拮抗CC趋化因子受体5信号诱导肿瘤细胞凋亡并调节肿瘤微环境抑制肿瘤生长 被引量：1

1

作者 何伟 刘丽萍 +3 位作者 卓静薇 张小冬 杨通 冯巨滨 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第9期1204-1210,共7页

目的探索拮抗CC趋化因子受体5(CCR5)信号通路对肿瘤生长和肿瘤微环境的影响。方法采用CCK8细胞毒试验研究CCR5选择性拮抗剂Maraviroc体外对小鼠Lewis肺腺癌细胞增殖的影响,并运用流式细胞术和RT-PCR检测肿瘤细胞凋亡和Caspase 8基因的... 目的探索拮抗CC趋化因子受体5(CCR5)信号通路对肿瘤生长和肿瘤微环境的影响。方法采用CCK8细胞毒试验研究CCR5选择性拮抗剂Maraviroc体外对小鼠Lewis肺腺癌细胞增殖的影响,并运用流式细胞术和RT-PCR检测肿瘤细胞凋亡和Caspase 8基因的表达。然后采用免疫荧光组织化学染色法研究了Maraviroc对小鼠体内肿瘤生长和肿瘤微环境中CD4^(+)和CD8^(+)以及Foxp3^(+)细胞比例的影响。结果拮抗CCR5信号在体内外均能够抑制癌细胞的生长。体外研究发现:CCR5拮抗剂可通过增强凋亡基因Caspase 8表达而诱导肿瘤细胞凋亡。在小鼠体内,CCR5拮抗剂可明显增加肿瘤微环境中CD4^(+)和CD8^(+)细胞的浸润而减少Foxp3^(+)细胞的浸润。结论拮抗CCR5信号可能通过诱导肿瘤细胞凋亡,逆转免疫抑制性肿瘤微环境而抑制肿瘤生长。 展开更多

关键词 CC趋化因子受体5 肿瘤微环境 凋亡 调节性T细胞

在线阅读 下载PDF 职称材料

趋化因子受体CCR5的研究进展 被引量：13

2

作者 朱长斌 蒋子恺 +1 位作者 程枫 钱关祥 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期809-814,共6页

CCR5为趋化因子CC受体家族成员,属7次跨膜G蛋白耦联受体,配体为CCL3(MIP-1α)、CCL4(MIP-1β)、CCL5(RANTES)。CCR5主要表达于单核/巨噬细胞和淋巴细胞,与其配体介导CCR5+免疫细胞的趋化、募集过程。因此,多种免疫性疾病的发生和发展过... CCR5为趋化因子CC受体家族成员,属7次跨膜G蛋白耦联受体,配体为CCL3(MIP-1α)、CCL4(MIP-1β)、CCL5(RANTES)。CCR5主要表达于单核/巨噬细胞和淋巴细胞,与其配体介导CCR5+免疫细胞的趋化、募集过程。因此,多种免疫性疾病的发生和发展过程均有CCR5参与。CCR5是人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)入侵时的重要辅助受体,而在肿瘤细胞和各类肿瘤相关间质细胞的表面也可见其表达,并介导肿瘤增殖、浸润等多种生物学过程。随着相关研究技术的发展,进一步加深了对CCR5的结构、功能、信号通路及其在相关疾病中的作用的认识。 展开更多

关键词 趋化因子受体 CCR5 免疫性疾病 肿瘤

在线阅读 下载PDF 职称材料

趋化因子受体CCR5亲合短肽的筛选 被引量：4

3

作者 王芳宇 张添元 +4 位作者 罗进贤 李瑞芳 甘菁菁 官文俊 肖凡 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第7期636-641,共6页

