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2017年中国普通人群H5和H9亚型流感病毒抗体水平检测分析 被引量：2
1
作者 赵新燕 陈跃飞 王晶钰 《动物医学进展》 北大核心 2018年第11期125-129,共5页
了解我国各省区人体H5和H9亚型流感病毒抗体水平变化,为我国流感防控政策的制定提供科学依据。2017年3月~4月份分批采集了来自中国大陆31个省市自治区18岁~94岁之间普通人群血样3 145份,采用微量血凝抑制试验检测H5和H9亚型流感病毒抗... 了解我国各省区人体H5和H9亚型流感病毒抗体水平变化,为我国流感防控政策的制定提供科学依据。2017年3月~4月份分批采集了来自中国大陆31个省市自治区18岁~94岁之间普通人群血样3 145份,采用微量血凝抑制试验检测H5和H9亚型流感病毒抗体水平。结果表明,我国人群中H5亚型流感病毒抗体总阳性率60.48%,阳性主要集中在18~29岁和70岁~99岁年龄段;H9亚型流感病毒抗体总阳性率为3.78%,阳性主要集中在30岁~39岁年龄段。从性别来看,H5和H9亚型流感病毒抗体阳性率女性显著的高于男性。就地域而言,我国东北部分省市及沿海省市流感病毒抗体阳性率偏高,其中吉林省人群中H5亚型流感病毒抗体阳性率78.57%,海南省人群中H9亚型流感病毒抗体阳性率为28.57%;我国中部及西北地区H5和H9流感病毒抗体阳性率较低。我国大部分省市人群中H5亚型流感病毒抗体阳性率显著高于H9亚型流感病毒抗体阳性率。 展开更多
关键词 h5亚型流感病毒 h9亚型流感病毒 抗体水平 血凝抑制试验 普通人群
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H9亚型流感病毒数字RT-PCR检测方法的建立与应用 被引量：1
2
作者 吴斌 苏立明 +2 位作者 张琳 马嗣同 肇慧君 《中国家禽》 北大核心 2017年第21期62-65,共4页
通过数字RT-PCR和实时定量RT-PCR两种方法的比对试验,建立快速检测H9亚型流感的数字RT-PCR方法。利用同一对引物和探针,以梯度稀释的方法测定这两种方法针对H9亚型流感的灵敏性、特异性及重现性。结果显示:两种方法均能够检测出104倍稀... 通过数字RT-PCR和实时定量RT-PCR两种方法的比对试验,建立快速检测H9亚型流感的数字RT-PCR方法。利用同一对引物和探针,以梯度稀释的方法测定这两种方法针对H9亚型流感的灵敏性、特异性及重现性。结果显示:两种方法均能够检测出104倍稀释的H9亚型流感病毒,而数字RT-PCR可以检测出单个微滴中的H9亚型流感病毒,其灵敏度性高于实时定量RT-PCR;两种方法的特异性和重复性都较好,对H3N2、H4N2、H6N2等亚型流感病毒均未有扩增反应。数字RT-PCR方法比实时定量RT-PCR具有更高的灵敏度,在快速检测H9亚型流感病毒方面可发挥重要作用。 展开更多
关键词 h9亚型流感病毒 数字RT—PCR 实时定量RT—PCR
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广西马源H9亚型流感病毒的血清学调查 被引量：3
3
作者 韦建华 何奇松 +2 位作者 冯淑萍 熊毅 颜健华 《广西畜牧兽医》 2015年第4期176-177,共2页
为了解广西马源H9亚型流感病毒的感染情况,本研究从广西4个主要养马地区采集马血清样品共计1 110份,采用血凝抑制(HI)试验方法进行抗体检测。结果显示,1 110份血清样品中共检测出阳性血清7份,平均抗体阳性率为0.54%。本实验结果表明,广... 为了解广西马源H9亚型流感病毒的感染情况,本研究从广西4个主要养马地区采集马血清样品共计1 110份,采用血凝抑制(HI)试验方法进行抗体检测。结果显示,1 110份血清样品中共检测出阳性血清7份,平均抗体阳性率为0.54%。本实验结果表明,广西马群已受到H9亚型流感病毒的感染。 展开更多
关键词 马源h9亚型流感病毒 血清学调查
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2024年安徽省H9N2亚型禽流感病毒遗传进化和抗原性分析
4
作者 李玉冬 周迎春 +13 位作者 段倩倩 曹婕 董金泽 陈洪壮 束思成 佟琪 赵传阔 王维 刘畅 王军 陈静 蒲娟 何长生 朱良强 《中国兽医杂志》 北大核心 2025年第7期1-11,共11页
