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E2F-1在胃癌组织中的突变、表达及其意义 被引量:10
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作者 肖强 徐君毅 谢玉波 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期238-239,共2页
E2F-1是细胞周期相关性转录因子E2F家族八个成员之一,在细胞周期进展过程中具有重要的调节作用。有文献报道E2F-1在转基因动物的角质形成细胞中可引起成纤维母细胞转化为肿瘤细胞,林福地等。发现随着肺癌分期的提高E2F-1表达也增高。... E2F-1是细胞周期相关性转录因子E2F家族八个成员之一,在细胞周期进展过程中具有重要的调节作用。有文献报道E2F-1在转基因动物的角质形成细胞中可引起成纤维母细胞转化为肿瘤细胞,林福地等。发现随着肺癌分期的提高E2F-1表达也增高。本实验采用PCR-SSCP和免疫组织化学法,观察E2F-1在胃癌中的基因突变、表达情况,分析E2F-1在胃癌发生发展中的可能作用。 展开更多
关键词 e2f-1 PCR-SSCP 免疫组化 胃癌
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胃癌组织中c-met、e2f-1和Ki-67的表达 被引量:4
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作者 伍宏彪 张鹏 +3 位作者 李小强 吴巨钢 俞继卫 姜波健 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1482-1486,共5页
目的检测肝细胞生长因子受体c-met、转录因子e2f-1和Ki-67抗原在胃癌组织中的表达,探讨三者的相关性及与临床病理特征和预后的关系。方法免疫组织化学染色法检测86例胃癌患者手术标本中c-met、e2f-1和Ki-67的表达,单因素与多因素法分析... 目的检测肝细胞生长因子受体c-met、转录因子e2f-1和Ki-67抗原在胃癌组织中的表达,探讨三者的相关性及与临床病理特征和预后的关系。方法免疫组织化学染色法检测86例胃癌患者手术标本中c-met、e2f-1和Ki-67的表达,单因素与多因素法分析其与临床病理特征的关系及三者的相关性,Logrank检验分析其与患者预后的关系。结果c-met、e2f-1和Ki-67在胃癌组织中均广泛表达。c-met的高表达与Ki-67高表达、生存期较短、肿瘤位置较高、淋巴结转移率较高、累及淋巴站较远及TNM分期较晚有关(P<0.05);e2f-1的低表达与肿瘤直径较大、TNM分期较晚、浸润较深、淋巴结转移率较高、累及淋巴站较远有关(P<0.05)。多因素分析显示,浸润深度、累及淋巴站、TNM分期和Ki-67表达是c-met表达的独立相关因素,而年龄和生存期是e2f-1表达的独立相关因素。Logrank检验显示,与术后生存相关的因素有c-met、e2f-1和Ki-67表达、累及淋巴站、肿瘤直径、肿瘤位置、淋巴结转移率、浸润深度和TNM分期。结论c-met阳性表达的胃癌患者生存期显著缩短。e2f-1在早期胃癌中高表达,晚期胃癌的进展可能与e2f-1表达降低有关。 展开更多
关键词 胃癌 C-MeT e2f-1 KI-67 预后
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E2F-1基因沉默可增强人胃癌耐药细胞株SGC-7901/DDP对顺铂的敏感性 被引量:4
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作者 廉超 杨杰 +2 位作者 王晓通 谢玉波 肖强 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1727-1732,共6页
