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骨膜水凝胶负载脂肪间充质干细胞来源外泌体治疗骨关节炎
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作者 章竞 常恬 +3 位作者 刘欣 张诗晗 刘阳 霍强 《海南医科大学学报》 北大核心 2025年第13期993-999,共7页
目的:制备了一种骨膜细胞外基质(periosteum extracellular matrix, PECM)水凝胶负载脂肪间充质干细胞来源的外泌体(exosomes of adipose mesenchymal stem cells, AdMSC-Exo),评价其对内侧半月板失稳术(destabilization of medial meni... 目的:制备了一种骨膜细胞外基质(periosteum extracellular matrix, PECM)水凝胶负载脂肪间充质干细胞来源的外泌体(exosomes of adipose mesenchymal stem cells, AdMSC-Exo),评价其对内侧半月板失稳术(destabilization of medial meniscus, DMM)构建的骨关节炎大鼠模型的治疗效果。方法:采用超速离心法提取AdMSC-Exo并进行表征。PECM通过脱细胞和酶降解工艺制备。以制得的水凝胶负载外泌体得到PECM@AdMSC-Exo。SD雄鼠随机分为假手术(Sham)组、DMM+Saline组、DMM+PECM组、DMM+AdMSC-Exo组、DMM+PECM@AdMSC-Exo组。通过关节腔注射药物进行体内药效实验,观察其对骨关节炎的治疗作用。结果:表征实验结果表明,成功制备了AdMSC-Exo、PECM和PECM@AdMSC-Exo。体外实验表明,AdMSC-Exo对损伤的软骨细胞具有修复作用。体内药效实验结果表明,与对照组相比,PECM@AdMSC-Exo可以有效修复软骨,对大鼠骨关节炎具有较好的治疗作用,且对大鼠的体重无明显影响。结论:本研究成功制备了PECM@AdMSC-Exo,对大鼠软骨损伤具有较好的修复效果,为骨关节炎的治疗提供了一种新策略。 展开更多
关键词 骨膜细胞外基质水凝胶 间充细胞泌体 软骨修复 骨关节炎
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负载抗炎肽的锆-金属有机框架封装于水凝胶促进软骨细胞外基质生成 被引量:1
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作者 秦晓平 李涛 +1 位作者 陈诚 杨柳 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期673-683,共11页
目的制备一种可用于修复伴有骨关节炎的软骨缺损的兼具软骨再生和炎性微环境调控的水凝胶支架。方法通过溶剂热法制备锆金属有机框架(Zr MOF),并负载抗炎肽KAFAK,用紫外光交联法制备普鲁兰多糖/聚乙二醇复合水凝胶,将Zr MOF封装于水凝... 目的制备一种可用于修复伴有骨关节炎的软骨缺损的兼具软骨再生和炎性微环境调控的水凝胶支架。方法通过溶剂热法制备锆金属有机框架(Zr MOF),并负载抗炎肽KAFAK,用紫外光交联法制备普鲁兰多糖/聚乙二醇复合水凝胶,将Zr MOF封装于水凝胶内部,通过扫描电镜、溶胀平衡、降解实验和流变力学表征水凝胶的理化性能。以兔骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)作为种子细胞,用活/死细胞染色验证水凝胶的生物活性,测定软骨细胞外基质糖胺聚糖的含量和成软骨标志基因COL2A1和ACAN及肥大化基因COL10A1的表达。结果成功将抗炎肽KAFAK负载到Zr MOF,水合粒径为352.5 nm,粒径分布(PDI)为0.29,Zeta电位为(18.27±0.55)mV。普鲁兰多糖/聚乙二醇复合水凝胶封装Zr MOF后,随着Zr MOF含量的增加,扫描电镜观察到孔壁上的小孔越多;溶胀时间缩短,降解速度增加,流变性能改善。抗炎肽KAFAK负载到Zr MOF后再用水凝胶封装,到第21天,有(84.1±5.0)%的释放,显示出对抗炎肽KAFAK较好的缓释作用。活细胞在Gel、Gel-100 Zr MOF和Gel-100 Zr MOF@KAFAK组的存活比率分别为(90.7±5.4)%、(93.5±4.3)%和(91.9±3.1)%,均显示出良好的生物相容性。以兔BMSCs为种子细胞,在成软骨诱导培养7 d和14 d后,Gel-100 Zr MOF@KAFAK组相较于Gel和Gel-100 Zr MOF组糖胺聚糖含量有显著提高(P<0.05),成软骨标志基因COL2A1、ACAN表达显著升高(P<0.05),而肥大化基因COL10A1表达显著降低(P<0.05)。结论成功将负载抗炎肽的Zr MOF封装于水凝胶内部,通过对抗炎肽KAFAK的持续释放控制炎性微环境,产生更多的软骨细胞外基质,有利于维持成软骨表型。 展开更多
关键词 水凝 细胞 炎性微环境 抗炎肽KAFAK 金属有机框架
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兔角膜基质细胞在壳聚糖胶原共混膜体外培养研究 被引量:9
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作者 丁勇 徐锦堂 +2 位作者 陈建苏 吴春云 陈瑞 《眼科新进展》 CAS 2004年第2期88-90,共3页