为了解析H9N2亚型禽流感病毒(AIV)在安徽省的遗传进化特征和抗原性变化,本试验于2024年在安徽省城乡农贸活禽市场、家禽规模养殖场和屠宰厂采集家禽咽拭子并进行AIV分离鉴定。挑选4株2024年安徽H9N2亚型AIV分离毒株进行全基因组测序后,... 为了解析H9N2亚型禽流感病毒(AIV)在安徽省的遗传进化特征和抗原性变化,本试验于2024年在安徽省城乡农贸活禽市场、家禽规模养殖场和屠宰厂采集家禽咽拭子并进行AIV分离鉴定。挑选4株2024年安徽H9N2亚型AIV分离毒株进行全基因组测序后,结合安徽省所有H9N2亚型AIV公开序列数据,进行8个基因片段(PB2、PB1、PA、HA、NP、NA、M、NS)的同源性分析、遗传进化分析、关键氨基酸和糖基化位点分析以及抗原性分析。结果显示,本试验共采集了1033份拭子样本,鉴定出334株H9N2亚型AIV,分离率为32.33%。4株2024年安徽H9N2亚型AIV分离毒株的PB1、PA、HA基因序列一致度差异较大(88.65%~98.05%),而PB2、NP、NA、M、NS基因序列一致度较为接近(92.19%~99.08%)。HA基因的遗传进化分析显示,2株鸡源和1株鸭源H9N2亚型AIV分离毒株属于B谱系的B4.7.2分支,1株鹅源H9N2亚型AIV分离毒株属于B谱系的B4.7.3分支;PB2、PB1、PA、NP、NA、M、NS基因遗传进化分析显示,2024年安徽H9N2亚型AIV分离毒株与近年来的人源H9N2亚型AIV分离毒株遗传距离接近,2024年2月鸡源H9N2亚型AIV分离毒株的PA基因与野鸟源H9N2亚型AIV的亲缘关系较近。关键氨基酸分析显示,与参考株序列相比,4株2024年安徽H9N2亚型AIV分离毒株HA蛋白的130-loop、150-loop和190-helix存在明显氨基酸多态性;鹅源H9N2亚型AIV分离毒株HA蛋白在第289~291位可能出现了N-糖基化修饰的缺失,值得关注。抗原性评估显示,2024年安徽H9N2亚型AIV分离毒株均属于当前优势流行的抗原群,鹅源H9N2亚型AIV分离毒株表现出明显的抗原漂移。结果表明,2024年安徽H9N2亚型AIV在不同宿主中显示出较高的遗传多样性,HA蛋白的受体结构域存在变异和抗原性漂移,有向家禽和人类传播扩散的风险隐患。 展开更多
关键词 h9N2亚型禽流感 遗传进化 抗原性分析
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某活禽批发市场通过外售禽类和转运笼具扩散H9亚型禽流感病毒的定量风险评估
5
作者 姚玲 陈斌 +7 位作者 周立新 岳建国 李敏 张毅 梁璐琪 周潇潇 叶斌 阳爱国 《中国动物检疫》 2025年第3期27-33,共7页
为评估2023年我国西部地区某活禽批发市场通过外售禽类和转运笼具扩散H9亚型禽流感病毒(AIV)的风险,并寻找风险因素进行针对性防控,用定量风险评估的方法,绘制可能造成病原扩散的风险路径,通过@Risk软件对相关参数进行模拟运算,运用敏... 为评估2023年我国西部地区某活禽批发市场通过外售禽类和转运笼具扩散H9亚型禽流感病毒(AIV)的风险,并寻找风险因素进行针对性防控,用定量风险评估的方法,绘制可能造成病原扩散的风险路径,通过@Risk软件对相关参数进行模拟运算,运用敏感性分析发现影响模型结果的参数。结果显示:2023年该市场售出1批家禽扩散H9亚型AIV的概率为1.38×10^(-4)(95%CI:0.77×10^(-4)~2.12×10^(-4));通过转运笼具调运活禽扩散H9亚型AIV的概率为3.00×10^(-3)(95%CI:0.74×10^(-3)~7.20×10^(-3));敏感性分析发现,该活禽批发市场通过外售禽类扩散H9亚型AIV的风险主要取决于场内销售摊位鸡的平均批次流行率,通过转运笼具扩散H9亚型AIV的风险主要取决于每次调入活禽时笼具置换出场的比例。据此提出加强市场有效洗消、减少笼具流通、完善外调管理等建议,以期为防控H9亚型AIV从活禽批发市场扩散提供参考。 展开更多
关键词 h9亚型禽流感 活禽批发市场 扩散 定量风险评估
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2023—2024年我国部分地区H9N2亚型禽流感病毒流行病学调查和疫苗株筛选
6
作者 王金右 车艳杰 +3 位作者 宋新宇 张博文 付旭彬 孙英峰 《中国兽医杂志》 北大核心 2025年第7期12-22,共11页
为了解2023年12月—2024年9月我国H9N2亚型禽流感病毒(AIV)的分子流行病学和遗传变异情况,并筛选免疫原性更好的H9N2亚型AIV疫苗株,本试验自甘肃、广西、山东、河北、辽宁、黑龙江、广东、湖北、江苏、安徽、河南、内蒙古和山西采集280... 为了解2023年12月—2024年9月我国H9N2亚型禽流感病毒(AIV)的分子流行病学和遗传变异情况,并筛选免疫原性更好的H9N2亚型AIV疫苗株,本试验自甘肃、广西、山东、河北、辽宁、黑龙江、广东、湖北、江苏、安徽、河南、内蒙古和山西采集280份疑似AIV发病肉鸡和蛋鸡的临床样本,进行AIV-H9亚型核酸检测、HA基因测序分析和病毒分离,并采用分离毒制备油乳剂灭活疫苗,与购买的商品化三联灭活疫苗进行交叉血凝抑制(HI)试验和攻毒保护试验,以筛选出免疫原性较好的毒株进行攻毒保护试验。结果显示,280份样本中24份呈H9N2亚型AIV阳性,24份阳性样本的HA基因均属于h9.4.2.5分支(也被称为Y280谱系),它们之间的HA核苷酸同源性为90.10%~99.90%,氨基酸同源性为91.44%~99.82%。24份阳性样本的HA蛋白裂解位点均为333PSRSSR↓GLF341,符合低致病性AIV特征;HA蛋白受体结合位点变异主要表现为在R381K、Q234L和T198V的突变。将24份阳性样本接种无特定病原体(SPF)鸡胚获得9株分离毒,其中A/Chicken/Shandong/JY17/2024(H9N2)(简称SD17株)交叉HI抗体滴度较高,且制备的油乳剂灭活疫苗对流行毒株的免疫保护率不低于90%。结果表明,h9.4.2.5分支为我国H9亚型AIV的HA基因主流分支,结合关键氨基酸位点分析,H9亚型AIV逐步向哺乳动物适应性和气溶胶传播方向发生变异。本试验分离的A/Chicken/Shandong/JY17/2024(H9N2)制备的油乳剂灭活疫苗对H9N2亚型AIV流行毒株的免疫保护效果良好,可作为疫苗候选株用于研制新型H9N2亚型AIV疫苗。 展开更多
