Tenebrio molitor抗冻蛋白基因家族cDNA片段的克隆、序列分析及原核表达 被引量：9

1

作者 刘忠渊 王芸 +3 位作者 吕国栋 王贤磊 张富春 马纪 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1532-1540,共9页

利用反转录-多聚酶链式反应(RT-PCR)的方法,克隆黄粉甲虫(Tenebriomolitor)抗冻蛋白基因cDNA片段并进行序列分析和原核表达。同源性分析表明,获得9条新cDNA片段,与黄粉甲虫抗冻蛋白基因家族的其他基因序列具有较高的同源性。重组质粒pGE... 利用反转录-多聚酶链式反应(RT-PCR)的方法,克隆黄粉甲虫(Tenebriomolitor)抗冻蛋白基因cDNA片段并进行序列分析和原核表达。同源性分析表明,获得9条新cDNA片段,与黄粉甲虫抗冻蛋白基因家族的其他基因序列具有较高的同源性。重组质粒pGEX-4T-1-tmafp-XJ430,转化E.coliBL21进行原核表达,SDS-PAGE分析结果表明,抗冻蛋白基因以可溶性融合蛋白表达,相对分子量为38kDa。构建真核表达载体pCDNA3-tmafp-XJ430,免疫小鼠,获得的抗血清滴度为1:2000。Westernblotting结果为单一的条带,证明该抗血清具有针对抗冻蛋白TmAFP-XJ430抗原的专一性。 展开更多

关键词 黄粉甲虫 抗冻蛋白 cdna片段 序列分析 原核表达

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小菜蛾烟碱型乙酰胆碱受体α亚基cDNA片段的克隆和序列分析 被引量：8

2

作者 韩招久 韩召军 +2 位作者 李凤良 李忠英 陈之浩 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期29-32,共4页

利用简并引物 ,采用PCR等分子生物学技术 ,对小菜蛾烟碱型乙酰胆碱受体 (nAChR)α亚基的cDNA片段进行克隆 ,并对序列进行分析。测序结果显示 ,扩增的目的基因片段包含了nAChRα亚基的 3种亚型 (分别命名为Pxαl、Pxα2、Pxα3) ,都具有... 利用简并引物 ,采用PCR等分子生物学技术 ,对小菜蛾烟碱型乙酰胆碱受体 (nAChR)α亚基的cDNA片段进行克隆 ,并对序列进行分析。测序结果显示 ,扩增的目的基因片段包含了nAChRα亚基的 3种亚型 (分别命名为Pxαl、Pxα2、Pxα3) ,都具有典型的α亚基的结构 :2个相邻的半胱氨酸 ,由 2个半胱氨酸之间二硫键形成包含 15个氨基酸的胞外环 ,与烟碱和α银环蛇毒素结合有关的氨基酸残基。克隆的基因片段在氨基酸序列上和其他昆虫nAChRα亚基基因之间有高达 6 5 %～ 99%的同源性 ,表明克隆的cDNA片段是小菜蛾nAChRα亚基基因的部分序列。 展开更多

关键词 小菜蛾 烟碱型 乙酰胆碱受体 Α亚基 cdna片段 克隆 序列分析

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SSH法获取水稻矮化突变体相关的cDNA片段 被引量：7

3

作者 王永胜 王景 +2 位作者 李发强 刘筱斌 刘良式 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2001年第5期20-24,共5页

利用抑制性消减杂交 (Suppressivesubtractionhybridization ,SSH)分离水稻矮化突变体dwarf69与其野生型对照品系特光矮 2 (Oryzasativa ,TGA 2indica)间表达有差异的cDNA片段。分别以dwarf69作为驱赶子 ,TGA 2为检测子 ,以及以dwarf69... 利用抑制性消减杂交 (Suppressivesubtractionhybridization ,SSH)分离水稻矮化突变体dwarf69与其野生型对照品系特光矮 2 (Oryzasativa ,TGA 2indica)间表达有差异的cDNA片段。分别以dwarf69作为驱赶子 ,TGA 2为检测子 ,以及以dwarf69作为检测子 ,TGA 2为驱赶子建立了两个差异表达cDNA文库 ,分别代表在TGA 2和dwarf69特异表达的cDNA。经反式Northern检测这两个文库共得到 1 0个阳性克隆。序列分析表明有两个序列为水稻中首次报道 ,一个序列有相应的基因组序列报道 ,但其cDNA序列是首次报道。 展开更多