趋化因子受体5(CCR5)是HIV-1与宿主细胞结合的辅助因子之一,其功能缺失或被CCR5拮抗剂封闭则会阻止HIV-1感染细胞.为得到与CCR5特异结合的肽类拮抗剂,采用噬菌体展示技术,以稳定表达CCR5的CHO细胞(CHO/CCR5)作为靶标,通过噬菌体随机12... 趋化因子受体5(CCR5)是HIV-1与宿主细胞结合的辅助因子之一,其功能缺失或被CCR5拮抗剂封闭则会阻止HIV-1感染细胞.为得到与CCR5特异结合的肽类拮抗剂,采用噬菌体展示技术,以稳定表达CCR5的CHO细胞(CHO/CCR5)作为靶标,通过噬菌体随机12肽库筛选与CCR5特异结合的多肽;经过四轮筛选后,挑选20个阳性噬菌体克隆进行测序,从中得到11个含有AFDWTFVPSLIL序列的小分子肽.含该序列的噬菌体能与抗人CCR5单抗(2D7)竞争性结合CCR5,且合成肽AFDWTFVPSLIL对趋化因子RANTES与CHO/CCR5的结合具有明显的抑制作用,初步证明该小肽与CCR5具有特异性结合作用. 展开更多

关键词 噬菌体展示 肽 筛选 人趋化因子受体5(CCR5) CHO细胞

在线阅读 下载PDF 职称材料

趋化因子受体CCR3、CCR5和CXCR3与自然流产的相关性 被引量：6

4

作者 姜培娟 林其德 +2 位作者 鲍世民 赵爱民 肖世金 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1535-1540,共6页

目的探讨外周血、脾脏、胸腺趋化因子受体CCR3、CCR5、CXCR3与自然流产的关系。方法用双标记流式细胞分析技术检测自然流产模型组小鼠(CBA/J×DBA/2,n=14)、正常妊娠模型组小鼠(CBA/J×BALB/c,n=13)和正常非孕组小鼠(CBA/J,n=11... 目的探讨外周血、脾脏、胸腺趋化因子受体CCR3、CCR5、CXCR3与自然流产的关系。方法用双标记流式细胞分析技术检测自然流产模型组小鼠(CBA/J×DBA/2,n=14)、正常妊娠模型组小鼠(CBA/J×BALB/c,n=13)和正常非孕组小鼠(CBA/J,n=11)外周血、脾脏以及胸腺中CD4+T细胞CCR3、CCR5和CXCR3这三类趋化因子受体的表达。结果自然流产模型组外周血CD4+T细胞CCR3的表达率低于正常妊娠模型组(P<0.01),CCR5和CXCR3高于正常妊娠模型组(P<0.05,P<0.01);但三个指标与正常非孕组相比,差异均无统计学意义(P>0.05)。自然流产模型组脾脏CD4+T细胞CCR3的表达率低于正常妊娠模型组(P<0.01),高于正常非孕组(P<0.05);而CCR5和CXCR3高于正常妊娠模型组(P<0.05),但与正常非孕组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。自然流产模型组胸腺CD4+T细胞CCR3的表达率低于正常妊娠模型组(P<0.05),高于正常非孕组(P<0.01);而CXCR3的表达率高于正常妊娠模型组(P<0.05),但与正常非孕组相比,差异无统计学意义(P>0.05);CCR5与其他两组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论CD4+T细胞上CCR3、CCR5和CXCR3的表达异常可能在自然流产的发病中起作用。 展开更多

关键词 趋化因子受体 CCR3 CCR5 CXCR3 CD4^+ T细胞 自然流产

在线阅读 下载PDF 职称材料

趋化因子5及其受体CCR5与糖尿病并发症 被引量：17

5

作者 李桂林 梁尚栋 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1333-1337,共5页

趋化因子是一组能够趋化细胞定向移动的小分子细胞因子,参与白细胞迁移的调控,在炎症中诱导性表达,与炎症过程密切相关,最初的研究主要局限于免疫系统。近几年来研究发现,趋化因子不仅参与糖尿病的炎症过程,而且在糖尿病并发症的发生发... 趋化因子是一组能够趋化细胞定向移动的小分子细胞因子,参与白细胞迁移的调控,在炎症中诱导性表达,与炎症过程密切相关,最初的研究主要局限于免疫系统。近几年来研究发现,趋化因子不仅参与糖尿病的炎症过程,而且在糖尿病并发症的发生发展中发挥重要的调节作用。该文主要针对趋化因子5及其受体CCR5在糖尿病并发症中的作用及相关机制的研究予以综述,以便深入理解趋化因子与糖尿病的关系,为进一步的研究提供帮助。 展开更多

