IFN-γ通过调控Wnt信号通路诱导人牙髓干细胞迁移抑制成骨向分化对牙髓损伤修复的影响

1

作者 程诺 陈希源 +1 位作者 竹思齐 尹鸿民 《实用口腔医学杂志》 北大核心 2025年第3期344-350,共7页

目的:探讨干扰素-γ(IFN-γ)对牙髓损伤修复的影响。方法:分离培养hDPSCs,将hDPSCs分为对照组、0.05 ng/mL IFN-γ组、0.5 ng/mL IFN-γ组、5 ng/mL IFN-γ组、0.5 ng/mL IFN-γ+PDTC组。通过Transwell实验检测hDPSCs迁移能力,采用茜素... 目的:探讨干扰素-γ(IFN-γ)对牙髓损伤修复的影响。方法:分离培养hDPSCs,将hDPSCs分为对照组、0.05 ng/mL IFN-γ组、0.5 ng/mL IFN-γ组、5 ng/mL IFN-γ组、0.5 ng/mL IFN-γ+PDTC组。通过Transwell实验检测hDPSCs迁移能力,采用茜素红染色实验评估IFN-γ对hDPSCs成骨分化能力的影响,Western blot检测hDPSCs的Wnt/β-catenin信号通路表达。构建大鼠牙髓机械性损伤的模型,将三维培养hDPSCs细胞团、添加0.5 ng/mL IFN-γ的hDPSCs细胞团置于建立的大鼠牙髓损伤模型洞内,玻璃离子充填窝洞,HE染色比较各组大鼠牙髓组织修复情况。结果:IFN-γ组迁移的细胞数目明显多于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05),0.5 ng/mL IFN-γ组迁移的细胞数目多于0.05 ng/mL IFN-γ组和5 ng/mL IFN-γ组(P<0.05)。与对照组相比不同浓度的IFN-γ组的hDPSCs的矿化结节、成骨向分化受到明显抑制(P<0.05);与0.5 ng/mL IFN-γ组相比,0.5 ng/mL IFN-γ+信号通路抑制剂PDTC组hDPSCs的矿化结节形成、成骨向分化得到增强(P<0.05)。与对照组比较,IFN-γ组和IFN-γ+PDTC组细胞ALP活性明显降低(P<0.05),且IFN-γ+PDTC组细胞ALP活性高于IFN-γ组,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,IFN-γ组、IFN-γ+PDTC组Wnt1、β-catenin、RUNX2、CyclinD1、OCN蛋白表达水平明显降低,而p-GSK-3β、GSK-3β蛋白表达水平明显增加,组间比较差异有统计学意义(P<0.05),IFN-γ+PDTC组Wnt1、β-catenin、RUNX2、CyclinD1、OCN蛋白表达明显高于IFN-γ组,而p-GSK-3β、GSK-3β蛋白表达水平低于IFN-γ组,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。HE染色结果表明,与对照组相比,IFN-γ组大鼠牙髓机械损伤模型炎症反应加剧,牙本质形成受到明显抑制。结论:IFN-γ能够促进hDPSCs迁移,抑制hDPSCs成骨向分化,对牙髓损伤后修复性牙本质的形成具有抑制作用,可能与Wnt信号通路表达调控有关。 展开更多

关键词 干扰素-Γ WNT信号通路 人牙髓干细胞 成骨向分化 牙髓损伤

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活化α7乙酰胆碱受体促进LPS刺激的人牙髓干细胞牙/骨向分化 被引量：1

2

作者 李梦圆 王宇萌 +4 位作者 徐青清 关卓 卞成玥 江飞 张光东 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2024年第2期145-153,共9页

