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异常球菌RM菌株脂肪酶基因LIP的克隆、表达及酶学性质
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作者 郑炜彬 胡秋怡 +3 位作者 杨李 谭梓瀚 张玉璇 柯野 《福建农林大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第4期533-543,共11页
【目的】探究异常球菌RM菌株高表达的脂肪酶基因(LIP)异源表达及其重组脂肪酶(rLIP)的酶学性质,为产脂肪酶微生物菌株的筛选提供新的来源参考,以及为低温脂肪酶的开发应用提供一定的理论依据。【方法】对异常球菌RM菌株的基因组及转录... 【目的】探究异常球菌RM菌株高表达的脂肪酶基因(LIP)异源表达及其重组脂肪酶(rLIP)的酶学性质,为产脂肪酶微生物菌株的筛选提供新的来源参考,以及为低温脂肪酶的开发应用提供一定的理论依据。【方法】对异常球菌RM菌株的基因组及转录组进行测序分析,筛选出表达量高的脂肪酶基因,重组至毕赤酵母GS115菌株中进行诱导表达;对rLIP的氨基酸残基序列和3-D结构进行分析,并探究其酶学性质。【结果】RM菌株表达了6个脂肪酶基因,其中只有1个基因编码胞外脂肪酶。序列比对分析表明,LIP与脂肪酶(国际蛋白结构数据库编号:5ah0.1.A)的序列一致性最高,为43.84%。LIP具有低温脂肪酶的催化三联体(Ser-Asp-His)和α/β水解酶折叠的典型结构特征。LIP基因在毕赤酵母GS115菌株中成功获得了表达。rLIP的最适底物为对硝基苯月桂酸酯和对硝基苯棕榈酸酯;rLIP最适反应温度为30℃,低于30℃有较高催化活性和稳定性;rLIP最适pH为8.0,pH为7.0~9.0时能保持50%以上的酶活性;Mg^(2+)对rLIP活性的提高有一定的促进作用。【结论】异常球菌RM菌株分泌的LIP是一种低温碱性脂肪酶,具有较强的稳定性和底物特异性。 展开更多
关键词 脂肪酶基因LIP 异常球菌RM菌株 蛋白结构预测 克隆表达 酶学性质
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白血病中FHIT基因的异常表达和缺失(英文) 被引量:3
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作者 王莉 董陆佳 +2 位作者 田方 刘广贤 李春海 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2003年第2期153-160,共8页
FHIT基因位于染色体 3p14 .2 ,实验室的研究证实FHIT基因具有抑癌基因活性。FHIT基因异常表达或表达缺失出现在多种实体肿瘤和造血系统恶性疾病。为了探讨白血病细胞中FHIT基因的异常表达及意义 ,采用巢式RT PCR法对急性髓性白血病 (AML... FHIT基因位于染色体 3p14 .2 ,实验室的研究证实FHIT基因具有抑癌基因活性。FHIT基因异常表达或表达缺失出现在多种实体肿瘤和造血系统恶性疾病。为了探讨白血病细胞中FHIT基因的异常表达及意义 ,采用巢式RT PCR法对急性髓性白血病 (AML)、急性淋巴细胞白血病 (ALL)、慢性粒细胞白血病 (CML)以及骨髓增生异常综合症 (MDS)、慢性淋巴细胞白血病 (CLL)、骨髓瘤 (MM )等不同类型白血病患者FHIT基因转录本进行检测 ,并对FHIT基因转录本进行序列测定。 98份血液系统恶性疾病患者的骨髓或外周血标本中AML 38例 ,ALL16例 ,CML 34例 ,其它恶性血液病 10例。全部患者经骨髓细胞形态检查 ,诊断符合FAB诊断标准。肝素抗凝骨髓或外周血 2 - 3ml,分离单个核细胞 ,取 5× 10 7个细胞 ,用RTIZOL 试剂一步法提取细胞总RNA ,行PCR扩增 ,琼脂糖凝胶电泳分析PCR产物。回收目的片段 ,克隆到PGEM T载体 ,进行序列测定。结果表明 :在 5 5 / 98(5 6 % )的被检测病例有FHIT基因的异常表达 ,在AML、ALL和CML异常表达的发生率分别为 2 2 / 38(5 8% ) ,9/ 16(5 6 % )和 19/ 34(5 6 % )。正常骨髓或外周血标本未见有FHIT基因的异常表达。 4 3/ 98(44 % )的患者表达正常转录本 (Ⅰ型 ) ,4 0 / 98(41% ) 展开更多
关键词 白血病 染色体 抑癌基因活性 fhit基因表达异常 基因缺失 骨髓增生异常综合症 急性髓性白血病 急性淋巴细胞白血病
