补骨脂素逆转K562/ADM多药耐药细胞系耐药性研究 被引量：16

1

作者 蔡宇 蔡天革 +3 位作者 唐凤德 张荣华 何岚 徐立群 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期146-148,共3页

目的:研究补骨脂素对白血病细胞阿霉素耐药株(K562/ADM)多药耐药(multidrugresistance,MDR)性的逆转作用及其机制。方法:采用MTT法检测药物细胞毒性作用,计算其逆转倍数。结果:补骨脂素在1～20μmol·L-1范围内,对K562和K562/ADM无... 目的:研究补骨脂素对白血病细胞阿霉素耐药株(K562/ADM)多药耐药(multidrugresistance,MDR)性的逆转作用及其机制。方法:采用MTT法检测药物细胞毒性作用,计算其逆转倍数。结果:补骨脂素在1～20μmol·L-1范围内,对K562和K562/ADM无明显细胞毒作用,但与ADM联合用药可使ADM对K562/ADM的IC50明显下降,补骨脂素(1～20μmol·L-1)能不同程度地降低ADM对K562/ADM细胞的IC50值。结论:补骨脂素能逆转K562/ADM细胞的多药耐药。 展开更多

关键词 补骨脂素 多药耐药 k562/adm 逆转

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柴胡皂苷在体外对人白血病细胞株K562/ADM多药耐药性的逆转作用 被引量：18

2

作者 盖晓东 历春 +2 位作者 李倩 刘艳波 薛昊罡 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期76-80,共5页

目的:研究柴胡皂苷(SS)对白血病细胞株K562/ADM多药耐药性(MDR)的逆转作用,并进一步探讨其耐药逆转机制。方法:分别以不同浓度(1～100 mg/L)的SS作用于体外培养的K562和K562/ADM细胞48h,采用MTT法检测细胞增殖抑制率,确定SS的非毒性剂量... 目的:研究柴胡皂苷(SS)对白血病细胞株K562/ADM多药耐药性(MDR)的逆转作用,并进一步探讨其耐药逆转机制。方法:分别以不同浓度(1～100 mg/L)的SS作用于体外培养的K562和K562/ADM细胞48h,采用MTT法检测细胞增殖抑制率,确定SS的非毒性剂量;采用非毒性剂量SS 1.25、2.5和5.0 mg/L,分别与不同浓度(0.05～100 mg/L)阿霉素(ADM)联合作用,检测各组细胞生长抑制50%的ADM浓度(IC50),计算逆转指数和两药相互作用系数(CDI),观察SS协同ADM作用后的细胞形态;利用流式细胞术检测SS联合ADM作用后K562/ADM细胞内ADM的蓄积程度、细胞凋亡和细胞周期变化。结果:随着SS浓度的增加,细胞增殖抑制率也相应增加,呈剂量-效应关系;SS的非细胞毒性剂量为5.0 mg/L,逆转倍数为21.5倍;SS协同ADM作用后形态学方法显示肿瘤细胞数量减少,并出现了大量凋亡细胞,呈剂量-效应关系;SS可明显提高ADM在K562/ADM细胞内的蓄积,与未加SS对照组比较差异显著(P<0.05);SS可增强ADM对K562/ADM细胞的凋亡诱导作用,与未加SS对照组比较差异显著(P<0.05);K562/ADM细胞被阻滞在G0/G1期,与未加SS对照组比较差异显著(P<0.05)。结论:SS对白血病耐药细胞株K562/ADM有增殖抑制和逆转多药耐药性的作用,其部分逆转机制可能是通过增加细胞内化疗药物蓄积,诱导细胞凋亡和使细胞阻滞在G0/G1期而实现的。 展开更多

关键词 柴胡皂苷 多药耐药 耐药逆转 k562/adm细胞

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自噬水平与白血病K562/ADM细胞耐药的关系研究 被引量：3

3

作者 李彩丽 高静 +4 位作者 黄双盛 赵永勋 刘进 黄涛 李敏 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期343-348,共6页

目的采用阿霉素(adriamycin,ADM)“逐步提高药物浓度+间歇性诱导”的方式体外诱导建立稳定耐受15μmol·L^(-1) ADM的白血病K562/ADM细胞,观察该细胞对其它化疗药物的敏感性以及细胞自噬水平与耐药的关系。方法MTT法检测细胞对几种... 目的采用阿霉素(adriamycin,ADM)“逐步提高药物浓度+间歇性诱导”的方式体外诱导建立稳定耐受15μmol·L^(-1) ADM的白血病K562/ADM细胞,观察该细胞对其它化疗药物的敏感性以及细胞自噬水平与耐药的关系。方法MTT法检测细胞对几种化疗药物的敏感性;用透射电镜、荧光显微镜观察细胞自噬形态学改变;Annexin-V/PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡;Western blot检测自噬和耐药相关蛋白的表达水平。结果K562/ADM细胞除了对ADM产生明显耐药外,还对多种化疗药物如:吡柔比星、柔红霉素、5-FU和长春新碱等有交叉耐药,但对三氧化二砷较敏感。K562/ADM细胞内自噬体数量、MDC荧光强度以及LC3Ⅰ/Ⅱ、Beclin-1蛋白表达水平均高于亲本细胞。用3-MA抑制自噬可明显增加K562/ADM细胞对ADM的敏感性,同时也能有效抑制K562/ADM细胞内耐药相关蛋白的表达。结论K562/ADM细胞出现多药耐药现象,且耐药性与细胞自噬水平有密切关系。 展开更多

