鸡马立克病病毒814株gE、gI、gp82基因的克隆及序列分析

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作者 张艳萍 刘长军 +2 位作者 秦运安 张晓巍 张颖 《动物医学进展》 CSCD 2007年第3期26-30,共5页

从感染鸡马立克病病毒血清Ⅰ型(MDVⅠ)814株的鸡胚成纤维细胞(CEF)中提取病毒总DNA,以其为模板,根据GenBank中MDVⅠGA株基因组gE、gI、gp82基因序列,设计并合成3对特异性引物,用PCR方法分别扩增了814株的gE、gI、gp82基因,并将扩增的基... 从感染鸡马立克病病毒血清Ⅰ型(MDVⅠ)814株的鸡胚成纤维细胞(CEF)中提取病毒总DNA,以其为模板,根据GenBank中MDVⅠGA株基因组gE、gI、gp82基因序列,设计并合成3对特异性引物,用PCR方法分别扩增了814株的gE、gI、gp82基因,并将扩增的基因片段克隆到pMD18-T载体中,进行序列测定,应用DNA Star软件分析814株gE、gI、gp82基因核苷酸序列,并与已发表的MDVⅠ毒株序列进行了比较。结果表明,不同MDVⅠ毒株的gE、gI、gp82基因同源性很高,814株与已发表的MDVⅠ毒株的gE、gI、gp82基因核苷酸序列同源性分别在99.4%、98.9%和99.6%以上。 展开更多

关键词 鸡马立克病病毒 基因 序列分析

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鸡马立克氏病火鸡疱疹病毒间接免疫荧光检测方法的建立与比较 被引量：1

2

作者 薛麒 孙瑶 +7 位作者 冯显钤 吴华伟 刘丹 周明旭 黄张玲 杨飞 黄小洁 陈孟姣 《中国兽药杂志》 2024年第9期1-6,共6页

为建立鸡马立克氏病火鸡疱疹病毒(MDV HVT)的间接免疫荧光方法,将MDV HVT病毒接种96孔细胞板培养(CEF),72 h后用鸡抗马立克氏病病毒阳性血清作为一抗和兔抗鸡荧光抗体作为二抗,对反应条件进行优化,建立了间接免疫荧光方法(IFA)。并与经... 为建立鸡马立克氏病火鸡疱疹病毒(MDV HVT)的间接免疫荧光方法,将MDV HVT病毒接种96孔细胞板培养(CEF),72 h后用鸡抗马立克氏病病毒阳性血清作为一抗和兔抗鸡荧光抗体作为二抗,对反应条件进行优化,建立了间接免疫荧光方法(IFA)。并与经典的马立克蚀斑计数方法进行病毒滴度的测定比较,运用统计学方法分析,P小于0.05,相关系数为0.995,说明两种方法相关性很好,两种方法均可用于马立克氏病病毒的滴度测定。IFA方法较蚀斑计数方法操作简便快捷,可代替蚀斑计数方法用于马立克氏病活疫苗的病毒含量的初步测定,同时为2025年版《中国兽药典》马立克氏病活疫苗增加IFA鉴别检验方法积累实验数据。 展开更多

关键词 鸡马立克氏病火鸡疱疹病毒 间接免疫荧光方法 蚀斑计数

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鸡马立克氏病病毒的分子生物学研究 被引量：2

3

作者 杨克礼 潘玲 《家禽科学》 2005年第10期44-46,共3页

关键词 鸡马立克氏病病毒 分子生物学 传播途径 生物学特性 血清型 发病机制 诊断方法

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禽源U6启动子介导鸡马立克氏病病毒gI、gE基因特异siRNA的筛选及干扰活性鉴定

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作者 全炎铭 崔红玉 +7 位作者 赵妍 赵晓岩 石星明 高宏博 闫帅 张晓艳 王玫 王云峰 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期335-339,共5页

