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基于类器官构建泛TKI提高ET+CDK4/6抑制剂治疗HR^(+)/HER2-low乳腺癌疗效的筛选工具
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作者 吴迎朝 陈柳汕 +4 位作者 梁裕琪 陈洁婷 黄俊峰 左谦 陈前军 《实用医学杂志》 北大核心 2025年第18期2786-2795,共10页
目的探讨HR^(+)/HER2-low乳腺癌ET+CDK4/6抑制剂治疗效果不佳的机制,并构建乳腺癌类器官模型工具以筛选泛TKI敏感的HR^(+)/HER2-low乳腺癌患者。方法转录组学分析HR^(+)/HER2-0与HR^(+)/HER2-low乳腺癌样本差异表达基因并进行富集分析... 目的探讨HR^(+)/HER2-low乳腺癌ET+CDK4/6抑制剂治疗效果不佳的机制,并构建乳腺癌类器官模型工具以筛选泛TKI敏感的HR^(+)/HER2-low乳腺癌患者。方法转录组学分析HR^(+)/HER2-0与HR^(+)/HER2-low乳腺癌样本差异表达基因并进行富集分析。使用临床来源的乳腺癌组织构建肿瘤类器官模型,并通过Calcein-AM/PI细胞活死双染和EdU细胞增殖检测分析不同样本对治疗药物的敏感性。结果转录组学富集分析结果显示,HR^(+)/HER2-low乳腺癌的EGFR存在显著激活并具有酪氨酸激酶抑制剂耐药的特性。成功构建了乳腺癌类器官,通过药敏试验结果显示,部分HR^(+)/HER2-low乳腺癌ET+CDK4/6抑制剂治疗效果较差,TKI可以恢复HR^(+)/HER2-low乳腺癌ET+CDK4/6抑制剂治疗的敏感性(P<0.05)。结论TKI可以逆转HR^(+)/HER2-low乳腺癌对ET+CDK4/6抑制剂治疗的敏感性下降,乳腺癌类器官有望成为临床HR^(+)/HER2-low乳腺癌药敏试验筛选工具。 展开更多
关键词 乳腺癌 HR^(+)/HER2-low ET+cdk4/6抑制剂 类器官 酪氨酸激酶抑制剂
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苦参素对实验性肝癌PCNA、cyclinD1、CDK4表达的影响 被引量:35
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作者 朱玉娟 周爱玲 +2 位作者 茅家慧 胡亚娥 朱燕 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2005年第1期52-56,共5页
目的 :研究苦参素对 2 乙酰氨基芴 (2 AAF)诱发大鼠实验性肝癌的防治作用 ,并探讨其抑制肝癌细胞增殖的机制。方法 :以 2 AAF喂饲SD大鼠制备肝癌模型。给予不同剂量的苦参素腹腔注射 ,观察肿瘤生成状况 ;免疫组化方法检测增殖细胞核... 目的 :研究苦参素对 2 乙酰氨基芴 (2 AAF)诱发大鼠实验性肝癌的防治作用 ,并探讨其抑制肝癌细胞增殖的机制。方法 :以 2 AAF喂饲SD大鼠制备肝癌模型。给予不同剂量的苦参素腹腔注射 ,观察肿瘤生成状况 ;免疫组化方法检测增殖细胞核抗原 (PCNA)蛋白的表达 ;RT PCR检测细胞周期素D1(cyclinD1)、细胞周期蛋白依赖激酶 4 (CDK4 )mR NA的表达。结果 :苦参素各防治组大鼠肝表面癌结节数明显低于模型组 ,预防组肝表面结节数最少。苦参素各预防治疗组PCNA和cyclinD1、CDK4的表达显著低于模型组 (P <0 .0 1)。结论 :苦参素有预防或延缓 2 AAF诱发大鼠肝癌发生的作用 ,其机制可能通过抑制cyclinD1、CDK4mRNA和PCNA蛋白的表达 ,从而诱导细胞周期阻滞 ,抑制肝癌细胞过度增殖。 展开更多
关键词 苦参素 2-AAF 肝癌 PCNA CYCLIN D1 cdk4
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人参皂苷Rg1抗衰老作用可能与改变p16、cyclin D、CDK4的表达有关 被引量:26
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作者 金建生 赵朝晖 +5 位作者 陈晓春 朱元贵 曾育琦 李永坤 彭小松 师广斌 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2004年第1期29-34,共6页
