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成纤维细胞生长因子2重组蛋白对鸡原代成肌细胞增殖和分化的影响 被引量：1
1
作者 孙梦 郑钢 +3 位作者 吴俊锋 王沁园 陈佳华 连玲 《中国家禽》 北大核心 2024年第12期24-30,共7页
为研究成纤维细胞生长因子2(FGF2)对鸡原代成肌细胞增殖和分化的影响,试验以鸡原代成肌细胞为研究对象,体外培养使其增殖并分化为肌管。在成肌细胞中添加不同浓度的FGF2重组蛋白,通过EdU和CCK8技术检测FGF2对原代成肌细胞增殖的影响,通... 为研究成纤维细胞生长因子2(FGF2)对鸡原代成肌细胞增殖和分化的影响,试验以鸡原代成肌细胞为研究对象,体外培养使其增殖并分化为肌管。在成肌细胞中添加不同浓度的FGF2重组蛋白,通过EdU和CCK8技术检测FGF2对原代成肌细胞增殖的影响,通过荧光定量PCR检测分化因子MYOD、MYOG的表达情况,分析FGF2对成肌细胞分化的影响。进一步通过转录组测序分析FGF2处理组和对照组的基因表达差异,挖掘调节肌肉发育的潜在分子机制。结果显示:添加FGF2重组蛋白能够显著促进成肌细胞增殖,抑制成肌细胞分化,在5 ng/mL时对细胞增殖促进效果最强。转录组测序数据显示,在FGF2处理组和对照组中存在424个差异表达基因,GO富集分析结果显示差异基因富集到细胞增殖、分化等通路,KEGG分析结果显示差异基因富集到MAPK通路。研究表明,FGF2可能通过影响MAPK通路进而调控成肌细胞的增殖和分化。 展开更多
关键词 鸡 成纤维细胞生长因子2 成肌细胞 肌肉发育
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非促有丝分裂型人酸性成纤维细胞生长因子的受体结合特性及对MAPK信号通路的影响 被引量：18
2
作者 汪小凤 郑青 +6 位作者 蔡绍晖 吴晓萍 许华 赵文 苏志坚 李校堃 张敏 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期179-182,共4页
目的:研究非促分裂人酸性成纤维细胞生长因子(non- mitogenetichumanacidicfibroblastgrowthfac tor,nm haFGF)促细胞增殖活性的变化及其作用机制。方法:采用MTT法测定人酸性成纤维细胞生长因子(haFGF)和nm- haFGF对NIH3T3细胞株的增殖... 目的:研究非促分裂人酸性成纤维细胞生长因子(non- mitogenetichumanacidicfibroblastgrowthfac tor,nm haFGF)促细胞增殖活性的变化及其作用机制。方法:采用MTT法测定人酸性成纤维细胞生长因子(haFGF)和nm- haFGF对NIH3T3细胞株的增殖活性;采用受体放射性配基结合法,测定haFGF和nm- haFGF与其受体结合的亲和力及受体总结合位点数RT ;利用Western印迹检测haFGF和nm- haFGF分别作用于NIH3T3细胞后MAPK信号通路中ERK信号分子的表达。结果:与haFGF比较,nm- haFGF对NIH3T3细胞的促增殖活性降低,nm -haFGF与NIH3T3细胞胞膜上aFGF受体结合的亲和力下降,但与受体结合的总位点数不变。Western半定量检测结果显示,nm -haFGF组信号蛋白ERK的表达水平明显低于haFGF组。结论:nm -haFGF与受体结合能力下降,下调MAPK信号通路是导致nm haFGF的促分裂活性降低的主要原因之一。 展开更多
关键词 非促分裂人酸性成纤维细胞生长因子 受体 信号通路
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2型糖尿病肥胖或超重患者血清成纤维细胞生长因子21水平及其临床价值研究 被引量：11
3
作者 张楠 姜天 +2 位作者 孙莉 代芳 章秋 《中国全科医学》 CAS 北大核心 2018年第5期521-525,共5页
目的研究2型糖尿病(T2DM)肥胖或超重患者血清成纤维细胞生长因子21(FGF21)的水平,并探讨其与体质指数(BMI)、稳态胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)等因素的相关性。方法选取2014年1月—2016年7月安徽医科大学第一附属医院内分泌科住院治疗的T2D... 目的研究2型糖尿病(T2DM)肥胖或超重患者血清成纤维细胞生长因子21(FGF21)的水平,并探讨其与体质指数(BMI)、稳态胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)等因素的相关性。方法选取2014年1月—2016年7月安徽医科大学第一附属医院内分泌科住院治疗的T2DM患者213例,根据BMI分为T2DM肥胖超重组(BMI≥24.0 kg/m^2,127例)和T2DM非肥胖超重组(BMI<24.0 kg/m^2,86例),另选取同期本院体检健康者为健康对照组(114例)。记录受试者血压、BMI、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、糖化血红蛋白(Hb A1c)、空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、HOMA-IR及FGF21水平。结果各组舒张压、体质量、BMI、TG、HDL-C、LDL-C、Hb A1c、FBG、FINS、HOMA-IR比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。T2DM非肥胖超重组FGF21水平高于健康对照组,T2DM肥胖超重组FGF21水平高于健康对照组、T2DM非肥胖超重组(P<0.05)。Spearman相关分析显示,T2DM肥胖超重组FGF21水平与BMI、FINS、HOMA-IR呈正相关(rs=0.312、0.311、0.243,P<0.05)。多元线性回归分析显示,BMI[b=3.654,95%CI(1.543,5.764)]、FINS[b=1.310,95%CI(0.537,2.082)]是T2DM肥胖超重组FGF21水平的影响因素(P<0.05)。结论 T2DM肥胖或超重患者血清FGF21水平升高,且与BMI、胰岛素抵抗等因素有关;FGF21可能用于预测糖尿病、肥胖的发生,并成为治疗糖尿病、肥胖的新一代药物。 展开更多
