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NIR-II quantum dot-labeled exosomes’imaging in treatment of ischemic peripheral nerve injury
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作者 OGURA Shingo SHAO Ke-Meng +6 位作者 ZHANG Xiao LI Hui-Zhu FENG Si-Jia WANG Yue-Ming CHEN Jun WU De-Hua WO Yan 《红外与毫米波学报》 北大核心 2025年第5期631-640,共10页
Ischemia is a significant factor affecting the repair of peripheral nerve injuries,while exosomes have been shown to promote angiogenesis.To further investigate the detailed processes and efficacy of exosome thera⁃py ... Ischemia is a significant factor affecting the repair of peripheral nerve injuries,while exosomes have been shown to promote angiogenesis.To further investigate the detailed processes and efficacy of exosome thera⁃py for ischemic peripheral nerve injuries,this study utilized glucose-modified near-infrared-II(NIR-II)quantum dots(QDs)to label adipose-derived stem cell exosomes(QDs-ADSC-Exos),enabling long-term in vivo NIR-II imaging of exosome treatment for ischemic peripheral nerve damage.Experimental results confirmed that QDs can be used for non-invasive in vitro labeling of exosomes,with QDs-ADSC-Exos exhibiting strong fluorescence signals in the NIR-II window and demonstrating favorable NIR-II imaging characteristics in vivo.Notably,QDsADSC-Exos showed accumulation at the site of nerve injury in cases of ischemic peripheral nerve damage.Func⁃tional neurological assessments indicated that QDs-ADSC-Exos effectively promoted neural regeneration.This study highlights the potential of exosomes in treating ischemic peripheral nerve injuries and elucidates the spatio⁃temporal characteristics of exosome therapy,providing objective evidence for the further optimization of exosomebased treatment protocols. 展开更多
关键词 NIR-II imaging quantum dots exosomeS peripheral nerve injury vascular injury
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Advances and Challenges of Exosome Metabolomics in Body Fluids
2
作者 CAO Yiqing HOU Jingxin +1 位作者 LIU Jianye LI Yan 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2024年第11期1-15,共15页
Exosomes,ubiquitously present in body fluids,serve as non-invasive biomarkers for disease diagnosis,monitoring,and treatment.As intercellular messengers,exosomes encapsulate a rich array of proteins,nucleic acids,and ... Exosomes,ubiquitously present in body fluids,serve as non-invasive biomarkers for disease diagnosis,monitoring,and treatment.As intercellular messengers,exosomes encapsulate a rich