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胃肠癌中FHIT基因的异常表达
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作者 段晓明 张桂英 +2 位作者 吴鄂生 田芳 陈主初 《湖南医科大学学报》 CSCD 2000年第4期331-333,共3页
目的 :探讨FHIT基因与胃肠肿瘤的关系。方法 :采用RT PCR及PCR产物直接测序法 ,检测了 2 6例胃癌组织和 30例大肠癌组织及其配对正常组织的FHIT基因。结果 :7例 (2 6 9% )胃癌组织和 8例 (2 6 7% )大肠癌组织存在异常FHIT转录本 ,而... 目的 :探讨FHIT基因与胃肠肿瘤的关系。方法 :采用RT PCR及PCR产物直接测序法 ,检测了 2 6例胃癌组织和 30例大肠癌组织及其配对正常组织的FHIT基因。结果 :7例 (2 6 9% )胃癌组织和 8例 (2 6 7% )大肠癌组织存在异常FHIT转录本 ,而配对正常组织均无异常FHIT转录本 ;测序证实异常转录本缺失 1~ 3个FHIT外显子。结论 :异常FHIT转录本的表达是胃肠肿瘤发生中常见的和特有的改变 ;FHIT基因异常与胃肠肿瘤的发生和发展有关。 展开更多
关键词 胃肿瘤 结肠直肠肿瘤 基因 fhit 多聚酶链反应 顺序分析 脱氧核糖核酸 基因表达 异常转录本
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人肺癌中FHIT基因表达的临床病理生理意义及与预后的关系研究 被引量:13
4
作者 王允 周清华 +6 位作者 张尚福 成娘 刘伦旭 李潞 伍伫 车国卫 秦建军 《中国肺癌杂志》 CAS 2002年第1期6-9,共4页
目的 研究FHIT基因表达与人肺癌临床病理生理特征和预后的关系 ,探讨FHIT基因在人肺癌发生、发展过程中的可能作用。方法 应用免疫组化法检测了 1 66例肺癌组织标本及其癌旁肺组织和 37例肺良性病变组织中FHIT基因的表达水平。结果 ... 目的 研究FHIT基因表达与人肺癌临床病理生理特征和预后的关系 ,探讨FHIT基因在人肺癌发生、发展过程中的可能作用。方法 应用免疫组化法检测了 1 66例肺癌组织标本及其癌旁肺组织和 37例肺良性病变组织中FHIT基因的表达水平。结果 肺癌组织中FHIT基因表达阳性率 (63 .0 3 %± 2 6 .41 % )显著低于癌旁组织 (83 .74%± 1 7.46 % ) ,而癌旁组织又显著低于肺良性病变组织 (92 .98%± 5 .56 % ) (P <0 .0 1 ) ;肺癌组织中FHIT基因表达水平降低与肺癌组织学类型、细胞分化程度 ,患者P TNM分期、淋巴结转移程度存在相关性 (P <0 .0 5) ;吸烟组肺癌患者的肺癌组织中FHIT基因表达阳性率 (55 .1 4 %± 2 7.55 % )明显低于非吸烟组 (71 .93%± 2 2 .0 5 % ) (P <0 .0 1 ) ;FHIT基因低表达组肺癌患者的术后长期生存率显著低于高表达组 (P <0 .0 5)。结论 FHIT基因的表达下降可能与肺癌的发生、发展过程有关。吸烟是导致肺癌患者FHIT基因表达下降的重要原因之一。 展开更多
关键词 预后 肺肿瘤 fhit基因 免疫组化 基因表达 病理特征 生理特征
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人非小细胞肺癌中FHIT基因转录本异常的研究 被引量:7
5
作者 陈军 周清华 +5 位作者 覃扬 孙芝琳 孙泽芳 王允 李潞 秦建军 《中国肺癌杂志》 CAS 2000年第4期245-249,共5页
目的 探讨FHIT基因转录表达异常在人肺癌发生、发展中的作用。方法 应用nestedRT PCR方法对 3 5例人非小细胞肺癌 (NSCLC)组织、癌旁组织和远癌肺组织 ,10例肺良性病变肺组织以及 4株肺癌细胞株中FHIT基因转录表达异常进行了研究。结... 目的 探讨FHIT基因转录表达异常在人肺癌发生、发展中的作用。方法 应用nestedRT PCR方法对 3 5例人非小细胞肺癌 (NSCLC)组织、癌旁组织和远癌肺组织 ,10例肺良性病变肺组织以及 4株肺癌细胞株中FHIT基因转录表达异常进行了研究。结果  3 5例肺癌中 14例肺癌组织存在FHIT转录表达异常 ,异常率为 40 % ;在这 14例癌组织转录本异常病例中 ,5例癌旁组织亦见转录本异常( 3 5 .71% ,5 /14 )。远癌肺组织和肺良性病变组织均未见转录本异常。 4株肺癌细胞株均检测到转录本异常。在鳞癌中FHIT基因转录本异常率 ( 5 8.82 % )显著高于腺癌 ( 2 2 .2 2 % ) (P <0 .0 5 )。FHIT基因转录本异常与肺癌细胞的分化程度、P TNM分期、原发肿瘤大小、肿瘤部位 ,以及患者年龄等均无明显关系 (P>0 .0 5 )。结论 本研究结果表明在NSCLC中存在FHIT基因转录表达异常。FHIT基因异常主要发生在肺鳞癌中 ,且可能是肺癌发生的早期分子事件。 展开更多
