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吴茱萸碱抑制活化T细胞增殖作用的研究 被引量：1
1
作者 唐佳楠 罗兴燕 +3 位作者 何晶晶 曾晓鑫 刘阳 赖翼 《细胞与分子免疫学杂志》 北大核心 2025年第6期524-530,共7页
目的探究吴茱萸碱(EVO)对活化T细胞增殖的抑制特性。方法采用密度梯度离心法从健康供体中提取外周血单个核细胞(PBMC),采用免疫磁珠法纯化T细胞,抗人CD3/CD28抗体活化T细胞。以不同浓度的EVO(0.37、1.11、3.33、10)μmol/L作用于T细胞... 目的探究吴茱萸碱(EVO)对活化T细胞增殖的抑制特性。方法采用密度梯度离心法从健康供体中提取外周血单个核细胞(PBMC),采用免疫磁珠法纯化T细胞,抗人CD3/CD28抗体活化T细胞。以不同浓度的EVO(0.37、1.11、3.33、10)μmol/L作用于T细胞。流式细胞术测定T细胞增殖率、凋亡率、存活率、CD25表达水平以及细胞周期分布。ELISA分析细胞因子白细胞介素2(IL-2)、IL-17A、IL-4和IL-10的表达水平。结果(1.11、3.33、10)μmol/L EVO能有效抑制活化T细胞增殖,其半数抑制浓度(IC 50)为(1.5±0.3)μmol/L。EVO不诱导活化T细胞凋亡,且不影响静息T细胞的存活率。EVO不影响活化T细胞CD25的表达及IL-2的分泌。EVO阻滞T细胞周期于G2/M期,使G2/M期细胞增加,且具有浓度-效应关系。EVO不影响活化T细胞分泌IL-4、IL-10,但显著抑制IL-17A的分泌。结论EVO对T细胞的活化过程无显著影响,但可通过阻滞细胞周期于G2/M期,从而抑制T细胞的增殖,并显著抑制促炎因子IL-17A的分泌。提示EVO有望作为先导物,促进低毒高效性免疫抑制剂的研发,并有助于阐释传统中药吴茱萸在抗炎及免疫调节中的作用机制。 展开更多
关键词 吴茱萸碱(EVO) 免疫抑制剂 细胞周期 细胞因子 流式细胞术
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发酵体系pH控制对短双歧杆菌分裂周期的影响
2
作者 李民 杨展 +5 位作者 刘凯龙 张晓源 张怡 张文羿 张和平 姚国强 《食品工业科技》 北大核心 2025年第18期232-239,共8页
pH控制是双歧杆菌高密度培养过程中关键的调控手段之一,但关于pH调控菌体分裂增殖机制的研究较少。本研究以短双歧杆菌B2798为研究对象,基于细胞增殖荧光探针(Carboxyfluorescein Diacetate,Succinimidyl ester,CFDA-SE)对菌体细胞进行... pH控制是双歧杆菌高密度培养过程中关键的调控手段之一,但关于pH调控菌体分裂增殖机制的研究较少。本研究以短双歧杆菌B2798为研究对象,基于细胞增殖荧光探针(Carboxyfluorescein Diacetate,Succinimidyl ester,CFDA-SE)对菌体细胞进行标记,采用流式细胞术检测该菌株在不同发酵体系pH条件下的菌体分裂进程,采用实时荧光定量PCR(Real-time Quantitative Polymerase Chain Reaction,qPCR)技术对菌体分裂过程中关键基因进行定量检测,探究不同发酵体系pH对其分裂周期的影响。结果表明:在pH5.30的发酵体系中菌体分裂数可达7次,高于其他pH条件的试验组,进一步测定活菌数达(1.39±0.04)×10^(10) CFU/mL,显著大于其他pH条件试验组(P<0.05),说明在此pH条件下菌体不仅分裂旺盛,且存活率高。发酵体系pH5.30时,分裂相关基因ftsZ与sepF表达量较pH6.30试验组显著上调61.86%与131.36%(P<0.05),较pH4.30组显著上调78.13%和80.31%(P<0.05)。综上所述,发酵体系pH通过调控菌体分裂,影响活菌数量以及调控分裂相关基因的表达,共同作用形成了一个有利于菌体快速分裂增殖的环境,为精准发酵提供理论支持。 展开更多
关键词 短双歧杆菌 发酵体系 PH 荧光探针 流式细胞术 分裂周期 分裂基因
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基于生信分析探讨金雀异黄素对非小细胞肺癌的影响
3
作者 产柳佳 王阳 +1 位作者 谢楚菲 赵立春 《世界中医药》 北大核心 2025年第15期2619-2625,共7页
