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石蒜1-氨基环丙烷-1-羧酸合酶基因LrACS的克隆及功能鉴定
1
作者 樊雅婷 李雪纯 +1 位作者 李晓丹 汪仁 《植物资源与环境学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期74-82,共9页
为了解1-氨基环丙烷-1-羧酸合酶(ACS)基因在石蒜〔Lycoris radiata(L'Hér.)Herb.〕乙烯合成中的作用,对石蒜ACS基因LrACS进行了克隆,并通过系统进化树和氨基酸序列比对分析明确LrACS与其他同源蛋白的进化关系。利用亚细胞定位... 为了解1-氨基环丙烷-1-羧酸合酶(ACS)基因在石蒜〔Lycoris radiata(L'Hér.)Herb.〕乙烯合成中的作用,对石蒜ACS基因LrACS进行了克隆,并通过系统进化树和氨基酸序列比对分析明确LrACS与其他同源蛋白的进化关系。利用亚细胞定位分析LrACS在细胞中的定位,对LrACS重组蛋白进行体外活性检测,并利用实时荧光定量逆转录PCR(qRT-PCR)分析不同生长时期LrACS的组织特异性表达。结果显示:LrACS的开放阅读框长度为1473 bp,编码490个氨基酸。LrACS的理论相对分子质量为54954.97,理论等电点为pI 8.21。系统进化树分析结果表明LrACS与忽地笑〔Lycoris aurea(L'Hér.)Herb.〕LaACS的亲缘关系最近,均属于Ⅰ型ACS蛋白。亚细胞定位结果显示LrACS主要定位于细胞质基质。体外活性检测结果证实LrACS重组蛋白能够催化S-腺苷甲硫氨酸(SAM)生成1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)。qRT-PCR分析结果显示:LrACS在花期和叶期的石蒜各组织中均有表达,但其表达具有组织特异性,其中,花期花瓣中LrACS的相对表达量极显著(P<0.01)高于根、鳞茎、花茎,叶期根中LrACS的相对表达量极显著高于鳞茎和叶。综上所述,LrACS主要定位于细胞质基质并在石蒜不同生长时期行使催化SAM生成ACC的功能。 展开更多
关键词 石蒜 1-氨基环丙烷-1-羧酸(acc) 1-氨基环丙烷-1-羧酸合酶(ACS) 亚细胞定位 酶活 功能鉴定
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黄土高原新造耕地1-氨基环丙烷-1-羧酸脱氨酶(ACCD)活性菌株的筛选及其功能特性 被引量：3
2
作者 贾凤安 甄丽莎 +2 位作者 常帆 吕睿 刘晨 《江苏农业科学》 北大核心 2017年第19期289-294,共6页
为了筛选性能良好的新造耕地产1-氨基环丙烷-1-羧酸脱氨酶(1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid deaminase,简称ACCD)菌株,对菌株进行多项分类鉴定,分离所产生的ACCD菌株并对其性质进行研究。以1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)作为唯一氮... 为了筛选性能良好的新造耕地产1-氨基环丙烷-1-羧酸脱氨酶(1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid deaminase,简称ACCD)菌株,对菌株进行多项分类鉴定,分离所产生的ACCD菌株并对其性质进行研究。以1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)作为唯一氮源分离纯化普鲁兰酶产生菌,通过形态学鉴定、16S r RNA序列分析等试验确定菌株的分类地位。通过Biolog自动微生物鉴定系统,使用GenⅢ鉴定板进行生理生化测定,以及不同条件下酶活性的检测,研究菌株的产酶特性。通过平皿促生试验,研究菌株不同组分的促生作用。结果表明,从陕北新造耕地样品中分离得到6株ACCD产生菌,经过多项分类鉴定显示,这些菌株主要分为假单胞菌属(Pseudomonas)、肠杆菌属(Enterobacter)、伯克氏菌属(Burkholderia),其中Enterobacter菌株YAnl_w2产酶迅速,在最适温度和p H值条件下ACCD活性达0.54μmol/(mg·h)(以单位质量酶蛋白在单位时间内生成α-丁酮酸的物质的量表示)。促生试验表明,YAnl_w2对麦种具有明显的促生作用,具有促生应用前景。对6株新造耕地分离菌株的多项分类结果鉴定发现,它们均为产ACCD的细菌,其中YAnl_w2菌株ACCD产率、产量较其他来源的酶高,对麦种促生作用明显,具有进一步的研究价值。 展开更多