关键词 肺肿瘤 fhit基因 转录表达异常 DNA序列分析
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异常棉NF-YA家族基因鉴定及其在干旱胁迫下的表达分析 被引量:3
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作者 徐珍珍 季为 +3 位作者 陈祥龙 徐鹏 郭琪 沈新莲 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2023年第6期1265-1274,共10页
NF-YA转录因子在植物生长发育和逆境响应中扮演重要角色。本研究通过生物信息学手段,分析棉花二倍体野生种异常棉基因组中NF-YA家族基因的数目、染色体分布、系统进化、保守基序、结构、顺式作用元件、表达模式及编码蛋白质的亚细胞定... NF-YA转录因子在植物生长发育和逆境响应中扮演重要角色。本研究通过生物信息学手段,分析棉花二倍体野生种异常棉基因组中NF-YA家族基因的数目、染色体分布、系统进化、保守基序、结构、顺式作用元件、表达模式及编码蛋白质的亚细胞定位、理化性质等。结果表明,异常棉NF-YA基因家族(GoanoNF-YA)包含17个成员,分布在10条染色体上,编码的蛋白质长度为190~603个氨基酸,理论等电点为7.87~10.07,16个成员包含3~5个外显子且编码的蛋白质定位于细胞核。拟南芥和异常棉NF-YA基因在系统进化树上分为6类,每类基因在系统进化树上具有相同或相似类型和排列顺序的基序。5个NF-YA基因在异常棉根、茎、叶和花中广泛表达,15个NF-YA基因对干旱持续时间有不同程度的响应,11个NF-YA基因含有干旱响应顺式作用元件MBS。本研究结果为进一步解析异常棉NF-YA家族基因的功能提供了理论依据。 展开更多
关键词 异常 NF-YA基因家族 生物信息 干旱 表达模式
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卵巢癌ras p21及p16基因异常表达的临床病理研究 被引量:2
7
作者 董跃兰 李琳 +4 位作者 陈利馨 邓民芳 杨正中 陈建伟 刘大荣 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期144-145,共2页
卵巢癌跃居妇癌首位,生物学行为恶劣,70%卵巢癌诊断时已为晚期,5年生存率仅30%,Ⅲ期以上仅10%,故研究新的诊断方法势在必行。我们应用S-P法,对卵巢癌rasp21及p16表达进行回顾性研究,探索与其生物学行为的... 卵巢癌跃居妇癌首位,生物学行为恶劣,70%卵巢癌诊断时已为晚期,5年生存率仅30%,Ⅲ期以上仅10%,故研究新的诊断方法势在必行。我们应用S-P法,对卵巢癌rasp21及p16表达进行回顾性研究,探索与其生物学行为的关系。1材料与方法1990年1月~... 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 ras-p21基因 P16基因 异常表达
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子宫颈癌FHIT基因表达与杂合性丢失 被引量:4
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作者 石海燕 陈晓端 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 2004年第1期56-59,共4页
