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鸡传染性贫血病疫苗研究进展 被引量:1
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作者 汪磊 梁琳 +6 位作者 罗润琪 梁瑞英 胡丹丹 司红彬 丁家波 邸文达 汤新明 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第1期341-350,共10页
鸡传染性贫血病(chicken infectious anemia, CIA)是临床上最常见的免疫抑制性传染病之一,尚无特异性治疗方法,严重威胁动物健康和养殖业的经济效益。虽然已有部分地区以活疫苗进行CIA的临床预防,但其安全性问题及病毒培养和生产效率低... 鸡传染性贫血病(chicken infectious anemia, CIA)是临床上最常见的免疫抑制性传染病之一,尚无特异性治疗方法,严重威胁动物健康和养殖业的经济效益。虽然已有部分地区以活疫苗进行CIA的临床预防,但其安全性问题及病毒培养和生产效率低是制约活疫苗推广应用的主要瓶颈。笔者从引起CIA的鸡传染性贫血病毒(Chicken infectious anemia virus, CIAV)的病原学与流行特征、传统疫苗与新型疫苗激发宿主的免疫应答特征与免疫保护力等方面进行全面分析,剖析现有疫苗的优缺点,结合新型疫苗的理论与技术优势,提出CIA高效疫苗的研发方向,为CIA疫苗的研发提供新的思路和科学依据。 展开更多
关键词 传染性贫血 传染性贫血病毒(ciav) 感染与免疫 疫苗研发
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抗鸡传染性贫血病毒VP2蛋白单克隆抗体的制备及其应用研究
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作者 侯力丹 薛麒 +8 位作者 王嘉 孔冬妮 吴宏举 翟天舒 邓永 毛娅卿 吴华伟 孙瑶 刘丹 《中国兽药杂志》 2024年第8期1-8,共8页
为制备针对鸡传染性贫血病毒(Chicken infectious anemia virus,CIAV)的单克隆抗体,以CIAV的VP2原核表达蛋白作为抗原免疫小鼠,经杂交瘤技术获得3株能稳定分泌抗VP2蛋白特异性抗体的细胞株,进一步经IFA筛选出特异性和灵敏度俱佳的杂交... 为制备针对鸡传染性贫血病毒(Chicken infectious anemia virus,CIAV)的单克隆抗体,以CIAV的VP2原核表达蛋白作为抗原免疫小鼠,经杂交瘤技术获得3株能稳定分泌抗VP2蛋白特异性抗体的细胞株,进一步经IFA筛选出特异性和灵敏度俱佳的杂交瘤细胞Mab-VP2-4株,制备的小鼠腹水效价达到1∶2000。结果显示,制备的抗VP2蛋白单克隆抗体可与多株CIAV感染的MDCC-MSB1细胞发生特异性反应,而对EDSV、ALV、ILTV、ARV以及空白MDCC-MSB1细胞、CEF细胞等均无交叉反应,特异性良好,且应用于IFA方法时对CIAV感染的最低检出限为5 TCID 50。以该单克隆抗体对市场上10种不同来源的禽活疫苗进行病毒分离结合单克隆抗体IFA检测,同时与《中国兽药典》规定的鸡检查法进行对比检测,结果一致,均未检出CIAV污染。本研究制备了针对CIAV VP2蛋白的特异性单克隆抗体,为该病特异性诊断方法的建立奠定了基础。 展开更多
关键词 传染性贫血病毒 VP2蛋白 单克隆抗体 间接免疫荧光
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一株鸡传染性贫血病毒对不同日龄SPF鸡的致病性研究
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作者 陈玲 杨宵玥 +1 位作者 荣俊 蒋桃珍 《中国兽药杂志》 2024年第3期16-23,共8页