目的:探讨活化α7乙酰胆碱受体(alpha 7 nicotinic acetylcholine receptor,α7-nAChR)联合钙离子(calcium ion,Ca^(2+)对LPS刺激的人牙髓干细胞(dental pulp stem cell,DPSC)牙/骨向分化的影响。方法:分离培养DPSC,流式细胞术对DPSC进... 目的:探讨活化α7乙酰胆碱受体(alpha 7 nicotinic acetylcholine receptor,α7-nAChR)联合钙离子(calcium ion,Ca^(2+)对LPS刺激的人牙髓干细胞(dental pulp stem cell,DPSC)牙/骨向分化的影响。方法:分离培养DPSC,流式细胞术对DPSC进行表面标志物表达鉴定。CCK-8检测α7-nAChR激动剂PNU-282987和Ca^(2+)对DPSC增殖的影响。通过碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性和染色筛选PNU-282987促进DPSC表达ALP活性的最佳浓度。用大肠杆菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)模拟炎性微环境刺激DPSC。采用免疫印迹分析(Western blot,WB)、实时定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,RT-qPCR)和茜素红染色等方法检测牙/骨向分化的相关蛋白:Ⅰ型胶原(typeⅠcollagen,COL-I)、牙本质涎磷蛋白(dentin sialoprotein,DSPP)、骨钙素(osteopontin,OPN)、ALP、核心转录因子-2(runt-related transcription factor 2,RUNX2)、成骨细胞特异性转录因子(osterix,OSX),相关基因(COL-I、DSPP、OPN、ALP、RUNX2、OSX)和矿化基质表达情况。Fura-2AM用于检测细胞内Ca^(2+)流动情况。结果:CCK-8实验显示,PNU-282987浓度低于10μmol/L时对细胞增殖无抑制作用,且此浓度处理LPS刺激的DPSC后ALP活性增加最明显;Ca^(2+)浓度低于2 mmol/L对细胞增殖无抑制作用;Western blot和RT-qPCR实验显示,PNU-282987及Ca^(2+)处理后的LPS刺激的DPSC牙/骨向分化相关蛋白(COL-I、DSPP、OPN、ALP、RUNX2、OSX)和相关基因(COL-I、DSPP、OPN、ALP、RUNX2、OSX)的表达及矿化基质形成均明显上调,二者联合后上调最显著(P <0.001)。Fura-2 AM钙离子探针结果显示DPSC细胞内Ca^(2+)浓度增加。结论:10μmol/L PNU-282987联合2 mmol/L Ca^(2+)可以促进LPS刺激的DPSC的牙/骨向分化能力。 展开更多

关键词 α7乙酰胆碱受体 牙/骨向分化 人牙髓干细胞 钙离子 脂多糖

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人牙髓干细胞在聚乳酸-聚乙醇酸共聚物支架上粘附与增殖的研究 被引量：17

3

作者 张巍巍 李艳萍 +3 位作者 梁鹏 董海波 甘友华 牛玉梅 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1083-1085,1088,共4页

目的:研究成人牙髓干细胞(HDPSCs)在聚乳酸-聚乙醇酸共聚物(PLGA)支架上粘附与增殖的情况。方法:采用酶消化法分离、培养人牙髓干细胞,免疫组化法及体外诱导分化对细胞进行鉴定。将人牙髓干细胞与PLGA支架材料进行复合培养,扫描电镜(SEM... 目的:研究成人牙髓干细胞(HDPSCs)在聚乳酸-聚乙醇酸共聚物(PLGA)支架上粘附与增殖的情况。方法:采用酶消化法分离、培养人牙髓干细胞,免疫组化法及体外诱导分化对细胞进行鉴定。将人牙髓干细胞与PLGA支架材料进行复合培养,扫描电镜(SEM)观察支架材料形态,细胞粘附、增殖及基质分泌情况;细胞计数检测其增殖力。结果:细胞接种2、5、10d,扫描电镜及细胞计数均显示HDPSCs与PLGA支架材料粘附紧密,生长状态良好,细胞明显增殖(P<0.05),有丰富的细胞外基质形成。结论:PLGA是一种适宜人牙髓干细胞粘附与增殖的支架材料。 展开更多

关键词 成人牙髓干细胞 聚乳酸-聚乙醇酸共聚物 组织工程

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SHH和bFGF体外诱导人牙髓干细胞向神经细胞分化的研究 被引量：6

4

作者 张智慧 胡伟平 +2 位作者 郭阳 曹潇方 袁梦桐 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期631-635,共5页

目的:研究体外使用音猬因子(SHH)、碱性成纤维生长因子(bFGF)体外诱导人牙髓干细胞(DPSCs)分化为神经细胞的可行性,以优化人牙髓干细胞向神经细胞分化的诱导条件。方法:从因正畸或阻生拔除的第一前磨牙或第三磨牙中提取牙髓,采用酶消化... 目的:研究体外使用音猬因子(SHH)、碱性成纤维生长因子(bFGF)体外诱导人牙髓干细胞(DPSCs)分化为神经细胞的可行性,以优化人牙髓干细胞向神经细胞分化的诱导条件。方法:从因正畸或阻生拔除的第一前磨牙或第三磨牙中提取牙髓,采用酶消化及过滤法得到单细胞悬液,有限稀释法培养分离的原代人牙髓干细胞,并进行克隆化培养,检测间充质干细胞特异性标志物STRO-1的表达。将人牙髓干细胞分别接种于含有不同浓度诱导液,MTT法检测不同时间、两种因子单独或联合对细胞增殖能力的影;免疫荧光法检测抗微管相关蛋白(MAP-2)、神经元烯醇化酶(NSE)、胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)的表达。透射电镜观察诱导前后细胞超微结构。结果:克隆来源细胞的间充质干细胞特异性标志物STRO-1表达阳性。100μg/L音猬因子SHH与20μg/L碱性成纤维生长因子bFGF单独作用促增殖作用最强(P<0.05),碱性成纤维生长因子bFGF单独作用各组及对照组均未检测出神经元样细胞。音猬因子SHH作用各组检测到阳性细胞。而100μg/L音猬因子SHH与20μg/L碱性成纤维生长因子bFGF联合增殖和分化作用均优于其它组。透射电镜观察到神经元样细胞表现。结论:100μg/L音猬因子和20μg/L碱性成纤维生长因子联合可以在体外有效诱导人牙髓干细胞分化为神经细胞。 展开更多

