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Improvement of fretting fatigue lifetime at 500℃of GH 4169 dovetail component treated by nanosecond stacked femtosecond laser shock peening
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作者 FANG Xiu-yang WANG Zheng +4 位作者 GONG Jian-en WANG Zhi-guo CHEN Tai-li NI Jing CAI Zhen-bing 《Journal of Central South University》 2025年第7期2364-2382,共19页
The effects of nanosecond laser shock peening without coating(LSPwC)and nanosecond stacked femtosecond laser shock peening compound strengthening(LSP-CS)on the surface integrity and fretting fatigue lifetime at 500℃o... The effects of nanosecond laser shock peening without coating(LSPwC)and nanosecond stacked femtosecond laser shock peening compound strengthening(LSP-CS)on the surface integrity and fretting fatigue lifetime at 500℃of GH 4169 dovetail component were investigated.The results show that LSP treatment does not significantly lead to changes in the grain size of GH 4169 alloy,but it introduces a large number of dislocations,resulting in the formation of a plastic deformation layer and residual compressive stress layer.The surface microhardness increased by 20.5%and 28.6%after being treated by LSPwC and LSP-CS,respectively.The surface residual compressive stresses were(-306.5±42.5)MPa and(-404.3±34.7)MPa,respectively;The depth of both the hardening layer and the residual compressive stress layer is 400μm,and along the cross-section with 0-100μm region after LSP-CS treatment has higher hardness and greater residual compressive stress.The fretting fatigue lifetime of the GH 4169 dovetail component at 500℃was increased by 346.8%and 494.9%,which is the result of the combined effects of the hardening layer and the residual stress layer.The LSP-CS treatment can effectively make up for the disadvantage of the LSPwC treatment,and further enhance the fretting fatigue lifetime of the GH 4169 dovetail component at high temperature. 展开更多
关键词 GH 4169 dovetail LSPwC LSP-CS fretting fatigue life high temperature
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Effect of Different Laser Energy Nitriding on the Fretting Wear Performance of Zr Alloy 被引量:1
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作者 NING Chuangming TANG Guocan +4 位作者 YU Shijia ZHOU Junbo REN Quanyao ZENG Bing CAI Zhenbing 《摩擦学学报(中英文)》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第9期1306-1321,共16页