array of proteins,nucleic acids,and metabolites,although most studies have primarily focused on proteins and RNA.Recently,exosome metabolomics has demonstrated clinical value and potential advantages in disease detection and pathophysiology,despite significant challenges,particularly in exosome isolation and metabolite detection.This review discusses the significant technical challenges in exosome isolation and metabolite detection,highlighting the advancements in these areas that support the clinical application of exosome metabolomics,and illustrates the potential of exosomal metabolites from various body fluids as biomarkers for early disease diagnosis and treatment. 展开更多
关键词 exosome Metabolomics Body fluid BIOMARKER Disease diagnosis
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间充质干细胞来源的Exosome对神经损伤的保护作用 被引量:15
3
作者 魏俊吉 陈云飞 +8 位作者 薛春玲 马百涛 沈雅梅 关健 包新杰 吴昊 韩钦 王任直 赵春华 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期33-36,共4页
目的研究脂肪间充质干细胞(MSC)来源的Exosome对谷氨酸神经损伤的保护作用及可能机制。方法采用透射电镜和Western blot法检测人脂肪MSC来源的Exosome的特征,ELISA法检测Exosome中主要的细胞因子。用PC12细胞建立谷氨酸神经细胞损伤模... 目的研究脂肪间充质干细胞(MSC)来源的Exosome对谷氨酸神经损伤的保护作用及可能机制。方法采用透射电镜和Western blot法检测人脂肪MSC来源的Exosome的特征,ELISA法检测Exosome中主要的细胞因子。用PC12细胞建立谷氨酸神经细胞损伤模型,并分为对照组(未经谷氨酸损伤的细胞)、Glu组(谷氨酸损伤未经其他处理的细胞)、Glu+Exo组(谷氨酸损伤后用100 ng/ml MSC Exosome处理的细胞)、Glu+Exo+Akt组(谷氨酸损伤后用MSC Exosome同时加10μmol/L Akt抑制剂LY294002处理的细胞)、Glu+Exo+Erk组(谷氨酸损伤后用MSC Exosome同时加10μmol/L Erk抑制剂U0126处理的细胞)和Glu+Exo+Trk B组(谷氨酸损伤后用MSC Exosome同时加10μmol/L Trk B抑制剂K252a处理的细胞),MTS法检测各组细胞的存活率并进行比较。结果透射电镜下可见Exosome为40-100 nm的小囊泡结构,Western blot法检测结果显示其可表达CD63、CD81、HSP70和HSP90等特征性蛋白。ELISA检测结果显示Exosome中主要包含的细胞因子为肝细胞生长因子和胰岛素样生长因子,含量分别为9336.49±258.63和58645.50±16014.62;而脑源性神经营养因子、血管内皮生长因子和神经生长因子含量均较低,分别为1928.25±385.47、1136.94±5.99和33.34±9.43。MTS检测结果显示,对照组、Glu组、Glu+Exo组、Glu+Exo+Akt组、Glu+Exo+Erk组和Glu+Exo+Trk B组的PC12细胞存活率分别为0.842±0.047、0.306±0.024、0.566±0.026、0.461±0.016、0.497±0.003和0.515±0.034,其中,Glu组显著低于对照组(P=0.02),Glu+Exo组显著高于Glu组(P=0.01),Glu+Exo+Akt组显著低于Glu+Exo组(P=0.01)。结论人脂肪MSC来源的Exosome具有保护谷氨酸神经损伤的作用,这可能是通过激活磷脂酰基醇3激酶-丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶信号通路来实现的。 展开更多
关键词 间充质干细胞 exosome 神经损伤 治疗机制
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IL-18基因修饰对肺癌细胞来源exosome诱导杀伤肿瘤细胞作用的影响 被引量:10
4
作者 张在云 李晓梅 +3 位作者 王涓冬 孙建华 姜玉华 潘祥林 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期1758-1761,共4页
