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人唾液蛋白的高效疏水色谱分离纯化被引量：3: 1; 作者景娟侯铁舟 +3 位作者赵东方王强阮梅生侯建霞《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期82-84,共3页; 目的　探讨高效疏水色谱分离、纯化人全唾液蛋白、腮腺液蛋白及颌 /舌下腺液蛋白的最佳分离条件和临床意义。方法　将收集的唾液样品经低温离心 ,过滤 ,冻干 ,低温保存备用。以不同浓度的 (NH4 ) 2 SO4 、KH2 PO4 溶液分别为A、B流动相 ... 展开更多; 关键词高效疏水色谱(hphic) 全唾液腮腺液颌/舌下腺液分离纯化唾液蛋白; 在线阅读下载PDF 职称材料

胍变及脲变α-淀粉酶的研究 Ⅰ.用高效疏水色谱法研究变性机理和复性效率被引量：7: 2; 作者白泉卫引茂耿信笃《色谱》 CAS CSCD 北大核心 1997年第4期284-287,共4页; 用疏水性强弱不同的两种色谱柱对７．０ｍｏｌ／Ｌ盐酸胍及８．０ｍｏｌ／Ｌ脲变性的α－淀粉酶变体和在疏水色谱介质表面上折叠的中间体进行了分离和复性。通过研究和比较发现，两者的变性机理和形成折叠中间体的个数以及复性效率均不... 展开更多; 关键词高效疏水色谱蛋白折叠 Α-淀粉酶胍变脲变; 在线阅读下载PDF 职称材料

新型高效疏水相互作用色谱填料的合成及性能的研究被引量：7: 3; 作者常建华耿信笃殷剑宁《色谱》 CAS CSCD 北大核心 1991年第4期263-267,共5页; 本文介绍了在硅胶基质上键合聚乙二醇、聚丙二醇、聚四氢呋喃和改性聚乙二醇等多类疏水色谱填料的合成及其分离蛋白质的色谱特性。其中改性聚乙二醇、聚1,2-丙二醇、聚四氢呋喃型配基的疏水填料为首次合成。文中探讨了硅胶孔径、聚乙二... 展开更多; 关键词疏水色谱填料色谱 hphic HIC; 在线阅读下载PDF 职称材料

活性蚤白质的高效疏水作用色谱法分离和纯化被引量：1: 4; 作者茅力练鸿振《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1990年第1期15-19,共5页; 高效疏水作用色谱是最近几年才发展起来的分离蛋白质的新方法,具有分离效率高、容量大、不损伤蛋白质的活性等特点。本文简要阐述该方法的基本概念,并介绍几种常见高效疏水作用色谱固定相的合成及其最新应用。; 关键词高效疏水色谱蛋白分离纯化; 在线阅读下载PDF 职称材料

人IFN-γ在大肠杆菌中高效表达和色谱复性研究被引量：2: 5; 作者王骊丽耿信笃韩骅《西北大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期540-544,共5页; 从健康人外周血分离单核细胞,经LPS刺激后提取总RNA,用RT-PCR扩增hIFN-γ的cDNA。将扩增产物克隆后进行序列分析证明,克隆的hIFN-γcDNA除存在2个序列多态性位点外,与天然的干扰素氨基酸序列完全一致。利用温控表达系统在大肠杆菌中实现... 展开更多; 关键词人干扰素-γ 反转录聚合酶链反应重组蛋白表达复性与纯化高效疏水色谱; 在线阅读下载PDF 职称材料

重组人干扰素-γ的制备与鉴定被引量：3: 6; 作者吴丹高栋 +1 位作者白泉耿信笃《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期206-211,共6页; 用聚乙二醇200疏水相互作用色谱固定相(PEG200-STHIC)分别在色谱柱和色谱饼上完成了一步复性并同时纯化来源于大肠杆菌(E.coli)表达的重组人干扰素-γ(rhIFN-γ)。为了能使色谱分离方法用于不同来源的rhIFN-γ的纯化,对rhIFN-γ在反相... 展开更多; 关键词重组人干扰素-γ 蛋白折叠液相色谱法高效疏水色谱复性纯化; 在线阅读下载PDF 职称材料