目的 探讨抑癌基因FHIT基因在子宫颈癌发生中的作用及其失活的可能机制。方法 选取FHIT基因内 2个微卫星位点D3S130 0和D3S12 34,对 5 6例经显微切割分离肿瘤组织的原发性子宫颈癌进行杂合性丢失 (LOH)分析 ,同时采用免疫组化方法 (S ... 目的 探讨抑癌基因FHIT基因在子宫颈癌发生中的作用及其失活的可能机制。方法 选取FHIT基因内 2个微卫星位点D3S130 0和D3S12 34,对 5 6例经显微切割分离肿瘤组织的原发性子宫颈癌进行杂合性丢失 (LOH)分析 ,同时采用免疫组化方法 (S P法 )检测FHIT的表达情况。结果 D3S130 0和D3S12 34的LOH发生率分别为 36 2 % (17/ 4 7)、32 7% (16 /4 9) ,5 2 % (2 9/ 5 6 )的子宫颈癌组织至少在一个位点存在LOH。 5 7 1%的子宫颈癌FHIT表达减弱或缺失 ,其中 71 9%存在FHIT基因LOH ,FHIT低表达与FHIT基因LOH之间有相关性 (P <0 0 1)。子宫颈鳞癌组织的LOH发生率及FHIT低表达率均高于腺癌 (6 4 3%vs 14 3% ,6 9 0 %vs 2 1 4 % ,P <0 0 5 )。子宫颈鳞癌LOH发生率及FHIT低表达与组织学分级、FI GO分期均不相关 (P >0 0 5 )。结论 FHIT基因可能在子宫颈鳞癌发生中起重要作用 。 展开更多
关键词 子宫颈癌 fhit基因 基因表达 杂合性
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肺癌中多癌基因异常表达的临床研究 被引量:3
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作者 石开虎 俞颖 +1 位作者 周久华 颜林洲 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期210-212,共3页
目的 :通过 76例肺癌切除标本进行免疫组化染色来探索癌相关基因 c- erb B- 2、ras p2 1和 p5 3与肺癌的组织分型和 TNM分期之间的关系。方法 :随机选取 76例肺癌手术切除标本 ,其中鳞癌 35例 ,腺癌 2 2例 ,小细胞癌10例 ,大细胞癌 4例 ... 目的 :通过 76例肺癌切除标本进行免疫组化染色来探索癌相关基因 c- erb B- 2、ras p2 1和 p5 3与肺癌的组织分型和 TNM分期之间的关系。方法 :随机选取 76例肺癌手术切除标本 ,其中鳞癌 35例 ,腺癌 2 2例 ,小细胞癌10例 ,大细胞癌 4例 ,腺鳞癌 5例。TNM 期 8例 , 期 35例 , 期 33例。均按文献方法进行免疫组化染色后按阳性表达率进行统计分析。结果 :c- erb B- 2和 p5 3的总阳性表达率分别为 6 4.5 %及 5 2 .6 % ,且在小细胞癌中分别高达 10 0 %和 90 .0 % ,明显超过 ras p2 1(P<0 .0 1) ,但 ras p2 1在腺癌中的表达率 (72 .3% )高于 c- erb B- 2和 p5 3。同时 ,c- erb B- 2在 TNM 期中 87.9%的表达率也高于 、 期和 ras p2 1、p5 3在 期的表达率 (P<0 .0 5 )。结论 :c-erb B- 2过度表达与预后差 ,恶性度高 ,病程长或晚期肺癌有关联 ;ras p2 1可能参与腺癌的发生 ;p5 3则可能与恶性度高 ,预后差的小细胞癌的发生和转归有关。 展开更多
关键词 肺肿瘤 基因 基因异常表达
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卵巢癌ras及p16基因异常表达的临床研究 被引量:1
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作者 董跃兰 刘燕青 +5 位作者 邓民芳 陈利馨 李琳 杨正中 谭德勇 赖建华 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2000年第10期744-747,共4页
目的:探讨ras癌基因及p16抑癌基因与卵巢癌生物学行为的关系。方法:应用S-P免疫组化法及聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)技术,检测36例卵巢癌,20例卵巢良性肿瘤及10例正常卵巢ras、p16基因... 目的:探讨ras癌基因及p16抑癌基因与卵巢癌生物学行为的关系。方法:应用S-P免疫组化法及聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)技术,检测36例卵巢癌,20例卵巢良性肿瘤及10例正常卵巢ras、p16基因及表达状况。结果:卵巢癌及对照组ras癌基因无突变及缺失。卵巢癌ras p21阳性表达80.6%,卵巢良性肿瘤仅有25%弱阳性表达,正常卵巢阴性表达,P< 0.01、P< 0.001,差异非常显著;卵巢癌及对照组p16基因无突变,卵巢癌p16缺失9例占25%,p16蛋白阳性表达降低,仅13.9%,强阳性表达27.8%,11例晚期卵巢癌阴性表达占30.6%;卵巢良性肿瘤p16蛋白弱阳性表达占45%,阳性表达降低占40%,对照组p16蛋白80%阳性表达,卵巢癌、卵巢良性肿瘤与正常对照比较阳性表达,P< 0.001、P< 0.05,差异显著。结论:本组卵巢上皮癌ras癌基因无突变,但ras p21过表达、p16基因25%缺失,无突变,p16蛋白表达降低,ras癌基因及p16抑癌基因异常,与卵巢癌患者临床分期、病理分化密切相关。 展开更多