目的:研究细胞介素18(IL-18)基因修饰对肺癌细胞来源exosome诱导杀伤肿瘤细胞作用的影响,以探讨高效exosome疫苗的制备。方法:提取IL-18基因修饰的NCI-H460细胞(IL-18/H460)、pcDNA3.1+载体修饰细胞(DNA3.1/H460)及未修饰NCI-H460细胞(N... 目的:研究细胞介素18(IL-18)基因修饰对肺癌细胞来源exosome诱导杀伤肿瘤细胞作用的影响,以探讨高效exosome疫苗的制备。方法:提取IL-18基因修饰的NCI-H460细胞(IL-18/H460)、pcDNA3.1+载体修饰细胞(DNA3.1/H460)及未修饰NCI-H460细胞(NCI-H460)上清液的exosome,透射电镜下观察exo-some形态;用Western blotting方法检测exosome中热休克蛋白70(HSP70)、人白细胞抗原(HLA)及IL-18的表达;用exosome直接刺激活化T细胞,用乳酸脱氢酶(LDH)法测定T细胞对NCI-H460细胞的杀伤作用;用exosome冲击树突状细胞(DCs),然后活化T细胞,测定对NCI-H460细胞的杀伤作用,计算杀伤率。结果:透射电镜下观察exosome具有典型的形态;3组exosome中均有HSP70及HLA蛋白表达,IL-18/H460组有IL-18蛋白表达。效靶比25∶1、10∶1、5∶1时exosome直接提高活化T细胞的杀伤率,IL-18/H460组为(38.45±5.42)%、(25.17±3.94)%和(11.75±3.22)%,exosome冲击DCs活化T细胞的杀伤率,IL-18/H460组为(89.05±4.06)%、(64.97±6.02)%和(40.16±4.98)%,均高于其余2组。Exosome冲击DCs活化T细胞的杀伤作用强于exosome直接刺激活化的T细胞。结论:IL-18基因修饰能增强NCI-H460细胞来源exosome诱导的杀伤肿瘤细胞作用。 展开更多
关键词 白细胞介素18 基因修饰 肺肿瘤 exosome 癌症疫苗
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致敏树突细胞及exosome对胃癌的免疫治疗作用研究 被引量:5
5
作者 罗治彬 徐采朴 +6 位作者 孙贵银 谢家印 田玉静 朱高友 房殿春 王东 王阁 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第10期693-696,共4页
目的 :了解胃癌组织中树突细胞 (DC)的功能状态 ,探讨DC及其分泌的亚细胞成分exosomes用于防治胃癌的可能性 ,旨在为胃癌的防治探索新的途径。方法 :利用致敏DC及其所分泌的亚细胞成分exosomes对荷胃癌小鼠进行免疫治疗 ,观察其免疫治... 目的 :了解胃癌组织中树突细胞 (DC)的功能状态 ,探讨DC及其分泌的亚细胞成分exosomes用于防治胃癌的可能性 ,旨在为胃癌的防治探索新的途径。方法 :利用致敏DC及其所分泌的亚细胞成分exosomes对荷胃癌小鼠进行免疫治疗 ,观察其免疫治疗效果。结果 :荷胃癌小鼠经胃癌细胞RNA致敏的DC及其分泌的亚细胞成分exosomes治疗后 ,小鼠腹水产生率、肿瘤转移率、动物存活率、瘤体平均重量等指标均明显优于对照组 (P <0 0 1) ,局部组织中IL 12、IFN γ和IL 18的基因表达水平都明显升高 (P <0 0 1) ,肿瘤局部CD4 + 、CD8+ 细胞数量增加 (P <0 0 5 ) ,TIL细胞毒活性明显增强。结论 :胃癌RNA致敏的DC及其所分泌的亚细胞成分exosomes,能促进胃癌抗原的提呈 ,并启动和增强机体的抗瘤免疫功能 ,改善临床症状和生存质量 ,对荷胃癌小鼠具有一定的免疫治疗效果。 展开更多
关键词 树突细胞 胃癌 肿瘤浸润树突细胞 exosome 小鼠
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肾癌ACHN细胞exosome对自身细胞增殖和凋亡的影响 被引量:4
6
作者 杨林 吴小候 +5 位作者 罗春丽 何云锋 张尧 陈雄 张龙 陈力学 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1498-1502,共5页
目的探讨肾癌ACHN细胞来源的exosome对肾癌ACHN细胞自身增殖和凋亡的影响及机制。方法用超滤和蔗糖重水密度梯度超速离心法分离纯化肾癌ACHN细胞分泌的exosome;采用CCK-8法评价exosome对肾癌ACHN细胞增殖的影响;Annexin V-FITC/PI双染... 目的探讨肾癌ACHN细胞来源的exosome对肾癌ACHN细胞自身增殖和凋亡的影响及机制。方法用超滤和蔗糖重水密度梯度超速离心法分离纯化肾癌ACHN细胞分泌的exosome;采用CCK-8法评价exosome对肾癌ACHN细胞增殖的影响;Annexin V-FITC/PI双染色流式细胞术检测细胞凋亡的变化;RT-PCR和Western blotting检测CyclinD1、caspase-3 mRNA和蛋白的表达;Western blotting检测p-Akt、p-ERK1/2的变化。结果成功使用超滤和蔗糖重水密度梯度超速离心法分离纯化肾癌ACHN细胞分泌的exosome。exosome可促进肾癌ACHN细胞增殖,抑制其凋亡;在此过程中,CyclinD1 mRNA和蛋白的表达均上调,而caspase-3 mRNA表达无明显变化,caspase-3蛋白表达下调;同时p-Akt和p-ERK1/2的表达也上调。结论 exosome可促进肾癌ACHN细胞生长和增殖,抑制细胞凋亡。筛除肾癌微环境中的exosome或抑制其功能,可能成为肾癌治疗的有效新方法。 展开更多
关键词 exosome 肾癌 增殖 凋亡 ACHN细胞
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乳腺癌MDA-MB-231细胞源Exosomes对内皮细胞增殖的影响及MAPK/ERK和PI3K/Akt信号通路的作用 被引量:8
7