目的:通过生物信息学分析和细胞生物学实验,探究金雀异黄素对非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞系的影响及潜在治疗靶点。方法:将肺癌细胞A549分为对照组和金雀异黄素给药组(100μmol/L),处理48 h后,使用核糖核酸(RNA)试剂盒提取细胞的RNA。... 目的:通过生物信息学分析和细胞生物学实验,探究金雀异黄素对非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞系的影响及潜在治疗靶点。方法:将肺癌细胞A549分为对照组和金雀异黄素给药组(100μmol/L),处理48 h后,使用核糖核酸(RNA)试剂盒提取细胞的RNA。将提取出的RNA进行转录组测序。所得到的差异基因在sangerbox网站进行热图和火山图分析;运用Matascape网站进行基因本体(GO)富集分析;利用在线网站Omicshare进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析;将药物与疾病交集靶点上传至Cytoscape_v3.7.2数据平台进行蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)分析。通过流式细胞术验证金雀异黄素对肺癌细胞周期的影响。结果:与对照组比较,金雀异黄素给药后,mRNA的表达发生了改变,2组差异明显。共筛选出4630个差异基因的表达,其中有2853个上升基因,1777个下降基因。KEGG富集分析显示,金雀异黄素给药后影响了细胞周期(Cell cycle)。细胞周期实验结果表明,金雀异黄素将肺癌细胞周期阻滞在G_(2)/M期,并同时影响了细胞有丝分裂进程。结论:金雀异黄素可能通过影响A549细胞周期、DNA复制、p53等信号通路抑制NSCLC进程。 展开更多
关键词 生物信息学 金雀异黄素 转录组测序 非小细胞肺癌 人肺癌细胞系细胞A549 流式细胞术 细胞周期 有丝分裂
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流式细胞术渐进式实验教学模式的探索与实践
4
作者 赵颖岚 贾方兴 +3 位作者 宋亚坤 生悦 余春红 邓怿 《生物学杂志》 北大核心 2025年第1期117-121,共5页
流式细胞术广泛应用于生命科学研究的各个领域,因其所涉及的原理及操作比较复杂,本科生较难通过一次学习掌握,通过使用流式细胞术检测细胞周期、细胞吞噬和细胞凋亡等3个内容递进的实验,使本科生系统性学习流式细胞术在细胞生物学研究... 流式细胞术广泛应用于生命科学研究的各个领域,因其所涉及的原理及操作比较复杂,本科生较难通过一次学习掌握,通过使用流式细胞术检测细胞周期、细胞吞噬和细胞凋亡等3个内容递进的实验,使本科生系统性学习流式细胞术在细胞生物学研究中的应用,这有助于培养其科研思维和实验技能,促进学生主动学习和探索。在教学过程中,设计层层递进的授课内容,讲授流式细胞仪基础知识、荧光信号的收集及显示方法、如何圈门、设置阈值及多荧光检测的荧光补偿等。教学结果表明,“渐进式”的实验设计,加深了学生对流式细胞仪基础知识的理解和掌握,学生逐步学习了细胞标本制备、实验操作和数据处理,提升了学生动手操作与科研分析能力,为科研工作打下了良好的基础,同时探索了先进仪器在本科生实验教学中的应用。 展开更多
关键词 渐进式实验教学 流式细胞术 细胞生物学实验 细胞周期 细胞吞噬 细胞凋亡
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流式细胞术检测细胞周期影响因素及不同免疫细胞亚群周期分析 被引量：2
5
作者 刘丹 张洁 +2 位作者 郭正阳 薛丽香 王羽晴 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期1308-1316,共9页
细胞周期检测对于了解细胞增殖状态、细胞功能研究、药物筛选与评估等领域具有重要意义。流式细胞仪分析细胞周期是目前较为经典且广泛应用的检测手段之一。碘化丙啶(propidium iodide,PI)单染是最常用的基于流式的检测细胞周期方法,然... 细胞周期检测对于了解细胞增殖状态、细胞功能研究、药物筛选与评估等领域具有重要意义。流式细胞仪分析细胞周期是目前较为经典且广泛应用的检测手段之一。碘化丙啶(propidium iodide,PI)单染是最常用的基于流式的检测细胞周期方法,然而,该方法在使用过程有诸多处理因素会对检测结果造成影响。此外,不同免疫细胞亚群在不同细胞周期阶段的分布差异也有助于研究免疫反应,了解疾病状态。本文以B16-F10细胞系为例,采用PI单染法,从固定条件、上机条件和软件分析3个角度,评价多种处理因素对细胞周期检测结果的影响。