姜黄素对脂多糖诱导肺泡上皮细胞炎性反应及单免疫球蛋白白介素-1相关蛋白表达的影响 被引量：7

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作者 孙慧男 韩志海 陈旭昕 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第7期1070-1073,共4页

目的:探讨姜黄素对脂多糖诱导肺泡上皮细胞炎症反应及单免疫球蛋白白介素-1受体相关蛋白表达的影响。方法:体外培养大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞,用脂多糖及不同浓度姜黄素刺激后测定细胞活性;测定细胞上清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介... 目的:探讨姜黄素对脂多糖诱导肺泡上皮细胞炎症反应及单免疫球蛋白白介素-1受体相关蛋白表达的影响。方法:体外培养大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞,用脂多糖及不同浓度姜黄素刺激后测定细胞活性;测定细胞上清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)水平。20μmol/L的姜黄素处理后加入10μg/m L的脂多糖刺激,提取细胞核蛋白及膜蛋白,检测核转录因子kappa B和单免疫球蛋白白介素-1相关蛋白的表达水平。结果:5~30μmol/L的姜黄素及10μg/m L脂多糖对细胞活性无影响(P>0.05);5~30μmol/L的姜黄素抑制脂多糖诱导的TNF-α和IL-6的产生(P<0.05),其中20μmol/L与30μmol/L姜黄素的抑制作用最为明显,且两组之间差异无统计学意义(P>0.05);20μmol/L的姜黄素显著降低细胞核内磷酸化核转录因子kappa B p65的表达水平(P<0.05),同时上调细胞内单免疫球蛋白白介素-1受体相关蛋白的表达(P<0.05)。结论:姜黄素可抑制脂多糖诱导的大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞炎性因子TNF-α和IL-6的释放以及核转录因子kappa B活化,上调负调控分子单免疫球蛋白白介素-1受体相关蛋白表达水平是可能的机制之一。 展开更多

关键词 姜黄素 脂多糖 肺泡上皮细胞 炎症 单免疫球蛋白白介素-1相关蛋白

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白术内酯Ⅲ介导的肌动蛋白相关蛋白2/3抑制肠上皮间质转化以缓解溃疡性结肠炎的研究 被引量：1

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作者 肖贵梅 蔡向志 +2 位作者 龙海洮 田丽霞 任燕 《世界中医药》 CAS 北大核心 2024年第15期2237-2245,共9页

目的:探寻白术内酯Ⅲ(AT-Ⅲ)的关键靶点,探究肌动蛋白相关蛋白2/3(Arp2/3)抑制溃疡性结肠炎(UC)的作用机制。方法:采用有限酶切-质谱法(lip-SMap)筛选大鼠小肠隐窝上皮细胞(IEC-6)特征蛋白,进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(... 目的:探寻白术内酯Ⅲ(AT-Ⅲ)的关键靶点,探究肌动蛋白相关蛋白2/3(Arp2/3)抑制溃疡性结肠炎(UC)的作用机制。方法:采用有限酶切-质谱法(lip-SMap)筛选大鼠小肠隐窝上皮细胞(IEC-6)特征蛋白,进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析,确定AT-Ⅲ的关键靶点。脂多糖(LPS)与IEC-6共孵育模拟UC模型,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测白细胞介素-6(IL-6),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;划痕实验测定IEC-6迁移速率;蛋白质印迹法测定上皮钙黏素(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)和Arp2/3含量;分子对接评估AT-Ⅲ与关键靶点的结合能力。结果:基于lip-SMap获得的特征蛋白参与调控磷脂酰肌醇3激酶-丝苏氨酸激酶(PI3K-AKT)信号通路和紧密连接(TJ)信号通路;与对照组比较,LPS组中IL-6和TNF-α释放量升高(均P<0.05),迁移速率变快(P<0.05),E-cadherin和Vimentin的表达都有不同程度的影响(均P<0.05);与LPS组比较,LPS+CK666+AT-Ⅲ组显著降低IL-6和TNF-α含量(均P<0.01),有效逆转LPS诱导的细胞迁移变化及E-cadherin和Vimentin表达(均P<0.05);分子对接显示,Arp2/3与AT-Ⅲ有较好的结合活性。结论:Arp2/3作为AT-Ⅲ的关键靶点,可通过上皮细胞-间充质转化(EMT)缓解LPS诱导的UC。 展开更多

关键词 白术内酯Ⅲ 大鼠小肠隐窝上皮细胞 溃疡性结肠炎 肌动蛋白相关蛋白2/3 有限酶切-质谱法 上皮细胞-间充质转化 紧密连接通路 脂多糖

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miR-375靶向YAP1调控上皮-间质转化参与乳腺癌细胞曲妥珠单抗的耐药 被引量：7

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作者 叶星明 王淋 +2 位作者 贾静 吴秀凤 陈颖 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期27-34,共8页