目的 :探讨人参皂苷Rg1对抗三丁基过氧化氢 (t BHP)诱导的WI 38细胞衰老作用及其可能细胞周期调控机制。方法 :将WI 38细胞随机分为 4组 ,用不同剂量Rg1预处理。从 30代开始 ,隔代用t BHP作用 ,每次 1h ,共 4次 ,诱导细胞衰老。从光镜... 目的 :探讨人参皂苷Rg1对抗三丁基过氧化氢 (t BHP)诱导的WI 38细胞衰老作用及其可能细胞周期调控机制。方法 :将WI 38细胞随机分为 4组 ,用不同剂量Rg1预处理。从 30代开始 ,隔代用t BHP作用 ,每次 1h ,共 4次 ,诱导细胞衰老。从光镜、透射电镜观察细胞形态及超微结构 ;流式细胞术分析G1期细胞比例 ;以及SA β 半乳糖苷酶的细胞化学染色 ,确定Rg1的抗衰老作用。并采用免疫印迹技术对CDK4、cyclinD1和p16等表达情况进行检测。结果 :Rg1预处理组与单纯t BHP处理组相比 ,细胞形态体积小、胞体不如后者扁平 ,次级溶酶体减少 ,G1期细胞比例下降 ,SA β 半乳糖苷酶染色阳性细胞百分比下降 ,说明Rg1在t BHP诱导细胞衰老模型中有抗衰老作用。进一步发现用Rg1预处理后 ,p16、cyclinD1表达水平降低、CDK4表达水平增加。结论 :提示Rg1可能通过改变细胞周期调控因子的表达而发挥其抗t BHP诱导的WI 38细胞衰老作用。 展开更多
关键词 人参皂苷RG1 P16 CYCLIN D cdk4 衰老 三丁基过氧化氢
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细胞周期蛋白D1、CDK4在乳腺癌中的表达及其临床意义 被引量:12
4
作者 陆劲松 沈镇宙 +6 位作者 吴炅 江明 沈坤炜 韩企夏 施达仁 张廷璆 邵志敏 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2001年第2期105-108,共4页
目的 :研究乳腺癌组织周期蛋白D1、CDK4的蛋白表达定位、表达水平 ,及与P2 1蛋白表达、与临床病理指标的关系及其预后意义。方法 :①应用免疫组织化学染色方法 ,检测 10 6例乳腺癌组织石蜡切片上的周期蛋白D1、CDK4的蛋白定位和蛋白表... 目的 :研究乳腺癌组织周期蛋白D1、CDK4的蛋白表达定位、表达水平 ,及与P2 1蛋白表达、与临床病理指标的关系及其预后意义。方法 :①应用免疫组织化学染色方法 ,检测 10 6例乳腺癌组织石蜡切片上的周期蛋白D1、CDK4的蛋白定位和蛋白表达 ,比较其与P2 1的蛋白表达 ,与临床病理学指标 ,如病理类型、组织学分型、组织学分级、淋巴结状态、雌激素受体状态、TNM分期等之间的关系 ;②对周期蛋白D1、CDK4、P2 1及临床病理指标如肿瘤的组织学分级、淋巴结状态、TNM分期、ER状态等 ,应用Kaplan Meier法Log rank检验进行单因素生存分析 ,应用Cox比例风险模型进行多因素生存分析。结果 :①周期蛋白D1表达定位于细胞核、CDK4的表达位于细胞质和细胞核 ,周期蛋白D1的阳性率为 30 2 % ,CDK4的阳性率为 5 3 8%。②周期蛋白D1及CDK4的表达与乳腺癌的病理诊断组织学分型、组织学分级、ER状态、临床TNM分期、淋巴结状态、P2 1蛋白表达表达水平无关 (P >0 0 5 )。周期蛋白D1的蛋白表达与CDK4的蛋白表达相关 (P <0 0 5 )。③单因素分析提示影响 140个月无瘤生存率及总生存率的因素有 :临床TNM分期、组织学分级、腋淋巴结状态、周期蛋白D1的蛋白表达 (P <0 0 5 )。在无腋淋巴结转移亚组周期蛋白D1蛋白表达单因素生存分析? 展开更多
关键词 乳腺癌 细胞周期蛋白D1 cdk4 P21 预后因素
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乳腺癌细胞中p53、C-erbB-2、p21^(WAF1)和CDK4的表达及临床意义 被引量:8
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作者 王锋 王水 +2 位作者 宣卓琦 孙琳 陆辉 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期70-73,I0001,共5页