The zirconium(Zr)alloy fuel cladding is one of the key structural components of a nuclear reactor and the first and most important line of defense for accommodating fission products.During the operation of nuclear rea... The zirconium(Zr)alloy fuel cladding is one of the key structural components of a nuclear reactor and the first and most important line of defense for accommodating fission products.During the operation of nuclear reactors,Zr alloy fuel cladding is subjected to extreme harsh environments,such as high temperature,high pressure and high flow rate for a long period of time.The wear and corrosion resistance of Zr alloys is important for the safe operation of nuclear reactors.Surface modification can effectively improve the corrosion and wear resistance of fuel cladding.Compared with coating technology,nitriding technology does not have problems for bonding between the coating and the substrate.Current research on surface nitriding of Zr alloys mainly focuses on plasma nitriding and ion implantation techniques.Research on laser nitriding of Zr alloy surfaces and their fretting wear characteristics is scarce.In this study,the surface of Zr alloy was treated with laser nitriding at different laser energies.The microstructure of Zr alloy treated with different laser energies and its fretting wear performance were studied.The results showed that after nitriding with different laser energies,the surface of the Zr alloy showed a typical molten state after melting,vaporizing and cooling under the thermal effect of the laser,and this state was more obvious with the increase of the laser energy.At the same time,doping of N atoms and formation of the ZrN phase led to different cooling rates in the molten zone that produced large tensile stresses after cooling.This led to cracks on the surface of Zr alloys after laser nitriding at different energies,and the crack density increased with increasing laser energy.This also led to an increase in the surface roughness of the Zr alloy with increasing laser energy after laser nitriding treatment.Due to the presence of water in the industrial nitrogen,nitrides were generated on the surface of the sample along with some oxides.When the laser energy was 100 mJ,there was no ZrN generation,and N existed mainly as a diffusion layer within the Zr alloy substrate.ZrN generated when the laser energy reached 200 mJ and above,which increased with the increase of laser energy.Due to the generation of ZrN phase and the presence of some oxides,the surface Vickers hardness of Zr alloys after laser nitriding treatment at different energies increased by 37.5%compared to Zr alloys.After laser nitriding treatment,the wear mechanism of Zr alloys changed.For the untreated Zr alloys,the wear mechanism was dominated by delamination and spalling wear,accompanied by oxidative and abrasive wear.The phenomenon of delamination and peeling decreased with the increase of laser energy.Wear mechanisms changed to predominantly abrasive wear with oxidative wear and delamination spalling.The wear volume of sample nitriding with laser energy 400 mJ was reduced by 46.5%compared with that of untreated Zr alloy. 展开更多