为评价鸡传染性贫血病毒AV1550株的致病性,取1日龄、7日龄和14日龄SPF鸡分别经胸部肌肉注射不同病毒含量的病毒液,同时设置正常对照,隔离饲养观察21 d。感染后14 d采血测定红细胞压积,21 d统计死亡率、体重变化以及胸腺、骨髓、法氏囊... 为评价鸡传染性贫血病毒AV1550株的致病性,取1日龄、7日龄和14日龄SPF鸡分别经胸部肌肉注射不同病毒含量的病毒液,同时设置正常对照,隔离饲养观察21 d。感染后14 d采血测定红细胞压积,21 d统计死亡率、体重变化以及胸腺、骨髓、法氏囊病变情况并测定1日龄SPF鸡感染后不同组织中的病毒载量。结果表明,1日龄SPF鸡感染AV1550株后,表现出精神沉郁、增重减缓、贫血等明显的临床症状,死亡率为53.9%;死亡鸡或观察期结束时存活鸡剖检,可见胸腺萎缩,骨髓变成淡黄色;不同剂量感染后14 d,均能引起红细胞压积显著下降;21 d时,胸腺病毒载量最高,可达10^(6.7) copies/mg。7日龄SPF鸡感染后,出现增重减缓,高感染剂量(100000EID_(50))出现贫血,部分鸡出现胸腺萎缩和骨髓病变,但病变率低于30%。14日龄SPF鸡感染后,不引起明显临床症状。研究证实,CAV对SPF鸡的致病性具有明显的日龄依赖性,红细胞压积降低、骨髓病变、胸腺萎缩以及胸腺病毒载量测定可作为评价CAV致病的指标。 展开更多
关键词 传染性贫血病毒 SPF 致病性
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鸡传染性贫血病毒对SPF鸡的致病特性及其排毒规律研究
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作者 冯笑艳 胡明雪 +7 位作者 林雨萌 高宏雷 于海波 刘长军 祁小乐 张伟 张艳萍 高玉龙 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期5684-5691,共8页
旨在了解鸡传染性贫血病毒(CAV)对SPF鸡的致病性、排毒规律及水平传播能力。本研究将CAV JL17/1204株经腹腔接种和同居接触感染1日龄及28日龄SPF鸡,在感染后3 d(dpi)、5 dpi、7 dpi、9 dpi、11 dpi、14 dpi、21 dpi、28 dpi、42 dpi、56... 旨在了解鸡传染性贫血病毒(CAV)对SPF鸡的致病性、排毒规律及水平传播能力。本研究将CAV JL17/1204株经腹腔接种和同居接触感染1日龄及28日龄SPF鸡,在感染后3 d(dpi)、5 dpi、7 dpi、9 dpi、11 dpi、14 dpi、21 dpi、28 dpi、42 dpi、56 dpi、84 dpi和112 dpi,感染组和同居组分别采集3只鸡的抗凝血并剖检,以检测其贫血、胸腺萎缩情况;每个时间点另采集每组20只鸡的咽拭子和肛拭子通过PCR方法进行排毒检测。临床观察结果显示,1日龄感染组和同居组鸡的死亡率分别为50.0%和10.0%,死亡时间为12~15 dpi;28日龄感染组和同居组鸡感染后无死亡。剖检结果显示,各组发病鸡出现胸腺萎缩和/或贫血症状,1日龄感染组和同居组发病率分别为100.0%和20.0%;28日龄感染组和同居组发病率分别为10.0%和8.0%。排毒检测结果显示,1日龄感染组鸡呼吸道和消化道分别从3 dpi、5 dpi开始排毒,1日龄同居组呼吸道和消化道排毒期分别为同居后5~84 d和7~42 d;28日龄感染组呼吸道和消化道排毒期分别为感染后3~9 dpi和5~14 dpi;28日龄同居组呼吸道和消化道排毒期分别为同居后5~9 d和5~42 d。结果提示CAV对1日龄SPF鸡致病性强,感染后可诱导鸡死亡、胸腺萎缩和/或贫血等致病特征,对28日龄SPF鸡致病性明显减弱;接种和同居感染后均经呼吸道和消化道排毒,可诱导同居接触感染鸡发病甚至死亡,表明CAV具有较强的水平传播能力。本研究结果系统阐明了CAV感染致病特征和排毒规律,为鸡群科学开展CAV的净化提供了理论指导和科学依据。 展开更多
关键词 传染性贫血病毒 SPF 致病特性 排毒规律 水平传播
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白羽肉鸡圆圈病毒3型与鸡传染性贫血病毒混合感染的诊断
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作者 齐莎莎 齐爽 《北方牧业》 2024年第16期7-7,共1页
2011年以前,圆圈病毒属(GyVs)仅有一个成员(鸡传染性贫血病毒),2011年以后研究人员不断检测出10种类似于鸡传染性贫血病毒基因结构的病毒。2016年以来国际病毒分类委员会将该病毒属重新分类,把圆圈病毒属从圆环病毒科划分到指环病毒科。
关键词 传染性贫血病毒 白羽肉 病毒 混合感染 圆环病毒 基因结构 重新分类
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鸡传染性贫血病毒与禽网状内皮增生症病毒二重PCR检测方法的建立 被引量:9
