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溶剂诱导黑色素瘤抗原基因-2特定表位多肽异构的LC/MS研究
1
作者 周伟 吴玉章 +3 位作者 边疆 贾正才 唐艳 邹丽云 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期449-453,共5页
研究乙醇、甲醇两种常用溶剂系统对固相合成的黑色素瘤抗原基因 2 (MAGE 2 )的特定表位多肽 (171 179)异构的影响。分别运用乙醇、甲醇溶剂体系以及极性溶剂二甲基亚砜 (DMSO)作对照预处理固相合成的黑色素瘤抗原特异性MAGE 2表位多肽 ... 研究乙醇、甲醇两种常用溶剂系统对固相合成的黑色素瘤抗原基因 2 (MAGE 2 )的特定表位多肽 (171 179)异构的影响。分别运用乙醇、甲醇溶剂体系以及极性溶剂二甲基亚砜 (DMSO)作对照预处理固相合成的黑色素瘤抗原特异性MAGE 2表位多肽 (171～ 179) ,然后用反相高效液相色谱 /质谱联用技术 (RP HPLC/MS)对合成的表位多肽的m/z进行Q1正离子监测扫描分析 ,观察其在不同溶剂系统预处理下的异构情况 ,以选择合理的预处理条件。结果发现采用乙醇及甲醇溶样时MAGE 2表位多肽有异构体产生 ,极性溶剂DMSO溶样的表位多肽未有异构现象发生 ,采用 5 0 % (体积分数 )的乙醇及 5 0 % (体积分数 )的甲醇时也未监测到异构体产生 ;同时发现将已发生异构的乙醇及甲醇溶样溶液用三氟乙酸酸化处理后 ,异构多肽可发生较大的逆转。 展开更多
关键词 液相色谱/质谱联用 黑色素瘤抗原基因-2 表位多肽 异构体 溶剂诱导 黑色素瘤 免疫治疗
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黑色素瘤抗原A3基因对肝细胞癌免疫保护作用
2
作者 张永俊 黄爱民 +2 位作者 陈裕庆 高美钦 张文敏 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期170-174,共5页
目的：构建小鼠黑色素瘤抗原A3 （MAGE-A3）基因真核表达载体,观察其对小鼠肝细胞癌的免疫保护作用.方法：化学合成小鼠MAGE-A3全长基因,以pcDNA3.1（＋）质粒为载体,构建重组表达载体pcDNA3.1-MAGE-A.将pcDNA3.1（＋）-MAGE-A3载体转染... 目的：构建小鼠黑色素瘤抗原A3 （MAGE-A3）基因真核表达载体,观察其对小鼠肝细胞癌的免疫保护作用.方法：化学合成小鼠MAGE-A3全长基因,以pcDNA3.1（＋）质粒为载体,构建重组表达载体pcDNA3.1-MAGE-A.将pcDNA3.1（＋）-MAGE-A3载体转染293T细胞,免疫印迹鉴定转染细胞MAGE-A3蛋白的表达.将纯化的重组质粒DNA肌肉注射免疫小鼠,5-Aza-Cdr诱导小鼠肝癌细胞H22表达MAGE-A3基因,观察小鼠成瘤情况与瘤体形态学改变.结果：成功构建pcDNA3.1-MAGE-A3真核表达载体,转染293T细胞后能正常高效表达MAGE-A3蛋白;MAGE-A3重组质粒DNA免疫小鼠后,小鼠成瘤的时间推迟,瘤体生长速度明显减慢,瘤体大小和质量与对照组相比,差异有统计学意义;光镜下显示MAGE-A3重组质粒组肿瘤细胞排列较为稀疏,间质炎症细胞浸润和淋巴细胞增殖更为明显.结论：MAGE-A3基因免疫可有效抑制肝细胞癌成瘤,产生对肝癌的免疫保护作用,提示MAGE-A3基因疫苗可作为肝癌防治手段之一. 展开更多
关键词 肝细胞癌 黑色素瘤抗原-A3 真核表达载体 基因疫苗
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MAGE-3抗原肽致敏树突状细胞的体内抗膀胱癌作用及机制 被引量：1
3
作者 马鸣 李秀真 +3 位作者 王超 郭洪敏 马鑫 张旭 《山东医药》 CAS 北大核心 2008年第8期1-3,共3页
