GUS基因在杜氏盐藻细胞中的瞬间表达 被引量：36

1

作者 耿德贵 王义琴 +1 位作者 李文彬 孙勇如 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2002年第2期35-39,共5页

利用电激法将GUS基因转入杜氏盐藻细胞内进行瞬间表达 ,研究了盐藻的生长状态和电激转化条件对转化率的影响 ,并比较了CaMV35S、Ubil、Ubil Ω、CaMV35S U bil和CaMV35S Ubil Ω 5种启动子的转化效率。结果表明 ,培养 5d的盐藻在 6kV的... 利用电激法将GUS基因转入杜氏盐藻细胞内进行瞬间表达 ,研究了盐藻的生长状态和电激转化条件对转化率的影响 ,并比较了CaMV35S、Ubil、Ubil Ω、CaMV35S U bil和CaMV35S Ubil Ω 5种启动子的转化效率。结果表明 ,培养 5d的盐藻在 6kV的脉冲电压、0 .0 5s的脉冲持续时间和 2 10的脉冲次数下电激可获得较高的转化率 ,为转化最佳条件。 5种启动子中 ,Ubil Ω启动子的转化效率最高 。 展开更多

关键词 杜氏盐藻细胞 转化率 杜氏盐藻 gus基因 电激法 瞬间表达 转基因 基因表达

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基于GUS基因瞬时表达优化云南杜鹃(Rhododendron yunnanense Franch.)遗传转化方法 被引量：8

2

作者 彭绿春 周微 +5 位作者 汪玲敏 张露 宋杰 解玮佳 关文灵 李世峰 《云南农业大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2016年第6期1045-1051,共7页

本研究以云南杜鹃无菌叶片和愈伤组织为受体材料,运用正交试验设计,通过组织染色分析法研究了预培养时间、菌液密度、侵染时间、共培养时间对农杆菌介导的GUS基因瞬时表达的影响。结果表明:叶片是云南杜鹃较理想的遗传转化受体材料,无... 本研究以云南杜鹃无菌叶片和愈伤组织为受体材料,运用正交试验设计,通过组织染色分析法研究了预培养时间、菌液密度、侵染时间、共培养时间对农杆菌介导的GUS基因瞬时表达的影响。结果表明:叶片是云南杜鹃较理想的遗传转化受体材料,无菌叶片预培养0 d,菌液OD_(600)值0.5,侵染时间40 min,共培养5 d,GUS基因瞬时表达率最高,平均表达率为70%。试验结果为云南杜鹃遗传转化研究提供了快速可靠的依据。 展开更多

关键词 云南杜鹃 gus基因 瞬时表达 遗传转化方法

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根癌农杆菌介导转化甘蓝型油菜子叶GUS基因瞬间表达 被引量：4

3

作者 谢伶俐 李加纳 +3 位作者 殷家明 柴友荣 许本波 林呐 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期9-13,共5页

为提高根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导转化甘蓝型油菜外源基因的瞬间表达率和优化遗传转化体系,利用根癌农杆菌共培养法转化甘蓝型油菜(Brassica napusL.)湘油15带柄子叶,通过组织化学染色法检测GUS基因瞬间表达情况,研究... 为提高根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导转化甘蓝型油菜外源基因的瞬间表达率和优化遗传转化体系,利用根癌农杆菌共培养法转化甘蓝型油菜(Brassica napusL.)湘油15带柄子叶,通过组织化学染色法检测GUS基因瞬间表达情况,研究了预培养基、蔗糖浓度、无机盐浓度和乙酰丁香酮对GUS基因瞬间表达的影响。结果表明,预培养基为MS+6-BA1.0mg/L+2,4-D 1.0mg/L、菌悬液为MS+蔗糖30g/L+乙酰丁香酮100μmol/L或1/2MS+蔗糖60g/L+乙酰丁香酮100μmol/L时GUS基因瞬间表达率较高,达到约40%。 展开更多