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作者 吴萍萍 张小飞 +3 位作者 潘玲 胡来根 尹秀凤 毛火云 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第4期182-184,共3页
当前养鸡业中鸡传染性贫血病毒、禽网状内皮增生症病毒混合感染的发生率日益增高,为提高CIAV、REV检测效率,根据GenBank上登录的CIAV全基因序列和REV的LTR序列分别设计了2对引物,建立了REV、CIAV二重PCR检测方法,另外还比较了2种不同的... 当前养鸡业中鸡传染性贫血病毒、禽网状内皮增生症病毒混合感染的发生率日益增高,为提高CIAV、REV检测效率,根据GenBank上登录的CIAV全基因序列和REV的LTR序列分别设计了2对引物,建立了REV、CIAV二重PCR检测方法,另外还比较了2种不同的DNA提取方法。结果显示,该方法扩增目的条带清晰、敏感性高、特异性好。应用建立的方法对临床7份病料样品检测,检出5份CIAV、REV阳性,表明建立的二重PCR方法能有效用于CIAV、REV混合感染的临床诊断。 展开更多
关键词 传染性贫血病毒(ciav) 禽网状内皮增生症病毒(REV) 二重PCR
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鸡传染性贫血病毒荧光定量PCR检测方法的建立及其在疫苗污染检测中的应用 被引量:14
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作者 任志浩 房立春 +5 位作者 栾怀彪 李阳 王一新 崔治中 常爽 赵鹏 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期1459-1464,共6页
为了更快速而灵敏地检测禽弱毒疫苗中鸡传染性贫血病毒(CIAV)的污染,根据CIAV基因组保守序列设计合成了引物及TaqMan探针,通过优化反应条件建立了快速检测CIAV的实时荧光定量PCR检测方法。结果显示,建立的检测方法灵敏度可达10拷贝·... 为了更快速而灵敏地检测禽弱毒疫苗中鸡传染性贫血病毒(CIAV)的污染,根据CIAV基因组保守序列设计合成了引物及TaqMan探针,通过优化反应条件建立了快速检测CIAV的实时荧光定量PCR检测方法。结果显示,建立的检测方法灵敏度可达10拷贝·μL^(-1),比常规PCR灵敏度高100倍。该方法与禽白血病病毒、禽网状内皮组织增生症病毒以及马立克病病毒等病毒基因均无交叉反应,具有很好的特异性;批内重复和批间重复显示变异系数均小于2%,呈现良好的可重复性。在模拟试验中,该方法能够检测到1 000羽份弱毒疫苗中1个EID50的低剂量污染,应用该方法从送检的39种(批)商品化禽用弱毒疫苗中检测到2份为CIAV阳性。上述结果表明,本研究建立的荧光定量PCR检测方法灵敏度高,特异性强,重复性好,可用于检测疫苗中CIAV低剂量的污染。 展开更多
关键词 传染性贫血病毒 实时荧光定量PCR 弱毒疫苗 污染
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鸡传染性贫血病毒广西株全基因组的克隆与序列分析 被引量:7
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作者 邓显文 谢芝勋 +3 位作者 谢丽基 刘加波 谢志勤 庞耀珊 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2011年第4期19-22,共4页
为了解鸡传染性贫血病毒(CIAV)广西分离株全基因变异情况,设计3对特异性引物,对CIAV广西分离株(GXC060821)的全基因进行PCR扩增、克隆和序列分析。结果显示,广西分离株的全基因为2 292个核苷酸,含有3个互相重叠的开放阅读框(ORF)... 为了解鸡传染性贫血病毒(CIAV)广西分离株全基因变异情况,设计3对特异性引物,对CIAV广西分离株(GXC060821)的全基因进行PCR扩增、克隆和序列分析。结果显示,广西分离株的全基因为2 292个核苷酸,含有3个互相重叠的开放阅读框(ORF)。序列分析表明,本CIAV分离株与国内外其他31个CIAV毒株比较核苷酸的同源性在96.1%~98.5%之间,推导氨基酸的同源性在89.8%~94.2%之间。全基因系统发育进化树分析显示,广西分离株和中国的TJBD40株、LF4株都处于一个分支,它们的亲缘关系较近,而与美国的98D06073分离株及中国的HA4分离株的亲缘关系较远。 展开更多