关键词 多药耐药 自噬 阿霉素 k562细胞 k562/adm细胞 白血病

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孤啡肽联合阿霉素逆转K562/ADM细胞多药耐药及其分子机制研究 被引量：2

4

作者 王晓霞 刘小琴 +2 位作者 张炜 陈轩 赵丽 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期574-578,共5页

本实验室已研究证实,在细胞水平孤啡肽(OFQ)单独用药可逆转K562/ADM细胞多药耐药。本研究目的是探索OFQ联合阿霉素(ADM)逆转K562/ADM细胞多药耐药的分子机制及其与MDR1 mRNA/P-gp表达的相关性。MTT法检测OFQ和ADM单药及两者联合后对K562... 本实验室已研究证实,在细胞水平孤啡肽(OFQ)单独用药可逆转K562/ADM细胞多药耐药。本研究目的是探索OFQ联合阿霉素(ADM)逆转K562/ADM细胞多药耐药的分子机制及其与MDR1 mRNA/P-gp表达的相关性。MTT法检测OFQ和ADM单药及两者联合后对K562/ADM细胞增殖能力的影响,流式细胞术检测细胞凋亡率,实时荧光定量PCR检测MDR1 mRNA表达水平,Western blot检测P-gp的相对表达量。结果显示,OFQ(0.1μmol/L)联合ADM(15 mg/L)后细胞增殖抑制率增加,与ADM组比较,48 h数据具有统计学意义(P<0.05),细胞凋亡率显著提高(P<0.01);OFQ联合ADM作用于细胞后MDR1 mRNA/P-gp表达水平明显低于ADM单独用药组(P<0.01),且MDR1 mRNA(r=0.91)及P-gp(r=0.98)表达水平在48 h内呈时间依赖性。结论:OFQ联合ADM可时间依赖性的逆转K562/ADM细胞多药耐药性,48 h为最佳逆转时间,逆转机制与下调MDR1 mRNA和P-gp的表达量相关。 展开更多

关键词 孤啡肽 阿霉素 k562/adm细胞 多药耐药

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新型多胺缀合物NMMB逆转K562/ADM细胞多药耐药及其机制 被引量：1

5

作者 盖晓东 程鹏飞 +2 位作者 历春 冯凯 王超杰 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期238-241,共4页

目的:研究新型多胺缀合物NMMB对白血病细胞株K562/ADM的多药耐药(MDR)逆转作用,并进一步探讨其耐药逆转机制。方法:分别以不同浓度的NMMB(10～1000mg.L-1)作用于体外培养的K562和K562/ADM细胞24h,采用MTT法检测细胞增殖抑制率,确定NMMB... 目的:研究新型多胺缀合物NMMB对白血病细胞株K562/ADM的多药耐药(MDR)逆转作用,并进一步探讨其耐药逆转机制。方法:分别以不同浓度的NMMB(10～1000mg.L-1)作用于体外培养的K562和K562/ADM细胞24h,采用MTT法检测细胞增殖抑制率,确定NMMB的非毒性剂量;采用非毒性剂量,NMMB0、2.5、5.0和10.0mg.L-1组,分别与不同浓度ADM(0.25～100.00mg.L-1)联合作用,检测各组细胞生长抑制50%的ADM浓度,即IC50,计算逆转倍数;利用流式细胞术检测NMMB联合ADM作用后K562/ADM细胞内ADM蓄积程度和细胞周期变化。结果:随着NMMB浓度的增加,细胞增殖抑制率也相应增加,呈剂量-效应关系;NMMB的最大无毒剂量为12.5mg.L-1,逆转倍数为4倍;NMMB可明显提高ADM在K562/ADM细胞内的蓄积,与未加NMMB对照组比较差异有显著性(P<0.05);K562/ADM细胞被阻滞在G0/G1期,与未加NMMB对照组比较差异有显著性(P<0.01)。结论:NMMB对白血病耐药细胞株K562/ADM有增殖抑制和多药耐药逆转作用,其部分逆转机制可能是通过增加细胞内化疗药物蓄积和将K562/ADM细胞阻滞在G0/G1期而实现的。 展开更多

关键词 多胺缀合物 多药耐药 耐药逆转 k562/adm细胞

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雄黄微生物提取液诱导K562/ADM细胞凋亡的作用机制研究 被引量：2