可溶型人干细胞因子cDNA的克隆表达、复性与纯化被引量：2: 7; 作者王骊丽耿信笃韩骅《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期402-405,共4页; 目的 :构建可溶型人干细胞因子 (hSCF)基因的表达载体。优化培养条件 ,实现hSCF基因在大肠杆菌中的高表达。方法 :利用PCR技术 ,以人淋巴结cDNA为模板扩增并克隆hSCF基因。用简并PCR对hSCF基因 5′端的序列进行修饰 ,以实现在大肠杆菌... 展开更多; 关键词 PCR 人干细胞因子大肠杆菌包含体高效疏水色谱色谱饼重组蛋白; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人唾液蛋白的高效疏水色谱分离纯化被引量：3: 1; 作者景娟侯铁舟赵东方王强阮梅生侯建霞; 机构西安交通大学口腔医学院口内研究室北京大学口腔医学院牙周科; 出处《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期82-84,共3页; 基金中华医学基金会; 文摘目的　探讨高效疏水色谱分离、纯化人全唾液蛋白、腮腺液蛋白及颌 /舌下腺液蛋白的最佳分离条件和临床意义。方法　将收集的唾液样品经低温离心 ,过滤 ,冻干 ,低温保存备用。以不同浓度的 (NH4 ) 2 SO4 、KH2 PO4 溶液分别为A、B流动相 ,梯度分离 ,收集各个组分峰 ,通过生化方法对蛋白进行定性。结果　全唾液蛋白被分离为 12个峰组分 ,腮腺液被分离为 6个峰组分 ,颌 /舌下腺液被分为 8个峰组分。经统计学处理 ,平均出峰时间标准差小 ,个体间重复性好。目前能初步定性的唾液蛋白为富含脯氨酸蛋白、半胱氨酸蛋白、富酪蛋白和富组蛋白及α 淀粉酶。结论　疏水色谱可用于人全唾液蛋白、腮腺液蛋白及颌; 关键词高效疏水色谱(hphic) 全唾液腮腺液颌/舌下腺液分离纯化唾液蛋白; Keywords high-performance hydrophobicity chromatography (hphic) whole salivary parotid salivary submandibular/ sublingual salivary separation purification salivary protein; 分类号 R446.1 [医药卫生—诊断学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名胍变及脲变α-淀粉酶的研究 Ⅰ.用高效疏水色谱法研究变性机理和复性效率被引量：7: 2; 作者白泉卫引茂耿信笃; 机构西北大学现代分离科学研究所; 出处《色谱》 CAS CSCD 北大核心 1997年第4期284-287,共4页; 基金国家自然科学基金; 文摘用疏水性强弱不同的两种色谱柱对７．０ｍｏｌ／Ｌ盐酸胍及８．０ｍｏｌ／Ｌ脲变性的α－淀粉酶变体和在疏水色谱介质表面上折叠的中间体进行了分离和复性。通过研究和比较发现，两者的变性机理和形成折叠中间体的个数以及复性效率均不相同。在用疏水性较弱的疏水色谱柱对脲变α－淀粉酶的折叠中间体进行分离时，得到了疏水性接近连续的、数目很多的中间体。用疏水性较强的疏水色谱柱对胍变α－淀粉酶进行复性的效果较好。还研究了柱温变化对其折叠、分离效果和复性效率的影响。; 关键词高效疏水色谱蛋白折叠 Α-淀粉酶胍变脲变; Keywords high performance hydrophobic interaction chromatography, protein refolding, α amylase, denaturation mechanism; 分类号 Q556.02 [生物学—生物化学] O657.72 [理学—分析化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名新型高效疏水相互作用色谱填料的合成及性能的研究被引量：7: 3; 作者常建华耿信笃殷剑宁; 机构西北大学化学系现代分离科学研究室; 出处《色谱》 CAS CSCD 北大核心 1991年第4期263-267,共5页; 文摘本文介绍了在硅胶基质上键合聚乙二醇、聚丙二醇、聚四氢呋喃和改性聚乙二醇等多类疏水色谱填料的合成及其分离蛋白质的色谱特性。其中改性聚乙二醇、聚1,2-丙二醇、聚四氢呋喃型配基的疏水填料为首次合成。文中探讨了硅胶孔径、聚乙二醇链长、改性聚乙二醇配基的端基和不同的聚醚链对蛋白质的保留值、活性回收率、分离度、填料稳定性和键合密度的影响,发现了在聚醚链单元上引入支链改变生物大分子与填料疏水区的接触面积可以改变蛋白质的保留时间和选择性。