关键词 人牙髓干细胞 音猬因子 碱性成纤维生长因子 分化

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成人牙髓干细胞与壳聚糖-磷酸三钙复合材料相容性试验研究 被引量：12

5

作者 李珊 樊明文 梁素霞 《口腔医学研究》 CAS CSCD 2006年第3期264-266,共3页

目的:研究成人牙髓干细胞与壳聚糖-磷酸三钙复合材料的生物相容性。方法:采用冷冻干燥法制备壳聚糖-磷酸三钙复合材料。酶消化法分离,培养人牙髓干细胞,并将达到一定数量级的牙髓干细胞与支架材料进行复合培养,通过扫描电镜观察细胞的... 目的:研究成人牙髓干细胞与壳聚糖-磷酸三钙复合材料的生物相容性。方法:采用冷冻干燥法制备壳聚糖-磷酸三钙复合材料。酶消化法分离,培养人牙髓干细胞,并将达到一定数量级的牙髓干细胞与支架材料进行复合培养,通过扫描电镜观察细胞的生长情况。结果:扫描电镜可见复合材料具有良好的多孔网状结构,成人牙髓干细胞与材料表面紧密贴附,生长良好。结论:复合壳聚糖-磷酸三钙进行培养的成人牙髓干细胞生长良好,具有良好的生物相容性。表明壳聚糖-磷酸三钙完全符合生物支架材料的要求,是一个具有很好应用前景的牙髓组织工程支架材料。 展开更多

关键词 成人牙髓干细胞 组织工程 壳聚糖-磷酸三钙 扫描电镜

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体外共培养人牙髓干细胞对人牙囊干细胞增殖、成骨分化的作用 被引量：3

6

作者 余勇 陶昱 +2 位作者 邓锋 王睿 陈军 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第22期2267-2272,共6页

目的通过体外建立人牙囊干细胞(human dental follicle stem cells,HDFSCs)和人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,HDPSCs)共培养体系,研究HDPSCs对HDFSCs增殖、成骨分化的作用。方法 1利用改良的组织块-消化联合法、免疫组化方... 目的通过体外建立人牙囊干细胞(human dental follicle stem cells,HDFSCs)和人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,HDPSCs)共培养体系,研究HDPSCs对HDFSCs增殖、成骨分化的作用。方法 1利用改良的组织块-消化联合法、免疫组化方法、流式细胞术以及多向诱导方法对HDFSCs和HDPSCs进行分离、培养、鉴定;2采用0.4μm孔径的Transwell小室构建HDFSCs和HDPSCs体外共培养体系;3CCK-8测定HDFSCs增殖活性的变化;4与HDPSCs体外共培养1周,qRTPCR检测HDFSCs几个标志性成骨基因:碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、人类相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,Runx2)、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)、骨涎蛋白(bone sialoprotein,BSP)以及Ⅰ型胶原(collagen type 1,Col-1)的表达情况。结果 1成功分离、培养、鉴定HDFSCs和HDPSCs;2从第4天开始,共培养组HDFSCs的增殖活力明显高于对照组(P<0.05);3与对照组相比,共培养组ALP、Runx2、OPN、BSP、Col-1的相对表达量均明显增高(P<0.05)。结论与HDPSCs共培养能增强HDFSCs增殖活力及成骨分化。 展开更多

关键词 人牙囊干细胞 人牙髓干细胞 体外共培养 成骨分化

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脂多糖调控Notch信号通路作用于人牙髓干细胞增殖、分化、凋亡的实验研究 被引量：4

7

作者 项海东 李浩渤 陈惠珍 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期1483-1486,1497,共5页