目的:探讨乳腺癌组织中p53、C-erbB-2、p21WAF1和CDK4的表达及临床意义。方法:采用免疫组化SP法检测120例乳腺癌组织石腊切片上p53、C-erbB-2、p21WAF1和CDK4的表达。结果:p53、C-erbB-2、p21WAF1和CDK4阳性表达率分别为53.3%、63.3%、5... 目的:探讨乳腺癌组织中p53、C-erbB-2、p21WAF1和CDK4的表达及临床意义。方法:采用免疫组化SP法检测120例乳腺癌组织石腊切片上p53、C-erbB-2、p21WAF1和CDK4的表达。结果:p53、C-erbB-2、p21WAF1和CDK4阳性表达率分别为53.3%、63.3%、58.3%、41.6%;阳性产物主要位于细胞核中,p53、C-erbB-2的表达与肿瘤组织分级(P<0.05)、淋巴结转移(P<0.01)显著相关,p21WAF1的表达与淋巴结转移(P<0.01)显著相关,无淋巴结转移组明显高于有淋巴结转移组;与组织分级及PR、ER表达无显著相关。CDK4阳性表达与肿瘤组织分级(P<0.05)、淋巴结转移(P<0.01)显著相关,与PR、ER无相关。结论:p53、C-erbB-2、p21WAF1和CDK4与乳腺癌的发生发展密切相关,可作为判断肿瘤浸润转移、指导治疗和估计预后的参考指标。特别是p53的表达水平及淋巴结转移可能是判断乳腺癌的术后生存的独立有效指标,而综合应用上述指标可能更有助于预后的判断。 展开更多
关键词 P53 C-ERBB-2 P21WAF1 cdk4 乳腺癌 基因表达 肿瘤转移
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CDK4/6抑制剂在非小细胞肺癌治疗中的研究进展 被引量:18
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作者 秦琼 任尧尧 钟殿胜 《中国肺癌杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期176-181,共6页
肺癌是全球癌症相关死亡的首要原因,非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)占肺癌的80%-85%。恶性肿瘤可以无限增殖,细胞周期失调控是恶性肿瘤特征之一。细胞周期依赖激酶(cyclin D-dependent kinase,CDK)4/6抑制剂能阻滞肿... 肺癌是全球癌症相关死亡的首要原因,非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)占肺癌的80%-85%。恶性肿瘤可以无限增殖,细胞周期失调控是恶性肿瘤特征之一。细胞周期依赖激酶(cyclin D-dependent kinase,CDK)4/6抑制剂能阻滞肿瘤细胞通过G1期进入S期从而抑制肿瘤增殖,该药物在激素受体阳性乳腺癌中取得了良好的疗效,联合内分泌治疗成为这类患者一线标准治疗。细胞周期失控在NSCLC中比较常见,发生率约为22%-45%,CDK4/6抑制剂也进行了一系列的探索研究,并取得一定的效果,将来有可能成为新的治疗手段。本文重点讨论CDK4/6抑制剂在NSCLC的研究进展,包括作用机制、获批药物、在NSCLC中的临床研究进展、疗效预测生物标记物及局限性等。 展开更多
关键词 肺肿瘤 细胞周期蛋白D cdk4/6抑制剂 生物标记物
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人细胞周期蛋白D1及细胞周期蛋白激酶CDK4的原核表达及鉴定 被引量:7
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作者 王鸿鹤 朱孝峰 +3 位作者 谢冰芬 冯公侃 沈竞康 刘宗潮 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期444-447,共4页
【目的】构建表达人细胞周期蛋白D1及细胞周期蛋白激酶CDK4融合蛋白的重组体。【方法】用RT-PCR从HL-60细胞中扩增细胞周期蛋白D1及CDK4基因片段,克隆到pGEM-Teasy载体上。测序鉴定后切下相应的片段,连接到表达载体pET-22b(+)上,重组质... 【目的】构建表达人细胞周期蛋白D1及细胞周期蛋白激酶CDK4融合蛋白的重组体。【方法】用RT-PCR从HL-60细胞中扩增细胞周期蛋白D1及CDK4基因片段,克隆到pGEM-Teasy载体上。测序鉴定后切下相应的片段,连接到表达载体pET-22b(+)上,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DL3),使之高效表达融合蛋白细胞周期蛋白D1及CDK4。SDS-PAGE电泳及Westernblotting鉴定表达蛋白。【结果】用PCR扩增得到了正确的目的基因片段并构建成pET-cyclinD1和pET-CDK4两个原核表达载体。将其转化大肠杆菌,Westernblot检测证实了转化的大肠杆菌能表达细胞周期蛋白D1及CDK4融合蛋白。【结论】本研究成功构建了细胞周期蛋白D1及CDK4原核表达载体,后两者在细胞内能正确表达细胞周期蛋白D1及CDK4融合蛋白。 展开更多