关键词 趋化因子5 趋化因子受体5 炎症 糖尿病 糖尿病肾病 糖尿病心血管病

在线阅读 下载PDF 职称材料

趋化因子受体CCR5及CXCR4在HIV-1感染中的作用 被引量：4

6

作者 孙利 张久聪 +1 位作者 白雪帆 孙永涛 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期508-510,共3页

关键词 趋化因子受体 HIV CXCR4 CCR5

在线阅读 下载PDF 职称材料

骨癌痛大鼠脊髓背角趋化因子受体5的表达变化 被引量：4

7

作者 杭黎华 束薇薇 +3 位作者 罗红 陈远丰 陈正 邵东华 《中国疼痛医学杂志》 CAS CSCD 2015年第7期495-498,共4页

目的：探讨骨癌痛大鼠脊髓背角趋化因子受体5（CC chemokine receptor 5,CCR5）表达的变化。方法：雌性SD大鼠32只,体重150～180 g,采用随机数字表法,将其分为2组（n=16）：对照组（C组）和骨癌痛组（BCP组）。采用左胫骨骨髓腔内注入Wa... 目的：探讨骨癌痛大鼠脊髓背角趋化因子受体5（CC chemokine receptor 5,CCR5）表达的变化。方法：雌性SD大鼠32只,体重150～180 g,采用随机数字表法,将其分为2组（n=16）：对照组（C组）和骨癌痛组（BCP组）。采用左胫骨骨髓腔内注入Walker 256细胞的方法制备胫骨癌痛模型。行为学（n=8）：于术前1 d和术后1、3、6、9、12、15 d测定各组大鼠左后肢压爪缩爪阈值（paw withdrawal pressure threshold,PWPT）;于术前1 d及术后15 d,行大鼠左胫骨X线摄片检查。Real-time PCR（n=4）：术前1 d和术后15 d,测定各组大鼠左侧脊髓背角CCR5 m RNA的表达。Western blot（n=4）：术前1 d和术后15 d,测定各组大鼠左侧脊髓背角CCR5蛋白的表达。结果：行为学：与C组相比,术后6～15 d BCP组PWPT明显降低;与术前1 d比较,BCP组术后6～15 d PWPT呈进行性降低。与术前1 d比较,术后15 d BCP大鼠左胫骨X线检查显示有明显的骨皮质破坏及骨小梁缺损。Real-time PCR：与术前1 d及C组比较,BCP组术后15 d左侧脊髓背角CCR5 m RNA表达明显增加。Western blot：与术前1 d及C组比较,BCP组术后15 d左侧脊髓背角CCR5蛋白的表达也显著增加。结论：骨癌痛大鼠脊髓背角CCR5 m RNA及蛋白的表达上调,该变化可能参与了骨癌痛的形成和维持。 展开更多

关键词 骨癌痛 趋化因子受体5 脊髓

在线阅读 下载PDF 职称材料

IV-1协同受体CXCR4、CCR5及相关趋化因子SDF-1在胎盘的表达 被引量：2

8

作者 吴霞 李大金 +2 位作者 袁敏敏 王明雁 孟毅 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第9期622-628,共7页

目的 :研究HIV 1协同受体CXCR4、CCR5及CXCR4的特异性配体SDF 1在人胎盘组织的表达 ,探索HIV 1子宫内垂直传播的分子机制。方法 :半定量RT PCR检测早、中、晚孕期胎盘及早孕滋养细胞CXCR4、CCR5mRNA水平 ;免疫组化和免疫细胞化学检测早... 目的 :研究HIV 1协同受体CXCR4、CCR5及CXCR4的特异性配体SDF 1在人胎盘组织的表达 ,探索HIV 1子宫内垂直传播的分子机制。方法 :半定量RT PCR检测早、中、晚孕期胎盘及早孕滋养细胞CXCR4、CCR5mRNA水平 ;免疫组化和免疫细胞化学检测早孕胎盘及原代培养滋养细胞CXCR4、CCR5蛋白表达 ;原位杂交及免疫组化分析SDF 1在早孕胎盘的表达 ;ELISA测定滋养细胞SDF 1的动态分泌水平。结果 :各孕期胎盘表达CXCR4及CCR5mRNA ;CXCR4蛋白定位于滋养细胞 ,而CCR5蛋白定位于绒毛基质中。滋养细胞可转录并翻译SDF 1,且能分泌可溶性SDF 1。结论 :滋养细胞同时表达CXCR4及SDF 1,SDF 1可能通过降调CXCR4而拮抗X4 HIV 1感染胎儿细胞 ;R5 HIV 1或许能通过滋养层裂隙感染CCR5 + 基质细胞和 或Hofbauer细胞 ,从而发生子宫内垂直传播。 展开更多