关键词 传染性贫血病毒 全基因组 克隆 序列分析
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免疫抑制鸡群鸡传染性贫血病毒和网状内皮增生症病毒共感染检测 被引量:30
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作者 吉荣 刘岳龙 +7 位作者 秦爱建 丁家波 金文杰 赵文明 崔治中 段素华 高海萍 韩方伟 《中国兽药杂志》 2001年第4期1-3,共3页
分别用 digoxigenin标记的鸡传染性贫血病毒 (CAV)和禽网状内皮增生症病毒 (REV)核酸探针以及 PCR技术对某种鸡场进行检测。检测结果表明 ,在 2 0个样品中 ,CAV和 REV感染的阳性率分别为 1 0 %和 5%。这一结果显示 ,CAV和 REV感染是导... 分别用 digoxigenin标记的鸡传染性贫血病毒 (CAV)和禽网状内皮增生症病毒 (REV)核酸探针以及 PCR技术对某种鸡场进行检测。检测结果表明 ,在 2 0个样品中 ,CAV和 REV感染的阳性率分别为 1 0 %和 5%。这一结果显示 ,CAV和 REV感染是导致该鸡场发生免疫抑制的主要病因之一。 展开更多
关键词 传染性贫血病毒 禽网状风皮增生症病毒 共感染检测 免疫抑制
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鸡传染性贫血病毒的分子生物学及其核酸检测技术 被引量:4
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作者 蒋玲艳 韦平 李义杰 《动物医学进展》 CSCD 2003年第5期10-13,共4页
鸡传染性贫血 (CIA)是鸡的重要的免疫抑制性疾病之一 ,以引起雏鸡再生障碍性贫血和全身淋巴组织萎缩为主要特征。鸡传染性贫血病毒 (CIAV)主要引起鸡骨髓成红细胞和胸腺皮质的成淋巴细胞溶细胞感染 ,继而导致贫血和免疫抑制。该病毒在... 鸡传染性贫血 (CIA)是鸡的重要的免疫抑制性疾病之一 ,以引起雏鸡再生障碍性贫血和全身淋巴组织萎缩为主要特征。鸡传染性贫血病毒 (CIAV)主要引起鸡骨髓成红细胞和胸腺皮质的成淋巴细胞溶细胞感染 ,继而导致贫血和免疫抑制。该病毒在世界范围内广泛存在 ,是养鸡业潜藏的巨大威胁。文章从 CIA的危害、基本控制方法、病原的基因组及其所编码的蛋白质的功能、疾病的诊断等方面的最新进展进行了综述 ,重点介绍了病原的分子生物学研究进展及其核酸检测技术 ,并对 展开更多
关键词 传染性贫血病毒 分子生物学 核酸检测 CIA 免疫抑制性疾病 基因组 蛋白质
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鸡传染性贫血病病毒TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立 被引量:3
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作者 郭翠丽 张春红 +3 位作者 郭鹏举 张建峰 沈海燕 潘家强 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第12期45-49,共5页
根据鸡传染性贫血病病毒(chicken infectious anemia virus,CAV)基因组保守区域设计1对特异性引物和探针,通过优化反应条件,建立了一种快速检测CAV的TaqMan实时荧光定量PCR方法,同时验证其特异性、灵敏性和重复性。本试验建立的TaqMan... 根据鸡传染性贫血病病毒(chicken infectious anemia virus,CAV)基因组保守区域设计1对特异性引物和探针,通过优化反应条件,建立了一种快速检测CAV的TaqMan实时荧光定量PCR方法,同时验证其特异性、灵敏性和重复性。本试验建立的TaqMan实时荧光定量PCR方法灵敏度可达1.8×101拷贝/μL,远高于常规PCR方法;并与禽类其他病毒性疾病无交叉反应,具有高特异性。用分离的病毒人工感染1日龄SPF雏鸡,14日龄剖检,对感染鸡体内各器官的病毒分布及载量进行检测,结果表明,在脑、心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胸腺、法氏囊和血清中均可检测到病毒,肝脏、胸腺病毒载量明显高于其他组织。本研究建立的TaqMan实时荧光定量PCR方法特异性强、灵敏度高、重复性好,可同时检测大量临床样品,适用于CAV的诊断与流行病学分析。 展开更多