目的探讨E2F转录因子1(E2F transcription factor 1,E2F-1)基因沉默对人胃癌耐药细胞株SGC-7901/DDP对顺铂敏感性的影响及可能机制。方法将SGC-7901/DDP细胞接种于六孔板,分为3组:以E2F-1沉默重组慢病毒颗粒(Lv-shRNA-E2F-1)感染SGC-790... 目的探讨E2F转录因子1(E2F transcription factor 1,E2F-1)基因沉默对人胃癌耐药细胞株SGC-7901/DDP对顺铂敏感性的影响及可能机制。方法将SGC-7901/DDP细胞接种于六孔板,分为3组:以E2F-1沉默重组慢病毒颗粒(Lv-shRNA-E2F-1)感染SGC-7901/DDP,作为Lv-shRNA-E2F-1组;以阴性对照慢病毒颗粒(Lv-shRNA-NC)感染SGC-7901/DDP,作为Lv-shRNANC组;空白对照组不做任何处理。以MTT法测定转染后各组细胞对DDP的半数抑制浓度(IC50),并以AxnnexinV-PE/7-AAD双染色流式细胞术检测各组细胞凋亡率及周期分布。应用Western blot和半定量RT-PCR技术分别对各组细胞中E2F-1、survivin、Bcl-2的mRNA及蛋白水平进行检测。结果与Lv-shRNA-NC组和空白对照组相比,Lv-shRNA-E2F-1组细胞对顺铂的IC50显著降低,细胞凋亡率显著提高,细胞周期阻滞于G0/G1期,差别均有统计学意义(P<0.05);Lv-shRNA-E2F-1组E2F-1mRNA水平较Lv-shRNA-NC组和空白对照组分别下降45.0%和41.3%,蛋白水平分别下降66.7%和70.5%(均P<0.01);LvshRNA-E2F-1组survivin mRNA水平较Lv-shRNA-NC组和空白对照组分别下降30.3%和28.7%,蛋白水平分别下降56.5%和53.6%(均P<0.01);Lv-shRNA-E2F-1组Bcl-2 mRNA水平较Lv-shRNA-NC组和空白对照组分别下降76.6%和76.8%,蛋白水平分别下降74.6%和79.9%(均P<0.01);Lv-shRNA-NC组与空白对照组比较,上述指标差别均无统计学意义(均P>0.05)。结论:沉默E2F-1基因可有效提高人胃癌耐药细胞株SGC-7901/DDP对顺铂的敏感性,其机制可能与survivin及Bcl-2表达下调有关,提示E2F-1可能成为胃癌药物治疗的新靶点。 展开更多
关键词 e2f-1 胃癌 CISPLATIN 化疗敏感性 survivin Bcl-2
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芬太尼对胃癌MGC-803细胞E2F-1、p53基因表达的影响 被引量:5
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作者 廖淳杰 覃怡 +1 位作者 唐小曼 谢玉波 《临床麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期63-64,共2页
目的观察芬太尼对人胃癌MGC-803细胞生长增殖及E2F-1、p53基因表达的影响。方法芬太尼10-4μmol/L与胃癌MGC-803细胞共同孵育为芬太尼组,未加入芬太尼的胃癌MGC-803细胞孵育为对照组。7d后检测胃癌MGC-803细胞生长增殖的变化,观察细胞... 目的观察芬太尼对人胃癌MGC-803细胞生长增殖及E2F-1、p53基因表达的影响。方法芬太尼10-4μmol/L与胃癌MGC-803细胞共同孵育为芬太尼组,未加入芬太尼的胃癌MGC-803细胞孵育为对照组。7d后检测胃癌MGC-803细胞生长增殖的变化,观察细胞超微结构的变化,检测细胞E2F-1、p53基因的表达。结果与对照组相比,芬太尼组MGC-803细胞生长增殖缓慢,细胞克隆形成率更低(P<0.05);细胞胞质深染、细胞核固缩、染色质碎裂,出现明显的凋亡表现;细胞E2F-1基因表达增加、p53基因表达减少。结论 10-4μmol/L芬太尼可抑制胃癌MGC-803细胞的生长增殖,促进细胞的凋亡,并改变E2F-1、p53基因的表达。 展开更多
关键词 芬太尼 胃癌 e2f-1 P53
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E2F-1和survivin蛋白在非小细胞肺癌中的表达及其与HPV感染的相关性研究 被引量:15
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作者 孔令慧 吴翠环 +2 位作者 李莹 张明 张玉慧 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期81-85,共5页