关键词 抑制性消减杂交 SSH 矮化突变体 反式Northern cdna片段 水稻

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小菜蛾乙酰胆碱酯酶cDNA片段的克隆和序列分析 被引量：6

4

作者 王建军 韩召军 王荫长 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期544-547,共4页

利用反转录 多聚酶链式反应 (RT PCR)的方法对小菜蛾Plutellaxylostella的乙酰胆碱酯酶基因cDNA片段进行了克隆和序列分析。通过简并性上游引物和下游引物扩增出了小菜蛾乙酰胆碱酯酶基因 2 81bp的cDNA片段。同源性分析表明 ,该cDNA片... 利用反转录 多聚酶链式反应 (RT PCR)的方法对小菜蛾Plutellaxylostella的乙酰胆碱酯酶基因cDNA片段进行了克隆和序列分析。通过简并性上游引物和下游引物扩增出了小菜蛾乙酰胆碱酯酶基因 2 81bp的cDNA片段。同源性分析表明 ,该cDNA片段与其它昆虫乙酰胆碱酯酶基因序列具有较高的同源性。 展开更多

关键词 小菜蛾 乙酰胆碱酯酶 cdna片段 克隆 序列分析

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糖尿病性高血压大鼠肾损害相关基因cDNA片段的克隆与初步鉴定 被引量：4

5

作者 张芳林 李果 +6 位作者 叶传忠 丁伟 刘优萍 谢超 张迪 孙卫华 罗敏 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第1期94-99,共6页

为筛选大鼠糖尿病性高血压病所致的肾损害相关基因 ,自发性高血压大鼠以STZ 5 0mg/kg一次性尾静脉注射 ,建立糖尿病性高血压大鼠模型 ,4周后该模型大鼠尿蛋白持续阳性 ,电镜观察到肾小球基质增生、足突融合或扁平 .应用荧光标记的差异... 为筛选大鼠糖尿病性高血压病所致的肾损害相关基因 ,自发性高血压大鼠以STZ 5 0mg/kg一次性尾静脉注射 ,建立糖尿病性高血压大鼠模型 ,4周后该模型大鼠尿蛋白持续阳性 ,电镜观察到肾小球基质增生、足突融合或扁平 .应用荧光标记的差异显示反转录聚合酶链反应 (DDRT PCR)及RNA印迹技术 ,比较两种模型大鼠肾皮质的基因表达差异 ,并进行差异条带的cDNA序列生物信息学分析 .其中 4个差异条带与Genbank数据库比较 ,2个为未知基因 ,2个为已知基因 ,即成淀粉样糖蛋白 (amyloidogenicglycoprotein ,AGG)、CDK10 9,两者可能与糖尿病性高血压肾损害的发生相关 ,对它们的进一步研究将为肾损害发病机理的发现提供思路 . 展开更多

关键词 差异显示 糖尿病性高血压 肾损害 生物信息学 相关基因 cdna片段 克隆

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水稻矮化突变体差异表达cDNA片段的克隆与分析 被引量：3

6

作者 王永胜 王景 +2 位作者 李发强 刘筱斌 刘良式 《中山大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期59-62,共4页

利用抑制性消减杂交 (Suppressivesubtractionhybridization ,SSH)分离本实验室获得的一株水稻矮化突变体dwarf6 9与其野生型对照品系特光矮_2 (Oryzasativa ,TGA_2indica)间表达有差异的cDNA片段 .分别以dwarf6 9作为驱赶子 ,TGA_2为... 利用抑制性消减杂交 (Suppressivesubtractionhybridization ,SSH)分离本实验室获得的一株水稻矮化突变体dwarf6 9与其野生型对照品系特光矮_2 (Oryzasativa ,TGA_2indica)间表达有差异的cDNA片段 .分别以dwarf6 9作为驱赶子 ,TGA_2为检测子 ,以及以dwarf6 9作为检测子 ,TGA_2为驱赶子建立了两个差异表达cDNA文库 ,分别代表在TGA_2和dwarf6 9中特异表达的cDNA .经反式Northern检测这两个文库共得到 展开更多