关键词 糖尿病 2型 肥胖症 成纤维细胞生长因子21 体脂肪率 胰岛素抵抗
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成纤维细胞生长因子21对1型糖尿病动物模型的肝糖代谢影响及机制研究 被引量：15
4
作者 孙国鹏 叶贤龙 +2 位作者 任桂萍 李晋南 李德山 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2011年第10期953-960,共8页
成纤维细胞生长因子(FGF)-21是FGF家族的成员之一.作为近年发现的一种新的糖代谢调节因子,大量研究表明,FGF-21是一种不依赖胰岛素,能够独立降糖的2型糖尿病治疗潜力型药物.但是,能否应用于1型糖尿病的治疗,国内外目前尚无报道.通过改... 成纤维细胞生长因子(FGF)-21是FGF家族的成员之一.作为近年发现的一种新的糖代谢调节因子,大量研究表明,FGF-21是一种不依赖胰岛素,能够独立降糖的2型糖尿病治疗潜力型药物.但是,能否应用于1型糖尿病的治疗,国内外目前尚无报道.通过改良传统造模方法,诱导小鼠缓慢产生糖耐量异常,研究FGF-21对此类模型的糖代谢影响及肝糖代谢机制.通过检测FGF-21短期注射和长期注射后模型动物血糖的变化,研究FGF-21在模型动物上对血糖的调控效果.采用实时定量PCR检测FGF-21对模型动物肝脏中葡萄糖转运蛋白(GLUT)1、4 mRNA的表达影响.利用蒽酮法检测模型动物肝脏中糖原合成量.实验结果显示,FGF-21能够调节1型糖尿病动物的血糖水平,并呈剂量依赖性.同时,首次在1型糖尿病动物模型上证实了低剂量FGF-21(0.125 mg/kg)与胰岛素的协同作用效果优于相同剂量FGF-21和胰岛素单独注射的效果.治疗结果表明,FGF-21能够维持1型糖尿病动物模型血糖在正常范围,效果优于胰岛素.实时定量PCR结果发现,与胰岛素上调GLUT4 mRNA表达量不同的是,FGF-21作用动物模型8周后,GLUT1 mRNA表达量显著提高,长期的FGF-21与胰岛素协同注射使GLUT1、4 mRNA表达量同时显著提高.长期FGF-21与胰岛素协同注射组和高剂量FGF-21注射均可显著提高模型动物肝糖原的合成.结果表明,FGF-21促进动物模型糖代谢机制与增加GLUT1表达、增加糖原合成作用有关.为临床应用FGF-21治疗1型糖尿病,增加胰岛素敏感性提供了理论依据. 展开更多
关键词 成纤维细胞生长因子21 迟发性1型糖尿病动物模型 糖代谢 胰岛素协同作用 糖尿病治疗药物
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成纤维细胞生长因子受体1和受体2在小鼠肾发育中的表达 被引量：5
5
作者 田娟 郭敏 王堃 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1471-1474,共4页
目的观察成纤维细胞生长因子受体1(FGFR1)及受体2(FGFR2)在小鼠肾发育过程中的时空表达,探讨其与肾发育的关系。方法选取胚龄E12、14、16、18d的胎鼠和生后N1、7、14、21、40d的仔鼠肾脏,应用免疫组织化学技术对肾组织中FGFR1和FGFR2的... 目的观察成纤维细胞生长因子受体1(FGFR1)及受体2(FGFR2)在小鼠肾发育过程中的时空表达,探讨其与肾发育的关系。方法选取胚龄E12、14、16、18d的胎鼠和生后N1、7、14、21、40d的仔鼠肾脏,应用免疫组织化学技术对肾组织中FGFR1和FGFR2的表达进行定位观察;应用图像分析技术、体视学方法及免疫印迹技术对肾组织中FGFR1和FGFR2的表达进行定性分析及定量检测。结果免疫组化结果显示,胚龄E12d时FGFR1和FGFR2即开始表达。FGFR1在发育各期的肾小体(即逗号小体、S小体、毛细血管襻期肾小体、未成熟期肾小体及成熟期肾小体)、远端小管和集合管均有表达,而在近端小管未见表达。FGFR2主要在远端小管表达,在各期发育肾小体、近端小管和集合管未见表达。图像分析结果显示,随着肾脏的发育,FGFR1、FGFR2表达逐渐增高。体视学及免疫印迹检测结果显示,FGFR1和FGFR2的含量都随着肾脏的发育逐渐增加。结论 FGFR1和FGFR2对小鼠肾发育所起的作用不同,FGFR1与肾小体、远端小管和集合管发育相关,而FGFR2主要与远端小管发育相关。 展开更多
关键词 受体 成纤维细胞生长闪子 1型 受体 成纤维细胞生长因子 2型 肾 发育生物学 小鼠
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野百合碱所致肺动脉高压大鼠模型中碱性成纤维细胞生长因子、内皮素-1及其受体的表达和外源性NO的作用 被引量：12
6
作者 顾勇 王治平 +2 位作者 鲁建军 张希 孙培吾 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第10期1416-1417,1436,共3页