6

作者 张景红 冯汗青 李红玉 《中华中医药学刊》 CAS 2010年第3期533-537,共5页

目的:观察雄黄微生物提取液对K562/ADM细胞的诱导凋亡作用,探讨其作用机制、并初步探寻雄黄溶解后表现药理活性的化学物种。方法:应用噻唑蓝(MTT)比色法、Annexin V-PI双染法染色、DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞术(FCM)观察K562/ADM细胞... 目的:观察雄黄微生物提取液对K562/ADM细胞的诱导凋亡作用,探讨其作用机制、并初步探寻雄黄溶解后表现药理活性的化学物种。方法:应用噻唑蓝(MTT)比色法、Annexin V-PI双染法染色、DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞术(FCM)观察K562/ADM细胞凋亡,FCM测定K562/ADM细胞Fas、Bcl-2、Caspase3的活性变化,并以H3AsO3(As2O3在该溶液中的主要存在形式)作为阳性对照。结果:雄黄微生物提取液可抑制K562/ADM细胞增殖;K562/ADM呈典型凋亡形态改变;DNA电泳可见梯状条带出现;FCM分析显示:G1期细胞比例增高,G2-M和S期阻滞;Fas蛋白表达明显上调、Bcl-2蛋白表达显著下调、Caspase-3活性明显增强。结论:雄黄微生物提取液可通过Fas/Bcl-2途径,激活Caspase-3而诱导K562/ADM细胞凋亡。砷酸(V)、甲基砷酸盐(V)可能是雄黄溶解后表现药理活性的主要化学物种。 展开更多

关键词 k562/adm细胞 雄黄微生物提取液 凋亡 活性成分

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C_SA逆转白血病细胞株K562/ADM耐药的实验研究 被引量：1

7

作者 马静秋 梁辉 +3 位作者 陈琳军 邓晓辉 陈文娟 刘晓莉 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期1317-1321,共5页

目的研究不同浓度环孢霉素A(2、0.3、0μg/mL)和粒细胞集落刺激因子以及小剂量化疗药物(米托蒽醌+替尼泊甙+阿糖胞苷)组合后,不同组合对耐药白血病细胞株K562/ADM的作用情况,为环孢霉素A逆转耐药的临床应用提供实验依据。方法采用四唑氮... 目的研究不同浓度环孢霉素A(2、0.3、0μg/mL)和粒细胞集落刺激因子以及小剂量化疗药物(米托蒽醌+替尼泊甙+阿糖胞苷)组合后,不同组合对耐药白血病细胞株K562/ADM的作用情况,为环孢霉素A逆转耐药的临床应用提供实验依据。方法采用四唑氮蓝(MTT)药敏法测定K562/ADM细胞株的增殖抑制率,观察细胞形态学改变,在不同培养时间进行细胞活力测定,并采用流式细胞仪检测K562/ADM细胞株的P-糖蛋白表达和细胞周期分析。结果在每个时间点,大剂量环孢霉素A(2μg/mL)+粒细胞集落刺激因子+化疗组对K562/ADM细胞株的抑制率最大;培养96 h后,P-糖蛋白平均荧光强度下降最明显(P<0.01)。粒细胞集落刺激因子+小剂量化疗药与不同浓度环孢霉素A结合的三组组合,在培养72 h后,大量细胞出现S期阻滞。结论大剂量环孢霉素A既降低了细胞耐药性,粒细胞集落刺激因子预激又促使细胞进入细胞周期,有利化疗对于白血病细胞进行最大限度的杀伤,二者有明显协同作用。 展开更多

关键词 环孢霉素A 白血病 k562/adm细胞株 P-糖蛋白

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六神丸对K562/ADM细胞增殖的抑制作用及其机制研究 被引量：4

8

作者 李海燕 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2011年第6期1216-1217,共2页

目的:研究六神丸对人类红白血病耐药细胞(K562/ADM细胞)的增殖抑制作用,并对其作用机制进行初步的探讨。方法:采用血清药理学方法,把六神丸含药血清加入K562/ADM细胞,MTT法检测细胞增殖抑制率,QPCR法检测Bcl-2 mRNA的表达,Western blot... 目的:研究六神丸对人类红白血病耐药细胞(K562/ADM细胞)的增殖抑制作用,并对其作用机制进行初步的探讨。方法:采用血清药理学方法,把六神丸含药血清加入K562/ADM细胞,MTT法检测细胞增殖抑制率,QPCR法检测Bcl-2 mRNA的表达,Western blot方法检测Bcl-2蛋白的表达。结果:六神丸对K562/ADM细胞有较明显的增殖抑制作用,QPCR结果显示六神丸能下调K562/ADM细胞Bcl-2 mRNA和蛋白的表达。结论:六神丸可能通过诱导K562/ADM细胞凋亡而抑制细胞增殖,其诱导细胞凋亡的机制可能与抑制Bcl-2表达有关。 展开更多