关键词 抑制性消减杂交 矮化突变体 反式Northern 水稻 cdna片段 表达 克隆

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黑曲霉木聚糖酶和β-葡聚糖酶cDNA片段克隆和序列分析 被引量：4

7

作者 孙建义 李卫芬 +1 位作者 顾赛红 许梓荣 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期352-354,共3页

关键词 黑曲霉木聚糖酶 Β-葡聚糖酶 cdna片段 克隆 序列分析 造纸工业

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胃癌相关cDNA片段的快速克隆和表达分析 被引量：3

8

作者 李红 王孟薇 +3 位作者 王刚石 陈润生 凌伦奖 王金华 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第4期604-609,共6页

利用差异显示PCR技术获得的一条在胃癌和正常组织有差异表达的表达序列标签 (EST) W 12 3(GenBank登录号为AF15 0 6 31) ,通过与GenBank的dbest库进行电子杂交 ,选取了与其同源度高的若干EST ,在它们共有的保守序列设计了用于扩增的寡... 利用差异显示PCR技术获得的一条在胃癌和正常组织有差异表达的表达序列标签 (EST) W 12 3(GenBank登录号为AF15 0 6 31) ,通过与GenBank的dbest库进行电子杂交 ,选取了与其同源度高的若干EST ,在它们共有的保守序列设计了用于扩增的寡聚核苷酸引物 ,利用cDNA末端快速扩增PCR (RACE)技术得到了7条带有 polyA尾的 3′EST ,进行序列分析后 ,发现它们均是代表新基因或不同剪接体的EST ,且具有共同的保守序列 ,已登录GenBank .采用RNA印迹对目的序列进行初步鉴定 ,并进行了这些基因的组织分布分析 .RACE技术和生物信息学相结合 ,具有快速、高效的特点 ,有助于疾病相关基因的克隆 . 展开更多

关键词 胃癌相关cdna片段 快速克隆 表达分析

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鼠牙乳头细胞核心结合因子cDNA片段的克隆与序列测定 被引量：3

9

作者 郭红延 吴补领 +2 位作者 郭希民 陆怀秀 余擎 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第11期1309-1311,共3页

目的　从培养的大鼠牙乳头细胞中克隆核心结合因子 (cbfa1)的cDNA片段。方法　原代培养大鼠牙乳头细胞 ,提取培养细胞的总RNA ,逆转录合成cDNA ,用PCR的方法扩增cbfa1基因片段。将获得的预期大小的PCR产物插入pUC18克隆载体中 ,转化TOP1... 目的　从培养的大鼠牙乳头细胞中克隆核心结合因子 (cbfa1)的cDNA片段。方法　原代培养大鼠牙乳头细胞 ,提取培养细胞的总RNA ,逆转录合成cDNA ,用PCR的方法扩增cbfa1基因片段。将获得的预期大小的PCR产物插入pUC18克隆载体中 ,转化TOP10感受态细胞 ,蓝白筛选白色克隆 ,进行体外扩增 ,提取质粒进行酶切鉴定 ,含目的插段的克隆在PE317 A自动测序仪上进行序列测定。结果　从培养的鼠牙乳头细胞提取的总RNA中成功克隆出 6 91bpcbfa1基因片段 ,测序结果和GenBank报道序列完全一致。结论　从鼠牙乳头细胞中成功克隆到cbfa1基因片段 ,确切的证实了核心结合因子 (cbfa1)基因在鼠牙乳头细胞中的表达。 展开更多

关键词 鼠牙乳头细胞 核心结合因子 cdna片段 基因表达 成骨细胞转录因子

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调节破骨细胞分化的RANK特异性cDNA片段的研究 被引量：3

10

作者 许多荣 罗绍凯 +3 位作者 苏畅 方荸荠 黄珊 李娟 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期1-5,共5页