背景与目的:曲妥珠单抗作为人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2,HER2)常用靶向抗体药物,其耐药问题日益凸显。探讨miR-375靶向Yes相关蛋白1(Yes-associated protein 1,YAP1)介导上皮-间质转化(epithelial-me... 背景与目的:曲妥珠单抗作为人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2,HER2)常用靶向抗体药物,其耐药问题日益凸显。探讨miR-375靶向Yes相关蛋白1(Yes-associated protein 1,YAP1)介导上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)参与乳腺癌细胞曲妥珠单抗的耐药。方法:建立HER2阳性乳腺癌曲妥珠单抗耐药的细胞株,转染miR-375 mimic来上调其表达,采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)检测miR-375的表达情况,采用蛋白质印迹法(Western blot)检测其EMT标志蛋白波形蛋白(vimentin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达变化情况。采用MTT实验和平板克隆实验检测其药物敏感性及增殖能力的变化。双荧光素酶报告基因实验验证miR-375与YAP13’-UTR的靶向关系,采用RTFQ-PCR检测临床水平上两者的相关性。对细胞株共转染miR-375 mimic和YAP1-MUT载体后,采用Western blot检测其EMT蛋白表达的恢复情况,采用MTT实验和平板克隆形成实验检测其药物敏感性和增殖能力的恢复情况。结果:与NC组比较,miR-375 mimic组的药物敏感性、平板克隆形成能力均下调(P均<0.01),其EMT标志蛋白vimentin、E-cadherin表达也发生逆转(P均<0.05)。双荧光素酶报告基因实验结果证实,YAP1是miR-375的靶基因,miR-375与YAP1在乳腺癌患者肿瘤组织中呈负相关(r=-0.5868,P=0.0028)。miR-375 mimic组同时过表达YAP1后可恢复其药物敏感性(P<0.01)、克隆形成能力(P<0.05)和EMT标志蛋白vimentin、E-cadherin表达情况(P均<0.05)。结论:miR-375通过靶向YAP1在曲妥珠单抗耐药细胞株中介导EMT,进而调控曲妥珠单抗耐药细胞株的药物敏感性。 展开更多

关键词 miR-375 曲妥珠单抗耐药 乳腺癌 Yes相关蛋白1 上皮-间质转化

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基于ARRB1探讨亮菌多糖干预5-FU诱导的肠黏膜损伤的作用及机制 被引量：3

4

作者 张泉 赵秦英 +2 位作者 叶映泉 刘利 张梅 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第10期1743-1749,共7页

目的探讨β-抑制蛋白1(ARRB1)对亮菌多糖(ATPS)逆转5-氟尿嘧啶(5-FU)诱导的化疗性肠黏膜损伤的影响及机制。方法ARRB1基因敲除型(ARRB1^(-/-))和野生型(WT)C57BL/6J小鼠各12只,分别随机分成Control组、Model组和ATPS组(200 mg/kg),连续7... 目的探讨β-抑制蛋白1(ARRB1)对亮菌多糖(ATPS)逆转5-氟尿嘧啶(5-FU)诱导的化疗性肠黏膜损伤的影响及机制。方法ARRB1基因敲除型(ARRB1^(-/-))和野生型(WT)C57BL/6J小鼠各12只,分别随机分成Control组、Model组和ATPS组(200 mg/kg),连续7 d 5-FU(50 mg/kg)腹腔注射建立化疗性肠黏膜损伤模型;比较各组小鼠体质量变化,肉眼观察肠道组织大体外观;HE染色评价空肠组织病理损伤;试剂盒测量血清中超氧化物歧化酶(SOD)和二胺氧化酶(DAO)的活性;免疫组织化学检测紧密连接蛋白(TJ)标志物ZO-1、Occludin、Claudin-1和增殖相关蛋白Ki-67的表达情况;隐窝分离和类器官培养,检测小肠类器官生长状态。结果5-FU化疗减轻小鼠体质量,加重小肠组织病理损伤,降低SOD水平、TJ蛋白和Ki-67蛋白表达,升高血清DAO水平,降低球形结构形成率和类器官形成率;与模型组比较,WT小鼠ATPS处理后体质量恢复,病理损伤减轻,血清SOD水平、TJ蛋白和Ki-67蛋白表达增加,DAO水平降低,球形结构形成率和类器官形成率明显升高;而ARRB1^(-/-)小鼠在ATPS治疗后未能逆转5-FU的效应。结论ATPS通过ARRB1的肠道屏障和类器官生长保护作用,逆转5-FU诱导的肠黏膜炎。 展开更多

关键词 ARRB1 5-氟尿嘧啶 化疗性肠黏膜损伤 紧密连接蛋白 类器官

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siRNA-YAP1对TGF-β_(2)诱导的人晶状体上皮细胞上皮-间质转化的抑制作用 被引量：2

5

作者 郑柳 胡超 +2 位作者 杨彬彬 杨兴刚 丁芝祥 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期289-296,共8页

目的探讨小干扰RNA-Yes相关蛋白1(siRNA-YAP1)对转化生长因子β^(2)(TGF-β^(2))诱导的人晶状体上皮细胞(LECs)发生上皮-间质转化(EMT)的抑制作用。方法将人LECs株HLEB-3细胞分为对照组和TGF-β^(2)诱导组,正常对照组采用无血清低糖培... 目的探讨小干扰RNA-Yes相关蛋白1(siRNA-YAP1)对转化生长因子β^(2)(TGF-β^(2))诱导的人晶状体上皮细胞(LECs)发生上皮-间质转化(EMT)的抑制作用。方法将人LECs株HLEB-3细胞分为对照组和TGF-β^(2)诱导组,正常对照组采用无血清低糖培养基处理细胞,TGF-β^(2)诱导组采用10 ng/ml TGF-β^(2)处理细胞,分别培养24 h。另将HLEB-3细胞分为siRNA空载体组、siRNA-YAP1转染组、siRNA空载体+TGF-β^(2)组和siRNA-YAP1+TGF-β^(2)组,分别采用含有siRNA空载体和siRNA-YAP1序列的质粒转染细胞。采用实时荧光定量PCR、细胞免疫荧光染色和Western blot法检测各组细胞中转录共激活因子Yes相关蛋白1(YAP1)mRNA及其蛋白的相对表达量;采用细胞免疫荧光、Western blot法检测各组中LECs EMT相关标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)在细胞中的表达变化。结果 TGF-β^(2)诱导组中E-cadherin蛋白相对表达量为0.830±0.104,低于正常对照组的1.180±0.118,TGF-β^(2)诱导组中Vimentin蛋白相对表达量为1.240±0.110,高于正常对照组的0.797±0.110,差异均有统计学意义(t=3.857,P=0.018;t=-4.933,P=0.008);TGF-β^(2)诱导组YAP1 mRNA和蛋白的相对表达量分别为2.200±0.193和1.203±0.121,显著高于正常对照组的1.136±0.123和0.967±0.025,差异均有统计学意义(t=-9.288,P<0.01;t=-3.329,P=0.029)。与siRNA空载体组比较,siRNA-YAP1转染组细胞中YAP1 mRNA及蛋白相对表达量明显下降,差异均有统计学意义(均P<0.01)。与siRNA空载体+TGF-β^(2)组比较,siRNA-YAP1+TGF-β^(2)组细胞中E-cadherin蛋白相对表达量明显升高,Vimentin蛋白相对表达量明显下降,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论 YAP1参与TGF-β^(2)诱导的HLEB-3细胞EMT过程,siRNA-YAP1抑制TGF-β^(2)诱导的人LECs EMT过程。 展开更多

