3, FOXP3)与树突状细胞(dendritic cells, DC)的Toll样受体9(Toll-like receptor 9, TLR9)、干扰素调节因子(interferon regulation factor, IRF-7)水平的变化特征。方法选取本院2017年2月至2018年2月收治的120例尖锐湿疣患者为疾病组,另选取同期健康体检患者120例作为健康组,比较两组患者的DC的TLR9、IRF-7水平、PBLC的Foxp3水平,以及PBLC的Foxp3与DC的TLR9、IRF-7水平的特征。结果疾病组患者DC的TLR9、IRF-7水平显著高于对照组,疾病组复发患者DC的TLR9、IRF-7水平显著高于初发患者;疾病组PBLC的Foxp3 mRNA、PD-1、PD-L1、CD8+水平高于健康组,疾病组PBLC的RORγt mRNA、CD4+水平低于健康组,且疾病组中,复发患者的Foxp3 mRNA、PD-1、PD-L1、CD8+水平高于初发患者,RORγt mRNA、CD4+水平低于健康组,患者PBLC的Foxp3与DC的TLR9、IRF-7的变化存在正相关关系。结论尖锐湿疣患者外周血淋巴细胞Foxp3与树突状细胞TLR9、IRF-7变化有关,可能共同作为刺激分子参与疾病的进展。 展开更多

关键词 转录因子叉头蛋白 干扰素调节因子 TOLL样受体9 树突细胞 尖锐湿疣

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GBP2通过诱导巨噬细胞极化及上皮细胞转化促进硅肺进展的机制研究

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作者 陈茂茜 吴静 +5 位作者 李宣 周家伟 刘亚锋 郭健强 成安琪 胡东 《细胞与分子免疫学杂志》 北大核心 2025年第7期611-619,共9页

目的本研究旨在探究鸟苷酸结合蛋白2(GBP2)在硅肺纤维化过程中的表达情况、表型变化及作用机制。方法通过免疫组织化学染色和免疫荧光检测硅肺组织中GBP2的表达和定位。构建体外细胞模型,运用Western blot、实时定量PCR等方法探究二氧化... 目的本研究旨在探究鸟苷酸结合蛋白2(GBP2)在硅肺纤维化过程中的表达情况、表型变化及作用机制。方法通过免疫组织化学染色和免疫荧光检测硅肺组织中GBP2的表达和定位。构建体外细胞模型,运用Western blot、实时定量PCR等方法探究二氧化硅(CS)刺激后GBP2在不同细胞系中的功能。通过Western blot法明确GBP2在不同细胞系中的作用机制。结果GBP2在硅肺患者的肺组织中高表达,免疫组织化学染色和免疫荧光染色发现GBP2定位于巨噬细胞和上皮细胞中。体外细胞实验表明CS刺激THP-1细胞通过GBP2激活c-Jun通路,促进炎症因子分泌并促使巨噬细胞M2型极化的发生,在上皮细胞中GBP2通过上调Krüppel样转录因子8(KLF8),促进上皮-间充质转化(EMT)的发生。结论GBP2不但在巨噬细胞中激活c-Jun促进炎症因子产生以及发生巨噬细胞M2型极化,而且在上皮细胞中激活转录因子KLF8发生EMT,共同促进硅肺的进展。 展开更多

关键词 巨噬细胞 硅肺 鸟苷酸结合蛋白2(GBP2) C-JUN krüppel样转录因子8(KLF8) 上皮-间充质转化(EMT)

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人TLR9真核表达载体在HEK293T细胞中的表达 被引量：1

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作者 丁国富 吴翀 +3 位作者 蒋为薇 李军 罗平 周红 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第13期1246-1248,共3页