目的:探讨脂多糖调控Notch信号通路对人牙髓干细胞增殖、分化、凋亡的影响及机制。方法:从牙髓组织中分离出人牙髓干细胞(h DPSCs),CCK8实验检测0、0.1、1、10μg/ml的脂多糖处理h DPSCs 1、3、5、7 d后细胞的增殖情况;RTPCR检测1μg/m... 目的:探讨脂多糖调控Notch信号通路对人牙髓干细胞增殖、分化、凋亡的影响及机制。方法:从牙髓组织中分离出人牙髓干细胞(h DPSCs),CCK8实验检测0、0.1、1、10μg/ml的脂多糖处理h DPSCs 1、3、5、7 d后细胞的增殖情况;RTPCR检测1μg/ml的脂多糖处理h DPSCs 0、3、7、14、21 d后矿化相关基因ALP、DSPP、DMP1的mRNA表达情况;流式细胞仪检测1μg/ml的脂多糖处理h DPSCs 0、7、14、21 d后的细胞凋亡情况;Western blot检测Cleaved caspase3、Notch1、Hes1的蛋白表达。结果:不同浓度的脂多糖刺激h DPSCs 1、3、5 d后细胞的增殖均无显著差异,培养至第7天时,0.1、1、10μg/ml的脂多糖组细胞的增殖均显著低于0μg/ml的脂多糖组(P<0.01);脂多糖处理h DPSCs 3 d时ALP、DSPP、DMP1的mRNA表达与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05),7、14、21 d时ALP、DSPP、DMP1的mRNA表达均显著高于对照组(P<0.01);脂多糖处理h DPSCs 7、14、21 d时细胞的凋亡率及Cleaved caspase3、Notch1、Hes1蛋白表达均显著高于对照组(P<0.01),21 d时ALP、DSPP、DMP1的mRNA表达及细胞凋亡率和Cleaved caspase3、Notch1、Hes1蛋白表达均有下降趋势。结论:脂多糖可降低h DPSCs的增殖,促进其矿化和凋亡,其机制与激活Notch信号通路有关。 展开更多

关键词 脂多糖 NOTCH信号通路 人牙髓干细胞 增殖 分化 凋亡

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透明质酸微球的制备及细胞毒性的研究 被引量：3

8

作者 张璇 李祥伟 +4 位作者 宋文龙 倪世磊 邱滢 刘慧敏 李娜 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期954-958,共5页

目的:构建适宜牙髓再生的透明质酸(HA)微球支架,评价其作为细胞载体的可行性。方法:乳化交联法制备透明质酸微球,SEM观察其形貌特征及粒径大小,将该微球材料与人牙髓干细胞(hDPSCs)共培养,MTT实验检测hDPSCs在微球存在的微环境内的增殖... 目的:构建适宜牙髓再生的透明质酸(HA)微球支架,评价其作为细胞载体的可行性。方法:乳化交联法制备透明质酸微球,SEM观察其形貌特征及粒径大小,将该微球材料与人牙髓干细胞(hDPSCs)共培养,MTT实验检测hDPSCs在微球存在的微环境内的增殖情况。结果:乳化交联法可制备透明质酸微球,该微球规则、圆整、粒径5~10μm;透明质酸微球浓度0.05~0.8 mg/ml作用24~72 h不抑制hDPSCs增殖,细胞毒性为0级。结论:透明质酸微球可作为应用hDPSCs的载体。 展开更多

关键词 透明质酸(HA)微球 乳化交联 生物相容性 人牙髓干细胞(hDPSCs) 增殖

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模拟微重力环境对人牙髓干细胞体外增殖能力的影响 被引量：2

9

作者 何丽娜 王田田 +3 位作者 张巍巍 潘爽 李艳萍 牛玉梅 《口腔医学研究》 CAS CSCD 2014年第7期600-602,606,共4页

目的:研究模拟微重力环境对人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)在PLGA支架上体外增殖能力的影响。方法:将分离、鉴定后的人牙髓干细胞接种在PLGA支架上,采用MTT法检测普通环境和模拟微重力环境中培养24、48、72h的人牙... 目的:研究模拟微重力环境对人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)在PLGA支架上体外增殖能力的影响。方法:将分离、鉴定后的人牙髓干细胞接种在PLGA支架上,采用MTT法检测普通环境和模拟微重力环境中培养24、48、72h的人牙髓干细胞在PLGA支架上的细胞活性。DAPI荧光染色和流式细胞术比较牙髓干细胞在两种环境培养3d的细胞数量以及细胞周期分布情况。结果:MTT显示模拟微重力组中各时间点的A值均高于普通环境培养组;DAPI荧光染色显示在模拟微重力下培养3d的人牙髓干细胞数量明显多于普通环境培养组;细胞周期分析结果表明模拟微重力组中S期细胞比例明显高于普通环境培养组(P<0.05)。结论:接种在PLGA支架上的人牙髓干细胞在模拟微重力环境下较普通环境具有更高的体外增殖能力。 展开更多

关键词 人牙髓干细胞 模拟微重力 体外 细胞增殖

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RA和bFGF体外诱导人牙髓干细胞向神经细胞分化的研究 被引量：3

10

作者 张智慧 胡伟平 +1 位作者 郭阳 曹潇方 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期676-681,共6页