关键词 1-氨基环丙烷-1-羧酸 acc脱氨酶 新造耕地 根际促生菌 肠杆菌属
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水稻籽粒中乙烯和ACC对土壤水分的反应及其与籽粒灌浆的关系 被引量：20
3
作者 刘凯 叶玉秀 +2 位作者 唐成 王志琴 杨建昌 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期539-546,共8页
以武运粳8号(粳稻)和扬稻6号(籼稻)为材料,自抽穗后9d至成熟期进行保持浅水层(WW)、土壤轻度落干(MD)和土壤水分严重亏缺(SD)3种处理。观察在不同土壤水分条件下灌浆期籽粒中乙烯和1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)浓度的变化及其与籽粒灌浆的... 以武运粳8号(粳稻)和扬稻6号(籼稻)为材料,自抽穗后9d至成熟期进行保持浅水层(WW)、土壤轻度落干(MD)和土壤水分严重亏缺(SD)3种处理。观察在不同土壤水分条件下灌浆期籽粒中乙烯和1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)浓度的变化及其与籽粒灌浆的关系,并使用化学调控物质进行验证。结果表明,MD显著提高籽粒灌浆速率和粒重,SD明显降低籽粒灌浆速率和粒重。籽粒中乙烯释放速率和ACC浓度在MD中降低,在SD中增加。籽粒乙烯释放速率及根系伤流液中ACC浓度与籽粒中ACC浓度呈极显著的正相关。籽粒灌浆速率与乙烯释放速率呈极显著负相关。在花后9～13d喷施乙烯合成的抑制物质氨基-乙氧基乙烯基甘氨酸(AVG),明显降低籽粒中ACC的浓度和乙烯的释放速率,显著提高了籽粒灌浆速率和粒重以及籽粒中的蔗糖合成酶(SuSase)、ADP葡萄糖焦磷酸化酶(AGPase)和可溶性淀粉合成酶(SSSase)活性;喷施乙烯释放的促进物质乙烯利,结果则相反。表明结实期土壤轻度落干或适度干旱处理可以抑制水稻体内乙烯的产生,促进籽粒灌浆。 展开更多
关键词 水稻 1-氨基环丙烷-1-羧酸(acc) 乙烯 籽粒灌浆 根系伤流液 土壤水分
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不同性别类型黄瓜ACC合酶基因的单核苷酸多态性标记和酶切扩增长度多态性标记 被引量：14
4
作者 向太和 王利琳 +3 位作者 庞基良 胡江琴 申屠连峰 吴锴 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第4期362-367,共6页
黄瓜的性别分化与乙烯密切相关,1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)合酶是乙烯生物合成过程中的关键酶.根据ACC合酶基因家族的保守序列设计PCR引物,从8个不同性别类型(雌雄同株、强雌性和全雌性)黄瓜品种中克隆了长度为1188bp的ACC合酶基因(CS-AC... 黄瓜的性别分化与乙烯密切相关,1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)合酶是乙烯生物合成过程中的关键酶.根据ACC合酶基因家族的保守序列设计PCR引物,从8个不同性别类型(雌雄同株、强雌性和全雌性)黄瓜品种中克隆了长度为1188bp的ACC合酶基因(CS-ACS2)片段(GenBank登记号为:DQ115884～DQ115886和DQ115875～DQ115879).经测序分析,3个雌雄同株性别类型品种的序列完全相同.与之相比,5个强雌性和全雌性品种中存在8个单核苷酸多态性(SNPs)标记,SNPs标记为4个A←→G和4个T←→C之间的转换.在8个SNPs中,有1个SNP位于内含子区域,其余7个SNPs都位于外显子区域.在7个位于外显子区域的SNPs中,有3个为非编码区的SNPs,4个为cSNPs.而在4个cSNPs中,有3个导致了编码的氨基酸序列改变.研究结果表明,与雌雄同株性别类型相比,雌性系中均存在单核苷酸的变异,这提示ACC合酶基因CS-ACS2的单核苷酸变异可能与黄瓜雌性系的发生形成有关.另一方面,根据SNP多态性还发展了一个酶切扩增长度多态性(CAPS)标记C-MT700.利用CAPS标记C-MT700能将强雌性优良品种MT-705与其他黄瓜品种相区别,该标记在黄瓜育种生产上具有一定的应用价值.此外,研究获得的SNPs标记和CAPS标记丰富了黄瓜的分子标记种类. 展开更多