目的探讨黑色素瘤-3基因(MAGE-3)抗原肽致敏的树突状细胞(DC)体内对膀胱癌肿瘤的抑制作用及机制。方法采用Ficoll法从HLA-A2型个体外周血中分离单个核细胞,用GM-CSF和IL-4诱导扩增DC,再经MAGE-3抗原肽致敏,致敏DC细胞和同型T淋巴细胞共... 目的探讨黑色素瘤-3基因(MAGE-3)抗原肽致敏的树突状细胞(DC)体内对膀胱癌肿瘤的抑制作用及机制。方法采用Ficoll法从HLA-A2型个体外周血中分离单个核细胞,用GM-CSF和IL-4诱导扩增DC,再经MAGE-3抗原肽致敏,致敏DC细胞和同型T淋巴细胞共培养诱导细胞毒性T淋巴细胞(CTL),经过尾静脉注入膀胱癌荷瘤小鼠,观察其对肿瘤体积及重量的影响。结果MAGE-3抗原肽致敏的DC诱导产生的CTL可明显缩小瘤体、降低瘤重。结论MAGE-3九肽致敏DC诱导CTL体内具有抑制膀胱癌细胞增长的作用;其机制可能为激活T淋巴细胞。 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 膀胱癌 树突状细胞 抗原肽 黑色素瘤-3基因
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MAGE-3目的基因真核表达载体的构建
4
作者 裴瑞 杨红梅 +3 位作者 陈洁 陈晓玲 杨萍 赵国强 《山东医药》 CAS 北大核心 2005年第28期21-22,共2页
目的构建黑色素瘤抗原-3(M AGE-3)目的基因真核重组表达载体pcDNA 3.1-M AGE-3。方法用RT-PCR法从肝癌组织制备含B amHⅠ、E coRⅠ酶切位点的M AGE-3目的基因,采用DNA重组技术将目的基因克隆至pGEM-T E asy载体和亚克隆至pcDNA 3.1载体... 目的构建黑色素瘤抗原-3(M AGE-3)目的基因真核重组表达载体pcDNA 3.1-M AGE-3。方法用RT-PCR法从肝癌组织制备含B amHⅠ、E coRⅠ酶切位点的M AGE-3目的基因,采用DNA重组技术将目的基因克隆至pGEM-T E asy载体和亚克隆至pcDNA 3.1载体上,根据氨苄青霉素(Am p)抗性、蓝白筛选实验、引物扩增等方法筛选、鉴定阳性克隆,并对其中的插入序列M AGE-3目的基因进行DNA测序。结果扩增出M AGE-3目的基因;重组质粒pcDNA 3.1-M AGE-3中的插入片段经DNA测序后与G enB ank中M AGE-3相应序列比较,结果完全一致。结论成功构建了真核重组表达载体pcDNA 3.1-M AGE-3,为肿瘤免疫治疗提供了条件。 展开更多
关键词 黑色素瘤抗原-3 克隆 重组质粒 肿瘤免疫治疗
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MAGE-3在胃癌组织中的表达及其临床意义 被引量：1
5
作者 何宋兵 汪良 +3 位作者 吴雨岗 陈彦 孙康 张雁云 《中国现代普通外科进展》 CAS 2007年第3期230-232,239,共4页
目的:检测黑色素瘤抗原基因-3(MAGE-3)在胃癌组织中的表达,探讨其在胃癌免疫治疗中的应用价值。方法:应用RT-PCR方法对40例胃癌组织和相应的癌旁组织以及20例胃慢性炎症组织中的MAGE-3基因进行检测,随机选取RT-PCR阳性扩增产物进行测序... 目的:检测黑色素瘤抗原基因-3(MAGE-3)在胃癌组织中的表达,探讨其在胃癌免疫治疗中的应用价值。方法:应用RT-PCR方法对40例胃癌组织和相应的癌旁组织以及20例胃慢性炎症组织中的MAGE-3基因进行检测,随机选取RT-PCR阳性扩增产物进行测序,并结合临床病理参数进行研究分析。结果:在40例胃癌组织中,MAGE-3基因的表达阳性率为67.5%(27/40),明显高于在相应的癌旁组织15%(6/40)及胃慢性炎症组织中的表达阳性率10%(2/20)。DNA测序证实RT-PCR产物确为MAGE-3基因的目的片段。胃癌组织中MAGE-3基因表达的阳性率与胃癌的浸润深度有关,而与病理分期、分化程度和淋巴转移无关。结论:MAGE-3基因在胃癌组织中有较高的表达率,可望将其编码的蛋白作为靶分子应用于胃癌的免疫治疗。 展开更多
关键词 胃肿瘤 黑色素瘤抗原基因-3
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TCT联合HPV DNA及血清CA15-3、SCCA、CA125水平检测对宫颈上皮内瘤变的诊断价值 被引量：5
6
作者 吕祥瑞 方卓宁 《河南医学研究》 CAS 2019年第17期3216-3217,共2页
