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NF-κBp65对食管鳞癌细胞上皮间质转化的影响
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作者 张红燕 王小军 +3 位作者 王丰 王新华 孙洋 李珊珊 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期187-189,193,共4页
目的:探讨NF-κBp65对食管鳞癌细胞EC9706上皮间质转化的影响。方法:NF-κBp65反义寡核苷酸(NF-κBp65-ASODN)转染食管鳞癌细胞EC9706,采用RT-PCR、免疫细胞化学及流式细胞术检测NF-κBp65-ASODN转染前后EC9706细胞中NF-κBp65、上皮性... 目的:探讨NF-κBp65对食管鳞癌细胞EC9706上皮间质转化的影响。方法:NF-κBp65反义寡核苷酸(NF-κBp65-ASODN)转染食管鳞癌细胞EC9706,采用RT-PCR、免疫细胞化学及流式细胞术检测NF-κBp65-ASODN转染前后EC9706细胞中NF-κBp65、上皮性标志物E-cadherin及间质性标志物Vimentin mRNA及蛋白表达的变化,观察转染前后细胞形态学的改变,细胞划痕实验检测转染前后细胞运动能力的变化。结果:转染NF-κBp65-ASODN的EC9706细胞,其NF-κBp65 mRNA(0.14±0.06)及蛋白(免疫细胞化学:11.33±1.40%,流式细胞术:11.78%)的表达低于转染前(mRNA:0.45±0.05;蛋白:免疫细胞化学:17.17±1.66%,流式细胞术:15.76%)(P<0.05),上皮性标志物E-cadherin mRNA(0.36±0.08)及蛋白(免疫细胞化学:17.58±1.86%,流式细胞术:14.98%)的表达高于转染前(mRNA:0.22±0.06;蛋白:免疫细胞化学:14.42±1.63%,流式细胞术:12.22%)(P<0.05),间质性标志物Vimentin mRNA(0.75±0.07)及蛋白(免疫细胞化学:16.00±1.41%,流式细胞术:12.90%)的表达低于转染前(mRNA:0.89±0.09;蛋白:免疫细胞化学:19.50±0.89%,流式细胞术:17.76%)(P<0.05)。转染NF-κBp65-ASODN后,EC9706细胞形态发生改变,细胞迁移距离(0.45±0.08)较转染前(0.81±0.11)明显缩短(P<0.05)。结论:NF-κBp65可能参与食管鳞状细胞癌的上皮转化。NF-κBp65-ASODN转染可抑制食管鳞癌细胞上皮间质转化,上皮性标志物E-Cadherin表达上调、间质性标志物Vimentin表达下调,且细胞形态发生改变、细胞运动能力降低。 展开更多
关键词 上皮转化 NF-ΚBP65 食管
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积雪草苷调节HIF-1α/VEGF信号通路对食管癌细胞上皮-间质转化和放疗敏感性的影响
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作者 刘双双 朱正帅 +3 位作者 杨子林 段东奎 符克优 沈索姣 《中国医科大学学报》 北大核心 2025年第2期150-155,共6页
目的 探讨积雪草苷(AS)调节缺氧诱导因子-1α (HIF-1α)/血管内皮生长因子(VEGF)信号通路对食管癌(EC)细胞上皮-间质转化(EMT)和放疗敏感性的影响。方法 以不同浓度的AS或不同放疗剂量干预EC9706细胞,四甲基偶氮唑蓝法检测细胞增殖,计... 目的 探讨积雪草苷(AS)调节缺氧诱导因子-1α (HIF-1α)/血管内皮生长因子(VEGF)信号通路对食管癌(EC)细胞上皮-间质转化(EMT)和放疗敏感性的影响。方法 以不同浓度的AS或不同放疗剂量干预EC9706细胞,四甲基偶氮唑蓝法检测细胞增殖,计算半数抑制浓度;将EC9706细胞分为control组、放射组(单纯X射线照射)、AS组、联合组(AS+X射线照射)、激活剂组(AS+X射线照射+HIF-1α/VEGF通路激活剂二甲基草酰甘氨酸),平板克隆实验检测放疗敏感性;Transwell实验检测细胞迁移与侵袭;流式细胞仪检测细胞凋亡;实时定量PCR检测HIF-1α、VEGF mRNA表达。Western blotting检测基质金属蛋白酶-2 (MMP-2)、波形蛋白(vimentin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)及HIF-1α、VEGF蛋白表达。结果 随着AS浓度和放疗剂量的增加,EC9706细胞活力逐渐降低;与control组相比,放射组、AS组存活分数、迁移与侵袭细胞数、HIF-1α、VEGF mRNA表达及MMP-2、vimentin、HIF-1α、VEGF蛋白表达降低,细胞凋亡率及E-cadherin、Bax表达升高(P <0.05);与放射组、AS组相比,联合组存活分数、迁移与侵袭细胞数、HIF-1α、VEGF mRNA表达及MMP-2、vimentin、HIF-1α、VEGF表达降低,细胞凋亡率及E-cadherin、Bax表达升高(P <0.05);与联合组相比,激活剂组上述指标变化均逆转(P <0.05)。结论 AS可能通过抑制HIF1-α/VEGF信号通路抑制EMT,增强EC细胞的放疗敏感性。 展开更多