目的 :探讨野百合碱 (MCT)肺动脉高压模型大鼠肺组织中碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)、内皮素 - 1(ET - 1)和内皮素A受体 (ETAR)的表达 ,并观察吸入外源性NO的作用。方法 :通过腹腔注射MCT建立肺动脉高压大鼠模型 ;使用NO吸入装置给予... 目的 :探讨野百合碱 (MCT)肺动脉高压模型大鼠肺组织中碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)、内皮素 - 1(ET - 1)和内皮素A受体 (ETAR)的表达 ,并观察吸入外源性NO的作用。方法 :通过腹腔注射MCT建立肺动脉高压大鼠模型 ;使用NO吸入装置给予大鼠外源性NO ;采用免疫组织化学方法定量检测不同组间肺组织中bFGF、ET - 1及ETA 受体的表达。结果 :模型组肺动脉压、右心室肥厚程度、bFGF、ET - 1及ETA 受体的表达明显高于对照组 ,外源性NO吸入能明显减低肺动脉压、右室肥厚程度、bFGF、ET - 1及ETA 受体的表达。结论 :bFGF、ET -1及ETA 受体可能参与了MCT所致肺动脉高压的发生发展 ,外源性NO吸入可能通过ET - 1及ETA 受体途径阻止或逆转肺动脉高压的发展 ,但如何通过bFGF起作用还有待探讨。 展开更多
关键词 肺动脉高压 成纤维细胞生长因子2 内皮缩血管肽1 一氧化氮 大鼠 野百合碱
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血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子-2及雌激素受体在早产儿视网膜病发病机制中的作用 被引量：4
7
作者 石文静 陈超 +2 位作者 周国民 胡宝洋 肖虹蕾 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期228-232,共5页
目的 测定新生小鼠视网膜正常发育及视网膜病时血管内皮生长因子（VEGF）、碱性成纤维细胞生长因子-2（FGF-2）和雌激素受体（ER）表达的改变,了解它们在早产儿视网膜病（ROP）发病机制中的作用.方法 选择7日龄（P7）C57BL/6J新生小鼠47... 目的 测定新生小鼠视网膜正常发育及视网膜病时血管内皮生长因子（VEGF）、碱性成纤维细胞生长因子-2（FGF-2）和雌激素受体（ER）表达的改变,了解它们在早产儿视网膜病（ROP）发病机制中的作用.方法 选择7日龄（P7）C57BL/6J新生小鼠474只,雌雄各半,分为吸氧组和对照组两大组,再按性别分成4小组,用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）测定VEGF、FGF-2和ER的mRNA水平,用免疫组化测定它们的蛋白水平.具体分组及取材时间为：组1（n=126）,吸氧组,雌性;组2（n=126）,吸氧组,雄性,两组均自吸氧后每天分离视网膜至P21（P8～P21）行RT-PCR,每天摘眼石蜡包埋后行免疫组化;组3（n=111）,对照组,雌性;组4（n=111）,对照组,雄性,均自P7起每天分离视网膜至P17（P7～P17）行RT-PCR,自P7起每天摘眼至P21（P7～P21）行免疫组化.结果 （1）VEGF mRNA在正常小鼠自P7起上升,P9达高峰,P11起下降并始终维持低水平;在吸氧组自P8起显著下降,且在整个吸氧阶段持续降低,至出氧箱后缓慢上升,自P15起显著上升,并和对照组形成显著差异,受氧浓度的调节非常明显.FGF-2 mRNA在正常小鼠始终维持相对稳定的低水平;在吸氧组,吸氧期间无明显变化,出氧箱后3 d开始上升.ER mRNA在正常小鼠自P7起上升,P9达高峰,P11起下降并始终维持低水平;在吸氧组,吸氧期间变化与对照组相似,出氧箱后5 d开始上升,并维持较高水平直至P21.这3个细胞因子的蛋白水平变化均晚于其基因水平变化,但变化趋势基本相同.（2）性别和吸氧都不能单独影响上述细胞因子的表达（P＞0.05）;日龄可独立地影响它们的表达;吸氧和日龄两因素结合起来可显著影响它们的表达（P＜0.000 1）.结论 引起ROP发病的根本原因是早产,吸氧是其重要的外因;VEGF、FGF-2和ER参与血管的形成,在视网膜血管正常发育和ROP的发病机制中起重要作用;VEGF直接受氧浓度调节,在众多细胞因子中可能起关键性作用. 展开更多
关键词 早产儿 视网膜病 血管内皮生长因子 碱性成纤维细胞生长因子 雌激素受体 小鼠
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成纤维细胞生长因子受体各亚型与小鼠肺纤维化及衰老的关系 被引量：4
8
作者 李小溪 常红恩 +4 位作者 奈文青 白晓燕 孙颖 余焱林 戴萌 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期607-610,共4页
目的观察成纤维细胞生长因子受体(FGFR)各亚型与肺组织的纤维化及衰老之间的关系。方法应用荧光定量聚合酶链反应方法,分别检测不同鼠龄的小鼠肺组织FGFR1-4的表达水平;同时,采用常规病理切片(HE染色和Masson染色)观察不同鼠龄小鼠肺组... 目的观察成纤维细胞生长因子受体(FGFR)各亚型与肺组织的纤维化及衰老之间的关系。方法应用荧光定量聚合酶链反应方法,分别检测不同鼠龄的小鼠肺组织FGFR1-4的表达水平;同时,采用常规病理切片(HE染色和Masson染色)观察不同鼠龄小鼠肺组织的纤维化状况。结果(1)FGFR各亚型在小鼠肺组织中表达水平不均匀,FGFR2的含量高于其他几个亚型;(2)8月龄小鼠肺组织中FGFR亚型表达水平均显著低于5周龄小鼠肺组织中FGFR的表达;(3)8月龄的小鼠肺组织表现出肺纤维化的变化。结论小鼠肺组织中FGFR水平的下降可能与年龄的增加相关;不同年龄组均以FGFR2的含量为高;小鼠肺组织随着鼠龄增加呈现不同程度的纤维化,可能与FGFR的表达下降相关;提示FGFs/FGFR可能参与衰老的发生及肺纤维化调节。 展开更多
关键词 肺纤维化 成纤维细胞生长因子受体 衰老