根据结果分析,在进行细胞周期检测时,建议取3×10^(6)个细胞,用300μL预冷PBS重悬细胞后逐滴滴入700μL预冷的无水乙醇,放置于4℃或-20℃过夜固定,低速收样,收样速率为每秒400~600颗粒数,去黏连后需收集至少3000个细胞。另外,通过EdU、PI双指标染色可以精确划分细胞周期,而细胞表面标志物染色联合Ki-67和PI染色法,可在不进行细胞分选的情况下进行不同免疫细胞亚群周期分析。本文较为系统的探讨了PI单染法检测细胞周期的影响因素,提供了标准的实验操作流程。建立了EdU联合PI检测细胞周期和针对不同免疫细胞亚群周期分析方案,拓宽了细胞周期检测方式。 展开更多
关键词 流式细胞术 细胞周期 碘化丙啶 免疫细胞亚群
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维甲酸诱导神经管畸形发生过程中神经干细胞的变化研究 被引量：15
6
作者 李红丽 蔡文琴 +3 位作者 杨忠 李泽桂 李巍 付晓岚 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期11-14,共4页
目的　了解维甲酸 (Retinoicacid ,RA)诱导神经管缺陷 (Neuraltubedefect ,NTD)小鼠神经发育过程中神经干细胞的变化规律。方法　分别取不同胚胎时段及新生、成年的正常及NTD小鼠的神经组织 ,采用神经干细胞特异性抗原神经巢蛋白 (Nest... 目的　了解维甲酸 (Retinoicacid ,RA)诱导神经管缺陷 (Neuraltubedefect ,NTD)小鼠神经发育过程中神经干细胞的变化规律。方法　分别取不同胚胎时段及新生、成年的正常及NTD小鼠的神经组织 ,采用神经干细胞特异性抗原神经巢蛋白 (Nestin)间接免疫荧光抗体标记和DNA定量荧光染色 ,以流式细胞术检测。结果　①正常小鼠神经组织中Nestin阳性细胞数目在E8.5d时呈高峰 ,此后逐步下降 ,新生期仍保持较高水平 ;NTD小鼠神经组织中Nestin阳性细胞数在胚胎各期均低于正常小鼠 ,尤以E8.5d下降显著 ;出生后与正常组无显著差别。②NTD小鼠胚胎期神经组织G0 G1 期细胞数百分比明显高于正常组 ,S期细胞数百分比则明显低于正常组。 展开更多
关键词 维甲酸 神经干细胞 神经巢蛋白 神经管缺陷 流式细胞术 细胞周期 NTD
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流式细胞仪在生物学中的应用 被引量：36
7
作者 耿慧霞 王来 王强 《生物学杂志》 CAS CSCD 2005年第4期44-45,51,共3页
简要论述了流式细胞仪(flowcytometry,FCM)的工作原理,并对其在生物学基础科学研究中的应用进行阐述,包括对细胞凋亡、细胞周期、免疫细胞、细胞受体的研究应用。
关键词 流式细胞仪 细胞凋亡 细胞周期
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茶多酚对人鼻咽癌细胞株CNE_2细胞DNA损伤和细胞周期的影响 被引量：12
8
作者 谢冰芬 郝东磊 +3 位作者 刘宗潮 朱孝峰 冯公侃 潘启超 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第5期424-427,共4页
目的　观察茶多酚（ｔｅａ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ， ＴＰ） 对人鼻咽癌细胞株ＣＮＥ２ 细胞ＤＮＡ 的损伤作用和细胞周期的影响。方法　用琼脂糖凝胶电泳方法测定ＴＰ对细胞ＤＮＡ的断裂作用；用流式细胞术（ＦＣＭ） 观察ＴＰ对ＣＮ... 目的　观察茶多酚（ｔｅａ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ， ＴＰ） 对人鼻咽癌细胞株ＣＮＥ２ 细胞ＤＮＡ 的损伤作用和细胞周期的影响。方法　用琼脂糖凝胶电泳方法测定ＴＰ对细胞ＤＮＡ的断裂作用；用流式细胞术（ＦＣＭ） 观察ＴＰ对ＣＮＥ２ 细胞周期的变化及其诱导凋亡。结果　ＴＰ可引起ＣＮＥ２ 细胞ＤＮＡ 断裂、其断裂程度随剂量的增加和作用时间的延长而增强。ＴＰ不同浓度和不同作用时间可干扰ＣＮＥ２ 细胞在周期中的进程，使Ｇ１ 期细胞明显增多，Ｓ期细胞减少，细胞分裂增殖指数（ＰＩ）亦随之降低。同时，ＴＰ可诱导ＣＮＥ２ 细胞凋亡，其凋亡率随ＴＰ浓度的增加和作用时间的延长在逐渐增加。结论　ＴＰ１９９８１２０４ 收稿，１９９９０７３１ 修回＊ 国家自然科学基金资助课题，Ｎｏ ３９３７０８００作者简介：谢冰芬，女，副研究员，硕士生导师，研究方向为肿瘤药理可引起人鼻咽癌细胞株ＣＮＥ２ 细胞的ＤＮＡ 断裂，使细胞停滞于Ｇ１ 期，阻止Ｇ１ 期细胞进入Ｓ期；同时亦可诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 茶多酚 鼻咽癌 细胞株 CNE2 细胞 DNA损伤
