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PI3K/Akt/FoxO3a信号通路对人鼻咽癌CNE-1、CNE-2细胞增殖及凋亡的影响 被引量:10
1
作者 邱权 叶琳 +2 位作者 皮静婷 陈黎黎 陈鸿雁 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1264-1267,共4页
目的探讨FoxO3a对体外培养的人鼻咽癌CNE-1、CNE-2细胞增殖及凋亡的影响是否是通过PI3K/Akt信号通路。方法通过使用LY294002特异性抑制PI3K的活性,免疫印迹法检测FoxO3a及p-Akt蛋白在人鼻咽癌CNE-1、CNE-2细胞的表达,免疫荧光化学检测Fo... 目的探讨FoxO3a对体外培养的人鼻咽癌CNE-1、CNE-2细胞增殖及凋亡的影响是否是通过PI3K/Akt信号通路。方法通过使用LY294002特异性抑制PI3K的活性,免疫印迹法检测FoxO3a及p-Akt蛋白在人鼻咽癌CNE-1、CNE-2细胞的表达,免疫荧光化学检测FoxO3a在鼻咽癌细胞中的亚细胞定位,实时荧光定量PCR检测FoxO3a的mRNA表达水平,MTT法检测鼻咽癌细胞的增殖抑制率,流式细胞术检测鼻咽癌细胞的凋亡率。结果通过使用PI3K特异性抑制剂LY294002,FoxO3a在实验组人鼻咽癌CNE-1、CNE-2细胞中的蛋白和mRNA表达水平均高于对照组(P<0.05),且在CNE-1(P=0.004)、CNE-2(P=0.001)细胞核内的表达量高于对照组,FoxO3a的上调可抑制人鼻咽癌CNE-1、CNE-2细胞的增殖(P<0.05),促进其凋亡(P<0.01)。结论通过抑制PI3K/Akt信号通路的活性可上调人鼻咽癌CNE-1、CNE-2细胞FoxO3a基因的表达,抑制细胞增殖并诱导细胞凋亡,其机制可能与其对FoxO3a的调控有关。 展开更多
关键词 FOXO3A PI3K AKT通路 人鼻咽癌 cne-1 cne-2 细胞增殖 细胞凋亡
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人鼻咽癌细胞株CNE-1放射生物学参数的测定 被引量:7
2
作者 李志强 方翼 +2 位作者 钟女奇 侯友贤 夏云飞 《实用医学杂志》 CAS 2001年第9期802-803,共2页
目的:测定人鼻咽癌细胞株CNE-1的各项放射生物学参数D0,Dq,n,α/β,SF2。方法:应用集落形成法检测人鼻咽癌细胞株CNE-1在不同放射剂量照射下的细胞存活率,通过单击多靶模型和线性二次模型拟合绘制细胞存活曲... 目的:测定人鼻咽癌细胞株CNE-1的各项放射生物学参数D0,Dq,n,α/β,SF2。方法:应用集落形成法检测人鼻咽癌细胞株CNE-1在不同放射剂量照射下的细胞存活率,通过单击多靶模型和线性二次模型拟合绘制细胞存活曲线,求出D0,Dq,n,α/β比值,以及SF2等放射生物学参数。结果:(1)由单击多靶模型求出D0=0.84Gy,Dq=2.19 Gy,n=13.57,SF2=0.732;(2)曲线性=次模型求出α=0.260 GY-1,β=0.075 Gy-2,α/β=3.44 Gy,SF2=0.44。结论:人鼻咽癌细胞株CNE-1 D0值及 SF2值较大,其对放疗相对不敏感。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 细胞分化 细胞系 cne-1 放射生物学参数 测定 鼻咽癌
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人鼻咽癌细胞系HONE1的蛋白质双向凝胶电泳分析 被引量:9
3
作者 李峰 关勇军 +4 位作者 谢锦云 何春梅 陈平 陈主初 梁宋平 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2001年第4期294-298,共5页