关键词 人细胞周期蛋白D1 细胞周期蛋白激酶cdk4 HL-60细胞 肿瘤
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p27-CyclinD1/CDK4-Rb蛋白在不同类型甲状腺肿瘤组织中的表达及临床意义 被引量:5
8
作者 张慧芹 李伟娟 +2 位作者 俞芳 刘秀玲 刘阁玲 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2006年第18期1035-1037,共3页
目的:探讨细胞周期调控基因蛋白p27、CyclinD1、CDK4、Rb在不同类型甲状腺肿瘤组织中的变化,为甲状腺肿瘤的发生学以及临床诊断提供参考。方法:应用流式细胞术和免疫荧光技术对甲状腺乳头状癌(40例)、甲状腺腺瘤(16例)、结节性甲状腺肿... 目的:探讨细胞周期调控基因蛋白p27、CyclinD1、CDK4、Rb在不同类型甲状腺肿瘤组织中的变化,为甲状腺肿瘤的发生学以及临床诊断提供参考。方法:应用流式细胞术和免疫荧光技术对甲状腺乳头状癌(40例)、甲状腺腺瘤(16例)、结节性甲状腺肿(21例)、正常甲状腺组织(10例)的CyclinD1、CDK4、p27、Rb基因蛋白的表达进行定量检测。结果:CyclinD1和CDK4基因蛋白在甲状腺乳头状癌组织中的表达量显著高于其它三组(P<0.01),而后三组间差异无显著性(P>0.05);p27基因蛋白在结节性甲状腺肿、甲状腺腺瘤和甲状腺乳头状癌表达量依次减少,均低于正常甲状腺组织(P<0.05);Rb基因蛋白的表达量在正常甲状腺组织、甲状腺腺瘤、结节性甲状腺肿、甲状腺乳头状癌中依次减少,但各组间无显著性差异(P>0.05)。结论:CyclinD1/CDK4高表达、p27低表达在甲状腺乳头状癌的发生中起着重要的作用,而Rb基因在甲状腺乳头状癌的发生中可能不起主要作用。 展开更多
关键词 甲状腺肿瘤 细胞周期调控基因p27 CYCLIND1 cdk4 RB
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口腔癌及癌前病变中FHIT与cyclinD1/CDK4表达的相关性研究 被引量:4
9
作者 殷操 沈丽佳 +2 位作者 谢思明 阮萍 姚希 《第一军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期812-814,共3页
目的通过检测cyclinD1/CDK4在口腔鳞癌(OSCC)及癌前病变中的表达,并分析它们在口腔癌中的作用及相关关系。方法采用免疫组化SP法检测64例OSCC、39例口腔癌前病变、12例正常口腔粘膜中cyclinD1、CDK4蛋白表达的情况,并比较其相关性。结果... 目的通过检测cyclinD1/CDK4在口腔鳞癌(OSCC)及癌前病变中的表达,并分析它们在口腔癌中的作用及相关关系。方法采用免疫组化SP法检测64例OSCC、39例口腔癌前病变、12例正常口腔粘膜中cyclinD1、CDK4蛋白表达的情况,并比较其相关性。结果cyclinD1/CDK4在OSCC组中的表达明显高于正常组和癌前病变组(P<0.01)。Spearman等级相关分析表明FHIT与cyclinD1、CDK4之间相关性不明显,而cyclinD1、CDK4之间有正相关关系。结论FHIT、cyclinD1、CDK4在OSCC的发生和发展过程中起着一定的作用。FHIT可能并不通过影响cyclinD1/CDK4来发挥其功能。 展开更多
关键词 FHIT CYCLIN D1 cdk4 口腔癌 癌前病变
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Caspase-3、P73、CDK4在口腔黏膜鳞状细胞癌化疗前后的表达及其意义 被引量:6
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作者 郭建文 刘亮 +3 位作者 左连富 刘江惠 王静 刘辉 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期93-94,98,共3页