关键词 黄瓜 性别类型 1-氨基环丙烷-1-羧酸(acc)合酶基因 单核苷酸多态性(SNP) 酶切扩增长度多态性(CAPS)
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酸橙ACC氧化酶基因片段克隆及序列分析
5
作者 吴波 罗光明 刘红宁 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期923-926,共4页
1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)氧化酶是植物乙烯合成的1个关键酶,乙烯作为一种内源激素,对植物生长、老熟过程有多方面的调节作用。根据已报道的各种植物ACC氧化酶氨基酸序列上前后两个保守区设计1对简并引物,以酸橙叶片总RNA为模板,通过RT-... 1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)氧化酶是植物乙烯合成的1个关键酶,乙烯作为一种内源激素,对植物生长、老熟过程有多方面的调节作用。根据已报道的各种植物ACC氧化酶氨基酸序列上前后两个保守区设计1对简并引物,以酸橙叶片总RNA为模板,通过RT-PCR扩增到1个834 bp的基因片段。克隆了酸橙1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)氧化酶基因cDNA片段,将片段序列在NCB I网站上进行同源性搜索,显示的皆为不同植物的ACC氧化酶基因,因而认为所克隆的片段就是酸橙ACC氧化酶基因;并运用DNAStar5.0软件进行序列分析,推导的氨基酸序列为278个残基;具有所有植物ACC氧化酶基因共有的保守区域;与多种植物的ACC氧化酶基因的核苷酸和氨基酸序列的同源性都在72%和70%以上。 展开更多
关键词 酸橙 1-氨基环丙烷-1-羧酸(acc)氧化酶 基因克隆 序列分析
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乙烯抑制剂对钾缺乏棉花根系生长和侧根形成的影响（英文）
6
作者 张志勇 张新 +1 位作者 王素芳 卜晶晶 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2015年第4期362-371,共10页
水培条件下,通过用乙烯前体1-氨基环丙烷基羧酸(ACC)和乙烯抑制剂氨氧基乙酸(AOA)、Co2+和Ag+分别处理棉花幼苗根系和叶片,研究其对钾缺乏棉花根系伸长和侧根形成的影响,探讨钾缺乏棉花根系伸长和侧根形成与乙烯生成增加之间的关系。结... 水培条件下,通过用乙烯前体1-氨基环丙烷基羧酸(ACC)和乙烯抑制剂氨氧基乙酸(AOA)、Co2+和Ag+分别处理棉花幼苗根系和叶片,研究其对钾缺乏棉花根系伸长和侧根形成的影响,探讨钾缺乏棉花根系伸长和侧根形成与乙烯生成增加之间的关系。结果显示,钾充分营养液中,添加ACC显著抑制了棉花根系伸长和侧根形成。钾缺乏营养液中,添加ACC加重了对根系伸长和侧根发生的抑制;添加AOA和Ag+分别显著降低了根系长度和侧根数;添加Co2+显著提高了根系长度,但其高浓度显著减少了侧根数。由此可见,钾缺乏诱导乙烯释放增加或许是根系伸长受抑制的原因。钾缺乏条件下Co2+处理叶片显著增加了叶面积、根系长度和侧根数,这表明改善叶片生长可积极调节根系生长和发育。 展开更多
关键词 1-氨基环丙烷基羧酸(acc) Co2+ 根系伸长 侧根形成 叶面积
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乙烯对大豆幼苗盐胁迫响应的调控机制研究 被引量：8
7
作者 王玉斌 刘薇 +5 位作者 张彦威 李伟 王彩洁 戴海英 徐冉 张礼凤 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期580-587,共8页
