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^(177)Lu-DTPA-BIS-BIOTIN的制备及正常鼠体内生物分布 被引量：1
1
作者 邓新荣 杜进 罗志福 《核化学与放射化学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期184-188,共5页
研究了DTPA-BIS-BIOTIN的177Lu标记方法,优化了标记条件,并进行了标记物在正常小鼠体内分布实验。在最佳标记条件下(DTPA-BIS-BIOTIN 25μg,标记介质pH=4.5,80℃反应20 min),177Lu-DTPA-BIS-BIOTIN标记率大于99.0%,室温下放置96 h,标记... 研究了DTPA-BIS-BIOTIN的177Lu标记方法,优化了标记条件,并进行了标记物在正常小鼠体内分布实验。在最佳标记条件下(DTPA-BIS-BIOTIN 25μg,标记介质pH=4.5,80℃反应20 min),177Lu-DTPA-BIS-BIOTIN标记率大于99.0%,室温下放置96 h,标记物体外稳定性良好。正常小鼠体内分布实验结果表明,177Lu-DTPA-BIS-BIOTIN在血液中清除快,主要浓集于肝、脾和肾,经肾脏排泄。本研究为进一步采用177Lu-DTPA-BIS-BIOTIN进行肿瘤预定位显像及治疗研究提供了实验基础。 展开更多
关键词 177Lu DTPA-BIS-biotin 放射性标记 生物分布
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生物素靶向显影探针Biotin-S-S-Rhodol对乳腺癌细胞的靶向显影作用
2
作者 吴碧娟 周杏子 +2 位作者 孙婧雯 谭翠雯 吴新荣 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期124-129,共6页
目的对新型生物素靶向显影探针(Biotin-S-S-Rhodol,3a)的靶向显影性能进行分析。方法采用紫外吸收光谱和荧光光谱分析谷胱甘肽(GSH)处理后3a的光谱特性;采用不同浓度GSH处理3a,荧光光谱分析3a对GSH的敏感性;采用流式细胞术和荧光倒置显... 目的对新型生物素靶向显影探针(Biotin-S-S-Rhodol,3a)的靶向显影性能进行分析。方法采用紫外吸收光谱和荧光光谱分析谷胱甘肽(GSH)处理后3a的光谱特性;采用不同浓度GSH处理3a,荧光光谱分析3a对GSH的敏感性;采用流式细胞术和荧光倒置显微镜观察生物素预处理前后MCF-7细胞、MDA-MB-231细胞和Hs 578Bst细胞对3a的摄取率和靶向显影性能;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)初步分析3a对MCF-7细胞、MDA-MB-231细胞和Hs 578Bst细胞的毒性。结果 3a的最强吸收峰在510 nm处,在544 nm处荧光发射信号最强;荧光光谱结果显示随着GSH浓度(0~6 mmol/L)处理浓度提高,544 nm波长处的荧光强度升高;MDA-MB-231、MCF-7细胞对3a的摄取率明显高于Hs 578Bst细胞;3a能实现乳腺癌细胞专一性成像,成像清晰;2~20μmol/L 3a对人正常乳腺细胞无明显毒性,可在一定程度上抑制MCF-7细胞和MDA-MB-231细胞存活。结论 3a能通过生物素介导专一靶向乳腺癌细胞,成像清晰,对正常乳腺细胞毒性极低,有一定的抑制乳腺癌细胞存活作用。 展开更多
关键词 biotin-S-S-Rhodol 生物素 罗丹明 二硫键 靶向显影 乳腺癌
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植物和细菌TurboID邻近蛋白标记方法的建立
3
作者 王芳 邵会茹 +4 位作者 吕林龙 赵点 胡振 吕建珍 姜亮 《生物技术通报》 北大核心 2025年第9期44-53,共10页