目的:探讨全反式维甲酸(all-trans-retinoic acid,RA)、碱性成纤维生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)体外诱导人牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSCs)分化为神经细胞的可行性。方法:体外分离培养DPSCs并进行克隆化,检... 目的:探讨全反式维甲酸(all-trans-retinoic acid,RA)、碱性成纤维生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)体外诱导人牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSCs)分化为神经细胞的可行性。方法:体外分离培养DPSCs并进行克隆化,检测STRO-1的表达。将DPSCs分别接种于含有不同浓度RA、bFGF或二者结合的诱导液,MTT法检测细胞增殖能力,免疫荧光法检测微管相关蛋白(microtubule-associated protein-2,MAP-2)、神经元烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)、胶质原纤维酸性蛋白(glial fibrillary acid protein,GFAP)的表达。透射电镜观察诱导前后细胞超微结构。结果:克隆来源细胞的STRO-1表达阳性。0.5μg/ml RA或20 ng/ml bFGF单独应用促增殖作用最强(P<0.05),bFGF单独作用各组及对照组均未检测出神经元样细胞。RA作用各组检测到阳性细胞。而0.5μg/ml RA与20 ng/ml bFGF联合应用的增殖和分化效应均优于其它组。透射电镜观察到幼稚神经元样细胞。结论:RA和bFGF联合应用可在体外有效诱导人DPSCs转化为神经细胞。 展开更多

关键词 人牙髓干细胞 全反式维甲酸 成纤维生长因子-2 分化

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核心结合因子α1对人牙本质基质蛋白1基因转录活性的作用 被引量：2

11

作者 逄键梁 柯杰 +4 位作者 邓天政 朱晓茹 李晓华 张亚庆 吴补领 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期473-476,共4页

目的:观察核心结合因子α1(core binding factorα1,Cbfα1)对人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,HDPSCs)牙本质基质蛋白1(dentin matrix protein 1,DMP1)基因转录活性的影响。方法:将pCMV-Osf2瞬时转染至体外矿化诱导的HDPSCs... 目的:观察核心结合因子α1(core binding factorα1,Cbfα1)对人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,HDPSCs)牙本质基质蛋白1(dentin matrix protein 1,DMP1)基因转录活性的影响。方法:将pCMV-Osf2瞬时转染至体外矿化诱导的HDPSCs中,检测转染后不同时间Cbfα1蛋白的表达变化。将不同长度的DMP1基因启动子片段重组报告基因载体与pCMV-Osf2分别共转染至细胞中,报告基因检测系统检测荧光素酶活性。结果:诱导后的HDPSCs中少量表达Cbfα1,在瞬时转染Cbfα1后,蛋白主要表达于细胞胞质中,并且在转染48 h后表达量达到最高值;Cbfα1可明显增强6个不同长度的DMP1基因启动子片段重组报告基因载体的荧光素酶活性,以pGL3-P-505～+86启动子活性增强最为明显(P<0.05)。计算机分析结果发现,DMP1基因启动子-505～+86 bp区存在Cbfα1的结合位点。结论:Cbfα1可上调人DMP1基因转录活性,是HDPSCs向成牙本质细胞方向分化重要的调节因子之一,DMP1基因启动子序列-199～-185 bp区可能是Cbfα1结合位点。 展开更多

关键词 核心结合因子Α1 牙本质基质蛋白1 人牙髓干细胞 报告基因 转录活性

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lncRNA MEG3对脂多糖诱导人牙髓干细胞衰老的影响 被引量：3

12

作者 朱婷婷 胡青芳 +3 位作者 刘学玉 孙德刚 辛秉昌 高嫘娜 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期294-300,共7页

目的探讨lncRNA母源性印记基因3(maternal imprinting gene 3,MEG3)通过调控ROCK1对LPS诱导人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)衰老的影响。方法从成人牙髓中分离培养hDPSCs,采用10 ng/mL LPS刺激hDPSCs,分别刺激1次(6... 目的探讨lncRNA母源性印记基因3(maternal imprinting gene 3,MEG3)通过调控ROCK1对LPS诱导人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)衰老的影响。方法从成人牙髓中分离培养hDPSCs,采用10 ng/mL LPS刺激hDPSCs,分别刺激1次(6 h)、3次(每次6 h,48 h 1次)、6次(每次6 h,24 h 1次),以生理盐水组为对照组。利用脂质体转染技术分别将lncRNA MEG3 shRNA(sh-MEG3)、sh-NC、ROCK1 siRNA(si-ROCK1)、pcDNA3.1-ROCK1(OE-ROCK1)、si-NC以及OE-NC转染进hDPSCs,构建过表达和沉默细胞模型。采用qRT-PCR法检测lncRNA MEG3的表达水平;Western blot法检测ROCK1和衰老相关蛋白p21和p53的表达水平;SA-β-gal染色检测hDPSCs衰老情况。结果随着LPS刺激时间的延长,lncRNA MEG3、ROCK1、p53和p21的表达逐渐升高,LPS刺激6次组的表达水平均显著高于对照组(P<0.001)。敲降lncRNA MEG3(sh-MEG3)或敲降ROCK1(si-ROCK1)均能下调LPS刺激hDPSCs 6次后ROCK1、p53和p21蛋白的表达水平(P<0.05),且减少了细胞中SA-β-gal阳性细胞数(P<0.01)。同时敲降lncRNA MEG3且过表达ROCK1(sh-MEG3+OE-ROCK1)时,ROCK1、p53和p21的表达水平及SA-β-gal阳性细胞数在LPS刺激6次hDPSCs中均显著低于OE-ROCK1组(P<0.05)。结论敲降lncRNA MEG3可缓解LPS诱导hDPSCs衰老,其机制是通过下调ROCK1表达抑制衰老相关蛋白的表达。 展开更多

