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完整弓形虫P35重组蛋白IgM-酶联免疫吸附测定法检测弓形虫急性感染 被引量：4
1
作者 吕斌 吴少廷 +5 位作者 周宜开 徐顺清 张仁利 高世同 林敏 张志仁 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第1期134-137,共4页
为利用重组的完整弓形虫表面抗原P35 GST蛋白对弓形虫感染进行血清学诊断 ,构建了可表达P35 GST的JM10 9细胞株 .采用亲和层析对融合蛋白进行分离和纯化 ,用SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)和蛋白质印迹 (Westernblot)分析所表达... 为利用重组的完整弓形虫表面抗原P35 GST蛋白对弓形虫感染进行血清学诊断 ,构建了可表达P35 GST的JM10 9细胞株 .采用亲和层析对融合蛋白进行分离和纯化 ,用SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)和蛋白质印迹 (Westernblot)分析所表达的蛋白质 ,并用纯化的重组蛋白进行IgM 酶联免疫吸附测定法 (IgM ELISA)检测不同病人血清中的抗 P35抗体 .SDS PAGE分析发现P35 GST重组蛋白的大小约 6 0ku ,为一亲水性蛋白 ,蛋白质印迹分析表明该蛋白与弓形虫阳性感染病人的血清有特异性反应 .利用P35 GST为抗原 ,对 6 0例血清进行IgM ELISA分析 ,发现P35 GST可明显区分近期感染和既往感染 ,在弓形虫的诊断上有很大的应用前景 . 展开更多
关键词 完整弓形虫表面抗原 P35-GST蛋白 弓形虫感染 igm-酶联免疫吸附测定法
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免疫亲和层析技术协同酶联免疫吸附法检测赭曲霉毒素A 被引量：5
2
作者 张蕴哲 张先舟 +1 位作者 袁耀武 张伟 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第10期257-264,共8页
利用免疫亲和层析技术(immunoaffinity chromatography,IAC)对样品中赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)进行捕获与浓缩,利用酶联免疫吸附(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法对IAC捕获的目标物OTA进行测定。IAC与ELISA中的抗OTA... 利用免疫亲和层析技术(immunoaffinity chromatography,IAC)对样品中赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)进行捕获与浓缩,利用酶联免疫吸附(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法对IAC捕获的目标物OTA进行测定。IAC与ELISA中的抗OTA单克隆抗体来自不同的克隆株,分属不同独特型,与OTA结合靶点的选择性存在差异,IAC与ELISA协同检测,可以有效过滤OTA结构类似物造成的干扰,提高免疫分析的特异性与灵敏度。该方法用于加标样品测定时,OTA的检出限为0.2 ng/g,定量限为0.4 ng/g,OTA的平均回收率为75.9%,与单一的ELISA法相比,该方法虽然回收率略低,但灵敏度可以显著提高,达到ELISA法的60倍。通过对49份样品的实际检测,该方法检出阳性样品与国标法的符合率达到100%,漏检率为0%,由此可见,该方法在准确性上表现出明显的优势。作为一种综合免疫分析技术,该方法不需要大型仪器设备,对操作环境没有严格要求,便于基层实验室对样品中OTA的分析。 展开更多
关键词 免疫亲和层析技术 酶联免疫吸附法 检测 赭曲霉毒素A
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酶联免疫吸附法在畜产品快速检测中的应用 被引量：3
3
作者 程俊嘉 陈源 刘冬梅 《中国动物保健》 2024年第5期115-116,共2页