关键词 h9N2亚型禽流感病毒 流行病学调查 hA基因 交叉免疫保护
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禽H9N2亚型流感病毒对猪的致病性研究
7
作者 张梅 《猪业科学》 2025年第9期60-60,共1页
近年来,猪作为重要的经济动物及流感病毒的“混合容器”,其与禽流感病毒的相互作用愈发受到关注。H9N2亚型流感病毒对猪的致病性研究,不仅是深入理解该病毒跨种传播机制的关键环节,更有助于预测和防范可能引发的新型流感疫情。1材料与方... 近年来,猪作为重要的经济动物及流感病毒的“混合容器”,其与禽流感病毒的相互作用愈发受到关注。H9N2亚型流感病毒对猪的致病性研究,不仅是深入理解该病毒跨种传播机制的关键环节,更有助于预测和防范可能引发的新型流感疫情。1材料与方法1.1病毒与动物病毒株:禽源H9N2(A/Chicken/China/2022),EID50=107.3/0.1mL。 展开更多
关键词 h9N2亚型流感病毒 跨种传播 致病性
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H9N2亚型禽流感的流行病学与防控措施
8
作者 赵艳姣 《北方牧业》 2025年第11期35-35,共1页
H9N2亚型禽流感是我国二类传染病,本病在家禽和水禽中普遍发生,可造成蛋鸡、蛋鸭、蛋鹅产蛋量下降,肉鸡、肉鹅以及肉鸭复合型呼吸道疾病,给养禽业造成了巨大的经济损失。本文对H9N2亚型禽流感的流行病学和防控措施进行综合阐述,为今后... H9N2亚型禽流感是我国二类传染病,本病在家禽和水禽中普遍发生,可造成蛋鸡、蛋鸭、蛋鹅产蛋量下降,肉鸡、肉鹅以及肉鸭复合型呼吸道疾病,给养禽业造成了巨大的经济损失。本文对H9N2亚型禽流感的流行病学和防控措施进行综合阐述,为今后在临床上预防禽H9N2亚型禽流感的发生提供基础依据。 展开更多
关键词 防控措施 流行病学 h9N2亚型禽流感
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灰树花多糖纳米乳的制备及其对H9亚型禽流感病毒与常见细菌抑制效果的评估 被引量：4
9
作者 刘博 毕研丽 +6 位作者 杨丽梅 冯宗玲 李佳 苏海歌 孙红武 张艳 王文秀 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期856-862,共7页
为制备灰树花多糖(GFP)纳米乳,并观察其理化及形态学特征,评估其对H9亚型禽流感病毒(AIV)及3种常见细菌的抑制效果,本研究采用低能乳化法制备GFP纳米乳,经不同方式处理后观察GFP纳米乳的稳定性,分别采用透射电镜和扫描电镜观察其形态特... 为制备灰树花多糖(GFP)纳米乳,并观察其理化及形态学特征,评估其对H9亚型禽流感病毒(AIV)及3种常见细菌的抑制效果,本研究采用低能乳化法制备GFP纳米乳,经不同方式处理后观察GFP纳米乳的稳定性,分别采用透射电镜和扫描电镜观察其形态特征,使用激光粒度仪测定GFP纳米乳的粒径与多分散系数(PDI),使用电位仪测定其Zeta电位。结果显示:该GFP纳米乳外观澄清、透明,8000 r/min离心20 min和室温静止7 d后不分层、不破乳,表明制备的GFP纳米乳性状稳定。电镜观察可见许多单一分布的均匀圆球,其周围包裹着网格状凝胶基质;GFP纳米乳的粒径为10 nm~100 nm,平均粒径24.12 nm,PDI为0.096,Zeta电位为-18.6±4.3 m V,表明GFP纳米乳稳定性较好。将不同浓度的GFP纳米乳及免手洗凝胶消毒剂分别于MDCK细胞中与H9亚型AIV NJ02株作用,通过计算各药物对H9亚型AIV的抑制率比较GFP纳米乳对H9亚型AIV的抑制效果。将不同稀释度的GFP纳米乳、GFP溶液及免手洗凝胶和75%乙醇分别与AIV NJ02株作用后,采用荧光定量PCR(q PCR)检测H9亚型AIV基因的拷贝数,并计算各药物对H9亚型AIV的抑制率。采用药敏纸片法检测GFP纳米乳、GFP原液、免手洗凝胶对禽舍3种常见细菌的抑菌效果。对H9亚型AIV的抑制率检测结果显示,当浓度低于10μL/mL时,GFP纳米乳及免手洗凝胶消毒剂对H9亚型AIV的抑制率均小于55%,效果不明显;当浓度大于40μL/mL时,GFP纳米乳对H9亚型AIV的抑制率极显著高于同浓度的免手洗凝胶(P<0.01);当浓度为80μL/mL时,GFP纳米乳可以100%抑制病毒增殖,且对细胞无毒性。