关键词 食管 积雪草苷 缺氧诱导因子-1Α 血管内皮生长因子 上皮-转化 放疗敏感性
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LncRNA SNHG20靶向调控miR-520c-3p/RAB22A通路对人口腔鳞状细胞癌细胞上皮间质转化及微管形成的影响 被引量:1
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作者 马民英 晁晓芹 +1 位作者 赵扬 赵国廷 《北京大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第1期26-32,共7页
目的:探究LncRNA SNHG20靶向调控miR-520c-3p/RAB22A通路对人口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)细胞上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)及微管形成的影响。方法:检测OSCC细胞及组织中LncRNA SNHG20... 目的:探究LncRNA SNHG20靶向调控miR-520c-3p/RAB22A通路对人口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)细胞上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)及微管形成的影响。方法:检测OSCC细胞及组织中LncRNA SNHG20、miR-520c-3p、RAB22A mRNA水平及其相互间关系。将OSCC细胞分为对照组、sh-NC组、sh-SNHG20组、sh-SNHG20+anti-NC组、sh-SNHG20+anti-miR-520c-3p组,检测OSCC细胞EMT蛋白表达,检测微管形成数量变化,裸鼠成瘤实验检测LncRNA SNHG20对OSCC肿瘤生长的影响。结果:OSCC组织和细胞中LncRNA SNHG20、RAB22A mRNA上调表达,miR-520c-3p下调表达(P<0.05);LncRNA SNHG20与miR-520c-3p、RAB22A与miR-520c-3p之间均有结合位点;与sh-NC组相比,sh-SNHG20组间质样细胞数量较少,上皮样细胞数量较多,微管结构不完整且结节数量较少,LncRNA SNHG20、RAB22A、N-cadherin、vimentin下调表达,miR-520c-3p、E-cadherin上调表达(P<0.05);与sh-SNHG20+anti-NC组相比,sh-SNHG20+anti-miR-520c-3p组间质样细胞数量较多,上皮样细胞数量较少,微管排列较紧密,微管结节数量较多,miR-520c-3p、E-cadherin下调表达,RAB22A、N-cadherin、vimentin上调表达(P<0.05)。sh-SNHG20组比sh-NC组OSCC移植瘤体积较小,质量较低,LncRNA SNHG20、RAB22A下调表达,miR-520c-3p上调表达(P<0.05)。结论:抑制LncRNA SNHG20表达能够靶向调节miR-520c-3p/RAB22A通路抑制OSCC细胞EMT和微管形成。 展开更多
关键词 口腔细胞 小核仁RNA宿主基因20 微小RNA-520c-3p Rab蛋白22a 上皮转化 微管形成
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牙龈卟啉单胞菌通过GARP促进TGF-β/SMAD轴介导食管鳞状细胞癌细胞的上皮间质转化 被引量:1
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作者 张升华 杨静怡 +3 位作者 祁春晖 乔亮 高社干 齐义军 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期769-776,共8页
目的:阐明牙龈卟啉单胞菌(Pg)诱导食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞发生上皮间质转化(EMT)的分子机制。方法:KEGG分析Pg诱导的ESCC差异表达基因富集的生物学通路,WB和/或免疫荧光法检测Pg诱导的ESCC细胞中糖蛋白A重复优势蛋白(GARP)、TGF-β、p... 目的:阐明牙龈卟啉单胞菌(Pg)诱导食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞发生上皮间质转化(EMT)的分子机制。方法:KEGG分析Pg诱导的ESCC差异表达基因富集的生物学通路,WB和/或免疫荧光法检测Pg诱导的ESCC细胞中糖蛋白A重复优势蛋白(GARP)、TGF-β、pSMAD/SMAD、Snail、Oct4和EMT相关分子表达的变化,ELISA检测TGF-β1水平的变化,免疫组织化学法检测ESCC组织中GARP和TGF-β1的表达规律,Transwell实验和动物实验验证Pg对ESCC的促进作用。结果:ESCC细胞感染Pg后,TGF-β、Hippo、PI3K/Akt等信号通路被激活;Pg感染刺激ESCC细胞分泌总TGF-β1和活性TFG-β1的水平升高(均P<0.01),使SMAD2/3磷酸化并发生核转位,诱导N-cadherin、Snail、Oct4等蛋白表达升高、E-cadherin蛋白表达降低,由此促进ESCC细胞的迁移、侵袭和裸鼠皮下移植瘤的生长(均P<0.01)。在ESCC细胞中沉默GARP表达后,逆转了Pg所诱导的上述ESCC细胞表型变化。Pg丰度高的ESCC组织中TGF-β1和GARP蛋白表达高于低丰度的ESCC组织,且Pg丰度与TGF-β1、GARP表达存在正向关联(P=0.0015)。结论:Pg通过GARP激活TGF-β/SMAD轴促进ESCC细胞发生EMT,进而促进ESCC细胞的迁移、侵袭和生长,清除Pg或阻断TGF-β信号转导则可阻断上述Pg对ESCC的促进作用。 展开更多