背景与目的:人乳头状瘤病毒(human papillomavirus,HPV)与人类多种恶性肿瘤密切相关,而肺癌中亦有HPV的检出引起了众多学者的关注。本实验旨在研究非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中高危HPV感染情况及其与E2F-1和survi... 背景与目的:人乳头状瘤病毒(human papillomavirus,HPV)与人类多种恶性肿瘤密切相关,而肺癌中亦有HPV的检出引起了众多学者的关注。本实验旨在研究非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中高危HPV感染情况及其与E2F-1和survivin蛋白表达的关系,初步探讨HPV感染可能导致NSCLC发生、发展的分子机制。方法:特异型PCR检测47例NSCLC和13例肺良性病变组织中是否有HPV16、18DNA存在;免疫组化SP法检测E2F-1和survivin蛋白在肺病变组织中的表达。结果:NSCLC组HPV16、18DNA检出率为42.55%(20/47),明显高于肺良性病变组的7.69%(1/13,P<0.05)。NSCLC组中HPV的感染率与患者的吸烟史、组织学类型及分化程度有关(P<0.05),而与患者的年龄、性别及淋巴结转移无关(P>0.05)。NSCLC组中E2F-1蛋白表达阳性率为59.57%(28/47),其中64.29%(18/28)呈高表达,显著高于肺良性病变组23.08%(3/13,P<0.025)。NSCLC中survivin蛋白表达阳性率为61.70%(29/47),而肺良性病变组无表达。NSCLC组中E2F-1、survivin蛋白表达呈正相关(r=0.3151,P<0.05),且两者在HPV阳性组的阳性表达率分别为85.00%(17/20)和80.00%(16/20),均显著高于HPV阴性组的40.74%(11/27)和48.15%(13/27),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:HPV16、18感染在NSCLC的发生中可能有病因学意义,其致癌机制可能与E2F-1和survivin蛋白表达上调有关。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 人乳头状瘤病毒16、18 e2f-1 SURVIVIN 聚合酶链式反应 免疫组织化学
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E2F-1基因过表达影响胃癌MGC-803细胞对化疗药物敏感性的研究 被引量:3
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作者 钱倩 王长青 +2 位作者 李雷 谢玉波 肖强 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2009年第16期945-947,956,共4页
目的:构建E2F-1真核表达载体,建立稳定过表达E2F-l的胃癌细胞株,探讨E2F-l基因过表达对胃癌MCC-803细胞化疗敏感性的影响方法:应用Tri zol法从胃癌的癌组织中提取mRNA逆转录合成cDNA,按Gene-Bank公布的E2F-1基因序列设计带有酶切位点的... 目的:构建E2F-1真核表达载体,建立稳定过表达E2F-l的胃癌细胞株,探讨E2F-l基因过表达对胃癌MCC-803细胞化疗敏感性的影响方法:应用Tri zol法从胃癌的癌组织中提取mRNA逆转录合成cDNA,按Gene-Bank公布的E2F-1基因序列设计带有酶切位点的引物并行扩增获得E2F-1的ORF片段;然后经限制性内切酶EcoR l和Hind Ⅲ双酶切后将E2F-1定向克隆到真核表达载体pCMV-HA2中转化筛选用脂质体Lipofectamine2000将该载体转染MGC-803胃癌细胞,然后用含G418的培养基筛选获得具Genectin抗性的过表达E2F-1的胃癌细胞株实时定量PCR( real-time quantitative PCR)和蛋白印迹(Western blotting)技术检测MGC-803/E2F-1细胞内E2F-1表达情况四唑蓝(MTT)法检测MGC-803/E2 F-1组(实验组)、MGC-803/EV组(阴性对照组)和MCC-803组(未转染组)细胞对化疗药物的敏感性结果:重组载体pCMV-E2F-1-HA2经EcoR I和Hind Ⅲ双酶切后得到预期片段,测序结果与报道的E2F-1基因之0RF完全一致,证明目的基因已成功克隆入真核表达载体,获取具Genectin抗性的细胞克隆、并进行了扩增。RT-PCR和Western blotting实验证实重组载体pCMV-E2F-l-HA2成功转入胃癌细胞内,并稳定过表达E2F-1 MTT法检测发现,5-氟尿嘧啶(5-FL)、阿霉素(ADM)、丝裂霉素(MMC)对MGC-803/E2F、-1组细胞的抑制率分别为71.45%、74.03%、76.72%,均明显高于MGC-803/EV组(45.58%、53.69%、54.58%)和MGC-803组(53.70%、54.67%、55.05%) (P<0.05)结论:成功构建了真核表达载体pCMV-E2F-1-HA2,并建立了稳定过表达E2F-1的胃癌细胞株MGC-803/E2F-1。E2F-1过表达增强了胃癌细胞对化疗药物的敏感性。 展开更多