关键词 HIV-1 子宫内垂直传播 趋化因子 趋化因子受体 滋养细胞 胎盘 CXCR4 CCR5 艾滋病

在线阅读 下载PDF 职称材料

糖皮质激素治疗对ITP患者外周血趋化因子受体CCR3、CCR5、CXCR3表达的影响 被引量：7

9

作者 赵霞 杨倩 +2 位作者 刘志 何高燕 肖淑欣 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第15期1883-1886,共4页

原发免疫性血小板减少症(primary immune thrombocytopenia,ITP)是临床最常见的自身免疫性出血性疾病[1-2]。研究证明,慢性ITP是一种以Th1细胞异常聚集为特征的Th1优势性自身免疫性疾病[3-4]。Th1和Th2细胞分别表达不同的趋化因子受体,... 原发免疫性血小板减少症(primary immune thrombocytopenia,ITP)是临床最常见的自身免疫性出血性疾病[1-2]。研究证明,慢性ITP是一种以Th1细胞异常聚集为特征的Th1优势性自身免疫性疾病[3-4]。Th1和Th2细胞分别表达不同的趋化因子受体,并与不同的趋化因子结合,其中Th1细胞优势性表达CXCR3、CCR5,Th2细胞优势性表达CCR3,从而调控Th1和Th2细胞活化与极化[5]。在CD4+T淋巴细胞表面,以上趋化因子受体可作为区分Th1和Th2细胞的标志物[6]。尽管目前ITP发病机制的研究较多,但多数是基于混合淋巴细胞培养的研究,本文旨在研究CCR3、CCR5、CXCR3在ITP患者CD4+T淋巴细胞表面的表达情况及其临床意义。 展开更多

关键词 CXCR3 原发免疫性血小板减少症 CCR3 自身免疫性疾病 CCR5 趋化因子受体 混合淋巴细胞培养 ITP

在线阅读 下载PDF 职称材料

趋化因子受体5基因启动子单核苷酸多态性与HIV易感性关系的Meta分析 被引量：1

10

作者 朱文昌 聂军 +3 位作者 李建栋 王云芸 陈清 俞守义 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2012年第11期1785-1787,共3页

目的:探讨趋化因子受体5(CCR5)基因启动子单核苷酸多态性(SNPs)与HIV易感性的关系。方法:在Pubmed等数据库检索有关CCR5基因启动子SNPs与HIV易感性的病例对照研究,选取文献,提取相关数据,用Stata10.0对数据进行Meta分析。结果:按照纳入... 目的:探讨趋化因子受体5(CCR5)基因启动子单核苷酸多态性(SNPs)与HIV易感性的关系。方法:在Pubmed等数据库检索有关CCR5基因启动子SNPs与HIV易感性的病例对照研究,选取文献,提取相关数据,用Stata10.0对数据进行Meta分析。结果:按照纳入和排除标准,共纳入8个病例对照研究,病例组共983例,对照组共1274例。分析的CCR5基因启动子SNPs位点共4个(59029A/G、59353T/C、59356C/T和59402A/G)。59029A/G和59353T/C位点的研究间异质性较小,使用固定效应模型。59029G等位突变的合并OR值及其95%CI是1.07(0.90～1.07),59353C等位突变合并的OR值及其95%CI是0.95(0.81～1.11)。59356C/T和59402A/G位点的研究间异质性较大,使用随机效应模型。59356T等位突变的合并OR值及其95%CI是1.34(0.86～2.11),59402G等位突变合并的OR值及其95%CI是0.88(0.63～1.23)。结论:CCR5基因启动子的SNPs与HIV的易感性可能没有关系。 展开更多