关键词 六神丸 k562/adm细胞 BCL-2

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细胞因子对K562/ADM耐药细胞株耐药性的逆转作用

9

作者 肖东杰 孙善会 +2 位作者 张红 申红 刘宗印 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期559-560,共2页

目的探讨细胞因子和抗Pgp单抗mAb对K562/ADM耐药细胞株耐药性的逆转作用。方法利用K562细胞的耐阿霉素细胞株K562/ADM采用免疫细胞化学染色法和流式细胞术分别检测mAbMRK-16及rhGM-CSF、rhM-CSF或TNF-α对其Pgp表达的影响。结果... 目的探讨细胞因子和抗Pgp单抗mAb对K562/ADM耐药细胞株耐药性的逆转作用。方法利用K562细胞的耐阿霉素细胞株K562/ADM采用免疫细胞化学染色法和流式细胞术分别检测mAbMRK-16及rhGM-CSF、rhM-CSF或TNF-α对其Pgp表达的影响。结果将TNF-α100kU/L、rhGM-CSF10μg/L或rhM-CSF10μg/L分别单独与K562/ADM细胞孵育48hPgp表达细胞的阳性率分别为72.19%、80.04%和70.30%与未经任何作用的K562/ADM细胞Pgp表达的阳性率77.02%相比较无明显差异P>0.05。mAbMRK-1610mg/L以及mAbMRK-16分别与TNF-α或rhGM-CSF共同作用于K562/ADM细胞后Pgp表达的阳性率分别为67.49%、67.14%和70.56%与K562/ADM细胞的表达率77.02%相比较Pgp的表达率虽有降低但差别不明显P>0.05只有rhM-CSF与mAbMRK-16共同作用Pgp表达的阳性率为64.29%,可明显抑制K562/ADM细胞上Pgp的表达P<0.05。结论rhM-CSF加mAbMRK-16联合应用,具有逆转K562/ADM细胞MDR的作用。 展开更多

关键词 k562/adm细胞 重组M/CSF MRk-16 多药耐药 P-糖蛋白 细胞因子 肿瘤

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硼替佐米提高耐药K562/ADM细胞对NK细胞杀伤的敏感性及其机制 被引量：1

10

作者 张虹丽 曾鹏云 +7 位作者 邓黎黎 张连生 柴晔 岳玲玲 吴重阳 李莉娟 郝正栋 李亮亮 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期513-516,共4页

目的:探讨硼替佐米提高耐药K562/ADM细胞对NK细胞杀伤敏感性的可能机制。方法:流式细胞术和real-time PCR检测硼替佐米处理前后K562/ADM细胞表面MHCⅠ类链相关分子A(major histocompatibility complex classⅠchain-related molecule A,... 目的:探讨硼替佐米提高耐药K562/ADM细胞对NK细胞杀伤敏感性的可能机制。方法:流式细胞术和real-time PCR检测硼替佐米处理前后K562/ADM细胞表面MHCⅠ类链相关分子A(major histocompatibility complex classⅠchain-related molecule A,MICA)蛋白和mRNA的表达,LDH释放法检测硼替佐米处理前后K562/ADM细胞对NK细胞的杀伤敏感性。结果:硼替佐米处理后,K562/ADM细胞表面MICA蛋白表达率上升[(17.03±4.94)%vs(23.77±5.26)%,P<0.05];处理后K562/ADM细胞MICA mRNA的表达水平是处理前的(2.03±0.33)倍。效靶比为10∶1、20∶1时,NK细胞对硼替佐米处理后的K562/ADM细胞的杀伤率上升[(23.22±3.03)%、(30.30±0.74)%vs(33.69±1.28)%、(41.40±1.97)%,P<0.05]。结论:硼替佐米提高耐药K562/ADM细胞对NK细胞杀伤的敏感性,其机制可能与硼替佐米上调K562/ADM细胞MICA表达有关。 展开更多

关键词 硼替佐米 Nk细胞 MHC Ⅰ类链相关分子A(MICA) 耐药k562/adm细胞

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敲低花生四烯酸5脂加氧酶(Alox5)基因促进K562/ADM细胞凋亡 被引量：4

11

作者 雒钰杰 徐敏 +1 位作者 高雯琬 陶崑 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期1398-1403,共6页