为筛选鸡马立克氏病病毒(MDV)gI、gE基因特异性siRNA,本研究以鸡胚成纤维细胞(CEF)的DNA为模板,扩增禽源cU6-3启动子序列,并合成针对gI和gE基因各5个靶位点的10条shRNA序列。通过重叠PCR将cU6-3启动子与shRNA融合扩增制备shRNA表达盒,... 为筛选鸡马立克氏病病毒(MDV)gI、gE基因特异性siRNA,本研究以鸡胚成纤维细胞(CEF)的DNA为模板,扩增禽源cU6-3启动子序列,并合成针对gI和gE基因各5个靶位点的10条shRNA序列。通过重叠PCR将cU6-3启动子与shRNA融合扩增制备shRNA表达盒,将制备的shRNA表达盒分别与重组质粒pEGFP-gI或pEGFP-gE共转染CEF细胞,并根据荧光显微镜观察和流式细胞仪检测结果评价siRNA抑制融合荧光蛋白表达的效率。结果表明,gI和gE基因的抑制效率为10%～80%。分别将其中抑制效率最高的一条shRNA插入pGEM-T载体中构建重组表达质粒pcU6-shgI735和pcU6-shgE936,通过不同细胞系稳定干扰试验和抑制病毒复制试验评价其干扰活性。结果显示,pcU6-shgI735和pcU6-shgE936能够明显抑制融合蛋白的表达及MDV在CEF细胞中的增殖,并且禽源U6启动子构建的表达盒在禽源细胞(DF1)中的活性比在哺乳动物细胞(Vero、MDCK)的活性高1.21～1.45倍。本研究鉴定获得了gI和gE基因的特异性siRNA,筛选出能够抑制MDV复制的靶位点,为MDV基因的功能和抗MDV病毒研究奠定了基础。 展开更多

关键词 鸡马立克氏病病毒 gI和gE基因 禽源U6启动子 SIRNA

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鸡马立克氏病病毒细菌人工染色体技术展望

5

作者 董鹏 崔红玉 王云峰 《中国家禽》 北大核心 2010年第3期8-12,共5页

鸡马立克氏病病毒反向遗传操纵技术的发展促进了对其生物学特性研究的不断深入,文章回顾了MDV基因操纵技术的发展历程,综述了MDV细菌人工染色体的特点、构建策略、研究进展、应用局限性及未来发展潜力。

关键词 鸡马立克氏病病毒 细菌人工染色体

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鸡马立克氏病病毒LMS分离株基因组重复区的测定及分析 被引量：1

6

作者 成云 张艳萍 +3 位作者 李志杰 郑永胜 谭成章 刘长军 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期492-494,共3页

为分析鸡马立克氏病病毒(MDV)LMS分离株的分子遗传特性,本研究对该分离株基因组重复区(包括连接长重复区和短重复区的α样序列)进行了测定。LMS分离株基因组的长重复区为11 746 bp,α样序列为997 bp,短重复区为12 431 bp。在重复区内,... 为分析鸡马立克氏病病毒(MDV)LMS分离株的分子遗传特性,本研究对该分离株基因组重复区(包括连接长重复区和短重复区的α样序列)进行了测定。LMS分离株基因组的长重复区为11 746 bp,α样序列为997 bp,短重复区为12 431 bp。在重复区内,预测存在43个ORF,与参考病毒株序列相比存在5个变异较大的ORF。重复区的遗传进化分析表明,LMS分离株与国内814株和欧洲pC12-130株亲缘关系较近。LMS分离株在短重复区潜伏相关转录本(LATs)编码序列的预测转录起始位点位置存在缺失;LMS分离株在α样序列内存在一个新的短重复序列。 展开更多

关键词 鸡马立克氏病病毒 序列测定与分析 重复区 α样序列

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鸡马立克氏病病毒编码的miRNA体内表达特征分析

7

作者 郑惠文 李志杰 +4 位作者 张艳萍 包珂岩 郑永胜 刘长军 王笑梅 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期751-754,共4页