关键词 晶状体上皮细胞 上皮-间质转化 Yes相关蛋白1 小干扰RNA 抑制作用

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参白颗粒干预细胞焦亡降低人胃黏膜上皮细胞炎症的机制研究

6

作者 李亚可 张忠绵 +4 位作者 张希颜 张丽菊 陶婧娜 王岚 李志红 《世界中医药》 北大核心 2024年第21期3311-3317,共7页

目的:探究参白颗粒(SBKL)干预细胞焦亡通路降低人胃黏膜上皮细胞(GES-1)炎症的机制。方法:通过脂多糖(LPS)诱导GES-1建立炎症模型。1)设置不同浓度梯度的LPS干预GES-1后,通过蛋白质印迹法(WB)检测各组NOD样受体热蛋白结构域蛋白3(NLRP3... 目的:探究参白颗粒(SBKL)干预细胞焦亡通路降低人胃黏膜上皮细胞(GES-1)炎症的机制。方法:通过脂多糖(LPS)诱导GES-1建立炎症模型。1)设置不同浓度梯度的LPS干预GES-1后,通过蛋白质印迹法(WB)检测各组NOD样受体热蛋白结构域蛋白3(NLRP3)的表达,确定LPS造模的相对最佳浓度;2)设置不同浓度SBKL干预GES-1,通过细胞计数试剂盒(CCK-8)验证SBKL对GES-1毒性并筛选最佳干预浓度;3)实验分为空白组、模型组和SBKL组,除空白组外,其余2组以LPS构建炎症模型,干预24 h后通过WB检测NLRP3、半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、剪切的半胱氨酸蛋白酶-1(Cleaved Caspase-1)、消皮素D(GSDMD)、剪切的消皮素D(Cleaved GSDMD)的表达;流式细胞术检测活性氧(ROS)、细胞焦亡率;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清液中白细胞介素18(IL-18),白细胞介素1β(IL-1β),肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量。结果:1)LPS造模的相对最佳浓度为0.5μg/mL;2)CCK-8检测发现SBKL对于GES-1无毒性作用;3)与空白组比较,模型组NLRP3、Caspase-1、Cleaved Caspase-1、GSDMD、Cleaved GSDMD、ROS和焦亡率表达升高;与模型组比较,SBKL组上述指标表达明显降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:SBKL能够抑制细胞焦亡通路降低LPS诱导的GES-1炎症反应及氧化应激,减轻细胞焦亡。 展开更多

关键词 参白颗粒 慢性萎缩性胃炎 细胞焦亡 NOD样受体热蛋白结构域蛋白3 炎症反应 半胱氨酸蛋白酶-1 消皮素D 人胃黏膜上皮细胞

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口腔上皮白细胞介素-1α的过表达可导致牙周病

7

作者 赵蕾 《国外医学（口腔医学分册）》 2005年第3期246-246,共1页

关键词 白细胞介素-1Α 口腔上皮 牙周病 过表达 Res IL-1Α 特征性症状 角质细胞 细胞来源 转基因鼠 牙周炎 启动子 角蛋白 相关性 高表达

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放疗对食管鳞癌患者血清SCC、CEA、CRFRA21-1、TAG72、CA199、T淋巴细胞亚群的影响 被引量：7

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作者 沙莎 于波 +4 位作者 舒钟琴 顾小伟 茅卫东 夏林云 秦建军 《海南医学院学报》 CAS 2016年第17期2003-2006,2010,共5页