qPCR结果显示,10倍稀释的各药物对H9亚型AIV的抑制率均明显高于100倍稀释的各药物,且10倍稀释的GFP纳米乳对H9亚型AIV的抑制率均极显著高于免手洗凝胶、GFP原液和75%乙醇(P<0.01)。纸片扩散法结果显示,GFP纳米乳对金黄色葡萄球菌的抑菌效果较差,对枯草芽孢杆菌和大肠杆菌的抑菌效果较强,但总体GFP纳米乳的抑菌效果比免手洗凝胶稍差。上述结果表明,本研究制备的GFP纳米乳性状稳定,对体外培养的H9亚型AIV具有良好的抑制效果,对禽舍常见细菌具有一定的抑制效果,且安全无毒副作用,有望作为安全高效的纳米消毒剂用于畜禽和人类的消毒。本研究为开发新型抗病毒中草药纳米消毒剂奠定了实验基础。 展开更多
关键词 灰树花多糖 纳米乳 h9亚型禽流感病毒 抑菌效果
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一株H9N2亚型禽流感病毒抗原变异株产生原因的分析 被引量：1
10
作者 乔淑媛 滕巧泱 +6 位作者 李雪松 刘芹防 张志飞 王思琪 李泽君 杨健美 王彩云 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2024年第4期39-45,共7页
目前,H9N2亚型禽流感病毒是我国最主要的低致病性禽流感病毒,造成禽养殖业的严重经济损失。H9N2禽流感病毒灭活疫苗是防控该疫病的最有效方式,然而,H9N2病毒在免疫压力下容易产生抗原变异,导致疫苗免疫失败,其机制尚不清楚。在前期研究... 目前,H9N2亚型禽流感病毒是我国最主要的低致病性禽流感病毒,造成禽养殖业的严重经济损失。H9N2禽流感病毒灭活疫苗是防控该疫病的最有效方式,然而,H9N2病毒在免疫压力下容易产生抗原变异,导致疫苗免疫失败,其机制尚不清楚。在前期研究中,我们通过模拟H9N2禽流感免疫压力筛选出携带HA_(D201N)单点突变的逃逸株,但HA_(D201N)如何导致H9N2病毒逃逸株出现的原因尚不明确。为此,本研究利用8质粒反向遗传技术方法拯救出1株A/Chicken/Shanghai/1/2006(H9N2)(简称SH1)及其免疫逃逸株rSH1-HA_(D201N)。为了鉴定HA_(D201N)是否通过影响H9N2禽流感病毒复制能力而导致病毒发生免疫逃逸,用0.001 MOI的病毒接种MDCK并测定其生长曲线,结果表明HA_(D201N)点突变可显著降低rSH1病毒的复制能力,且病毒复制能力的变化不是rSH1病毒发生逃逸的主要原因。为了研究HA_(D201N)是否通过影响H9N2病毒抗原变异而产生病毒逃逸株,将原毒株与突变毒株加入佐剂后免疫鸡以制备多克隆抗体血清,利用交叉HI试验,计算R值并分析抗原变异,结果表明rSH1与rSH1-HA_(D201N)的R值为2,说明HA_(D201N)会导致rSH1发生显著的抗原变异,从而使病毒在免疫压力下逃逸。本研究为探索H9N2禽流感病毒抗原变异规律及其疫苗研发奠定了基础。 展开更多
关键词 h9N2亚型禽流感病毒 反向遗传技术 点突变 免疫逃逸
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2023年江苏常州地区H9N2亚型禽流感病毒遗传演化与抗原性分析 被引量：1
11
作者 李玉冬 张海涛 +12 位作者 罗燕 周勇 董金泽 陈洪壮 束思成 陈雪 张双玉 刘晓妹 杨亚军 李荣杰 夏福芳 蒲娟 罗坚强 《中国家禽》 北大核心 2024年第11期106-114,共9页
试验旨在调查H9N2亚型禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)在江苏省常州市的流行情况。2023年3—12月,在常州市所有辖区的交易平台、散养户、活禽市场、屠宰场等7种场所类型的147个采样场点开展H9N2亚型AIV流行病学调查,试验采集鸡... 试验旨在调查H9N2亚型禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)在江苏省常州市的流行情况。2023年3—12月,在常州市所有辖区的交易平台、散养户、活禽市场、屠宰场等7种场所类型的147个采样场点开展H9N2亚型AIV流行病学调查,试验采集鸡、鸭、鹅、鸽等咽拭子、组织样品以及环境拭子共计1970份,进行AIV分离及其流行病学特征分析,并对分离的H9N2亚型AIV进行遗传演化、关键氨基酸与糖基化位点和抗原性分析。结果显示:共鉴定出73株H9N2亚型AIV,平均分离率为3.70%;4月和5月分离率较高,分别为7.07%和8.00%;分离地点中活禽市场和交易平台的分离率最高;H9N2亚型AIV在鸡、鸭、鸽、野鸟粪便和环境中均有分离,在环境和鸡中的分离率最高,分别为6.90%和4.15%;分离的H9N2亚型AIV属于欧亚谱系9.1分支中Group2群,与2021—2023年多个地区人感染H9N2亚型AIV亲缘关系较近;与参考株序列相比,H9N2亚型AIV分离株HA蛋白的130-loop、150-loop及190-helix存在明显氨基酸多态性,但没有发现新的糖基化位点;H9N2亚型AIV分离株均属于当前优势流行的抗原群,尚未发生明显抗原漂移。综上所述,江苏常州地区H9N2亚型AIV流行的热点场所是活禽市场和交易平台,提示环境消毒是控制病毒传播和污染的关键手段;H9N2亚型AIV可能在野生禽类中流行,须减少家禽与野禽接触;并且H9N2亚型AIV分离株HA蛋白受体结构域变异可能对人间感染造成持续威胁,值得关注。 展开更多