目的 探讨壳聚糖 胶原共混膜作为载体体外培养兔角膜基质细胞的可行性。方法 先同时消化角膜上皮及内皮层 ,然后刮去上皮、内皮、前弹力层和后弹力层 ,将剩余的基质层剪碎消化 ,接种在壳聚糖 胶原共混膜上 ,通过间接免疫荧光细胞化学... 目的 探讨壳聚糖 胶原共混膜作为载体体外培养兔角膜基质细胞的可行性。方法 先同时消化角膜上皮及内皮层 ,然后刮去上皮、内皮、前弹力层和后弹力层 ,将剩余的基质层剪碎消化 ,接种在壳聚糖 胶原共混膜上 ,通过间接免疫荧光细胞化学染色对培养的细胞进行鉴别。结果 角膜基质细胞应用消化培养法 4h后部分基质细胞与壳聚糖 胶原共混膜有贴壁现象出现 ,细胞呈梭形。培养 2 4h后 ,基质细胞呈纺锤形且透明 ,此后细胞分裂增殖越来越多并向周围延伸 ,培养第 6天细胞已经达到完全融合状态 ,呈梭形 ,排列比较整齐。在 6d左右达到 10 0 %融合状态 ,间接免疫荧光细胞化学染色、Vim染色、胞浆染色阳性。结论 传代的细胞具有角膜基质细胞的生物特性 ,壳聚糖 展开更多
关键词 壳聚糖-原共混膜 兔角膜细胞 培养 载体
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水凝胶与陶瓷化骨及β-磷酸三钙复合对骨髓基质细胞成骨能力的影响 被引量:4
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作者 何大为 金岩 +3 位作者 李石保 王容 郑昌琼 宋志国 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期514-517,共4页
目的 :观察水凝胶 (hydrogel ,HG)分别与陶瓷化骨 (ceramicbovinebone ,CBB)、β 磷酸三钙 (β tricalciumphosphate ,β TCP)复合成的复合材料对骨髓基质细胞 (MSCs)的生长、分化的影响 ,寻找更适合骨组织工程的复合物支架材料。方法 ... 目的 :观察水凝胶 (hydrogel ,HG)分别与陶瓷化骨 (ceramicbovinebone ,CBB)、β 磷酸三钙 (β tricalciumphosphate ,β TCP)复合成的复合材料对骨髓基质细胞 (MSCs)的生长、分化的影响 ,寻找更适合骨组织工程的复合物支架材料。方法 :将诱导的骨髓基质细胞接种于CBB HG、β TCP HG上 ,另外MSCs分别接种于单纯的CBB、β TCP上作为对照 ,进行体外培养。 5、10d取材 ,细胞计数观察贴附及增殖情况 ,扫描电镜观察细胞形态以及与材料的贴附情况 ,检测碱性磷酸酶的活性以及免疫组织化学方法检测Ⅰ型胶原的分泌情况。结果 :骨髓基质细胞与各组材料均能形成良好贴附 ,两种复合材料上贴附的细胞数量明显高于对照组 ,CBB HG、β TCP HG两组间细胞的碱性磷酸酶的活性以及Ⅰ型胶原的分泌量无明显差别 ,但显著高于对照组。结论 :CBB HG、β TCP HG均能促进骨髓基质细胞分化及基质分泌 。 展开更多
关键词 水凝 陶瓷化骨 Β-磷酸三钙 骨组织工程 骨髓细胞 复合物支架材料
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双动态共价键交联的光聚合水凝胶研究喉鳞癌细胞在不同黏弹性基底的增殖机制
5
作者 赵千烨 王江 +5 位作者 杜会影 沈晓雪 肖世伟 王颖 张庆涛 温树信 《医用生物力学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第S01期552-552,共1页
目的头颈部鳞状细胞癌是全球第六大最常见的上皮性恶性肿瘤,在喉癌发展过程阶段中癌症组织的力学环境会发生变化,这种变化体现在细胞外基质的储存模量和松弛模量的明显改变上。具有不同黏弹性的水凝胶可以很好模拟癌症组织的力学环境,... 目的头颈部鳞状细胞癌是全球第六大最常见的上皮性恶性肿瘤,在喉癌发展过程阶段中癌症组织的力学环境会发生变化,这种变化体现在细胞外基质的储存模量和松弛模量的明显改变上。具有不同黏弹性的水凝胶可以很好模拟癌症组织的力学环境,是研究肿瘤细胞的研究肿瘤细胞增殖机制的极佳基底材料。方法在明胶上接枝了硼苯酸与甲基丙烯酸酐,对结冷胶进行了不同程度的氧化,通过光交联方式制备了一种新型的双动态共价交联水凝胶。通过调节改性明胶与氧化结冷胶的组分,来控制水凝胶中动态亚胺键和动态硼酸键数量以产生不同黏弹性的水凝胶。使用核磁共振氢谱,红外光谱,SEM表征了水凝胶结构,测定了水凝胶的流变学特征,和应力松弛等机械特性。之后通过2D与3D的培养方式观察喉鳞癌细胞的表型差异,使用转录组测序与q PCR探究增殖机制。结果在不同的组分的水凝胶里,改性明胶的含量越高其储存模量越高,氧化结冷胶含量越高其损耗模量越高。在储存模量一定的前提下,损耗模量较高会显著促进喉鳞癌细胞增殖,Tgfβ表达量显著提升。结论双动态共价键水凝胶能够精确调节自身黏弹性,同时具有损耗模量的力学环境能够加快喉鳞癌细胞增殖。 展开更多
关键词 储存模量 细胞 水凝 光聚合 黏弹性 共价交联 底材料 松弛模量
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脂肪干细胞基质胶在糖尿病创面治疗中的研究进展
6
作者 任永恒(综述) 苗春雷 +1 位作者 白南 陈远征(审校) 《医学研究与战创伤救治》 CAS 北大核心 2024年第1期98-103,共6页