此外,还介绍了在硅胶上包裹有机胺类化合物再与环氧交联的疏水色谱填料的制备。; 关键词疏水色谱填料色谱 hphic HIC; 分类号 O657.7 [理学—分析化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名活性蚤白质的高效疏水作用色谱法分离和纯化被引量：1: 4; 作者茅力练鸿振; 机构南京医学院预防医学系南京大学现代分析中心; 出处《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1990年第1期15-19,共5页; 文摘高效疏水作用色谱是最近几年才发展起来的分离蛋白质的新方法,具有分离效率高、容量大、不损伤蛋白质的活性等特点。本文简要阐述该方法的基本概念,并介绍几种常见高效疏水作用色谱固定相的合成及其最新应用。; 关键词高效疏水色谱蛋白分离纯化; 分类号 Q510.3 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人IFN-γ在大肠杆菌中高效表达和色谱复性研究被引量：2: 5; 作者王骊丽耿信笃韩骅; 机构西北大学现代分离科学研究所/现代分离科学陕西省重点实验室第四军医大学医学遗传学与发育生物学教研室; 出处《西北大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期540-544,共5页; 基金国家自然科学基金资助项目(No.29675017); 文摘从健康人外周血分离单核细胞,经LPS刺激后提取总RNA,用RT-PCR扩增hIFN-γ的cDNA。将扩增产物克隆后进行序列分析证明,克隆的hIFN-γcDNA除存在2个序列多态性位点外,与天然的干扰素氨基酸序列完全一致。利用温控表达系统在大肠杆菌中实现了hIFN-γ的高效表达,表达的目的蛋白可占菌体总蛋白的55%。用5L和50L发酵罐放量生产的产物,经高效疏水色谱HPHIC直接复性和纯化得到了重组hIFN-γ纯品,其比活性与天然蛋白相近。; 关键词人干扰素-γ 反转录聚合酶链反应重组蛋白表达复性与纯化高效疏水色谱; Keywords hIFN-γ RT-PCR high expression of recombinant protein Hydrophobic interaction chromatography renaturation and purification; 分类号 R318 [医药卫生—生物医学工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名重组人干扰素-γ的制备与鉴定被引量：3: 6; 作者吴丹高栋白泉耿信笃; 机构西北大学现代分离科学研究所现代分离科学陕西省重点实验室; 出处《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期206-211,共6页; 基金国家自然科学基金资助项目(No.20475042) 国家“863”计划项目(No.2006AA02Z227); 文摘用聚乙二醇200疏水相互作用色谱固定相(PEG200-STHIC)分别在色谱柱和色谱饼上完成了一步复性并同时纯化来源于大肠杆菌(E.coli)表达的重组人干扰素-γ(rhIFN-γ)。为了能使色谱分离方法用于不同来源的rhIFN-γ的纯化,对rhIFN-γ在反相色谱、离子交换色谱、固定化镍离子亲和色谱上的保留行为也进行了研究。色谱柱纯化的rhIFN-γ收集液经排阻色谱除盐和冷冻干燥得到rhIFN-γ干粉。用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱对rhIFN-γ干粉进行了测定,rhIFN-γ单体的相对分子质量为17184.0,二聚体的相对分子质量为34204.4。用细胞病变抑制法(CPEI)测定rhIFN-γ干粉的比活性为9.5×108IU/mg。用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)测定rhIFN-γ干粉的纯度高于95%。用色谱柱复性并同时纯化rhIFN-γ的质量回收率达到93.7%,纯度高于95%,比活性为4.3×107IU/mg。结果表明,采用PEG200-STHIC色谱柱复性并同时纯化rhIFN-γ是一种十分高效的方法。