关键词 甘蓝型油菜 子叶 根癌农杆菌 gus基因 瞬间表达

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棉花GhCCR4基因表达载体构建及GUS基因的瞬时表达 被引量：4

4

作者 秦超 倪志勇 +3 位作者 郝晓燕 王娟 吕萌 范玲 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期639-642,共4页

研究以GUS基因为报告基因,构建CCR4基因的瞬时表达载体,首先酶切带有CCR4基因的pGEM-T-CCR4载体,获得CCR4基因目的片段,然后将其克隆到瞬时表达载体pGUS/NIa中,获得由CaMV35S启动子调控目的基因的pGUS-CCR4融合表达载体,使目的基因能够... 研究以GUS基因为报告基因,构建CCR4基因的瞬时表达载体,首先酶切带有CCR4基因的pGEM-T-CCR4载体,获得CCR4基因目的片段,然后将其克隆到瞬时表达载体pGUS/NIa中,获得由CaMV35S启动子调控目的基因的pGUS-CCR4融合表达载体,使目的基因能够和GUS基因同时表达。采用基因枪法将pGUS-CCR4转化到洋葱表皮细胞中,暗培养24h,经GUS组织化学染色,检测到多个洋葱细胞呈现蓝色,表明构建的瞬时表达载体可在植物细胞中高效表达。为进一步在棉花中研究GhCCR4基因的功能奠定了实验基础。 展开更多

关键词 CCR 载体构建 瞬时表达 gus基因

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棉花GhCAD6基因表达载体构建及GUS基因的瞬时表达 被引量：3

5

作者 倪志勇 吕萌 +3 位作者 王娟 李波 白岩 范玲 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期20-24,共5页

【目的】以GUS基因为报告基因,构建GhCAD6基因的瞬时表达载体。【方法】采用PCR方法和基因枪法。【结果】用PCR法,以pGEM-T-CAD6质粒为模板,获得GhCAD6基因目的片段。然后将其克隆到瞬时表达载体pRTL2-GUS/NIa中,获得由CaMV35S启动子调... 【目的】以GUS基因为报告基因,构建GhCAD6基因的瞬时表达载体。【方法】采用PCR方法和基因枪法。【结果】用PCR法,以pGEM-T-CAD6质粒为模板,获得GhCAD6基因目的片段。然后将其克隆到瞬时表达载体pRTL2-GUS/NIa中,获得由CaMV35S启动子调控目的基因的pGUS-CAD6融合表达载体,使目的基因能够和GUS基因同时表达。采用基因枪法将pGUS-CAD6转化到洋葱表皮细胞中,暗培养24 h,经GUS组织化学染色,检测到多个洋葱细胞呈现蓝色。【结论】构建的瞬时表达载体可在植物细胞中高效表达,为进一步研究棉花GhCAD6基因的功能奠定了实验基础。 展开更多

关键词 CAD 载体构建 瞬时表达 gus基因

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紫羊茅高频植株再生系统的建立与GUS基因的转化 被引量：2

6

作者 贾炜珑 杨丽莉 +4 位作者 张彦芹 胡鸢雷 倪挺 吴锜 林忠平 《草业学报》 CSCD 2005年第4期53-57,共5页

以紫羊茅的成熟种子为外植体材料,研究了2,4-D、有机物及光照对愈伤组织诱导发生、生长状态及绿苗分化能力的影响.结果表明,3～5 mg/L 2,4-D为愈伤组织诱导和继代培养基的适宜浓度,诱导率为46.6%～57.9%,并使愈伤组织保持胚性状态.在继... 以紫羊茅的成熟种子为外植体材料,研究了2,4-D、有机物及光照对愈伤组织诱导发生、生长状态及绿苗分化能力的影响.结果表明,3～5 mg/L 2,4-D为愈伤组织诱导和继代培养基的适宜浓度,诱导率为46.6%～57.9%,并使愈伤组织保持胚性状态.在继代培养基中添加脯氨酸和天门冬酰氨,并且每培养1～2个月给予15 d左右的散射光培养,使培养了2年多的愈伤组织仍保持99%以上的绿苗分化率.利用基因枪将GUS基因转入继代2年多的愈伤组织,通过组织染色法检测到了高频率的GUS基因瞬时表达. 展开更多