关键词 卵巢癌 RAS基因 P16基因 基因异常表达
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axl基因在骨髓增生异常综合征患者外周血细胞的表达 被引量:2
11
作者 陈书长 吕照江 +2 位作者 朱红 扬经敏 张之南 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1998年第1期63-65,共3页
为研究axl基因在骨髓增生异常综合征(MDS)及其它几种血液病患者外周血单个核细胞中的表达,用RT-PCR方法测定细胞中axl基因mRNA的表达情况。结果表明:①10/11例(91%)MDS患者和1/2例AML-M_3型患者有axl基因表达。2例再生障碍性贫血患者、... 为研究axl基因在骨髓增生异常综合征(MDS)及其它几种血液病患者外周血单个核细胞中的表达,用RT-PCR方法测定细胞中axl基因mRNA的表达情况。结果表明:①10/11例(91%)MDS患者和1/2例AML-M_3型患者有axl基因表达。2例再生障碍性贫血患者、2例球形红细胞增多症患者、2例正常人均无axl基因表达。②FAB分型与axl基因表达关系:5例RA有表达,其中强表达2例,弱表达3例;4例RAEB均有表达,其中强表达1例,弱表达3例;1例RAEB-T为强表达。以上结果说明,axl基因在MDS患者中有很高的表达率,提示其可能作为MDS患者的诊断指标之一。 展开更多
关键词 骨髓增生异常综合征 axl基因 逆转录-聚合酶链反应 基因表达
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从贮存骨髓涂片提取RNA检测骨髓增生异常综合征病人的WT1基因表达 被引量:1
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作者 王嵘 波西雁 +3 位作者 郁志 陈志松 张洹 郁知非 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2001年第2期132-134,共3页
从贮存骨髓涂片提取RNA ,用巢式RT PCR检测 6 1例骨髓增生异常综合征 (MDS)病人的WT1基因表达 ,结果显示各类型MDS病人均高表达WT1基因。难治性贫血伴原始细胞增多(RAEB)和转变中的RAEB(RAEB t)的表达率高于难治性贫血 (RA)和环形铁粒... 从贮存骨髓涂片提取RNA ,用巢式RT PCR检测 6 1例骨髓增生异常综合征 (MDS)病人的WT1基因表达 ,结果显示各类型MDS病人均高表达WT1基因。难治性贫血伴原始细胞增多(RAEB)和转变中的RAEB(RAEB t)的表达率高于难治性贫血 (RA)和环形铁粒幼细胞性难治性贫血 (RAS)。WT1基因的表达与MDS病人的疾病进展呈正相关关系。WT1基因表达的RT 展开更多
关键词 骨髓 RNA WT1基因 骨髓增生异常综合症 基因表达
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转基因鼠载脂蛋白E基因异常表达与血脂代谢水平的相关性 被引量:1
13
作者 廖峥嵘 琦祖和 孙明增 《生物学杂志》 CAS CSCD 2001年第5期21-22,共2页
探讨载脂蛋白E(apoE)基因在转基因鼠体内的表达及其在血脂代谢中的作用。以单克隆抗体酶联免疫吸附法分别测定apoE4 、apoE7转基因鼠 (tg4、tg7)的血清apoE含量。用甘油磷酸化酶 (GPO)法和胆固醇氧化酶 (CHOD—PAP)法对转基因鼠及对照组... 探讨载脂蛋白E(apoE)基因在转基因鼠体内的表达及其在血脂代谢中的作用。以单克隆抗体酶联免疫吸附法分别测定apoE4 、apoE7转基因鼠 (tg4、tg7)的血清apoE含量。用甘油磷酸化酶 (GPO)法和胆固醇氧化酶 (CHOD—PAP)法对转基因鼠及对照组鼠 (control)的血清甘油三酯 (TG)和胆固醇 (TC)进行测定。tg4血清apoE含量为 2 0 3± 7.2ug/dl,tg7血清apoE含量为 1 8± 5 4ug/dl。血清TG水平转基因鼠 [tg4 (1 9.1 6± 0 .3 1 )mmol/L ,tg7(1 8.1 5± 0 .4 6)mmol/L]与对照组鼠 [(4 .95± 2 .2 5 )mmol/L]的差异均有显著性(p <0 .0 5 )。血清TC水平tg4 [(4 .4 4± 0 .0 4 )mmol/L]与对照组鼠 [(1 .4 9± 0 .0 1 )mmol/L]也表现出显著性的差异 (p <0 .0 5 )。 展开更多