关键词 人牙髓干细胞 脂多糖 衰老 lncRNA MEG3 ROCK1

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阿司匹林影响人牙髓间充质干细胞成骨分化的新型药理研究 被引量：3

13

作者 申晓靖 刘海蓉 +4 位作者 刘新燕 赵鹏 郑建金 卢恕来 王超 《中国医学前沿杂志（电子版）》 2017年第1期73-77,共5页

目的通过体外成骨分化诱导实验探究阿司匹林对牙髓间充质干细胞成骨分化的影响及机制,以此作为突破口,为牙质再生提供新思路。方法体外成功分离并培养人牙髓间充质干细胞,采用含转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)... 目的通过体外成骨分化诱导实验探究阿司匹林对牙髓间充质干细胞成骨分化的影响及机制,以此作为突破口,为牙质再生提供新思路。方法体外成功分离并培养人牙髓间充质干细胞,采用含转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)的成骨诱导分化培养基,诱导分化20天后,采用碱性磷酸酶染色,观察不同浓度阿司匹林对牙髓间充质干细胞成骨分化的影响,并采用实时定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)法检测与成骨相关转录因子(Runx2、Osterox、ALP)和细胞增殖相关干性基因(Sox2、Nanog、Oct4)的表达。结果成功体外分离并培养人牙髓间充质干细胞,成骨诱导20天后,结果显示,阿司匹林可明显促进人牙髓间充质干细胞成骨分化。随着阿司匹林浓度逐渐增加,碱性磷酸酶染色的染色率明显上调;细胞克隆数显著降低;实时定量PCR检测显示,与成骨相关转录因子(Runx2、Osterox、ALP)的表达均显著上调,但与细胞增殖相关干性基因(Sox2、Nanog、Oct4)的表达均显著下调。结论阿司匹林可影响人牙髓间充质干细胞成骨分化,可显著提高碱性磷酸酶的染色率,并上调与成骨相关转录因子的表达。以促进人牙髓间充质干细胞成骨分化为突破口,可为牙质再生提供新思路。 展开更多

关键词 阿司匹林 人牙髓间充质干细胞 成骨分化

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人重组转化生长因子β1促进牙髓干细胞的增殖和矿化 被引量：8

14

作者 贾维茜 赵玉鸣 葛立宏 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期680-684,共5页

目的:研究人重组转化生长因子β1(recombinant human transforming growth factorβ1,rh TGF-β1)对牙髓干细胞生物学性能的影响,包括确定促进牙髓干细胞增殖的最佳作用浓度和该浓度下对牙髓干细胞分化的作用。方法:分离培养人健康第三... 目的:研究人重组转化生长因子β1(recombinant human transforming growth factorβ1,rh TGF-β1)对牙髓干细胞生物学性能的影响,包括确定促进牙髓干细胞增殖的最佳作用浓度和该浓度下对牙髓干细胞分化的作用。方法:分离培养人健康第三磨牙牙髓干细胞,分别加入1μg/L、6μg/L、10μg/L的rh TGF-β1,CCK-8(cell counting kit-8)法检测对牙髓干细胞增殖的影响,选择出最佳浓度在成骨/成牙本质诱导条件下连续培养,酶标仪检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)光密度值,二喹啉甲酸(bicinchoninic acid,BCA)蛋白质定量试剂盒计算总蛋白含量,两者比值作为ALP相对活性的指标。茜素红染色观察矿化结节形成能力,染色液洗脱后检测光密度值,比较rh TGF-β1对牙髓干细胞增殖和分化的作用。结果:牙髓干细胞具有体外形成矿化结节的能力,6μg/L rh TGF-β1可促进牙髓干细胞增殖;连续培养7 d后,6μg/L rh TGF-β1组细胞ALP的光密度值为0.31±0.03,显著高于对照组0.02±0.01(P<0.05);6μg/L rh TGF-β1组总蛋白含量为(2 775.46±83.54)mg/L,对照组为(1 432.20±110.83)mg/L(P<0.05);ALP相对光密度值,6μg/L rh TGF-β1组较对照组提高了6倍。茜素红染色下显示矿化结节形成增加,洗脱液光密度值6μg/L rh TGF-β1组和对照组分别为0.83±0.02和0.55±0.05,P<0.05。结论:6μg/L rh TGF-β1具有促进牙髓干细胞增殖和促进体外成牙本质分化的作用。 展开更多