关键词 h9N2亚型禽流感 活禽市场 遗传演化 抗原性 江苏
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表达H7N9亚型禽流感病毒HA蛋白的重组血清4型禽腺病毒构建及其免疫效果评估
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作者 万志敏 李亚锋 +9 位作者 孙建文 姜文杰 赵喆泓 汤婷 谢泉 李拓凡 邵红霞 秦爱建 钱琨 叶建强 《中国家禽》 北大核心 2024年第11期25-33,共9页
为构建H7N9亚型禽流感病毒和血清4型禽腺病毒(FAdV-4)的二联疫苗候选株,试验通过CRISPR/Cas9和Cre-Loxp系统,以课题组前期构建的表达EGFP蛋白的重组病毒FAdV4-EGFP为载体,构建能够稳定表达H7N9亚型禽流感病毒血凝素(HA)蛋白的重组血清4... 为构建H7N9亚型禽流感病毒和血清4型禽腺病毒(FAdV-4)的二联疫苗候选株,试验通过CRISPR/Cas9和Cre-Loxp系统,以课题组前期构建的表达EGFP蛋白的重组病毒FAdV4-EGFP为载体,构建能够稳定表达H7N9亚型禽流感病毒血凝素(HA)蛋白的重组血清4型腺病毒;并通过PCR、间接免疫荧光试验(IFA)、Westernblot试验以及SPF鸡保护性试验等方法,探究此重组病毒体外生物学特性并评估其为鸡提供的保护力。结果显示:研究成功构建能稳定表达H7N9禽流感亚型病毒HA蛋白的重组血清4型腺病毒,命名为FAdV4-H7;FAdV4-H7能在LMH细胞高效复制,并能在LMH细胞传代15次后仍能稳定表达HA蛋白;FAdV4-H7不仅高度致弱,而且能诱导机体产生高滴度针对H7N9亚型禽流感病毒HI抗体和FAdV-4的中和抗体,能为SPF鸡提供足够保护来抵抗致死性FAdV-4感染。研究表明,试验成功构建了重组病毒FAdV4-H7,为H7N9亚型禽流感病毒和FAdV-4的联防联控提供了二联苗候选疫苗株。 展开更多
关键词 h7N9亚型禽流感病毒 hA蛋白 重组血清4型腺病毒 CRISPR/Cas9 疫苗
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鸡新城疫-传染性支气管炎-禽流感(H9亚型)-鸡滑液囊支原体四联灭活疫苗免疫效果研究 被引量：4
13
作者 沈丹丹 李双双 +4 位作者 周欣 李厚伟 丁丽萍 姬星宇 张先锋 《中国家禽》 北大核心 2024年第8期61-68,共8页
为探讨制备的鸡新城疫-传染性支气管炎-禽流感(H9亚型)-鸡滑液囊支原体四联灭活疫苗(以下简称新支流滑四联灭活疫苗)免疫效果,试验采用新城疫病毒(NDV)La Sota株接种BHK-21-sc悬浮细胞,用易感鸡胚增殖传染性支气管炎病毒(IBV)M41株,H9... 为探讨制备的鸡新城疫-传染性支气管炎-禽流感(H9亚型)-鸡滑液囊支原体四联灭活疫苗(以下简称新支流滑四联灭活疫苗)免疫效果,试验采用新城疫病毒(NDV)La Sota株接种BHK-21-sc悬浮细胞,用易感鸡胚增殖传染性支气管炎病毒(IBV)M41株,H9亚型禽流感病毒(AIV)ML01株接种MDCK-sc悬浮细胞,用改良Frey氏培养基发酵培养鸡滑液囊支原体(MS)ML-MS1株,收获抗原液,制备新支流滑四联灭活疫苗,并对疫苗进行安全性和效力测定;以0.05、0.1、0.3 mL/只的剂量接种30日龄SPF鸡,免疫后7、14、21 d采血测定NDV HI和AIV(H9亚型)HI抗体,并于免疫后21 d进行NDV和AIV攻毒;30日龄SPF鸡首免H120株,免疫后21 d采血测定IBV HI抗体效价,并以0.05、0.1、0.3 mL/只的剂量进行二免,免疫后7、14、21、28 d采血测定IBV HI抗体;以0.05、0.1、0.3 mL/只的剂量接种30日龄SPF鸡,免疫后7、14、21、30 d采血测定MS ELISA抗体,并于免疫后30 d进行MS攻毒。结果显示:制备的新支流滑四联灭活疫苗安全性良好、效力合格;免疫后21 d NDV HI效价为6.6~8.8 log2,AIV HI效价为7.0~9.7 log2;免疫后28 d IBV HI效价为5.6~7.8 log2,且二免是首免的3.2~14.9倍;免疫后30 d MS ELISA效价为3 164~6 847;攻毒试验结果显示,0.05 mL/只剂量组对ML-MS1攻毒保护率为80%(8/10),其余组均为100%(10/10)保护。研究表明,新支流滑四联灭活疫苗对SPF鸡安全、有效,以0.1 mL/只剂量免疫SPF鸡可获得较好的免疫效果。 展开更多