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用DAPI和Hoechst33342染色法检测DNA的流式细胞方法探讨 被引量：21
9
作者 刘锡娟 丁慧荣 张宏 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期480-484,共5页
目的:探索利用DAPI和Hoechst33342两种荧光染料检测DNA的流式细胞技术。方法:分别用DAPI、Hochest和PI3种荧光染料标记HT-29细胞,通过流式细胞仪检测其G0/G1期、S期和G2/M期的DNA含量,比较3种方法测定结果。用标准荧光微球和DNA质量控... 目的:探索利用DAPI和Hoechst33342两种荧光染料检测DNA的流式细胞技术。方法:分别用DAPI、Hochest和PI3种荧光染料标记HT-29细胞,通过流式细胞仪检测其G0/G1期、S期和G2/M期的DNA含量,比较3种方法测定结果。用标准荧光微球和DNA质量控制试剂盒做测试质控。结果:质控实验显示,紫外激光的变异系数(CV)为2.4;DAPI和Hoechst33342标记的小鸡红细胞核(chicken erythrocyte nuclei,CEN)出现4个峰,第2、第3和第4峰所在道数的平均值与第1峰的比值为2、3、4,且第1峰的CV均为2.4。DAPI、Hoechst33342标记小牛胸腺细胞核(calf thymocyte nuclei,CTN)出现2个峰,G2/G1为1.97,且G0/G1峰的CV为2.4。DAPI、Hoechst33342和PI3种染料标记的HT-29细胞呈现完整的细胞周期峰,结果分别为CV值3.40、3.02和4.42,G0/G1期含量为60.86%、60.22%和60.81%,S期含量为28.85%、29.70%和29.82%,G2/M期含量为10.29%、9.09%和9.37%,3种标记法测定结果一致。结论:本文探索的DAPI和Hoechst33342标记法简单易行,可作为具备紫外激光器的流式细胞仪的首选DNA荧光染料。 展开更多
关键词 染色与标记 流式细胞术 DNA 细胞周期
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大气细颗粒物PM_(2.5)对大鼠睾丸组织细胞周期的影响 被引量：11
10
作者 张琳 牛静萍 +1 位作者 徐佳 徐大琴 《生态毒理学报》 CAS CSCD 2009年第2期271-275,共5页
为了研究大气细颗粒物(PM2.5)对雄性大鼠的生殖毒性作用,将不同剂量的PM2.5颗粒物悬液采用气管滴注方式对雄性Wistar大鼠分组染毒,染毒剂量分别为0、1.6、8.0、40.0mg·kg-(1BW),24h后应用流式细胞术对睾丸组织细胞周期及DNA倍体进... 为了研究大气细颗粒物(PM2.5)对雄性大鼠的生殖毒性作用,将不同剂量的PM2.5颗粒物悬液采用气管滴注方式对雄性Wistar大鼠分组染毒,染毒剂量分别为0、1.6、8.0、40.0mg·kg-(1BW),24h后应用流式细胞术对睾丸组织细胞周期及DNA倍体进行检测分析.结果显示:PM2.5对大鼠睾丸组织各倍体细胞比例和细胞周期有明显影响,可导致二倍体细胞数显著降低(p<0.05);可引起以二倍体细胞为主的G0/G1期细胞比例显著下降(p<0.05),G2/M期细胞比例和细胞增殖指数(PI)显著上升(p<0.05).结果提示,PM2.5可透过血睾屏障,干扰细胞周期进程,对生殖系统具有一定的毒性作用. 展开更多
关键词 PM2.5 流式细胞术 睾丸 细胞周期 生殖毒性
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铈对培养肝细胞的影响 被引量：30
11
作者 申治国 雷衡毅 +2 位作者 杜柳涛 杨杏芬 杨燕生 《中山大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期109-112,共4页