关键词 zirconium alloy fretting wear laser nitriding DELAMINATION laser energy
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荧光共振能量转移(FRET)的定量检测及其应用 被引量:7
3
作者 张建伟 陈同生 《华南师范大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2012年第3期12-17,共6页
荧光共振能量转移(Fluorescence Resonance Energy Transfer,FRET)技术被广泛应用于活细胞中生物大分子构象变化和分子间动态相互作用的实时研究.针对光谱串扰和供体受体间的浓度比等困扰FRET效率定量检测的两大难题,已经发展了多种定... 荧光共振能量转移(Fluorescence Resonance Energy Transfer,FRET)技术被广泛应用于活细胞中生物大分子构象变化和分子间动态相互作用的实时研究.针对光谱串扰和供体受体间的浓度比等困扰FRET效率定量检测的两大难题,已经发展了多种定量检测FRET效率的方法.作者结合自己的研究结果介绍了多种FRET效率定量检测技术在细胞信号转导机制研究中的应用. 展开更多
关键词 荧光共振能量转移(fret) fret效率 定量检测 荧光蛋白
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FRET技术及其在蛋白质-蛋白质分子相互作用研究中的应用 被引量:21
4
作者 王进军 陈小川 邢达 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第6期980-984,共5页
简要综述了FRET方法在活细胞生理条件下研究蛋白质 蛋白质间相互作用方面的最新进展 .蛋白质 蛋白质间相互作用在整个细胞生命过程中占有重要地位 ,由于细胞内各种组分极其复杂 ,因此一些传统研究蛋白质 蛋白质间相互作用的方法 ,例... 简要综述了FRET方法在活细胞生理条件下研究蛋白质 蛋白质间相互作用方面的最新进展 .蛋白质 蛋白质间相互作用在整个细胞生命过程中占有重要地位 ,由于细胞内各种组分极其复杂 ,因此一些传统研究蛋白质 蛋白质间相互作用的方法 ,例如酵母双杂交、免疫沉淀等可能会丢失某些重要的信息 ,无法正确地反映在当时活细胞生理条件下蛋白质 蛋白质间相互作用的动态变化过程 .荧光共振能量转移 (fluorescenceresonanceenergytransfer ,FRET)是近来发展的一项新技术 ,此项技术的应用 ,为在活细胞生理条件下对蛋白质 蛋白质间相互作用进行实时的动态研究 。 展开更多
关键词 荧光共振能量转移 fret 蛋白质 相互作用 活细胞 荧光成像技术
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基于SPHD及FRET技术的蛋白质传感器 被引量:2
5
作者 郭素 廖玮 +2 位作者 魏芳 钱民协 赵新生 《物理化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第8期917-920,共4页
蛋白质传感器作为一种分析蛋白质与其他分子之间作用力的有效手段已经越来越显示出其优点,但是蛋白质在基底表面的变性问题对于研究者来说仍然是一个挑战.作者介绍了一种具有高灵敏度的蛋白质传感器,即利用DNA引导固定(DDI)方法,将DNA-... 蛋白质传感器作为一种分析蛋白质与其他分子之间作用力的有效手段已经越来越显示出其优点,但是蛋白质在基底表面的变性问题对于研究者来说仍然是一个挑战.作者介绍了一种具有高灵敏度的蛋白质传感器,即利用DNA引导固定(DDI)方法,将DNA-蛋白质复合物通过DNA双链特异性杂交固定在硅基底表面,从而有效保持了蛋白质的活性,并且引入荧光共振能量传递(FRET)技术以及电势扫描发卡去杂交(SPHD)技术降低非特异性吸附带来的荧光信号.这种蛋白质传感器在蛋白质识别以及DNA杂交方面具有显著区分不同体系荧光信号的能力. 展开更多
关键词 蛋白质 传感器 fret 电位控制 SPHD 微阵列
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基于FRET技术构建破伤风毒素和B型肉毒毒素酶类抑制剂高通量体外筛选方法 被引量:2
6
作者 罗森 丁朋晓 +2 位作者 李涛 王琴 王慧 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2018年第5期739-745,共7页
目的利用FRET技术构建破伤风毒素和B型肉毒毒素酶类抑制剂高通量体外筛选方法。方法构建针对破伤风毒素和B型肉毒毒素的双荧光标记底物的重组表达质粒,表达并纯化荧光标记底物重组蛋白;利用A型肉毒毒素轻链(ALc),B型肉毒毒素轻链(BLc)... 目的利用FRET技术构建破伤风毒素和B型肉毒毒素酶类抑制剂高通量体外筛选方法。方法构建针对破伤风毒素和B型肉毒毒素的双荧光标记底物的重组表达质粒,表达并纯化荧光标记底物重组蛋白;利用A型肉毒毒素轻链(ALc),B型肉毒毒素轻链(BLc)和破伤风毒素轻链(TLc)分别对目的蛋白进行酶切反应。对基于双荧光标记底物高通量体外筛选方法的条件进行优化。酶动力学参数分别测定TLc和BLc切割底物荧光标记底物的Km和Kcat值。结果设计并成功构建荧光标记底物的重组表达质粒。表达并纯化后获得纯度为90%左右的重组蛋白,命名为CYVAMP。利用ALc、BLc和TLc分别对CYVAMP进行酶切,CYVAMP能被BLc和TLc识别切割而不能被ALc切割。对基于双荧光标记底物高通量体外筛选方法的条件优化得到:CYVAMP较适宜的范围为0.2~32μmol/L,酶标仪滤光片灵敏度设定的较合适的设置范围在65~110;(对于96孔板)动态实时检测间隔时间2 min较为合适,检测持续时间从30 min到120 min较合适。CYVAMP在内肽酶BLc作用下随反应时间变化与荧光值528与485比值作图最大时在1.5左右,最小在0.5左右。酶动力学参数测定得到BLc酶切CYVAMP的Km和Kcat值分别为(17.6±2.6)μmol/L和(4.16±0.28)s-1。TLc酶切CYVAMP的Km和Kcat值分别为(40.8±3.5)μmol/L和(2.65±0.32)s-1。结论成功构建基于FRET技术的分析法能满足对破伤风毒素和B型肉毒毒素的检测及抑制剂的高通量体外筛选所需。 展开更多