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精神分裂症患者血清成纤维细胞生长因子2、瞬时受体电位通道1水平与精神症状的相关性 被引量：3
9
作者 张晓鸣 过斌 +3 位作者 刘彦茹 张房昉 刘华清 王志仁 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第11期1422-1426,共5页
目的探讨成纤维细胞生长因子2(FGF2)、瞬时受体电位通道1(TRPC1)在精神分裂症患者中的表达及与精神症状的相关性。方法选取2019年7月至2022年6月医院收治的200例精神分裂症患者和进行健康体检的正常人群200例分别设为观察组和对照组。... 目的探讨成纤维细胞生长因子2(FGF2)、瞬时受体电位通道1(TRPC1)在精神分裂症患者中的表达及与精神症状的相关性。方法选取2019年7月至2022年6月医院收治的200例精神分裂症患者和进行健康体检的正常人群200例分别设为观察组和对照组。收集一般资料,采用酶联免疫吸附法检测血清中FGF2表达水平;采用WD-3000全自动血液分析仪和免疫比色法检测TRPC1水平;采用阳性与阴性症状量表(PANSS)评价精神症状;Pearson法分析FGF2、TRPC1与精神症状指标的相关性。利用受试者工作特征(ROC)曲线评价血清FGF2、TRPC1水平对精神分裂症的诊断价值。结果观察组患者血清中TRPC1表达水平均低于对照组,FGF2表达水平高于对照组(P<0.05);观察组患者总PANSS评分、阳性评分、阴性评分、一般症状评分均高于对照组(P<0.05);精神分裂症患者血清FGF2表达与总PANSS评分、阳性评分、阴性评分、一般症状评分均呈正相关,TRPC1表达与总PANSS评分、阳性评分、阴性评分、一般症状评分均呈负相关(P<0.05)。血清FGF2、TRPC1水平预测精神分裂症患者的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.928、0.911,对应的敏感度分别为84.00%、89.50%,特异度分别为89.00%、86.50%;两者联合检测精神分裂症患者的AUC为0.969,敏感度和特异度分别为94.50%、90.00%。结论精神分裂症患者血清FGF2水平明显升高,TRPC1水平明显降低,血清FGF2、TRPC1水平与患者的精神症状密切相关。 展开更多
关键词 精神分裂症 成纤维细胞生长因子2 瞬时受体电位通道1 精神症状
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鸡成纤维细胞生长因子Ⅰ型受体胞外段原核表达载体的构建及表达鉴定 被引量：2
10
作者 郑少江 黄凤迎 +2 位作者 郑少萍 王伟 吴人亮 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期433-435,439,共4页
目的构建重组原核表达载体以获得鸡成纤维细胞生长因子Ⅰ型受体(FGFR-1)胞外段活性蛋白,为进一步研制FGFR-1蛋白质肿瘤疫苗打下基础。方法利用RT-PCR技术,从鸡胚肝中扩增出鸡的FGFR-1胞外段基因的cD-NA,用内切酶消化后插入原核表达质粒p... 目的构建重组原核表达载体以获得鸡成纤维细胞生长因子Ⅰ型受体(FGFR-1)胞外段活性蛋白,为进一步研制FGFR-1蛋白质肿瘤疫苗打下基础。方法利用RT-PCR技术,从鸡胚肝中扩增出鸡的FGFR-1胞外段基因的cD-NA,用内切酶消化后插入原核表达质粒pQE30中。经过琼脂糖凝胶电泳和测序鉴定后,体外转化大肠埃希菌,用RT-PCR和免疫印迹方法鉴定是否能够正确表达,同时利用Ni-NTA琼脂柱层析法纯化复性重组蛋白。结果琼脂糖凝胶电泳和测序鉴定证实PCR扩增的cDNA及构建的重组原核表达质粒pQE30-FGFR-1正确,并在大肠埃希菌中正确表达。经纯化后,进行SDS-PAGE电泳显示得到1条分子量约40 ku的蛋白质条带。结论成功构建鸡FGFR-1胞外段原核表达载体并获得重组活性蛋白。 展开更多
关键词 成纤维细胞生长因子Ⅰ型受体 肿瘤血管生成 原核表达 基因重组
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转化生长因子β型受体Ⅰ基因RNA干扰慢病毒载体的构建及其在人胚肺成纤维细胞中的表达 被引量：2
11
作者 林时辉 付娟 +1 位作者 王川江 刘琼 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期915-922,共8页
目的:构建转化生长因子β型受体Ⅰ(transforming growth factor beta receptorⅠ,TGFβRⅠ)基因RNA干扰(RNA interference,RNAi)慢病毒载体并在人胚肺成纤维细胞株MRC-5上鉴定其沉默效应。方法:构建4种针对人TGFβRⅠ基因不同干扰靶点... 目的:构建转化生长因子β型受体Ⅰ(transforming growth factor beta receptorⅠ,TGFβRⅠ)基因RNA干扰(RNA interference,RNAi)慢病毒载体并在人胚肺成纤维细胞株MRC-5上鉴定其沉默效应。方法:构建4种针对人TGFβRⅠ基因不同干扰靶点的慢病毒干扰载体,PCR筛选阳性克隆,测序鉴定,将筛选出的4种有效重组慢病毒干扰载体和其它辅助质粒一起共转染293T细胞并测定病毒滴度。最后将4种重组的慢病毒干扰载体分别感染MRC-5细胞,采用Real-time PCR和Western blot检测它们对靶基因的沉默效率。结果:经双酶切鉴定和DNA测序,证实短发夹RNA正确插入慢病毒载体且插入的序列正确。4种重组慢病毒干扰载体经293T细胞成功包装后,其病毒滴度分别为:si RNA-1 6.37×107 TU/ml、si RNA-2 1.65×108 TU/ml、si RNA-3 4.50×108TU/ml、si RNA-4 2.31×108TU/ml,阴性对照组载体包装后的病毒滴度为:1.79×109 TU/ml。