作者 隆霜 沈宜 +3 位作者 谢莹珊 范维珂 姜蓉 陈黎 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1054-1058,共5页
目的研究人乳腺癌MDA-MB-231细胞源Exosomes对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的促增殖作用,并初步探讨MAPK/ERK和PI3K/Akt信号转导通路在此过程中的作用。方法低温超速离心及密度梯度离心法提取乳腺癌MDA-MB-231细胞源Exosomes。采用MTT法分... 目的研究人乳腺癌MDA-MB-231细胞源Exosomes对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的促增殖作用,并初步探讨MAPK/ERK和PI3K/Akt信号转导通路在此过程中的作用。方法低温超速离心及密度梯度离心法提取乳腺癌MDA-MB-231细胞源Exosomes。采用MTT法分别检测50、100、200、400μg/ml Exosomes对HUVECs促增殖作用的影响,流式细胞仪测定200μg/ml Exosomes对HUVECs细胞周期的影响,Western blotting检测200μg/ml Exosomes诱导下HUVECs细胞内细胞外调节蛋白激酶(ERK)和蛋白激酶B(Akt)蛋白的表达水平。结果乳腺癌MDA-MB-231细胞源Exosomes可促进HUVECs细胞增殖,且呈时间和剂量依赖性。200μg/ml Exosomes作用HUVECs细胞24h后,S期细胞比例(27.8%±3.37%)较对照组(15.34%±0.71%)增加(P<0.05),G1/S期细胞比例(2.22%±0.37%)与对照组(4.67%±0.47%)比较下降(P<0.05)。Western blotting结果显示,200μg/ml Exosomes作用HUVECs细胞24、48、72h后,磷酸化ERK表达(0.3378±0.0415,0.4967±0.0511,0.9205±0.0462)与磷酸化Akt蛋白表达(0.4091±0.0361,0.5484±0.0382,0.7496±0.0481)与对照组(磷酸化ERK 0.1836±0.0324,磷酸化Akt 0.2582±0.0215)相比有所增加(P<0.05)。结论乳腺癌MDA-MB-231细胞源Exosomes能促进HUVECs的增殖,其机制可能与细胞周期改变,以及MAPK/ERK和PI3K/Akt信号通路的持续活化有关。 展开更多
关键词 exosomeS 胞外信号调节激酶 蛋白激酶B 增殖 乳腺癌
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顺铂联合exosomes抗小鼠肝癌效应的实验研究 被引量:5
8
作者 汪少华 沈宜 +3 位作者 李静 向自武 范维珂 陈黎 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期49-52,共4页
目的:评价顺铂(DDP)与exosomes联用的抗肿瘤效果,研究其可能机制。方法:采用MTT法检测顺铂对小鼠肝癌H22细胞增殖的影响,用H22源exosomes瘤苗免疫小鼠,3H-TdR释放法检测exosomes诱导产生的CTL活性及顺铂对CTL杀伤的增敏作用,RT-PCR检测... 目的:评价顺铂(DDP)与exosomes联用的抗肿瘤效果,研究其可能机制。方法:采用MTT法检测顺铂对小鼠肝癌H22细胞增殖的影响,用H22源exosomes瘤苗免疫小鼠,3H-TdR释放法检测exosomes诱导产生的CTL活性及顺铂对CTL杀伤的增敏作用,RT-PCR检测顺铂作用后H22细胞中Fas及exosomes免疫后脾淋巴细胞FasL的mRNA表达水平,Western blot检测顺铂对H22细胞Fas的蛋白表达水平的影响。以小鼠肝癌H22细胞接种BALB/c小鼠建立动物模型,观察顺铂联合exosomes治疗对小鼠生存期的影响。结果:顺铂抑制H22细胞生长呈量效关系;exosomes免疫小鼠可诱导产生针对H22细胞的CTL反应,经2.5mg/L顺铂预处理24h的H22细胞对CTL杀伤的敏感性增强(P<0.05)。顺铂在mRNA和蛋白水平,显著增强H22Fas的表达;exosomes免疫小鼠后,脾淋巴细胞FasL表达增加。顺铂联合exosomes组小鼠生存期较单独治疗组及对照组明显延长(P<0.05)。结论:顺铂与exosomes联合治疗有协同抑制肿瘤的作用,产生协同作用的机制与增强CTL活性有关。 展开更多
关键词 顺铂 exosomeS 联合治疗 肿瘤疫苗
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肝癌HepG2细胞分泌的Exosome对间充质干细胞分化的影响及其相互作用机制 被引量:4
9
作者 骆飞 孙昭 +2 位作者 韩钦 薛春玲 白春梅 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期312-317,共6页