关键词 fret 肉毒毒素 破伤风毒素 高通量筛选
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基于FRET构建A型肉毒毒素活性检测的高通量方法 被引量:1
7
作者 罗森 郭丽娜 +2 位作者 李涛 王琴 王慧 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第1期15-21,共7页
目的利用荧光共振能量转移(FRET)构建针对A型肉毒毒素酶活性检测的高通量体外方法。方法构建只识别A型肉毒毒素的基于双荧光标记底物的重组表达质粒,将其构建的质粒转入大肠杆菌表达系统进行表达,对表达后的荧光标记底物重组蛋白进行纯... 目的利用荧光共振能量转移(FRET)构建针对A型肉毒毒素酶活性检测的高通量体外方法。方法构建只识别A型肉毒毒素的基于双荧光标记底物的重组表达质粒,将其构建的质粒转入大肠杆菌表达系统进行表达,对表达后的荧光标记底物重组蛋白进行纯化和透析并保存备用;利用A型肉毒毒素轻链(ALc)对重组蛋白进行酶切检测活性;对本检测方法的条件进行优化;ALc切割荧光标记底物测定其酶动力学参数K_(m)与K_(cat)值。结果重组表达质粒构建成功,通过大肠杆菌表达系统表达后检测明显出现目的条带,对其纯化后获得的重组蛋白纯度在90%左右,命名重组蛋白为CYA。对CYA通过酶ALc、B型肉毒毒素轻链(BLc)进行酶切鉴定,结果显示CYA只能被ALc酶切产生与预期相符的两个蛋白片段,不能被BLc酶切。对基于FRET底物的条件优化得到:设定滤光片灵敏度在65~110之间;实时动态检测间隔为2 min/次,动态检测时间为30~120 min,底物CYA合适的浓度范围0.5~32μmol/L。CYA在ALc酶作用下随时时间的变化与荧光值528与485的比值作图最小在0.5左右,最大时约为0.9。酶动力学参数测定ALc切割CYA的值K_(cat)值为(5±0.4)s^(-1)和K_(m)为(2.33±0.21)μmol/L。结论成功构建了基于FRET技术的A型肉毒毒素活性检测的高通量体外分析方法。 展开更多
关键词 fret 肉毒毒素 高通量检测
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基于FRET机理的荧光探针的合成及其对汞离子的识别 被引量:6
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作者 王海菊 张文珠 +1 位作者 何成 周硼 《发光学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1030-1036,共7页
基于FRET机理设计合成了一个包含罗丹明6G及香豆素的汞离子荧光探针Rh-6G-coumarin(RC),研究了它的光谱性能及对汞离子的识别作用。在V(C2H5OH)∶V(H2O)=9∶1溶液中加入汞离子后,575 nm处荧光强度迅速增大,荧光由蓝色变为明亮的红色,同... 基于FRET机理设计合成了一个包含罗丹明6G及香豆素的汞离子荧光探针Rh-6G-coumarin(RC),研究了它的光谱性能及对汞离子的识别作用。在V(C2H5OH)∶V(H2O)=9∶1溶液中加入汞离子后,575 nm处荧光强度迅速增大,荧光由蓝色变为明亮的红色,同时溶液的颜色由黄色变为红色。溶液中其他金属离子,如Na+、K+、Mg2+、Fe2+、Co2+、Pb2+、Zn2+、Cd2+和Cr3+对汞离子的荧光识别没有太大影响。该探针可在较宽的pH(4~10)范围内识别汞离子。光谱滴定实验表明,汞离子与RC以2∶1的计量比形成了配合物。 展开更多
关键词 荧光探针 汞离子 fret 罗丹明6G 香豆素
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绿色荧光蛋白为传能对的供体光漂白法测定FRET效率的探讨 被引量:2
9
作者 周晓娟 郭慧芳 +1 位作者 刘德龙 孙大业 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期127-130,共4页
探讨以两种新荧光蛋白MiCy,mKo为传能对并应用供体光漂白法测量荧光共振能量转移(FRET)效率。首先通过基因工程方法表达纯化了这两种蛋白,并测量了荧光光谱及光漂白性质,表明MiCy极易光漂白而mKo抗光漂白。进一步以Ni-NTA-agarose为FRE... 探讨以两种新荧光蛋白MiCy,mKo为传能对并应用供体光漂白法测量荧光共振能量转移(FRET)效率。首先通过基因工程方法表达纯化了这两种蛋白,并测量了荧光光谱及光漂白性质,表明MiCy极易光漂白而mKo抗光漂白。进一步以Ni-NTA-agarose为FRET模型,在Confocal上对MiCy进行光漂白时间常数的测量,并计算了FRET效率。结果表明MiCy-mKo传能对适合用供体光漂白法测量FRET效率,此传能对将在蛋白质相互作用研究中有广泛应用。 展开更多
关键词 绿色荧光蛋白 荧光共振能量转移 fret效率 光漂白
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基于1,8-萘酰亚胺-罗丹明的FRET机理阳离子探针研究进展 被引量:1
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作者 田娟 陈彪 +1 位作者 吕浩 吴志兵 《应用化工》 CAS CSCD 2014年第2期346-352,共7页