目的研究短发夹RNA(shRNA)敲低花生四烯酸5脂加氧酶(Alox5)基因对慢性粒细胞白血病耐药细胞K562/ADM细胞凋亡的影响。方法设计并合成3对针对人Alox5基因的靶向shRNA片段,插入到p Genesil-1干扰载体中,经过酶切和测序验证,成功构建p Gene... 目的研究短发夹RNA(shRNA)敲低花生四烯酸5脂加氧酶(Alox5)基因对慢性粒细胞白血病耐药细胞K562/ADM细胞凋亡的影响。方法设计并合成3对针对人Alox5基因的靶向shRNA片段,插入到p Genesil-1干扰载体中,经过酶切和测序验证,成功构建p Genesil-1-shRNA-Alox5重组质粒,转染K562/ADM细胞,实时定量PCR和Western blot法检测Alox5 mRNA及蛋白水平,筛选最好干扰组。选择较高干扰效率的p Genesil-1-shRNA-Alox5重组质粒组作为实验组,采用实时定量PCR检测K562/ADM细胞bcr/abl mRNA水平、Western blot法检测BCR/ABL融合蛋白水平、流式细胞术检测细胞凋亡率。结果酶切及测序结果显示重组质粒构建成功。与阴性对照组(p Genesil-1-K562/ADM)和空白K562/ADM细胞组相比,转染p Genesil-1-shRNA-Alox5重组质粒组的K562/ADM细胞Alox5 mRNA和蛋白水平均明显降低。敲低K562/ADM细胞Alox5后,bcr/abl mRNA、BCR/ABL融合蛋白水平均显著降低、细胞凋亡率显著增加。结论敲低Alox5基因后,K562/ADM细胞bcr/abl mRNA和BCR/ABL融合蛋白表达水平下降,细胞凋亡率增加。 展开更多

关键词 慢性粒细胞白血病(CML) BCR/ABL 花生四烯酸5脂加氧酶(Alox5) k562/adm细胞

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6种中药活性成分对K562/ADM耐药性逆转及P27和P170蛋白表达影响 被引量：12

12

作者 陈超 蔡天革 +2 位作者 张荣华 杨丽 蔡宇 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期1-4,共4页

目的观察中药活性成分对白血病K562/ADM耐药细胞逆转及P27和P170蛋白表达的影响,探讨其可能作用机制。方法选用补骨脂素、苦参碱、槲皮素、姜黄素、川芎嗪、大黄酸6种中药单体成分作为研究对象,MTT比色法测定6种中药成分对K562/ADM耐药... 目的观察中药活性成分对白血病K562/ADM耐药细胞逆转及P27和P170蛋白表达的影响,探讨其可能作用机制。方法选用补骨脂素、苦参碱、槲皮素、姜黄素、川芎嗪、大黄酸6种中药单体成分作为研究对象,MTT比色法测定6种中药成分对K562/ADM耐药细胞的增殖抑制作用,高效液相色谱法检测细胞内阿霉素的质量浓度,流式细胞术检测K562/ADM耐药细胞中P27和P170蛋白表达。结果 6种中药活性成分逆转耐药倍数在6.99~10.59之间,K562/ADM耐药细胞中阿霉素积累比率为(11.6±3.7)^(17.7±2.8);对照组P27和P210蛋白的表达率分别为(33.1±2.1)和(6.51±1.33),K562/S和K562/ADM耐药细胞的P27和P210相关蛋白表达率分别在(54.2±3.5)^(72.1±4.2)和(6.21±1.35)^(6.59±1.48)之间。结论 6种中药活性成分具有不同程度的逆转耐药细胞作用,且影响耐药细胞内化疗药物质量浓度;各中药活性成分具有不同程度抑制K562/ADM耐药细胞中P27蛋白表达作用。 展开更多

关键词 补骨脂素 苦参碱 槲皮素 姜黄素 川芎嗪 大黄酸 k562 adm耐药细胞 P27 P170 蛋白表达

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乌苏烷三萜类化合物RA逆转的K562/ADM细胞耐药作用及其机制研究 被引量：1

13

作者 钟思思 袁永平 +2 位作者 辛柳燕 陈懿建 张立群 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期1704-1709,共6页

目的:研究乌苏烷三萜类化合物3β,19α-二羟基乌苏-12-烯-23,28-二羧酸(Rotundioic acid,RA)对耐阿霉素的K562细胞(K562/ADM细胞)抗肿瘤药物敏感性的影响,并探讨RA对K562/ADM细胞多药耐药作用的影响及相关机制。方法:采用CCK-8法检测RA... 目的:研究乌苏烷三萜类化合物3β,19α-二羟基乌苏-12-烯-23,28-二羧酸(Rotundioic acid,RA)对耐阿霉素的K562细胞(K562/ADM细胞)抗肿瘤药物敏感性的影响,并探讨RA对K562/ADM细胞多药耐药作用的影响及相关机制。方法:采用CCK-8法检测RA对K562细胞及K562/ADM细胞的抗肿瘤药物敏感性的影响;逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)和Western blot检测K562细胞和K562/ADM细胞MDR1 mRNA和蛋白表达水平,并检测RA对K562/ADM细胞MDR1 mRNA及P-gp表达的影响;Western blot检测K562/ADM细胞p-JNK、p-p38、pERK1/2的表达。结果:RA增加K562/ADM细胞对阿霉素的敏感性,逆转倍数为1.61倍,差异有统计学意义(P<0.05);K562/ADM对ADM的耐药倍数为41.76倍。K562细胞内MDR1 mRNA表达极低,其蛋白产物P-糖蛋白(Pglycoprotein,P-gp)几乎不表达;K562/ADM细胞内的MDR1 mRNA及P-gp高表达;RA能够下调K562/ADM细胞MDR1及P-gp的表达水平。此外,RA可以上调K562/ADM细胞p38、ERK1/2的磷酸化水平,不影响p-JNK的表达。结论:RA可能通过上调K562/ADM细胞p-p38、p-ERK1/2的表达水平参与MAPK信号通路的调节,从而抑制MDR1的转录和翻译水平,最终逆转白血病细胞多药耐药作用。 展开更多