【目的】TurboID邻近蛋白标记技术是一种基于生物素连接酶的新型蛋白互作研究技术,具有标记速度快、时空分辨率高和毒性小等优点。目前该技术仍处于逐步推广阶段,并在少数物种中得到应用。通过构建多种代表性物种的TurboID表达系统,评... 【目的】TurboID邻近蛋白标记技术是一种基于生物素连接酶的新型蛋白互作研究技术,具有标记速度快、时空分辨率高和毒性小等优点。目前该技术仍处于逐步推广阶段,并在少数物种中得到应用。通过构建多种代表性物种的TurboID表达系统,评估其在单子叶植物、双子叶植物及原核生物中的标记效能和应用范围。【方法】分别构建在单子叶植物[水稻(Oryza sativa)]、双子叶植物[拟南芥(Arabidopsis thaliana)、番茄(Solanum lycopersicum)、本氏烟草(Nicotiana benthamiana)]和细菌[大肠杆菌(Escherichia coli)]中表达“标签蛋白+TurboID”融合蛋白的载体,并将其转化至相应物种。通过生物素溶液处理转基因材料后提取总蛋白,利用标签蛋白免疫印迹检测融合蛋白的表达情况,并通过生物素免疫印迹检测内源蛋白的标记情况。【结果】在植物中采用泛素启动子、细菌中采用T7启动子驱动表达,实现了“标签蛋白+TurboID”融合蛋白在拟南芥、番茄、烟草、水稻愈伤组织和大肠杆菌中的高效表达。免疫印迹显示融合蛋白表达良好,且经生物素处理后,各系统中均有多种内源蛋白被有效标记,表明所构建的TurboID系统在单子叶植物、双子叶植物及原核生物中均具有良好适用性和推广潜力。【结论】成功在单子叶植物、双子叶植物和细菌中建立了TurboID邻近蛋白标记方法,为复杂蛋白互作网络分析提供了高效、可靠的技术平台。 展开更多
关键词 TurboID 邻近蛋白标记 生物素 生物素连接酶 蛋白互作 拟南芥 水稻
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BA-ELISA法快速检测农产品中阿特拉津残留
4
作者 胡刘岭 金靓怡 +2 位作者 李瑞韩 刘重阳 宋洋 《天津师范大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第2期49-53,共5页
为快速检测阿特拉津在农产品中的残留,基于其单克隆抗体,建立了间接竞争生物素/亲和素酶联免疫法(BA-ELISA).选择黄瓜、玉米、甘蔗作为样品,用乙腈提取3种样品,将得到的提取液经PSA净化后,旋蒸至近干,并用甲醇定容.对提取液作不同倍数... 为快速检测阿特拉津在农产品中的残留,基于其单克隆抗体,建立了间接竞争生物素/亲和素酶联免疫法(BA-ELISA).选择黄瓜、玉米、甘蔗作为样品,用乙腈提取3种样品,将得到的提取液经PSA净化后,旋蒸至近干,并用甲醇定容.对提取液作不同倍数的稀释,以消除复杂基质的影响.采用BA-ELISA法测定样品中的阿特拉津含量,并与气相色谱(GC)法对比.结果显示:最优反应体系中,BA-ELISA法的检测限为0.52±0.13μg/L,灵敏度为12.24±1.28μg/L;添加回收实验中,3种样品的阿特拉津回收率在93.07%~99.67%之间,变异系数在1.5%~6.7%之间,检测时间在1 h左右.该方法的检测结果与GC法基本一致,表明BA-ELISA法可以实现农产品中阿特拉津残留的快速测定. 展开更多
关键词 阿特拉津 快速测定 生物素/亲和素酶联免疫(BA-ELISA)
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盐透析体外组装核小体及检测方法 被引量：2
5
作者 赵宏宇 柴荣 +1 位作者 王成爱 蔡禄 《河南师范大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2014年第1期133-136,共4页
核小体是构成真核生物染色质的基本结构单位,体内研究核小体及染色质结构受到诸多因素限制,体外重构核小体结构是研究与核小体及染色质结构相关课题的一种重要的方法手段.实验将ES1,CS1以及601DNA序列克隆到载体中,通过PCR大量扩增回收... 核小体是构成真核生物染色质的基本结构单位,体内研究核小体及染色质结构受到诸多因素限制,体外重构核小体结构是研究与核小体及染色质结构相关课题的一种重要的方法手段.实验将ES1,CS1以及601DNA序列克隆到载体中,通过PCR大量扩增回收得到目的DNA条带,表达纯化了4种组蛋白且装配成组蛋白八聚体,在盐透析的条件下组装形成核小体结构,利用EB染色以及Biotin标记的方法分析检测了形成核小体的效率.结果显示,在盐透析的条件下,可以有效的组装形成核小体结构,而且随着组蛋白八聚体与DNA的比例增加,核小体的形成效率显著提高.本实验为核小体定位、染色质重塑及组蛋白变体等表观遗传学以及结构生物学领域的研究奠定一定的基础. 展开更多