关键词 新城疫 传染性支气管炎 h9亚型禽流感 滑液囊支原体 灭活疫苗 免疫效果
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H9N2亚型禽流感病毒感染鸡呼吸道应答模式研究 被引量：2
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作者 池周颖 李天旭 +6 位作者 吴亚鑫 瞿孝云 李思婕 孙敏华 张建峰 廖明 杜寿文 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期3970-3979,共10页
【目的】通过建立H9N2亚型禽流感病毒(AIV)感染鸡上呼吸道炎症模型,探索其感染鸡上呼吸道引起的炎症反应。【方法】将H9N2亚型AIV流行毒株GD10142,按照100μL/只(108 EID 50/100μL)的剂量通过滴鼻点眼方法感染SPF鸡,并在感染后观察鸡... 【目的】通过建立H9N2亚型禽流感病毒(AIV)感染鸡上呼吸道炎症模型,探索其感染鸡上呼吸道引起的炎症反应。【方法】将H9N2亚型AIV流行毒株GD10142,按照100μL/只(108 EID 50/100μL)的剂量通过滴鼻点眼方法感染SPF鸡,并在感染后观察鸡的临床特征,采集感染后0、1、3、5、7、9 d的咽拭子和血清样品;感染后5和9 d剖检观察鸡的呼吸道和肺脏病理变化,收集气管灌洗液、气管和肺脏组织;通过实时荧光定量PCR检测咽拭子、气管灌洗液、气管和肺脏组织中的病毒载量;应用ELISA方法检测感染后血清总IgG和H9N2亚型AIV特异性IgG的变化规律,通过血清中和试验分析血清中和抗体的活性;通过ELISA方法检测血清和气管灌洗液中炎症相关细胞因子白细胞介素6(IL-6)、IL-10、IL-1β、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和核转录因子κB(NF-κB)的水平。【结果】H9N2亚型AIV感染后鸡没有出现典型的临床特征,但感染后1~5 d在咽拭子中可检测到病毒核酸,且感染3 d后病毒载量最高,感染5 d后检测不到病毒核酸;感染5 d时,在气管灌洗液、气管和肺脏检测到病毒核酸,其中前两者载量高于肺脏;血清总IgG和H9N2亚型AIV特异性IgG在感染后3 d增多,感染后5~9 d维持较高水平,且具有较强的病毒中和活性;血清IL-10、IL-1β、TNF-α和NF-κB也在感染后3 d开始呈上升趋势;但气管灌洗液中IL-6、IL-10、IL-1β、TNF-α和NF-κB含量很低,且感染前后无明显变化。【结论】本研究成功建立了H9N2亚型AIV感染鸡呼吸道模型,确定上呼吸道是H9N2亚型AIV主要感染和增殖部位,H9N2亚型AIV感染诱导机体产生促炎和抑炎细胞因子,可能是感染动物维持免疫稳态的重要因素。本研究为深入探索H9N2亚型AIV的致病机制和宿主防御机制奠定了基础。 展开更多
关键词 h9N2亚型禽流感病毒 呼吸道感染 免疫应答 模型评价
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双黄连口服液对H9亚型禽流感的预防和治疗效果 被引量：1
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作者 朱巧艳 聂春波 +7 位作者 张盼涛 薛瑞 王锐 王艳鸣 赵青森 李新乐 高彬文 赵坤坤 《动物医学进展》 北大核心 2024年第9期127-132,共6页
为了评价双黄连口服液对H9亚型禽流感的预防和治疗效果,分别在SPF鸡感染H9亚型禽流感病毒前和感染后口服双黄连口服液,病毒感染后3、5、7、10 d采集喉头和泄殖腔棉拭子,通过实时荧光定量RT-PCR检测排毒率,并在感染后5、7 d剖检观察组织... 为了评价双黄连口服液对H9亚型禽流感的预防和治疗效果,分别在SPF鸡感染H9亚型禽流感病毒前和感染后口服双黄连口服液,病毒感染后3、5、7、10 d采集喉头和泄殖腔棉拭子,通过实时荧光定量RT-PCR检测排毒率,并在感染后5、7 d剖检观察组织病变,进行病理组织学观察。结果显示,双黄连口服液可降低H9亚型禽流感病毒感染鸡的排毒率,缩短排毒周期,治疗组和预防治疗组病毒感染后10 d排毒率为0,极显著低于病毒感染组排毒率6/10(60%)(P<0.01);治疗组和预防治疗组SPF鸡在感染后5 d和7 d喉头、气管黏膜、肺脏的组织损伤较小;且与治疗组相比,预防治疗组排毒率更低,喉头、气管、肺脏组织病理损伤更轻微。结果表明,双黄连口服液不仅可降低感染鸡的排毒率,缩短鸡体排毒时间。针对呼吸道病原,双黄连口服液预防治疗效果优于感染后治疗效果。该研究为双黄连口服液更好地应用于临床呼吸道疫病的防控提供了新的策略。 展开更多
关键词 双黄连口服液 h9亚型禽流感 预防和治疗 排毒率 组织病理学
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共表达膜结合型与可溶性H9N2亚型禽流感病毒HA蛋白的重组基因Ⅶ型新城疫病毒的构建及免疫效果评价