关键词 传染性贫血病毒(CAV) TaqMan实时荧光定量PCR 探针
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鸡传染性贫血病毒VP1和VP2基因共表达载体的构建 被引量:3
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作者 陈降华 周庆丰 +1 位作者 刘忠华 李文平 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2009年第11期68-71,共4页
根据GenBank中收录的鸡传染性贫血病毒(CIAV)基因组序列,设计了扩增CIAV VP1和VP2基因的特异性引物,运用PCR技术从发病鸡肝组织DNA中扩增得到VP1、VP2基因,并将其克隆至pMD18-T载体。核苷酸测序结果显示,其序列与发表的序列同源性达到99... 根据GenBank中收录的鸡传染性贫血病毒(CIAV)基因组序列,设计了扩增CIAV VP1和VP2基因的特异性引物,运用PCR技术从发病鸡肝组织DNA中扩增得到VP1、VP2基因,并将其克隆至pMD18-T载体。核苷酸测序结果显示,其序列与发表的序列同源性达到99.8%。将VP2基因克隆到pMD18-T载体,并对Vp3基因起始密码子进行定点突变,得到突变基因mVP2。将mVP2、VP1先后克隆至pIRES载体,并转化大肠埃希菌JM109,提取质粒通过酶切鉴定显示,成功获得了共表达质粒pIRES-VP1/mVP2。 展开更多
关键词 传染性贫血病毒 VP1基因 VP2基因 共表达载体
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一株鸡传染性贫血病毒的分离鉴定及其致病性研究 被引量:6
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作者 陈玲 宋亚芬 +1 位作者 张兵 蒋桃珍 《中国兽药杂志》 2020年第4期17-23,共7页
从北京某鸡场发生疑似鸡传染性贫血病毒(CAV)感染的鸡只病料中分离到了一株CAV,通过PCR和全基因组测序等方法对其进行了鉴定,命名为AV1550。将其全基因组序列与NCBI上的参考毒株序列进行同源性比对和进化分析,结果显示AV1550株与CAV参... 从北京某鸡场发生疑似鸡传染性贫血病毒(CAV)感染的鸡只病料中分离到了一株CAV,通过PCR和全基因组测序等方法对其进行了鉴定,命名为AV1550。将其全基因组序列与NCBI上的参考毒株序列进行同源性比对和进化分析,结果显示AV1550株与CAV参考毒株的同源性在91.7%~99.7%,与中国分离株LN15170的亲缘关系最近。VP1序列分析表明AV1550在75、89、125、141和394位氨基酸均为强毒株特征。1日龄SPF鸡经胸部肌肉途径接种含10000 EID50的AV1550病毒液后,接种鸡只出现明显的贫血症状,增长迟缓,死亡率高达50%,表明AV1550是一株具有较强致病性的CAV野毒株。 展开更多
关键词 传染性贫血病毒 致病性 序列分析
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鸡传染性贫血病毒诱导细胞凋亡的研究进展 被引量:1
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作者 郗洪生 王滨坤 郑世民 《动物医学进展》 CSCD 2005年第10期46-49,共4页
鸡传染性贫血病毒是鸡传染性贫血病的病原体,能引起雏鸡贫血、淋巴组织萎缩、出血及免疫抑制,是导致许多疫苗免疫失败及雏鸡死亡的主要原因之一。该病毒在世界范围内广泛存在,是养鸡业潜在的巨大威胁。近年来的研究表明,鸡传染性贫血病... 鸡传染性贫血病毒是鸡传染性贫血病的病原体,能引起雏鸡贫血、淋巴组织萎缩、出血及免疫抑制,是导致许多疫苗免疫失败及雏鸡死亡的主要原因之一。该病毒在世界范围内广泛存在,是养鸡业潜在的巨大威胁。近年来的研究表明,鸡传染性贫血病毒主要是通过其编码的凋亡素诱导雏鸡胸腺和骨髓中的造血祖细胞凋亡而致病的,而凋亡素诱导细胞凋亡的能力与其在细胞中的核定位及半胱氨酸蛋白酶(caspase)等因素密切有关。文章就鸡传染性贫血病毒生物学特征、诱导细胞凋亡的现象及机制的研究进行了综述。 展开更多
关键词 传染性贫血病毒 免疫抑制 细胞凋亡 凋亡素
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应用PCR方法检测鸡传染性贫血病毒 被引量:4