目的:观察caspase-3、P73、CDK4在口腔黏膜鳞状细胞癌平阳霉素治疗前后的表达及其临床意义。方法:临床标本取自河北医科大学第四医院口腔科1988年至2005年的23例病理学确诊的口腔鳞状细胞癌患者。流式细胞术检测caspase-3、P73、CDK4在... 目的:观察caspase-3、P73、CDK4在口腔黏膜鳞状细胞癌平阳霉素治疗前后的表达及其临床意义。方法:临床标本取自河北医科大学第四医院口腔科1988年至2005年的23例病理学确诊的口腔鳞状细胞癌患者。流式细胞术检测caspase-3、P73、CDK4在口腔黏膜鳞状细胞癌中的表达。结果:Caspase-3在口腔鳞癌中的表达水平显著性低于正常组织(P<0.05),平阳霉素化疗后表达显著性增高(P<0.05)。P73表达量在口腔鳞状细胞癌中明显升高,平阳霉素化疗后显著性下降(P<0.05)。口腔鳞状细胞癌中CDK4表达明显增高,平阳霉素化疗后显著性下降(P<0.05)。结论:Caspase-3、P73、CDK4在口腔黏膜中的异常表达与口腔鳞癌的发生有关,平阳霉素可能通过调节caspase-3、P73、CDK4的表达起到抗癌作用。 展开更多
关键词 口腔黏膜鳞状细胞癌 CASPASE-3 P73 cdk4 平阳霉素
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miR-206/CDK4信号在卵巢癌生长和化疗增敏中的作用 被引量:5
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作者 凌晨 刘蜀 +2 位作者 王勇 张逢春 杜鹰 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期393-397,共5页
探讨miR-206/CDK4信号在卵巢癌生长和化疗增敏中的作用。方法分别提取卵巢癌和癌旁组织总RNA并将它们逆转录成cDNA。实时荧光定量PCR检测miR-206在卵巢癌和癌旁组织中差异表达。在将miR-206 mimic和其特异抑制剂以及它们各自对照分别转... 探讨miR-206/CDK4信号在卵巢癌生长和化疗增敏中的作用。方法分别提取卵巢癌和癌旁组织总RNA并将它们逆转录成cDNA。实时荧光定量PCR检测miR-206在卵巢癌和癌旁组织中差异表达。在将miR-206 mimic和其特异抑制剂以及它们各自对照分别转染卵巢癌细胞后,MTT和流式细胞仪用于检测细胞增殖和细胞周期的改变。Western blot和荧光素酶报告基因活性分析鉴定miR-206的靶基因和其调控信号通路。miR-206诱导5-Fu对卵巢癌细胞化疗增敏作用被鉴定。结果荧光定量PCR分析显示,miR-206在卵巢癌组织中表达明显下调。在转染miR-206 mimics后,细胞的增殖明显抑制,细胞周期也出现G/S转化障碍。机制分析显示,miR-206 mimic能明显抑制CDK4,c-Myc和CCND1表达。与之相反,在使用miR-206特异抑制剂后,细胞的增殖能力明显恢复,而CDK4表达能明显增高。荧光素酶报告基因活性分析显示,miR-206能直接结合CDK43'UTR。药敏分析显示,miR-206能明显降低IC50值(P<0.001),从而增加5-Fu对卵巢癌细胞的敏感性。结论 miR-206作为候选抑癌基因,直接靶击CDK4基因,从而抑制了卵巢癌细胞生长,并诱导了5-Fu对卵巢癌细胞的化疗敏感性。 展开更多
关键词 miR-206 cdk4 卵巢癌
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二烯丙基二硫下调cyclin D1和CDK4的表达诱导人鼻咽癌CNE2细胞G_1期阻滞 被引量:3
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作者 胡波 邱青朝 +2 位作者 贺修培 赵其辉 贺修胜 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期1203-1207,共5页
目的研究二烯丙基二硫(DADS)对人鼻咽癌CNE2细胞的影响及其分子机制。方法采用MTT法检测DADS对CNE2细胞增殖抑制作用;流式细胞术分析DADS对CNE2细胞周期分布的影响;运用RT-PCR和Western blot方法分析DADS作用CNE2细胞后,cyclin D1和CDK... 目的研究二烯丙基二硫(DADS)对人鼻咽癌CNE2细胞的影响及其分子机制。方法采用MTT法检测DADS对CNE2细胞增殖抑制作用;流式细胞术分析DADS对CNE2细胞周期分布的影响;运用RT-PCR和Western blot方法分析DADS作用CNE2细胞后,cyclin D1和CDK4的表达变化。结果 MTT结果显示,不同浓度DADS(90、140、240、400μmol·L-1)处理CNE2细胞48h后,生长抑制率分别为4.0%、13.8%、25.8%、51.2%;流式细胞术分析显示,DADS阻滞CNE2细胞于G1期,并呈浓度依赖性;RT-PCR和Western blot结果表明,细胞周期调控基因cyclinD1、CDK4表达下调。结论 DADS对CNE2细胞的增殖抑制作用与其阻滞细胞G1期有关,并且可能是通过抑制cyclin D1、CDK4的表达使CNE2细胞阻滞于G1期。 展开更多
