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A/California/07／2009亚型猪流感冷适应减毒疫苗株的拯救及免疫效果评价
被引量：
2
1
作者
段跃强
罗德炎
+5 位作者
邢丽
杨鹏辉
赵忠鹏
贾卫红
李培锋
王希良
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2010年第12期1289-1295,共7页
应用反向遗传学技术,选择冷适应、温度敏感、减毒的A/Ann Arbor/6/60 ca(H2N2)型流感病毒的6个内部基因为骨架,与A/California/07/2009株流感病毒2个抗原基因HA、NA分别克隆到polⅠ-polⅡ转录表达载体pAD3000中,构建8个转录表达载体重...
应用反向遗传学技术,选择冷适应、温度敏感、减毒的A/Ann Arbor/6/60 ca(H2N2)型流感病毒的6个内部基因为骨架,与A/California/07/2009株流感病毒2个抗原基因HA、NA分别克隆到polⅠ-polⅡ转录表达载体pAD3000中,构建8个转录表达载体重组质粒,共转染Vero细胞,获得重配A/California/07/2009ca株流感病毒.重配病毒的TCID50为7.5,病毒传4代后其血凝素(HA)滴度稳定在1∶256,半数感染剂量EID50为8,鸡胚传20代,经RT-PCR鉴定未发现重组病毒基因突变,电镜观察重配病毒符合流感病毒的主要特征;蔗糖纯化的病毒经肌肉注射(灭活)及滴鼻(减毒活病毒)两种途径免疫BALB/c小鼠,结果显示:滴鼻免疫和肌肉注射都可以产生较高效价的血凝抑制(HI)抗体,肌肉注射组产生的HI抗体略高(P=0.044),但肌肉注射组检测不到高效价IgA抗体;滴鼻免疫组鼻冲洗液中可以检测到高效价的IgA抗体,同型病毒感染后,IL-1β、TNFα、IFN-α等前炎因子分泌较早,且高于肌肉注射组(P<0.05),可见,喷鼻减毒疫苗比灭活全病毒疫苗能更好地激发黏膜免疫反应.通过对小鼠各个器官病毒载量的检测发现,4天后鼻腔、气管、脑、肺、脾脏没有病毒存在,证明减毒活疫苗株在小鼠上是安全的.以上数据可以初步断定,重组病毒有作疫苗候选株的可能,而且喷鼻疫苗具有降低免疫剂量、同时激活体内体液免疫和细胞免疫的功能.
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关键词
反向遗传学技术
a/california/07/2009亚型猪流感
8质粒拯救系统
在线阅读
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职称材料
甲型H1N1流感病毒在季流病毒、禽流感病毒共感染时变异可能性的验证
2
作者
鲍琳琳
许黎黎
+6 位作者
孙惠惠
占玲俊
邓巍
朱华
高虹
陈鸿霖
秦川
《中国实验动物学报》
CAS
CSCD
2011年第3期211-215,共5页
目的甲型H1N1流感病毒A/California/7/2009分别与A/Brisbane/10/07和A/ShenZhen/406H/06共感染小型香猪,预测甲流病毒在与季流H3N2病毒/甲流病毒与禽流感病毒共感染时是否会发生变异。方法分别将A/California/7/2009(CA7)与A/Brisbane/1...
目的甲型H1N1流感病毒A/California/7/2009分别与A/Brisbane/10/07和A/ShenZhen/406H/06共感染小型香猪,预测甲流病毒在与季流H3N2病毒/甲流病毒与禽流感病毒共感染时是否会发生变异。方法分别将A/California/7/2009(CA7)与A/Brisbane/10/07(H3N2),A/California/7/2009与A/Shenzhen/406H/06(H5N1)对5～6月龄小型猪共感染,小型猪经复方氯胺酮0.1 mL/kg麻醉后进行滴鼻感染,感染后第5天安乐死动物,取动物肺组织作病毒测序分析。结果 A/California/7/2009(CA7)与A/Brisbane/10/07(H3N2)共感染后,A/California/7/2009病毒PB1基因993位G→A突变,PA基因1659位G→A突变,没有氨基酸的变异。A/California/7/2009与A/Shenzhen/406H/06(H5N1)共感染后A/California/7/2009病毒PB2基因1711位T→C突变。碱基的突变未引起氨基酸的变异。结论 A/California/7/2009(CA7)与A/Brisbane/10/07(H3N2),A/California/7/2009与A/Shenzhen/406H/06(H5N1)共感染后在猪的体内没有发生病毒重组、变异。
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关键词
a/california
/7
/2009
A/Brisbane/10
/07
A/Shenzhen/406H/06
小型
猪
变异
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职称材料
题名
A/California/07／2009亚型猪流感冷适应减毒疫苗株的拯救及免疫效果评价
被引量：
2
1
作者
段跃强
罗德炎
邢丽
杨鹏辉
赵忠鹏
贾卫红
李培锋
王希良
机构
军事医学科学院微生物流行病研究所
内蒙古农业大学兽医系
出处
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2010年第12期1289-1295,共7页
基金