酶联免疫吸附法是畜产品质量安全检测常用的快检方法之一,能快速、准确、高效地对相关产品进行检测。伴随着行业的高速发展,人们对畜产品的需求数量及质量要求也在逐步上升,畜产品的食品安全问题越来越受到重视。但近年来,畜产品中存在... 酶联免疫吸附法是畜产品质量安全检测常用的快检方法之一,能快速、准确、高效地对相关产品进行检测。伴随着行业的高速发展,人们对畜产品的需求数量及质量要求也在逐步上升,畜产品的食品安全问题越来越受到重视。但近年来,畜产品中存在着动物疫病、兽药残留及产品非法添加物等相关问题。因此,使用快速、准确的检测方法筛查畜产品的质量安全至关重要。本文以酶联免疫吸附法为主要技术导向,深入剖析其原理,同时对该技术在畜产品快检中的应用情况分层介绍,以期为行业相关研究人员提供依据。 展开更多
关键词 酶联免疫吸附法 畜产品 检测技术 应用
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酶联免疫吸附分析法测定水样中的毒死蜱 被引量：8
4
作者 韩丽君 钱传范 +2 位作者 李文明 江树人 王小如 《环境科学与技术》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期35-37,共3页
自制了毒死蜱多克隆抗体,考察了离子强度和甲醇含量对抗原抗体竞争反应的影响,对反应体系进行了优化,最终建立了水样中毒死蜱的残留检测ELISA方法。结果表明,毒死蜱对抗体竞争性结合的I50为76.8μg/L,方法检出限为5.2μg/L。河水样品经... 自制了毒死蜱多克隆抗体,考察了离子强度和甲醇含量对抗原抗体竞争反应的影响,对反应体系进行了优化,最终建立了水样中毒死蜱的残留检测ELISA方法。结果表明,毒死蜱对抗体竞争性结合的I50为76.8μg/L,方法检出限为5.2μg/L。河水样品经简单前处理后分别采用ELISA和GC测定,用ELISA方法测得水样中毒死蜱的添加回收率为93.40%～102.1%,C.V为4.04%～5.18%,在水样中的最低检出浓度为0.08μg/L,检测灵敏度远高于GC,符合农药残留检测的要求。 展开更多
关键词 酶联免疫吸附测定法 毒死蜱 水样 残留检测
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乳铁蛋白的免疫化学分析法——酶联免疫吸附测定法 被引量：15
5
作者 卢蓉蓉 孙震 +1 位作者 许时婴 王璋 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第4期102-104,共3页
应用酶联免疫法测定初乳中乳铁蛋白的含量。检测的线性范围为３．１～２００　ｎｇ／ｍｌ，最小检测限为１．５　ｎｇ／ｍｌ，回收率在９１．８２％～１１５．５６　％之间，变异系数在６．２０％～９．１８　％之间。
关键词 乳铁蛋白 免疫化学分析法 酶联免疫吸附测定法
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磁微粒酶联免疫吸附法测定玉米中的伏马毒素B1 被引量：16
6
作者 管笛 潘灿平 +1 位作者 王文 武会娟 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第8期208-211,共4页
将磁微粒的偶联物替代酶标板作为固定相,用于酶联免疫吸附（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）法检测玉米中的伏马毒素B1（fumonisin B1,FB1）.在直接竞争ELISA反应中,分别引入羊抗兔抗体-磁微粒、蛋白A-磁微粒,并比较二者替... 将磁微粒的偶联物替代酶标板作为固定相,用于酶联免疫吸附（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）法检测玉米中的伏马毒素B1（fumonisin B1,FB1）.在直接竞争ELISA反应中,分别引入羊抗兔抗体-磁微粒、蛋白A-磁微粒,并比较二者替代效果.通过对检测方法的优化,使用羊抗兔抗体、蛋白A与磁微粒的偶联物作为固定相的检出限分别为0.024μg/mL和0.030 μg/mL.羊抗兔抗体-磁微粒偶联物替代酶标板后具有更低的检出限,为常规ELISA法检测限的三分之一.玉米样品中FB1回收率范围在76.4％～110.6％之间,相对标准偏差小于11％.研究建立了一种灵敏度高、稳定性好的FB1检测方法. 展开更多