关键词 二烯丙基二硫 鼻咽癌 CNE2细胞 细胞周期 CYCLIN D1 cdk4
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CDK4蛋白在口腔粘膜癌变过程中表达的研究 被引量:4
13
作者 陈谦明 罗刚 +4 位作者 李秉琦 何志秀 陈列 曾昕 聂敏海 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期8-10,I002,共4页
目的:探讨CDK4蛋白在口腔粘膜癌变过程中表达的变化规律。方法:采用链菌素-生物素免疫组织化学染色法,对正常口腔粘膜、癌前损害、口腔鳞状细胞癌等共计80例标本中CDK4蛋白的表达进行检测,并与同批标本的P16蛋白的免... 目的:探讨CDK4蛋白在口腔粘膜癌变过程中表达的变化规律。方法:采用链菌素-生物素免疫组织化学染色法,对正常口腔粘膜、癌前损害、口腔鳞状细胞癌等共计80例标本中CDK4蛋白的表达进行检测,并与同批标本的P16蛋白的免疫组织化学染色结果进行相关性分析。结果:口腔粘膜癌前损害中出现CDK4蛋白的过表达,其阳性率及表达强度与P16蛋白的表达密切相关。结论:CDK4的过表达可能是口腔粘膜癌前损害发生发展中的增殖刺激因子,并可能引发P16的代偿作用。 展开更多
关键词 cdk4蛋白 口腔粘膜癌 癌前病变
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CDK4-pRB-E2F1通路是Aβ_(1-40)诱导皮层神经元凋亡的可能途径 被引量:4
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作者 陈丽敏 陈晓春 +3 位作者 林挺岩 朱元贵 赵朝晖 周宜灿 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第8期1034-1038,共5页
目的 :探讨 β淀粉样肽1-40 (beta -amyloidpeptide1-40 ,Aβ1-40 )诱导大鼠皮层神经元凋亡的可能分子机制。方法 :以 4 0mg/L的Aβ1-40 诱导离体培养的大鼠皮层神经元凋亡 ,流式细胞仪及免疫印迹方法检测细胞周期相关的周期依赖性激酶 ... 目的 :探讨 β淀粉样肽1-40 (beta -amyloidpeptide1-40 ,Aβ1-40 )诱导大鼠皮层神经元凋亡的可能分子机制。方法 :以 4 0mg/L的Aβ1-40 诱导离体培养的大鼠皮层神经元凋亡 ,流式细胞仪及免疫印迹方法检测细胞周期相关的周期依赖性激酶 4 (CDK4 )、磷酸化的视网膜神经胶质瘤蛋白 (pRB)水平 ;RT -PCR技术检测E2F1mRNA表达水平 ;荧光分光光度计检测半胱氨酸基天冬氨酸特异性蛋白酶 3(caspase - 3)活力 ;观察在Aβ1-40 诱导凋亡过程中是否伴随上述指标的变化。结果 :①CDK4、磷酸化pRB水平在Aβ1-40 作用后 2 - 4h显著升高 ;②Aβ1-40 孵育 3h后皮层神经元E2F1基因表达上调 ;③Aβ1-40 作用 12 - 2 4h后caspase- 3活力明显升高。结论 :CDK4 -pRB -E2F1信号转导通路可能在Aβ1-40 诱导的大鼠皮层神经元凋亡中起主要作用。 展开更多
关键词 淀粉样β肽 cdk4—pRB—E2F1通路 细胞凋亡 神经元 大鼠
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人参皂苷Rg1可能通过CDK4-pRB-E2F1通路减少神经元凋亡 被引量:13
15
作者 陈丽敏 陈晓春 +3 位作者 林挺岩 朱元贵 周宜灿 赵朝晖 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期695-700,共6页
目的 探讨人参皂苷Rg1是否通过CDK4 pRB E2F1通路对抗Aβ1~ 4 0 诱导的神经元凋亡。方法 用TUNEL染色、DNA琼脂糖凝胶电泳方法观察神经元凋亡形态学和生化改变 ;免疫印迹方法检测细胞周期相关的周期依赖性激酶4(Cyclindependentkinas... 目的 探讨人参皂苷Rg1是否通过CDK4 pRB E2F1通路对抗Aβ1~ 4 0 诱导的神经元凋亡。方法 用TUNEL染色、DNA琼脂糖凝胶电泳方法观察神经元凋亡形态学和生化改变 ;免疫印迹方法检测细胞周期相关的周期依赖性激酶4(Cyclindependentkinase 4,CDK4)、磷酸化的视网膜神经胶质瘤蛋白 (Retinoblastomaprotein ,pRB)水平 ;RT PCR技术检测E2F1mRNA表达水平 ;荧光分光光度计法检测凋亡效应分子Caspase 3活力的变化。结果 人参皂苷Rg1预处理可降低Aβ1~ 4 0 诱导的大鼠皮层神经元的凋亡率 ;凋亡细胞特有的DNA梯形条带消失 ;CDK4、磷酸化pRB水平降低 ;E2F1基因表达下调 ;Caspase 3活力下降。结论 人参皂苷Rg1可通过抑制CDK4 pRB E2F1信号传导通路及Caspase 3的激活 ,减少Aβ1~ 4 0 诱导的大鼠皮层神经元凋亡。 展开更多