关键词 牙髓干细胞 人重组转化生长因子β1 成牙本质细胞 分化

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转化生长因子β1对人牙髓干细胞成纤维向分化的作用 被引量：1

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作者 姜力铭 宋戈 +1 位作者 夏商 陈旭 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期398-401,405,共5页

目的 研究不同浓度转化生长因子β1(TGF-β1)促进人牙髓干细胞(hDPSCs)成纤维分化的作用。方法 利用含有不同浓度(1、5、10、20 ng/m L)TGF-β1的细胞培养基培养h DPSCs,分别在第1、3和7天时检测细胞增殖情况;在第7和14天时,采用RT-PC... 目的 研究不同浓度转化生长因子β1(TGF-β1)促进人牙髓干细胞(hDPSCs)成纤维分化的作用。方法 利用含有不同浓度(1、5、10、20 ng/m L)TGF-β1的细胞培养基培养h DPSCs,分别在第1、3和7天时检测细胞增殖情况;在第7和14天时,采用RT-PCR方法检测成纤维相关因子[I型胶原蛋白(Collagen I)、纤连蛋白(Fibronectin)、骨膜蛋白(Periostin)和α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)]的表达情况。结果 MTT结果显示,第7天时,TGF-β1(1 ng/mL和5 ng/mL)可明显促进hDPSCs增殖。RT-PCR结果表明:第7d时,1ng/m L组、5 ng/m L组和10 ng/m L组Collagen I的表达水平分别为对照组的8.2倍、9.3倍和8.1倍,α-SMA的表达水平分别为对照组的6.2倍、6.7倍和5.8倍。5 ng/mL和10 ng/mL组的Periostin表达水平相近,约为1 ng/mL和20 ng/mL组的3.2倍和1.8倍(P<0.05)。第14天时,各实验组的成纤维相关因子表达水平均下降,但仍高于对照组。结论 TGF-β1可以促进h DPSCs的成纤维分化,浓度为10ng/mL时效果最明显。 展开更多

关键词 转化生长因子Β1 人牙髓干细胞 成纤维分化

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CD146在人牙髓干细胞中表达的研究 被引量：2

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作者 杨雪超 吕孝帅 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期122-125,共4页

目的:研究CD146在人牙髓干细胞及其诱导分化过程中的表达情况。方法:体外培养人牙髓干细胞,免疫荧光及流式细胞术检测CD146的表达。矿化诱导人牙髓干细胞分化,检测牙本质唾蛋白的表达,从mRNA及蛋白水平检测诱导过程中CD146的表达。结果... 目的:研究CD146在人牙髓干细胞及其诱导分化过程中的表达情况。方法:体外培养人牙髓干细胞,免疫荧光及流式细胞术检测CD146的表达。矿化诱导人牙髓干细胞分化,检测牙本质唾蛋白的表达,从mRNA及蛋白水平检测诱导过程中CD146的表达。结果:免疫荧光及流式细胞术证明人牙髓干细胞中CD146表达阳性。使用矿化诱导液培养人牙髓干细胞,通过检测到牙本质唾蛋白的表达,证明细胞已向成牙本质细胞方向分化;在此诱导过程中,CD146在人牙髓干细胞中的表达逐渐下调。CD146在人牙髓干细胞中有较特异性的表达,有可能作为其特异性标志物。 展开更多

关键词 人牙髓干细胞 CD146 牙本质唾蛋白

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Wnt信号通路在调控牙髓干细胞多向分化及炎症损伤修复中的作用 被引量：11

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作者 杨鑫 李思洁 赵玮 《国际口腔医学杂志》 CAS CSCD 2018年第3期286-290,共5页

人牙髓干细胞(hDPSC)和乳牙牙髓干细胞(SHED)均属于间充质干细胞,具有多向分化潜能。Wnt信号通路包括经典Wnt/β-catenin信号通路和非经典Wnt信号通路,参与牙齿的生长发育过程,能促进牙损伤的修复。在炎症状态下,激活的Wnt信号通路可加... 人牙髓干细胞(hDPSC)和乳牙牙髓干细胞(SHED)均属于间充质干细胞,具有多向分化潜能。Wnt信号通路包括经典Wnt/β-catenin信号通路和非经典Wnt信号通路,参与牙齿的生长发育过程,能促进牙损伤的修复。在炎症状态下,激活的Wnt信号通路可加快牙损伤修复,参与hDPSC的增殖与成牙本质向分化过程。在非炎症状态下,Wnt信号通路参与调控hDPSC和SHED成骨、成牙本质方向分化,抑制其成脂向分化。 展开更多