关键词 HIV 趋化因子受体5 启动子 单核苷酸多态性 META分析

在线阅读 下载PDF 职称材料

CC趋化因子受体5在滤泡状甲状腺癌中的表达 被引量：1

11

作者 弓雪莲 郭葆玉 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期701-704,共4页

目的:研究CC趋化因子受体5(CCR5)在滤泡状甲状腺癌中的表达,并检测血清中CCR5配体的含量,为进一步探讨CCR5在滤泡状甲状腺癌演进和转移中的作用奠定基础。方法:采用免疫组化方法检测15例滤泡状甲状腺癌患者以及17例甲状腺腺瘤患者,12例... 目的:研究CC趋化因子受体5(CCR5)在滤泡状甲状腺癌中的表达,并检测血清中CCR5配体的含量,为进一步探讨CCR5在滤泡状甲状腺癌演进和转移中的作用奠定基础。方法:采用免疫组化方法检测15例滤泡状甲状腺癌患者以及17例甲状腺腺瘤患者,12例癌旁甲状腺组织中CCR5的表达情况,同时应用酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测血清中CCL3、CCL4、CCL5的浓度。结果:滤泡状甲状腺癌组织中,CCR5表达阳性率(11/15)明显高于甲状腺腺瘤和正常甲状腺组织(P<0.01)。滤泡状甲状腺癌患者血清中CCL3、CCL5的浓度显著高于对照组(P<0.05)。结论:滤泡状甲状腺癌组织中存在着CCR5高表达,且外周血CCL3,CCL5浓度明显升高,提示CCR5可能在滤泡状甲状腺癌发病进程中发挥着重要的作用。 展开更多

关键词 CC趋化因子受体5 甲状腺肿瘤 腺癌 滤泡性 CCL3 CCL5

在线阅读 下载PDF 职称材料

小鼠β趋化因子受体CCR_5基因的克隆 被引量：3

12

作者 郭葆玉 久野耕嗣 +2 位作者 向田直史 原田明久 松岛纲治 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第3期231-234,共4页

目的：克隆小鼠β趋化因子相关的受体并研究其表达。方法：使用共同引物用ＲＴ－ＰＣＲ方法，从ＢＡＬＢ／ｃ小鼠腹腔巨噬细胞的Ｐｏｌｙ（Ａ）＋ＲＮＡ中扩增出一０．５ｋｂｃＤＮＡ，再根据其序列，设计一特异引物，用Ｍａｒａｔｈｏ... 目的：克隆小鼠β趋化因子相关的受体并研究其表达。方法：使用共同引物用ＲＴ－ＰＣＲ方法，从ＢＡＬＢ／ｃ小鼠腹腔巨噬细胞的Ｐｏｌｙ（Ａ）＋ＲＮＡ中扩增出一０．５ｋｂｃＤＮＡ，再根据其序列，设计一特异引物，用ＭａｒａｔｈｏｎＰＣＲ法扩增得一２．８ｋｂｃＤＮＡ，用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ方法检测分析该基因，Ｎｏｒｔｈｅｒｎ方法分析其表达。结果：成功克隆出小鼠ＣＣＲ５ｃＤＮＡ，其开放阅读框为１０６５ｂｐ，编码３５５个氨基酸，与人巨噬细胞炎性趋化蛋白５受体（ｈｕＭＩＰ－５Ｒ）同源性为８１％，Ｓｏｕｔｈｅｒｎ结果显示该基因为单拷贝，Ｎｏｒｔｈｅｒｎ结果显示小鼠巨噬细胞、脾脏等有表达。结论：克隆得到小鼠ＣＣＲ５基因，可作为研究ＨＩＶ－１感染机制及ＡＩＤＳ治疗有价值的实验模型。 展开更多

关键词 受体 β趋化因子 CCR5基因 基因克隆

在线阅读 下载PDF 职称材料

人趋化因子受体5N端膜外第一襻的克隆与表达及其特异抗体的制备

13

作者 张莉 郭葆玉 +4 位作者 苗红 邱磊 张冉 道书艳 卞广兴 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第11期1201-1203,共3页