关键词 紫羊茅 组织培养 植株再生 gus基因

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NPTⅡ基因和GUS基因在小麦遗传转化中的应用 被引量：4

7

作者 张文蔚 成卓敏 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期48-50,共3页

对小麦遗传转化上常用的选择标记基因NPTⅡ的选择剂及GUS基因在幼胚愈伤组织中的转移进行了研究。结果表明用G418作为选择剂,浓度为20-30 mg／L较为合适。幼胚愈伤组织与农杆菌共培养3 d后,即可检测到GUS基因的瞬时表达。农杆菌LBA4404... 对小麦遗传转化上常用的选择标记基因NPTⅡ的选择剂及GUS基因在幼胚愈伤组织中的转移进行了研究。结果表明用G418作为选择剂,浓度为20-30 mg／L较为合适。幼胚愈伤组织与农杆菌共培养3 d后,即可检测到GUS基因的瞬时表达。农杆菌LBA4404由500 mg／L羧卞青霉素抑制;EHA105、AGLI由500 mg／L头孢霉素抑制。而不能用卡那霉素。 展开更多

关键词 NPTⅡ基因 gus基因 小麦 遗传转化 幼胚愈伤组织 农杆菌介导

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以农杆菌为介导的GUS基因在籼稻中的转移 被引量：2

8

作者 林红 李晓方 梁宁 《广东农业科学》 CSCD 1996年第5期7-9,共3页

用籼稻品种澳青占、早丝占、七山占的幼胚和幼穗为外植体，探索以农杆菌为介导的ＧＵＳ基因在籼稻中的转移，结果共培养后的愈伤组织比未经共培养的愈伤组织生长缓慢，再生植株的诱导条件亦有变化，共培养时间以４０分钟至２小时为佳，... 用籼稻品种澳青占、早丝占、七山占的幼胚和幼穗为外植体，探索以农杆菌为介导的ＧＵＳ基因在籼稻中的转移，结果共培养后的愈伤组织比未经共培养的愈伤组织生长缓慢，再生植株的诱导条件亦有变化，共培养时间以４０分钟至２小时为佳，卡那霉素选择浓度应大于２００μｇ／ｍｌ。由ＧＵＳ基因阳性反应的愈伤组织得到两株亦显阳性的植株，移入大田后，前期生长正常并开花。 展开更多

关键词 籼稻 农杆菌 gus基因

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eGfp/Gus融合基因植物表达载体的构建和转化验证 被引量：4

9

作者 吴学龙 何海燕 +1 位作者 刘智宏 黄锐之 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2011年第4期645-650,共6页

绿色荧光蛋白(Gfp)基因和葡萄糖醛酸糖苷酶(Gus)基因是广泛应用的2个报告基因,在定性和定量研究基因表达和启动子功能等方面各有优劣。为联合使用这2个报告基因,根据报告基因序列设计2对带有特异限制性内切酶位点的引物,PCR法分别扩增... 绿色荧光蛋白(Gfp)基因和葡萄糖醛酸糖苷酶(Gus)基因是广泛应用的2个报告基因,在定性和定量研究基因表达和启动子功能等方面各有优劣。为联合使用这2个报告基因,根据报告基因序列设计2对带有特异限制性内切酶位点的引物,PCR法分别扩增增强型Gfp(eGfp)和Gus基因,连接到植物表达载体pF-GC5941中,构建含CaMV35S启动子驱动的eGfp/Gus基因融合表达载体,命名为pFGC-DR。注射农杆菌法转化烟草叶片,以及花器官农杆菌浸泡法转化拟南芥,发现融合基因成功地在烟草叶片中瞬时表达和在拟南芥中稳定表达,表明融合报告基因在烟草和拟南芥中都能高效表达。 展开更多