关键词 核小体定位 组蛋白 biotin标记
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躯体和内脏SP能初级传入神经元的定位研究 被引量：1
6
作者 王亚奇 李继硕(指导) 秦秉志(指导) 《神经解剖学杂志》 CAS 1986年第1期71-78,171,共9页
本文在后根节和脊髓两个水平对躯体(胫神经)和内脏(膀胱)初级传入系统进行同时定性、定位的研究。对后根节选用两种较敏感的双标技术(HRP结合PAP,Biotin-WGA结合免疫荧光)。结果表明,在后根节中被标记的胫神经和膀胱的初级传入神经元均... 本文在后根节和脊髓两个水平对躯体(胫神经)和内脏(膀胱)初级传入系统进行同时定性、定位的研究。对后根节选用两种较敏感的双标技术(HRP结合PAP,Biotin-WGA结合免疫荧光)。结果表明,在后根节中被标记的胫神经和膀胱的初级传入神经元均有一部分同时显示SP样阳性反应。另外在分别切断盆内脏神经和胫神经的两组动物模型上进行脊髓的SP样免疫反应,通过两侧对比,观察到术侧灰质在相当于被切断神经的传入经路及终末区出现SP样反应的“脱落”现象,从而反证出躯体和内脏初级传入纤维中的SP能成分在中枢内的定位分布。本文首次提供了内脏初级传入在中枢内定位与定性相结合的研究结果。 展开更多
关键词 内脏传入神经元 躯体传入神经元 SP样物质 HPR与PAP结合 biotin-WGA 免疫荧光结合 神经切断术 大鼠
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填白鹅幽门部G细胞含5-羟色胺的观察
7
作者 周占祥 邓泽沛 李宝仁 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1989年第S1期79-81,共3页
本实验用3只填白鹅(填饲期28天)和5只自由采食白鹅,经颈动静脉放血处死后,立即将幽门部取出,两端分别保留数毫米肌胃和十二指肠,用无水醋酸的Bouin氏液固定,石蜡包埋,切4μm厚的切片。将部分相邻切片的相邻面朝上分别贴在两张载玻片上,... 本实验用3只填白鹅(填饲期28天)和5只自由采食白鹅,经颈动静脉放血处死后,立即将幽门部取出,两端分别保留数毫米肌胃和十二指肠,用无水醋酸的Bouin氏液固定,石蜡包埋,切4μm厚的切片。将部分相邻切片的相邻面朝上分别贴在两张载玻片上,制成镜像切片。应用Avidin-biotin-peroxidase complex法即ABC法(Hsu S-Met al.,1981)在同一切片上作5-羟色胺和胃泌素的双重免疫组化染色(Tramu et al.,1978),并在镜像切片上分别进行5-羟色胺和胃泌素的免疫组化染色。 展开更多
关键词 G细胞 色胺 胃泌素 幽门部 免疫组化染色 酶复合物 PEROXIDASE 抗生物素蛋白 羊抗兔 biotin
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基因传感器表面两种探针固定法的比较 被引量：16
8
作者 陈鸣 府伟灵 +5 位作者 张波 蒋天伦 俞丽丽 刘明华 俞凡 陈小兵 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期17-19,共3页
目的　比较基因传感器表面两种探针固定法的优劣。方法　分别用巯基固定法及生物素 亲和素固定法将人类乳头瘤病毒 (HumanPapillomaVirus,HPV)的探针固定在基因传感器的金膜表面 ,比较不同探针浓度、不同靶序列浓度下反应所引起的频率... 目的　比较基因传感器表面两种探针固定法的优劣。方法　分别用巯基固定法及生物素 亲和素固定法将人类乳头瘤病毒 (HumanPapillomaVirus,HPV)的探针固定在基因传感器的金膜表面 ,比较不同探针浓度、不同靶序列浓度下反应所引起的频率的变化以及所用的时间。结果　两种固定方法检测靶序列的灵敏度相当。生物素 亲和素法反应所需的时间较短 ,且具有放大效应 ,能结合上更多的探针并检测到更多的靶序列 ,但操作较为繁琐。巯基法操作较为简单 ,但所需的反应时间较长。结论　两种探针固定法各有利弊 ,实际操作中应根据不同的需要选择合适的固定方法。 展开更多
关键词 基因传感器 人类乳头瘤病毒 探针 生物素-亲和素 HPV 巯基法
