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启膈散乙酸乙酯提取物对食管癌Eca9706细胞增殖和凋亡的影响 被引量:6
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作者 尹素改 王慧慧 +1 位作者 吴耀松 陈玉龙 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第14期1663-1666,共4页
目的探讨启膈散乙酸乙酯提取物对食管癌Eca9706细胞增殖和凋亡的影响。方法按沙参∶丹参∶茯苓∶川贝母(去心)∶郁金∶砂仁壳∶杵头糠=6∶6∶2∶3∶1∶1∶1的比例配制启膈散,每克药物配10 ml的比例加入95%乙醇溶液,用旋转蒸发仪浓缩药液... 目的探讨启膈散乙酸乙酯提取物对食管癌Eca9706细胞增殖和凋亡的影响。方法按沙参∶丹参∶茯苓∶川贝母(去心)∶郁金∶砂仁壳∶杵头糠=6∶6∶2∶3∶1∶1∶1的比例配制启膈散,每克药物配10 ml的比例加入95%乙醇溶液,用旋转蒸发仪浓缩药液,浓缩液与乙酸乙酯按体积比2∶1进行萃取,获取启膈散乙酸乙酯提取物。Eca9706细胞与浓度分别为12.5、25.0、50.0、100.0、200.0μg/ml的启膈散提取物共培养,MTT法检测启膈散提取物对Eca9706细胞的抑制率。Eca9706细胞与35%抑制浓度(IC35)、50%抑制浓度(IC50)和70%抑制浓度(IC70)的启膈散提取物共培养,采用流式细胞仪检测启膈散提物对Eca9706细胞的凋亡率。结果不同浓度启膈散提取物对Eca9706细胞的抑制率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。启膈散提取物对Eca9706细胞的抑制率与启膈散提取物浓度拟合曲线方程为Y=-1.835×10^(-5)X2+0.006X+0.185,R2=0.996,概率法计算IC35为22.8μg/ml,IC50为81.8μg/ml,IC70为162.2μg/ml。显微镜下观察,随着启膈散提取物浓度的增加,细胞变圆、变小,贴壁细胞数目逐渐减少,细胞间隙增大,细胞碎片增多。IC35、IC50和IC70启膈散提取物对Eca9706细胞的凋亡率比较,差异有统计学意义(P<0.001)。激光共聚焦显微镜下显示,启膈散提取物作用于Eca9706细胞后,部分细胞膜呈绿色,提示早期凋亡;部分细胞膜呈绿色,且细胞核呈红色,细胞体积变小、变圆,形成凋亡小体,提示晚期凋亡细胞。结论启膈散乙酸乙酯提取物可抑制食管癌Eca9706细胞增殖,诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 食管肿瘤 启膈散 细胞增殖 eca9706细胞 细胞凋亡
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低氧对食管癌ECa9706细胞生长及顺铂敏感性的影响 被引量:4
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作者 杨联河 赵雪艳 +2 位作者 牛春玲 辛凯 陈玉龙 《河南师范大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2015年第5期107-111,共5页
着重探讨低氧对食管癌ECa9706细胞生长及顺铂敏感性的影响.ECa9706细胞分别培养于顺铂干预的常氧和低氧(1%O2)环境下,倒置显微镜观察细胞形态,MTT法检测细胞活力,流式细胞法检测细胞凋亡和细胞周期.结果显示:与常氧环境下培养相比,低氧... 着重探讨低氧对食管癌ECa9706细胞生长及顺铂敏感性的影响.ECa9706细胞分别培养于顺铂干预的常氧和低氧(1%O2)环境下,倒置显微镜观察细胞形态,MTT法检测细胞活力,流式细胞法检测细胞凋亡和细胞周期.结果显示:与常氧环境下培养相比,低氧下细胞形态变长、变大,细胞自第7d后生长缓慢.常氧下顺铂作用细胞48h的IC50为(1.180±0.056)μM,低氧下为(2.675±0.063)μM.培养48h后,常氧对照组及常氧高浓度顺铂组(1.18μM)阻滞细胞周期于G1期,低氧下各组细胞周期阻滞于S期.低氧导致顺铂诱导的细胞凋亡率较常氧下降低.表明:低氧环境影响了细胞的形态、增殖及细胞周期,低氧下细胞对顺铂的细胞毒作用敏感性降低. 展开更多
关键词 NORMOXIA HYPOXIA eca9706 CISPLATIN drug-sensitivity