目的:探讨放疗对食管鳞癌患者血清鳞状上皮细胞癌抗原(squamous cell cancer,SCC)、癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)、细胞角蛋白19片段抗原21-1(cytokerantin-19-fragment antigen21-1,CRFRA21-1)、肿瘤相关糖蛋白72(tumor ass... 目的:探讨放疗对食管鳞癌患者血清鳞状上皮细胞癌抗原(squamous cell cancer,SCC)、癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)、细胞角蛋白19片段抗原21-1(cytokerantin-19-fragment antigen21-1,CRFRA21-1)、肿瘤相关糖蛋白72(tumor associated glycoprotein,TAG72)、糖类抗原199(cancer antigen 199,CA199)水平及T淋巴细胞亚群的影响。方法:选择2013年1月~2016年1月在江阴市人民医院确诊的60例食管鳞癌患者为实验组,另外同期选择40例健康体检者为对照组。实验组患者给予6MV X线放射治疗。检测并比较实验组患者放疗前和放疗后1个月、对照组健康者血清SCC、CEA、CRFRA21-1、TAG72、CA199水平及外周血CD4+、CD8+细胞所占的比值。结果:治疗前,实验组患者血清SCC、CEA、CRFRA21-1水平均明显高于对照组健康者,差异具有统计学意义(均P<0.05);治疗后,实验组患者血清SCC、CEA、CRFRA21-1水平均明显低于治疗前,但实验组患者上述各肿瘤标志物水平均明显高于对照组健康者,差异具有统计学意义(均P<0.05)。治疗前,实验组患者外周血CD4^+、CD4^+/CD8^+所占比值明显低于对照组健康者,CD8^+细胞所占比值明显高于对照组健康者,差异具有统计学意义(均P<0.05);治疗后,实验组患者外周血CD4^+、CD8^+细胞所占比值及CD4^+/CD8^+比值与治疗前比较差异无统计学意义(均P>0.05),且实验组患者外周血CD4^+、CD4^+/CD8^+细胞所占比值明显低于对照组健康者,CD8^+比值明显高于对照组健康者,差异具有统计学意义(均P<0.05)。结论:放疗能明显降低食管鳞癌患者血清SCC、CEA、CRFRA21-1、水平,但对T淋巴细胞亚群水平影响不明显。 展开更多

关键词 食管鳞癌 放疗 鳞状上皮细胞癌抗原 癌胚抗原 细胞角蛋白19片段抗原21-1 肿瘤相关糖蛋白72 T淋巴细胞亚群

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糖化白蛋白诱导人近端肾小管上皮细胞产生损伤与炎性反应的表达 被引量：5

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作者 段楠 刘怡 +1 位作者 李海霞 焦莉莉 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2017年第2期289-294,共6页

目的探讨在糖化白蛋白(glycated albumin,GA)刺激下,人近端肾小管上皮细胞(HK-2细胞系)中肾损伤分子-1(kidney injury molecule-1,KIM-1)、中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL)及炎性反应... 目的探讨在糖化白蛋白(glycated albumin,GA)刺激下,人近端肾小管上皮细胞(HK-2细胞系)中肾损伤分子-1(kidney injury molecule-1,KIM-1)、中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL)及炎性反应相关细胞因子的表达情况。方法分别采用不同浓度的GA与白蛋白(albumin,Alb)刺激HK-2细胞12 h、24 h及48 h,通过real-time PCR和酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunesorbent assay,ELISA)分别检测NGAL、KIM-1的mRNA表达与蛋白释放水平,并运用流式液相多重蛋白定量技术检测血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)和可溶性细胞间黏附分子-1(soluble intercellular cell adhesion molecule-1,sICAM-1)等细胞因子的浓度。结果与对照组与Alb组比较,GA刺激HK-2细胞12 h、24 h和48 h均能显著上调KIM-1和NGAL的mRNA表达(P<0.05)以及KIM-1和NGAL蛋白的释放(P<0.05);GA组sICAM-1、VEGF与IL-8水平在各时间点均高于Alb组和对照组(P<0.05)。结论 GA能上调KIM-1和NGAL mRNA的表达与蛋白的释放,并促进炎性细胞因子的分泌从而对肾小管造成损伤,提示GA可反映糖尿病肾脏受累情况。 展开更多

关键词 糖化白蛋白 近端肾小管上皮细胞 肾损伤分子-1 中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白 细胞因子

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上皮间质转化在大鼠舌黏膜创口愈合中的作用 被引量：2

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作者 孔苗苗 孙应明 +3 位作者 张梦洁 张亚军 杨聪翀 刘来奎 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2015年第5期454-457,共4页

目的：越来越多的研究阐明EMT与癌症转移，组织器官纤维化及皮肤创伤愈合的情况关系密切，但在口腔黏膜创伤愈合方面的作用却依然需要进一步探索。文中通过对大鼠舌背部黏膜创口愈合过程的观察探讨上皮间质转化（ epithe-lial-to-mesenc... 目的：越来越多的研究阐明EMT与癌症转移，组织器官纤维化及皮肤创伤愈合的情况关系密切，但在口腔黏膜创伤愈合方面的作用却依然需要进一步探索。文中通过对大鼠舌背部黏膜创口愈合过程的观察探讨上皮间质转化（ epithe-lial-to-mesenchymal transition ， EMT）在大鼠舌黏膜创口愈合过程中的作用及其意义。方法取8周龄Wistar 大鼠，于舌背部黏膜处作一直径为3 mm的圆形缺损模型，分别于术后0、1、2、3、4、8 d处死，HE染色观察组织愈合过程，同时采用免疫组织荧光法检测 EMT相关蛋白E-钙黏蛋白（E-cadherin， E-cad），波形蛋白（Vimentin）和成纤维细胞特异性蛋白-1（fibroblast specif-ic proteins， FSP1）在舌黏膜创口愈合过程中的表达。结果大鼠舌黏膜创口边缘E-cad表达术后2～4 d较0、1d减少，间质细胞特异蛋白Vimentin、FSP1在上皮基底层表达。术后8 d舌黏膜创口完全愈合，E-cad表达量与0 d相近，上皮基地层仍可见少量Vimentin、FSP1表达。结论 E-cad、Vimentin、FSP1参与舌黏膜创口愈合过程，部分上皮细胞向创口中心迁徙过程中具备了间质细胞特性。 展开更多

关键词 上皮间质转化 E-钙黏蛋白 波形蛋白 成纤维细胞特异性蛋白-1 舌黏膜

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黏膜相关恒定T细胞与肿瘤 被引量：2

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作者 邵春艳 仲飞 +1 位作者 王学富 王华 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期1650-1653,共4页