应用流式细胞术研究了稀土离子对大白鼠原代肝细胞和肝癌细胞的影响．结果表明，稀土离子可以增加原代肝细胞内ＤＮＡ含量，促进细胞增殖，改变肝细胞周期时相，减少正常肝细胞凋亡，诱导肝癌细胞凋亡；钙调素也能促进细胞内ＤＮＡ含量... 应用流式细胞术研究了稀土离子对大白鼠原代肝细胞和肝癌细胞的影响．结果表明，稀土离子可以增加原代肝细胞内ＤＮＡ含量，促进细胞增殖，改变肝细胞周期时相，减少正常肝细胞凋亡，诱导肝癌细胞凋亡；钙调素也能促进细胞内ＤＮＡ含量的增加。 展开更多
关键词 稀土元素 大白鼠 肝细胞 流式细胞术 铈
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华蟾素联合长春瑞滨对小鼠Lewis肺癌细胞周期的影响 被引量：24
12
作者 吴万垠 柴小姝 刘伟胜 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2004年第4期363-365,共3页
目的 :研究华蟾素联合长春瑞滨对小鼠Lewis肺癌细胞周期的影响。方法 :5 0只皮下接种Lewis肺癌细胞的C57BL/ 6小鼠 ,随机分成华蟾素组、长春瑞滨组、华蟾素联合长春瑞滨组、环磷酰胺 (CTX)治疗对照组和生理盐水空白对照组。每天分别按 5... 目的 :研究华蟾素联合长春瑞滨对小鼠Lewis肺癌细胞周期的影响。方法 :5 0只皮下接种Lewis肺癌细胞的C57BL/ 6小鼠 ,随机分成华蟾素组、长春瑞滨组、华蟾素联合长春瑞滨组、环磷酰胺 (CTX)治疗对照组和生理盐水空白对照组。每天分别按 5ml/kg华蟾素、6 .7mg/kg长春瑞滨、两者联合、30mg/kg环磷酰胺以及 0 .2ml生理盐水予腹腔注射 ,给药 7天后处死 ,测定各组小鼠的皮下瘤重 ,计算抑瘤率 ,并运用流式细胞仪分析各组小鼠肿瘤细胞细胞周期各时相分布的状况。结果 :华蟾素组、长春瑞滨组、华蟾素联合长春瑞滨组的皮下瘤重较生理盐水组低 (P <0 .0 1) ,抑瘤率分别是 4 2 .86 %、4 5 .6 8%和 5 3.4 4 %。华蟾素组的肿瘤细胞S期细胞比例增高 ,长春瑞滨组的肿瘤细胞G2 /M期细胞比例增高 ,两药联合组的肿瘤细胞S期、G2 /M期细胞比例均有所增高。结论 :华蟾素和长春瑞滨对小鼠Lewis肺癌具有协同抑瘤作用 ,机制可能与其协同作用于细胞周期有关。 展开更多
关键词 华蟾素 长春瑞滨 LEWIS肺癌细胞 细胞周期 流式细胞术 小鼠
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中波紫外线对成纤维细胞的损伤作用 被引量：9
13
作者 马淑梅 刘晓冬 +3 位作者 龚平生 牟颖 阎岗林 罗贵民 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期365-367,共3页
目的:探讨中波紫外线(UVB)对成纤维细胞的损伤作用,建立细胞损伤模型。方法:采用UVB灯照射小鼠成纤维细胞株NIH3T3,MTT法测细胞存活率,流式细胞术检测细胞周期、凋亡和H2 O2 的生成。结果:0 .2～3.0 k J·m- 2 U VB照射后2 4 h细胞... 目的:探讨中波紫外线(UVB)对成纤维细胞的损伤作用,建立细胞损伤模型。方法:采用UVB灯照射小鼠成纤维细胞株NIH3T3,MTT法测细胞存活率,流式细胞术检测细胞周期、凋亡和H2 O2 的生成。结果:0 .2～3.0 k J·m- 2 U VB照射后2 4 h细胞存活率明显降低(P<0 .0 5或0 .0 1) ;1.5 k J·m- 2 UVB照射后4、8、18和2 4 h细胞G1 期细胞百分数升高,凋亡小体增多;1.5 k J·m- 2 U VB照射后8h H2 O2 生成增多,与0、4、18和2 4 h组比较差异有显著性(P<0 .0 5 )。结论:U VB照射可诱导成纤维细胞出现Gl 期阻滞、细胞凋亡及H2 O2 生成增多。 展开更多
关键词 紫外线/副作用 NIH3T3 成纤维细胞/辐射效应 细胞凋亡 细胞周期 流式细胞术
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流式细胞仪检测苏丹Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ对SGC-7901细胞增殖的影响 被引量：6
14
作者 季宇彬 汲晨锋 +1 位作者 高世勇 于蕾 《哈尔滨工业大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第5期767-769,共3页