随着糖尿病发病率的增加,由慢性持续性高血糖所引起的难愈性创面长期困扰着糖尿病患者。脂肪细胞外基质/基质血管组分凝胶(SVF-gel)中因含有高度浓缩的细胞外基质和基质血管组分(SVF),在为细胞及细胞因子功能的发挥提供最适微环境的同时... 随着糖尿病发病率的增加,由慢性持续性高血糖所引起的难愈性创面长期困扰着糖尿病患者。脂肪细胞外基质/基质血管组分凝胶(SVF-gel)中因含有高度浓缩的细胞外基质和基质血管组分(SVF),在为细胞及细胞因子功能的发挥提供最适微环境的同时,具有促进创面血管新生、抑制炎症反应和刺激上皮细胞增殖分化等功能,最终达到修复难愈性创面的目的。文章主要就SVF胶的制备、成分以及在糖尿病创面治疗中的机制和应用进行综述。 展开更多
关键词 SVF 细胞 脂肪干细胞 糖尿病创面
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p38MAPK参与高糖刺激大鼠肾小管上皮细胞产生细胞外基质胶原Ⅲ 被引量:1
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作者 荆小莉 王东平 +2 位作者 廖晓星 李锦华 李欣 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期1311-1314,共4页
目的:探讨p38MAPK信号通路在高糖刺激大鼠肾小管上皮细胞产生细胞外基质胶原Ⅲ中的作用。方法:采用体外培养和Westernblotting等方法,以不同浓度D-葡萄糖、p38MAPK信号通路特异性阻断剂SB203580以及用不同时间刺激正常大鼠肾小管上皮细... 目的:探讨p38MAPK信号通路在高糖刺激大鼠肾小管上皮细胞产生细胞外基质胶原Ⅲ中的作用。方法:采用体外培养和Westernblotting等方法,以不同浓度D-葡萄糖、p38MAPK信号通路特异性阻断剂SB203580以及用不同时间刺激正常大鼠肾小管上皮细胞NRK52E,分别检NRK52E细胞p38MAPK磷酸化水平和细胞外基质胶原Ⅲ的表达。结果:随D-葡萄糖浓度增加,p38MAPK磷酸化水平、胶原Ⅲ的产生也增加,SB203580可有效阻断高糖引起p38MAPK磷酸化水平的升高和细胞外基质胶原Ⅲ的表达的增高。结论:高糖引起p38MAPK磷酸化水平的升高可能在糖尿病肾病的肾间质纤维化中发挥重要作用。SB203580有潜在的糖尿病肾病防治的临床应用价值。 展开更多
关键词 葡萄糖溶液 高渗 糖尿病 肾间纤维化 P38MAP激酶 细胞原Ⅲ
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自制细胞外基质胶泪道羊膜生物学特性及修复泪道损伤的实验研究 被引量:1
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作者 杨继玲 邵毅 +2 位作者 张颖 徐国芬 裴重刚 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2016年第4期306-310,共5页
目的研究自制细胞外基质胶泪道羊膜的生物活性因子表达含量、生物力学特征以及在修复兔泪道损伤中的应用效果。方法使用放射免疫分析方法对自制细胞外基质胶泪道羊膜中表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)、成纤维细胞生长因子(f... 目的研究自制细胞外基质胶泪道羊膜的生物活性因子表达含量、生物力学特征以及在修复兔泪道损伤中的应用效果。方法使用放射免疫分析方法对自制细胞外基质胶泪道羊膜中表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)、成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor,FGF)、肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)等10种生物活性因子的表达含量进行测定,并与新鲜泪道羊膜、干燥泪道羊膜进行对比。利用负荷传感器对比自制细胞外基质胶羊膜与新鲜泪道羊膜、干燥泪道羊膜的抗拉强度、断裂伸长率和弹性模力,且把保存12个月的自制细胞外基质胶泪道羊膜应用于修复兔泪道损伤模型,并于术后4周观察兔泪道黏膜修复及K16表达情况。结果自制细胞外基质胶泪道羊膜、干燥泪道羊膜中10种细胞因子含量均比新鲜泪道羊膜低(均为P<0.05),而ECM泪道羊膜中10种细胞因子含量均明显高于干燥泪道羊膜(均为P<0.05)。自制细胞外基质胶泪道羊膜的抗拉强度和断裂伸长率与新鲜泪道羊膜、干燥泪道羊膜相比明显增加(均为P<0.05),而自制细胞外基质胶泪道羊膜的弹性模量明显小于新鲜泪道羊膜及干燥泪道羊膜(均为P<0.05)。术后4周发现ECM-LDAM组泪道管口通畅,无明显的排斥反应和炎症反应,其下睑泪道黏膜K16表达阴性,而对照组泪道黏膜K16表达阳性。结论自制细胞外基质胶泪道羊膜含有丰富的生物活性因子和优越的生物力学特性,是一种更加安全有效的泪道修复及重建材料。 展开更多
关键词 细胞泪道羊膜 生物活性因子 生物力学特性 K16
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胶原的分子类型、结构分级及与细胞外基质成分的关系 被引量:7
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作者 卢戈 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1991年第4期275-280,共6页