关键词 载脂蛋白E 基因表达 甘油三脂 血清胆固醇 基因 血脂代谢 异常表达
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参麦汤对糖耐量异常大鼠骨骼肌GLUT4mRNA基因表达的影响 被引量:1
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作者 柴可夫 孙炜 +2 位作者 马纲 慎知 谷英敏 《中华中医药学刊》 CAS 2011年第2期231-234,共4页
目的:探讨参麦汤改善糖耐量异常大鼠骨骼肌GLUT4mRNA基因表达的作用。方法:造模大鼠随机分为正常组、模型组、参麦汤组、参麦汤加运动组、运动组。用RT-PCR方法检测参麦汤对糖耐量异常大鼠骨骼肌GLUT4mRNA表达的影响。结果:参麦汤组大... 目的:探讨参麦汤改善糖耐量异常大鼠骨骼肌GLUT4mRNA基因表达的作用。方法:造模大鼠随机分为正常组、模型组、参麦汤组、参麦汤加运动组、运动组。用RT-PCR方法检测参麦汤对糖耐量异常大鼠骨骼肌GLUT4mRNA表达的影响。结果:参麦汤组大鼠骨骼肌GLUT4mRNA表达上升最显著(P<0.001),运动组(P<0.01)、参麦加运动组(P<0.05)依次次之。结论:参麦汤可上调大鼠骨骼肌GLUT4mRNA的表达,可能是其改善胰岛素抵抗的机理之一。 展开更多
关键词 糖耐量异常 参麦汤 葡萄糖转运蛋白4mRNA 基因表达
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应用DNA微阵列对骨髓增生异常综合征患者骨髓单个核细胞基因表达谱的初步研究(英文) 被引量:1
15
作者 钱军 陈子兴 +1 位作者 岑建农 王玮 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2004年第5期595-600,共6页
为了探讨应用DNA微阵列研究骨髓增生异常综合征 (MDS)的基因表达谱的可行性 ,将 2例患者骨髓单个核细胞RNA各取等量混合后进行逆转录Cy5标记 ,与Cy3标记的正常对照cDNA混合 ,与H14 1微阵列杂交、扫描、软件分析。结果H14 1s芯片中共点样... 为了探讨应用DNA微阵列研究骨髓增生异常综合征 (MDS)的基因表达谱的可行性 ,将 2例患者骨髓单个核细胞RNA各取等量混合后进行逆转录Cy5标记 ,与Cy3标记的正常对照cDNA混合 ,与H14 1微阵列杂交、扫描、软件分析。结果H14 1s芯片中共点样 13484个基因克隆 ,其中 10 6 4个靶克隆是由针对同一基因内不同序列的cDNA片段重复点样至少 2次。重复点样检测结果表明 :在 2张芯片内各自完全一致的分别为 6 2 5个 (5 8.7% )和6 30个 (5 9.2 % ) ,而存在完全相反结果的cDNA片段分别有 2 1个 (2 .0 % )和 11个 (1.0 % )。 10 6 4个靶克隆中重复点样数据完整且分别在 2张芯片内结果一致的共有 4 11个 ,其中在 2张芯片间结果也完全一致的共有 4 0 0个(97 3% )。 2张芯片中MDS与正常对照比较存在差异表达的靶基因分别为 15 4 9和 1311个 ,而 2张芯片间表达差异一致的靶基因为 4 0 9个 ,其中 10 1个基因参与造血调控 ,主要涉及转录因子、细胞周期调节蛋白、代谢相关基因、表面黏附分子等。结论 :DNA微阵列可用于对MDS患者混合标本的表达谱分析 ,为深入研究MDS的发病分子机理提供线索 ,但需要进行重复实验以降低微阵列操作过程引起的表达偏差。 展开更多
关键词 骨髓增生异常综合征 DNA微阵列 基因表达 骨髓单个核细胞
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p16基因结构及表达异常与周围型肺癌CT征象的关系 被引量:4
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作者 彭秀斌 罗云辉 +2 位作者 杜中立 黄世奎 何竞 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期171-175,共5页