综述了近年来以1,8-萘酰亚胺-罗丹明为母体的FRET机理阳离子探针的研究进展。介绍了Hg2+,Al3+,Fe3+,Sn4+,Cr3+和H+荧光探针的设计合成、性质及其应用,并对今后的研究方向作简要的展望。
关键词 荧光分子探针 1 8-萘酰亚胺 罗丹明 fret机理
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基于FRET原理构建AtLHT1转运底物筛选探针 被引量:1
11
作者 李志伟 李本杰 +3 位作者 刘志兵 林菲 徐汉虹 舒薇 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期77-84,共8页
【目的】为提高导向药物筛选通量,加快导向农药分子设计、合成、筛选等研发速度,构建基于拟南芥氨基酸转运蛋白AtLHT1的荧光共振能量转移(Fluorescence resonance energy transfer,FRET)探针作为导向农药筛选平台。【方法】构建CFP-LHT1... 【目的】为提高导向药物筛选通量,加快导向农药分子设计、合成、筛选等研发速度,构建基于拟南芥氨基酸转运蛋白AtLHT1的荧光共振能量转移(Fluorescence resonance energy transfer,FRET)探针作为导向农药筛选平台。【方法】构建CFP-LHT1-YFP的三明治探针,分别在大肠埃希菌Escherichia coli BL21(DE3)原核细胞和BY4741酵母细胞中进行表达、鉴定和纯化。采用荧光酶标仪和激光共聚焦检测FRET效率的变化。【结果】CFPAtLHT1-YFP融合蛋白探针纯化后,分别与供试氨基酸和草甘膦混合,供试氨基酸和草甘膦的加入导致探针蛋白的FRET比率发生明显变化,草甘膦处理使D535 nm/D480 nm升高7%~12%,其变化趋势与阳性配体甘氨酸和谷氨酸接近,而加入阴性配体精氨酸则没有明显变化。同时,FRET比率呈现底物浓度依赖。样品中分别加入1、5和30 mmol/L的草甘膦溶液,20 min后检测到D535 nm/D480 nm分别升高3%、1%和13%,阳性配体也存在FRET比率随着底物浓度上升而升高的趋势,而阴性配体变化不规则。利用光漂白法检测到氨基酸或草甘膦处理后单个酵母细胞的FRET效率发生明显变化。加入阳性对照的甘氨酸和谷氨酸后,FRET效率变化明显,其中,甘氨酸和谷氨酸的FRET效率分别达到30%和26%;加入草甘膦处理的FRET效率与谷氨酸接近,达26%;含PBS的空白对照组没有明显的FRET效率变化。【结论】AtLHT1-FRET探针可以与中性氨基酸甘氨酸和酸性氨基酸谷氨酸结合,但不结合碱性氨基酸精氨酸;FRET效率因不同底物有所差异,且具有一定的底物浓度依赖性;同时,证明了草甘膦能够被氨基酸转运蛋白AtLHT1转运。 展开更多
关键词 荧光共振能量转移 AtLHT1 fret探针 导向农药
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在活细胞中应用FRET技术研究TGFβ/TβRI信号传导 被引量:2
12
作者 刘伟 曹薇薇 +2 位作者 何建伟 史晨辉 王维山 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期757-762,共6页
转移生长因子β(TGFβ)信号传导通路参与调节细胞的增殖、分化、凋亡、细胞迁移等一系列细胞过程,与骨代谢疾病的发病机制密切相关.本研究根据荧光共振能量转移(FRET)技术原理,构建包含CFP-TβRI-YFP融合蛋白的TβRI生物传感器,转染293... 转移生长因子β(TGFβ)信号传导通路参与调节细胞的增殖、分化、凋亡、细胞迁移等一系列细胞过程,与骨代谢疾病的发病机制密切相关.本研究根据荧光共振能量转移(FRET)技术原理,构建包含CFP-TβRI-YFP融合蛋白的TβRI生物传感器,转染293T细胞,观察转染效率.以TGFβ1为诱导剂,激活TGFβ/TβRI信号传导通路,在活细胞生理条件下,动态监测TβRI生物传感器的FRET效应.结果表明,成功构建了TβRI生物传感器,转染细胞效率达50%,在TGFβ1诱导刺激6min后,FRET效率增加并达到最大值,该过程经历9 min后,随时间的延长,FRET效率下降.研究结果表明:在活细胞生理条件下,TGFβ1/TβRI信号转导过程存在一定的时间特异性. 展开更多
关键词 转移生长因子Β TΒRI 生物传感器 荧光共振能量转移 活细胞
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Ag7(MBISA)6 Nanoclusters Conjugated with Quinacrine for FRET-Enhanced Photodynamic Activity under Visible Light Irradiation 被引量:2
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作者 TOMINAGA Chiaki HIKOSOU Dailo +1 位作者 OSAKA Issey KAWASAK Hideya 《物理化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2018年第7期805-811,共7页
Singlet oxygen(1 O2) plays an important role in various applications, such as in the photodynamic therapy(PDT) of cancers,photodynamic inactivation of microorganisms, photo-degradation of toxic compounds, and photo-ox... Singlet oxygen(1 O2) plays an important role in various applications, such as in the photodynamic therapy(PDT) of cancers,photodynamic inactivation of microorganisms, photo-degradation of toxic compounds, and photo-oxidation