目的评估肝癌HepG2细胞分泌的Exosome对间充质干细胞(MSC)分化为肿瘤相关成纤维细胞(CAF)的影响及其相互作用机制。方法在人脂肪MSC培养体系中加入HepG2细胞分泌的Exosome进行培养,采用Western blot法检测CAF特征性蛋白的表达情况。将... 目的评估肝癌HepG2细胞分泌的Exosome对间充质干细胞(MSC)分化为肿瘤相关成纤维细胞(CAF)的影响及其相互作用机制。方法在人脂肪MSC培养体系中加入HepG2细胞分泌的Exosome进行培养,采用Western blot法检测CAF特征性蛋白的表达情况。将已鉴定为CAF样条件培养基(CAF-CM)和牛血清白蛋白对照组分别加至HepG2培养基中,采用Western blot法和定量PCR检测上皮间质转化相关基因的表达,MTS法检测细胞增殖,Transwell法检测HepG2细胞的迁移和侵袭。结果 HepG2细胞分泌的Exosome表达CD63、热休克蛋白(HSP)70和HSP90。将Exosome加入MSC培养体系后14 d,可检测到α平滑肌肌动蛋白、成纤维细胞激活蛋白α、白细胞介素(IL)-6、IL-8和IL-1β等CAF特征性蛋白的表达。MTS法检测CAF-CM组的细胞增殖OD值为1.075±0.104,明显高于对照组的0.874±0.066(P=0.023)和MSC条件培养基组的0.649±0.034(P=0.0005)。CAF-CM组迁移的HepG2细胞数为(42.5±9.1)个,明显高于对照组的(18.5±3.1)个(P=0.001);CAF-CM组侵袭细胞数为(29.0±3.5)个,明显高于对照组的(13.1±3.7)个(P=0.009)。CAF-CM组Smad交互蛋白1(P=0.040)、β-catenin(P=0.038)、纤连蛋白(P=0.029)和Vimentin(P=0.013)的表达较对照组显著上调;而CAF-CM组的紧密连接蛋白表达显著低于对照组(P=0.010)。结论肝癌HepG2细胞系分泌的Exosome可诱导脂肪组织来源的MSC分化为CAF,后者又可以促进HepG2细胞的增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 exosome 间充质干细胞 肝癌 肿瘤相关成纤维细胞
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热休克小鼠肝癌细胞(H_(22))源Exosomes的制备及其蛋白组成的初步研究 被引量:6
10
作者 杨麟 沈宜 +1 位作者 李静 陈黎 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2008年第6期669-672,共4页
目的:探讨热休克对小鼠肝癌细胞H22分泌的Exosomes产量及蛋白组分的影响,为进一步研究Exosomes在生产和免疫治疗方面的改进提供理论依据。方法:经超速分级离心和蔗糖密度梯度离心纯化得到H22细胞分泌的Exosomes和经热休克处理后H22... 目的:探讨热休克对小鼠肝癌细胞H22分泌的Exosomes产量及蛋白组分的影响,为进一步研究Exosomes在生产和免疫治疗方面的改进提供理论依据。方法:经超速分级离心和蔗糖密度梯度离心纯化得到H22细胞分泌的Exosomes和经热休克处理后H22细胞分泌的Exosomes(Heat shocked Exosomes,HS—Exo),透射电镜观察其形态,SDS—PAGE电泳分析其蛋白带组成,Western Blot检测两者所含有的免疫分子情况。结果:在透射电镜下,HS—Exo与Exosomes形态相似,直径约20~90nm的膜性囊泡,结构完整;经热休克处理后小鼠肝癌细胞H22分泌的Exosomes产量增多,且在HS—Exo中表达的热休克蛋白70(HSP70)、热休克同源蛋白70(HSC70)、热休克蛋白60(HSP60)、粘附相关蛋白(ICAM—1)与在Exosomes中的表达相比显著上调(P〈0.05)。结论:超速分级离心及蔗糖密度梯度离心提取纯化热休克小鼠肝癌细胞H22源的Exosomes的方法具有可行性;HS—Exo中HSP70、HSC70、HSP60、ICAM—1的表达比Exosomes更为丰富,提示HS—Exo可能比Exosomes具有更强的免疫活性。 展开更多
关键词 exosomeS 肝癌细胞 热休克 肿瘤疫苗
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H_(22)源exosomes瘤苗在小鼠体内的抗肿瘤及免疫调节作用 被引量:4
11
作者 汪少华 沈宜 +3 位作者 李静 向自武 范维珂 孙迪 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期417-420,共4页
目的:探讨exosomes瘤苗对小鼠免疫功能及肝癌移植瘤生长的影响。方法:从培养的小鼠肝癌H22细胞上清中分离exosomes瘤苗,以H22细胞接种BALB/c小鼠建立动物模型,随机分为exosomes瘤苗接种组及PBS对照组。15d后处死小鼠,测量移植瘤体重量,... 目的:探讨exosomes瘤苗对小鼠免疫功能及肝癌移植瘤生长的影响。方法:从培养的小鼠肝癌H22细胞上清中分离exosomes瘤苗,以H22细胞接种BALB/c小鼠建立动物模型,随机分为exosomes瘤苗接种组及PBS对照组。15d后处死小鼠,测量移植瘤体重量,计算抑瘤率;分别称取脾重、胸腺重,检测荷瘤小鼠脾脏指数和胸腺指数;用MTT法检测小鼠脾淋巴细胞增殖情况和细胞毒活性;酶连免疫吸附试验(Enzyme-linked immunoabsorbent assay,ELISA)检测脾淋巴细胞产生IL-2、INF-γ的能力。结果:接种exosomes瘤苗能显著抑制肿瘤生长,抑瘤率达42.26%;与对照组比较,实验组荷瘤鼠胸腺指数、脾指数显著提高(P<0.05);exosomes促进脾淋巴细胞增殖并增强其细胞毒活性,同时脾淋巴细胞培养上清中IL-2、INF-γ的水平升高。结论:exosomes瘤苗可能通过增强小鼠的免疫功能抑制小鼠肝癌移植瘤生长。 展开更多
关键词 exosomeS 肝细胞癌 抗肿瘤免疫 肿瘤疫苗
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延边黄牛与韩延牛血液Exosome对延边黄牛垂体细胞中GH含量的影响 被引量:5
12
作者 关立增 娄安钢 +1 位作者 朴明淑 蔡锦顺 《安徽农业科学》 CAS 2016年第1期105-107,共3页