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作者 刘泽文 邵华斌 +4 位作者 杨峻 汪宏才 段正赢 熊忠良 王红琳 《湖北畜牧兽医》 2004年第4期30-31,共2页
根据发表的鸡传染性贫血病毒(CAV)序列,选择鸡传染性贫血病毒基因组保守区域,设计一对引物,建立了CAV快速诊断的PCR方法。特异性结果说明,该方法对CAV不同毒株均能扩增出明显的特异性条带,而新城疫病毒(NDV)Lasota株、传染性支气管炎病... 根据发表的鸡传染性贫血病毒(CAV)序列,选择鸡传染性贫血病毒基因组保守区域,设计一对引物,建立了CAV快速诊断的PCR方法。特异性结果说明,该方法对CAV不同毒株均能扩增出明显的特异性条带,而新城疫病毒(NDV)Lasota株、传染性支气管炎病毒(IBV)M41株、鸡马立克氏病病毒(MDV)和鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)扩增结果均为阴性;PCR反应敏感性结果显示,该方法能检测出的DNA最低浓度为0.001pg/μl,可用于临床感染不同年龄鸡群的CAV的检测。 展开更多
关键词 PCR方法 传染性贫血 病毒 CAV 细胞 引物
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鸡传染性贫血病毒研究进展 被引量:4
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作者 曲鸿飞 李慧姣 《中国兽药杂志》 2010年第3期52-56,共5页
对鸡传染性贫血病毒的理化特性、基因组结构及其编码蛋白、复制、致病性和免疫预防与控制措施等进行了概述。
关键词 传染性贫血病毒 基因组结构 复制 致病性
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应用聚合酶链反应检测鸡传染性贫血病毒 被引量:4
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作者 谢芝勋 MazharI.Khan 《中国动物检疫》 CAS 1999年第6期1-3,共3页
根据鸡传染性贫血病毒(CAV)Cux-1株的基因序列,设计了一对引物,用这对引物对三株CAV的核酸模板进行PCR扩增,结果均能特异性地扩增出420bp的片段,但对其它5种禽病病原体核酸模板的扩增,结果均为阴性,该PCR能检出10fg鸡传染性贫... 根据鸡传染性贫血病毒(CAV)Cux-1株的基因序列,设计了一对引物,用这对引物对三株CAV的核酸模板进行PCR扩增,结果均能特异性地扩增出420bp的片段,但对其它5种禽病病原体核酸模板的扩增,结果均为阴性,该PCR能检出10fg鸡传染性贫血病毒DNA模板。 展开更多
关键词 传染性贫血病毒 聚合酶链反应
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鸡传染性贫血病毒广东分离株GD-1-12致病性研究 被引量:5
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作者 张新珩 刘远佳 +4 位作者 吴波良 陈峰 孙宝丽 马静云 谢青梅 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2014年第1期27-31,共5页
从广东省某商品代肉鸡场12日龄生长迟缓的小鸡体内分离到1株鸡传染性贫血病毒(CAV),暂定名为GI)_1—12株。分离病毒用MDCC—MSB1细胞进行培养,通过肌肉注射方式感染1日龄SPF鸡,于感染后第7天、第14天、第21天分别检测CAV对SPF鸡... 从广东省某商品代肉鸡场12日龄生长迟缓的小鸡体内分离到1株鸡传染性贫血病毒(CAV),暂定名为GI)_1—12株。分离病毒用MDCC—MSB1细胞进行培养,通过肌肉注射方式感染1日龄SPF鸡,于感染后第7天、第14天、第21天分别检测CAV对SPF鸡体质量、胸腺、脾脏、肝脏、法氏囊及胸腺和外周血液中CD3+T淋巴细胞指标的影响,同时观察鸡的临床症状。结果表明,GD-1—12分离株导致SPF鸡30%的死亡率。感染后第14天,胸腺极度萎缩,肝脏肿大,法氏囊萎缩,脾脏萎缩。感染后第7~14天之间,胸腺和外周血中CD3+T淋巴细胞呈下降趋势。结果表明1日龄SPF雏鸡在人工感染CAV后第7~14天是损伤上述器官的关键时期。 展开更多