in synthetic chemistry. Recently,water-soluble metal nanoclusters(NCs) have been utilized as photosensitizers for the generation of highly reactive 1 O2 because of their high water solubility, low toxicity, and surface functionalizability for targeted substances. In the case of metal NC-based photosensitizers, the photo-physical properties depend on the core size of the NCs and the core/ligand interfacial structures. A wide range of atomically precise gold NCs have been reported; however, reports on the synthesis of atomically precise silver NCs are limited due to the high reactivity and low photostability(i.e., easy oxidation) of Ag NCs. In addition, there have been few reports on what kinds of metal NCs can generate large amounts of 1 O2. In this study, we developed a new one-pot synthesis method of water-soluble Ag7(MBISA)6(MBISA= 2-mercapto-5-benzimidazolesulfonic acid sodium salt) NCs with highly efficient 1 O2 generation ability under the irradiation of white light emitting diodes(LEDs). The molecular formula and purity were determined by electrospray ionization mass spectrometry and gel electrophoresis. To the best of our knowledge, this is the first report on atomically precise thiolate silver clusters(Agn(SR)m) for efficient 1 O2 generation under visible light irradiation. The 1 O2 generation efficiency of Ag7(MBISA)6 NCs was higher than those of the following known water-soluble metal NCs: bovine serum albumin(BSA)-Au25 NCs,BSA-Ag8 NCs, BSA-Ag14 NCs,Ag25(dihydrolipoic acid)14 NCs,Ag35(glutathione)18 NCs,and Ag75(glutathione)40 NCs. The metal NCs examined in this study showed the following order of 1 O2 generation efficiency under white light irradiation: Ag7(MBISA)6 > BSA-Ag14 > Ag75(SG)40 > Ag35(SG)18 >BSA-Au25 >>BSA-Ags(not detected) and Ag2 s(DHLA)14(not detected). For further improving the 1 O2 generation of Ag7(MBISA)6 NCs, we developed a novel fluorescence resonance energy transfer(FRET) system by conjugating Ag7(MBISA)6 NCs with quinacrine(QC)(molar ratio of Ag NCs to QC is 1 : 0.5). We observed the FRET process,from QC to Ag7(MBISA)6 NCs,occurring in the conjugate. That is,the QC works as a donor chromophore,while the Ag NCs work as an acceptor chromophore in the FRET process. The FRET-mediated process caused a 2.3-fold increase in 1 O2 generation compared to that obtained with Ag7(MBISA)6 NCs alone. This study establishes a general and simple strategy for improving the PDT activity of metal NC-based photosensitizers. 展开更多
关键词 Silver NANOCLUSTERS SINGLET oxygen Photodynamic therapy Organic DYES fret Hybrid PHOTOSENSITIZERS
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基于FRET效率分析细胞内caspase-3活化特性研究 被引量:1
14
作者 陈同生 卢盈颖 +1 位作者 王龙祥 屈军乐 《深圳大学学报(理工版)》 EI CAS 北大核心 2008年第3期233-237,共5页