目的:获得人β趋化因子受体5(huCCR5)N端膜外第一襻基因片段的序列,并构建表达huCCR5 N端膜外第一襻的重组体,实现其有效表达及其特异抗体的鉴定。方法:计算机分析比较趋化因子超家族部分成员,定位超家族中同源性最低的N端膜外第一襻结... 目的:获得人β趋化因子受体5(huCCR5)N端膜外第一襻基因片段的序列,并构建表达huCCR5 N端膜外第一襻的重组体,实现其有效表达及其特异抗体的鉴定。方法:计算机分析比较趋化因子超家族部分成员,定位超家族中同源性最低的N端膜外第一襻结构域。PCR扩增出该结构域114个核苷酸序列基因片段,构建融合表达载体pGEX-IN/NR5,经测序确定基因片段正确后,在大肠杆菌中表达。表达产物经纯化后免疫新西兰兔。ELISA鉴定CCR5 N端肽段特异性抗体。结果:序列测定结果与文献报道一致,经计算机作图分析ELISA实验数据证明得到抗huCCR5 N端肽段的特异性抗体。结论:本方法采用pGEX-lN在大肠杆菌DE3中有效表达CCR5 N端膜外第一襻基因片段,并实现了对其特异性抗体的鉴定,为进一步的研究奠定基础。 展开更多

关键词 人趋化因子受体5 基因克隆 融合表达 抗体 制备

在线阅读 下载PDF 职称材料

沉默CC型趋化因子受体5对人乳腺癌细胞黏附及迁移的影响

14

作者 林森森 王从品 +3 位作者 万淑颍 孙立 袁胜涛 张陆勇 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期362-367,共6页

构建CC型趋化因子受体5(CCR5)基因shRNA的真核表达载体,探讨沉默CCR5对乳腺癌细胞黏附与迁移能力的影响。在多种人乳腺癌细胞中检测CCR5的基因表达,选择CCR5表达较高的MDA-MB-231细胞做为基因沉默的研究对象;设计并合成2对靶向人CCR5基... 构建CC型趋化因子受体5(CCR5)基因shRNA的真核表达载体,探讨沉默CCR5对乳腺癌细胞黏附与迁移能力的影响。在多种人乳腺癌细胞中检测CCR5的基因表达,选择CCR5表达较高的MDA-MB-231细胞做为基因沉默的研究对象;设计并合成2对靶向人CCR5基因的RNA沉默序列,连入基因沉默载体pSilencer 2.1-U6中,构建沉默质粒shCCR5-1和shCCR5-2,定量PCR和蛋白印迹法检测CCR5基因沉默的效率;以细胞黏附实验和Transwell趋化小室实验分别检测沉默CCR5对MDA-MB-231细胞黏附和迁移能力的影响。结果表明,沉默CCR5可以抑制MDA-MB-231细胞的黏附能力,同时显著降低MDA-MB-231细胞的迁移和趋化。 展开更多

关键词 CC型趋化因子受体5 CCR5 基因沉默载体pSilencer 2 1-U6 乳腺癌 黏附与迁移

在线阅读 下载PDF 职称材料

人趋化因子受体5基因的克隆及原核表达

15

作者 赵国新 靳静 +3 位作者 冯龙 马云云 卫艳萍 赵国强 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2008年第5期911-915,共5页

目的:构建人趋化因子受体5(CCR5)原核表达载体并在大肠杆菌中进行表达。方法:从健康人外周血单个核细胞提取总RNA,以RT-PCR获得CCR5基因全长1059bp的完整编码序列;将其克隆入载体pGEM-T中,经限制性内切酶和菌落PCR分析并测序;再将阳性... 目的:构建人趋化因子受体5(CCR5)原核表达载体并在大肠杆菌中进行表达。方法:从健康人外周血单个核细胞提取总RNA,以RT-PCR获得CCR5基因全长1059bp的完整编码序列;将其克隆入载体pGEM-T中,经限制性内切酶和菌落PCR分析并测序;再将阳性重组子中的CCR5片段与表达载体pQE80L连接并转化大肠杆菌DH5α,进行诱导表达,对表达产物进行纯化和鉴定。结果:SDS-PAGE和Western Blot分析表明,在30℃以IPTG诱导获得相对分子质量为41000的CCR5重组蛋白表达带,诱导4h后此蛋白表达量约为全菌总蛋白的25%。结论:成功获得人CCR5重组蛋白。 展开更多