关键词 eGfp/gus双报告基因 植物表达载体 瞬时表达 转基因表达

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GUS报告基因在植物功能基因研究中的应用 被引量：5

10

作者 袁思玮 黄锐之 罗红兵 《作物研究》 2008年第S1期310-314,共5页

近十年来,植物转基因技术取得了显著的进展,许多转基因植物不断问世,其中报告基因GUS在基因工程和遗传转化中发挥着重要的作用。就GUS基因的来源,GUS基因在转基因植物中的表达,GUS活性的测定方法,GUS基因转基因安全评价,GUS基因应用的... 近十年来,植物转基因技术取得了显著的进展,许多转基因植物不断问世,其中报告基因GUS在基因工程和遗传转化中发挥着重要的作用。就GUS基因的来源,GUS基因在转基因植物中的表达,GUS活性的测定方法,GUS基因转基因安全评价,GUS基因应用的最新进展作了简要综述。 展开更多

关键词 植物 报告基因gus 转基因 基因表达

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共培养基对甘蓝型油菜下胚轴GUS瞬间表达及转化效率的影响 被引量：1

11

作者 许本波 殷家明 +2 位作者 谢伶俐 李加纳 柴友荣 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2007年第25期8062-8064,共3页

为提高根癌农杆菌介导的甘蓝型油菜遗传转化效率,以甘蓝型油菜"湘油15"下胚轴为外植体,以MS为基本培养基,研究了共培养基中α-NAA和6-BA浓度对根癌农杆菌介导法转化甘蓝型油菜过程中下胚轴GUS基因瞬间表达及转化效率的影响。... 为提高根癌农杆菌介导的甘蓝型油菜遗传转化效率,以甘蓝型油菜"湘油15"下胚轴为外植体,以MS为基本培养基,研究了共培养基中α-NAA和6-BA浓度对根癌农杆菌介导法转化甘蓝型油菜过程中下胚轴GUS基因瞬间表达及转化效率的影响。结果表明,共培养基对GUS基因的瞬间表达和稳定表达具有重要影响,但共GUS基因的瞬间表达率和转化效率之间没有明显的线性关系。 展开更多

关键词 甘蓝型油菜 下胚轴 gus基因 瞬间表达

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杨树皮储藏蛋白基因启动子的克隆和功能研究 被引量：22

12

作者 蒋浩 秦红敏 +1 位作者 田颖川 DeanW.Gabriel 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 1999年第5期46-50,共5页

杨树树皮储藏蛋白BSP是类似种子储藏蛋白的氮素储藏物 ,冬季在韧皮部薄壁细胞中大量积累 ,是落叶树氮代谢中的重要成分。为了研究BSP基因启动子在转基因植物中的表达特性 ,探索其在植物基因工程研究中潜在的应用价值 ,我们用PCR方法从... 杨树树皮储藏蛋白BSP是类似种子储藏蛋白的氮素储藏物 ,冬季在韧皮部薄壁细胞中大量积累 ,是落叶树氮代谢中的重要成分。为了研究BSP基因启动子在转基因植物中的表达特性 ,探索其在植物基因工程研究中潜在的应用价值 ,我们用PCR方法从美洲黑杨基因组中DNA扩增得到了BSA启动子片段。与GUS基因融合构建中间载体后 ,转化烟草 ,获得了一批PCR检测为阳性的转化再生植株。经GUS组织化学检测 ,发现若干转基因烟草的茎和叶柄韧皮部以及叶脉都呈GUS染色阳性 ,初步证明杨树BSP基因启动子确有韧皮部表达特性 ,可介导GUS基因在转基因烟草韧皮部特异表达。 展开更多