关键词 e2f-1 转染 MGC-803胃癌细胞 药敏试验
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转录因子E2F-1与垂体肿瘤转化基因(PTTG)在大鼠PRL瘤中的表达 被引量:3
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作者 程海梅 徐春 +1 位作者 杨雪梅 刘晓军 《中国比较医学杂志》 CAS 2011年第9期6-9,F0002,共5页
目的通过检测垂体肿瘤转化基因(PTTG)与腺病毒E2启动子结合因子1(E2F-1)在大鼠催乳素(PRL)瘤中的表达来探讨两者在PRL瘤发生发展过程中的作用。方法 40只大鼠随机分为两组:实验组(E组,n=20):皮下植入17β-雌二醇的方法诱发大鼠PRL瘤;对... 目的通过检测垂体肿瘤转化基因(PTTG)与腺病毒E2启动子结合因子1(E2F-1)在大鼠催乳素(PRL)瘤中的表达来探讨两者在PRL瘤发生发展过程中的作用。方法 40只大鼠随机分为两组:实验组(E组,n=20):皮下植入17β-雌二醇的方法诱发大鼠PRL瘤;对照组(C组,n=20):皮下植入空白硅胶管。雌激素诱导10周后处死大鼠,心脏穿刺取血,4%多聚甲醛体内灌流取出脑垂体,称重,ELISA方法检测两组大鼠血清PRL水平,垂体组织行病理组织学观察,免疫组化SP方法检测两组大鼠垂体组织中PTTG蛋白质、E2F-1蛋白质的表达。结果雌二醇作用10周后,据垂体重量、垂体组织学变化和血清PRL水平证实PRL瘤诱导成功。PRL瘤组中,PTTG蛋白质、E2F-1蛋白质均明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.01);且PTTG蛋白质和E2F-1蛋白质的表达呈明显正相关(γ=0.764,P<0.01)。结论 PTTG与E2F-1在大鼠PRL瘤中共同过度表达,参与了大鼠PRL瘤的发生发展。 展开更多
关键词 PTTG e2f-1 WISTAR大鼠 PRL瘤 免疫组化
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骨巨细胞瘤中Skp2、p27及E2F-1的表达及意义 被引量:3
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作者 李翀 李海 冯一中 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1202-1205,共4页
目的研究骨巨细胞瘤中Skp2(S期激酶相关蛋白2)、p27(周期素依赖性蛋白激酶抑制因子)及E2F-1(细胞周期相关性转录因子家族成员)的表达并探讨其与放射学分期、肿瘤复发等关系。方法运用免疫组化SP法检测44例骨巨细胞瘤中Skp2、p27及E2F-1... 目的研究骨巨细胞瘤中Skp2(S期激酶相关蛋白2)、p27(周期素依赖性蛋白激酶抑制因子)及E2F-1(细胞周期相关性转录因子家族成员)的表达并探讨其与放射学分期、肿瘤复发等关系。方法运用免疫组化SP法检测44例骨巨细胞瘤中Skp2、p27及E2F-1的表达情况。结果 Skp2、p27及E2F-1的阳性率分别为65.91%3、8.64%和63.64%,在影像学分期1型、2型3、型中的阳性率分别为50%、64.29%、100%(P<0.05),60%、28.57%、10%(P<0.05),50%、71.43%、80%(P>0.05)。Skp2、p27及E2F-1在复发组与未复发组的阳性率分别为91.67%、56.25%(P<0.05),8.33%、50%(P<0.05),75.00%、59.38%(P>0.05)。Skp2、骨皮质破坏或软组织浸润、手术方式以及p27对复发均有明显影响,其中前两者是骨巨细胞瘤复发的危险因素,后两者(截骨的手术方式、p27)则是骨巨细胞瘤复发的保护因素。Skp2与p27的表达呈负相关(P<0.05)。结论在骨巨细胞瘤中,Skp2与p27的表达均与骨巨细胞瘤的复发有关,二者在骨巨细胞瘤细胞的增殖过程中可能起重要作用。联合检测Skp2与p27可能作为骨巨细胞瘤侵袭状态、复发倾向的判断以及手术治疗方式选择的参考指标。 展开更多
关键词 骨巨细胞瘤 SKP2 P27 e2f-1 免疫组化
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系膜增生性肾炎肾组织E2F-1的表达及临床意义 被引量:2