关键词 人参皂苷RG1 AΒ1-40 神经元凋亡 cdk4-pRB-E2F1通路 皮层神经元 阿尔茨海默病 AD 免疫印迹法
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吉祥草中甾体皂苷RCE-4对人宫颈癌Caski细胞Ras/Erk和p16/cyclinD1/CDK4通路的影响 被引量:7
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作者 颜为红 邹坤 +6 位作者 贺海波 张永峰 李小妹 李小琴 杨小姣 汪鋆植 邓张双 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2018年第3期247-254,共8页
目的:研究吉祥草中甾体皂苷RCE-4影响Ras/Erk和p16/cyclin D1/CDK4信号通路促进Caski细胞凋亡的作用机制。方法:体外培养人宫颈癌Caski细胞株,用RCE-4作为处理因素,MTT法检测细胞增殖活力;流式细胞术检测细胞周期分布;Real-time PCR检测... 目的:研究吉祥草中甾体皂苷RCE-4影响Ras/Erk和p16/cyclin D1/CDK4信号通路促进Caski细胞凋亡的作用机制。方法:体外培养人宫颈癌Caski细胞株,用RCE-4作为处理因素,MTT法检测细胞增殖活力;流式细胞术检测细胞周期分布;Real-time PCR检测p16、cyclin D1和CDK4m RNA表达水平;Western blot检测Ras/Erk信号通路总蛋白和磷酸化蛋白表达水平。结果:RCE-4呈剂量依赖性抑制Caski细胞增殖,其作用24 h的IC50值为12.33μmol/L;升高G0/G1期细胞比例,降低S期细胞比例;抑制Ras、p-Raf、p-Mek1/2和p-Erk1/2蛋白表达,降低p-Raf/Raf、p-Mek1/2/Mek1/2和p-Erk1/2/Erk1/2比值,上调p16的m RNA表达,下调cyclin D1和CDK4的m RNA表达。结论:RCE-4可抑制Caski细胞的增殖,诱导细胞在G0/G1期阻滞,其诱导作用与其抑制Ras/Erk和p16/cyclin D1/CDK4信号通路激活有关。 展开更多
关键词 RCE-4 细胞周期 CASKI细胞 Ras/Erk信号通路 p16/cyclinD1/cdk4信号通路
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CDK4蛋白在胞浆中的表达与肺癌临床病理学特征及预后的关系 被引量:4
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作者 张月 周颖 +1 位作者 刘真 方唯意 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1572-1575,共4页
目的评估CDK4蛋白在胞浆中表达与肺癌患者临床病理学特征的关系。方法利用免疫组化和统计学方法分析CDK4蛋白在胞浆中表达以及与肺癌患者临床病理参数及预后之间的相关性。结果与正常肺组织相比,CDK4蛋白在肺癌胞浆中的表达并没有明显增... 目的评估CDK4蛋白在胞浆中表达与肺癌患者临床病理学特征的关系。方法利用免疫组化和统计学方法分析CDK4蛋白在胞浆中表达以及与肺癌患者临床病理参数及预后之间的相关性。结果与正常肺组织相比,CDK4蛋白在肺癌胞浆中的表达并没有明显增高(P=1.000)。然而,在肺癌组织中,CDK4表达上调正向相关于患者的临床分期和淋巴结转移(P=0.001,P=0.00 1)。预后分析表明,CDK4蛋白在胞浆表达越高,患者生存时间越短。多变量分析显示,CDK4在胞浆中过表达是预测肺癌患者预后不利因素(P<0.001)。结论 CDK4蛋白在细胞胞浆中过表达也促进肺癌的发病过程,且其是预测肺癌患者预后的不利因子。 展开更多
关键词 cdk4蛋白 肺癌 胞浆过表达 预后因子
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胰腺癌中和的p21WAF1、cyclinD1CDK4表达意义及其相互关系 被引量:3