【目的】在生理条件下寻找调节破骨细胞(OC)分化的核转录因子NF-κB受体激动剂(RANK)的特异性cDNA功能片段,为研究OC分化机制提供理论基础。【方法】先将RANK膜内部分的1.2kb大小的cDNA分成20个片段,用缺失突变的方法构建出20个由肿瘤... 【目的】在生理条件下寻找调节破骨细胞(OC)分化的核转录因子NF-κB受体激动剂(RANK)的特异性cDNA功能片段,为研究OC分化机制提供理论基础。【方法】先将RANK膜内部分的1.2kb大小的cDNA分成20个片段,用缺失突变的方法构建出20个由肿瘤坏死因子受体1和RANK跨膜和膜内部分组成的TNFR1/RANK嵌合体的突变体,每一个突变体在RANK膜内部分含60bp缺失。再将RANK-cDNA第1561～1680bp之间的120bp片段分为10个片段,构建10个新的TNFR1/RANK突变体,每一个突变体在其RANK膜内部分含12bp缺失。用包装细胞PlatE分别将各突变体包装成逆转录病毒,通过感染分别将这些逆转录病毒转染到肿瘤坏死因子受体1和2基因敲除小鼠的骨髓巨噬细胞(BMM)中。用TNFɑ刺激后、观察哪一个突变体不能诱导OC形成。【结果】首先发现表达TNFR1/RANK1561-1620或TNFR1/RANK1621-1680的逆转录病毒感染的BMM不能分化成OC,然后在RANK-cDNA第1561～1680bp这个大的片段中又发现表达TNFR1/RANK1597-1608、TNFR1/RANK1609-1620、TNFR1/RANK1621-1632或TNFR1/RANK1633-1644的逆转录病毒感染的BMM也不能分化成OC。【结论】RANK-cDNA第1597～1644bp之间的48bp片段(5′-gggcaggtgatgaacttcaagggtgacatcatcgtggtgtatgtcagc-3′)对OC形成起决定性作用。 展开更多

关键词 RANK特异性cdna片段 嵌合体 破骨细胞 分化

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斯氏狸殖吸虫囊蚴半胱氨酸蛋白酶cDNA片段的克隆和序列分析 被引量：3

11

作者 王英 张锡林 +1 位作者 段建华 徐文岳 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第9期1052-1055,共4页

目的　克隆斯氏狸殖吸虫囊蚴半胱氨酸蛋白酶cDNA片段 ,获得其序列 ,并进行序列分析。方法　利用简并引物 ,进行RT PCR ,扩增斯氏狸殖吸虫囊蚴半胱氨酸蛋白酶cDNA片段。TA克隆装入pUCm T载体 ,进行鉴定、测序 ;利用DNASIS程序推导其所编... 目的　克隆斯氏狸殖吸虫囊蚴半胱氨酸蛋白酶cDNA片段 ,获得其序列 ,并进行序列分析。方法　利用简并引物 ,进行RT PCR ,扩增斯氏狸殖吸虫囊蚴半胱氨酸蛋白酶cDNA片段。TA克隆装入pUCm T载体 ,进行鉴定、测序 ;利用DNASIS程序推导其所编码的氨基酸序列 ,并与相关虫种半胱氨酸蛋白酶进行氨基酸序列的同源性分析。结果　RT PCR扩增出了一 5 0 0bp左右的cDNA片段 ,对阳性克隆测序后获得其核酸序列 ,长 498bp。推导出的氨基酸序列长 166;氨基酸序列的同源性分析显示 ,该序列与相关虫种半胱氨酸蛋白酶存在着很高的同源性 ,组成半胱氨酸催化三联体的半胱氨酸、组胺酸和天冬酰胺残基高度保守。 展开更多

关键词 斯氏狸殖吸虫 囊蚴 半胱氨酸蛋白酶 cdna片段 克隆 序列分析

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黑麦中与耐盐性相关的cDNA片段的克隆与序列分析 被引量：3

12

作者 王振英 彭永康 郑坚瑜 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期427-431,共5页

SI800(Salt Induced 800 bp,SI800)为我们用mRNA差别显示技术在盐胁迫的黑麦幼苗叶片中分离到的一个盐胁迫应答cDNA片段。利用低熔点琼脂糖凝胶电泳方法纯化了该片段,并将其连接到pGEM—T easy vector上转化大肠杆菌JM 109,获得30个阳... SI800(Salt Induced 800 bp,SI800)为我们用mRNA差别显示技术在盐胁迫的黑麦幼苗叶片中分离到的一个盐胁迫应答cDNA片段。利用低熔点琼脂糖凝胶电泳方法纯化了该片段,并将其连接到pGEM—T easy vector上转化大肠杆菌JM 109,获得30个阳性克隆子,经过酶切和PCR双重鉴定后,选取2个阳性克隆子进行了测序,结果表明,SI800长735 bp,GenBank B last结果显示,该片段与细菌中的阿卓糖酸氧化还原酶基因的部分区段有较高的同源性。 展开更多