黏膜相关恒定T(mucosal-associated invariant T,MAIT)细胞是一种在进化上高度保守的T淋巴细胞亚群,具有与先天自然杀伤T(innate natural killer T cells,iNKT)细胞相似的天生功能。MAIT细胞由其不变的T细胞受体(T cell receptor,TCR)-... 黏膜相关恒定T(mucosal-associated invariant T,MAIT)细胞是一种在进化上高度保守的T淋巴细胞亚群,具有与先天自然杀伤T(innate natural killer T cells,iNKT)细胞相似的天生功能。MAIT细胞由其不变的T细胞受体(T cell receptor,TCR)-α链及其限制性主要组织相容性复合物(major histocompatibility complex,MHC)相关蛋白-1(MR1)所定义,并通过MR1识别抗原,被激活后分泌多种细胞因子,直接或间接参与机体的免疫应答。MAIT细胞在人外周血和各组织中均含量丰富,并与多种感染性疾病、自身免疫性疾病及恶性肿瘤的发生、发展有着密切的关系。该文主要对MAIT细胞在肿瘤疾病中的研究进行综述。 展开更多

关键词 黏膜相关恒定T细胞 T细胞受体 主要组织相容性复合物相关蛋白-1 细胞因子 肿瘤 免疫监视

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同源物2增强子在喉癌细胞上皮-间充质转化中的作用 被引量：2

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作者 王雨洁 张婷 +4 位作者 王志颐 季俊峰 吴明海 潘晗 陈伟 《医学研究与战创伤救治》 CAS 北大核心 2023年第1期20-26,共7页

目的同源物2增强子(EZH2)在喉癌组织上皮-间充质转化(EMT)中的作用尚不清楚。文中旨在探讨EZH2在喉癌细胞EMT中的作用。方法根据喉癌细胞系分为:TU177、SNU46、M4E、Tu686)和人类鼻咽上皮细胞(HNPECs)NP69。选取EZH2蛋白表达较高的TU177... 目的同源物2增强子(EZH2)在喉癌组织上皮-间充质转化(EMT)中的作用尚不清楚。文中旨在探讨EZH2在喉癌细胞EMT中的作用。方法根据喉癌细胞系分为:TU177、SNU46、M4E、Tu686)和人类鼻咽上皮细胞(HNPECs)NP69。选取EZH2蛋白表达较高的TU177和Tu686细胞系转染EZH2si-RNA,其中转染效果高的为EZH2-1组,转染效果较低(沉默EZH2)的为EZH2-2组,对照为转染空载体的si-NC组。通过qRT-PCR和Western blot检测喉癌组织和细胞中EZH2、分泌的卷曲相关蛋白1(SFRP1)及组蛋白H3(H3K27me3)上赖氨酸27的三甲基化的表达。转染si-EZH2、si-SFRP1、oe-SFRP1或H3K27me3上调后,通过CCK-8检测细胞活力,免疫印迹法检测E-钙粘蛋白、N-钙粘蛋白、β-连环蛋白、c-Myc和CyclinD1的蛋白水平,免疫荧光法检测波形蛋白的表达。通过qPCR检测SFRP1启动子中H3K27me3的富集水平。结果与癌旁组织相比,癌组织中EZH2的mRNA及蛋白水平升高(P<0.05)。细胞活力结果显示,si-EZH2-1组细胞活力较si-NC组有所下降(P<0.05)。Western blot和免疫荧光法检测结果显示,si-EZH2-1组E-钙粘蛋白的表达明显增加,而N-钙粘蛋白的表达明显降低(P<0.05),波形蛋白的荧光强度减弱。与si-NC组相比,si-EZH2-1组的H3K27me3蛋白水平明显降低(P<0.05)。ChIP-qPCR检测结果显示,si-EZH2-1组SFRP1启动子中H3K27me3的富集水平较si-NC组显著降低(P<0.05)。qRT-PCR和Western blot检测结果显示,si-EZH2-1组中SFRP1的表达明显高于si-NC组(P<0.05)。结论EZH2可以促进喉癌细胞的EMT发生,为喉癌临床管理提供了一种全新的策略。 展开更多

关键词 喉癌 同源物2增强子 上皮-间充质转化 卷曲相关蛋白1 组蛋白H3

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转移相关肺腺癌转录本1(MALAT1)促进缺氧诱导的肾小管间皮细胞转分化 被引量：5

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作者 李欢 何丽洁 +2 位作者 娄未娟 王汉民 李洋平 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期1008-1014,共7页