目的:探讨p16基因结构及表达异常与周围型肺癌CT征象的相关性。方法:利用免疫组织化学、聚合酶链反应单链构象多态性分析(PCR SSCP)方法检测52例周围型肺癌患者癌肺组织和癌旁肺组织中p16基因的表达水平及第2外显子突变,并与其CT征象进... 目的:探讨p16基因结构及表达异常与周围型肺癌CT征象的相关性。方法:利用免疫组织化学、聚合酶链反应单链构象多态性分析(PCR SSCP)方法检测52例周围型肺癌患者癌肺组织和癌旁肺组织中p16基因的表达水平及第2外显子突变,并与其CT征象进行相关性研究。结果: 52例肺癌患者癌组织中p16基因蛋白丢失率为53. 8% (28 /52),第2外显子缺失/突变率为23. 1% (12 /52);p16基因的缺失和蛋白的丢失率在不同临床分期的各组间的差异有统计学意义(P<0. 05),但在不同病理类型、分化程度的各组间差异无统计学意义(P>0. 05)。有细毛刺、棘突、胸膜凹陷及淋巴结转移等CT征象的肺癌患者,p16基因的缺失和蛋白的丢失率明显高于无以上征象者(P<0. 05);而在不同肿瘤大小、有无分叶、有无空洞、不同增强值方面,各组的p16基因的缺失和蛋白的丢失率差异无统计学意义(P>0. 05)。结论:p16基因突变及表达异常可能在肺癌的发生、发展中起重要作用,并与肺癌患者CT征象有关。p16基因可作为临床诊断及预后评估的检测指标。 展开更多
关键词 CT征象 周围型肺癌 表达异常 基因结构 聚合酶链反应-单链构象多态性分析 P16基因蛋白 P16基因突变 肺癌患者 免疫组织化学 外显子突变 相关性研究 第2外显子 淋巴结转移 丢失率 统计学 临床分期 病理类型 分化程度 胸膜凹陷
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FHIT基因在上皮性卵巢肿瘤中的表达及其临床意义 被引量:1
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作者 胡叶青 刘元姣 《实用医学杂志》 CAS 2004年第11期1234-1236,共3页
目的 :检测脆性组氨酸三联体蛋白 (FHIT蛋白 )在上皮性卵巢肿瘤中的表达 ,探讨其表达与上皮性卵巢癌临床病理参数之间的关系 ,以期了解其表达在鉴别卵巢良、恶性肿瘤 ,判断恶性肿瘤预后中的意义。方法 :收集我院 94例上皮性卵巢肿瘤的... 目的 :检测脆性组氨酸三联体蛋白 (FHIT蛋白 )在上皮性卵巢肿瘤中的表达 ,探讨其表达与上皮性卵巢癌临床病理参数之间的关系 ,以期了解其表达在鉴别卵巢良、恶性肿瘤 ,判断恶性肿瘤预后中的意义。方法 :收集我院 94例上皮性卵巢肿瘤的外科手术石蜡标本 (2 0例良性、18例交界性、5 6例恶性 ) ,用免疫组化SP的方法检测FHIT蛋白的表达。并分析FHIT蛋白的表达与年龄、病理分级、分类、临床分期以及有无淋巴结转移的关系。结果 :FHIT蛋白在 2 0例良性上皮性肿瘤及 18例交界性肿瘤中均无阴性表达 ,而在 5 6例恶性上皮性肿瘤中有 13例FHIT蛋白阴性表达 (2 3 2 1% )。而且FHIT蛋白阴性表达癌在癌组织学分级中的分布为Ⅰ级 0 /16例 ,Ⅱ~Ⅲ级 13 /4 3例 ,两组比较差异有显著性 (P <0 0 5 ) ;FHIT蛋白阴性表达率在伴淋巴结转移组和不伴淋巴结转移组间比较差异也有显著性 (P <0 0 5 ) ;而FHIT蛋白的阴性表达率与年龄、病理类型及临床分期无关。结论 :FHIT蛋白只在上皮性卵巢癌中特异性表达丧失 ,而且在上皮性卵巢癌中其表达丧失可能与高病理分级、淋巴结转移阳性相关 ,提示FHIT蛋白表达丧失在上皮性卵巢癌的发生和发展中起重要作用 ,其表达对卵巢上皮性肿瘤良恶性鉴别及预后判断具有临床指导意义 ,FHIT蛋白表达? 展开更多
关键词 fhit基因 上皮性卵巢肿瘤 基因表达 免疫组织化学 免疫组化
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FHIT基因在食管鳞癌中表达的变化及机制
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作者 刘复兴 王明荣 +3 位作者 吴人亮 徐昕 韩亚玲 蔡岩 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期678-681,共4页