为了进一步研究苏丹Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ对人胃癌细胞(SGC-7901)增殖的影响,采用流式细胞仪测定了DNA含量的变化,分析细胞周期的变化.结果表明:苏丹Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ促进了SGC-7901细胞由G1期进入S期和G2期,表现为G1期细胞平均DNA含量下降,S期DNA含量上... 为了进一步研究苏丹Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ对人胃癌细胞(SGC-7901)增殖的影响,采用流式细胞仪测定了DNA含量的变化,分析细胞周期的变化.结果表明:苏丹Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ促进了SGC-7901细胞由G1期进入S期和G2期,表现为G1期细胞平均DNA含量下降,S期DNA含量上升,G2期DNA含量上升,细胞增殖指数(PI)增加,S期细胞指数(SPF)增加.其中苏丹Ⅲ在50μg.mL-1剂量时对SGC-7901细胞增殖影响非常显著(P<0.01),苏丹Ⅰ、Ⅳ在10μg.mL-1剂量时对SGC-7901细胞增殖影响非常显著(P<0.01).苏丹Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ是通过影响细胞周期,从而调节SGC-7901细胞的增殖活动,促进细胞分化增殖. 展开更多
关键词 苏丹红 流式细胞仪 SGC-7901细胞株 细胞周期
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不同浓度的碘化丙啶染色对细胞周期分布的影响 被引量：10
15
作者 胡梦裳 张云艳 +2 位作者 万建美 章斌 吴翼伟 《激光杂志》 CAS 北大核心 2015年第1期144-147,共4页
研究不同浓度的碘化丙啶(PI)染色对细胞周期分布的影响。293T细胞经0、2、4、6Gy的X射线照射后,用浓度分别为5、10、20、50μg/ml的PI染色后,流式细胞仪检测细胞周期的分布情况。0、2、4、6Gy时,不同浓度PI染色时G1/G0期的比例变化如下:... 研究不同浓度的碘化丙啶(PI)染色对细胞周期分布的影响。293T细胞经0、2、4、6Gy的X射线照射后,用浓度分别为5、10、20、50μg/ml的PI染色后,流式细胞仪检测细胞周期的分布情况。0、2、4、6Gy时,不同浓度PI染色时G1/G0期的比例变化如下:(35.90±0.17)至(37.65±0.42),(18.05±0.40)至(19.08±2.01),(4.24±1.31)至(5.89±1.08),(2.88±0.16)至(4.04±1.06),G2/M期的比例变化如下:(13.36±0.36)至(15.39±0.33),(54.56±0.34)至(58.98±1.46),(83.92±4.50)至(84.80±1.43),(92.29±1.56)至(92.89±1.49);S期的比例变化如下:(45.63±0.97)至(49.74±0.16),(22.45±0.35)至(27.04±0.36),(10.05±0.79)至(11.29±0.11),(3.71±1.06)至(4.99±1.01)。在同一照射剂量下,不管是G1/G0期、S期还是G2/M期,不同浓度PI染色对细胞周期分布没有明显差异(P>0.05);但不管5、10、20μg/ml还是50μg/ml的PI染色,随着照射剂量的增加,G2/M期细胞比例明显增加(P<0.01)。随着照射剂量的增加,G2/M期细胞比例明显增加;但对于同一照射剂量,不同浓度PI染色对细胞周期分布没有明显差异,做周期分布实验时选择5μg/ml的PI染色即可。 展开更多
关键词 细胞周期 碘化丙啶 X射线 脱氧核糖核酸 流式细胞仪
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喜树碱对小鼠T淋巴细胞活化、增殖以及细胞周期的影响 被引量：8
16
作者 江颖娟 曾耀英 +1 位作者 肇静娴 古洁若 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期1178-1182,共5页