关键词 磁微粒 酶联免疫吸附法 伏马毒素 玉米 蛋白A
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酶联免疫吸附分析法测定水产品及水中孔雀石绿和无色孔雀石绿 被引量：36
7
作者 邢玮玮 王榕妹 +3 位作者 王俊卿 杨红 贺莉 邓安平 《化学研究与应用》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期42-46,共5页
本文报道一种同时测定水产品及水样中孔雀石绿（MG）和无色孔雀石绿（LMG）的间接竞争酶联免疫吸附分析法。对无色孔雀石绿分子进行修饰，使其与载体蛋白交联，得到免疫原和包被抗原，经过多次免疫动物制得抗无色孔雀石绿的多克隆抗体... 本文报道一种同时测定水产品及水样中孔雀石绿（MG）和无色孔雀石绿（LMG）的间接竞争酶联免疫吸附分析法。对无色孔雀石绿分子进行修饰，使其与载体蛋白交联，得到免疫原和包被抗原，经过多次免疫动物制得抗无色孔雀石绿的多克隆抗体。在优化的实验条件下，IC50值（标准曲线中吸光度抑制至最大吸光度值的50％时所对应的待测物浓度）为0．9～2．6μg／L，检出限为0．02—0．10μg／L，无色孔雀石绿在水样及水产品中的回收率为76．2～95．0％，与孔雀石绿的交叉反应率为95．25％。真实样品测定中，两种食用鱼养殖水样及一个鱼样中未检出孔雀石绿和无色孔雀石绿，但在观赏鱼养殖水样及另一鱼样中检出孔雀石绿和无色孔雀石，浓度分别为1．84μg／L和1．38μg/L。 展开更多
关键词 孔雀石绿 无色孔雀石绿 酶联免疫吸附分析法 食品分析
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酶联免疫吸附分析法测定土壤中的毒死蜱 被引量：7
8
作者 韩丽君 钱传范 +2 位作者 李文明 江树人 王小如 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2005年第8期53-56,共4页
采用自制多克隆抗体,考察了pH值和甲醇含量对竞争反应的影响,并对反应体系进行了优化,最终建立了土壤中毒死蜱的残留检测ELISA方法.试验表明,毒死蜱对抗体竞争性结合的I50为76.8 μg/L, 方法检出限为5.2 μg/L.土壤样品经简单前处理后,... 采用自制多克隆抗体,考察了pH值和甲醇含量对竞争反应的影响,并对反应体系进行了优化,最终建立了土壤中毒死蜱的残留检测ELISA方法.试验表明,毒死蜱对抗体竞争性结合的I50为76.8 μg/L, 方法检出限为5.2 μg/L.土壤样品经简单前处理后,分别采用ELISA和GC测定,用ELISA方法测得土壤中毒死蜱的添加回收率为80.33%～83.36%,CV为5.28%～9.83%,最低检出限为 0.005 mg/kg,与GC测定结果基本相当,符合农药残留分析的要求. 展开更多
关键词 酶联免疫吸附测定法 毒死蜱 土壤 残留检测
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用于测定多环芳烃的酶联免疫吸附分析法的研究 被引量：7
9
作者 张彦峰 张清敏 +1 位作者 高志贤 戴树桂 《农业环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期537-540,共4页
将芘丁酸(1-pyrenebutyricacid,PBA)通过活性酯法与牛血清白蛋白(BSA)共价结合,以PBA-BSA结合物为免疫原制备抗血清,利用该抗血清建立了测定多环芳烃类物质的间接竞争酶联免疫吸附分析法(enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA),并研究... 将芘丁酸(1-pyrenebutyricacid,PBA)通过活性酯法与牛血清白蛋白(BSA)共价结合,以PBA-BSA结合物为免疫原制备抗血清,利用该抗血清建立了测定多环芳烃类物质的间接竞争酶联免疫吸附分析法(enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA),并研究了10种多环芳烃与该抗血清的交叉反应。结果表明,该方法用于测定芘和芘丁酸的IC50值分别为0.132mg·L-1和0.253mg·L-1,检出限分别为0.1mg·L-1和0.01mg·L-1,该方法不受溶剂甲醇的影响,因此可以用于经过预富集的环境样品中多环芳烃类物质的测定。 展开更多