4种重组慢病毒干扰载体感染MRC-5细胞的效率均为93%左右。与正常对照组和阴性对照组比较,在感染4种重组慢病毒干扰载体(si RNA-1~4)后,MRC-5细胞内TGFβRⅠm RNA表达水平均明显下降(P=0.000),其中TGFβRⅠ-si RNA-2下降最明显,沉默效率最好。Western blot结果与q RT-PCR结果一致,4种重组慢病毒干扰载体均能使MRC-5细胞内TGFβRⅠ蛋白表达明显下降(P=0.000),且TGFβRⅠ-si RNA-2干扰效率最大。结论:筛选并构建了能有效沉默TGFβRⅠ基因的最佳RNAi重组慢病毒载体——TGFβR-si RNA-2,从而为后续研究奠定基础。 展开更多
关键词 RNA干扰 慢病毒载体 转化生长因子βⅠ型受体 人胚肺成纤维细胞
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血管钙化大鼠模型肾脏β-Klotho及成纤维细胞生长因子受体1表达研究 被引量：4
12
作者 史雨晨 柳景华 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2017年第5期507-510,共4页
目的:观察血管钙化对大鼠肾功能的损伤情况,及其与肾脏组织局部β-Klotho[成纤维细胞生长因子21(FGF21)的辅助因子]、成纤维细胞生长因子受体1(FGFR1)表达变化关系,探讨β-Klotho及FGFR1在血管钙化肾脏损伤中的作用和意义。方法:实验动... 目的:观察血管钙化对大鼠肾功能的损伤情况,及其与肾脏组织局部β-Klotho[成纤维细胞生长因子21(FGF21)的辅助因子]、成纤维细胞生长因子受体1(FGFR1)表达变化关系,探讨β-Klotho及FGFR1在血管钙化肾脏损伤中的作用和意义。方法:实验动物按电脑随机数字表法分为正常对照组和钙化组,每组6只。钙化组采用维生素D3联合尼古丁诱导大鼠血管钙化模型。以肌氨酸氧化酶法检测大鼠血清肌酐浓度,以紫外-谷氨酸脱氢酶法检测大鼠血清尿素氮浓度,以生化法检测大鼠血钙及血磷浓度,以碱性磷酸酶(ALP)试剂盒检测大鼠肾脏组织ALP活性,以酶联免疫吸附法检测大鼠肾脏组织β-Klotho及FGFR1蛋白含量。结果:与正常对照组比较,血管钙化组大鼠血清肌酐及尿素氮水平升高[(35.200±4.087)μmol/L vs(26.000±5.0990)μmol/L,(P<0.05);(6.900±0.623)mmol/L vs(5.400±0.803)mmol/L,(P<0.05)];大鼠肾脏组织局部ALP活性升高[(60.510±31.090)U/g vs(26.590±8.664)U/g,(P<0.05)];肾脏组织β-Klotho蛋白表达量增加[(9.052±1.238)ng/mg vs(6.860±1.036)ng/mg,(P<0.05)],而血钙及血磷浓度及大鼠肾脏组织FGFR1蛋白含量较正常对照组未见明显变化。结论:大剂量维生素D3肌肉注射联合尼古丁灌胃可导致大鼠肾脏组织局部钙超载及微血管钙化形成,并导致肾功能不全,出现早期慢性肾脏病(CKD)临床表现。同时病变肾脏组织局部β-Klotho表达量上调,而FGFR1在肾脏组织局部未见明显变化,提示FGF21在血管钙化大鼠肾脏组织局部的调节作用可能不是通过增加其受体FGFR1的数量,而是通过上调其结合辅助因子β-Klotho的表达而实现的。同时提示β-Klotho参与了血管钙化肾脏损伤的早期调节过程,可能为预测机体钙超载情况及CKD早期的预警信号,对CKD的早期诊断具有一定价值。 展开更多
关键词 β-Klotho 受体 成纤维细胞生长因子 血管钙化
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截短型小鼠成纤维细胞生长因子受体-1基因慢病毒载体构建及在真核细胞中的表达 被引量：1
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作者 陈伟 陈翀 +4 位作者 张焕新 闫志凌 程海 曾令宇 徐开林 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期168-172,共5页
本研究旨在克隆小鼠成纤维细胞生长因子受体1(fibroblast growth factor receptor 1,fgfr1)基因,构建携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的截短型fgfr1(△fgfr1)重组慢病毒载体并在真核细胞中表达。采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)以BALB/c... 本研究旨在克隆小鼠成纤维细胞生长因子受体1(fibroblast growth factor receptor 1,fgfr1)基因,构建携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的截短型fgfr1(△fgfr1)重组慢病毒载体并在真核细胞中表达。采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)以BALB/c胎鼠脑组织为模板克隆全长型fgfr1基因,连接至克隆载体pCR-Blunt,通过反向PCR技术删除胞内磷酸化区域获得△fgfr1,限制性内切酶酶切后亚克隆至慢病毒转移质粒,构建携带EGFP及△fgfr1双顺反子自身失活型重组慢病毒表达质粒,通过脂质体转染法与包装质粒及包膜蛋白质粒共转染包装细胞293FT,超速离心浓缩病毒颗粒后转染293FT细胞,用荧光显微镜及流式细胞术(FCM)检测EGFP的表达,免疫印迹法(Western blot)鉴定截短型FGFR1蛋白表达。结果表明,成功克隆小鼠fgfr1基因,构建重组慢病毒转移载体LV-IRES-EGFP-△fgfr1及对照载体LV-IRES-EGFP,三质粒系统共转染293FT细胞后获得病毒滴度达到108 TU/ml。以重组病毒载体转染293FT细胞后第4天在荧光显微镜下观察到较强绿色荧光表达,FCM检测转染效率可达95%,Western blot检测显示,转染后293FT细胞表达截短型FGFR1蛋白。结论:成功构建了自身失活型慢病毒载体LV-IRES-EGFP-△fgfr1,并在真核细胞中获得表达。 展开更多