目的 :研究人鼻咽癌细胞系HONE1的蛋白质表达特征。方法 :抽提鼻咽癌细胞系HONE1总蛋白 ,双向凝胶电泳 (2 DE)分离、银染显色 ,用凝胶成像仪和PDQUEST软件获取HONE1总蛋白的 2 DE图像 ;根据获得的 2 DE凝胶图像 ,从胶上切取分辨良好... 目的 :研究人鼻咽癌细胞系HONE1的蛋白质表达特征。方法 :抽提鼻咽癌细胞系HONE1总蛋白 ,双向凝胶电泳 (2 DE)分离、银染显色 ,用凝胶成像仪和PDQUEST软件获取HONE1总蛋白的 2 DE图像 ;根据获得的 2 DE凝胶图像 ,从胶上切取分辨良好、染色较浓的蛋白质点 ,用胰蛋白酶原位水解 ,所获酶解肽段经基质辅助激光解吸飞行时间质谱 (MALDI TOF MS)测定Mr;以测得的肽段Mr为肽质量指纹 (PMF) ,通过PepIdent软件搜索SWISS PROT和TrEMBL数据库而识别该点对应的蛋白质。结果 :建立了双向凝胶电泳分离总蛋白、质谱鉴定银染蛋白质点的方法 ,并鉴定出人鼻咽癌细胞系HONE1中表达较强的 10个点相应的蛋白质。结论 :本研究为建立人鼻咽癌细胞HONE1的 2 DE参考图和蛋白质数据库提供了有用的基础性研究资料 ,为进一步识别鼻咽癌特异性的蛋白质奠定了实验基础。 展开更多
关键词 鼻咽癌 细胞系 双向凝胶电泳 蛋白质 鉴定 HONE1
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鼻咽癌低分化细胞系CNE-2双向凝胶电泳图谱的建立 被引量:4
4
作者 杨海燕 肖志强 +3 位作者 李峰 余艳辉 张鹏飞 陈主初 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期123-128,共6页
目的 :建立人鼻咽癌低分化细胞系CNE 2双向凝胶电泳图谱 ,初步分析其蛋白质表达情况。方法 :采用双向凝胶电泳 (2 DE)分离人鼻咽癌低分化细胞系CNE 2总蛋白 ,银染显色 ,ImageMaster图象分析系统分析 ,从胶中选取分离较好的蛋白质点 ,... 目的 :建立人鼻咽癌低分化细胞系CNE 2双向凝胶电泳图谱 ,初步分析其蛋白质表达情况。方法 :采用双向凝胶电泳 (2 DE)分离人鼻咽癌低分化细胞系CNE 2总蛋白 ,银染显色 ,ImageMaster图象分析系统分析 ,从胶中选取分离较好的蛋白质点 ,基质辅助激光解析电离飞行时间质谱 (MALDI TOF MS)分析获取肽质量指纹图谱(PMF) ,Mascot软件搜索MSDB和SWISS PROT数据库鉴定蛋白质。结果 :获得重复性和分辨率较好的CNE 2双向凝胶电泳图谱 ;质谱分析了 78个蛋白质点 ,获取 77张肽质量指纹图谱 ,通过查询数据库鉴定了 4 8个蛋白质。结论 :建立了人鼻咽癌低分化细胞系CNE 2双向凝胶电泳图谱 ,并应用质谱技术鉴定了部分蛋白质点 。 展开更多
关键词 鼻咽癌 cne-2细胞系 双向凝胶电泳图谱 质谱技术 蛋白质组
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E1B缺陷腺病毒对鼻咽癌CNE-2细胞杀伤作用及其机理研究 被引量:2
5
作者 刘然义 罗慧玲 +6 位作者 彭吉林 蔡体育 张昌卿 潘伟光 吴沛宏 黄文林 曾益新 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2002年第1期6-9,共4页
目的 :研究E1B缺陷腺病毒dl15 2 0对鼻咽癌CNE 2细胞的杀伤作用及其作用机理。方法 :用MTT法和细胞病变试验 (CPE)测量dl15 2 0在体外对CNE 2细胞的抑制和杀伤作用 ,并通过测定病毒在CNE 2细胞中的复制产量和DAPI染色试验探讨其杀伤机... 目的 :研究E1B缺陷腺病毒dl15 2 0对鼻咽癌CNE 2细胞的杀伤作用及其作用机理。方法 :用MTT法和细胞病变试验 (CPE)测量dl15 2 0在体外对CNE 2细胞的抑制和杀伤作用 ,并通过测定病毒在CNE 2细胞中的复制产量和DAPI染色试验探讨其杀伤机理 ;瘤内注射dl15 2 0 ,观察其对CNE 2裸鼠移植瘤的治疗效果 ,用免疫织化方法检测肿瘤组织中病毒的复制。结果 :体外实验结果显示 :dl15 2 0能在CNE 2细胞中复制 ,导致明显的细胞病变 ,显著抑制CNE 2细胞的生长 ,在病变细胞中可见明显的核膨胀 ;瘤内注射dl15 2 0能明显抑制裸鼠移植瘤的生长 ,在肿瘤组织中可检测到病毒复制。结论 :dl15 2 0能在CNE 2细胞中复制并使之裂解 ,从而在体内外有效地抑制和杀伤CNE 2细胞。 展开更多