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生物素对肉仔鸡免疫器官的发育、机体免疫功能和神经内分泌激素的影响 被引量：13
9
作者 于会民 蔡辉益 +2 位作者 常文环 张姝 王金全 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期1006-1013,共8页
将400只1日龄AA肉仔鸡随机分成4个处理,每个处理5个重复,每个重复20只鸡(公母各半);基础日粮为小麦-酪蛋白型日粮,在基础日粮中分别添加0.30、0.90和2.7 mg/kg 3个水平的生物素,包括对照组共4种日粮处理。试验结果表明:(1)添加生物素可... 将400只1日龄AA肉仔鸡随机分成4个处理,每个处理5个重复,每个重复20只鸡(公母各半);基础日粮为小麦-酪蛋白型日粮,在基础日粮中分别添加0.30、0.90和2.7 mg/kg 3个水平的生物素,包括对照组共4种日粮处理。试验结果表明:(1)添加生物素可促进免疫器官的发育,提高其质量指数;提高了血清中新城疫抗体滴度和IgG水平,0.9 mg/kg和2.7 mg/kg处理组的新城疫抗体滴度显著高于对照组和0.3 mg/kg处理组(P<0.05),2.7 mg/kg处理组的IgG水平显著高于对照组(P<0.05);(2)添加生物素显著提高了血液中B淋巴细胞的转化效率(P<0.05)和脾脏中T淋巴细胞(P<0.05)和B淋巴细胞的转化效率(P<0.05);显著降低了血液中表达CD3+的细胞含量(P<0.05),其中2.7 mg/kg处理组极显著低于对照组和0.3 mg/kg处理组(P<0.05);显著降低了脾脏中表达CD3+、CD4+和CD8+的细胞含量(P<0.05),其中2.7 mg/kg处理组显著低于对照组和0.3 mg/kg处理组(P<0.05);(3)添加生物素后,血清甲状腺素T4、三碘甲状原氨酸T3、生长激素和皮质醇水平呈上升趋势(P>0.05)。 展开更多
关键词 肉仔鸡 生物素 免疫器官 免疫功能 T淋巴细胞亚群 神经内分泌激素
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生物素和VB_1在谷氨酸棒杆菌过量合成缬氨酸中的作用 被引量：15
10
作者 杨毅 章志兰 +2 位作者 姜绪林 杜大庆 张星元 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期57-60,65,共5页
通过对谷氨酸棒杆菌突变株AATV341进行生物素和VB1添加量的实验,探讨了生物素和VB1添加量对该菌株菌体质量及缬氨酸产量的影响;同时根据对AATV341进行的胞内外某些特定氨基酸和有机酸检测,研究了这两种维生素对碳架代谢流的分布,尤其是... 通过对谷氨酸棒杆菌突变株AATV341进行生物素和VB1添加量的实验,探讨了生物素和VB1添加量对该菌株菌体质量及缬氨酸产量的影响;同时根据对AATV341进行的胞内外某些特定氨基酸和有机酸检测,研究了这两种维生素对碳架代谢流的分布,尤其是对丙酮酸节点处的代谢流量分布的影响.结果表明,生物素添加量在40μg/L时,菌体质量和缬氨酸在胞外的累积明显提高,谷氨酸在胞外累积降低;VB1的适量添加,可提高缬氨酸在胞外的累积,降低发酵液中乙酸和草酰乙酸的含量. 展开更多
关键词 缬氨酸 谷氨酸棒杆菌 生物素 维生素B1 碳代谢流 草酰乙酸 乙酸
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有机氮源对谷氨酸棒杆菌发酵L-缬氨酸的影响 被引量：11
11
作者 徐庆阳 孙家凯 +3 位作者 吴晓娇 王晶 谢希贤 陈宁 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期12-16,共5页
以L-缬氨酸生产菌谷氨酸棒杆菌XV0505为供试菌株,研究有机氮源对L-缬氨酸发酵的影响,确定了玉米浆代替豆饼水解液作为有机氮源的发酵工艺,降低了发酵成本;考察不同玉米浆浓度对谷氨酸棒杆菌XV0505发酵生产L-缬氨酸过程中生物量、耗糖速... 以L-缬氨酸生产菌谷氨酸棒杆菌XV0505为供试菌株,研究有机氮源对L-缬氨酸发酵的影响,确定了玉米浆代替豆饼水解液作为有机氮源的发酵工艺,降低了发酵成本;考察不同玉米浆浓度对谷氨酸棒杆菌XV0505发酵生产L-缬氨酸过程中生物量、耗糖速率、L-缬氨酸产量、副产物积累及氨消耗等方面影响,确定了玉米浆的适宜添加浓度;考察了玉米浆与生物素不同配比对L-缬氨酸分批发酵过程的影响,确定了最适生物素添加浓度。与原工艺相比,新工艺的菌体生物量及产酸提高了13.2%和18.5%。 展开更多