关键词 乌苏烷三萜类化合物RA k562/adm细胞 耐药逆转

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辣椒素经内质网应激反应途径诱导K562/ADM耐药细胞凋亡

14

作者 侯娟娟 陈静 +2 位作者 易娟 高丽丽 魏虎来 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2010年第8期856-860,共5页

目的:研究辣椒素(capsaicin)是否经内质网途径诱导耐药性白血病K562/ADM细胞凋亡。方法:以耐药性白血病K562/ADM细胞为靶细胞,采用MTT比色法测定细胞增殖活性;细胞形态学和AnnexinV/PI双染色法检测细胞凋亡,电镜观察凋亡细胞内质网形态... 目的:研究辣椒素(capsaicin)是否经内质网途径诱导耐药性白血病K562/ADM细胞凋亡。方法:以耐药性白血病K562/ADM细胞为靶细胞,采用MTT比色法测定细胞增殖活性;细胞形态学和AnnexinV/PI双染色法检测细胞凋亡,电镜观察凋亡细胞内质网形态结构变化;实时定量RT-PCR检测GRP78mRNA的表达;Western blot法检测GRP78蛋白的表达。结果:不同浓度的辣椒素显著抑制K562/ADM细胞的增殖活性,20、50μmol/L辣椒素诱导后K562/ADM细胞出现典型的凋亡形态学改变,细胞凋亡率明显增高,分别为39.67%和41.78%。辣椒素诱导凋亡过程中,K562/ADM细胞出现内质网明显扩张和脱颗粒现象,GRP78mRNA的表达增高,GRP78蛋白的表达量分别增高1.5和2.2倍,随时间延长有所降低。结论:辣椒素可能通过内质网应激反应性途径诱导K562/ADM细胞发生凋亡。 展开更多

关键词 辣椒素 k562/adm细胞 内质网应激 凋亡

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雄黄微生物提取液对K562/ADM细胞P-糖蛋白和多药耐药基因表达的影响 被引量：4

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作者 张景红 李红玉 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2009年第8期855-860,共6页

目的:研究雄黄微生物提取液(RBS)诱导K562/ADM细胞凋亡的作用,并探讨其对P-糖蛋白(P-gp)和多药耐药基因(MDRI)表达的影响。方法:采用"微生物浸出"法制备RBS,并以H3AsO3作为阳性对照,AnnexinV-PI双染法检测细胞凋亡;流式细胞... 目的:研究雄黄微生物提取液(RBS)诱导K562/ADM细胞凋亡的作用,并探讨其对P-糖蛋白(P-gp)和多药耐药基因(MDRI)表达的影响。方法:采用"微生物浸出"法制备RBS,并以H3AsO3作为阳性对照,AnnexinV-PI双染法检测细胞凋亡;流式细胞仪检测细胞P-gp表达率;逆转录聚合酶链技术(RT-PCR)检测细胞MDRI mRNA表达水平。结果:RBS可诱导多药耐药白血病细胞发生典型凋亡,抑制P-gp的表达,下调MDRImRNA表达水平。在含砷量相同的条件下,RBS诱导效应明显强于H3AsO3。结论:诱导细胞凋亡、下调P-gp/MDRI蛋白的表达,可能是雄黄逆转白血病耐药的重要分子机制。 展开更多

关键词 雄黄微生物提取液 耐药白血病细胞 凋亡 P-糖蛋白 多药耐药基因

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大黄素对K562/ADM细胞阿霉素耐药的抑制作用 被引量：3

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作者 朱雅琪 严方 +3 位作者 狄斌 严佳 李佳常 李运曼 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期462-468,共7页