关键词 成纤维细胞生长因子受体基因 慢病毒载体构建 基因表达 293FT细胞
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成纤维细胞生长因子1非促分裂突变体对2型糖尿病大鼠血管功能的保护作用 被引量：1
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作者 南燕 李娜 +7 位作者 董育 邱鹏程 胡智盛 蔡昌洲 孔灵国 何正乐 应磊 汪洋 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1945-1950,共6页
目的:研究成纤维细胞生长因子1非促分裂突变体(n FGF1)对链脲佐菌素和高脂饮食诱导的2型糖尿病大鼠主动脉血管功能的保护作用并探讨其机制。方法:将5周龄左右(200±20)g雄性SD大鼠30只随机分为正常对照组、2型糖尿病模型组和2型糖... 目的:研究成纤维细胞生长因子1非促分裂突变体(n FGF1)对链脲佐菌素和高脂饮食诱导的2型糖尿病大鼠主动脉血管功能的保护作用并探讨其机制。方法:将5周龄左右(200±20)g雄性SD大鼠30只随机分为正常对照组、2型糖尿病模型组和2型糖尿病模型+n FGF1给药组,每组10只。给药组予以0.5 mg/kg n FGF1腹腔注射4周(隔天给药),对照组和糖尿病模型组则给予等量的生理盐水。监测各组大鼠的血糖变化情况,检测大鼠主动脉舒张功能变化,检测动脉组织超氧化物歧化酶(SOD)水平,检测环氧化酶2(COX-2)、磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)和内皮型一氧化氮合酶(e NOS)的蛋白表达水平,检测血清中葡萄糖、胆固醇和甘油三酯水平,研究n FGF1对2型糖尿病大鼠主动脉血管功能的调节作用。结果:n FGF1可明显降低2型糖尿病大鼠血清中葡萄糖、胆固醇和甘油三酯水平,显著增强主动脉SOD活性及e NOS蛋白表达水平,并明显下调COX-2和p-ERK的蛋白水平。结论:n FGF1可以有效保护2型糖尿病大鼠主动脉血管功能,其机制可能与降低血糖和血脂,减轻炎症和氧化应激反应,以及上调e NOS信号通路有关。 展开更多
关键词 2型糖尿病 成纤维细胞生长因子1 炎症 氧化应激
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血清全段成纤维细胞生长因子-23在2型糖尿病肾病不同分期中的变化 被引量：3
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作者 张宝玉 庞倩倩 +5 位作者 姜艳 王鸥 李梅 邢小平 赵冬 夏维波 《中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志》 2015年第2期126-131,共6页
目的研究2型糖尿病肾病（DN）不同临床分期患者血清全段成纤维细胞生长因子-23（iFGF-23）水平的变化,探讨2型糖尿病患者血清iFGF-23水平、尿微量白蛋白排泄率（UAER）和肾功能变化的相关性。方法选取2型糖尿病患者共119例,根据尿微量... 目的研究2型糖尿病肾病（DN）不同临床分期患者血清全段成纤维细胞生长因子-23（iFGF-23）水平的变化,探讨2型糖尿病患者血清iFGF-23水平、尿微量白蛋白排泄率（UAER）和肾功能变化的相关性。方法选取2型糖尿病患者共119例,根据尿微量白蛋白排泄率分为4组：尿微量白蛋白排泄率正常组（DM1组,8°UAER〈20μg/min,血清肌酐水平正常）30例;微量白蛋白尿组（DM2组,8°UAER20~200μg/min,血清肌酐水平正常）30例;临床蛋白尿组（DM3组,8°UAER〉200μg/min,血清肌酐水平正常）28例;尿毒症血液透析组（DM4组）31例。正常对照组（N组）29例。收集受试者基本资料,空腹静脉采血测血糖、血脂,肝、肾功能,全段甲状旁腺激素（iPTH）,血清iFGF-23,DM1组、DM2组、DM3组留取8h尿检测8°UAER。所有资料应用SPSS22.0软件包进行统计学分析。结果DM4组血清iFGF-23为558.93（168.65~2333.5）pg/mL水平显著高于其他组（P〈0.001）,但其他各组间差异无统计学意义。血清iFGF-23水平和肾小球滤过率（eGFR）呈负相关,与血清肌酐（Scr）,尿素氮（BUN）,葡萄糖（GLU）,血磷（P）,碱性磷酸酶（ALP）,iPTH呈正相关。结论糖尿病肾病晚期血清iFGF-23水平显著升高,血清iFGF-23水平与血磷、血清肌酐、尿素氮和iPTH呈正相关,与eGFR水平显著负相关。提示iFGF-23不能作为DN早期的生化标志物。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 2型糖尿病 血清全段成纤维细胞生长因子-23
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复方丹参滴丸对2型糖尿病下肢血管病变成纤维细胞生长因子21及载脂蛋白M水平的干预作用 被引量：7