关键词 E1B缺陷腺病毒 鼻咽癌 cne-2细胞 杀伤作用 基因治疗
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BCSC-1基因异位表达致鼻咽癌细胞CNE-2L2黏附性增强及细胞周期阻滞 被引量:3
6
作者 陈双玲 周异群 +3 位作者 田云 鞠吉雨 刘音 朱立平 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期533-537,共5页
目的探讨BCSC-1基因异位表达导致人鼻咽癌细胞CNE-2L2恶性行为减弱的机制。方法采用碘化丙啶染色DNA,流式细胞法检测细胞周期;Hoechest33258染色分析细胞分裂情况;细胞聚集实验检测细胞的黏附性;Western印迹分别检测E-钙黏蛋白、α-cate... 目的探讨BCSC-1基因异位表达导致人鼻咽癌细胞CNE-2L2恶性行为减弱的机制。方法采用碘化丙啶染色DNA,流式细胞法检测细胞周期;Hoechest33258染色分析细胞分裂情况;细胞聚集实验检测细胞的黏附性;Western印迹分别检测E-钙黏蛋白、α-catenin和p53的表达。结果细胞周期分析显示异位表达BCSC-1的CNE-2L2细胞、野生型CNE-2L2细胞和转染空载体的CNE-2L2细胞分别有55.1%、43.4%和39.4%处于G0/G1期,分别有25.2%、28.7%和30.9%处于S期,分别有19.7%、27.9%和29.7%处于G2/M期。野生型CNE-2L2细胞和转染空载体的CNE-2L2细胞有较多细胞处于有丝分裂相,异位表达BCSC-1的CNE-2L2细胞几乎见不到有丝分裂相。异位表达BCSC-1的CNE-2L2细胞的黏附性和E-钙黏蛋白、α-catenin及p53的表达水平均高于野生型CNE-2L2细胞和转染空载体的CNE-2L2细胞。结论异位表达BCSC-1的CNE-2L2细胞的黏附性增强可能与E-钙黏蛋白和α-catenin表达增强相关;异位表达BCSC-1的CNE-2L2细胞阻滞于G1期可能与p53表达增加相关。这些变化可能在细胞恶性行为减弱中发挥作用。 展开更多
关键词 人鼻咽癌细胞cne-2L2 BCSC-1基因 黏附性 细胞周期 E-钙黏蛋白 Α-CATENIN p53
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二甲双胍抑制鼻咽癌细胞CNE-1增殖并诱导其凋亡的作用机制 被引量:3
7
作者 汤燕琴 胡兵 +4 位作者 余杰情 范立 樊欣 陈剑飞 张志远 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2019年第9期926-930,共5页
目的二甲双胍可抑制鼻咽癌细胞的增殖,但作用机制尚不清楚。文章研究二甲双胍对鼻咽癌细胞CNE-1增殖与凋亡的效应,并探讨miR-let-7a、IGF-1R在其中的作用。方法分别以不同浓度二甲双胍(0、5、10、20、40、80mmol/L)干预鼻咽癌细胞CNE-1... 目的二甲双胍可抑制鼻咽癌细胞的增殖,但作用机制尚不清楚。文章研究二甲双胍对鼻咽癌细胞CNE-1增殖与凋亡的效应,并探讨miR-let-7a、IGF-1R在其中的作用。方法分别以不同浓度二甲双胍(0、5、10、20、40、80mmol/L)干预鼻咽癌细胞CNE-124h后,采用CCK8法检测细胞增殖活性;流式细胞仪技术分析细胞凋亡率;实时荧光定量PCR(qPCR)检测bcl-2、bax、IGF-1RmRNA表达水平,miR-let-7a的表达水平;Westernblot方法检测IGF-1R蛋白的表达。