目的:研究喜树碱(CPT)对刀豆蛋白A(ConA)介导的小鼠T淋巴细胞体外活化、增殖及细胞周期的影响。方法:以ConA刺激小鼠T淋巴细胞,建立小鼠T淋巴细胞活化、增殖的模型,以不同浓度的CPT作用于该模型,流式细胞术检测T细胞早期活化标志CD69分... 目的:研究喜树碱(CPT)对刀豆蛋白A(ConA)介导的小鼠T淋巴细胞体外活化、增殖及细胞周期的影响。方法:以ConA刺激小鼠T淋巴细胞,建立小鼠T淋巴细胞活化、增殖的模型,以不同浓度的CPT作用于该模型,流式细胞术检测T细胞早期活化标志CD69分子的表达;以活体染料羧基荧光素乙酰乙酸(CFDA-SE)染色流式细胞术分析CPT在ConA刺激下小鼠淋巴细胞的增殖相关指数(PI);以碘化丙啶染色流式细胞术分析细胞周期的分布情况。结果:ConA作用6h后流式细胞术分析显示CD69的表达率为(58.88±0.55)%,不同浓度的CPT组(10nmol/L、20nmol/L、50nmol/L、100nmol/L)CD69的表达率分别为(55.48±0.98)%、(54.67±1.05)%、(50.40±0.82)%、(42.47±1.32)%,均可明显抑制CD69的表达(P<0.01);ConA刺激48h后流式细胞术分析显示,不同浓度的CPT组(10nmol/L、20nmol/L、50nmol/L、100nmol/L)的增殖指数(PI)明显低于对照组(P<0.05);细胞周期分析显示刺激48h后不同浓度的CPT组(10nmol/L、20nmol/L、50nmol/L、100nmol/L)均出现明显的凋亡峰(apoptosispeak,AP),sub-G1期、G0/G1期细胞的比率明显高于ConA刺激组(P<0.01)。结论:CPT可明显抑制ConA刺激的T淋巴细胞的活化、增殖,同时使淋巴细胞阻滞于G0/G1期。 展开更多
关键词 喜树碱 T淋巴细胞 细胞增殖 细胞周期 流式细胞术
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高铜对雏鸭肾脏细胞周期和凋亡影响的研究 被引量：5
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作者 崔伟 彭西 +2 位作者 赵丽 杨帆 崔恒敏 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期980-984,共5页
360只1日龄天府肉鸭随机分为6组,分别喂以对照日粮(Cu 8 mg/kg)和高铜日粮(Cu 100 mg/kg,高铜Ⅰ组;Cu 200 mg/kg,高铜Ⅱ组;Cu 400 mg/kg,高铜Ⅲ组;Cu 600 mg/kg,高铜Ⅳ组;Cu 800 mg/kg,高铜Ⅴ组)6周,以流式细胞术研究高铜对雏鸭肾脏细... 360只1日龄天府肉鸭随机分为6组,分别喂以对照日粮(Cu 8 mg/kg)和高铜日粮(Cu 100 mg/kg,高铜Ⅰ组;Cu 200 mg/kg,高铜Ⅱ组;Cu 400 mg/kg,高铜Ⅲ组;Cu 600 mg/kg,高铜Ⅳ组;Cu 800 mg/kg,高铜Ⅴ组)6周,以流式细胞术研究高铜对雏鸭肾脏细胞周期和凋亡的影响。结果显示,肾脏细胞的调亡比例随日粮铜水平的升高而升高,当日粮铜水平达到400 mg/kg以上时,肾脏细胞凋亡比例与对照组比较差异极显著(P<0.01)。日粮铜水平达到400 mg/kg以上时,肾脏细胞的增殖指数(PI)极显著低于对照组(P<0.01)。结果表明日粮铜水平达到400mg/kg以上时会引起肾脏受损,肾脏细胞的增殖分化严重受阻,肾脏细胞凋亡大量增加。 展开更多
关键词 高铜 肾脏 流式细胞术 细胞凋亡 细胞周期 雏鸭
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广西眼镜蛇毒蛋白Natrin在体外诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡作用的研究 被引量：5
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作者 宋慧 徐星新 +4 位作者 李映新 李雪华 苏延旭 蒋兴明 梁永红 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期118-121,共4页
目的观察广西眼镜蛇毒蛋白Natrin在体外对人肝癌SMMC-7721细胞的增殖抑制作用及凋亡诱导作用。方法以不同浓度的Natrin作用于SMMC-7721细胞24 h后,用MTT法检测细胞的生长抑制率;AO/EB双染色法、透射电子显微镜法观察细胞凋亡、流式细胞... 目的观察广西眼镜蛇毒蛋白Natrin在体外对人肝癌SMMC-7721细胞的增殖抑制作用及凋亡诱导作用。方法以不同浓度的Natrin作用于SMMC-7721细胞24 h后,用MTT法检测细胞的生长抑制率;AO/EB双染色法、透射电子显微镜法观察细胞凋亡、流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期。结果 Natrin对人肝癌SMMC-7721细胞有体外抑制作用,随着药物浓度的增大抑制率也随之增大,24 h半数抑制浓度IC50为138.69 mg·L-1;给药后,荧光显微镜下与透射电子显微镜下细胞呈现典型的凋亡形态改变;流式细胞仪检测到随着药物浓度的增大凋亡百分数也随之增大;Natrin能诱导SMMC-7721细胞发生S期和G2/M期阻滞。结论Natrin在体外能抑制人肝癌SMMC-7721细胞增殖并诱导其凋亡。 展开更多