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作者 方朝晖 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2019年第8期1803-1806,共4页
目的:研究复方丹参滴丸治疗2型糖尿病下肢血管病变的临床疗效及其对纤维细胞生长因子21(fibroblast growth factor 21,FGF21)、载脂蛋白M(Apolipoprotein M,Apo M)水平的影响。方法:选取2型糖尿病合并下肢血管病变患者120例,按照随机数... 目的:研究复方丹参滴丸治疗2型糖尿病下肢血管病变的临床疗效及其对纤维细胞生长因子21(fibroblast growth factor 21,FGF21)、载脂蛋白M(Apolipoprotein M,Apo M)水平的影响。方法:选取2型糖尿病合并下肢血管病变患者120例,按照随机数字表法,1∶1将其随机分为观察组和对照组各60例。两组患者均给予基础治疗,治疗组加用复方丹参滴丸治疗,每次15粒,每日3次口服;疗程为1年。观察患者HbA1c、FPG、2hPG、TC、TG、HDL-C、LDL-C、血清FGF21、Apo M水平;测定踝/肱指数(ABI)及下肢血管动脉内径。结果:治疗前两组在HbA1c、FPG、2hPG、TC、TG、HDL-C、LDL-C、血清FGF21、Apo M水平;测定踝/肱指数(ABI)及下肢血管动脉内径两组无统计学差异(P>0.05);治疗后两组以上指标水平较治疗前改善(P<0.05),且治疗组优于对照组(P<0.05)。结论:复方丹参滴丸可以有效改善2型糖尿病下肢血管病变患者踝/肱指数(ABI)及下肢血管动脉内径,其机制可能是通过调节患者体内FGF21及ApoM水平实现的。 展开更多
关键词 2型糖尿病 下肢血管病变 复方丹参滴丸 纤维细胞生长因子21 载脂蛋白M
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成纤维细胞生长因子7、10及其受体2Ⅲb在小鼠肾脏发育中的表达
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作者 王堃 李佳 田娟 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期756-759,共4页
目的观察成纤维细胞生长因子7、10(FGF7、FGF10)及其受体2Ⅲb(FGFR2Ⅲb)在不同发育阶段的小鼠肾脏的表达变化情况,探讨其与肾脏发育的关系。方法选取胚龄E12、14、16、18d胎鼠和生后N1、3、7、14、21和42d仔鼠肾脏,应用免疫组织化学技... 目的观察成纤维细胞生长因子7、10(FGF7、FGF10)及其受体2Ⅲb(FGFR2Ⅲb)在不同发育阶段的小鼠肾脏的表达变化情况,探讨其与肾脏发育的关系。方法选取胚龄E12、14、16、18d胎鼠和生后N1、3、7、14、21和42d仔鼠肾脏,应用免疫组织化学技术对小鼠肾组织中FGF7、FGF10和FGFR2Ⅲb表达进行定位观察;应用体视学方法及Western blotting法对小鼠肾组织中FGF7、FGF10和FGFR2Ⅲb表达进行定性分析和定量检测。结果免疫组织化学法显示,E12d时,FGF7、FGF10和FGFR2Ⅲb开始在输尿管芽微弱表达;随着肾脏发育成熟,三者主要表达于远端小管和集合管。FGF10在近曲小管表达,近直小管无表达;FGF7和FGFR2Ⅲb在近端小管无表达。生后肾组织及发育各阶段肾小体未见FGF7、FGF10和FGFR2Ⅲb的表达。体视学和Western blotting结果显示,从E14d至N7d,三者在肾脏的表达量明显增加,N7d至N42d表达量逐渐减少。结论 FGF7、FGF10和FGFR2Ⅲb在肾脏发生和发育过程中可能起着重要作用。FGF10主要作用于近曲小管、远端小管和集合管,而FGF7和FGFR2Ⅲb主要作用于远端小管和集合管。 展开更多
关键词 成纤维细胞生长因子 受体 成纤维细胞生长因子 2型 肾
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法尼酯X受体上调肝细胞中成纤维细胞生长因子21的表达
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作者 王永超 刘红 +4 位作者 彭家和 李良鹏 董金瑜 张艳 江渝 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期912-915,共4页
目的研究法尼酯X受体(farnesoid X receptor,FXR)对成纤维细胞生长因子21(fibroblast growth factor,FGF21)表达的影响。方法用FXR特异性激动剂终浓度为0、50、100μmol/L的CDCA和0、1、5μmol/L的GW4064分别处理人肝癌细胞株HepG2和人... 目的研究法尼酯X受体(farnesoid X receptor,FXR)对成纤维细胞生长因子21(fibroblast growth factor,FGF21)表达的影响。方法用FXR特异性激动剂终浓度为0、50、100μmol/L的CDCA和0、1、5μmol/L的GW4064分别处理人肝癌细胞株HepG2和人胚胎肝细胞L02细胞后,用逆转录-聚合酶链法(RT-PCR)检测FXR特异性靶基因小异源二聚体配体(small heterodimer parterner,SHP)和FGF21 mRNA的表达变化,再用Western blot法检测FGF21蛋白表达水平的变化。结果用FXR特异性激动剂CDCA和GW4064刺激后,分别比较HepG2和L02细胞SHP与β-actin mRNART-PCR产物光密度比值,比值均明显增高(P<0.05),反应HepG2和L02细胞内SHP mRNA水平均明显升高,表明FXR在2种细胞中被激活;分别比较HepG2和L02细胞FGF21与β-actin RT-PCR产物光密度比值以及FGF21与β-actin蛋白光密度比值,比值均明显升高(P<0.05),表明FGF21 mRNA和蛋白水平均明显升高。结论激活的FXR可以上调FGF21的表达。 展开更多