关键词 趋化因子受体5 基因克隆 鉴定

在线阅读 下载PDF 职称材料

人趋化因子受体5基因5′侧翼区功能分析

16

作者 靳静 赵国新 +3 位作者 冯龙 马云云 卫艳萍 赵国强 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2008年第5期915-917,共3页

目的:分析人趋化因子受体5(CCR5)基因5′侧翼区的调控序列。方法:构建CCR5基因不同长度5′侧翼区的萤光素酶报告基因载体,分别转染入Jurkat细胞中,检测分析其萤光素酶活性。结果:CCR5基因5′侧翼区-1006bp至-1bp、-804bp至-1bp、-586bp... 目的:分析人趋化因子受体5(CCR5)基因5′侧翼区的调控序列。方法:构建CCR5基因不同长度5′侧翼区的萤光素酶报告基因载体,分别转染入Jurkat细胞中,检测分析其萤光素酶活性。结果:CCR5基因5′侧翼区-1006bp至-1bp、-804bp至-1bp、-586bp至-1bp和-478bp至-1bp区段的pGL3重组质粒在Jurkat细胞中能表现出明显的萤光素酶活性。结论:CCR5基因5′侧翼区-478bp至-1bp序列中存在基因转录的主要上调元件。 展开更多

关键词 趋化因子受体5 5’侧翼区 报告基因

在线阅读 下载PDF 职称材料

人单核细胞趋化因子受体5(CCR5)N-端膜外第一襻特异抗体F(ab′)_2的制备及鉴定

17

作者 张莉 郭葆玉 +1 位作者 苗红 张冉 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期236-239,共4页

目的 :研究人 β趋化因子受体 5 (huCCR5 )NH2 端膜外第一襻特异抗体F(ab′) 2 的制备及鉴定方法。方法 :计算机分析定位超基因家族中同源顺序最低的结构域NH2 端膜外第一襻 ,PCR扩增出该基因片段后克隆到原核表达载体pGEX 1N中 ,经测... 目的 :研究人 β趋化因子受体 5 (huCCR5 )NH2 端膜外第一襻特异抗体F(ab′) 2 的制备及鉴定方法。方法 :计算机分析定位超基因家族中同源顺序最低的结构域NH2 端膜外第一襻 ,PCR扩增出该基因片段后克隆到原核表达载体pGEX 1N中 ,经测序鉴定正确后 ,在E coli中表达 ,纯化后免疫新西兰白兔。经A蛋白 SepharoseCL 4B亲和层析纯化后 ,用胃蛋白酶消化IgG ,经S 2 0 0凝胶过滤柱分离制备F(ab′) 2 。结果 :经还原和非还原聚丙烯酰胺凝胶电泳和ELISA阻断实验分析证明得到抗huCCR5NH2 端的特异性抗体。结论 :这一简捷快速的特定功能结构域抗体F(ab′) 2 的制备方法 ,对研究该基因在体内的表达及生物学功能提供了重要的实验材料 ,同时也对超基因家族中亚家族特异抗体研制提供了一种研究思路和方法。 展开更多

关键词 人单核细胞趋化因子受体5 融合蛋白 抗体 制备

在线阅读 下载PDF 职称材料

法舒地尔联合过表达趋化因子受体5的间充质干细胞对实验性自身免疫性脑脊髓炎的治疗作用

18

作者 李艳花 闫亚平 +4 位作者 刘晓琴 席国萍 宋国斌 肖保国 马存根 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期35-41,共7页