最新研究发现,鸡马立克氏病病毒(MDV)基因组编码的miRNAs在肿瘤发生发展中发挥了重要的调控作用。为阐明强弱毒株编码的miRNA差异表达与病毒复制的关系,本研究采用SYBR Green荧光定量PCR方法检测了MDV CVI988疫苗株和MDV GA强毒株编码的... 最新研究发现,鸡马立克氏病病毒(MDV)基因组编码的miRNAs在肿瘤发生发展中发挥了重要的调控作用。为阐明强弱毒株编码的miRNA差异表达与病毒复制的关系,本研究采用SYBR Green荧光定量PCR方法检测了MDV CVI988疫苗株和MDV GA强毒株编码的M4-5P、M8-3P和M12-3P 3种miRNAs在肝脏和胸腺中的动态表达特征。结果表明,强弱毒株编码的这3种miRNAs在病毒感染过程中具有明显的差异性,其中GA株编码的miRNAs表达量高于CVI988株,这是由于强弱毒株在体内的复制滴度差异造成的,表明在感染前期miRNAs的表达量与病毒载量有关。该研究为进一步研究miRNAs的功能提供了实验依据。 展开更多

关键词 鸡马立克氏病病毒 MIRNA 荧光定量PCR

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肉仔鸡马立克氏病的诊治 被引量：2

8

作者 李勇生 《畜牧兽医科技信息》 2005年第10期40-40,共1页

关键词 鸡马立克氏病病毒 接触性传染病 诊治 肿瘤疾病 神经麻痹 细胞增生 组织发生 功能障碍 淋巴瘤

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鸡马立克氏病的病原、诊断与防制

9

作者 胡柏冬 李健 《养殖技术顾问》 2014年第6期172-172,共1页

1病原特点 鸡马立克氏病（MD）是由鸡马立克氏病病毒引起的鸡淋巴细胞增生性肿瘤疾病。鸡马立克氏病病毒（MDV）属于疱疹病毒科。病毒在鸡体内有完整病毒、裸体病毒和综合型病毒三种存在形式。完整病毒，即带囊膜的病毒，主要存在于... 1病原特点 鸡马立克氏病（MD）是由鸡马立克氏病病毒引起的鸡淋巴细胞增生性肿瘤疾病。鸡马立克氏病病毒（MDV）属于疱疹病毒科。病毒在鸡体内有完整病毒、裸体病毒和综合型病毒三种存在形式。完整病毒，即带囊膜的病毒，主要存在于鸡羽毛囊上皮细胞，抵抗力很强，可随脱落的羽毛囊上皮细胞散播于外界，是造成本病传播的主要因素。裸体病毒，即没有囊膜的病毒，存在于大多数感染细胞内，抵抗力很弱，一旦其所在细胞死亡，病毒很快死亡，所以又称之为细胞结合型病毒。整合型病毒，病毒仅以核酸的形式整合到宿主细胞的染色体中，这种病毒形式存在于某些感染细胞内和肿瘤细胞中，病毒随细胞存亡。 展开更多

关键词 鸡马立克氏病病毒 病原特点 防制 诊断 淋巴细胞 上皮细胞 细胞死亡 肿瘤疾病

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蛋鸡内脏型马立克氏病的诊治

10

作者 孙立新 单琦 +3 位作者 刘迪 刘蕾 裴成 高颖 《吉林畜牧兽医》 2009年第9期25-25,27,共2页

鸡马立克氏病（MD）是最常见的一种鸡淋巴组织增生性疾病，以外周神经、性腺、虹膜、各种脏器肌肉和皮肤的单核性细胞浸润为特征。本病由一种疱疹病毒引起，传染性强。MD存在于世界所有养禽国家和地区，其危害随着养鸡业的集约化而增大... 鸡马立克氏病（MD）是最常见的一种鸡淋巴组织增生性疾病，以外周神经、性腺、虹膜、各种脏器肌肉和皮肤的单核性细胞浸润为特征。本病由一种疱疹病毒引起，传染性强。MD存在于世界所有养禽国家和地区，其危害随着养鸡业的集约化而增大。疫苗免疫失败屡有发生，受害鸡群的损失在1％～3％不等，个别的鸡群可达50％以上。近年来世界各地相继发现毒力极强的鸡马立克氏病病毒，给本病的防治带来了新的问题。现将近期一典型病历的诊治情况总结如下。 展开更多