本文介绍了目前已发现的十一种胶原分子类型的多肽链组成、主要氨基酸数、组织分布及主要特征;胶原各种结构在光、电镜及肉眼下的分级;细胞外基质:非胶原性糖蛋白(纤维连接素、板连素、内胚素、连接素、β-半乳糖苷凝集素、骨连素、软... 本文介绍了目前已发现的十一种胶原分子类型的多肽链组成、主要氨基酸数、组织分布及主要特征;胶原各种结构在光、电镜及肉眼下的分级;细胞外基质:非胶原性糖蛋白(纤维连接素、板连素、内胚素、连接素、β-半乳糖苷凝集素、骨连素、软骨连素、玻璃体连素)、糖胺聚糖(透明质酸)、蛋白聚糖(硫酸乙酰肝素、硫酸软骨素、硫酸皮肤素、硫酸角质素、肝素)的分布、功能、结构特点及与Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ型胶原间的一些关系。 展开更多
关键词 细胞 分子类型 结构
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肝脏基质水凝胶的制备及其细胞相容性研究 被引量:3
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作者 梁成宵 古瑞 +6 位作者 李婷 杨冠 吴东叶 屈琳林 李凤君 田伏洲 孙红玉 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期409-413,共5页
目的制备肝脏基质水凝胶并评价其体外细胞毒性,以期为后续该水凝胶的应用提供实验依据。方法采用Triton X-100和SDS法制备大鼠肝脏脱细胞基质,对其进行HE染色和DNA含量测定;将肝脏脱细胞基质溶解制备成肝脏基质水凝胶,对其进行大体形态... 目的制备肝脏基质水凝胶并评价其体外细胞毒性,以期为后续该水凝胶的应用提供实验依据。方法采用Triton X-100和SDS法制备大鼠肝脏脱细胞基质,对其进行HE染色和DNA含量测定;将肝脏脱细胞基质溶解制备成肝脏基质水凝胶,对其进行大体形态观察和扫描电镜检测;在水凝胶表面培养肝细胞BRL-3A,采用Live/Dead染色、Alamar Blue法和细胞骨架染色,研究其细胞毒性、增殖情况及黏附行为。结果组织学和DNA含量检测显示获得了理想的肝脏脱细胞基质材料,该材料经溶解后可制备成温敏性水凝胶,扫描电镜观察可见其呈网状多孔结构。细胞毒性实验显示该水凝胶材料有利于肝细胞的存活,并能促进肝细胞的黏附和增殖。结论成功制备了生物相容性良好的肝脏基质水凝胶,有望作为可注射性水凝胶材料应用于终末期肝病的临床治疗。 展开更多
关键词 肝脱细胞 水凝 细胞 细胞行为
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细胞外基质胶羊膜棒的生物学特性及其在雌兔干眼中的应用 被引量:2
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作者 黎乐平 康红花 +8 位作者 马明洋 叶蕾 李清海 兰东怡 刘佳祥 徐千惠 杨雁嫦 袁晴 邵毅 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2018年第8期709-714,共6页
目的研究细胞外基质胶羊膜棒的生物学特性及其在兔干眼的应用效果。方法使用放射免疫分析方法对细胞外基质胶羊膜棒中的表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)、成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor,FGF)、肝细胞生长因子... 目的研究细胞外基质胶羊膜棒的生物学特性及其在兔干眼的应用效果。方法使用放射免疫分析方法对细胞外基质胶羊膜棒中的表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)、成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor,FGF)、肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)、转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)等10种生物活性因子的表达含量加以测定,同时和新鲜泪道纤维蛋白胶羊膜(fresh lacrimal duct amniotic membrane,F-LDAM)、单层泪道纤维蛋白胶羊膜(monolayer lacrimal duct amniotic membrane,M-LDAM)进行对比。此外,利用负荷传感器对比细胞外基质胶泪道纤维蛋白胶羊膜(extracellular matrix lacrimal duct amniotic membrane,ECM-LDAM)与F-LDAM、M-LDAM的弹性模量、抗拉强度、断裂伸长率,并把ECMLDAM应用于兔干眼症的治疗,术后8周观察实验兔干眼治疗前后荧光染色(fluorescein stain,FL)评分、各时段泪液分泌、FL情况和角膜共焦显微镜下角膜上皮下神经纤维密度、神经纤维分支及曲率评分。结果 ECM-LDAM、M-LDAM中EGF、NGF、HGF、TGF-β等10种因子含量均比F-LDAM低,差异均有统计学意义(均为P<0.05),而ECM-LDAM中EGF、NGF、HGF、TGF-β等10种因子含量明显高于M-LDAM,差异有统计学意义(P<0.05)。ECM-LDAM的弹性模量明显低于F-LDAM及M-LDAM,差异有统计学意义(P<0.05);而ECM-LDAM的抗拉强度和断裂伸长率明显高于与M-LDAM和F-LDAM,差异有统计学意义(P<0.05)。术后8周发现B组与A组相比FL评分降低,泪液分泌时间延长,角膜共焦显微镜下观察发现神经纤维密度、神经纤维分支及曲率评分显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ECM-LDAM作为一种新型安全的泪道修复材料,其丰富的生物活性因子和优越的柔韧性,可以更有效地改善兔干眼,营养修复受损的角膜神经。 展开更多