目的探讨液基薄层细胞学检测(TCT)联合人乳头瘤病毒基因分型(HPV DNA)及血清肿瘤标志物[糖类抗原15-3(CA15-3)、癌相关抗原(SCCA)、糖类抗原125(CA125)]水平检测对宫颈上皮内瘤变(CIN)的诊断价值。方法选取2017年5月至2018年5月焦作市... 目的探讨液基薄层细胞学检测(TCT)联合人乳头瘤病毒基因分型(HPV DNA)及血清肿瘤标志物[糖类抗原15-3(CA15-3)、癌相关抗原(SCCA)、糖类抗原125(CA125)]水平检测对宫颈上皮内瘤变(CIN)的诊断价值。方法选取2017年5月至2018年5月焦作市人民医院收治的58例CIN患者作为观察组,经宫颈病理活检,确诊CIN I级19例、CINⅡ级16例、CINⅢ级23例。另选择同期于焦作市人民医院进行健康体检的58例女性作为对照组。所有患者均接受TCT、HPV DNA及血清CA15-3、SCCA、CA125水平检测。比较各项指标单一检测与联合检测对CIN的阳性检出率。结果观察组血清CA15-3、SCCA、CA125水平均较对照组高,差异有统计学意义(均P<0.05)。TCT联合HPV DNA、CA15-3、SCCA、CA125对CIN的阳性检出率较SCCA、CA125、CA15-3、TCT、HPV DNA单一检测时高,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论 TCT联合HPVDNA、CA15-3、SCCA、CA125检测可提高CIN的阳性检出率。 展开更多
关键词 宫颈上皮内瘤变 薄层液基细胞学 人乳头瘤病毒基因分型 糖类抗原15-3 癌相关抗原 糖类抗原125
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子宫腺肌病患者子宫内膜组织中Ki-67、bcl-2和STAT3表达变化及意义 被引量：1
7
作者 刘宁 王肖力 +3 位作者 张洁 刘瑶 张兰英 张雅琦 《山东医药》 CAS 2014年第48期40-41,共2页
目的观察子宫腺肌病患者子宫内膜组织中细胞核相关抗原(ki-67)、B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(bcl-2)及信号传导与转录激活因子3(STAT3)的表达变化,并探讨其意义。方法采用免疫组化SP法检测40例子宫腺肌病患者异位、在位内膜组织及41例正... 目的观察子宫腺肌病患者子宫内膜组织中细胞核相关抗原(ki-67)、B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(bcl-2)及信号传导与转录激活因子3(STAT3)的表达变化,并探讨其意义。方法采用免疫组化SP法检测40例子宫腺肌病患者异位、在位内膜组织及41例正常子宫内膜组织中的ki-67、bcl-2及STAT3,并分析三者的关系。结果子宫腺肌病在位内膜和正常子宫内膜增殖期的ki-67、bcl-2阳性表达率均高于分泌期,P均<0.05。子宫腺肌病异位内膜分泌期的ki-67阳性表达率均高于同期子宫腺肌病在位内膜和正常子宫内膜,子宫腺肌病异位、在位内膜bcl-2、STAT3阳性表达率均高于同期正常子宫内膜,P均<0.05。子宫腺肌病异位、在位内膜组织中ki-67、bcl-2和STAT3的表达,两两均呈正相关,P均<0.05。结论子宫腺肌病异位内膜组织中ki-67、bcl-2及STAT3表达均升高,三者可能共同促进该病的发生发展。 展开更多
关键词 子宫腺肌病 细胞核相关抗原 B细胞淋巴瘤/白血病-2基因 信号传导与转录激活因子3
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平调饮对原发性肝癌患者AFPmRNA、MAGE-1mRNA表达的影响 被引量：1
8
作者 宋爱英 杨丹 +2 位作者 曹德胜 李威 王丽芹 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2010年第7期17-19,共3页
目的研究平调饮对原发性肝癌患者甲胎蛋白(AFP)mRNA、黑色素瘤抗原-1(MAGE-1)mRNA表达的影响,探讨平调饮对原发性肝癌的抑癌基质。方法原发性肝癌患者60例,随机分为治疗组和对照组,分别给予平调饮和华蟾素注射液,治疗2个疗程,采用RT-PC... 目的研究平调饮对原发性肝癌患者甲胎蛋白(AFP)mRNA、黑色素瘤抗原-1(MAGE-1)mRNA表达的影响,探讨平调饮对原发性肝癌的抑癌基质。方法原发性肝癌患者60例,随机分为治疗组和对照组,分别给予平调饮和华蟾素注射液,治疗2个疗程,采用RT-PCR技术检测原发性肝癌患者治疗前后外周血AFPmRNA、MAGE-1mRNA的表达,并取30例健康志愿者血样作为参考对照,结果用SPSS13.0软件统计。结果平调饮使原发性肝癌患者的AFPmRNA、MAGE-1mRNA表达明显降低,2组治疗前后比较差异均有统计学意义(P<0.01),治疗后治疗组与对照组MAGE-1mRNA表达(灰度比)分别为0.07±0.01、0.13±0.02,组间比较差异有统计学意义(P<0.01),治疗组作用优于对照组。结论平调饮能够明显降低原发性肝癌患者AFPmRNA、MAGE-1mRNA表达,对MAGE-1基因表达的降低作用优于对照组,说明抑制MAGE-1基因表达可能是平调饮抗肝癌机制的靶点之一。 展开更多