利用SCAT3在选择性激发CFP时的发射谱信息,通过光谱拟合定量获得FRET效率,监测双氢青蒿素诱导的人肺腺癌(ASTC-a-1)细胞内caspase-3的活化特性.实验结果表明:双氢青蒿素可有效抑制ASTC-a-1细胞的增殖并诱导细胞凋亡,且对细胞抑制呈剂量... 利用SCAT3在选择性激发CFP时的发射谱信息,通过光谱拟合定量获得FRET效率,监测双氢青蒿素诱导的人肺腺癌(ASTC-a-1)细胞内caspase-3的活化特性.实验结果表明:双氢青蒿素可有效抑制ASTC-a-1细胞的增殖并诱导细胞凋亡,且对细胞抑制呈剂量依赖性;双氢青蒿素诱导细胞中caspase-3的活化也呈剂量依赖性;通过光谱拟合得到的FRET效率表明,细胞中caspase-3活化程度越大,FRET效率越低,且FRET效率呈剂量依赖性递减. 展开更多
关键词 CASPASE-3 荧光共振能量转移 荧光光谱 双氢青蒿素 细胞凋亡
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基于FRET成像探究棕榈酰化修饰调节Fyn激酶活性 被引量:1
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作者 张鑫 郭佳 +2 位作者 姚辉 邓林红 欧阳明星 《医用生物力学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期228-235,共8页
目的探讨棕榈酰化修饰调节非受体酪氨酸激酶Fyn活性的分子机制。方法利用荧光共振能量转移(fluorescence resonance energy transfer,FRET)技术实时检测细胞中的Fyn活性,并结合棕榈酰化位点缺失和共转染蛋白质酪氨酸激酶(C-terminal Src... 目的探讨棕榈酰化修饰调节非受体酪氨酸激酶Fyn活性的分子机制。方法利用荧光共振能量转移(fluorescence resonance energy transfer,FRET)技术实时检测细胞中的Fyn活性,并结合棕榈酰化位点缺失和共转染蛋白质酪氨酸激酶(C-terminal Src kinase,CSK)表达质粒研究其分子机制。结果实验发现,(C3,C6)任一位点的棕榈酰化缺失能引起Fyn的高活性表达,且C6位点影响更显著。已知CSK激活后发生膜转移,FRET检测证实其对细胞中的Fyn活性有下调作用,但不能有效调控(C3,C6)棕榈酰化位点缺失的Fyn(GSS)活性。结论本文结果初步支持了Fyn活性受细胞内的物理空间定位分布的一种调控机制假设,即棕榈酰化缺失的Fyn(GSS)受细胞膜上CSK抑制性的调节作用被减弱,从而促进了组成性的高活性表达。 展开更多
关键词 Fyn激酶 棕榈酰化修饰 荧光共振能量转移 CSK激酶
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Fretting instability characteristics for gear shaft shoulder 被引量:1
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作者 贾国海 龚金科 +2 位作者 鄂加强 蔡皓 王曙辉 《Journal of Central South University》 SCIE EI CAS 2014年第10期3746-3752,共7页
In order to solve fretting instability problem of gear shaft shoulder due to torsional vibration in mechanical system, the mathematical model of fretting instability vibration of gear shaft shoulder was established by... In order to solve fretting instability problem of gear shaft shoulder due to torsional vibration in mechanical system, the mathematical model of fretting instability vibration of gear shaft shoulder was established by adopting the method of combining kinematics and tribology, and the numerical analysis was applied to the fretting instability mechanism of gear shaft shoulder by introducing the friction instability damping ratio. The numerical results show that the main factors causing the unstable and vibrating gear shaft shoulder are the large tightening torque and too large static friction coefficient. The reasonable values of the static friction coefficient, the amount of interference and tightening torque can effectively mitigate the fretting instability phenomenon of gear shaft shoulder. The experimental results verify that damping plays a significant role in eliminating the vibration of gear shaft control system. 展开更多