关键词 杨树 启动子 gus基因 树皮 储藏蛋白

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以基因枪法转化日本结缕草获得转基因植株 被引量：10

13

作者 齐春辉 韩烈保 +2 位作者 梁小红 曾会明 刘君 《北京林业大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第3期71-75,共5页

将含有DREB1A和gus基因的双基因载体质粒包裹在金粉上,以基因枪轰击日本结缕草胚性愈伤组织,以gus基因的瞬时表达研究日本结缕草基因枪转化参数.结果表明,在1 100 psi压力下6 cm的轰击距离、每皿轰击2次的转化效果最好,而金粉和质粒用... 将含有DREB1A和gus基因的双基因载体质粒包裹在金粉上,以基因枪轰击日本结缕草胚性愈伤组织,以gus基因的瞬时表达研究日本结缕草基因枪转化参数.结果表明,在1 100 psi压力下6 cm的轰击距离、每皿轰击2次的转化效果最好,而金粉和质粒用量对转化效率影响不显著;经过筛选和再生培养,检测到gus基因的稳定表达,并获得日本结缕草潮霉素抗性株系,PCR-Southern杂交证实外源DREB1A基因已整合到日本结缕草基因组中. 展开更多

关键词 日本结缕草 基因枪转化 转基因植株 DREB1A gus基因 正交设计

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农杆菌介导银杏遗传转化体系的建立及Gb-DXR基因表达载体的构建 被引量：17

14

作者 冯国庆 杨颖舫 +4 位作者 李郑娜 成瑜 杨春贤 陈敏 廖志华 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第10期4992-4995,5067,共5页

[目的]为提高农杆菌介导的银杏遗传转化效率提供参考。[方法]以成熟的银杏种子胚为外植体,在无激素MS培养基上预培养48h后,采用3种农杆菌介导将GUS基因导入银杏胚中,经过组织化学染色法检测到GUS瞬时表达活性,对影响GUS基因表达的因素... [目的]为提高农杆菌介导的银杏遗传转化效率提供参考。[方法]以成熟的银杏种子胚为外植体,在无激素MS培养基上预培养48h后,采用3种农杆菌介导将GUS基因导入银杏胚中,经过组织化学染色法检测到GUS瞬时表达活性,对影响GUS基因表达的因素进行初步分析;并构建了银杏内酯前体合成途径上1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶(DXR)的表达载体。[结果]该研究得到较合适的遗传转化方案,即用银杏胚作为外植体,用携带pCAMBIA1304+的EHA105农杆菌进行侵染,共培养3d,进行GUS染色,结果显示转化后GUS阳性率较高。[结论]该研究为进一步的银杏转基因研究工作奠定了基础。 展开更多

关键词 银杏胚 农杆菌介导 遗传转化 gus基因 1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶(DXR) 表达载体

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转抗蚜GNA基因苜蓿的研究 被引量：6

15

作者 卢广 张青文 田颖川 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期23-26,共4页

将雪花莲凝集素基因GNA插入双元载体pBI121中的GUS基因的上游,得到植物表达载体pLG66m。GNA与GUS基因构成融合基因,共用一个CaMV35S启动子。将该表达载体导入农杆菌LBA4404,得到LBA4404／pLG66m菌株。利用LBA4404／pLG66m菌株培养液直... 将雪花莲凝集素基因GNA插入双元载体pBI121中的GUS基因的上游,得到植物表达载体pLG66m。GNA与GUS基因构成融合基因,共用一个CaMV35S启动子。将该表达载体导入农杆菌LBA4404,得到LBA4404／pLG66m菌株。利用LBA4404／pLG66m菌株培养液直接浸泡萌动的苜蓿种子,组织学检测表明GUS在种苗上3 d的瞬时表达效率超过90％。待苜蓿长出第3片真叶后检测,GUS表达效率明显下降。GNA基因在种苗期间的短期表达也积累GNA毒蛋白在苜蓿体内的含量,为苜蓿在苗期抗蚜起到一定作用。 展开更多