关键词 WNT信号通路 牙髓干细胞 乳牙牙髓干细胞 分化

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盐酸千金藤碱对人牙髓干细胞增殖及成骨分化能力的影响

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作者 岳二丽 赵哲 +1 位作者 李夏宁 赵红宇 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2021年第3期400-403,共4页

目的:初步探究盐酸千金藤碱(CH)对人牙髓干细胞(DPSC)增殖和成骨分化能力的影响。方法:体外分离培养鉴定人DPSC,MTT法检测0.0、2.5、5.0、10.0和20.0μmol/L CH处理24、48和72 h对DPSC增殖能力的影响,Western blot检测DPSC中骨钙素(OCN... 目的:初步探究盐酸千金藤碱(CH)对人牙髓干细胞(DPSC)增殖和成骨分化能力的影响。方法:体外分离培养鉴定人DPSC,MTT法检测0.0、2.5、5.0、10.0和20.0μmol/L CH处理24、48和72 h对DPSC增殖能力的影响,Western blot检测DPSC中骨钙素(OCN)和核心结合因子(RUNX2)的表达。结果:DPSC细胞为典型的间充质干细胞形态,表达间充质干细胞表面标记物CD44且有成骨分化能力。2.5和5.0μmol/L CH可促进DPSC的增殖且使DPSC中OCN及RUNX2蛋白的表达水平升高(P<0.05)。结论:CH可促进人DPSC的增殖和成骨分化的能力。 展开更多

关键词 牙髓干细胞 盐酸千金藤碱 成骨分化

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载柚皮苷羟基磷灰石胶原支架对人牙髓干细胞体外增殖及成骨向分化的影响 被引量：14

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作者 侯婷婷 潘爽 +3 位作者 李艳萍 何丽娜 肖婉鲁 牛玉梅 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2019年第8期744-747,共4页

目的:探讨载柚皮苷羟基磷灰石胶原复合支架对人牙髓干细胞体外增殖以及成骨向分化的影响。方法:体外扩增人牙髓干细胞与复合支架联合培养。采用CCK-8法检测人牙髓干细胞在支架上的增殖能力,通过检测碱性磷酸酶活性、茜素红染色和蛋白质... 目的:探讨载柚皮苷羟基磷灰石胶原复合支架对人牙髓干细胞体外增殖以及成骨向分化的影响。方法:体外扩增人牙髓干细胞与复合支架联合培养。采用CCK-8法检测人牙髓干细胞在支架上的增殖能力,通过检测碱性磷酸酶活性、茜素红染色和蛋白质印迹法观察支架对细胞体外成骨向分化能力的影响。结果:载柚皮苷羟基磷灰石胶原复合支架能促进牙髓干细胞增殖(P<0.05),并能增加其ALP活性(P<0.05)增强矿化能力,并对成骨相关标记蛋白RUNX-2和BMP-2的表达具有上调作用。结论:载柚皮苷羟基磷灰石胶原支架可提高人牙髓干细胞的增殖能力以及成骨分化的潜能。 展开更多

关键词 柚皮苷 羟基磷灰石胶原支架 人牙髓干细胞 成骨向分化增殖

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整合素α6对模拟微重力下人牙髓干细胞粘附能力的影响 被引量：6

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作者 杨典凇 潘爽 +3 位作者 何丽娜 李艳萍 张琳 牛玉梅 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期361-364,共4页

目的:探究整合素α6对模拟微重力下人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)粘附能力的影响。方法:以PLGA支架为载体,将采用酶消化法培养的hDPSCs接种在PLGA支架上,分普通重力组和模拟微重力组培养72h,Western blot检测整合... 目的:探究整合素α6对模拟微重力下人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)粘附能力的影响。方法:以PLGA支架为载体,将采用酶消化法培养的hDPSCs接种在PLGA支架上,分普通重力组和模拟微重力组培养72h,Western blot检测整合素α6(Integrinα6)、整合素αv(Integrinαv)、整合素β1(Integrinβ1)、粘着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)、磷酸化粘着斑激酶(phospho-FAK)的达;si-RNA转染hDPSCs,抑制整合素α6表达,DAPI荧光染色检测转染后hDPSCs在PLGA支架上的粘附数量,Western blot检测转染后hDPSCs中整合素β1、FAK、phospho-FAK的表达。结果:模拟微重力下,整合素α6、phospho-FAK蛋白水平上调(P<0.05),整合素αv、整合素β1和FAK的蛋白水平未见显著性差异;si-RNA转染的hDPSCs粘附能力、phosphoFAK蛋白水平均低于对照组(P<0.05),整合素β1和FAK的蛋白水平未见显著性差异。结论:模拟微重力下,hDPSCs在PLGA支架上粘附能力增强可能与整合素α6及其下游信号分子FAK的表达水平上调相关。 展开更多

关键词 人牙髓干细胞 模拟微重力 细胞粘附 整合素

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