关键词 黑麦 耐盐性 cdna片段 基因克隆 基因序列

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亚洲玉米螟幼虫体内酚氧化酶原cDNA片段的克隆 被引量：3

13

作者 冯从经 戴华国 符文俊 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期130-132,共3页

利用昆虫酚氧化酶原 (PPO)基因序列设计简并引物 ,采用RT PCR方法从亚洲玉米螟幼虫体内扩增了一段 5 2 2个核苷酸的cDNA片段 ,编码 174个氨基酸。经Blastp分析表明 ,该段氨基酸序列同鳞翅目和双翅目中PPO的相同区域具有较高的相似性 ( ... 利用昆虫酚氧化酶原 (PPO)基因序列设计简并引物 ,采用RT PCR方法从亚洲玉米螟幼虫体内扩增了一段 5 2 2个核苷酸的cDNA片段 ,编码 174个氨基酸。经Blastp分析表明 ,该段氨基酸序列同鳞翅目和双翅目中PPO的相同区域具有较高的相似性 ( 39%～ 6 3% )。其中与烟草天蛾PPO的相似性最高 ( 6 3% ) ;与家蚕、大蜡螟、惜古比天蚕蛾PPO也有较高的相似性。在该片段中含有 1个该类酶原中保守的 2个铜离子结合位点之一 (含 4个组氨酸残基 )。据此推断克隆的片段为PPO基因片段。 展开更多

关键词 亚洲玉米螟 幼虫 酚氧化酶原 cdna片段 克隆 基因

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用保守氨基酸区段序列分离克隆几种云南高原作物GPAT基因cDNA片段 被引量：1

14

作者 杨明挚 陈善娜 +4 位作者 刘继梅 谭德勇 鄢波 黄兴奇 陈莉 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 1998年第S1期39-40,共2页

用分子生物学技术分别成功地从南瓜及黑子南瓜、水稻、油菜中得到了ＧＰＡＴ基因ｃＤＮＡ片段中约３１５ｂｐ的片段，并用Ｔ４连接酶分别克隆到了ｐＧＥＭＴ载体系统上。这一片段在不同科的植物中其片段大小并无差别，但限制性酶切表明... 用分子生物学技术分别成功地从南瓜及黑子南瓜、水稻、油菜中得到了ＧＰＡＴ基因ｃＤＮＡ片段中约３１５ｂｐ的片段，并用Ｔ４连接酶分别克隆到了ｐＧＥＭＴ载体系统上。这一片段在不同科的植物中其片段大小并无差别，但限制性酶切表明其内部序列确实存在有差异。从南瓜中得到的ＧＰＡＴｃＤＮＡ部分片段经ＨｉｎｄⅢ酶切，得到了一个约１００多ｂｐ和一个约２００ｂｐ的片段，与前人所发表的南瓜ＧＰＡＴｃＤＮＡ序列（在该片段的１１１ｂｐ处有一个ｈｉｎｄⅢ的酶切位点）相符。 展开更多

关键词 南瓜 水稻 油菜 GPAT基因 cdna片段

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棉蚜羧酸酯酶同工酶cDNA片段的基因克隆与序列分析 被引量：2

15

作者 李飞 韩召军 王荫长 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2002年第6期336-339,共4页

采用简并引物和降落PCR技术,克隆了棉蚜2个羧酸酯酶同工酶基因的cDNA片段,分别命名为Ag.est1和Ag.est2。其中Ag.est1为479bp,编码160个氨基酸;Ag.est2为476bp,编码159个氨基酸。序列同源分析表明,PCR扩增获得的Ag.est1和Ag.est2基因与... 采用简并引物和降落PCR技术,克隆了棉蚜2个羧酸酯酶同工酶基因的cDNA片段,分别命名为Ag.est1和Ag.est2。其中Ag.est1为479bp,编码160个氨基酸;Ag.est2为476bp,编码159个氨基酸。序列同源分析表明,PCR扩增获得的Ag.est1和Ag.est2基因与其他昆虫的羧酸酯酶具有较高的相似性。2个羧酸酯酶同工酶基因cDNA片段的GeneBank登录号分别为:AF502083、AF502084。 展开更多