为研究乙烯对大豆盐胁迫响应的调控作用,促进乙烯在大豆高效栽培中的应用,以耐盐大豆品种齐黄34为材料,采用水培的方法,外源添加乙烯合成前体1-氨基环丙烷-1-羧酸(1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid,ACC)后进行NaCl胁迫处理,设置4... 为研究乙烯对大豆盐胁迫响应的调控作用,促进乙烯在大豆高效栽培中的应用,以耐盐大豆品种齐黄34为材料,采用水培的方法,外源添加乙烯合成前体1-氨基环丙烷-1-羧酸(1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid,ACC)后进行NaCl胁迫处理,设置4种不同处理,测定盐处理对乙烯合成关键限速酶基因表达的影响,乙烯对盐胁迫下大豆幼苗形态建成、渗透调节系统和氧化还原系统的影响,分析乙烯对大豆抗盐的调控效应。结果显示:NaCl处理显著提高不同时间点乙烯合成关键限速酶基因GmACS1、GmACS2和GmACS6的表达,促进乙烯的释放;外源添加ACC可加速盐胁迫下大豆叶片衰老,降低地上部和地下部干物质和叶片叶绿素含量;提高植株地上部和地下部Na^(+)、K^(+)含量、地上部Na^(+)/K^(+)和MDA含量,降低脯氨酸含量;此外,外源添加ACC显著提高盐胁迫下大豆叶片O_(2)·-释放和NADPH氧化酶GmRbohA和GmRbohB基因的表达,降低POD酶活性。研究结果表明乙烯通过调控ROS稳态以及Na^(+)/K^(+)平衡负调控大豆耐盐性。 展开更多
关键词 大豆 盐胁迫 1-氨基环丙烷-1-羧酸(acc) ROS积累 Na^(+)/K^(+)平衡
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花生耐盐乙烯不敏感突变体的筛选
8
作者 孙明明 周文杰 +6 位作者 纪红昌 黄建斌 赵方贵 唐艳艳 朱虹 姜德锋 乔利仙 《山东农业科学》 2019年第9期132-138,共7页
利用沙土培养法,使用1、3、5、7、10 mg·L^-1乙烯利溶液处理花生品种花育22种子,5 d后测量下胚轴长度。结果表明:经乙烯利处理后,花生下胚轴生长受到显著抑制而增粗变短,受抑制程度随乙烯利溶液浓度的提高而增加,3 mg·L^-1乙... 利用沙土培养法,使用1、3、5、7、10 mg·L^-1乙烯利溶液处理花生品种花育22种子,5 d后测量下胚轴长度。结果表明:经乙烯利处理后,花生下胚轴生长受到显著抑制而增粗变短,受抑制程度随乙烯利溶液浓度的提高而增加,3 mg·L^-1乙烯利处理的下胚轴长度极显著低于未施加和施加1 mg·L^-1乙烯利处理的,因此选用3 mg·L^-1乙烯利对诱变筛选得到的165份花生种质进行种子萌发处理,有145份种质表现为下胚轴生长受抑制而增粗变短,属于正常的乙烯敏感型种质;有11份种质下胚轴生长并未受到明显抑制,显著高于同样条件处理下花育22的下胚轴长度,属于乙烯不敏感型种质;有9份种质下胚轴生长受到显著抑制,其下胚轴长度极显著低于同样条件处理下花育22的下胚轴长度,属于乙烯超敏感型种质。使用50μmol·L^-1 ACC(1-氨基环丙烷羧酸)溶液对筛选获得的11份不敏感种质进行验证处理,其中,9份种质保持了对乙烯不敏感的特点,下胚轴生长仍未受到明显抑制。通过在沙土中添加0.7%NaCl溶液,继续对筛选得到的9份乙烯不敏感型种质进行耐盐筛选,有1份种质表现为下胚轴生长受抑制程度最低,下胚轴长度显著高于同样处理条件下花育22的下胚轴长度,初步确定其为耐盐乙烯不敏感种质。因此,用3 mg·L^-1乙烯利溶液预选、50μmol·L^-1 ACC溶液验证、0.7%NaCl溶液处理,通过评价黑暗条件下沙土培养的花生种子下胚轴长度,可以有效筛选到花生耐盐乙烯不敏感突变体。 展开更多
关键词 花生 乙烯利 acc(1-氨基环丙烷羧酸) 不敏感突变体 耐盐
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反义基因促进芥菜形态发生
9
作者 李思经 《生物技术通报》 CAS CSCD 1996年第1期11-11,共1页
新加坡大学利用编码1-氨基环丙烷-1-羧酸盐(ACC)氧化酶(一种催化ACC转化成乙烯的酶)的反义基因转化了芥菜植株。结果发现,与未转化的对照植株相比,转基因植株的乙烯生产量降低,离体培养物再生苗能力显著增加。高效再生性转基因植株始终... 新加坡大学利用编码1-氨基环丙烷-1-羧酸盐(ACC)氧化酶(一种催化ACC转化成乙烯的酶)的反义基因转化了芥菜植株。结果发现,与未转化的对照植株相比,转基因植株的乙烯生产量降低,离体培养物再生苗能力显著增加。高效再生性转基因植株始终保持ACC氧化酶活性和乙烯生产量降低。在R1代亦出现反义基因的效应。 展开更多
关键词 反义基因转化 转基因植株 芥菜 乙烯生产 1-氨基环丙烷-1-羧酸 再生苗 对照植株 acc氧化酶 形态发生 再生性
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