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松材线虫actin基因全长cDNA的克隆 被引量:3
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作者 沈卫锋 牛宝龙 +4 位作者 翁宏飚 何丽华 刘岩 齐晓朋 孟智启 《浙江农业学报》 CSCD 2007年第6期399-403,共5页
借助电子克隆和RACE方法,克隆了松材线虫生长发育关键基因actin的全长cDNA序列(登陆号:EU100952)。该序列共1 296个碱基,有一个完整ORF,起始密码子在48位,终止密码子在1 176位,编码376个氨基酸。
关键词 松材线虫 actin基因 全长CDNA
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扁穗牛鞭草actin基因克隆及荧光定量PCR的建立 被引量:2
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作者 陈永霞 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第16期158-161,共4页
搜索GenBank中禾本科植物actin基因序列进行同源性比对,选择保守区段设计简并引物,利用RT-PCR方法从扁穗牛鞭草中克隆获得actin基因cDNA片段。该基因片段长度为773 bp,编码257个氨基酸残基。根据此actin基因序列设计引物,建立了基于SYBR... 搜索GenBank中禾本科植物actin基因序列进行同源性比对,选择保守区段设计简并引物,利用RT-PCR方法从扁穗牛鞭草中克隆获得actin基因cDNA片段。该基因片段长度为773 bp,编码257个氨基酸残基。根据此actin基因序列设计引物,建立了基于SYBR Green I染料技术的实时荧光定量PCR方法。该方法扩增效率高,检测范围广(R2=0.995,E=101.3%),为actin基因作为内参基因进行扁穗牛鞭草功能基因的定量分析奠定了基础。 展开更多
关键词 扁穗牛鞭草 actin基因 克隆 荧光定量PCR
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光皮桦总RNA的提取及Actin基因的克隆 被引量:8
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作者 王钰 童再康 +1 位作者 黄华宏 林二培 《浙江林业科技》 北大核心 2010年第4期32-36,共5页
以光皮桦(Betula luminifera)的嫩叶为材料,针对光皮桦组织中富含多糖多酚等特点,改进了CTAB法,采用β-巯基乙醇和PVP去除酚类,无水乙醇去除多糖,LiCl沉淀过夜。运用该方法提取得到的RNA,条带整齐、清晰,证明得到的RNA纯度、完整性和产... 以光皮桦(Betula luminifera)的嫩叶为材料,针对光皮桦组织中富含多糖多酚等特点,改进了CTAB法,采用β-巯基乙醇和PVP去除酚类,无水乙醇去除多糖,LiCl沉淀过夜。运用该方法提取得到的RNA,条带整齐、清晰,证明得到的RNA纯度、完整性和产率均较高,蛋白、多糖及酚类等去除较彻底。在此基础上,通过逆转录、PCR和RACE实验从光皮桦中克隆得到Actin基因。 展开更多
关键词 光皮桦 总RNA CTAB法 actin基因
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土人参Actin基因片段的克隆及序列分析 被引量:3
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作者 叶玉妍 陈晓 杨礼香 《广东农业科学》 CAS 2018年第6期19-24,共6页
为土人参功能基因的表达与调控提供内参基因,根据已知植物Actin基因的保守区设计简并性引物,采用RT-PCR方法扩增得到土人参的Actin基因片段,将该片段连接于p GEM-T载体,测序获得一段大小为598 bp的基因片段,该片段编码198个氨基酸。通... 为土人参功能基因的表达与调控提供内参基因,根据已知植物Actin基因的保守区设计简并性引物,采用RT-PCR方法扩增得到土人参的Actin基因片段,将该片段连接于p GEM-T载体,测序获得一段大小为598 bp的基因片段,该片段编码198个氨基酸。通过生物信息学软件分析,该序列与其他植物Actin基因的cDNA序列同源性均在85%以上,氨基酸序列的同源性达到86%以上,表明试验克隆所得基因片段为土人参Actin基因片段。将该Actin基因片段命名为TpActin1,并登陆在Gena Bank,登录号为MH333039。 展开更多
关键词 土人参 肌动蛋白 actin基因 克隆 序列分析
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甜菜Actin基因片段的克隆及序列分析 被引量:4
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作者 梁娜 伍国强 +2 位作者 冯瑞军 刘左军 李志忠 《中国糖料》 2014年第4期13-15,共3页
根据其它植物Actin基因设计一对简并性引物,以甜菜根总RNA为模板,采用RT-PCR的方法扩增出Actin基因片段并克隆到pUCm-T载体上,阳性克隆经PCR鉴定测序。序列分析表明,克隆得到Actin基因家族的两个成员,其片段长度均为598 bp,编码198个氨... 根据其它植物Actin基因设计一对简并性引物,以甜菜根总RNA为模板,采用RT-PCR的方法扩增出Actin基因片段并克隆到pUCm-T载体上,阳性克隆经PCR鉴定测序。序列分析表明,克隆得到Actin基因家族的两个成员,其片段长度均为598 bp,编码198个氨基酸,它们间的同源性为87%。将其分别命名为BvACT1和BvACT2,已在GenBank中注册,登录号为KF214784和KF214785。多重序列比较表明,BvACT1氨基酸序列与其他植物Actin基因的同源性在92%以上,而BvACT2则在93%以上。 展开更多
关键词 甜菜 actin基因 克隆 序列分析
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蒙古冰草肌动蛋白基因片段的克隆与组织表达分析 被引量:14
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作者 云锦凤 赵彦 +1 位作者 石凤敏 王俊杰 《草业学报》 CSCD 北大核心 2011年第2期170-176,共7页
本研究利用同源序列法分离蒙古冰草Actin基因同源片段,并分析蒙古冰草Actin基因在根、茎、叶中的表达特征。根据禾本科植物小麦Actin基因的保守序列设计1对引物A1,经RT-PCR扩增,从蒙古冰草cDNA中克隆到1个长度为541 bp的Actin基因片段,... 本研究利用同源序列法分离蒙古冰草Actin基因同源片段,并分析蒙古冰草Actin基因在根、茎、叶中的表达特征。根据禾本科植物小麦Actin基因的保守序列设计1对引物A1,经RT-PCR扩增,从蒙古冰草cDNA中克隆到1个长度为541 bp的Actin基因片段,使用DNAman和DNAUSER等分子生物学软件进行序列分析,结果表明,该序列编码179个氨基酸,并推测该片段具有Actin超基因家族的保守结构域,含有1个ATP结合位点,抑制蛋白结合位点和胶溶蛋白结合位点;该基因片段的氨基酸序列与小麦Actin基因的同源性为99%,与玉米同源性为96%,与水稻同源性为93%。组织器官特异性表达分析结果表明,该基因在根、茎、叶中的表达量恒定。将该基因片段命名为MwACT1,并在GengBank中登记注册,登录号为FJ490410。 展开更多
关键词 蒙古冰草 actin基因 克隆 表达分析
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