目的研究长链非编码RNA转移相关肺腺癌转录本1(MALAT1)参与缺氧诱导的肾小管上皮细胞上皮间质转分化(EMT)调控的机制。方法 HK-2肾小管上皮细胞缺氧处理0、12、24、48、72 h,实时定量PCR检测MALAT1 mRNA和miR-100-3p水平。HK-2细胞分别... 目的研究长链非编码RNA转移相关肺腺癌转录本1(MALAT1)参与缺氧诱导的肾小管上皮细胞上皮间质转分化(EMT)调控的机制。方法 HK-2肾小管上皮细胞缺氧处理0、12、24、48、72 h,实时定量PCR检测MALAT1 mRNA和miR-100-3p水平。HK-2细胞分别感染特异性lncRNA慢病毒和miRNA慢病毒下调MALAT1和miR-100-3p,采用实时定量PCR检测MALAT1 mRNA和miR-100-3p水平,免疫荧光细胞化学染色检测上皮钙黏素(ECD)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅳ型胶原蛋白α1链(COL4A1)的表达。构建单侧输尿管梗阻(UUO)动物模型,设置单侧输尿管未结扎组(对照组)、结扎7 d组(UUO7 d组)、结扎3周组(UUO 3周组)、腺相关病毒(AAV)组。在UUO动物模型中,采用AAV感染下调MALAT1水平后,采用HE和Masson染色检测各组肾组织病变情况,采用免疫组织化学染色检测肾组织ECD和α-SMA的表达。结果在缺氧诱导的HK-2细胞中,随缺氧刺激时间延长,MALAT1表达逐渐升高,而miR-100-3p表达逐渐减低;缺氧诱导HK-2细胞72 h后,慢病毒感染下调MALAT1水平,miR-100-3p水平升高,同时ECD表达增加、COL4A1和α-SMA表达降低;缺氧诱导HK-2细胞72 h后,转染下调miR-100-3p水平,MALAT1水平无显著变化,miR-100-3p水平降低,ECD表达降低,COL4A1和α-SMA表达增加;体内实验:与对照组相比,UUO动物模型组MALAT1表达显著升高,而miR-100-3p表达明显降低; AAV组与3周组比较,ECD表达显著升高,而α-SMA表达显著降低。结论 MALAT1可通过负向调控miR-100-3p,进而促进COL4A1表达,促进缺氧诱导的HK-2细胞EMT,并且可以促进UUO肾病小鼠肾脏纤维化。 展开更多

关键词 转移相关肺腺癌转录本1(MALAT1) miR-100-3p Ⅳ型胶原蛋白α1链(COL4A1) 上皮间质转分化(EMT)

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玻璃体内注射色素上皮源性因子对大鼠早期糖尿病视网膜病变的保护作用 被引量：4

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作者 江新利 苗慧鹏 +2 位作者 周忠友 赵平 刘岩 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2016年第3期210-215,共6页

目的观察玻璃体内注射色素上皮源性因子（pigment epithelium-derived factor,PEDF）对SD糖尿病大鼠视网膜PEDF、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）、炎性相关因子细胞间黏附分子-1（intercellular cell adh... 目的观察玻璃体内注射色素上皮源性因子（pigment epithelium-derived factor,PEDF）对SD糖尿病大鼠视网膜PEDF、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）、炎性相关因子细胞间黏附分子-1（intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1）和单核细胞趋化蛋白-1（monocyte chemotactic protein-1,MCP-1）以及细胞通透性相关因子紧密连接蛋白-1（zonu-la occludens-1,ZO-1）和蛋白激酶B（protein kinase B,PKB,又称Akt）表达的影响,探讨PEDF对早期糖尿病视网膜病变的保护作用。方法选取6~8周龄SD大鼠60只,随机分为4组：正常对照组（CON组）、糖尿病组（DM组）、糖尿病生理盐水注射组（DM＋NS组）和糖尿病PEDF注射组（DM＋PEDF组）。链脲佐菌素诱导建立糖尿病模型后第1周、2周、3周时,DM＋PEDF组大鼠玻璃体内注射PEDF,而DM＋NS组注射同样体积的生理盐水。第4周时处死大鼠,摘出眼球,进行视网膜组织病理学及电镜观察。并采用免疫组织化学方法检测视网膜PEDF、VEGF、ICAM-1、MCP-1以及ZO-1、Akt的表达情况。结果糖尿病大鼠均造模成功。4周糖尿病病程尚不能导致明显的视网膜新生血管形成。在透射电镜下,DM组大鼠视网膜可见神经节细胞水肿,线粒体肿胀变大,基质肿胀明显,可见大部分或全部的嵴消失,部分双侧膜融合,粗面内质网扩张,而玻璃体内PEDF注射可以明显地改善这一病理改变。DM组大鼠PEDF主要表达于视网膜神经纤维层、神经节细胞层以及内丛状层、光感受器基质以及色素上皮层、脉络膜等部位;VEGF主要表达于神经节细胞层,ICAM-1主要表达在光感受器层,MCP-1主要表达在视网膜内层细胞,包括节细胞层和内核层,ZO-1蛋白主要表达于内核层的细胞以及神经节细胞,Akt主要表达于内丛状层以及脉络膜的细胞浆中。同CON组相比,DM组、DM＋NS组视网膜中PEDF、VEGF表达差异均无统计学意义（均为P〉0.05）,而ICAM-1、MCP-1表达增加,ZO-1、Akt表达减少,差异均有统计学意义（均为P0.05）,但ICAM-1、MCP-1表达减少,ZO-1、Akt表达增多,差异均有统计学意义（均为P〈0.05）。结论 PEDF可以明显地改善糖尿病视网膜病变早期视网膜神经节细胞的损害,通过减少炎性因子和增加细胞连接蛋白而减轻血-视网膜屏障的破坏,从而对早期糖尿病视网膜病变起一定的防治作用。 展开更多

关键词 糖尿病视网膜病变 色素上皮源性因子 血管内皮生长因子 细胞间黏附分子-1 单核细胞趋化蛋白-1 紧密连接蛋白-1 蛋白激酶B

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血清TNF-α升高对糖尿病肾脏脂质积聚的影响研究 被引量：6

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作者 张松 朱琳 +1 位作者 郝军 郑书深 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期1161-1165,共5页