关键词 广西眼镜蛇毒蛋白Natrin 肝癌SMMC-7721细胞 细 胞周期 细胞凋亡 透射电镜 流式细胞术
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人脐血单个核细胞中Nestin阳性细胞表达及其临床意义 被引量：7
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作者 周毅 王景周 +1 位作者 周萍 王昌铭 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期773-775,共3页
目的　观察脐血单个核细胞是否表达nestin抗原及表达量的多少;探讨人脐血单个核细胞(humancordbloodmononuclearcells ,HCMNCs)对神经系统疾病治疗的潜能。方法　采集正常分娩胎儿的脐血。以淋巴细胞密度梯度离心法分离人脐血细胞(human... 目的　观察脐血单个核细胞是否表达nestin抗原及表达量的多少;探讨人脐血单个核细胞(humancordbloodmononuclearcells ,HCMNCs)对神经系统疾病治疗的潜能。方法　采集正常分娩胎儿的脐血。以淋巴细胞密度梯度离心法分离人脐血细胞(humancordbloodcells ,HUCBCs)。用免疫组化法测定HCMNCs及外周血细胞(humanperipheralbloodcells ,HPBCs)中nestin阳性细胞;流式细胞仪(flowcytometer,FCM)分析HCMNCs中nestin阳性细胞的比例及细胞周期。结果　脐血中有nestin阳性细胞,约占HCMNCs的(4 3 2±0 66) %。HCMNCs的G1 0期细胞显著少于外周血而S期细胞则显著多于外周血,G2 M期细胞无显著差异。结论　人脐血单个核细胞确能表达nestin抗原。这将为HCMNCs在神经系统应用提供一定的理论依据。 展开更多
关键词 脐血 单个核细胞 NESTIN 细胞周期 流式细胞术
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苦马豆素诱导人胃癌细胞SGC-7901凋亡作用机制的实验研究(英文) 被引量：13
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作者 孙纪元 王四旺 +2 位作者 朱妙章 谢艳华 缪珊 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2005年第9期978-983,共6页
目的:探讨SW体外诱导人胃癌细胞株SGC7901凋亡的机制。方法:应用MTT法确定SW对体外培养的SGC7901细胞的作用剂量,通过流式细胞术及凋亡相关调控基因p53、cmyc、Bcl2的检测对细胞凋亡及细胞周期的测定,观察SW对胃癌细胞SGC7901增殖周期... 目的:探讨SW体外诱导人胃癌细胞株SGC7901凋亡的机制。方法:应用MTT法确定SW对体外培养的SGC7901细胞的作用剂量,通过流式细胞术及凋亡相关调控基因p53、cmyc、Bcl2的检测对细胞凋亡及细胞周期的测定,观察SW对胃癌细胞SGC7901增殖周期的影响以及抑制肿瘤细胞增殖的方式,同时利用激光共聚焦显微镜对细胞内Ca2+浓度的监测,研究SW与细胞内Ca2+超载的关系。结果:SW体外抗SGC7901细胞的完全致死剂量为6.2μg·ml-l,高于0.05μg·ml-l时抑制作用明显(P<0.05),其LC50为0.84μg·ml-l;经SW0.5～1.5μg·ml-l处理24h可引起凋亡抑制基因p53、Bcl2的明显下降、凋亡促进基因cmyc的明显升高以及肿瘤细胞内Ca2+超载,最终诱导SGC7901细胞凋亡。实验还证实SW主要作用于肿瘤细胞的S期,使瘤细胞主要积聚在S期。结论:SW通过多种途径诱导细胞凋亡可能是其发挥抗癌作用的重要机制。 展开更多
关键词 苦马豆素 胃癌 凋亡 流式细胞仪 细胞周期 激光共聚焦显微镜
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