关键词 有机氮源 L-缬氨酸 玉米浆 生物素
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四种维生素对杜氏盐藻生长的影响 被引量：14
12
作者 汪本凡 唐欣昀 +3 位作者 赵良侠 曹媛媛 甘旭华 叶霁 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期400-402,共3页
关键词 杜氏盐藻 维生素B1 维生素B6 维生素B12 维生素H 促长效应
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婴儿配方食品中生物素测定 被引量：22
13
作者 殷晓红 杨金宝 +3 位作者 张潇宇 王旻 房玉国 王淼 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2002年第5期117-119,共3页
植物乳杆菌（ATCC NO.8014）对生物素有很高的灵敏性,利用这种特异性,可以定量地测出奶基婴幼儿食品中的生物素的含量。为了达到定量测定的目的,在供繁殖试验菌株所用培养基中供给除生物素以外的所有营养成分,这样植物乳杆菌的生长就会... 植物乳杆菌（ATCC NO.8014）对生物素有很高的灵敏性,利用这种特异性,可以定量地测出奶基婴幼儿食品中的生物素的含量。为了达到定量测定的目的,在供繁殖试验菌株所用培养基中供给除生物素以外的所有营养成分,这样植物乳杆菌的生长就会同标准溶液及未知测定溶液中的生物素的水平相对应。结果表明,本方法的重现性好,变异系数为3.34％,平均回收率为97％。 展开更多
关键词 婴儿配方食品 生物素 测定 微生物法
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饲料中生物素的高效液相色谱测定 被引量：21
14
作者 余林梁 黄晓兰 吴惠勤 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期102-104,共3页
介绍了用液相色谱测定饲料中生物素的方法,探讨了流动相中缓冲液、pH值、有机溶剂等对分离的影响,确定的较佳色谱条件:HypersilODS柱,流动相为甲醇-0.1mol·L-1KH2PO4(H3PO4调pH＝3.5)(体积比25∶75),流速1.0mL／min,紫外210nm检测... 介绍了用液相色谱测定饲料中生物素的方法,探讨了流动相中缓冲液、pH值、有机溶剂等对分离的影响,确定的较佳色谱条件:HypersilODS柱,流动相为甲醇-0.1mol·L-1KH2PO4(H3PO4调pH＝3.5)(体积比25∶75),流速1.0mL／min,紫外210nm检测;方法的相对标准偏差在3.5%以内,回收率在92%～102%,检出限为1mg／kg;实验表明该法简便、快速,适应性好;方法应用于饲料样品中生物素的测定,取得了很好的结果。 展开更多
关键词 饲料 生物素 高效液相色谱 测定
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饲料中添加生物素对草鱼幼鱼生长、体成分和血清生化指标的影响 被引量：12
15
作者 吴凡 刘安龙 +3 位作者 文华 蒋明 刘伟 冷向军 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2009年第3期52-56,共5页
在纯化饲料中分别添加生物素0、0.05、0.10、0.20、0.40、0.80、1.60 mg/kg投喂初始质量为(5.92±0.25)g的草鱼(Ctenopharyngodon idellus)幼鱼8周,研究了不同生物素添加量对草鱼幼鱼生长性能、饲料系数、机体营养成分、血清生化指... 在纯化饲料中分别添加生物素0、0.05、0.10、0.20、0.40、0.80、1.60 mg/kg投喂初始质量为(5.92±0.25)g的草鱼(Ctenopharyngodon idellus)幼鱼8周,研究了不同生物素添加量对草鱼幼鱼生长性能、饲料系数、机体营养成分、血清生化指标的影响。