目的明确糖尿病小鼠血清TNF-α升高与肾脏脂质代谢的关系。方法 CD1小鼠按体重腹腔注射链脲佐菌素(150 mg·kg-1),72 h后空腹血糖大于16.7 mmol·L-1者确定为1型糖尿病模型,饲养1个月后,采用ELISA方法检测血清中TNF-α水平,免... 目的明确糖尿病小鼠血清TNF-α升高与肾脏脂质代谢的关系。方法 CD1小鼠按体重腹腔注射链脲佐菌素(150 mg·kg-1),72 h后空腹血糖大于16.7 mmol·L-1者确定为1型糖尿病模型,饲养1个月后,采用ELISA方法检测血清中TNF-α水平,免疫组织化学和Western blot方法检测SREBP-1和ADRP的表达。结果与正常对照小鼠相比,糖尿病小鼠血清TNF-α水平明显升高,为正常对照小鼠的7.73倍。SREBP-1和ADRP主要表达于肾小管上皮细胞,糖尿病小鼠肾脏SREBP-1前体片段、成熟片段和ADRP表达明显高于正常对照小鼠,分别是对照组的2.31倍、1.74倍和1.72倍。小鼠血清TNF-α水平和肾脏ADRP表达的相关性分析证实二者间存在正相关,相关系数为0.914。结论糖尿病小鼠血清TNF-α升高可能是导致肾脏脂质积聚的因素之一。 展开更多

关键词 肿瘤坏死因子A 糖尿病 肾小管上皮细胞 脂质积聚 脂肪分化相关蛋白 固醇调节元件结合蛋白-1

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人肾小管上皮细胞necroptosis模型的构建

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作者 蒋芬 陈源汉 +6 位作者 梁馨苓 李东风 徐丽霞 谢红萍 胡鹏华 刘双信 史伟 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期2301-2304,共4页

目的:以体外培养的人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)为靶细胞,构建肾小管上皮细胞凋亡样坏死(necroptosis)的模型。方法:采用肿瘤坏死因子α(tumor nercosis factorα,TNF-α)诱导细胞凋亡,同时采用抗霉素A(antimycin A)耗竭ATP,构建肾小管... 目的:以体外培养的人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)为靶细胞,构建肾小管上皮细胞凋亡样坏死(necroptosis)的模型。方法:采用肿瘤坏死因子α(tumor nercosis factorα,TNF-α)诱导细胞凋亡,同时采用抗霉素A(antimycin A)耗竭ATP,构建肾小管上皮细胞凋亡的模型,并以caspase-8抑制剂苄氧羰酰-缬氨酰-丙氨酰-天冬氨酰-氟甲基酮(benzyloxycarbonyl-Val-Ala-Asp-fluoromethylketone,zVAD-fmk)阻断凋亡,用necroptosis的特异性抑制剂necrostatin-1(Nec-1)阻断necroptosis,观察细胞在不同的处理下形态学的变化,同时检测细胞存活率及标志物微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(microtubule-associated protein 1 light chain 3-Ⅱ,LC3-Ⅱ)的表达。结果:(1)在TNF-α+zVAD-fmk+antimycin A处理1 h时细胞及细胞器膨胀,电镜下细胞膜碎裂,线粒体变圆、肿胀,嵴逐渐模糊,胞浆中出现大量自噬小体,而Nec-1预处理后细胞的坏死程度较对照组明显改善。(2)在TNF-α+zVAD-fmk+antimycin A1 h实验组,Nec-1预处理后细胞的存活率显著增加(P<0.05)。(3)TNF-α+zVAD-fmk+antimycin A干预1 h实验组在Nec-1预处理后LC3-Ⅱ的表达量明显下降(P<0.05)。结论:凋亡环境中阻断凋亡可以诱导肾小管上皮细胞necroptosis,抑制剂Nec-1能特异性阻断肾小管上皮细胞发生坏死。 展开更多

关键词 凋亡样坏死 肾小管上皮细胞 微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ Necrostatin 1

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ZDHHC12在胶质母细胞瘤中通过YAP1调控肿瘤特性

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作者 张起翔 尤永平 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期527-534,共8页

背景和目的:胶质母细胞瘤(glioblastoma,GBM)是目前常见的恶性脑部肿瘤之一,但GBM相关发病机制仍不完全清楚。本研究旨在分析锌指DHHC结构域蛋白(zinc finger DHHC domain-containing protein,ZDHHC)12对Yes相关蛋白1(Yes-associated pr... 背景和目的:胶质母细胞瘤(glioblastoma,GBM)是目前常见的恶性脑部肿瘤之一,但GBM相关发病机制仍不完全清楚。本研究旨在分析锌指DHHC结构域蛋白(zinc finger DHHC domain-containing protein,ZDHHC)12对Yes相关蛋白1(Yes-associated protein 1,YAP1)的调控,以及ZDHHC12/YAP1轴对GBM肿瘤特性的调控。方法:在癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库以及基因型-组织表达(Genotype-Tissue Expression,GTEx)数据库中分析ZDHHC12分别在正常脑组织及GBM中的表达情况,运用蛋白质印迹法(Western blot)以及实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)检测,分析在U87、U251以及人正常星形胶质细胞(NHA)的mRNA表达及蛋白水平。在U87和U251两种GBM细胞系中通过设计的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)敲低ZDHHC12,并验证YAP1蛋白水平的变化。通过免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,Co-IP)验证内源性及外源性ZDHHC12及YAP1的相互关系。通过细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)实验、细胞平板克隆形成实验、划痕实验分析GBM细胞敲低ZDHHC12后在增殖及迁移能力上发生的改变。检测在敲低ZDHHC12后GBM细胞系中上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)标志物变化。分析ZDHHC12对GBM患者预后的影响。并检测在不同组织样本中ZDHHC12和YAP1蛋白水平。结果:TCGA数据库及GTEx数据库分析结果显示,ZDHHC12在GBM中的表达量明显高于正常脑组织(P<0.01),GBM细胞系中ZDHHC12的mRNA表达及蛋白水平高于NHA细胞系。U87和U251两组GBM细胞系中ZDHHC12的敲低会引起YAP1蛋白水平的降低。Co-IP实验验证了ZDHHC12及YAP1蛋白的相互关系。敲低ZDHHC12的表达能够显著抑制GBM细胞的增殖和迁移能力,差异有统计学意义(P<0.05)。ZDHHC12的敲低也可以引起EMT相关标志物的改变。YAP1的回复可以逆转敲低ZDHHC12所引起的GBM肿瘤特性变化。TCGA数据库中,ZDHHC12的表达也与GBM患者的预后密切相关。在组织中ZDHHC12的表达也与YAP1表达呈高度正相关。结论:ZDHHC12在GBM中高表达且与YAP1呈正相关,ZDHHC12/YAP1轴可以调控GBM相关肿瘤特性。 展开更多