探讨大黄素抑制人慢性粒细胞白血病细胞耐阿霉素变异株K562/ADM的药效学及作用机制。以维拉帕米为阳性药,阿霉素为工具药,采用MTT法测定大黄素与阿霉素合用对细胞增殖的抑制作用;使用流式细胞仪考察了大黄素对于阿霉素诱导K562/ADM细胞... 探讨大黄素抑制人慢性粒细胞白血病细胞耐阿霉素变异株K562/ADM的药效学及作用机制。以维拉帕米为阳性药,阿霉素为工具药,采用MTT法测定大黄素与阿霉素合用对细胞增殖的抑制作用;使用流式细胞仪考察了大黄素对于阿霉素诱导K562/ADM细胞周期阻滞和凋亡的促进作用;并采用Western blot法检测了大黄素对P-gp、Bcr-Abl和STAT5蛋白表达的影响;进一步通过P-gp单克隆藻红蛋白键合UIC2抗体结合实验探讨了大黄素是否是P-gp的底物。实验结果显示,大黄素与阿霉素合用可显著抑制K562/ADM的增殖,并呈量效关系;可促进阿霉素诱导的K562/ADM细胞G2/M期周期阻滞和细胞凋亡;不同剂量的大黄素可有效抑制P-gp、Bcr-Abl、STAT5蛋白表达及磷酸化;UIC2抗体结合实验结果则表明大黄素可能不是P-gp的底物。因此,大黄素能够在体外有效抑制K562/ADM阿霉素耐药,其机制可能不是通过底物竞争性抑制作用,而是与大黄素直接降低P-gp、Bcr-Abl及STAT5蛋白表达和磷酸化有关。 展开更多

关键词 大黄素 k562 adm 耐药抑制 P-gp BCR-ABL STAT5

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硫化砷对K_(562)/ADM细胞HSP70蛋白表达的影响 被引量：12

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作者 张晨 黄世林 +1 位作者 向阳 白月辉 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2001年第1期33-34,共2页

目的 :探讨硫化砷 (As2 S2 )对K5 6 2 及其耐药细胞株K5 6 2 ADM细胞膜HSP70蛋白表达的影响。方法 :采用流式细胞仪 (FCM)测定K5 6 2 和耐药细胞K5 6 2 ADM细胞膜HSP70蛋白表达及细胞凋亡 ,利用RT PCR方法检测HSP70的mRNA水平。结果 ... 目的 :探讨硫化砷 (As2 S2 )对K5 6 2 及其耐药细胞株K5 6 2 ADM细胞膜HSP70蛋白表达的影响。方法 :采用流式细胞仪 (FCM)测定K5 6 2 和耐药细胞K5 6 2 ADM细胞膜HSP70蛋白表达及细胞凋亡 ,利用RT PCR方法检测HSP70的mRNA水平。结果 :硫化砷能增加细胞膜HSP70蛋白表达 ,且与时间及浓度成正相关 ,而在mRNA水平上仍有较高的表达。K5 6 2 ADM细胞膜HSP70蛋白表达和细胞凋亡率均高于K5 6 2 细胞。结论 :硫化砷能增加细胞膜HSP70蛋白表达 。 展开更多

关键词 热休克蛋白 硫化砷 k562/adm细胞 细胞凋亡

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阿霉素对K562细胞Gfi-1表达的影响及其与相关凋亡基因关系的研究 被引量：5

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作者 常伟 孙汉英 +2 位作者 黄敏 周剑锋 张义成 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第2期278-282,共5页

本研究探讨阿霉素体外作用于K562细胞的细胞效应及癌基因Gfi-1和相关凋亡基因表达变化的机制。用不同浓度的阿霉素作用于K562细胞24小时,然后应用DNA电泳和流式细胞术检测K562细胞凋亡;用RT-PCR、流式细胞术检测Gfi-1、Bcl-2、bax基因... 本研究探讨阿霉素体外作用于K562细胞的细胞效应及癌基因Gfi-1和相关凋亡基因表达变化的机制。用不同浓度的阿霉素作用于K562细胞24小时,然后应用DNA电泳和流式细胞术检测K562细胞凋亡;用RT-PCR、流式细胞术检测Gfi-1、Bcl-2、bax基因和蛋白表达的变化。结果表明:当阿霉素浓度在0、0.5、2.0mg/L作用K562细胞24小时,细胞凋亡增加,可见典型的DNA断裂电泳条带;同时,当ADM浓度自0.5增为2.0mg/L时,Gfi-1表达减少,bax表达增加;Bcl-2表达在ADM0.5-2.0mg/L之间变化不明显,mRNA及蛋白水平均无统计学差异;当阿霉素浓度大于2.0mg/L时,细胞凋亡率并不增加,而是下降,且出现细胞坏死。结论:一定浓度阿霉素能诱导K562细胞凋亡,细胞凋亡率表达的变化与阿霉素浓度呈一定的量效依赖关系,阿霉素诱导K562细胞凋亡可能与抑制Gfi-1基因的表达和激活bax基因的表达有一定的关系。 展开更多

关键词 阿霉素 k562细胞 细胞凋亡 Gfi-1 BCL-2 BAX

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RNA干扰survivin基因对K562细胞化疗敏感性的影响及机制 被引量：2

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作者 陈琳 徐酉华 +4 位作者 温贤浩 杨山 于洁 戴碧涛 李欣 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第22期2111-2114,共4页