关键词 酶联免疫吸附分析法(ELISA) 多环芳烃(PAHs) 芘 测定
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检测T-2毒素的直接竞争性酶联免疫吸附测定法的研究 被引量：8
10
作者 曹艳红 孟宪清 +2 位作者 冯杰 惠洋 孙殿军 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期132-135,共4页
目的 本研究在自制T-2毒素酶标半抗原的基础上，结合市售抗T-2毒素单克隆抗体，建立了检测谷物中T-2毒素的直接竞争性酶联免疫吸附测定法（ELISA）。方法粮食样品经70％甲醇-水溶液提取，用滤纸过滤并稀释后。再用0．45μm滤器过滤净化... 目的 本研究在自制T-2毒素酶标半抗原的基础上，结合市售抗T-2毒素单克隆抗体，建立了检测谷物中T-2毒素的直接竞争性酶联免疫吸附测定法（ELISA）。方法粮食样品经70％甲醇-水溶液提取，用滤纸过滤并稀释后。再用0．45μm滤器过滤净化，该滤液用于ELISA检测。结果本方法最低检出量为0．125ng／ml，添加70-280ng／g T-2毒素的大米样品和面粉样品的平均回收率分别为85～117．5％和98．1～102．5％。结论结果表明，该方法简化了粮样提取步骤。可用于谷物及加工产品中T-2毒素的检测。 展开更多
关键词 T-2毒素 直接竞争性酶联免疫吸附测定 谷物
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高敏感度酶联免疫吸附测定法检测分泌蛋白MPB64对于活动性肺结核诊断的价值 被引量：9
11
作者 赵冰 侯萍 +4 位作者 黄静 贺文从 欧喜超 刘东鑫 赵雁林 《中国防痨杂志》 CAS 2017年第12期1303-1308,共6页
目的评价以结核分枝杆菌（MTB）分泌蛋白MPB64为检测抗原的高敏感度酶联免疫吸附测定法（high sensitivityenzyme-linked immunosorbent assay，HI-ELISA）用于检测痰液中MTB的价值。方法选取97份储存的疑似肺结核患者的痰标本，分别进... 目的评价以结核分枝杆菌（MTB）分泌蛋白MPB64为检测抗原的高敏感度酶联免疫吸附测定法（high sensitivityenzyme-linked immunosorbent assay，HI-ELISA）用于检测痰液中MTB的价值。方法选取97份储存的疑似肺结核患者的痰标本，分别进行BACTEC MGIT960液体培养（简称“MGIT960培养”）、MTB／利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测系统（Gene Xpert MTB／RIF，简称“Xpert检测”）和HI-ELISA检测，通过与MGIT 960培养比较来评价HI-ELISA的诊断效能。结果本研究97份痰标本中，MGIT 960培养、HI-ELISA检测MTB的阳性率分别为36．08％（35／97）、32．99％（32／97）；与MGIT 960培养比较，HI-ELISA的检测敏感度、特异度、总体符合率分别为88．57％（31／35）、98．39％（61／62）、94．85％（92／97）。在Xpert检测阳性的66份痰标本中，MGIT 960培养、HI-ELISA检测MTB的阳性率分别为51．51％（34／66）、48．48％（32／66）；与MGIT 960培养相比，HI-ELISA的检测敏感度、特异度、总体符合率分别为91．18％（31／34）、96．88％（31／32）、93．93％（62／66）。Xpert检测MTB为阴性的31份痰标本中，仅有1份标本的MGIT960培养阳性而HI-ELISA未能检测到MTB，其他30份标本检测结果全部相符，符合率为96．77％（30／31）。结论HI-ELISA可以特异性检测MTB活菌，对活动性肺结核的诊断及治疗评价有很高的应用价值。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 分泌蛋白 MPB64 酶联免疫吸附测定 敏感性与特异性 诊断