国家自然科学基金资助项目(30700743)~~
文摘
应用反向遗传学技术,选择冷适应、温度敏感、减毒的A/Ann Arbor/6/60 ca(H2N2)型流感病毒的6个内部基因为骨架,与A/California/07/2009株流感病毒2个抗原基因HA、NA分别克隆到polⅠ-polⅡ转录表达载体pAD3000中,构建8个转录表达载体重组质粒,共转染Vero细胞,获得重配A/California/07/2009ca株流感病毒.重配病毒的TCID50为7.5,病毒传4代后其血凝素(HA)滴度稳定在1∶256,半数感染剂量EID50为8,鸡胚传20代,经RT-PCR鉴定未发现重组病毒基因突变,电镜观察重配病毒符合流感病毒的主要特征;蔗糖纯化的病毒经肌肉注射(灭活)及滴鼻(减毒活病毒)两种途径免疫BALB/c小鼠,结果显示:滴鼻免疫和肌肉注射都可以产生较高效价的血凝抑制(HI)抗体,肌肉注射组产生的HI抗体略高(P=0.044),但肌肉注射组检测不到高效价IgA抗体;滴鼻免疫组鼻冲洗液中可以检测到高效价的IgA抗体,同型病毒感染后,IL-1β、TNFα、IFN-α等前炎因子分泌较早,且高于肌肉注射组(P<0.05),可见,喷鼻减毒疫苗比灭活全病毒疫苗能更好地激发黏膜免疫反应.通过对小鼠各个器官病毒载量的检测发现,4天后鼻腔、气管、脑、肺、脾脏没有病毒存在,证明减毒活疫苗株在小鼠上是安全的.以上数据可以初步断定,重组病毒有作疫苗候选株的可能,而且喷鼻疫苗具有降低免疫剂量、同时激活体内体液免疫和细胞免疫的功能.
关键词
反向遗传学技术
a/california/07/2009亚型猪流感
8质粒拯救系统
Keywords
reverse genetics；
a/california
/07
/2009
； 8 plasmids rescue system
分类号
R183.3 [医药卫生—流行病学]
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职称材料
题名
甲型H1N1流感病毒在季流病毒、禽流感病毒共感染时变异可能性的验证
2
作者
鲍琳琳
许黎黎
孙惠惠
占玲俊
邓巍
朱华
高虹
陈鸿霖
秦川
机构
中国医学科学院实验动物研究所
香港大学微生物系新发传染病国家重点实验室
出处
《中国实验动物学报》
CAS
CSCD
2011年第3期211-215,共5页
基金
科技重大专项-艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治(2009ZX10004-402,2009ZX10004-016)
卫生公益性行业科研专项项目(200802036)
中央级公益性科研院所基本科研业务费(DWS200810)
文摘
目的甲型H1N1流感病毒A/California/7/2009分别与A/Brisbane/10/07和A/ShenZhen/406H/06共感染小型香猪,预测甲流病毒在与季流H3N2病毒/甲流病毒与禽流感病毒共感染时是否会发生变异。方法分别将A/California/7/2009(CA7)与A/Brisbane/10/07(H3N2),A/California/7/2009与A/Shenzhen/406H/06(H5N1)对5～6月龄小型猪共感染,小型猪经复方氯胺酮0.1 mL/kg麻醉后进行滴鼻感染,感染后第5天安乐死动物,取动物肺组织作病毒测序分析。结果 A/California/7/2009(CA7)与A/Brisbane/10/07(H3N2)共感染后,A/California/7/2009病毒PB1基因993位G→A突变,PA基因1659位G→A突变,没有氨基酸的变异。A/California/7/2009与A/Shenzhen/406H/06(H5N1)共感染后A/California/7/2009病毒PB2基因1711位T→C突变。碱基的突变未引起氨基酸的变异。结论 A/California/7/2009(CA7)与A/Brisbane/10/07(H3N2),A/California/7/2009与A/Shenzhen/406H/06(H5N1)共感染后在猪的体内没有发生病毒重组、变异。
关键词
a/california
/7
/2009
A/Brisbane/10
/07
A/Shenzhen/406H/06
小型
猪
变异
Keywords
Influenza A
a/california
/7
/2009
a/california
/4
/2009
Co-infection
Miniature pigs
Mutation
分类号
Q95-33 [生物学—动物学]
R33 [医药卫生—人体生理学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
A/California/07／2009亚型猪流感冷适应减毒疫苗株的拯救及免疫效果评价
段跃强
罗德炎
邢丽
杨鹏辉
赵忠鹏
贾卫红
李培锋
王希良
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2010
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
甲型H1N1流感病毒在季流病毒、禽流感病毒共感染时变异可能性的验证
鲍琳琳
许黎黎
孙惠惠
占玲俊
邓巍
朱华
高虹
陈鸿霖
秦川
《中国实验动物学报》
CAS
CSCD
2011
0
在线阅读
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职称材料
已选择
0
条
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