目的探讨脆性组氨酸三联体(FHIT)基因在食管鳞癌中表达的变化及可能机制。方法用微卫星分析方法观察了80例食管鳞癌中FHIT基因的缺失情况,并用RT-PCR方法分析了其中20例食管鳞癌FHIT mRNA表达的变化。用免疫组化SABC法分析了另外65例食... 目的探讨脆性组氨酸三联体(FHIT)基因在食管鳞癌中表达的变化及可能机制。方法用微卫星分析方法观察了80例食管鳞癌中FHIT基因的缺失情况,并用RT-PCR方法分析了其中20例食管鳞癌FHIT mRNA表达的变化。用免疫组化SABC法分析了另外65例食管鳞癌及对应癌旁组织FHIT蛋白表达。结果FHIT基因旁侧微卫星杂合性丢失(LOH)在食管鳞癌频发;75%的病例FHIT mRNA表达下调且多发生于LOH的病例,但LOH发生与mRNA表达下调并不完全一致。FHIT蛋白在食管鳞癌和癌旁组织的表达并无显著差异。结论食管鳞癌中FHIT基因等位丢失是食管鳞癌FHIT基因表达失调的主要机制,FHIT基因在基因组水平和蛋白水平的改变并非完全一致。 展开更多
关键词 食管肿瘤 鳞状细胞癌 fhit基因 基因表达
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支气管上皮癌前病变FHIT基因稳定性及其蛋白表达
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作者 张鋆歆 彭凌 杜平 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2004年第4期295-297,共3页
FHIT基因位于3p14.2,为肿瘤候选抑制基因.FHIT异常表达广泛存在于肺、食管、胃、乳腺及肾脏等恶性肿瘤组织.实验表明FHIT参与细胞凋亡,FHIT与p53的联合基因治疗,启动两条或更多的凋亡途径,可抑制肿瘤生长[1].近来FHIT基因在肺癌前病变... FHIT基因位于3p14.2,为肿瘤候选抑制基因.FHIT异常表达广泛存在于肺、食管、胃、乳腺及肾脏等恶性肿瘤组织.实验表明FHIT参与细胞凋亡,FHIT与p53的联合基因治疗,启动两条或更多的凋亡途径,可抑制肿瘤生长[1].近来FHIT基因在肺癌前病变发生中的作用引起了特别的关注,因此我们对支气管上皮癌前病变FHIT基因稳定性及其蛋白表达进行检测,为FHIT基因应用于肺癌前病变的早期诊断及预防治疗提供实验依据. 展开更多
关键词 fhit基因 癌前病变 上皮癌 支气管 蛋白表达 肿瘤 治疗 抑制基因 乳腺 生长
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肾细胞癌FHIT基因蛋白产物表达研究
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作者 刘本春 王忠 +1 位作者 丁强 张元芳 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2000年第2期97-100,共4页
目的 :明确FHIT基因蛋白产物 (Fhit)细胞内定位及分布情况 ,比较其在肾细胞癌 (RCC)组织、癌周及正常肾组织中的表达差异 ,探讨Fhit表达状态与RCC临床病理特征的关系。方法 :采用兔抗 Fhit多克隆抗体对 36例RCC的癌组织、2 0份相应癌... 目的 :明确FHIT基因蛋白产物 (Fhit)细胞内定位及分布情况 ,比较其在肾细胞癌 (RCC)组织、癌周及正常肾组织中的表达差异 ,探讨Fhit表达状态与RCC临床病理特征的关系。方法 :采用兔抗 Fhit多克隆抗体对 36例RCC的癌组织、2 0份相应癌周肾组织及 6例正常肾组织标本行免疫组织化学ABC法染色 ,结果以半定量方法记录分析。结果 :RCC患者术后五年随访过程中 ,复发及转移发生率分别为 16 7% (6 /36 )和 7 7% (10 /36 )。五年生存率为 5 5 6 % (2 0 /36 )。正常肾组织中特异性着色区主要分布在肾小管上皮细胞胞浆 ,呈弥漫性表达 ,少量位于肾小球内。癌组织中特异性着色区位于癌细胞胞浆 ,Fhit阳性率为 5 2 8% (19/36 ) ,癌组织中Fhit表达强度明显低于正常肾脏组织和相应癌周肾组织 (P <0 0 1)。Ⅲ、Ⅳ期癌组织Fhit表达显著低于Ⅰ、Ⅱ期者 (P <0 0 5 )。RCC组织Fhit失表达与患者预后差关系密切 (P <0 0 5 )。结论 :Fhit为一种细胞浆蛋白 ,正常肾组织中呈强阳性表达 ,绝大部分位于肾小管上皮细胞。癌组织中Fhit表达显著降低或失表达。 展开更多
关键词 fhit基因 肾细胞癌 基因表达
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