关键词 细胞羊膜 生物力学特性 生物活性因子 角膜神经
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自制染色干燥细胞外基质胶羊膜生物学特性及修补结膜缺损的实验研究 被引量:1
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作者 江威 邹晶 +4 位作者 邵毅 高桂平 李云燕 邓军萍 杨璐 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2015年第8期704-707,共4页
目的研究自制染色干燥细胞外基质胶羊膜(extracellular matrix amniotic membrane,ECM-AM)的生物活性因子表达情况、生物力学特征以及在兔结膜修补术中的应用效果。方法使用光镜和HE染色对自制染色干燥ECM-AM进行形态学观察,并通过免疫... 目的研究自制染色干燥细胞外基质胶羊膜(extracellular matrix amniotic membrane,ECM-AM)的生物活性因子表达情况、生物力学特征以及在兔结膜修补术中的应用效果。方法使用光镜和HE染色对自制染色干燥ECM-AM进行形态学观察,并通过免疫荧光染色对比其与单纯冻干羊膜中不同生物活性因子Laminin 5、β-catenin和CollagenⅣ的表达情况。利用负荷传感器对比自制染色干燥ECM-AM与单纯冻干羊膜的最大承受拉伸力、弹性模量和拉伸长度,且把保存12个月的自制染色干燥ECM-AM应用于兔羊膜-结膜修补术,并在术后2周观察兔结膜愈合情况。结果自制染色干燥ECMAM可以分辨羊膜的折叠处、皱褶及边缘,HE染色表明自制染色干燥ECMAM基底膜的完整度和厚度均优于保存相应天数(12个月)的冻干羊膜。保存12个月的自制染色干燥ECM-AM中Laminin 5、β-catenin和CollagenⅣ均比单纯冻干羊膜要高。自制染色干燥ECM-AM的最大承受拉伸力以及弹性模量均明显高于于单纯冻干羊膜(均为P<0.05),但二者平均拉伸长度上差异无统计学意义(P>0.05)。自制染色干燥ECM-AM常温保存12个月后应用于兔羊膜-结膜修补术,术后2周羊膜上有兔结膜上皮长入且K19分布于整个结膜上皮细胞,并无明显的排斥反应和炎症反应。结论自制染色干燥ECM-AM含有丰富的生物活性因子,具有优越的生物力学特性,为眼表重建提供了更加安全有效的材料。 展开更多
关键词 细胞羊膜 单纯冻干羊膜 生物活性因子 结膜修补术
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温敏型水凝胶加载基质细胞衍生因子-1的骨髓内控释促进造血
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作者 姚佳佳 娄世锋 +1 位作者 张萍 晏丽 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期742-745,共4页
目的:观察温敏型水凝胶加载基质细胞衍生因子-1(stromal cell-derived factor-1,SDF-1)的体内外释放性能及对造血组织的影响。方法:(1)体外释放:用壳聚糖/明胶/甘油磷酸钠(chitosan-gelatin-glycerol phosphate,CS/G/GP)加载经... 目的:观察温敏型水凝胶加载基质细胞衍生因子-1(stromal cell-derived factor-1,SDF-1)的体内外释放性能及对造血组织的影响。方法:(1)体外释放:用壳聚糖/明胶/甘油磷酸钠(chitosan-gelatin-glycerol phosphate,CS/G/GP)加载经125I标记的SDF-1并通过γ探测仪测量其体外释放率。(2)体内释放:注射该缓释系统到18只SD大鼠股骨干中,在第1~6天(每天3只)收集注射侧股骨头、股骨干、周围肌肉组织及对侧股骨头,测量其释放量。(3)骨髓造血:将10只SD大鼠随机分为2组,实验组注射0.1 ml CS/G/GP加载SDF-1入5只大鼠股骨干,对照组注射0.1 ml CS/G/GP入5只SD大鼠股骨干中。在第7天处死10只大鼠收集注射侧股骨头行活检,观察造血活跃程度。结果:根据γ探测仪测量值获得该缓释系统加载SDF-1的体外及骨髓内释放曲线。实验组骨髓造血活跃程度明显高于对照组,两组间造血面积差异有统计学意义(P〈0.05)。结论:加载SDF-1的可注射温敏型水凝胶第2~5天在股骨头局部维持稳定浓度且活跃骨髓造血组织。 展开更多
关键词 造血干细胞移植 细胞衍生因子-1 温敏型水凝 药物控释
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针刺对颈椎间盘退变大鼠椎间盘VEGF、PLA2和PGE2和细胞外基质胶原、代谢酶表达的影响 被引量:9
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作者 孙卫强 张光志 《海南医学院学报》 CAS 2019年第17期1308-1313,共6页