关键词 gear shaft shoulder torsional vibration KINEMATICS fretting friction instability damping ratio
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基于荧光蛋白FRET特性DasR与效应小分子的相互作用
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作者 魏文平 叶邦策 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 2017年第4期397-401,共5页
本研究利用黄色荧光蛋白(YFP)和青色荧光蛋白(CFP)构建含有DasR蛋白的双荧光蛋白融合蛋白,以效应小分子与DasR作用前后导致的双荧光蛋白FRET效应变化为指标考察DasR与效应小分子的相互作用。研究结果表明:效应小分子与DasR的相互作用可... 本研究利用黄色荧光蛋白(YFP)和青色荧光蛋白(CFP)构建含有DasR蛋白的双荧光蛋白融合蛋白,以效应小分子与DasR作用前后导致的双荧光蛋白FRET效应变化为指标考察DasR与效应小分子的相互作用。研究结果表明:效应小分子与DasR的相互作用可以通过荧光蛋白FRET特性有效的呈现;该荧光蛋白系统能够反映出单独的DasR小分子结合结构域与效应物质的相互作用。本研究方法为研究调控蛋白与效应小分子相互作用、调控蛋白效应分子的高通量筛选等方面提供了理论借鉴与方法学参考。 展开更多
关键词 荧光蛋白 fret DasR 相互作用
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荧光蛋白MiCy、Citrine作为FRET传能对的研究
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作者 刘德龙 王晓静 +2 位作者 郭慧芳 白娟 孙大业 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期44-48,共5页
探索了2种新型荧光蛋白MiCy、Citrine作为荧光共振能量转移技术(FRET)传能对的可能性。首先通过基因工程方法表达纯化了这2种蛋白,并对其进行了光谱学研究,由于MiCy具有高的量子产率,且MiCy与Citrine的光谱重叠积分J较大,计算表明MiCy与... 探索了2种新型荧光蛋白MiCy、Citrine作为荧光共振能量转移技术(FRET)传能对的可能性。首先通过基因工程方法表达纯化了这2种蛋白,并对其进行了光谱学研究,由于MiCy具有高的量子产率,且MiCy与Citrine的光谱重叠积分J较大,计算表明MiCy与Citrine的Frster距离为R0=5.81nm,比CFP-YFP的大(R0=5nm)。进一步以Ni2+-NTA-agarose为FRET模型,结果表明:无论在荧光分光光度计还是在激光共聚焦显微镜上,都可以明显地检测到MiCy与Citrine的能量转移。由于二者较文献报道的其它FRET对具有更大的Frster距离,而且更适合以激光作为激发光进行测量,因此该FRET对应有更加广泛的应用前景。 展开更多
关键词 绿色荧光蛋白 MiCy Citrine 荧光共振能量转移 Frster距离
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用于血清胰岛素测定的荧光共振能量传递(FRET)免疫检测法的建立
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作者 南杰 夏缓 +3 位作者 张楠 赵洪伟 徐蓓 赛娜 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期898-903,共6页
目的研究探讨新型荧光染料Dylight(DL)和金纳米颗粒(AuNP)间荧光共振能量转移(FRET)效应,并将其与免疫竞争法结合构建一种新型胰岛素荧光免疫检测方法。方法分别将胰岛素抗原(Ag)和胰岛素抗体(Ab)与DL和AuNP进行偶联,形成DL-Ag偶联物和A... 目的研究探讨新型荧光染料Dylight(DL)和金纳米颗粒(AuNP)间荧光共振能量转移(FRET)效应,并将其与免疫竞争法结合构建一种新型胰岛素荧光免疫检测方法。方法分别将胰岛素抗原(Ag)和胰岛素抗体(Ab)与DL和AuNP进行偶联,形成DL-Ag偶联物和AuNP-Ab偶联物。利用它们间产生的FRET效应以及免疫竞争反应,建立针对胰岛素的新型荧光免疫检测方法。然后对该检测方法的检测性能进行评估和实际样品的应用研究。结果该荧光免疫检测方法不仅表现出较高的检测灵敏度(0.015 ng/mL),较快的检测时间(4 min)以及较好的检测特异性,而且成功地用于血清胰岛素的检测,回收率在96.9%~121.1%之间。结论新型荧光染料DL和AuNP间FRET效应可应用于血清胰岛素的荧光免疫检测。 展开更多
关键词 免疫学检验 荧光共振能量传递(fret) 胰岛素
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“用于均相FRET检测的纳米稀土荧光生物标记材料的研制”通过专家评审
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《人工晶体学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第5期1361-1361,共1页
9月27日,福建物构所陈学元研究员主持完成的福建省杰出青年基金项目"用于均相FRET检测的纳米稀土荧光生物标记材料的研制"通过省科技厅组织的专家评审。在听取了项目组的工作汇报后,评审委员会一致认为,该项目研究处于国际前沿领域,... 9月27日,福建物构所陈学元研究员主持完成的福建省杰出青年基金项目"用于均相FRET检测的纳米稀土荧光生物标记材料的研制"通过省科技厅组织的专家评审。在听取了项目组的工作汇报后,评审委员会一致认为,该项目研究处于国际前沿领域,项目组超额完成了项目任务书规定的研究内容, 展开更多
关键词 专家评审 生物标记 纳米稀土 fret 材料 荧光 检测 均相
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