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ASGPR与HBV preS1蛋白之间相互作用的验证 被引量:2
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作者 张曦 刘小静 +4 位作者 陈云茹 孔颖 杨雪亮 叶峰 蔺淑梅 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期292-297,共6页
目的验证去唾液酸糖蛋白受体(asialoglycoprotein receptor,ASGPR)与乙肝病毒前S1蛋白(HBV preS1蛋白)之间的相互作用,确认ASGPR作为乙肝病毒肝细胞膜受体在介导乙肝病毒感染的分子机制中的作用。方法分别用哺乳动物双杂交及体外免疫共... 目的验证去唾液酸糖蛋白受体(asialoglycoprotein receptor,ASGPR)与乙肝病毒前S1蛋白(HBV preS1蛋白)之间的相互作用,确认ASGPR作为乙肝病毒肝细胞膜受体在介导乙肝病毒感染的分子机制中的作用。方法分别用哺乳动物双杂交及体外免疫共沉淀技术验证ASGPR与HBV preS1蛋白之间的相互作用,操作方法参照试剂盒说明书进行。结果哺乳动物双杂交实验结果提示,ASGPR与HBV preS1蛋白在细胞环境中具有相互作用;免疫共沉淀实验结果提示,ASGPR与HBV preS1蛋白在非细胞环境中具有相互作用。结论 ASGPR可能是介导HBV入侵的肝细胞膜受体之一。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 PRES1蛋白 asgpr 蛋白质-蛋白质相互作用 哺乳动物双杂交 免疫共沉淀
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HBV preS1蛋白及ASGPR的亚细胞定位及其在肝组织中的分布
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作者 张曦 刘小静 +6 位作者 陈云茹 孔颖 杨雪亮 张凯 安小翠 叶峰 蔺淑梅 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期166-171,共6页
目的检测HBV preS1蛋白及ASGPR的亚细胞定位及在肝组织中的分布情况,为研究二者的生物学功能提供依据。方法激光共聚焦显微镜检测HBV preS1蛋白及ASGPR在HepG2细胞中的亚细胞定位情况以及二者是否存在共定位;免疫组织化学技术检测HBV pr... 目的检测HBV preS1蛋白及ASGPR的亚细胞定位及在肝组织中的分布情况,为研究二者的生物学功能提供依据。方法激光共聚焦显微镜检测HBV preS1蛋白及ASGPR在HepG2细胞中的亚细胞定位情况以及二者是否存在共定位;免疫组织化学技术检测HBV preS1蛋白和ASGPR在肝组织中的表达情况。结果激光共聚焦显微镜下观察,在HepG2细胞的胞膜、胞质及胞核中均可见明亮的绿色荧光,表明HBV preS1蛋白弥散分布于肝细胞的胞膜、胞质及胞核中;在胞膜上可见明亮的红色荧光,而胞质中的红色荧光较弱,表明ASGPR主要表达于肝细胞膜上,在肝细胞质中呈弱表达。提示在HepG2细胞的细胞膜上HBV preS1蛋白与ASGPR具有共定位。在乙肝肝硬化患者的肝组织中,HBV preS1蛋白在肝细胞的胞膜、胞质及胞核中均有阳性表达;ASGPR不仅在肝细胞膜上有阳性表达,在胞质中的表达率也较高。此外,ASGPR在肝组织中的分布形式与HBV preS1蛋白无明显差异(P>0.05),并且二者的表达水平呈显著正相关(Pearson相关系数0.776,P<0.000 1)。结论 ASGPR除介导HBV入侵外,可能还参与了病毒的分泌及胞内运输等其他生命活动。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 PRES1蛋白 asgpr 细胞定位 组织分布
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抗人ASGPR大亚基异构体蛋白H1b多克隆抗体的制备和鉴定 被引量:3