试验结果显示:与对照组相比,添加生物素提高了草鱼幼鱼的增重率、特定生长率,降低了饲料系数。添加量为0.40 mg/kg时草鱼幼鱼的特定生长率和增重率最大,饲料系数最低,并与对照组存在显著差异(P<0.05);添加不同水平生物素对草鱼幼鱼全鱼水分、粗蛋白、粗脂肪含量无显著影响,但添加量为0.40 mg/kg时粗蛋白含量最大。0.10 mg/kg组和0.20 mg/kg组的全鱼灰分含量显著高于对照组(P<0.05);添加生物素对血清总蛋白(TP)、血糖(GLU)和总胆固醇(TC)无显著影响,但显著提高了血清甘油三酯(TG)含量,各添加组TG含量均显著高于对照组(P<0.05),1.60 mg/kg添加组的高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量显著高于对照组(P<0.05)。综合本试验结果,草鱼幼鱼饲料中生物素适宜添加量为0.40 mg/kg。 展开更多
关键词 草鱼幼鱼(juvenile CTENOPHARYNGODON idellus) 生物素 生长 体成分 生化指标
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利用冷冻保藏菌种测定食品中的水溶性维生素 被引量：8
16
作者 李全霞 崔亚娟 +3 位作者 陈兆天 张绩觅 徐佳佳 刘玉峰 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期59-63,共5页
建立了一种简单的甘油保护的冷冻保藏菌种的制备方法,通过测定冷冻菌种的活菌数和标准曲线,研究冷冻菌种的稳定性和重复性。结果显示,-20℃下保藏8个月时,冷冻菌种保藏液中的活菌数仍达到107CFU/m L以上,利用冷冻菌种测定烟酸、泛酸、... 建立了一种简单的甘油保护的冷冻保藏菌种的制备方法,通过测定冷冻菌种的活菌数和标准曲线,研究冷冻菌种的稳定性和重复性。结果显示,-20℃下保藏8个月时,冷冻菌种保藏液中的活菌数仍达到107CFU/m L以上,利用冷冻菌种测定烟酸、泛酸、叶酸和生物素的标准曲线与传统方法的标准曲线高度一致,利用冷冻保藏的菌种和新鲜菌种同时进行6种样品的分析,结果没有显著差异。冷冻菌种表现稳定,使用方便,快捷,适合作为菌种来源。 展开更多
关键词 微生物法 烟酸 泛酸 叶酸 生物素
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亲和素-生物素间接偶联的压电DNA传感器研究 被引量：10
17
作者 高志贤 晁福寰 +4 位作者 王红勇 房彦军 宁保安 潘海峰 朱惠忠 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第3期454-459,共6页
采用 33′ 二巯基硫代丙酸的金电极自组装技术 ,用乙基 3 (3 二甲氨基 )碳二亚胺盐酸盐 (EDC)和N 羟基磺基琥珀酰亚胺 (NHS)偶联剂将亲和素固定于金电极上 ,联于生物素标记的探针 ,制备成压电DNA传感器的检测电极 ,和杂交液中的待检葡... 采用 33′ 二巯基硫代丙酸的金电极自组装技术 ,用乙基 3 (3 二甲氨基 )碳二亚胺盐酸盐 (EDC)和N 羟基磺基琥珀酰亚胺 (NHS)偶联剂将亲和素固定于金电极上 ,联于生物素标记的探针 ,制备成压电DNA传感器的检测电极 ,和杂交液中的待检葡萄球菌肠毒素B的ssDNA进行杂交 ,通过频率信号检测DNA杂交的量 ,达到检测的目的 .采用不同长度的基因片段进行了研究 ,制作的传感器一致性、特异性都较好 ;杂交后的电极 ,电极再生后 。 展开更多
关键词 亲和素-生物素间接偶联 压电DNA传感器 分子自组装膜
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基于生物素-亲和素放大的SPR传感器检测大肠杆菌研究 被引量：10
18
作者 刘儒平 王程 +3 位作者 徐万帮 岳钊 牛文成 刘国华 《传感技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期757-761,共5页