[目的]从延边黄牛和韩延牛血液中分离Exosome(外胞体),研究2种外胞体对延边黄牛垂体细胞中GH含量的影响。[方法]通过超高速离心等方法,从延边黄牛和韩延牛血液中分离Exosome,并以100 ng/mL的浓度分别转染给原代培养的延边黄牛... [目的]从延边黄牛和韩延牛血液中分离Exosome(外胞体),研究2种外胞体对延边黄牛垂体细胞中GH含量的影响。[方法]通过超高速离心等方法,从延边黄牛和韩延牛血液中分离Exosome,并以100 ng/mL的浓度分别转染给原代培养的延边黄牛垂体细胞培养12、24和48 h,对细胞上清液中GH含量进行检测。[结果] 电镜下延边黄牛与韩延牛血液Exosome均呈圆形或椭圆形的双层膜小囊泡,直径均为30~100 nm,膜结构完整。韩延牛Exosome处理组的延边黄牛垂体细胞GH mRNA表达显著高于延边黄牛Exosome处理组(P〉0.05)。韩延牛血液Exosome处理组垂体中GH的含量显著高于延边黄牛血液Exosome处理组(P〉0.05)。[结论]延边黄牛和韩延牛血液中的Exosome对延边黄牛垂体细胞中GH含量的影响有明显差异。 展开更多
关键词 延边黄牛 韩延牛 血液exosome 垂体细胞 GH
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Exosomes联合卡介苗的体内抗肿瘤效应 被引量:3
13
作者 杨云山 钟海均 +1 位作者 修方明 蔡志坚 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期263-266,共4页
目的:探讨exosomes(Exo)联合卡介苗(bacillus Calmette-Gurin vaccine,BCG)的体内抗肿瘤效应。方法:通过密度梯度离心法分离和纯化E.G7-OVA肿瘤细胞来源的Exo,Western blotting检测其蛋白成分。分别以Exo、BCG、Exo+BCG、PBS免疫小鼠,... 目的:探讨exosomes(Exo)联合卡介苗(bacillus Calmette-Gurin vaccine,BCG)的体内抗肿瘤效应。方法:通过密度梯度离心法分离和纯化E.G7-OVA肿瘤细胞来源的Exo,Western blotting检测其蛋白成分。分别以Exo、BCG、Exo+BCG、PBS免疫小鼠,以E.G7-OVA细胞攻击,观察各组免疫保护效应;建立E.G7-OVA荷瘤小鼠模型,观察各组免疫治疗效应。LDH法检测4组免疫小鼠脾细胞CTL细胞毒性。结果:Western blotting检测显示,Exo含有HSP60、OVA、HSC70和CD63分子;免疫保护实验结果显示,Exo+BCG组免疫小鼠90d无瘤率显著高于Exo组和BCG组(60%vs20%、0%,P<0.01);免疫治疗实验结果显示,Exo+BCG对小鼠移植瘤的抑制显著强于Exo组和BCG组(P<0.01)。CTL检测结果显示,Exo+BCG免疫小鼠的CTL细胞特异性杀伤E.G7-OVA细胞的活性显著高于其他各组(P<0.01)。结论:BCG作为免疫佐剂能显著增强exosomes的体内抗肿瘤效应。 展开更多
关键词 E.G7-OVA exosomeS 卡介苗 抗肿瘤效应
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HepaCAM蛋白通过exosomes途径分泌到细胞外并抑制肿瘤细胞增殖 被引量:4
14
作者 刘安全 吴小候 罗春丽 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期168-171,共4页
目的探讨肝细胞黏附分子(hepatocyte cell adhesion molecule,hepaCAM)在肾癌786-0细胞中通过exo-somes途径分泌到细胞外及是否可以抑制肿瘤细胞增殖。方法将携带hepaCAM基因的重组腺病毒质粒瞬时转染786-0细胞,Western blot鉴定hepaCA... 目的探讨肝细胞黏附分子(hepatocyte cell adhesion molecule,hepaCAM)在肾癌786-0细胞中通过exo-somes途径分泌到细胞外及是否可以抑制肿瘤细胞增殖。方法将携带hepaCAM基因的重组腺病毒质粒瞬时转染786-0细胞,Western blot鉴定hepaCAM基因在786-0中的表达;莫能星(monensin)和二甲基阿米洛利(DMA)处理转染后肿瘤细胞,检测肿瘤细胞上清液及exosomes中hepaCAM蛋白的量的变化。MTT法检测hepaCAM蛋白是否可以抑制肿瘤细胞增殖。结果成功构建并转染hepaCAM重组腺病毒质粒,在肿瘤细胞上清液中检测到hepaCAM蛋白的分泌,经药物处理后,莫能星明显增加了转染后肿瘤细胞的hepaCAM蛋白的分泌量,而二甲基阿米洛利处理转染后肿瘤细胞,能显著抑制细胞上清液中hepaCAM的分泌量。Western blot进一步证明hepaCAM蛋白存在于exosomes上。成功转染hepaCAM基因的肾癌细胞分泌的exosomes明显抑制了肿瘤细胞增殖。结论 hepaCAM蛋白可能通过exosomes途径分泌到肿瘤细胞外并抑制肿瘤细胞增殖。 展开更多
关键词 肝细胞粘附分子 exosomeS 分泌 增殖
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As_2O_3联合H_(22)源exosome的抗肿瘤作用研究 被引量:2
15
作者 沈宜 向自武 +2 位作者 陈国庆 谢莹珊 郑维萍 《激光杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期82-84,共3页