关键词 法尼酯X受体 成纤维细胞生长因子21 鹅脱氧胆酸 肥胖
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凝血酶和PAR-1受体对成骨细胞白介素-6和成纤维细胞生长因子-2表达的影响
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作者 宋淑军 王宗烨 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2009年第12期905-907,共3页
目的探讨凝血酶对小鼠成骨细胞某些因子表达的调节作用。方法使用小鼠颅骨的成骨细胞,通过荧光定量PCR方法和人工合成的PAR-1或PAR-4特异性激活短肽了解受体介导的凝血酶对成骨细胞因子表达的影响。结果凝血酶不影响成骨细胞转化生长因... 目的探讨凝血酶对小鼠成骨细胞某些因子表达的调节作用。方法使用小鼠颅骨的成骨细胞,通过荧光定量PCR方法和人工合成的PAR-1或PAR-4特异性激活短肽了解受体介导的凝血酶对成骨细胞因子表达的影响。结果凝血酶不影响成骨细胞转化生长因子、血小板生长因子A、胰岛素样生长因子-Ⅰ和-Ⅱ的表达,凝血酶和PAR-1受体激活肽可以显著上调成骨细胞成纤维细胞生长因子-2(FGF-2)和白介素-6(IL-6)的表达,但对IL-6表达的调节作用,凝血酶远较PAR-1激活肽为强,而PAR-4特异性激活肽并不影响这两种因子的表达。结论凝血酶可以促进小鼠成骨细胞FGF-2和IL-6的表达,此作用可能是通过PAR-1和非PAR-1通路介导的,凝血酶对FGF-2表达的调节可能完全是由PAR-1介导的,而凝血酶对IL-6表达的影响部分是由PAR-1介导的,部分可能是由未知受体介导的。PAR-4并不参与介导凝血酶对FGF-2和IL-6表达的调节作用。 展开更多
关键词 凝血酶 成骨细胞 成骨细胞成纤维细胞生长因子-2 白介素-6
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小鼠骨髓间充质干细胞通过JAK2/STAT3信号通路对成纤维细胞增殖和胶原表达水平的影响
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作者 黎涵玥 阳莲 +2 位作者 刘剑锋 张舒飞 洪莉 《吉林大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第2期325-332,共8页
目的:探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)对L929细胞增殖和其胶原表达水平的影响,阐明其相关作用机制。方法:提取4周龄C57BL/6小鼠的BMSCs。采用免疫荧光染色鉴定BMSCs的表型。将L929细胞分为对照组(L929细胞)、共培养组(L929细胞与BMSCs)、Ja... 目的:探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)对L929细胞增殖和其胶原表达水平的影响,阐明其相关作用机制。方法:提取4周龄C57BL/6小鼠的BMSCs。采用免疫荧光染色鉴定BMSCs的表型。将L929细胞分为对照组(L929细胞)、共培养组(L929细胞与BMSCs)、Janus激酶(JAK)抑制剂WP1066组(WP1066处理L929细胞与BMSCs)和二甲基亚砜(DMSO)组(DMSO处理L929细胞与BMSCs)。细胞计数试剂盒8 (CCK-8)法检测不同时间点各组L929细胞增殖活性,Western blotting法检测各组L929细胞中Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)和Ⅲ型胶原蛋白(ColⅢ)表达水平,免疫荧光染色法检测各组L929细胞中ColⅠ和ColⅢ蛋白表达。结果:BMSCs表面抗原(SA)荧光检测,BMSCs表达表面标志物CD29+、CD45-、CD90+和CD105+。CCK-8法检测,与对照组比较,共培养组L929细胞增殖活性明显升高(P<0.01),DMSO组L929细胞增殖活性明显升高(P<0.01);与共培养组比较,WP1066组L929细胞增殖活性明显降低(P<0.01)。Western blotting法检测,与对照组比较,共培养组和DMSO组L929细胞中ColⅠ及ColⅢ蛋白表达水平明显升高(P<0.01);与共培养组比较,WP1066组L929细胞中ColⅠ和ColⅢ蛋白表达水平明显降低(P<0.01);与DMSO组比较,WP1066组L929细胞中ColⅠ和ColⅢ蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。免疫荧光染色法检测,与对照组比较,共培养组和DMSO组L929细胞中ColⅠ及ColⅢ荧光强度明显升高(P<0.01);与共培养组比较,WP1066组L929细胞中ColⅠ和ColⅢ荧光强度明显降低(P<0.01);与DMSO组比较,WP1066组L929细胞中ColⅠ和ColⅢ荧光强度明显降低(P<0.01)。结论:间充质干细胞可通过JAK2/信号转导和转录激活子3 (STAT3)信号通路促进小鼠L929细胞增殖及胶原生成。 展开更多
关键词 盆底功能障碍性疾病 骨髓间充质干细胞 成纤维细胞 Ⅰ型胶原蛋白 Ⅲ型胶原蛋白 JANUS激酶2 信号转导和转录激活子3
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