; 关键词重组人干扰素-γ 蛋白折叠液相色谱法高效疏水色谱复性纯化; Keywords recombinant human interferon-γ（rhIFN-γ） protein folding liquid chromatography（PFLC） high performance hydrophobic interaction chromatography（hphic） renaturation purification; 分类号 O658 [理学—分析化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名可溶型人干细胞因子cDNA的克隆表达、复性与纯化被引量：2: 7; 作者王骊丽耿信笃韩骅; 机构西北大学现代分离科学研究所第四军医大学医学遗传学与发育生物学教研室; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期402-405,共4页; 基金国家自然科学基金资助项目 (No .2 96750 1 7) 陕西省自然科学基金资助项目 (No .2 0 0 3C1 1 1); 文摘目的 :构建可溶型人干细胞因子 (hSCF)基因的表达载体。优化培养条件 ,实现hSCF基因在大肠杆菌中的高表达。方法 :利用PCR技术 ,以人淋巴结cDNA为模板扩增并克隆hSCF基因。用简并PCR对hSCF基因 5′端的序列进行修饰 ,以实现在大肠杆菌中的高效表达 ;用MTT比色法测定初步复性和纯化的hSCF蛋白的生物学活性。结果 :扩增并克隆了hSCF成熟肽cDNA。将其插入表达载体pBV2 2 0构建了hSCF基因的表达质粒 ,并在大肠菌中初步表达。表达量占总菌体的 2 0 %以上 ,优化培养条件后表达量可达到 4 0 %以上 ,表达产物为包涵体。将包涵体溶解在 8mol/L脲或 7mol/L盐酸胍中 ,用疏水色谱法进行复性并同时纯化 ,得到具有天然生物学活性的rhSCF蛋白。结论 :成功地克隆hSCF基因 ,并实现在原核系统中的高表达 ,所获表达菌株可用于生产以获得具有生物学活性的rhSCF蛋白产品。; 关键词 PCR 人干细胞因子大肠杆菌包含体高效疏水色谱色谱饼重组蛋白; Keywords PCR human stem cell factor (hSCF) E.coli inclusion body high performance hydrophobic interaction chromatography (hphic) chromatography pie protein refolding; 分类号 Q785 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	人唾液蛋白的高效疏水色谱分离纯化	景娟侯铁舟赵东方王强阮梅生侯建霞	《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2003	3	在线阅读下载PDF 职称材料
2	胍变及脲变α-淀粉酶的研究 Ⅰ.用高效疏水色谱法研究变性机理和复性效率	白泉卫引茂耿信笃	《色谱》 CAS CSCD 北大核心	1997	7	在线阅读下载PDF 职称材料
3	新型高效疏水相互作用色谱填料的合成及性能的研究	常建华耿信笃殷剑宁	《色谱》 CAS CSCD 北大核心	1991	7	在线阅读下载PDF 职称材料
4	活性蚤白质的高效疏水作用色谱法分离和纯化	茅力练鸿振	《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心	1990	1	在线阅读下载PDF 职称材料
5	人IFN-γ在大肠杆菌中高效表达和色谱复性研究	王骊丽耿信笃韩骅	《西北大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2003	2	在线阅读下载PDF 职称材料
6	重组人干扰素-γ的制备与鉴定	吴丹高栋白泉耿信笃	《色谱》 CAS CSCD 北大核心	2008	3	在线阅读下载PDF 职称材料
7	可溶型人干细胞因子cDNA的克隆表达、复性与纯化	王骊丽耿信笃韩骅	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2004	2	在线阅读下载PDF 职称材料