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用酶联免疫吸附法测定鱼类体内金属硫蛋白 被引量：13
12
作者 林芃 任宏伟 茹炳根 《环境污染与防治》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期265-267,共3页
用酶联免疫吸附法测定鱼体内 (肝 ,肾 ) MT。鱼组织经匀浆、加热、离心、将上清液以包被液稀释后 ,与一抗、二抗反应 ,求得 MT含量。与镉 /血红蛋白饱和法比较 ,本法显示了特异、简便、及灵敏的特点。同时 ,用酶联免疫吸附法测定了取自... 用酶联免疫吸附法测定鱼体内 (肝 ,肾 ) MT。鱼组织经匀浆、加热、离心、将上清液以包被液稀释后 ,与一抗、二抗反应 ,求得 MT含量。与镉 /血红蛋白饱和法比较 ,本法显示了特异、简便、及灵敏的特点。同时 ,用酶联免疫吸附法测定了取自武汉东湖不同水域的鱼类、不同种类的鱼类的组织脏器的 MT的含量 。 展开更多
关键词 金属硫蛋白 酶联免疫吸附法 特异性 鱼类体内 生物监测
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酵母表面展示-酶联免疫吸附测定法的建立 被引量：2
13
作者 叶茂 韩双艳 +2 位作者 林影 唐语谦 王小宁 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第10期1113-1117,共5页
以表面展示人源蛋白酶体α亚基6蛋白的重组酵母细胞,结合酶联吸附免疫原理检测技术,以表面展示有人源蛋白酶体α亚基6(proteasome subunit alpha6,PSα6)的重组酵母细胞及其对应的单克隆抗体3D7D12D为研究对象,建立酵母酶联免疫吸附(yea... 以表面展示人源蛋白酶体α亚基6蛋白的重组酵母细胞,结合酶联吸附免疫原理检测技术,以表面展示有人源蛋白酶体α亚基6(proteasome subunit alpha6,PSα6)的重组酵母细胞及其对应的单克隆抗体3D7D12D为研究对象,建立酵母酶联免疫吸附(yeast-ELISA)检测技术,应用于检测小鼠单克隆抗体及单抗效价.应用该方法最佳酵母浓度为0.50A600;测得单抗效价为1∶5×105,与常规ELISA效价接近;交叉试验和阻断试验表明该方法特异性强;同时该方法可用于检测抗血清.结果表明,yeast-ELISA可直接应用于检测单抗,测得效价与常规抗原包被间接ELISA具有良好一致性,特异性好,无交叉反应性. 展开更多
关键词 酵母表面展示 抗体检测 酶联免疫吸附测定法
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应用酶联免疫吸附法测定饲料中克伦特罗 被引量：8
14
作者 杨曙明 高生 +1 位作者 范里 宋荣 《中国饲料》 北大核心 2002年第10期15-16,共2页
关键词 酶联免疫吸附法 饲料 克伦特罗 畜禽饲料
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异戊烯基腺苷组细胞分裂素的快速酶联免疫吸附测定法的建立 被引量：14
15
作者 陈以峰 周燮 《华北农学报》 CSCD 北大核心 1996年第1期97-102,共6页
从样品制备，ＥＬＩＳＡ类型及免疫反应时间三方面着手建立了异戊烯基腺苷（ｉＰＡ）组细胞分裂素的快速酶联免疫吸附测定法。用ＮａＩＯ４氧化合成免疫原ｉＰＡ－Ｎ９－ＢＳＡ（ＢＳＡ：牛血清白蛋白）。由此获得的免抗血清效价达１：... 从样品制备，ＥＬＩＳＡ类型及免疫反应时间三方面着手建立了异戊烯基腺苷（ｉＰＡ）组细胞分裂素的快速酶联免疫吸附测定法。用ＮａＩＯ４氧化合成免疫原ｉＰＡ－Ｎ９－ＢＳＡ（ＢＳＡ：牛血清白蛋白）。由此获得的免抗血清效价达１：３４５００。交叉反应试验表明该抗血清只识别ｉＰＡ组细胞分裂素。因此本研究中采用直接型（即固相抗体型）ＥＬＩＳＡ，并将最佳免疫反应平衡时间缩短至３０ｍｉｎ（４℃）。所建立的ｉＰＡ组ＥＬＩＳＡ检测极限为４．７ｆｍｏｌｉＰＡ／孔，线性检测范围０．０１～５０ｐｍｏｌｉＰＡ／孔，板内、板间的变异系数分别为３．７％和５．３％。样品的稀释曲线与标准曲线平行，回收率为８７．１％，表明本研究中采用的８０％甲醇提取、Ｓｅｐ－ｐａｋＣ１８柱初纯化的快速制样程序适合于该ＥＬＩＳＡ。对大豆植株不同部位ｉＰＡｓ含量测定结果表明，根瘤与根尖内ｉＰＡｓ含量显著高于幼叶与顶芽内的ｉＰＡｓ含量。 展开更多