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作者 刘嘉 丁红晖 +5 位作者 杨燕 胡斌 余源 黄红平 陆蒙吉 杨东亮 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期917-919,共3页
目的:制备小鼠抗人ASGPR大亚基异构体蛋白H1b的多克隆抗体,并鉴定其特异性。方法:合成H1b特异性多肽,以匙孔血蓝蛋白(KLH)作为载体构建多肽免疫原,通过致敏小鼠,制备小鼠抗人H1b蛋白的多克隆抗体;ELISA法检测抗体效价,通过Western blot... 目的:制备小鼠抗人ASGPR大亚基异构体蛋白H1b的多克隆抗体,并鉴定其特异性。方法:合成H1b特异性多肽,以匙孔血蓝蛋白(KLH)作为载体构建多肽免疫原,通过致敏小鼠,制备小鼠抗人H1b蛋白的多克隆抗体;ELISA法检测抗体效价,通过Western blot和免疫组织化学检测,鉴定抗体的特异性与适用范围。结果:得到小鼠抗人H1b蛋白的多克隆抗体,效价达1∶105。纯化后的抗体用于Western blot可高特异性识别真核表达的H1b蛋白,并可用于免疫组织化学实验。结论:成功制备小鼠抗人H1b蛋白的多克隆抗体,该抗体具有较高的效价以及特异性,能区分ASG-PR大亚基的两种剪接异构体,从而为进一步研究H1b蛋白的生理功能及其在人类疾病中的意义提供了有利工具。 展开更多
关键词 去唾液酸糖蛋白受体 多克隆抗体 剪接异构体
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肝靶向配体半乳糖基白蛋白和多聚谷氨酸 被引量:9
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作者 李崇辉 温守明 +1 位作者 池木根 孙曼霁 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1998年第6期532-535,共4页
化学合成两类去唾液酸糖蛋白受体(ASGPR)的人工配体———半乳糖基白蛋白(GalnHSA)和半乳糖基多聚L谷氨酸(GalnPLGA),并以125I标记的去唾液酸胎球蛋白(ASF)为标准配体,测定了合成配体抑制1... 化学合成两类去唾液酸糖蛋白受体(ASGPR)的人工配体———半乳糖基白蛋白(GalnHSA)和半乳糖基多聚L谷氨酸(GalnPLGA),并以125I标记的去唾液酸胎球蛋白(ASF)为标准配体,测定了合成配体抑制125IASF与大鼠肝细胞膜ASGPR结合的IC50值.结果表明,Gal12HSA、Gal15HSA、Gal26HSA、Gal30HSA和Gal34PLGA均能够有效地抑制125IASF与ASGPR的结合,且前者与ASGPR的亲和力随半乳糖基化程度的增加而增加.这些合成配体来源丰富、制备简单,适合于作为药物或基因肝靶向运送的导向配体. 展开更多
关键词 半乳糖基白蛋白 GalnPLGA asgpr GalnHSA
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去唾液酸糖蛋白受体及其在药物肝靶向递送中的应用 被引量:14
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作者 黄渊余 梁子才 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2015年第6期501-510,共10页
去唾液酸糖蛋白受体(ASGPR)是肝细胞特异性表达的受体,且是一种高效的内吞型受体,去唾液酸糖蛋白、半乳糖、半乳糖胺、N-乙酰半乳糖胺等糖分子对其有高亲和性.该综述回顾了ASGPR的发现历程、结构特征、生物学功能、表达模式、胞吞特点.... 去唾液酸糖蛋白受体(ASGPR)是肝细胞特异性表达的受体,且是一种高效的内吞型受体,去唾液酸糖蛋白、半乳糖、半乳糖胺、N-乙酰半乳糖胺等糖分子对其有高亲和性.该综述回顾了ASGPR的发现历程、结构特征、生物学功能、表达模式、胞吞特点.总结了影响ASGPR与其配体亲和、介导胞吞的影响因素(包括配体类型、触角数量、空间距离与颗粒粒径).概述了早期ASGPR与其特异性配体在药物递送中的应用.最后介绍了最近利用N-乙酰半乳糖胺的缀合或修饰来实现肝靶向核酸药物递送的研究进展. 展开更多
关键词 去唾液酸糖蛋白受体 N-乙酰半乳糖胺 药物递送 肝靶向 小干扰RNA 反义核酸
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