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作者 何正宏 白云凯 陈西北 《实用医学杂志》 CAS 2008年第23期4046-4048,共3页
目的:探讨核转录因子-1(E2F-1)在系膜增生性肾炎(MsPGN)肾组织中的表达及其与肾固有细胞增生和临床的关系。方法:采用免疫组织化学法检测36例MsPGN患者(MsPGN组)肾活检组织E2F-1的表达,并将其与临床作相关性分析。肾外伤切除的正常肾组... 目的:探讨核转录因子-1(E2F-1)在系膜增生性肾炎(MsPGN)肾组织中的表达及其与肾固有细胞增生和临床的关系。方法:采用免疫组织化学法检测36例MsPGN患者(MsPGN组)肾活检组织E2F-1的表达,并将其与临床作相关性分析。肾外伤切除的正常肾组织6例作为正常对照组。结果:正常对照组肾小球未见E2F-1表达,肾小管间质见少许表达。MsPGN组肾小球和肾小管间质均有E2F-1表达,两组比较,具有显著统计学差异(P<0.01),轻、中、重度系膜增生组随系膜增生加剧E2F-1表达逐渐增强(P<0.05或P<0.01)。肾小球、肾小管间质E2F-1表达与未使用类固醇激素/免疫抑制剂、未使用血管紧张素转移酶抑制剂(ACEI)/血管紧张素受体拮抗剂(ARB)呈正相关;肾小球E2F-1表达与BP、24h尿蛋白(TMP)水平呈正相关,与内生肌酐清除率(Ccr)呈负相关;肾小管间质E2F-1表达与临床无相关性。肾小球与肾小管间质E2F-1表达无相关性。结论:E2F-1表达水平可反映MsPGN患者系膜细胞及小管间质的增生程度,也可间接反映BP、TMP及肾功能水平,药物可干预E2F-1的表达。 展开更多
关键词 肾小球肾炎 膜增生性核转录因子-1 e2f-1
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转录因子E2F-1的DNA结合结构域与GST的融合表达和纯化
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作者 姜勇 徐应琪 +2 位作者 涂晓明 陈妍 施蕴渝 《中国科学技术大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第6期669-673,共5页
通过聚合酶链式反应方法扩增转录因子E2F-1中DNA结合结构域的基因片段,并将其克隆到pGEX-2T表达载体中,转化BL21菌株.经IPTG诱导,目的蛋白在大肠杆菌中得到高效表达,其表达量达15%.经GST-Agar... 通过聚合酶链式反应方法扩增转录因子E2F-1中DNA结合结构域的基因片段,并将其克隆到pGEX-2T表达载体中,转化BL21菌株.经IPTG诱导,目的蛋白在大肠杆菌中得到高效表达,其表达量达15%.经GST-Agarose亲合层析,目的蛋白得到了高度纯化.经胶迁移率改变实验(gelshiftmobilityasay)证明目的蛋白具有与腺病毒E2启动子DNA片段结合的能力. 展开更多
关键词 转录因子 e2f-1 DNA结合结构域 GST 纯化
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E2F1与肿瘤代谢重编程的研究进展 被引量:7
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作者 徐梦婕 黄耀 +2 位作者 谢国然 陈晓婷 秦映芬 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2014年第23期3858-3860,共3页
细胞周期相关转录因子 E2F-1(E2F transcription factor 1)是细胞周期相关转录因子 E2F 家族成员之一, E2F1的活化可将信号传至核内,推动细胞周期由G1期进入到 S 期,是细胞周期进程中重要的转录因子。近年来研究发现,E2F1除调控... 细胞周期相关转录因子 E2F-1(E2F transcription factor 1)是细胞周期相关转录因子 E2F 家族成员之一, E2F1的活化可将信号传至核内,推动细胞周期由G1期进入到 S 期,是细胞周期进程中重要的转录因子。近年来研究发现,E2F1除调控细胞周期外也参与肿瘤细胞代谢重编程,在肿瘤的发生、发展中起到重要作用,本文综述了 E2F1与肿瘤代谢重编程特别是有氧糖酵解在肿瘤中的作用以及两者之间的关系的研究进展。 展开更多
关键词 肿瘤细胞代谢 e2F1 编程 细胞周期进程 相关转录因子 e2f-1 有氧糖酵解 家族成员
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