关键词 鸡马立克氏病病毒 诊治 内脏型 蛋鸡 淋巴组织 外周神经 细胞浸润 疱疹病毒

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鸡马立克氏病的流行与免疫

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作者 李文华 耿敬志 《养殖技术顾问》 2014年第2期145-145,共1页

鸡马立克氏病（MD）是由鸡马立克氏病病毒引起的鸡淋巴细胞增生性肿瘤疾病。其特点是在鸡外周神经、性腺、虹膜、各种脏器、肌肉和皮肤出现淋巴样细胞、单核细胞的浸润和增生及肿瘤的形成。鸡马立克氏病病毒（MDV）归属于疱疹病毒科。MD... 鸡马立克氏病（MD）是由鸡马立克氏病病毒引起的鸡淋巴细胞增生性肿瘤疾病。其特点是在鸡外周神经、性腺、虹膜、各种脏器、肌肉和皮肤出现淋巴样细胞、单核细胞的浸润和增生及肿瘤的形成。鸡马立克氏病病毒（MDV）归属于疱疹病毒科。MDV在流行过程中经常出现变异毒株，其共同特点是毒力比一般毒株强，有极强的肿瘤性，用HVT免疫的鸡不能阻止其致瘤性。MDV分3个型，Ⅰ型为致病性强毒株及其致弱毒株，Ⅱ型为无致病性的自然弱毒株，Ⅲ型为火鸡疱疹病毒（HVT），此型病毒本非MDV，但因与鸡马立克氏病关系密切，故将其划分在马立克氏病毒型内。 展开更多

关键词 鸡马立克氏病病毒 免疫 火鸡疱疹病毒 肿瘤疾病 淋巴细胞 变异毒株 致弱毒株 MDV

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2016年鲁北地区鸡群病毒性肿瘤病例的检测分析

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作者 徐晴晴 孙培 +7 位作者 褚仁忠 王文秀 王金良 肖跃强 王艳 魏凤 莫玲 苗立中 《动物医学进展》 北大核心 2017年第12期123-127,共5页

为了解鸡马立克病病毒(MDV)、禽白血病病毒(ALV)和禽网状内皮组织增生症病毒(REV)在鲁北地区鸡群中的感染情况,对来自21个鸡群的送检病例进行了病原核酸的PCR检测。结果显示,MDV阳性率为28.5%,ALV-J阳性率为23.8%,REV阳性率为14.3%,肿... 为了解鸡马立克病病毒(MDV)、禽白血病病毒(ALV)和禽网状内皮组织增生症病毒(REV)在鲁北地区鸡群中的感染情况,对来自21个鸡群的送检病例进行了病原核酸的PCR检测。结果显示,MDV阳性率为28.5%,ALV-J阳性率为23.8%,REV阳性率为14.3%,肿瘤病毒的二重感染率为28.6%。结果表明,3种肿瘤病毒在鲁北地区蛋鸡和地方品种鸡群中的感染严重,病毒的混合感染较多。因此,做好MD的疫苗防护,对ALV-J及REV的感染状况要进行定期检测,控制好养殖环境,尽量避免3种肿瘤病毒的继发感染。 展开更多

关键词 鸡马立克病病毒 禽白血病病毒 禽网状内皮组织增生症病毒 PCR检测

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表达MDVgB基因的重组鸡痘病毒的免疫效果研究

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作者 丁巧玲 陈溥言 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期77-80,共4页