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作者 吕亚迪 杨洁 +2 位作者 谢文婷 徐婷 陈瑞爱 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期2123-2134,共12页
旨在构建能高效稳定表达H9N2 AIV的HA蛋白的重组基因Ⅶ型新城疫病毒,有望开发抗新城疫和H9N2亚型禽流感病毒的二联疫苗,为控制H9N2 AIV和NDV提供新的防御思路,对NDV疫苗载体的构建和优化有重要的参考意义。利用反向遗传技术,以rDHN3-mF... 旨在构建能高效稳定表达H9N2 AIV的HA蛋白的重组基因Ⅶ型新城疫病毒,有望开发抗新城疫和H9N2亚型禽流感病毒的二联疫苗,为控制H9N2 AIV和NDV提供新的防御思路,对NDV疫苗载体的构建和优化有重要的参考意义。利用反向遗传技术,以rDHN3-mF为骨架,在病毒基因组的P和M之间的非编码区插入全长膜结合HA和另外一个带有截短跨膜结构域的可溶性HA蛋白,获得了能高效稳定表达H9N2 AIV的HA蛋白的基因Ⅶ型NDV减毒株重组病毒rDHN3mF-HA和rDHN3mF-2HA。通过鸡胚接种、Western blot、血凝效价(HA)及平均鸡胚致死时间(MDT)等试验来检测重组病毒的稳定性以及生物学特性,将重组病毒以10~6 EID_(50·)只^(-1)剂量免疫7日龄SPF鸡并测定血凝抑制(HI)抗体,在免疫后28 d对各组进行攻毒保护试验。结果显示:重组病毒在鸡胚中连续传至十五代后HA基因无突变发生;Western blot证明重组病毒可稳定高效地表达特异性的HA蛋白;重组病毒的生长曲线说明了重组病毒与亲本毒株具有相似的复制特性和低毒力特征;重组病毒免疫组的SPF鸡均能产生针对NDV或者H9N2 AIV的特异性HI抗体;攻毒保护试验结果:重组病毒均能对攻毒后的鸡产生100%保护效果;喉、肛拭子检测结果说明重组病毒可显著减少NDV与H9N2 AIV的体外排毒;气管与肺qPCR检测结果显示攻毒后3 d, rDHN3mF-2HA较rDHN3mF-HA更显著地降低了脏器中H9N2 AIV含量。本研究成功构建了共表达膜结合型与可溶性H9N2亚型禽流感HA蛋白的基因Ⅶ型重组NDV,为H9N2 AIV和NDV的一种新型重组基因工程二联活载体疫苗的研制与应用奠定了基础。 展开更多
关键词 h9N2亚型禽流感病毒 hA蛋白 新城疫病毒 免疫原性 载体疫苗 免疫保护效率
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鸽H9N2亚型禽流感病毒的分离鉴定及致病性试验 被引量：1
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作者 贺祥 徐久鹏 +5 位作者 袁嘉欣 卢佳慧 范雨欣 常伽翌 李龙飞 徐彤 《北方牧业》 2024年第12期15-15,共1页
H9N2亚型禽流感病毒属于A型流感病毒,目前H9N2亚型禽流感病毒不仅可以感染家禽,而且可以感染猪、猫等哺乳动物,甚至出现人类感染现象。因此,H9N2亚型流感病毒不仅影响畜禽的健康养殖,同时也具有一定的公共卫生学意义。近年来鸽群感染流... H9N2亚型禽流感病毒属于A型流感病毒,目前H9N2亚型禽流感病毒不仅可以感染家禽,而且可以感染猪、猫等哺乳动物,甚至出现人类感染现象。因此,H9N2亚型流感病毒不仅影响畜禽的健康养殖,同时也具有一定的公共卫生学意义。近年来鸽群感染流感病毒时有报道,这其中包括H5N1、H7N9以及H9N2亚型禽流感病毒。虽然H9N2亚型禽流感毒株的致病性相对于H5和H7亚型较低,但是该亚型病毒在我国家禽中存在较为普遍,且目前从鸽子已分离到重组的H9N2毒株,该毒株不仅引起鸽子感染而且具有优先与人类呼吸道表面受体结合的能力,因此加强流感病毒在鸽群中流行情况具有重要的现实意义。 展开更多
关键词 h9N2亚型禽流感病毒 A型流感病毒 感染现象 公共卫生学 致病性试验 h7亚型 h5N1 健康养殖
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空心莲子草乙酸乙酯部位体内外抗H9N2亚型禽流感病毒活性的研究 被引量：1
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作者 廖思雨 郑新 +4 位作者 戴琪 许诗怡 张天旭 张秀桥 桂春 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期759-769,共11页