关键词 同工酶 cdna片段 基因克隆 序列分析 棉蚜 羧酸酯酶 代谢抗性

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D10-86cDNA片段在人食管癌中的表达 被引量：1

16

作者 郭长青 王明荣 +6 位作者 陈宝生 李继昌 徐昕 蔡岩 韩亚玲 刘国永 吴旻 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期12-14,共3页

目的:D10-86cDNA片段是通过mRNA差异显示技术分离的在食管癌中低表达的cDNA片段。由于mRNA差异显示技术具有较高的假阳性,故需进一步鉴定其在食管癌中的表达情况。方法:采用RT-PCR方法检测了41对食管癌组织及配对食管癌旁粘膜和食管癌... 目的:D10-86cDNA片段是通过mRNA差异显示技术分离的在食管癌中低表达的cDNA片段。由于mRNA差异显示技术具有较高的假阳性,故需进一步鉴定其在食管癌中的表达情况。方法:采用RT-PCR方法检测了41对食管癌组织及配对食管癌旁粘膜和食管癌细胞系EC9706和肺癌细胞系GLC82中D10-86cDNA片段的表达。结果:D10-86cDNA片段在41.5%(17/41)食管癌组织中的表达明显低于相应的癌旁粘膜,未检测到表达和微弱表达的分别为9.8%(4/41)和31.7%(13/41),食管癌组织中的表达高于相应的癌旁粘膜7.3%(3/41),表达无差别的51.2%(21/41);在食管癌细胞系EC9706和肺腺癌细胞系GLC82未检测到表达;D10-86cDNA片段表达下调与食管癌临床病理因素无显著相关性(P>0.05)。结论:D10-86cDNA片段在人食管癌中表达下调。 展开更多

关键词 食管肿瘤 基因表达 D10-86 cdna片段 逆转录聚合酶链反应 食管癌

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食管癌组织中cystatin B基因、D10-86 cDNA片段的表达 被引量：1

17

作者 郭长青 王明荣 +6 位作者 李继昌 徐峰 陈宝生 徐昕 蔡岩 韩亚玲 吴旻 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2004年第2期235-238,共4页

目的:研究食管癌组织中cystatin B基因、D10-86 cDNA片段的表达及相关性。方法:采用RT-PCR方法检测了41对食管癌组织及配对食管癌旁正常黏膜cystatin B基因、D10-86 cDNA片段的表达。结果:cystatin B基因、D10-86 cDNA片段各在82.9％(34... 目的:研究食管癌组织中cystatin B基因、D10-86 cDNA片段的表达及相关性。方法:采用RT-PCR方法检测了41对食管癌组织及配对食管癌旁正常黏膜cystatin B基因、D10-86 cDNA片段的表达。结果:cystatin B基因、D10-86 cDNA片段各在82.9％(34/41)、41.5％(17/41)食管癌组织中的表达水平低于配对的食管癌旁正常黏膜,cystatin B基因的表达下调情况显著高于D10-86 cDNA片段(P<0.05),但2者的表达无相关性(JD>0.05)。结论:cystatin B基因、D10-86 cDNA片段在食管癌中表达下调,可能源于不同的机制。2者可能分别是由不同的机制而导致在食管癌组织中表达下调。 展开更多

关键词 CYSTATIN B基因 D10—86 cdna片段 食管肿瘤 基因表达 逆转录聚合酶链反应

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小菜蛾细胞色素P450基因的cDNA片段克隆及其序列分析 被引量：1

18

作者 李洪山 戴华国 王娟 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2006年第1期29-32,共4页

以小菜蛾[Plutella xylostella(L.)]3龄幼虫(对氰戊菊酯的LC50为38.75 mg/L)的总RNA为模板,利用简并引物,采用反转录-多聚酶链式反应(RT-PCR)方法扩增出1个长度为240 bp的cDNA片段。序列分析结果表明,扩增出的cDNA片段与细胞色素P450的C... 以小菜蛾[Plutella xylostella(L.)]3龄幼虫(对氰戊菊酯的LC50为38.75 mg/L)的总RNA为模板,利用简并引物,采用反转录-多聚酶链式反应(RT-PCR)方法扩增出1个长度为240 bp的cDNA片段。序列分析结果表明,扩增出的cDNA片段与细胞色素P450的Cyp6基因有较高的同源性。 展开更多