结果CCK8结果显示,各浓度组二甲双胍处理细胞24h后,二甲双胍可抑制CNE-1细胞的增殖活性,随药物浓度增高抑制作用呈增强趋势,差异均有统计学意义(P<0.05)。流式细胞仪凋亡分析结果显示,0、5、10、20、40mmol/L二甲双胍处理后总凋亡率分别为(6.17±0.74)%、(8.11±1.29)%、(11.97±3.82)%、(13.94±2.98)%、(24.2±2.79)%;与0mmol/L二甲双胍处理比较相比,10、20、40mmol/L二甲双胍处理后凋亡率随浓度升高而呈上升趋势(P<0.05)。qPCR结果显示,0、5、10、20mmol/L浓度二甲双胍作用后24h后,CNE-1细胞的bcl-2、bcl-2/bax、IGF-1R、miR-let-7amRNA表达水平随二甲双胍浓度增加而逐渐下调,而bax基因表达水平则上调,与0mmol/L二甲双胍作用后相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论二甲双胍有抑制鼻咽癌细胞CNE-1增殖并诱导其凋亡的作用,其机制可能与miR-let-7a表达上调、IGF-1R表达下调有关。 展开更多
关键词 鼻咽癌细胞cne-1 二甲双胍 增殖 凋亡 miR-let-7a 胰岛素样生长因子1受体
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山奈酚对CNE-2细胞周期及CyclinB1、Cdk1mRNA表达的影响 被引量:4
8
作者 陈育华 吴国才 +1 位作者 王珍 周碧云 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2012年第5期616-619,共4页
目的:观察山奈酚对鼻咽癌CNE-2细胞周期分布及细胞周期素B1(CyclinB1)、细胞周期依赖性蛋白激酶1(Cdk1)表达的影响。方法:分别用0、20、40、60、80和100μmol/L的山奈酚处理CNE-2细胞。处理24、48和72h后,应用MTT法测定CNE-2细胞活力;处... 目的:观察山奈酚对鼻咽癌CNE-2细胞周期分布及细胞周期素B1(CyclinB1)、细胞周期依赖性蛋白激酶1(Cdk1)表达的影响。方法:分别用0、20、40、60、80和100μmol/L的山奈酚处理CNE-2细胞。处理24、48和72h后,应用MTT法测定CNE-2细胞活力;处理24和48h后用流式细胞术检测细胞周期;处理24h后用RT-PCR技术检测细胞CyclinB1及Cdk1mRNA的表达水平。结果:随山奈酚作用剂量的增加和作用时间的延长,CNE-2细胞活力逐渐降低(F浓度=385.194,F时间=237.324,F浓度×时间=13.757,P<0.001),细胞被阻滞于G2/M期(P<0.05);CNE-2细胞中CyclinB1和Cdk1mRNA的表达量随山奈酚作用浓度的增加而逐渐降低(F=95.682、154.871,P<0.001)。结论:山奈酚可能通过下调CNE-2细胞CyclinB1和Cdk1mRNA的表达水平,诱导G2/M期阻滞,抑制其增殖。 展开更多
关键词 山奈酚 cne-2细胞 细胞周期 CDK1 CYCLINB1 鼻咽癌
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转酮酶样蛋白1在人类鼻咽癌细胞生长增殖中的作用
9
作者 张松 杨菊红 +1 位作者 孔维佳 孙宇 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期505-509,共5页