目的:探讨三氧化二砷(As2O3)联合小鼠肝癌(H22)源exosome对小鼠皮下种植性肝癌(H22)模型的抗瘤作用。方法:超速离心及密度梯度离心法提取exosome,Bradford法蛋白定量;建立BALB/c小鼠皮下荷瘤模型,实验分4组:空白成瘤对照组、As2O3组、As... 目的:探讨三氧化二砷(As2O3)联合小鼠肝癌(H22)源exosome对小鼠皮下种植性肝癌(H22)模型的抗瘤作用。方法:超速离心及密度梯度离心法提取exosome,Bradford法蛋白定量;建立BALB/c小鼠皮下荷瘤模型,实验分4组:空白成瘤对照组、As2O3组、As2O3联合exosome组和exosome组。观察As2O3、exosome、及其联合应用的体内抗瘤效应;监测在体肿瘤的生长情况;计算抑瘤率、生存率:免疫组织化学法检测肿瘤组织中浸润的CD4+、CD8+T淋巴细胞。结果:与空白成瘤对照组比较,As2O3组、及其与exosome联合组的肿瘤生长明显放缓(P<0.05)。其抑瘤率分别为44.58%、66.27%。As2O3组及As2O3联合exosome组肿瘤组织中浸润的CD4+、CD8+T淋巴细胞明显增加(P<0.05)。结论:As2O3与exosome联合应用对小鼠皮下种植性实体性肝癌(H22)有协同治疗效应。 展开更多
关键词 肿瘤免疫 AS2O3 小鼠肝癌细胞H22 exosome
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不同雄性淋巴细胞及其Exosomes过继转输改善妊娠丢失孕鼠胚胎发育的比较分析 被引量:2
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作者 崔澂 郝淑维 +6 位作者 刘杰 郑文广 王雅卓 张斯斯 阎娟 吕微 李梅香 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1611-1615,共5页
目的:分析雄性T淋巴细胞及其Exosomes(Exo)过继转输对妊娠丢失孕鼠胚胎发育的保护作用。方法:分别将健康男性外周血单个核细胞(PBMC)、BALB/c及DBA/2雄鼠脾细胞体外诱导增殖,蔗糖密度梯度离心联合超滤制备Exo。CBA/J(♀)×BALB/c(♂... 目的:分析雄性T淋巴细胞及其Exosomes(Exo)过继转输对妊娠丢失孕鼠胚胎发育的保护作用。方法:分别将健康男性外周血单个核细胞(PBMC)、BALB/c及DBA/2雄鼠脾细胞体外诱导增殖,蔗糖密度梯度离心联合超滤制备Exo。CBA/J(♀)×BALB/c(♂)为正常妊娠对照,CBA/J(♀)×DBA/2(♂)为妊娠丢失URSA模型。将URSA孕鼠随机分组,经尾静脉或皮下注射,分别予以父方、非父方、无关雄鼠脾细胞或其Exo,以及男性PBMC来源Exo过继转输。观察胚胎发育,计算胎盘体积、胚胎吸收率及妊娠丢失率。结果:URSA组胎盘体积明显缩小,胚胎吸收率、妊娠丢失率显著升高(均P<0.000 5);尾静脉或皮下注射不同来源细胞及Exo后,孕鼠胎盘体积显著恢复,胚胎吸收率、妊娠丢失率显著下降(均P<0.000 5)。不同治疗组内两种注射途径产生的疗效无差异(均P>0.05);不同细胞来源Exo过继转输后,胚胎吸收率的下降幅度显著强于细胞治疗组(均P<0.05);男性Exo过继转输后,妊娠丢失率的下降幅度显著强于细胞治疗组及鼠源Exo治疗组(均P<0.05)。结论:过继转输不同来源雄性T淋巴细胞及其Exo均可明显改善胚胎发育。Exo作为非细胞成分生物学制剂,有望取代传统细胞过继免疫治疗。 展开更多
关键词 T淋巴细胞 exosomeS 过继转输 妊娠丢失 胚胎发育 小鼠
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舌癌Tca8113细胞来源exosomes的制备及鉴定 被引量:3
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作者 李金 廖贵清 +4 位作者 陈巨峰 刘海潮 苏宇雄 冯炼强 骆晓枫 《国际口腔医学杂志》 CAS 2014年第1期23-25,共3页
目的探讨舌癌Tca8113细胞能否分泌exosomes,为舌癌的免疫治疗寻找新方法。方法采用超速离心及差异密度梯度离心法,从Tca8113细胞中分离并纯化exosomes,通过透射电子显微镜观察其超微结构,蛋白质印迹法分析其表面蛋白成分。结果从Tca811... 目的探讨舌癌Tca8113细胞能否分泌exosomes,为舌癌的免疫治疗寻找新方法。方法采用超速离心及差异密度梯度离心法,从Tca8113细胞中分离并纯化exosomes,通过透射电子显微镜观察其超微结构,蛋白质印迹法分析其表面蛋白成分。结果从Tca8113细胞中成功分离并纯化出exosomes,其结构及携带蛋白与其他细胞来源的相似,并发现其分泌的exosomes还携带有肿瘤抗原。结论舌癌Tca8113细胞能分泌exosomes,而且其携带多种与肿瘤免疫相关的蛋白可能具有抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 exosomeS 蛋白质印迹法 透射电子显微镜 肿瘤免疫
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IL-12与IL-18联合刺激对树突状细胞分泌的exosome活性的影响 被引量:1
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作者 张在云 李希德 +3 位作者 魏玮 叶兰 丛萍 潘祥林 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期17-21,共5页