关键词 苜蓿种子 GNA基因 gus基因 苗期 种苗 毒蛋白 菌株培养 组织学检测 体内 融合基因

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番红花组织基因枪转化瞬时表达检测 被引量：2

16

作者 唐琳 徐莺 +3 位作者 赵婷婷 颜钫 徐是雄 陈放 《北京林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期35-38,共4页

用高压氦气式基因枪将CaMV35S启动子驱动下的gus基因导入经济植物番红花的叶鞘和叶、芽来源的愈伤组织块中 ,4 8h后染色检测到了gus基因的瞬间表达 ,2 0d后仍检测到极少量表达 .研究发现 ,轰击前在加有 0 5mol L甘露醇的液体愈伤组织... 用高压氦气式基因枪将CaMV35S启动子驱动下的gus基因导入经济植物番红花的叶鞘和叶、芽来源的愈伤组织块中 ,4 8h后染色检测到了gus基因的瞬间表达 ,2 0d后仍检测到极少量表达 .研究发现 ,轰击前在加有 0 5mol L甘露醇的液体愈伤组织继代培养基上处理 6h ,明显增加了gus基因表达的数量 ;选择 110 0psi× 9cm的轰击条件 ,转化效果最好 ;高浓度卡那霉素 (5 0 0～ 80 0mg L)可以作为筛选剂 .结果表明 ,基因枪法是有效的番红花遗传转化方法 ,gus基因可以作为番红花基因工程研究的报告基因 。 展开更多

关键词 番红花 gus基因 基因枪法 瞬间表达

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农杆菌介导转化愈伤组织获得抗除草剂转基因玉米植株 被引量：5

17

作者 朱友银 冯怡 赵德刚 《山地农业生物学报》 2008年第5期382-388,共7页

对4个玉米基因型Q31×Z31、Q31×Z3、Z3、B73胚性愈伤组织进行农杆菌介导基因转化，根据Gus基因表达水平，研究了影响农杆菌介导遗传转化玉米愈伤组织的因素。结果表明，在选用的玉米基因型中，不同基因型转化效率存在显著差异... 对4个玉米基因型Q31×Z31、Q31×Z3、Z3、B73胚性愈伤组织进行农杆菌介导基因转化，根据Gus基因表达水平，研究了影响农杆菌介导遗传转化玉米愈伤组织的因素。结果表明，在选用的玉米基因型中，不同基因型转化效率存在显著差异，其中Q31×Z31、Q31×Z3、B73转化效率较高，Z3较低。农杆菌菌液浓度（OD600）为0．4～0．6、侵染时间为10min、23℃暗培养3d是较佳转化条件。通过农杆菌介导遗传转化，获得再生玉米植株，并对再生植株离体叶片进行除草剂抗性检测，发现转基因再生植株叶片可以抵抗200mg／L Basra。 展开更多

关键词 玉米愈伤组织 农杆菌 遗传转化 gus基因 Pat基因

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银杏细胞作为转基因受体的研究 被引量：2

18

作者 刘小烛 铃木義胜 山口勇 《西南林学院学报》 2004年第4期1-3,共3页

为满足转目的基因的需求,探索一种能够将外源基因转入银杏细胞,并得以稳定表达和遗传的转基因方法以及选择合适的载体.用基因枪将带有和CaM35S启动子与NOS终止子相连接的GUS基因的质粒pBI221打入银杏细胞,以X-Gluc为底物检测GUS的活性,... 为满足转目的基因的需求,探索一种能够将外源基因转入银杏细胞,并得以稳定表达和遗传的转基因方法以及选择合适的载体.用基因枪将带有和CaM35S启动子与NOS终止子相连接的GUS基因的质粒pBI221打入银杏细胞,以X-Gluc为底物检测GUS的活性,所得结论为:GUS基因被转入了银杏细胞并在银杏细胞中得到了表达,但该基因没有稳定存在于银杏细胞中. 展开更多