关键词 细胞分裂素 异戊烯基腺苷 酶联免疫吸附测定法
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生物素-亲和素偶联放大竞争酶联免疫吸附法测定甲氨蝶呤 被引量：2
16
作者 牟方祥 王恒 +4 位作者 吴红 邹德生 邹庆华 万萍 方勇飞 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期1044-1046,共3页
目的将生物素-亲和素偶联放大竞争酶联免疫吸附法（BA-c ELISA）引入甲氨蝶呤血药浓度检测,建立一种快速、简便、敏感、特异的甲氨蝶呤检测方法。方法将NH2活性生物素与MTX单抗Ig G化学连接,采用亲和素-HRP酶标记系统,建立放大竞争酶联... 目的将生物素-亲和素偶联放大竞争酶联免疫吸附法（BA-c ELISA）引入甲氨蝶呤血药浓度检测,建立一种快速、简便、敏感、特异的甲氨蝶呤检测方法。方法将NH2活性生物素与MTX单抗Ig G化学连接,采用亲和素-HRP酶标记系统,建立放大竞争酶联免疫吸附法,连续制备5批试剂盒,对试剂盒进行批内批间精密度、敏感性、特异性、准确性和稳定性进行验证,检测口服MTX的类风湿关节炎患者血清MTX浓度,并对其检测结果进行判定。结果建立的生物素-亲和素偶联放大竞争酶联免疫吸附法测定甲氨蝶呤的方法具有很好的敏感性和特异性,检测MTX的灵敏度达到0.087 ng/m L,检测下限为0.137 ng/m L,检测线性范围为0.1~10 ng/m L;批内RSD为3.3%~8.7%,平均批内差异为6.5%,批间RSD为7.6%~9.9%,重复性教好,检测回收率为94.2%~112.8%。结论生物素-亲和素偶联放大竞争酶联免疫吸附法检测MTX,操作简单,具有较好的灵敏度和特异性。 展开更多
关键词 甲氨蝶呤 生物素 亲和素 放大竞争酶联免疫吸附法
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酶联免疫吸附法测定乳粉中IgG含量 被引量：3
17
作者 吴定 路桂红 孙德坤 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2000年第2期29-31,共3页
母乳化乳粉中添加保健功能因子人IgG。用饱和硫酸铵法从健康人血清中制备粗IgG ,经SephadexG -1 0 0柱制备纯IgG ;用纯人IgG作为抗原 ,免疫兔子制备兔抗人IgG抗体。建立乳制品中人IgG含量酶联免疫吸附测定 ,最佳包板物浓度为 5.2 5μg/... 母乳化乳粉中添加保健功能因子人IgG。用饱和硫酸铵法从健康人血清中制备粗IgG ,经SephadexG -1 0 0柱制备纯IgG ;用纯人IgG作为抗原 ,免疫兔子制备兔抗人IgG抗体。建立乳制品中人IgG含量酶联免疫吸附测定 ,最佳包板物浓度为 5.2 5μg/ml,最佳血清效价为 1∶1 60 0 ,抗血清亲和力为 2 .4 0× 1 0 7,回收率为 88%～ 94 % ,测定IgG浓度范围为 5.0～1 60ng/ml,最小检测限为 3 .2 5ng/ml。 展开更多
关键词 人IGG 酶联免疫吸附 测定 母乳化乳粉
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酶联免疫吸附分析法测定环境水体中的萘 被引量：3
18
作者 杨丽波 庄惠生 +1 位作者 周纯 叶其炎 《化工环保》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期563-566,共4页