目的:探讨转酮酶样蛋白1(TKTL1)在体外培养的人类鼻咽癌细胞生长增殖中的作用。方法:构建针对TKTL1 mRNA的干扰RNA质粒,转染人类鼻咽癌细胞(CNE细胞系);检测转染前后CNE细胞中转酮酶活性的变化;实时定量RT-PCR检测转染前后CNE细胞转酮... 目的:探讨转酮酶样蛋白1(TKTL1)在体外培养的人类鼻咽癌细胞生长增殖中的作用。方法:构建针对TKTL1 mRNA的干扰RNA质粒,转染人类鼻咽癌细胞(CNE细胞系);检测转染前后CNE细胞中转酮酶活性的变化;实时定量RT-PCR检测转染前后CNE细胞转酮酶基因家族(TKT、TKTL1、TKTL2)mRNA表达水平的变化;通过流式细胞术和MTT实验检测转染前后CNE细胞增殖和细胞周期的改变。结果:实验组CNE细胞中转酮酶活性(携带有pEGFP-C1-U6/TKTL1)明显低于质粒对照组(携带有pEGFP-C1-U6/UC)和空白对照组(未转染细胞);实时定量RT-PCR结果显示转染前后CNE细胞中TKT和TKTL2 mRNA的表达水平均无显著差异。然而,实验组细胞中TKTL1的表达水平明显低于对照组,且实验组CNE细胞增殖明显被抑制,癌细胞被阻滞在G0/G1期。结论:转酮酶蛋白TKTL1在人类鼻咽癌细胞的生长增殖中起重要作用,TKTL1可能成为肿瘤治疗研究的新靶点。 展开更多
关键词 转酮酶样蛋白1 鼻咽肿瘤 鼻咽癌细胞系 细胞周期
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AMIGO2通过激活PI3K/AKT/mTOR信号通路促进鼻咽癌细胞的增殖
10
作者 叶旺忠 许元基 +6 位作者 叶韵斌 黄心怡 刘枋 李洁羽 林智忠 柏朋刚 陈传本 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期1093-1099,共7页
目的:探讨Ig样结构域2黏附分子(adhesion molecule with Ig like domain 2,AMIGO2)在鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)细胞增殖中的作用及其机制。方法:选用2017年9月至11月福建省肿瘤医院收集的10例NPC组织和10例正常鼻咽黏膜上... 目的:探讨Ig样结构域2黏附分子(adhesion molecule with Ig like domain 2,AMIGO2)在鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)细胞增殖中的作用及其机制。方法:选用2017年9月至11月福建省肿瘤医院收集的10例NPC组织和10例正常鼻咽黏膜上皮组织标本,以及NPC细胞系CNE-1、CNE-2、SUNE-1、6-10B、C666-1和人永生化鼻咽黏膜上皮细胞株NP69,用qPCR法检测NPC组织和细胞中AMIGO2 mRNA的表达。构建慢病毒载体干扰AMIGO2表达,用qPCR法验证其干扰效率;用CCK-8法、克隆形成及流式细胞术检测干扰AMIGO2表达对NPC细胞增殖、克隆形成和凋亡的影响,用Western blotting检测干扰AMIGO2表达对NPC细胞增殖及PI3K/AKT/mTOR信号通路相关标志蛋白表达的影响。结果:AMIGO2在NPC组织和CNE-2和SUNE-1细胞中高表达(均P<0.01)。慢病毒AMIGO2感染后,CNE-2和SUNE-1细胞的AMIGO2干扰效率均达50%以上。干扰AMIGO2表达,显著降低CNE-2和SUNE-1细胞增殖及克隆形成能力(均P<0.01)、明显提高细胞的凋亡率(均P<0.01);降低SUNE-1细胞中PI3K、AKT和mTOR磷酸化蛋白的表达水平(均P<0.01)、下调survivin和PCNA蛋白的表达水平(均P<0.01)。结论:AMIGO2通过激活PI3K/AKT/mTOR信号通路促进NPC细胞增殖并抑制其凋亡,提示AMIGO2可能是NPC治疗的潜在靶点。 展开更多
关键词 Ig样结构域2黏附分子 鼻咽癌 SUNE-1细胞 cne-2细胞 增殖 凋亡 信号通路
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SAPK/JNK信号通路在鼻咽癌放疗群集耐受中的作用研究 被引量:3
11