目的:观察IL-12与IL-18联合刺激对树突状细胞(dendritic cell,DC)分泌的exosome(DC derived exosome,Dex)活性的影响,为探索高效的exosome肿瘤疫苗奠定基础。方法:取正常健康人外周血单个核细胞诱导培养DCs,分别以IL-12、IL-18或IL-12+I... 目的:观察IL-12与IL-18联合刺激对树突状细胞(dendritic cell,DC)分泌的exosome(DC derived exosome,Dex)活性的影响,为探索高效的exosome肿瘤疫苗奠定基础。方法:取正常健康人外周血单个核细胞诱导培养DCs,分别以IL-12、IL-18或IL-12+IL-18联合刺激DC,并设空白对照组、T细胞对照组,分别提取各组的Dex,Western blotting检测Dex中HLA-DR、CD83的表达,流式细胞仪检测CD54、CD80及CD86的表达;MTT法检测Dex刺激T细胞增殖的作用,ELISA法测定T细胞IFN-γ的分泌量。结果:IL-12、IL-18、联合组、空白组的Dex中均有HLA-DR、CD83蛋白表达;联合组Dex的CD54(323.67±44.06 vs 246.17±31.91、236.33±33.87、167.67±28.73,P<0.05)、CD80(406.37±39.18 vs 331.67±36.15、335.67±41.38、260.00±35.58,P<0.05)及CD86(390.50±38.06 vs 314.33±36.64、319.00±33.10、246.83±30.55,P<0.05)表达均高于IL-12组、IL-18组及空白组;联合组刺激T细胞增殖高于IL-12组、IL-18组及空白组、T细胞组(1.98±0.31vs 1.55±0.23、1.57±0.21、1.10±0.18、0.53±0.09,P<0.05);联合组刺激T细胞分泌IFN-γ水平高于IL-12组、IL-18组及空白组、T细胞组(436.67±61.80 vs 295.04±40.25、358.18±55.77、225.00±36.44、139.50±17.63,P<0.05)。结论:IL-12与IL-18联合刺激能增加Dex表达CD54、CD80及CD86,促进Dex刺激的T细胞的增殖及其IFN-γ的分泌。 展开更多
关键词 树突状细胞 exosome IL-12 IL-18 T细胞 IFN-Γ
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以exosome为基础的肿瘤免疫治疗研究进展 被引量:3
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作者 耿建 金洁 陈龙邦 《医学研究生学报》 CAS 2006年第9期838-840,844,共4页
exosom e是由细胞分泌至细胞外的膜性小囊泡,表面含有大量与其来源和功能密切相关的蛋白质和脂质成分。如树突状细胞和肿瘤细胞分泌的exosom e可同时表达主要组织相容性复合体(MHC)Ⅰ、Ⅱ分子、共刺激分子、热休克蛋白Hsp70-90和肿瘤抗... exosom e是由细胞分泌至细胞外的膜性小囊泡,表面含有大量与其来源和功能密切相关的蛋白质和脂质成分。如树突状细胞和肿瘤细胞分泌的exosom e可同时表达主要组织相容性复合体(MHC)Ⅰ、Ⅱ分子、共刺激分子、热休克蛋白Hsp70-90和肿瘤抗原,在体内和体外实验中,能诱发和增强机体的免疫反应,表现出与抗原呈递细胞相似的功能。exosom e作为一种亚细胞成分,在治疗肿瘤方面具有组成明确、活性稳定、安全有效和便于保存等优点,从而显示出良好的应用前景。 展开更多
关键词 exosome 肿瘤 免疫治疗
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三氧化二砷诱导小鼠肝癌细胞H_(22)外泌exosome及相关机制研究 被引量:1
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作者 向自武 沈宜 +2 位作者 汪少华 范维珂 陈黎 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期216-219,共4页
目的探讨三氧化二砷在小鼠肝癌细胞H22外泌exosome中的影响。方法MTT法筛选三氧化二砷的合适药物浓度;密度梯度离心和超速离心法提纯exosome,Bradford法对exosome总蛋白进行定量分析;Western blot检测影响小囊泡vesicle分泌的复合体SNAR... 目的探讨三氧化二砷在小鼠肝癌细胞H22外泌exosome中的影响。方法MTT法筛选三氧化二砷的合适药物浓度;密度梯度离心和超速离心法提纯exosome,Bradford法对exosome总蛋白进行定量分析;Western blot检测影响小囊泡vesicle分泌的复合体SNARE的重要组成及调节蛋白Syntaxin的表达;结合钙荧光探针Fura-2、荧光倒置定量显微镜测定细胞内游离钙的相对浓度。结果维持小鼠肝癌细胞H2290%存活48h的药物浓度为1.25μmmol/L;药物作用前后,细胞数为5×104ml-1的H22细胞常规培养48h所得细胞悬液200ml,经密度梯度离心和超速离心所得exosome的总蛋白浓度分别为(0.85±0.13)、(0.96±0.10)mg/ml,差异具有统计学意义(P<0.05);三氧化二砷作用前后,H22细胞均有Syntaxin蛋白表达,三氧化二砷处理后,其表达明显增加(P<0.05)。结论SNARE复合体假说也适用于小鼠肝癌细胞H22的exosome外泌过程,三氧化二砷在exosome的外泌过程中有一定的促进作用。 展开更多
关键词 三氧化二砷 exosome 胞吐作用 SNARE假说 SYNTAXIN
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