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敲除DNA聚合酶β基因的人食管癌Eca9706细胞系的建立及其细胞生物学特性分析
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作者 冯龙 郭文涛 +2 位作者 路武豪 孙萨迦 董子明 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2014年第5期605-608,共4页
目的:建立敲除DNA聚合酶β( DNA polβ)基因的人食管癌Eca 9706细胞株,观察基因敲除细胞生物学行为的变化。方法:采用同源重组基因敲除方法,首先构建食管癌Eca9706细胞DNA polβ基因敲除载体,并将其导入Eca9706细胞,构建DNA po... 目的:建立敲除DNA聚合酶β( DNA polβ)基因的人食管癌Eca 9706细胞株,观察基因敲除细胞生物学行为的变化。方法:采用同源重组基因敲除方法,首先构建食管癌Eca9706细胞DNA polβ基因敲除载体,并将其导入Eca9706细胞,构建DNA polβ基因敲除细胞株。 PCR、RT-PCR、Western blot法检测DNA polβ基因敲除区段DNA存在及表达情况。流式细胞术和MTT法检测基因敲除细胞的细胞周期和生长速度。结果:筛选得到具有neo抗性的DNA polβ基因敲除Eca9706细胞,其基因组中DNA polβ基因区段已被敲除;RT-PCR和Western blot 检测不到DNA polβmRNA和蛋白表达。敲除DNA polβ基因的细胞生长速度缓慢,G2~M期细胞增多,S期细胞减少( t=3.882、3.869,P均<0.05)。结论:成功构建了食管癌Eca9706 DNA polβ基因敲除细胞模型。 展开更多
关键词 DNA聚合酶Β 基因敲除 食管癌 eca9706细胞
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食管癌Eca9706细胞中KRT19基因的甲基化及表达
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作者 岳冬丽 董文杰 +1 位作者 孙晓娟 樊青霞 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期866-869,共4页
背景与目的:KRT19基因位于17q21.2,编码CK19蛋白。KRT19基因启动子的甲基化在肾癌、神经母细胞瘤中已有报道,而在食管癌中鲜见相关报道。本文研究甲基转移酶抑制剂5-氮-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对食管癌Eca9706细胞株生长活性的影响... 背景与目的:KRT19基因位于17q21.2,编码CK19蛋白。KRT19基因启动子的甲基化在肾癌、神经母细胞瘤中已有报道,而在食管癌中鲜见相关报道。本文研究甲基转移酶抑制剂5-氮-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对食管癌Eca9706细胞株生长活性的影响,并探讨5-Aza-CdR对食管癌Eca9706细胞株KRT19基因甲基化及其表达的影响。方法:用MTT比色法检测不同浓度5-Aza-CdR处理前后Eca9706细胞的生长活性;用结合重亚硫酸盐的限制性内切酶法(combined bi sulfite restriction analysis,C0BRA)检测应用5-Aza-CdR后与未用药对照组细胞的的KRT19基因甲基化状态;用Western blot法检测应用5-Aza-CdR后与未用药对照组细胞的KRT19基因蛋白的表达情况。结果:5-Aza-CdR对食管癌Eca9706细胞系的增殖有抑制作用,且呈时间、浓度依赖性;食管癌Eca9706细胞株存在KRT19基因启动子区的甲基化;对照组无KRT19蛋白的表达,应用5-Aza-CdR后可以恢复其蛋白表达。结论:5-Aza-CdR抑制食管癌Eca9706细胞的增殖;5-Aza-CdR可以逆转KRT19基因启动子区的甲基化,恢复其蛋白表达,KRT19基因启动子区的甲基化可能是其失表达的重要机制。这为食管癌诊疗提供了一个新的靶点。 展开更多
关键词 食管癌 eca9706细胞 KRT19基因 结合重亚硫酸盐的限制性内切酶法 甲基化
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