将马立克氏病病毒 (MDV)gB基因插入鸡痘病毒 (FPV)中 ,构建了含有MDVgB基因的重组鸡痘病毒 (rFPV)。用rFPV、HVT冻干苗、rFPV +HVT疫苗分别免疫 1日龄AA肉用雏鸡 ,于 8日龄攻毒后观察疫苗免疫效果。实验结果表明 ,HVT、rFPV、HVT +rFPV... 将马立克氏病病毒 (MDV)gB基因插入鸡痘病毒 (FPV)中 ,构建了含有MDVgB基因的重组鸡痘病毒 (rFPV)。用rFPV、HVT冻干苗、rFPV +HVT疫苗分别免疫 1日龄AA肉用雏鸡 ,于 8日龄攻毒后观察疫苗免疫效果。实验结果表明 ,HVT、rFPV、HVT +rFPV疫苗免疫组比攻毒对照组病毒血症持续时间短 ;上述 3种疫苗免疫后用京 1株MDV(vMDV)攻毒 ,脾脏T淋巴细胞增殖反应处于较高水平 ,而攻毒对照组脾脏T淋巴细胞增殖反应减弱 ,两者差异显著(P <0 0 5 ) ;用HVT +rFPV二价疫苗免疫雏鸡 ,其抵抗vMDV攻击的免疫保护力高于HVT和rFPV单价苗 ,HVT +rFPV、rFPV、HVT免疫保护指数分别为 81 7% ,6 3 4 %和 6 4 1%。以上结果表明 ,表达MDVgB基因的重组鸡痘病毒疫苗在一定程度上能保护鸡体抵抗vMDV的攻击 ,并且HVT和rFPV具有免疫协同作用。 展开更多

关键词 MDV GB基因 重组鸡痘病毒 免疫效果 鸡马立克氏病病毒

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重视免疫抑制性病毒感染,提高鸡群免疫力

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作者 司振书 《中国农村科技》 2005年第8期38-38,共1页

关键词 免疫抑制性病毒 机体免疫力 病毒感染 鸡群 禽网状内皮组织增生症病毒 鸡传染性法氏囊病病毒 鸡马立克氏病病毒 鸡传染性贫血病毒 禽白血病病毒

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马立克氏病液氮疫苗介绍 被引量：1

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作者 李凤华 丛艳萍 《养殖技术顾问》 2010年第5期95-95,共1页

鸡马立克氏病病毒不易被杀灭是由于感染马立克氏病病毒的阳性鸡终生排毒。使用疫苗是预防该病的有效方法，而目前最有效的是CVI988/Rispens液氮苗。

关键词 鸡马立克氏病病毒 液氮苗 CVI988/RISPENS 疫苗 排毒

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禽类抗病毒天然免疫研究取得新进展

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《农业科技与信息》 2019年第5期21-21,共1页

近日,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所禽免疫抑制病创新团队在鸡马立克氏病病毒(MDV)拮抗I型干扰素逃逸宿主天然免疫研究中取得重要进展。本研究揭示了MDV衣壳蛋白VP23通过阻断宿主细胞DNA受体信号通路拮抗IFN-β表达进而促进病毒复制... 近日,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所禽免疫抑制病创新团队在鸡马立克氏病病毒(MDV)拮抗I型干扰素逃逸宿主天然免疫研究中取得重要进展。本研究揭示了MDV衣壳蛋白VP23通过阻断宿主细胞DNA受体信号通路拮抗IFN-β表达进而促进病毒复制的机制。 展开更多

关键词 天然免疫 禽类 抗病毒 鸡马立克氏病病毒 哈尔滨兽医研究所 中国农业科学院 宿主细胞 免疫抑制病

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免疫抑制性病毒引起发病的病因及预防

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作者 卜凡红 徐显雷 刘光学 《山东畜牧兽医》 2007年第2期53-54,共2页