关键词 小菜蛾 细胞色素P450基因 cdna片段克隆 序列分析

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烟夜蛾幼虫中肠Bt Cry1Ac毒素受体蛋白cDNA片段的克隆和序列测定 被引量：1

19

作者 安世恒 郭线茹 +2 位作者 罗梅浩 蒋金炜 马继盛 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2005年第2期84-88,共5页

利用RT-PCR技术扩增烟夜蛾(HelicoverpaassultaGuen啨e)幼虫中肠Bt毒素Cry1Ac受体蛋白APN(N-氨基肽酶,aminopeptidaseN,APN)基因片段,克隆和测序结果表明,测序得到的812bp的片段编码270个氨基酸残基,且该片段在阅读框内。通过同源性分... 利用RT-PCR技术扩增烟夜蛾(HelicoverpaassultaGuen啨e)幼虫中肠Bt毒素Cry1Ac受体蛋白APN(N-氨基肽酶,aminopeptidaseN,APN)基因片段,克隆和测序结果表明,测序得到的812bp的片段编码270个氨基酸残基,且该片段在阅读框内。通过同源性分析发现,其核苷酸序列与棉铃虫(H.armigera)、澳洲棉铃虫(H.punctiger a)、烟芽夜蛾(H.virescens)、舞毒蛾(Lymantriadispar)、小菜蛾(Plutellaxylostella)、印度谷螟(Plodiainterpunctella)RC688品系和HD198品系、烟草天蛾(Manducasexta)和家蚕(Bombyxmori)的Cry1Ac受体蛋白基因的同源性分别为97.0%,90.0%,78.0%,63.5%,55.0%,60.3%,61.2%,55.0%和59.0%。推导的烟夜蛾Cry1Ac受体蛋白基因的氨基酸序列与棉铃虫、烟芽夜蛾、斑实夜蛾、舞毒蛾的氨基酸序列同源性分别为95.6%,81 0%,82 7%和55 7%。该片段编码的氨基酸属于氨肽酶家族,与烟夜蛾对BtCry1Ac毒素的抗性有关。 展开更多

关键词 受体蛋白 烟夜蛾 cdna片段 序列测定 中肠 幼虫 克隆 烟芽夜蛾 蛋白基因 PCR技术 氨基酸残基 同源性分析 核苷酸序列 inter 氨基酸序列 序列同源性 棉铃虫 氨基肽酶 Bt毒素 基因片段 印度谷螟 舞毒蛾 小菜蛾 氨肽酶 测序

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枇杷果实蔗糖磷酸合酶基因cDNA片段的克隆及表达分析 被引量：1

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作者 倪照君 高志红 +3 位作者 顾林平 章镇 黄蕾芳 王秀云 《江西农业学报》 CAS 2010年第9期42-45,共4页

根据GenBank中已登录的多种植物的蔗糖磷酸合成酶基因的保守序列设计引物,采用RT-PCR方法,从枇杷果实中扩增出该基因的cDNA片段并测序,分别为386 bp和383 bp。序列分析表明,枇杷果实蔗糖磷酸合成酶基因与桃果实蔗糖磷酸合成酶基因相似性... 根据GenBank中已登录的多种植物的蔗糖磷酸合成酶基因的保守序列设计引物,采用RT-PCR方法,从枇杷果实中扩增出该基因的cDNA片段并测序,分别为386 bp和383 bp。序列分析表明,枇杷果实蔗糖磷酸合成酶基因与桃果实蔗糖磷酸合成酶基因相似性达91%。半定量RT-PCR分析表明,该基因在枇杷果实生长发育过程中的表达量逐渐增加。所得基因片段已在GenBank中注册,386 bp和383 bp登记号分别为HM122759和HM146926。 展开更多

关键词 枇杷果实 蔗糖 磷酸合成酶基因 合酶基因 cdna片段 克隆 表达分析 GENBANK 生长发育过程 分析表 RT-PCR分析 RT-PCR方法 保守序列 设计引物 基因片段 多种植物 相似性 桃果实 表达量 半定量

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