目的·研究法舒地尔(fasudil)联合过表达趋化因子受体5(C-C chemokine receptor type 5,CCR5)的间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)的治疗效果... 目的·研究法舒地尔(fasudil)联合过表达趋化因子受体5(C-C chemokine receptor type 5,CCR5)的间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)的治疗效果。方法·小鼠经髓鞘少突胶质细胞糖蛋白第35~55位肽片段(myelin oligodendrocyte glycoprotein peptide fragment 35~55,MOG35-55)免疫后,随机分为EAE模型组(腹腔注射生理盐水)、fasudil干预组(腹腔注射fasudil)、CCR5-MSCs干预组(鼻腔给予CCR5-MSCs)、fasudil联合CCR5-MSCs干预组(鼻腔给予CCR5-MSCs,腹腔注射fasudil),每组8只。MOG35-55免疫后,每日记录EAE临床症状评分。于免疫后第28日处死小鼠,固蓝染色观察髓鞘完整性,免疫荧光染色分析脊髓组织中神经干细胞和少突胶质前体细胞的产生,Western blotting检测脊髓组织中神经营养因子的表达。结果·与其他3组相比,fasudil联合CCR5-MSCs干预组EAE临床症状评分降低(P=0.000,P=0.007,P=0.005),脱髓鞘减轻(P=0.000,P=0.009,P=0.008),脊髓组织中神经干细胞和少突胶质前体细胞的产生增多(均P=0.000),脑源性神经营养因子、胶质细胞源性神经营养因子、神经生长因子和神经营养因子3的表达增加(均P=0.000)。结论·Fasudil联合CCR5-MSCs对EAE的治疗效果较fasudil或CCR5-MSCs单独治疗更为显著,可能与其促进髓鞘再生和增加神经营养因子产生相关。 展开更多

关键词 法舒地尔 趋化因子受体5 间充质干细胞 实验性自身免疫性脑脊髓炎

在线阅读 下载PDF 职称材料

季节性接触性皮炎患者外周血淋巴细胞趋化因子受体5表达与血清总IgE水平关系的研究

19

作者 何静 毕志刚 刘彦群 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期4-6,共3页

为探讨外周血淋巴细胞趋化因子受体 5(CCR5)在季节性接触性皮炎发病中的作用，检测了 22例季节性接触性皮炎患者， 25例非季节性变应性接触性皮炎患者及 20名健康对照外周血淋巴细胞在培养前、后 CCR5的表达 (流式细胞仪法 )及血清总 Ig... 为探讨外周血淋巴细胞趋化因子受体 5(CCR5)在季节性接触性皮炎发病中的作用，检测了 22例季节性接触性皮炎患者， 25例非季节性变应性接触性皮炎患者及 20名健康对照外周血淋巴细胞在培养前、后 CCR5的表达 (流式细胞仪法 )及血清总 IgE水平 (IRMA法 )。结果表明：季节组的血清总 IgE阳性率高于非季节组 (P< 0.01)；季节组的 CD4＋ CCR5＋细胞在培养前低于对照组 (P< 0.01)，而在培养后则高于对照组 (P< 0.01)，但低于非季节组 (P< 0.05)；季节组和非季节组的 CD4＋ CCR5＋细胞在培养后均高于培养前 (均 P< 0.01)。提示季节性接触性皮炎患者的淋巴细胞向 Th1方向分化的能力可能减弱，并可能与 IgE介导的迟发相反应有关。 展开更多

关键词 季节性接触性 流式细胞计数 趋化因子受体5 CCR5 总IGE

在线阅读 下载PDF 职称材料

趋化因子受体-5相关的心脏移植物血管病变的研究进展

20

作者 姜兆磊 何毅 梅举 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1775-1777,共3页

心脏移植物血管病变(CAV)是影响心脏移植物长期存活的主要因素,也是导致受者在术后1年死亡或再次心脏移植的主要原因。目前,普遍认为CAV的发病机制主要是免疫性因素和非免疫性因素共同参与的血管内皮损伤,使血管内膜增厚,最终引起移植... 心脏移植物血管病变(CAV)是影响心脏移植物长期存活的主要因素,也是导致受者在术后1年死亡或再次心脏移植的主要原因。目前,普遍认为CAV的发病机制主要是免疫性因素和非免疫性因素共同参与的血管内皮损伤,使血管内膜增厚,最终引起移植心脏缺血。趋化因子及其受体共同参与调控移植物局部的免疫应答。其中,趋化因子受体-5(CCR5)可能在CAV发病机制中起着重要的作用,但其调控CAV的机制目前尚不明确。迄今,CAV的治疗方法仍较为局限;但随着对CCR5研究的不断深入,出现了一些新的研究成果,为CAV的治疗和预防提供了新的方向。 展开更多

关键词 心脏移植物血管病变 趋化因子受体-5 免疫应答

在线阅读 下载PDF 职称材料