病毒感染可直接或间接损害免疫系统的细胞，从而引起鸡群免疫应答功能不全，产生免疫抑制，使机体免疫力低下，导致疫苗免疫失败以及继发感染发病率增加。近年来，一些家禽由病毒感染所引发的免疫抑制越来越严重，因多处于隐性或亚临床... 病毒感染可直接或间接损害免疫系统的细胞，从而引起鸡群免疫应答功能不全，产生免疫抑制，使机体免疫力低下，导致疫苗免疫失败以及继发感染发病率增加。近年来，一些家禽由病毒感染所引发的免疫抑制越来越严重，因多处于隐性或亚临床感染状态而易被忽视。鸡免疫抑制性病毒主要包括鸡马立克氏病病毒、鸡传染性法氏囊病病毒、鸡传染性贫血病毒、禽网状内皮组织增生症病毒和禽白血病病毒等。 展开更多

关键词 免疫抑制性病毒 发病率 禽网状内皮组织增生症病毒 鸡传染性法氏囊病病毒 鸡马立克氏病病毒 鸡传染性贫血病毒 预防 病因

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硫酸化人参总皂苷对人工感染MDV鸡淋巴细胞活性的调节 被引量：2

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作者 王鲁 王春元 +4 位作者 付本懂 褚秀玲 伊鹏霏 申海清 韦旭斌 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期1272-1277,共6页

鸡马立克氏病病毒(MDV)经腹腔注射感染8日龄雏鸡,攻毒15 d后检测硫酸化人参总皂苷对鸡外周血白细胞数和淋巴细胞增殖活性的影响,并利用半定量RT-PCR方法分析外周血淋巴细胞IFN-γmRNA的表达水平。结果表明,MDV感染能引起鸡淋巴细胞百分... 鸡马立克氏病病毒(MDV)经腹腔注射感染8日龄雏鸡,攻毒15 d后检测硫酸化人参总皂苷对鸡外周血白细胞数和淋巴细胞增殖活性的影响,并利用半定量RT-PCR方法分析外周血淋巴细胞IFN-γmRNA的表达水平。结果表明,MDV感染能引起鸡淋巴细胞百分比相对增多(P<0.01),人参总皂苷及其硫酸化人参总皂苷不能改变MDV所致变化(P>0.05),且硫酸化人参总皂苷与人参总皂苷之间没有差异(P>0.05);MDV感染极显著抑制淋巴细胞增殖(P<0.01),人参总皂苷能明显改善MDV对感染鸡淋巴细胞增殖的抑制(P<0.01),硫酸化人参总皂苷促进了MDV所致的抑制状态(P<0.01);人参总皂苷及其硫酸化人参总皂苷均能增强MDV所致鸡淋巴细胞IFN-γmRNA的表达,与健康组相比,硫酸化人参总皂苷极显著增加IFN-γmRNA表达(P<0.01)。结果提示,硫酸化人参总皂苷对人工感染MDV鸡的淋巴细胞活性具有调节作用,其作用比人参总皂苷的作用更强。 展开更多

关键词 硫酸化人参总皂苷 鸡马立克氏病病毒 淋巴细胞 IFN-Γ

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“八五”兽医生物技术研究进展

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作者 崔治中 吴艳涛 《畜牧兽医科技信息》 1997年第15期2-4,共3页

一、鸡马立克氏病病毒(MDV)囊膜糖蛋白基因的克隆、表达和生物学活性 通过MDV的囊膜糖蛋白B及D抗原基因的克隆、表达及重组基因产物的生物学活性研究,阐明了其在MDV识别、粘附、渗入和感染易感细胞中及抗感染中的作用。1、以pUC18质粒... 一、鸡马立克氏病病毒(MDV)囊膜糖蛋白基因的克隆、表达和生物学活性 通过MDV的囊膜糖蛋白B及D抗原基因的克隆、表达及重组基因产物的生物学活性研究,阐明了其在MDV识别、粘附、渗入和感染易感细胞中及抗感染中的作用。1、以pUC18质粒为载体,构建了强毒GA株MDV感染的鸡胚成纤维细胞(CEF)基因组DNA基因文库。 展开更多

关键词 单克隆抗体 生物技术研究 MDV糖蛋白B 鸡马立克氏病病毒 MDV感染 病毒糖蛋白 B抗原 诊断试剂盒 基因克隆 生物学活性

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