关键词 食管细胞 牙龈卟啉单胞菌 糖蛋白A重复优势蛋白 TGF-Β SMAD 上皮转化
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CircBICD2调节miR-218-5p/RhoA轴对口腔鳞状细胞癌细胞增殖、凋亡和上皮间质转化的影响
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作者 谢耕耘 安晓燕 王佳 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期97-103,共7页
目的:探讨环状RNA(CircRNA)·BICD2调节miR-218-5p/Ras同源基因家族成员A·(RhoA)轴对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖、凋亡和上皮间质转化(EMT)的影响。方法:qRT-PCR、Western·blot分别检测OSCC组织、癌旁组织、人口腔上... 目的:探讨环状RNA(CircRNA)·BICD2调节miR-218-5p/Ras同源基因家族成员A·(RhoA)轴对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖、凋亡和上皮间质转化(EMT)的影响。方法:qRT-PCR、Western·blot分别检测OSCC组织、癌旁组织、人口腔上皮细胞系HOEC及OSCC细胞系HSC-4、CAL-27、SCC-15中Circ·BICD2、miR-218-5p表达及Rho·A蛋白表达;将SCC-15细胞分为Ct组(A,未转染对照)、si-NC组(B)、si-Circ·BICD2组(C)、miR-NC组(D)、miR-218-5p组(E)、si-Circ·BICD2+anti-NC组(F)、si-Circ·BICD2+anti-miR-218-5p组(G),qRT-PCR检测细胞中Circ·BICD2、miR-218-5p表达;·CCK-8法和平板克隆实验检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;·Western·blot检测Rho·A、E-cadherin、Vimentin、N-cadherin表达;双荧光素酶验证Circ·BICD2与miR-218-5p、miR-218-5p与Rho·A的关系。结果:在OSCC组织和细胞中,Circ·BICD2、Rho·A蛋白高表达,miR-218-5p低表达,在SCC-15细胞中miR-218-5p相对表达量最低,Circ·BICD2表达及Rho·A蛋白相对表达量最高(P<0.05)。后续实验取SCC-15细胞为研究对象;与B组比较,C组Circ·BICD2、Rho·A蛋白表达降低,miR-218-5p表达升高(P<0.05);与D组比较,E组miR-218-5p表达上调,Rho·A蛋白表达下调(P<0.05);与C组、F组相比,G组miR-218-5p表达降低,Rho·A蛋白表达升高(P<0.05)。下调Circ·BICD2或过表达miR-218-5p均可抑制SCC-15细胞增殖和EMT,促进细胞凋亡;下调miR-218-5p减弱了沉默Circ·BICD2对SCC-15细胞增殖、EMT的抑制作用以及对细胞凋亡的促进作用;·Circ·BICD2靶向调控miR-218-5p/Rho·A轴。结论:沉默Circ·BICD2可能通过上调miR-218-5p来抑制Rho·A表达,抑制SCC-15细胞增殖、EMT,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 BICD2 miR-218-5p 口腔细胞 增殖 上皮转化
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食管鳞状细胞癌中CD88表达及其与上皮-间质转化的关系
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作者 许坤明 刘香 +4 位作者 朱凯 罗华羽 樊琳蕊 张忠玉 任宏政 《临床与实验病理学杂志》 CAS 北大核心 2024年第6期615-620,共6页