关键词 银杏 gus基因 转基因受体 细胞 终止子 基因枪 遗传 NOS 稳定表达 质粒

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茶树N-甲基转移酶基因启动子克隆及功能分析 被引量：2

19

作者 刘平 任秋婧 +5 位作者 康馨 张媛媛 林晓蓉 李斌 高雄 陈忠正 《茶叶科学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期569-579,共11页

咖啡碱是茶叶中重要的功能物质,N-甲基转移酶(NMT)是其生物合成的关键酶。本研究以英红9号茶树新梢为材料,利用hiTAIL-PCR克隆NMT1基因启动子,并采用PlantCARE等在线软件分析其顺式作用元件。根据其元件组成,设计5'递减的启动子与GU... 咖啡碱是茶叶中重要的功能物质,N-甲基转移酶(NMT)是其生物合成的关键酶。本研究以英红9号茶树新梢为材料,利用hiTAIL-PCR克隆NMT1基因启动子,并采用PlantCARE等在线软件分析其顺式作用元件。根据其元件组成,设计5'递减的启动子与GUS基因一起组建了融合载体转入烟草,利用GUS染色和定量PCR方法,分析了克隆的启动子功能及其对环境因子的响应。结果表明,克隆的NMT1基因启动子长767 bp,含有TATA-box、CAAT-box等真核生物启动子基本元件及多个与植物非生物胁迫相关的响应元件。以5'递减的NMT1启动子替换pBI121中的CaMV35S启动子,构建出与GUS融合的pA、pB、pC、pD载体。在烟草叶片中进行瞬时表达,不同长度的NMT1启动子均具驱动GUS表达功能,且长度越长驱动能力越强。以含全长NMT1启动子载体pA对烟草转基因,转基因烟草各组织均检测到GUS基因的表达且表达量叶>茎>根,叶片中的表达量为根部的3倍。对转基因烟草进行不同程度光照、温度、模拟干旱和脱落酸处理后,除40℃温度条件外,其他处理的叶片中GUS基因表达在处理前后均存在显著变化,表明NMT1启动子功能受外界环境因子的胁迫影响。 展开更多

关键词 茶树 N-甲基转移酶 hiTAIL-PCR 启动子 gus基因

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一个花生早期胚特异性表达基因AhDGAT3启动子的克隆及功能分析 被引量：3

20

作者 石磊 齐飞艳 +7 位作者 苗利娟 黄冰艳 刘华 张忠信 高伟 董文召 汤丰收 张新友 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期25-34,共10页

为获得在早期胚中特异性表达启动子,本研究通过基因组步移技术对AhDGAT3(GenBank:AY875644.1)的启动子进行克隆。研究结果表明,获得了AhDGAT3起始密码子ATG上游5'侧翼序列2 181bp,应用PLACE和plantCARE在线分析显示,AhDGAT3启动子... 为获得在早期胚中特异性表达启动子,本研究通过基因组步移技术对AhDGAT3(GenBank:AY875644.1)的启动子进行克隆。研究结果表明,获得了AhDGAT3起始密码子ATG上游5'侧翼序列2 181bp,应用PLACE和plantCARE在线分析显示,AhDGAT3启动子除了含有核心调控元件TATA-box和CAAT-box之外,还有多个非生物胁迫作用元件,如茉莉酸响应元件、防御和干旱胁迫响应元件TC-rich repeats、光响应元件、干旱诱导的MYB结合位点、光响应MYB结合位点等,以及种子表达相关顺式作用元件及分裂组织表达相关元件。构建重组载体p BI121-PAhDGAT3,转化拟南芥,GUS染色结果显示,该启动子能驱动下游GUS基因,仅在发育早期的心型胚期至鱼雷型胚期较短时间内的胚中特异性表达。 展开更多

关键词 花生 DGAT3 早期胚 种子特异性启动子 gus报告基因

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