建立了一种基于表面等离子体共振(SPR)技术的大肠杆菌特异性快速检测方法。采用EDC/NHS将葡聚糖修饰的CM5芯片表面活化,通过亲和素固定生物素标记的二抗(羊抗兔IgG抗体),利用一抗(兔抗大肠杆菌ATCC25922单克隆抗体)和二抗反应,将兔抗大... 建立了一种基于表面等离子体共振(SPR)技术的大肠杆菌特异性快速检测方法。采用EDC/NHS将葡聚糖修饰的CM5芯片表面活化,通过亲和素固定生物素标记的二抗(羊抗兔IgG抗体),利用一抗(兔抗大肠杆菌ATCC25922单克隆抗体)和二抗反应,将兔抗大肠杆菌单克隆抗体固定在传感芯片表面。利用一抗和二抗的质量扩增效应和生物素-亲和素的多级放大效应,实现了对低浓度大肠杆菌ATCC25922的快速检测,提高了SPR传感器灵敏度。利用NaOH溶液对芯片再生,可对多个不同浓度样品进行检测,采用相对响应单位(RU)记录数据。本传感芯片对大肠杆菌ATCC25922响应的线性范围为1.5×102 CFU/mL～1.5×107 CFU/mL,检测限为1.5×102 CFU/mL,相关系数r为0.981 5。这种方法简便快捷,有望成为一种在线检测治病菌的有力手段。 展开更多
关键词 SPR传感器 生物素-亲和素多级放大 大肠杆菌ATCC25922 快速检测
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鼠抗人sIL-6R单克隆抗体的制备及sIL-6R检测方法的建立 被引量：7
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作者 邱玉华 张学光 +2 位作者 郭玲 刘俊恒 王江方 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1997年第4期58-60,20,共4页
以重组人ｓＩＬ－６Ｒ蛋白作为抗原，获得３株分泌特异性ＭｃＡｂ的杂交瘤株，分别命名为ＳＩ１０，ＳＩ１１和ＳＩ１２。３株ＭｃＡｂ均属小鼠ＩｇＧ１亚类。竞争抑制试验的结果表明，３株ＭｃＡｂ识别两个不同的抗原表位。将杂交瘤细... 以重组人ｓＩＬ－６Ｒ蛋白作为抗原，获得３株分泌特异性ＭｃＡｂ的杂交瘤株，分别命名为ＳＩ１０，ＳＩ１１和ＳＩ１２。３株ＭｃＡｂ均属小鼠ＩｇＧ１亚类。竞争抑制试验的结果表明，３株ＭｃＡｂ识别两个不同的抗原表位。将杂交瘤细胞注入同系小鼠腹腔诱生的ＭｃＡｂ腹水，经ｐｒｏｔｅｉｎＧ纯化后用生物素标记，建立了双ＭｃＡｂ夹心ＥＬＩＳＡ法，该法用于血清ｓＩＬ－６Ｒ的特异性检测，灵敏度为５０μｇ／Ｌ。 展开更多
关键词 IL-6 可溶性受体 单克隆抗体 ELISA 制备
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人血清癌胚抗原的生物素-亲和素ELISA检测方法的建立 被引量：6
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作者 杨静 曾昭伟 +3 位作者 王学谦 赵倩 孙辉 李会强 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期871-873,875,共4页
目的:建立检测血清癌胚抗原(CEA)的高灵敏度生物素-亲和素酶联免疫检测(BA-ELISA)方法。方法:亲和层析纯化得到CEA,免疫新西兰家兔制备多克隆抗体。将得到的抗体连接生物素和辣根过氧化物酶,在生物素化BSA包被的96微孔板上建立生物素-... 目的:建立检测血清癌胚抗原(CEA)的高灵敏度生物素-亲和素酶联免疫检测(BA-ELISA)方法。方法:亲和层析纯化得到CEA,免疫新西兰家兔制备多克隆抗体。将得到的抗体连接生物素和辣根过氧化物酶,在生物素化BSA包被的96微孔板上建立生物素-亲和素ELISA(BA-ELISA)。对这一体系的线性、灵敏度、特异度、稳定性、回收率等参数进行鉴定,并和常规ELISA、放射免疫检测以及化学发光法相比较检测了临床标本中的CEA浓度。结果:线性检测范围为(0.42～50)U/mL,检测结果表明,体系稳定性良好;灵敏度为0.42 U/mL,批内、批间差异均小于10.0%。该研究建立的方法与常规ELISA对比差异有统计学意义,与放射免疫检测对比差别无统计学意义。与化学发光法相比较,回归方程为:y=0.04825+0.99674x,r=0.994,差异无统计学意义。结论:建立的CEA的BA-ELISA检测方法易于操作、灵敏度高、价格低廉,适合应用于临床检测。 展开更多
关键词 癌胚抗原 乳腺癌 生物素-亲和素酶联免疫吸附法 生物素 亲和素
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