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作者 杨勇 曹农 +3 位作者 朱有权 周彦明 曾峰 冯颖 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期252-255,共4页
目的:探讨胰腺癌中p21W A F1、cyclinD1和CD K4的表达意义及其相互关系。方法:应用免疫组织化学二步法检测p21W A F1、cyclinD1和CD K4在48例胰腺癌和14例慢性胰腺炎中的表达。结果:胰腺癌组织中p21W A F1、cyclinD1、CD K4的阳性表达... 目的:探讨胰腺癌中p21W A F1、cyclinD1和CD K4的表达意义及其相互关系。方法:应用免疫组织化学二步法检测p21W A F1、cyclinD1和CD K4在48例胰腺癌和14例慢性胰腺炎中的表达。结果:胰腺癌组织中p21W A F1、cyclinD1、CD K4的阳性表达率分别是52.08%(25/48)、70.85%(34/48)、62.50%(30/48),同慢性胰腺炎组比较p21W A F1的表达明显降低(P<0.01),而cyclinD1和CD K4的表达明显升高(P<0.01)。高分化、无淋巴结转移、临床分期Ⅰ、Ⅱ期的胰腺癌组织中p21W A F1的阳性表达率明显高于低分化、有淋巴结转移、临床分期Ⅲ、Ⅳ期的胰腺癌(P<0.05);而cyclinD1和CD K4则相反(P<0.05)。p21W AF1的表达和cyclinD1、CDK4的表达呈明显的负相关(相关系数分别为r=-0.340,P<0.05和r=-0.571,P<0.01);cyclinD1和CDK4的表达则呈明显的正相关(r=0.450,P<0.01)。结论:p21W A F1的缺失表达和cyclinD1、CD K4的过表达在胰腺癌的发生、发展过程中起重要的协同作用。三种蛋白质主要以p21W AF1/cyclinD1/CDK4通路的方式作用于细胞的转化,参与肿瘤的形成。 展开更多
关键词 胰腺肿瘤 蛋白质p21WAF1 蛋白质cyclinD1 蛋白质cdk4 免疫组织化学
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cyclin D1、CDK4在肺癌中的表达 被引量:4
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作者 王华新 唐建武 +3 位作者 周春辉 孙雷 李连宏 郑仁恕 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 2003年第3期326-327,共2页
关键词 CYCLIN D1 cdk4 肺癌 基因表达 基因扩增 组织学
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9-顺-维甲酸对肺腺癌细胞cyclin D1、cdk4转录的影响 被引量:3
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作者 任桂杰 刘志方 +11 位作者 丁磊 胡国强 胡晓燕 田克立 于雪艳 任桂杰 刘志方 丁磊 胡国强 胡晓燕 田克立 于雪艳 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期359-362,共4页
目的:检测9-顺-维甲酸处理前后人肺腺癌细胞株PG、A_(549)、SPC-A_1的cyclinD1、cdk4转录水平的变化,探讨9-顺-维甲酸抑制肺腺癌细胞生长的分子机制。方法:采用相对定量逆转录PCR方法,分析细胞周期因子cyclinD1、cdk4转录的变化。结果:9... 目的:检测9-顺-维甲酸处理前后人肺腺癌细胞株PG、A_(549)、SPC-A_1的cyclinD1、cdk4转录水平的变化,探讨9-顺-维甲酸抑制肺腺癌细胞生长的分子机制。方法:采用相对定量逆转录PCR方法,分析细胞周期因子cyclinD1、cdk4转录的变化。结果:9-顺-维甲酸既可以降低PG、A_(549)的cyclinD1转录(P<0.01),又可以降低PG、SPC-A_1的cdk4的转录(P<0.01或P<0.05)。结论:9-顺-维甲酸对肺腺癌细胞的生长抑制作用,与其调控细胞周期因子cyclinD1、cdk4的表达密切相关。 展开更多
关键词 维甲酸 肺肿瘤 细胞周期蛋白D1 cdk4
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