作者 栾巍 黄海辉 梁后杰 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第21期2177-2179,共3页
目的用CNE-2Z多细胞球(multicellular spheroids,MCSs)模拟实体瘤,探讨SAPK/JNK信号通路在鼻咽癌放疗群集耐受中的作用。方法采用liquid overlay技术进行MCSs培养,Western blot法检测X射线照射后信号通路活性变化,SAPK/JNK信号通路特异... 目的用CNE-2Z多细胞球(multicellular spheroids,MCSs)模拟实体瘤,探讨SAPK/JNK信号通路在鼻咽癌放疗群集耐受中的作用。方法采用liquid overlay技术进行MCSs培养,Western blot法检测X射线照射后信号通路活性变化,SAPK/JNK信号通路特异阻断剂sp-600125作用前后Caspase-3蛋白表达变化;TUNEL法检测sp-600125作用前后、X射线照射后MCSs凋亡率变化。结果X射线照射后MCSs中SAPK/JNK信号通路表现动态磷酸化过程,其中2h磷酸化水平最高;预先阻断信号通路X射线照射后,细胞凋亡率上调(P<0.05),caspase-3蛋白表达增高(P<0.05)。结论SAPK/JNK信号通路短暂激活可能传递生存信号而在鼻咽癌放疗群集耐受中发挥作用,特异性阻断其信号传递上调MCSs凋亡率,这可能与促进caspase-3蛋白表达有关。 展开更多
关键词 人鼻咽癌细胞系cne-2Z 细胞凋亡 SAPK/JNK信号通道 sp-600125
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胰岛素和表皮生长因子刺激引起的蛋白激酶B磷酸化与PTEN突变的关系 被引量:3
12
作者 钟海兰 胡先福 林建华 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1065-1068,1072,共5页
目的研究第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)突变对人鼻咽癌细胞系CNE-1中蛋白激酶B(Akt)的磷酸化的影响。方法 CNE-1细胞用含100 m L/L胎牛血清RPMI1640培养基培养,并分别转染野生型PTEN(wt PTEN)质粒、突变型PTEN C124... 目的研究第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)突变对人鼻咽癌细胞系CNE-1中蛋白激酶B(Akt)的磷酸化的影响。方法 CNE-1细胞用含100 m L/L胎牛血清RPMI1640培养基培养,并分别转染野生型PTEN(wt PTEN)质粒、突变型PTEN C124S质粒和突变型PTEN G129E质粒。各组细胞加刺激前用无血清RPMI1640培养基饥饿过夜,用0.15 IU/m L胰岛素或0.3μg/m L重组人表皮生长因子(rh EGF)刺激,Western blot法检测Akt的磷酸化水平。结果胰岛素和rh EGF刺激均可导致CNE-1细胞Akt信号激活;wt PTEN可抑制胰岛素或rh EGF刺激引起的Akt信号激活;PTEN C124S突变体可激活胰岛素刺激引起的Akt信号,但不可激活rh EGF刺激引起的Akt信号;PTEN G129E突变体抑制胰岛素刺激引起的Akt信号激活。结论 wt PTEN可抑制胰岛素或rh EGF刺激引起的Akt信号激活,但PTEN C124S和G129E突变体不能一致性激活Akt信号表达。这表明PTEN基因突变可能与Akt信号表达无关。 展开更多
关键词 10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN) 基因突变 蛋白激酶B(Akt)磷酸化 胰岛素 重组人表皮生长因子(rhEGF) cne-1人鼻咽癌细胞系
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