目的:探究针刺对颈椎间盘退变大鼠椎间盘血管内皮生长因子(VEGF)、脂蛋白相关磷脂酶A2 (Lp-PLA2)、前列腺素E2(PGE2)和细胞外基质胶原、代谢酶表达的影响。方法:将大鼠随机分配到以下3组(每组25只):假手术组(切开颈部皮,然后缝合)、模型... 目的:探究针刺对颈椎间盘退变大鼠椎间盘血管内皮生长因子(VEGF)、脂蛋白相关磷脂酶A2 (Lp-PLA2)、前列腺素E2(PGE2)和细胞外基质胶原、代谢酶表达的影响。方法:将大鼠随机分配到以下3组(每组25只):假手术组(切开颈部皮,然后缝合)、模型组(采用建模方法处理)和针刺治疗组(每天持续30 min,完整疗程包括14 d,两个疗程间隔2 d);通过qRT-PCR分析VEGF、PLA2和PGE2的mRNA表达水平;通过蛋白质印迹法测定VEGF、PLA2和PGE2蛋白的蛋白质水平;通过免疫组织化学染色检测Ⅰ型和Ⅱ型胶原;通过酶联免疫吸附实验检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)和基质金属蛋白酶-3(MMP-3)含量;使用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)测定评估针刺治疗对颈椎间盘退变大鼠细胞凋亡的影响。结果:模型组较假手术组VEGF、PLA2、PGE2 mRNA、蛋白质表达水平升高,而针刺治疗组能够降低模型组VEGF、PLA2、PGE2 mRNA、蛋白质表达水平(P<0.05);Ⅰ型胶原与椎间盘退变正相关,Ⅱ型胶原与椎间盘退变呈负相关。模型组较假手术组Ⅰ型胶原表达水平升高,Ⅱ型胶原表达水平降低,而针刺治疗组能够恢复模型组Ⅰ型和Ⅱ型胶原水平(P<0.05);与假手术组相比,模型组TNF-α、IL-1β、MMP-1、MMP-3表达水平升高,而针刺治疗组能够降低模型组TNF-α、IL-1β、MMP-1和MMP-3表达水平(P<0.05);模型组核膜被破坏,细胞核变得更致密,针刺治疗组中的细胞显示相对完整的核膜。与假手术组相比,模型组中TUNEL阳性细胞的数量增加。与模型组相比,针刺治疗组中TUNEL阳性细胞的数量减少(P<0.05)。结论:针刺能够降低颈椎间盘退变大鼠椎间盘VEGF、PLA2和PGE2和细胞外基质Ⅰ型胶原和代谢酶表达,增加Ⅱ型胶原表达。 展开更多
关键词 针刺 颈椎间盘退变 细胞 金属蛋白酶
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脱细胞基质水凝胶促组织再生的研究进展 被引量:4
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作者 蒋永生 李锐 +1 位作者 韩春婵 黄立江 《中国生物医学工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期628-635,共8页
脱细胞基质水凝胶是组织或器官通过物理、化学和酶解等手段去除其细胞的内容物,只保留细胞骨架结构和细胞外基质等成分,以实现促细胞黏附、增殖和分化并为其生长创造良好微环境的天然高分子生物材料。近年来,由于其良好的细胞相容性、... 脱细胞基质水凝胶是组织或器官通过物理、化学和酶解等手段去除其细胞的内容物,只保留细胞骨架结构和细胞外基质等成分,以实现促细胞黏附、增殖和分化并为其生长创造良好微环境的天然高分子生物材料。近年来,由于其良好的细胞相容性、生物可降解性和诱导组织再生能力,脱细胞基质水凝胶在组织修复、再生医学领域备受关注。首先,介绍该水凝胶的基本特点和材料特性,包括其内部的组成成分和结构、组织特异性以及潜在的免疫排斥反应;然后,从细胞水平的培养、临床前的研究和临床上的应用等三方面,重点阐述脱细胞基质水凝胶在组织工程学中的研究应用;最后,展望脱细胞基质材料运用的优势和需要克服的缺陷。总之,作为构建工程化组织以及修复组织缺损的新型生物活性材料,脱细胞基质水凝胶具有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 细胞水凝 组织工程 再生医学 组织特异性 免疫原性
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补阳还五汤及有效组分对大鼠增生血管内膜细胞外基质蛋白表达的影响 被引量:21
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作者 张伟 吴露 +3 位作者 陈北阳 张国民 唐映红 邓常清 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期169-173,共5页
目的:探讨补阳还五汤有效组分生物碱和苷对大鼠主动脉球囊损伤后增生内膜中细胞外基质(ECM)及其调节因子基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、组织基质金属蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)表达的影响,揭示该方作用的物质基础及其机制。方法:大鼠随机分为... 目的:探讨补阳还五汤有效组分生物碱和苷对大鼠主动脉球囊损伤后增生内膜中细胞外基质(ECM)及其调节因子基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、组织基质金属蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)表达的影响,揭示该方作用的物质基础及其机制。方法:大鼠随机分为假手术组、模型组、生物碱治疗组、苷治疗组、补阳还五汤原方治疗组和阿托伐他汀治疗组,以球囊导管损伤主动脉内膜后第2d开始灌胃给药,连续14d,未次给药后第2d(术后第16d)取胸主动脉损伤段,以免疫组化法测定增生内膜中Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、纤维连接蛋白(FN)、层黏连蛋白(LN)和MMP-9、TIMP-1的表达。