关键词 传染性贫血病毒 SPF 致病性
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鸡传染性贫血病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立 被引量:5
19
作者 杨丽聪 苏霞 +4 位作者 朱瑞豪 周宏专 徐福州 杨兵 孙继国 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第4期859-864,共6页
为建立鸡传染性贫血病毒(chicken infectious anemia virus,CIAV)的实时荧光定量PCR检测方法,本试验通过CIAV基因组保守区域设计1对扩增片段大小为180bp的特异性引物,构建pGM-T-CIAV重组质粒,制备阳性标准品,建立SYBR GreenⅠ实时荧光定... 为建立鸡传染性贫血病毒(chicken infectious anemia virus,CIAV)的实时荧光定量PCR检测方法,本试验通过CIAV基因组保守区域设计1对扩增片段大小为180bp的特异性引物,构建pGM-T-CIAV重组质粒,制备阳性标准品,建立SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR标准曲线,并进行敏感性试验、特异性试验和重复性试验。结果显示,CIAV的Ct阈值与标准品浓度在5.33×108至5.33×103拷贝/μL间呈良好的线性关系,相关系数R2=0.998,斜率为-3.443,产物Tm值在86℃左右。该方法与网状内皮组织增生病病毒(REV)、禽白血病病毒(ALV)J亚型、马立克氏病病毒(MDV)、传染性法氏囊病病毒(IBDV)基因组均无交叉反应,敏感性为5.33拷贝/μL,比普通PCR高1 000倍,批内和批间重复试验变异系数均小于3%。结果表明,本试验建立的CIAV SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法可实现对鸡传染性贫血病的早期诊断及感染程度的定量分析的检测。 展开更多
关键词 传染性贫血病毒 实时荧光定量 PCR SYBR Green I 定量分析
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鸡传染性贫血病毒VP2蛋白单克隆抗体的研制及其识别抗原表位的鉴定 被引量:1
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作者 汪铭锐 吴俊花 +4 位作者 王飞 邵红霞 钱琨 叶建强 秦爱建 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期597-606,共10页
拟制备针对鸡传染性贫血病毒(CIAV)VP2蛋白的单克隆抗体(mAb),为CIAV的诊断和病毒生物学特性研究提供有用制剂。以PCR技术扩增CIAV VP2基因并克隆到原核表达载体pET-32a中,经IPTG诱导表达。以原核表达的融合蛋白免疫BALB/c小鼠,利用杂... 拟制备针对鸡传染性贫血病毒(CIAV)VP2蛋白的单克隆抗体(mAb),为CIAV的诊断和病毒生物学特性研究提供有用制剂。以PCR技术扩增CIAV VP2基因并克隆到原核表达载体pET-32a中,经IPTG诱导表达。以原核表达的融合蛋白免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术研制并筛选分泌抗CIAV VP2蛋白mAb的阳性杂交瘤细胞;采用截短表达CIAV VP2基因方法鉴定mAb识别的抗原表位。结果显示:成功获得了1株能稳定分泌抗CIAV VP2蛋白mAb的杂交瘤细胞株,并命名为CIAV-VP2-4A12;亚类鉴定结果表明,该mAb重链为IgG_(1)型,轻链为kappa链;Western blot结果显示,该mAb可以识别大肠杆菌,Sf9细胞和转染pCAGGS-VP2-Flag的DF1细胞中表达的VP2蛋白。使用原核表达截短蛋白进行表位鉴定,发现该mAb识别抗原表位序列是^(155)KTVRW^(159),序列比对发现该表位在CIAV中高度保守。本研究成功制备了针对CIAV VP2蛋白的特异性mAb,并精确鉴定了其识别表位,为VP2蛋白功能的研究以及CIAV的诊断方法研发提供了有效工具。 展开更多
关键词 传染性贫血病毒 VP2蛋白 单克隆抗体 抗原表位
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