目的探究食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)中CD88表达与临床病理特征及上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的关系。方法应用TCGA和TIMER数据库分析ESCC和食管鳞状上皮中CD88表达水平及其与... 目的探究食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)中CD88表达与临床病理特征及上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的关系。方法应用TCGA和TIMER数据库分析ESCC和食管鳞状上皮中CD88表达水平及其与EMT相关基因和蛋白表达的关系。收集199例ESCC和癌旁组织石蜡标本,制成组织芯片,采用免疫组化EnVision法检测ESCC和癌旁正常组织中CD88和EMT相关靶标蛋白的表达情况,分析CD88表达与ESCC临床病理特征、预后及EMT的关系。结果ESCC组织中CD88高表达者86例,低表达者113例,ESCC组织中CD88表达水平显著高于癌旁正常组织(P<0.001)。CD88高表达组分化程度更低(P<0.001)、T分期更高(P=0.03)。CD88高表达组患者的5年生存期显著低于CD88低表达组(P=0.002)。Cox单因素和多因素分析结果显示,CD88表达是ESCC患者总生存的独立预后因素(P=0.013)。CD88高表达与E-cadherin表达呈负相关(r=-0.146,P=0.039),与vimentin(r=0.387,P=1.61e-08)和N-cadherin表达呈正相关(r=0.304,P=1.3e-05)。结论CD88在ESCC组织中高表达,CD88可能通过EMT影响ESCC的发生发展及侵袭转移过程,其可以作为评估ESCC患者预后的标志物。 展开更多
关键词 食管肿瘤 细胞 CD88 上皮-转化 预后
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GANT61对食管鳞癌细胞上皮-间质转化作用的研究 被引量:1
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作者 王雷 杜媛鲲 +2 位作者 王林 米源 王娜 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期249-254,共6页
目的研究GANT61对人食管鳞癌细胞OE21和KYSE-30的上皮-间质转化的影响,同时使用N-Shh蛋白刺激Hedgehog通路作为阳性对照,探讨GANT61抗肿瘤机制。方法实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测GANT61和N-Shh蛋白作用于OE21和KYSE-30细胞后Gli... 目的研究GANT61对人食管鳞癌细胞OE21和KYSE-30的上皮-间质转化的影响,同时使用N-Shh蛋白刺激Hedgehog通路作为阳性对照,探讨GANT61抗肿瘤机制。方法实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测GANT61和N-Shh蛋白作用于OE21和KYSE-30细胞后Gli1、Gli2、N-cadherin和β-catenin基因变化;Western blot观察药物GANT61和N-Shh蛋白作用于OE21和KYSE-30细胞后对Gli1、Gli2、N-cadherin和β-catenin蛋白表达的影响。划痕愈合试验观察GANT61和N-Shh蛋白作用于OE21和KYSE-30细胞后对细胞迁移侵袭能力的影响。结果实时荧光定量PCR结果显示,GANT61可以下调OE21和KYSE-30的Gli-1、Gli-2、N-cadherin和β-cateninm RNA表达;Western blot显示GANT61可以下调OE21和KYSE-30的Gli1、Gli2、Ncadherin和β-catenin蛋白表达。划痕愈合试验显示GANT61导致OE21和KYSE-30细胞的迁移能力明显下降。应用N-Shh蛋白可以上调OE21和KYSE-30的Gli1、Gli2表达,N-cadherin和β-catenin表达,同时促进OE21和KYSE-30的迁移能力。结论GANT61通过下调Hedgehog信号转导通路中Gli1和Gli2的表达来影响食管鳞癌细胞上皮-间质转化能力,Gli可成为抑制食管鳞癌细胞转移新的有效的分子靶点。 展开更多
关键词 食管 HEDGEHOG信号通路 GANT61 GLI 上皮-转化
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IL-6对食管癌细胞侵袭迁移及上皮间质转化的影响 被引量:14
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作者 臧春宝 曹姝 +2 位作者 李芳 陈兴月 李少林 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期302-306,共5页
