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DNA足纹步移作图法
1
作者
谭文斌
朱敏
+4 位作者
聂怡玲
罗赛群
成光杰
胡维新
彭兴华
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2001年第4期551-555,共5页
一种以PCR介导的、可对任意长度靶DNA片段上的核蛋白结合位点进行DNA足纹作图分析的新方法 .原理是 :采用被随机降解靶DNA分子作为模板 ,用标记的跨越整个模板的足够多条特异性引物进行单链扩增 .首先 ,利用某种化学试剂或酶如DNaseⅠ...
一种以PCR介导的、可对任意长度靶DNA片段上的核蛋白结合位点进行DNA足纹作图分析的新方法 .原理是 :采用被随机降解靶DNA分子作为模板 ,用标记的跨越整个模板的足够多条特异性引物进行单链扩增 .首先 ,利用某种化学试剂或酶如DNaseⅠ对已与蛋白质结合或未结合的双链靶DNA进行随机降解 ,在一定条件下使每一个DNA分子恰好只有一个位点被切割 .然后 ,这些被随机降解DNA分子即可作为模板 ,用同位素标记的跨越整个模板的足够多条特异性引物 (正向或反向 )进行单链扩增 .最后 ,扩增的单链产物通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和放射自显影形成DNA片段梯队 ,而被蛋白质保护的位点则在DNA片段梯队中形成位置缺口 ,从而确定DNA与蛋白质相结合的精确位点 .该方法被应用对人干细胞因子基因 5′旁侧 - 1190～ - 2
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关键词
dna足纹作图分析
聚合酶链式反应
人干细胞因子基因
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职称材料
题名
DNA足纹步移作图法
1
作者
谭文斌
朱敏
聂怡玲
罗赛群
成光杰
胡维新
彭兴华
机构
湖南医科大学分子生物学研究中心
出处
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2001年第4期551-555,共5页
基金
国家自然科学基金 (3 970 0 0 5 0及 3 990 0 15 9)项目 ~~
文摘
一种以PCR介导的、可对任意长度靶DNA片段上的核蛋白结合位点进行DNA足纹作图分析的新方法 .原理是 :采用被随机降解靶DNA分子作为模板 ,用标记的跨越整个模板的足够多条特异性引物进行单链扩增 .首先 ,利用某种化学试剂或酶如DNaseⅠ对已与蛋白质结合或未结合的双链靶DNA进行随机降解 ,在一定条件下使每一个DNA分子恰好只有一个位点被切割 .然后 ,这些被随机降解DNA分子即可作为模板 ,用同位素标记的跨越整个模板的足够多条特异性引物 (正向或反向 )进行单链扩增 .最后 ,扩增的单链产物通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和放射自显影形成DNA片段梯队 ,而被蛋白质保护的位点则在DNA片段梯队中形成位置缺口 ,从而确定DNA与蛋白质相结合的精确位点 .该方法被应用对人干细胞因子基因 5′旁侧 - 1190～ - 2
关键词
dna足纹作图分析
聚合酶链式反应
人干细胞因子基因
Keywords
dna
footprinting
PCR
human stem cell factor gene
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
DNA足纹步移作图法
谭文斌
朱敏
聂怡玲
罗赛群
成光杰
胡维新
彭兴华
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2001
0
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