关键词 原发性肝癌 平调饮 黑色素瘤抗原-1基因 甲胎蛋白基因
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前列腺癌生物标志物的研究进展 被引量：7
9
作者 张耀辉 郭艳 《山东医药》 CAS 2013年第32期94-96,共3页
前列腺癌（PCa）是一种发生于前列腺组织中的恶性肿瘤,是前列腺腺泡细胞异常无序生长的结果.PCa发病率具有明显的地理和种族差异,在欧美等发达国家和地区,是男性最常见的恶性肿瘤,病死率居各种癌症第2位[1];在亚洲,其发病率低于西方国家... 前列腺癌（PCa）是一种发生于前列腺组织中的恶性肿瘤,是前列腺腺泡细胞异常无序生长的结果.PCa发病率具有明显的地理和种族差异,在欧美等发达国家和地区,是男性最常见的恶性肿瘤,病死率居各种癌症第2位[1];在亚洲,其发病率低于西方国家,但近年来随着人口老龄化及生活条件的改善,发病率呈迅速上升趋势[2];在我国,PCa在男性泌尿、生殖系统恶性肿瘤中发病率已跃居第3位,患者主要是老年人,严重影响着我国老年男性的晚年生活质量[3,4].PCa的生存率有赖于早期的诊断和治疗,生物标志物往往能先于其他手段如直肠指检（DRE）、超声等检出癌症,故寻找有效的生物标志物一直是研究的热点.现就PCa生物标志物研究进展作一综述. 展开更多
关键词 前列腺癌 生物标志物 前列腺特异性抗原 前列腺特异性膜抗原 早期前列腺癌抗原 Α-甲酰基辅酶A消旋酶 谷胱甘肽S转移酶1 DD3基因
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成人抗MDA5抗体阳性皮肌炎临床特征
10
作者 王惠敏 苗青 +1 位作者 熊稳稳 张肖晗 《河南医学研究》 CAS 2023年第4期612-617,共6页
目的分析成人抗黑色素瘤分化相关基因5(MDA5)抗体阳性皮肌炎(DM)的临床特征,并与抗MDA5抗体阴性DM进行比较。方法收集2021年1月1日至12月31日郑州大学第一附属医院101例成人DM患者资料,根据抗MDA5抗体阳性与否分为抗MDA5抗体阳性(MDA5^(... 目的分析成人抗黑色素瘤分化相关基因5(MDA5)抗体阳性皮肌炎(DM)的临床特征,并与抗MDA5抗体阴性DM进行比较。方法收集2021年1月1日至12月31日郑州大学第一附属医院101例成人DM患者资料,根据抗MDA5抗体阳性与否分为抗MDA5抗体阳性(MDA5^(+))组和抗MDA5抗体阴性(MDA5^(-))组,对两组数据进行比较。收集抗MDA5抗体水平定量检测结果,分析其与其他实验室指标的相关性。结果MDA5^(+)组较MDA5^(-)组初诊住院时间长,1 a内住院次数多,发热和咳嗽咳痰症状出现频率较高,差异具有统计学意义(P<0.05)。与MDA5^(-)组相比,MDA5^(+)组红细胞沉降率、涎液化糖链抗原-6(KL-6)、铁蛋白水平升高,中性粒细胞、淋巴细胞、血小板、肌酸激酶、肌酸激酶同工酶水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关分析显示,抗MDA5抗体水平与D-二聚体、免疫球蛋白G、免疫球蛋白M水平呈正相关,与肌酸激酶同工酶水平呈负相关(P<0.05)。高分辨率CT显示,MDA5^(+)组肺间质性改变较MDA5^(-)组发生率高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论MDA5^(+)DM较MDA5^(-)DM患者发热、咳嗽咳痰发生率高,肌肉受累较轻,易发生肺间质改变,病情较重,治疗较复杂。KL-6、铁蛋白、抗MDA5抗体水平可作为评估MDA5^(+)DM病情活动的指标。 展开更多
关键词 皮肌炎 抗黑色素瘤分化相关基因5抗体 肌酸激酶 涎液化糖链抗原-6 铁蛋白
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