目的应用小分子干扰RNA(siRNA)技术抑制survivin基因的表达,观察其对K562细胞化疗敏感性的影响,为临床白血病治疗提供理论依据。方法实验分为RNA干扰组、脂质体对照组、空白对照组。转染48h后用RT-PCR法,免疫组化法分别检测survivin在m... 目的应用小分子干扰RNA(siRNA)技术抑制survivin基因的表达,观察其对K562细胞化疗敏感性的影响,为临床白血病治疗提供理论依据。方法实验分为RNA干扰组、脂质体对照组、空白对照组。转染48h后用RT-PCR法,免疫组化法分别检测survivin在mRNA及蛋白水平的表达;MTT法检测细胞对阿霉素的敏感性;流式细胞仪检测细胞内阿霉素的药物浓度;免疫组化法检测K562细胞中3种耐药相关蛋白P-gp、TOPO-2、GST-π的表达。结果①RNA干扰组K562细胞的survivin基因表达水平明显下降;②RNA干扰组K562细胞对阿霉素敏感性增高;③RNA干扰组K562细胞中阿霉素浓度增高;④RNA干扰组K562细胞耐药蛋白GST-π表达水平下降,而P-gp,TOPO-2的表达与对照组比较无显著差异。结论特异性siRNA能够有效抑制survivin基因的表达,并可能通过降低耐药蛋白GST-π的表达增加K562细胞对阿霉素的敏感性。 展开更多

关键词 k562细胞 RNA干扰 SURVIVIN 阿霉素 耐药蛋白

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PI3Kδ抑制剂idelalisib对人髓系白血病细胞增殖的抑制作用及对阿霉素耐药性的逆转作用 被引量：1

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作者 李昆仑 易平勇 +6 位作者 罗晗嘉 李基炜 孟柳 唐敏 曾维斯 杨烁 王伟 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期1389-1397,共9页

目的:观察阿霉素(adriamycin,ADM)单药、艾德拉尼(idelalisib)单药以及ADM联合idelalisib对人髓系白血病细胞株K562和K562/ADM的增殖以及细胞内ADM相对浓度的影响,探讨idelalisib对K562和K562/ADM两种细胞株ADM耐药的逆转作用及其机制... 目的:观察阿霉素(adriamycin,ADM)单药、艾德拉尼(idelalisib)单药以及ADM联合idelalisib对人髓系白血病细胞株K562和K562/ADM的增殖以及细胞内ADM相对浓度的影响,探讨idelalisib对K562和K562/ADM两种细胞株ADM耐药的逆转作用及其机制。方法:以K562及K562/ADM细胞株为观察对象,分别以不同浓度ADM及idelalisib进行干预,计算ADM对两种细胞株的半抑制浓度(50%inhibitory concentration,IC50)及耐药指数(resistance index,RI);计算idelalisib对于两种细胞株的无细胞毒性作用浓度(细胞抑制率<5%)。后续将K562和K562/ADM细胞株分别分为ADM组和ADM+idelalisib组。分别用MTT法、生物发光法和流式细胞术检测各组细胞存活率、细胞株内ATP和ADM水平的变化。结果:随着ADM浓度的增加,K562及K562/ADM细胞存活率相应降低,呈剂量依赖性;ADM在K562与K562/ADM细胞株中的IC50分别为0.2 mg/L和1.0 mg/L,RI为5。随着idelalisib浓度的增加,K562及K562/ADM细胞存活率也相应降低,呈剂量依赖性;idelalisib对K562和K562/ADM细胞株的无细胞毒性体积浓度(抑制率<5%)分别约为25μmol/L和15μmol/L。MTT法结果显示:在K562/ADM细胞株中,ADM+idelalisib组的细胞存活率低于ADM组,差异有统计学意义(P<0.05);在K562细胞株中,ADM+idelalisib组的细胞存活率与ADM组相比差异无统计学意义(P>0.05)。生物发光法结果显示:K562细胞株内ATP水平为(91.502±0.479)mmol/L,K562/ADM细胞株内ATP水平为(24.311±0.349)mmol/L。在K562/ADM细胞株中,ADM+idelalisib组ATP水平低于ADM组,差异有统计学意义(P<0.05);在K562细胞株中,ADM+idelalisib组ATP水平与ADM组相比差异无统计学意义(P>0.05)。流式细胞术检测结果显示:在K562/ADM细胞株中,ADM+idelalisib组ADM吸收率高于ADM组,差异有统计学意义(P<0.05);在K562细胞株中,ADM+idelalisib组ADM吸收率与ADM组相比差异无统计学意义(P>0.05)。在K562/ADM细胞株中,ADM+idelalisib组ADM排除率低于ADM组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);在K562细胞株中,ADM+idelalisib组ADM排除率与ADM组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:Idelalisib对体外髓系白血病细胞株K562及K562/ADM均有细胞毒性作用,并能部分逆转K562/ADM细胞株对ADM的耐药。其逆转机制可能是通过增加细胞内ADM蓄积和诱导细胞凋亡而实现的。 展开更多

关键词 idelalisib 白血病 k562细胞 k562/adm细胞 肿瘤多发耐药 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B信号通路 逆转耐药

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