结果:(1)模型组Col-Ⅰ表达增强(P<0.01);补阳还五汤原方治疗组、生物碱治疗组、苷治疗组和阿托伐他汀治疗组Col-Ⅰ表达显著低于模型组(P<0.01)。模型组FN表达增强(P<0.01);生物碱治疗组和阿托伐他汀治疗组FN表达强度显著低于模型组(P<0.01)。而各组LN表达强度的变化差异均无显著(P>0.05)。(2)模型组TIMP-1表达增强(P<0.05);生物碱治疗可使TIMP-1表达降低(P<0.05);而原方、苷和阿托伐他汀对TIMP-1表达的增强无显著影响(P>0.05)。模型组MMP-9表达无显著变化(P>0.05);生物碱治疗组、苷治疗组和阿托伐他汀治疗组MMP-9表达强度显著高于模型组(P<0.05);而补阳还五汤原方治疗组MMP-9表达无显著变化(P>0.05)。结论:补阳还五汤及其2种有效组分生物碱和苷可抑制增生内膜中Col-Ⅰ的表达,生物碱还可抑制FN的表达。生物碱和苷可增强MMP-9的表达,生物碱还可抑制TIMP-1的表达。提示补阳还五汤及其2种有效组分生物碱和苷可能通过抑制增生内膜中ECM的合成,促进ECM成分的清除和降解以对抗血管内膜增生。 展开更多
关键词 血管再狭窄 补阳还五汤 细胞 原Ⅰ型 纤维蛋白类 层黏连蛋白 金属蛋白酶9 金属蛋白酶1组织抑制剂
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转化生长因子-β1介导的角膜基质细胞外基质纤维化体外三维培养模型的构建 被引量:4
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作者 靳荷 罗世男 +3 位作者 范梓晰 李杰 周卫为 李霞 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期406-411,共6页
背景 角膜损伤修复过程中细胞外基质(ECM)纤维化是角膜瘢痕形成的基础,转化生长因子-β1(TGF-β1)可引起角膜基质过度产生ECM.我们在前期的研究工作中构建了角膜基质三维培养模型,而将TGF-β1添加于该三维培养体系中是否可达到构建... 背景 角膜损伤修复过程中细胞外基质(ECM)纤维化是角膜瘢痕形成的基础,转化生长因子-β1(TGF-β1)可引起角膜基质过度产生ECM.我们在前期的研究工作中构建了角膜基质三维培养模型,而将TGF-β1添加于该三维培养体系中是否可达到构建角膜基质ECM纤维化的体外三维培养模型有待研究.目的 评估TGF-β1对该三维培养模型中ECM纤维化相关基因表达的影响,确定该三维培养体系是否可以作为角膜基质ECM纤维化的体外三维培养候选模型.方法分离新鲜成年牛角膜,并在基础培养液(DMEM/F12+体积分数10%胎牛血清)中进行角膜基质细胞的培养,将5&#215;105个牛角膜基质细胞收集于15 ml离心管中构建体外三维培养模型(Pellet),根据培养液中添加的TGF-β1质量浓度的不同分为基础培养液组(无TGF-β1)、基础培养液+0.5 ng/ml TGF-β1组和基础培养液+1.0 ng/ml TGF-β1组,于培养2周时用钙黄绿素-AM/碘化丙啶法(Calcein-AM/PI)法进行细胞活性测定;分别于培养后48 h、1周和2周应用实时荧光定量PCR(real-time PCR)和Western blot法检测各组Pellet中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)、ColⅢmRNA及其蛋白的表达. 结果 Pellet模型培养后48 h,角膜基质细胞开始抱团,培养后2周经Calcein AM/PI染色证实绝大多数细胞存活.培养后48 h、1周和2周,基础培养液+0.5 ng/ml TGF-β1组和基础培养液+1.0 ng/ml TGF-β1组角膜基质细胞中α-SMA、Col Ⅰ和ColⅢmRNA的相对表达量均明显高于基础培养液组,3个组间的总体差异均有统计学意义(F分组=696.745,P<0.001;F分组=35.166,P<0.001;F分组=33.677,P<0.001),且随着培养时间的延长,α-SMA、Col Ⅰ和ColⅢmRNA的相对表达量逐渐升高,差异均有统计学意义(F时间=5.863,P<0.05;F时间=298.614,P<0.001;F时间=607.472,P<0.001);ColⅢmRNA合成速率均大于Col Ⅰ mRNA的合成速率;Western blot检测发现,培养后48 h和1周α-SMA、Col Ⅰ和ColⅢ蛋白的表达量为微量,培养后2周基础培养液+0.5 ng/ml TGF-β1组Pellet模型中α-SMA、Col Ⅰ和ColⅢ蛋白的相对灰度表达量分别为0.395±0.208、1.060±0.175和0.629±0.382,基础培养液+1.0 ng/ml TGF-β1组o-SMA、Col Ⅰ和ColⅢ蛋白的灰度表达量分别为0.758±0.228、1.201±0.187和0.753 ±0.468,组间总体比较差异均有统计学意义(α-SMA:F=10.691,P<0.05;Col Ⅰ:F=14.094,P<0.05;ColⅢ:F=10.995,P<0.05). 结论 培养液中添加TGF-β1和血清促进角膜ECM的纤维化,表现为Pellet三维培养模型中牛角膜基质细胞高表达纤维化特异性标志物.该培养体系可作为角膜基质ECM纤维化研究的体外三维培养模型. 展开更多