目的构建人Toll样受体9(TLR9)全长序列与绿色荧光蛋白GFP的重组质粒,观察融合蛋白在HEK293T细胞内表达并检测其应答CpG DNA的能力。方法PCR法扩增TLR9全长,限制性内切酶BamHⅠ和XhoⅠ双酶切绿色荧光真核表达质粒pcDNA3/GFP和TLR9全长,... 目的构建人Toll样受体9(TLR9)全长序列与绿色荧光蛋白GFP的重组质粒,观察融合蛋白在HEK293T细胞内表达并检测其应答CpG DNA的能力。方法PCR法扩增TLR9全长,限制性内切酶BamHⅠ和XhoⅠ双酶切绿色荧光真核表达质粒pcDNA3/GFP和TLR9全长,构建重组质粒pcDNA3-TLR9/GFP,脂质体转染人胚肾293T细胞(HEK293T),荧光显微镜下观察绿色荧光融合蛋白在细胞内的表达与分布;将重组质粒与NF-κB荧光素酶报告质粒pGL2-luc共转染HEK293T细胞,CpG DNA(10mg/L)刺激后,化学发光法检测细胞内荧光素酶活性。结果成功构建pcDNA3-TLR9/GFP质粒,经酶切及测序分析证实载体构建正确;转染细胞后,在荧光显微镜下观察到TLR9/GFP融合蛋白大量表达;重组质粒与pGL2-luc共转染细胞,应用荧光报告系统检测显示,CpG DNA刺激后荧光素酶活性显著高于生理盐水对照组(P<0.01)。结论重组质粒pcDNA3-TLR9/GFP在HEK293T细胞中表达的TLR9/GFP绿色荧光融合蛋白,能够识别CpG DNA并诱导增加胞内NF-κB转录活性。 展开更多

关键词 TOLL样受体9 克隆 真核表达 核转录因子-ΚB 荧光素酶

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KLF9沉默对高糖刺激诱导的内皮细胞损伤的影响

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作者 姚瑞 孔令尧 +4 位作者 张兆陟 杜家琦 李亚彭 赵国俊 张彦周 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2022年第4期445-449,共5页

目的:探讨Krüppel样因子9(KLF9)对高糖刺激下内皮细胞损伤的影响。方法:人脐静脉内皮细胞(HUVEC)分为4组,空白对照组不处理,其他3组分别给予高糖(33.5 mmol/L葡萄糖)刺激12、24、48 h,采用qRT-PCR检测细胞中KLF9 mRNA表达水平。另... 目的:探讨Krüppel样因子9(KLF9)对高糖刺激下内皮细胞损伤的影响。方法:人脐静脉内皮细胞(HUVEC)分为4组,空白对照组不处理,其他3组分别给予高糖(33.5 mmol/L葡萄糖)刺激12、24、48 h,采用qRT-PCR检测细胞中KLF9 mRNA表达水平。另取HUVEC分为3组,ScRNA组(转染空载体ScRNA12 h后用5.5 mmol/L葡萄糖处理48 h)、HG-ScRNA组(转染空载体12 h后用33.5 mmol/L葡萄糖处理48 h)和HG-KLF9 siRNA组(转染KLF9 siRNA 12 h后用33.5 mmol/L葡萄糖处理48 h),采用CCK-8法检测各组细胞活力,TUNEL染色检测细胞凋亡,ELISA法检测细胞中炎症因子水平,氧化应激因子检测试剂盒检测细胞氧化应激水平,免疫荧光染色检测NF-E2相关因子2(NRF2)表达及核转位水平。结果:与空白对照组相比,高糖刺激24、48 h后细胞中KLF9 mRNA表达水平升高(P<0.05)。与ScRNA组相比,HG-ScRNA组细胞中炎症因子(TNF-α、IL-1和IL-6)水平增高,细胞活性氧和丙二醛含量升高,超氧化物歧化酶2以及谷胱甘肽还原酶活性降低,细胞增殖能力降低,凋亡增多,NRF2表达以及核转位水平降低(P<0.05);与HG-ScRNA组相比,HG-KLF9 siRNA组以上指标均有改善(P<0.05)。结论:沉默KLF9可减轻高糖诱导的内皮细胞炎症、氧化应激水平,恢复NRF2的核表达,从而减轻内皮细胞损伤。 展开更多

关键词 内皮细胞 高血糖 krüppel样因子9 氧化应激 NF-E2相关因子2

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