关键词 胶质母细胞瘤 锌指DHHC结构域蛋白12 Yes相关蛋白1 上皮-间质转化

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沉默Ras同源物家族成员C对唾液腺腺样囊性癌增殖、侵袭和迁移的影响

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作者 于汶源 赵鹏 +6 位作者 邵禹 徐勇 徐进 谢磊 于承浩 何秋萍 陈正岗 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期723-734,共12页

目的探讨沉默Ras同源物家族成员C(RhoC)对唾液腺腺样囊性癌(SACC)增殖、凋亡、侵袭、迁移和上皮-间充质转化(EMT)的影响及其分子机制。方法选择2019年1月1日—2024年3月1日于青岛市市立医院手术切除的SACC病灶和正常唾液腺组织各27例,... 目的探讨沉默Ras同源物家族成员C(RhoC)对唾液腺腺样囊性癌(SACC)增殖、凋亡、侵袭、迁移和上皮-间充质转化(EMT)的影响及其分子机制。方法选择2019年1月1日—2024年3月1日于青岛市市立医院手术切除的SACC病灶和正常唾液腺组织各27例,通过蛋白免疫印迹(Western blot)和免疫组织化学法检测RhoC的表达水平。针对RhoC基因序列设计3条小干扰RNA(siRNA),转染至SACC-LM和SACC-83细胞系中并评估转染效率。通过Western blot比较RhoC、Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶1(ROCK1)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)、扭曲家族bHLH转录因子1(TWIST1)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)的蛋白表达水平。CCK-8实验、流式细胞术、Transwell侵袭实验、伤口愈合实验分别检测各组细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移能力的差异。生物信息学方法预测RhoC可能的上游微小RNA(miRNA)及其在SACC中的表达情况,双荧光素酶报告基因实验验证二者的结合位点。结果RhoC在SACC中的表达显著上升(P<0.05)。沉默RhoC后,实验组ROCK1、p-p38MAPK、TWIST1、N-cadherin、Vimentin的表达显著下降,E-cadherin的表达显著上升(P<0.05);p38MAPK的表达无明显差异(P>0.05);细胞增殖、侵袭和迁移能力显著下降,凋亡率显著上升(P<0.05)。miR-138-5p在SACC中低表达,miR-138-5p micmic可以显著下调转染RhoC野生型质粒后293T细胞的荧光素酶活性(P<0.05)。结论RhoC在SACC中高表达,沉默RhoC可能靶向下游ROCK1/p38MAPK/TWIST1信号通路从而抑制SACC的增殖、侵袭、迁移和EMT,同时促进其凋亡。miR-138-5p在SACC中低表达,是RhoC潜在的上游基因,二者可能存在结合位点。 展开更多

关键词 唾液腺腺样囊性癌 Ras同源物家族成员C Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶1 上皮-间充质转化 miR-138-5p

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养胃解毒合剂对脓毒症模型大鼠肠屏障功能的影响与机制研究 被引量：8

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作者 姜永帅 姜树民 +2 位作者 宋囡 李佳 马贤德 《辽宁中医杂志》 CAS 2018年第7期1504-1507,I0004,共5页

目的：从肠屏障功能角度探讨养胃解毒合剂治疗脓毒症的作用机制。方法：140只SPF级健康雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、中药正常剂量组、中药高剂量组、西药组、西药＋中药正常剂量组、西药＋中药高剂量组。采用HE染色技术观测各组... 目的：从肠屏障功能角度探讨养胃解毒合剂治疗脓毒症的作用机制。方法：140只SPF级健康雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、中药正常剂量组、中药高剂量组、西药组、西药＋中药正常剂量组、西药＋中药高剂量组。采用HE染色技术观测各组大鼠肠道结构,分别采用实时荧光定量PCR技术与Western Blot技术检测肠屏障功能相关基因mRNA与蛋白表达。结果：（1）形态学结果显示：脓毒症模型大鼠肠组织细胞水肿严重,大量炎症细胞浸润,中药高剂量组与西药＋中药高剂量组水肿明显改善,炎症细胞明显减少。（2）Western Blot与PCR结果显示：与正常组比较,模型组Occludin、Claudin-1和ZO-1基因mRNA与蛋白表达显著下调;与模型组比较,3种基因mRNA与蛋白在西药组、中药高剂量组、西药＋中药正常剂量组、西药＋中药高剂量组表达均显著上调;与西药组比较,西药＋中药高剂量组Claudin-1和ZO-1基因mRNA与蛋白表达显著上调,Occludin蛋白表达显著上调。结论：高剂量养胃解毒合剂能够改善脓毒症大鼠的肠道屏障功能,与西药合用提高西药疗效,可能是通过上调肠组织Occludin、Claudin-1和ZO-1基因mRNA与蛋白表达水平实现的。 展开更多

关键词 养胃解毒合剂 脓毒症模型大鼠 肠道屏障功能 肠道闭锁蛋白 紧密连接跨膜蛋白 黏膜上皮紧密连接相关蛋白-1

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