[目的]探究空心莲子草乙酸乙酯部位(ethyl acetate extract from Alternanthera philoxeroides,AETAC)体内外抗H9N2亚型禽流感病毒(H9N2 subtype Avian influenza virus, AIV-H9N2)活性及其作用机制。[方法]利用CCK-8法检测不同浓度AETA... [目的]探究空心莲子草乙酸乙酯部位(ethyl acetate extract from Alternanthera philoxeroides,AETAC)体内外抗H9N2亚型禽流感病毒(H9N2 subtype Avian influenza virus, AIV-H9N2)活性及其作用机制。[方法]利用CCK-8法检测不同浓度AETAC作用不同时间对鸡胚成纤维细胞(DF-1)的抑制作用,通过预防感染、影响复制、阻止吸附及直接杀灭4种方式作用后检测AETAC对DF-1细胞的毒性,选择体外最佳抗AIV-H9N2作用方式。尿囊腔接种不同浓度AETAC确定其对鸡胚的最大安全浓度;将AETAC以3种不同给药方式作用于AIV-H9N2感染后鸡胚,选择体内最佳给药方式。经尿囊腔同时接种AETAC和AIV-H9N2,统计各组鸡胚存活数,测定血凝效价,并观察胚胎的发育情况和鸡胚法氏囊病理组织变化。[结果]在一定范围内,随着AETAC浓度升高或作用时间延长,AETAC对DF-1细胞的抑制率升高。与空白对照组相比,4种抗AIV-H9N2作用方式下,病毒对照组和药物组细胞存活率均显著降低(P<0.05);与病毒对照组相比,AETAC浓度为5~30μg/mL时,4种抗AIV-H9N2作用方式下,药物组细胞存活率均显著升高(P<0.05)。4种作用方式下,DF-1细胞存活率分别为8.15%~64.96%(预防感染)、8.56%~83.83%(影响复制)、1.82%~5.90%(阻止吸附)和6.90%~40.12%(直接杀灭)。AETAC对鸡胚的最大安全浓度为16.41 mg/mL,对感染鸡胚的最佳给药方式为AETAC和病毒混合后接种。以最佳体内作用方式给药后,AETAC中、低浓度组鸡胚存活率为40%~60%,高浓度组鸡胚全部存活,胚胎喙部发育明显,鸡胚法氏囊淋巴滤泡发育完整,滤泡大小和数量正常,充血量少,组织病理状态改善。[结论]AETAC在体内外对AIV-H9N2均具有显著的抑制作用,且主要与影响病毒复制作用方式相关。 展开更多
关键词 空心莲子草乙酸乙酯部位(AETAC) h9N2亚型禽流感病毒(AIV-h9N2) DF-1细胞 鸡胚
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2022年四川省达州市H9亚型禽流感病毒监测与分析 被引量：3
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作者 李清竹 徐倚天 +4 位作者 杨青 唐慧伦 冉崇川 李成 郭珏岑 《畜禽业》 2024年第1期9-12,共4页
为掌握达州市H9亚型禽流感病毒(AIV)的流行特征,于2022年在达州市128个乡镇的855个场点(家禽养殖场109个、活禽交易市场87个、散养户609个、活禽屠宰点50个)采集10120份样品,采用荧光定量RT-PCR法进行H9亚型AIV核酸检测。结果显示,达州... 为掌握达州市H9亚型禽流感病毒(AIV)的流行特征,于2022年在达州市128个乡镇的855个场点(家禽养殖场109个、活禽交易市场87个、散养户609个、活禽屠宰点50个)采集10120份样品,采用荧光定量RT-PCR法进行H9亚型AIV核酸检测。结果显示,达州市H9亚型AIV总体场点阳性率为3.27%(28/855),总体样品阳性率为0.41%(41/10120),其中活禽交易市场、屠宰点、养殖场、散养户的场点阳性率分别为17.24%、4.00%、1.83%、1.48%;鸡、鸭、鹅、鸽样品的场点阳性率分别为4.71%、3.37%、0、0;咽喉和泄殖腔拭子、环境样品的样品阳性率分别为0.60%、0.19%;不同县别的场点阳性率为0.78%~10.00%,样品阳性率为0.13%~0.74%,各县(市、区)均有阳性样品检出。结果表明,达州市H9亚型AIV低水平流行,防控效果较好,但其污染面广,主要在活禽交易市场与鸡群中流行,是监测与防控的重点。 展开更多
关键词 达州市 h9亚型禽流感 监测 分析
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鸭H9亚型禽流感和鸭坦布苏病毒感染综合防控技术
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作者 王涛 《中国动物保健》 2024年第12期84-85,共2页
禽流感和坦布苏病毒病是两类危害较为严重的病毒性传染性疾病,在养殖场中一旦出现,将会造成大批量的鸭发病死亡,对一个地区的鸭养殖业安全构成危害,因此需要明确上述两种疾病感染的综合防控措施,做到及时处理,确保养殖安全,更好地推动... 禽流感和坦布苏病毒病是两类危害较为严重的病毒性传染性疾病,在养殖场中一旦出现,将会造成大批量的鸭发病死亡,对一个地区的鸭养殖业安全构成危害,因此需要明确上述两种疾病感染的综合防控措施,做到及时处理,确保养殖安全,更好地推动鸭养殖业的高质量发展。本文主要结合实际工作经验探讨了鸭H9亚型禽流感和坦布苏病毒病感染的综合防控技术,希望通过研究对广大同行有所帮助。 展开更多
关键词 鸭h9亚型禽流感 鸭坦布苏病毒病 综合防控技术
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