使用自制的包被原和抗萘多克隆兔抗体,建立了测定环境水体中痕量萘的间接竞争酶联免疫吸附法,并优化了实验条件。工作曲线线性方程为I=8.394logρ+50.21(I为抑制率,ρ为萘的质量浓度),线性范围10^(-3)～10μg/L内的相关系数为0.985 6,... 使用自制的包被原和抗萘多克隆兔抗体,建立了测定环境水体中痕量萘的间接竞争酶联免疫吸附法,并优化了实验条件。工作曲线线性方程为I=8.394logρ+50.21(I为抑制率,ρ为萘的质量浓度),线性范围10^(-3)～10μg/L内的相关系数为0.985 6,方法灵敏度为0.944μg/L,检出限为0.250 ng/L,回收率为86.00%～106.00%,批间误差为5.00%～15.00%,批内误差为2.00%～8.00%,与四种结构类似物的交叉率均小于14.0%。 展开更多
关键词 酶联免疫吸附法 萘 分析方法
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三唑磷酶联免疫吸附测定法中包被抗体稳定剂的研究 被引量：1
19
作者 桂文君 梁赤周 +2 位作者 王姝婷 王春梅 朱国念 《农药学学报》 CAS CSCD 2007年第2期165-171,共7页
选择了甘油、山梨醇、聚乙二醇（PEG）、卵清蛋白（OVA）、多肽、糖、氨基酸等试剂,通过经验法和正交法相结合的手段配制了一系列稳定剂,对吸附在酶标板上的三唑磷多克隆抗体进行处理（37℃,1h）后,再在37℃下连续贮存7d,利用直接竞争EL... 选择了甘油、山梨醇、聚乙二醇（PEG）、卵清蛋白（OVA）、多肽、糖、氨基酸等试剂,通过经验法和正交法相结合的手段配制了一系列稳定剂,对吸附在酶标板上的三唑磷多克隆抗体进行处理（37℃,1h）后,再在37℃下连续贮存7d,利用直接竞争ELISA法对不同稳定剂处理的包被抗体免疫活性、亲合性及检测灵敏度进行检测,并与未经稳定剂处理的对照进行比较,筛选得到效果较好的稳定剂1（质量分数：甘油2.5%,氨基酸1.5%,蛋白胨3.0%,离子螯合剂0.1%,防腐剂0.01%）。用稳定剂1处理包被抗体后,4-6℃下保存半年及37℃下保存14d的试验结果表明,抗体的活性相对保持率分别为97.8%和94.2%;其免疫活性、亲合性（I50分别为68.43和54.38ng/mL）及灵敏度（I10分别为3.72和3.22ng/mL）与常规方法包被的抗体（包被好后不贮存,直接检测,I50为60.73ng/mL,I10为3.11ng/mL）无明显差异;冻融试验表明,经稳定剂1处理的三唑磷抗体在反复冻-融次数不超过8次时其活性也是稳定的。说明筛选出的稳定剂可以显著提高三唑磷多克隆包被抗体的稳定性,可用于三唑磷ELISA试剂盒的生产。 展开更多
关键词 酶联免疫吸附测定法 稳定剂 三唑磷 多克隆抗体
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灵芝酸A多克隆抗体制备及酶联免疫吸附测定法的建立 被引量：4
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作者 袁耀武 田益玲 +2 位作者 李升云 杨心怡 马晓飞 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2022年第16期332-337,共6页
以牛血清白蛋白为载体,采用活化酯法合成灵芝酸A的偶联抗原作为免疫原,按照免疫程序接种试验兔,获得针对偶联抗原的多克隆抗体。对多克隆抗体的效价及靶向进行分析后,构建灵芝酸A的间接竞争酶联免疫吸附测定法。结果显示:多克隆抗体中... 以牛血清白蛋白为载体,采用活化酯法合成灵芝酸A的偶联抗原作为免疫原,按照免疫程序接种试验兔,获得针对偶联抗原的多克隆抗体。对多克隆抗体的效价及靶向进行分析后,构建灵芝酸A的间接竞争酶联免疫吸附测定法。结果显示:多克隆抗体中存在靶向偶联抗原3个区域的独特型抗体,总效价为1∶78 125,其中抗灵芝酸A特异性抗体效价为1∶3 125。间接竞争酶联免疫吸附测定法的灵芝酸A检出限为0.3μg/L,半数抑制浓度为4.0μg/L,线性范围在0.6~27.3μg/L之间。样品测定批间变异系数低于10%,样品加标回收率在82.9%~118.6%之间,对22份灵芝粉剂产品的测定结果显示不同品牌产品中灵芝酸A含量的差异极显著,该法测定结果与高效液相色谱法的测定结果相比,相关系数为0.972。结果表明,间接竞争酶联免疫吸附法测定灵芝酸A可行,该方法能够为灵芝保健品市场中相关产品的质量监控提供一种辅助方案。 展开更多
关键词 灵芝酸A 多克隆抗体 间接竞争酶联免疫吸附测定法
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