关键词 角膜细胞 创伤修复 细胞培养技术/方法 转化生长因子-Β1 细胞 纤维化 Ⅰ型 Ⅲ型
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妊娠期压力性尿失禁妇女盆底肌肉细胞外基质特征分析 被引量:5
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作者 冯洁 吴氢凯 +1 位作者 吴登龙 许培荣 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期981-985,共5页
目的研究妊娠期压力性尿失禁(SUI)妇女盆底肌肉细胞外基质的特征。方法选取行定期产前检查并阴道分娩的初产妇女71例,其中SUI组33例,非SUI组38例,于胎儿娩出后取会阴侧切处深部组织行HE染色、电子显微镜超微结构观察,Masson三色染色和EV... 目的研究妊娠期压力性尿失禁(SUI)妇女盆底肌肉细胞外基质的特征。方法选取行定期产前检查并阴道分娩的初产妇女71例,其中SUI组33例,非SUI组38例,于胎儿娩出后取会阴侧切处深部组织行HE染色、电子显微镜超微结构观察,Masson三色染色和EVG弹性纤维染色定量分析盆底肌肉组织胶原纤维和弹性纤维含量;另选择同期3名非妊娠女性作为非妊娠组。结果妊娠晚期妇女会阴深部组织平滑肌细胞不同程度空泡变性、肌纤维直径变细,细胞间质水肿。非SUI组盆底肌肉组织中横纹肌周围有丰富胶原包绕,结构紧密并见成束弹性纤维;SUI组盆底组织以平滑肌为主,细胞外胶原结构稀疏,弹性纤维稀少,平滑肌肌束内多量胶原分布。SUI组盆底肌肉组织胶原纤维相对含量和弹性纤维相对含量均显著小于非SUI组(P<0.05)。结论妊娠期SUI妇女盆底肌肉组织细胞外基质结构疏松,胶原纤维和弹性纤维含量下降,可能与SUI的发生有关。 展开更多
关键词 妊娠期压力性尿失禁 盆底肌肉 细胞 弹性纤维
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利用纤维蛋白胶复合血管脱细胞基质制备全生物型小口径组织工程血管支架材料的研究 被引量:3
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作者 刘国锋 何志娟 +4 位作者 杨大平 徐学武 任丽虹 刘莺 李庆春 《中国康复理论与实践》 CSCD 2010年第8期748-751,F0003,共5页
目的探讨利用猪纤维蛋白胶复合犬颈总动脉脱细胞基质制备全生物型小口径组织工程血管支架材料的方法。方法将猪纤维蛋白胶均匀复合于犬颈总动脉脱细胞基质的外表面,构建全生物型小口径复合纤维蛋白胶支架材料。通过组织学染色、扫描电... 目的探讨利用猪纤维蛋白胶复合犬颈总动脉脱细胞基质制备全生物型小口径组织工程血管支架材料的方法。方法将猪纤维蛋白胶均匀复合于犬颈总动脉脱细胞基质的外表面,构建全生物型小口径复合纤维蛋白胶支架材料。通过组织学染色、扫描电镜观察及生物力学测试对复合纤维蛋白胶支架材料的性质进行检测。结果组织学染色结果表明猪纤维蛋白胶均匀分布于犬颈总动脉脱细胞基质的外表面;扫描电镜结果显示复合纤维蛋白胶支架材料的外表面光滑,质地均匀。复合纤维蛋白胶支架材料、脱细胞犬颈总动脉及新鲜犬颈总动脉3组标本的极限拉伸强度和爆裂强度相似,复合纤维蛋白胶支架材料组的轴向顺应性高于脱细胞犬颈总动脉组,而与新鲜犬颈总动脉组的顺应性相似。结论猪纤维蛋白胶可以均匀复合于犬颈总动脉脱细胞基质支架材料上,能够构建出结构均匀的全生物型小口径组织工程血管的支架材料,复合纤维蛋白胶支架材料具有合适的生物力学性质,能够满足小口径组织工程血管对支架材料的要求。 展开更多
关键词 血管 组织工程 生物支架材料 纤维蛋白 细胞 生物力学
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低剂量中子照射对大鼠细胞外基质成分的影响 被引量:1
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作者 陈铁河 鲁永杰 +4 位作者 柴明胜 彭武林 杨翊方 潘燕 陈金国 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期314-314,共1页
目的 探讨低剂量中子辐射对大鼠肺组织细胞外基质的影响。方法  12 0只雄性Wistar大鼠随机分为 4组 ,分别接受 0 ,0 .2 9,0 .6 2和 1.2 0Gy的2 52 Cf中子源照射 ,分别在照后 3d ,1和 2个月时处死动物 ,取肺组织样品 - 30℃贮存。采用... 目的 探讨低剂量中子辐射对大鼠肺组织细胞外基质的影响。方法  12 0只雄性Wistar大鼠随机分为 4组 ,分别接受 0 ,0 .2 9,0 .6 2和 1.2 0Gy的2 52 Cf中子源照射 ,分别在照后 3d ,1和 2个月时处死动物 ,取肺组织样品 - 30℃贮存。采用放射免疫方法测定其透明质酸、层连蛋白、Ⅳ型胶原和Ⅲ型前胶原的含量。结果 照射后各组肺组织透明质酸水平均无明显变化 ;层连蛋白水平在照后 3d ,与对照组相比低、中、高 3个剂量组均出现显著降低 ,直到照后 2个月仍未完全恢复到对照组水平 ;Ⅳ型胶原水平在照射后均出现升高趋势 ,但无显著性差异 ;Ⅲ型前胶原在照后早期出现升高趋势 ,但随后降低。结论 中子低剂量照射可引起肺组织某些细胞外基质成分的改变 ,但效应的形式和程度均随照射剂量及照后时间而不同。 展开更多
关键词 低剂量中子照射 细胞 透明 层连蛋白
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