目的研究白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)对食管癌Eca-109细胞增殖、侵袭迁移及上皮间质转化的影响,探讨其作用机制。方法用不同浓度(0、25、50和100 ng/mL)的IL-6处理Eca-109细胞,采用MTT法检测细胞增殖,细胞划痕实验、Transwell小... 目的研究白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)对食管癌Eca-109细胞增殖、侵袭迁移及上皮间质转化的影响,探讨其作用机制。方法用不同浓度(0、25、50和100 ng/mL)的IL-6处理Eca-109细胞,采用MTT法检测细胞增殖,细胞划痕实验、Transwell小室实验检测细胞迁移侵袭能力,荧光定量PCR检测E-cadherin、N-cadherin、Vimentin和Twist1mRNA的表达,Western blot检测Stat3、p-Stat3、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin和Twist1蛋白表达。结果与对照组(0 ng/mL)比较,IL-6处理组(25、50、100 ng/mL)在IL-6作用后第1~5天Eca-109细胞增殖增加,呈量效-时效关系(P<0.05,P<0.01)。IL-6各浓度(0、25、50 ng/mL)组24 h细胞迁移距离分别为(18.20±0.89)、(23.77±0.40)和(25.27±0.93)mm,与对照组(0 ng/mL)比较,IL-6处理组(25、50 ng/mL)Eca-109细胞体外迁移距离明显增加(P<0.05,P<0.05)。IL-6各浓度(0、25、50 ng/mL)组穿过Matrigel胶的细胞分别为(70.33±2.36)、(103.00±3.51)、(118.00±4.00)个/视野,与对照组(0 ng/mL)比较,IL-6处理组(25、50 ng/mL)Eca-109细胞体外穿过Matrigel胶的细胞数量明显增加(P<0.05,P<0.05)。荧光定量PCR结果显示,与对照组(0 ng/mL)相比,IL-6处理(25、50 ng/mL)组N-cadherin、Vimentin和Twist1 mRNA达增加(P<0.05,P<0.05),E-cadherin mRNA表达降低(P<0.05)。Western blot结果显示,与对照组(0 ng/mL)相比,IL-6各处理(25、50 ng/mL)组p-Stat3、N-cadherin、Vimentin和Twist1蛋白表达增加,E-cadherin蛋白表达降低,Stat3蛋白表达没有明显改变。结论 IL-6可提高食管癌Eca-109细胞体外增殖、侵袭、迁移能力,促进上皮间质转化过程,其机制可能通过活化Stat3蛋白,上调Twist1的表达,进一步调控EMT蛋白(E-cadherin、N-cadherin和Vimentin)的表达。 展开更多
关键词 IL-6 食管 STAT3 上皮转化 侵袭迁移
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食管癌组织中Slug表达量与癌细胞上皮-间质转化及侵袭特性的相关性 被引量:3
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作者 詹波涛 赵华 《海南医学院学报》 CAS 2017年第10期1391-1394,共4页
目的:探讨食管癌组织中Slug表达量与癌细胞上皮-间质转化及侵袭特性的相关性。方法:收集在本院接受根治性手术治疗的食管癌患者78例,取术中食管癌组织及癌旁正常组织标本。采用荧光定量PCR法测定标本组织中Slug基因及侵袭基因的mRNA表达... 目的:探讨食管癌组织中Slug表达量与癌细胞上皮-间质转化及侵袭特性的相关性。方法:收集在本院接受根治性手术治疗的食管癌患者78例,取术中食管癌组织及癌旁正常组织标本。采用荧光定量PCR法测定标本组织中Slug基因及侵袭基因的mRNA表达量,采用western-blot法测定上皮-间质转化相关指标的蛋白表达量,采用Pearson检验法评估食管癌组织中Slug表达量与癌细胞上皮-间质转化、侵袭活性的相关关系。结果:食管癌组织中Slug mRNA的表达量显著高于癌旁组织(P<0.05)。食管癌组织中上皮-间质转化标志物E-cadherin的蛋白表达量低于癌旁组织,Vimentin、N-cadherin的蛋白表达量高于癌旁组织,促侵袭基因Ezrin、FAT10、Survivin、MCP-1、RhoA的mRNA表达量均高于癌旁组织,侵袭抑制基因DEC1、PTEN、p53的mRNA表达量均低于癌旁组织(P均<0.05)。食管癌组织中Slug mRNA的表达量与上皮-间质转化标志物E-cadherin的蛋白表达量呈负相关,与Vimentin、N-cadherin的蛋白表达量呈正相关,与促侵袭基因Ezrin、FAT10、Survivin、MCP-1、RhoA的mRNA表达量呈正相关,与侵袭抑制基因DEC1、PTEN、p53的mRNA表达量呈负相关。结论:食管癌组织中Slug表达量高于癌旁组织,且Slug表达量与癌细胞上皮-间质转化及侵袭活性直接相关。 展开更多
关键词 食管 SLUG 上皮-转化 侵袭
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敲低lncRNA CACNA1C-AS2促进上皮间质转化增强人食管癌细胞的增殖、侵袭和迁移 被引量:5
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作者 秦玉萍 曹通 +3 位作者 许颖 蒋旭 马佳 禹莉 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期249-257,共9页
目的 探讨钙电压门控通道亚基α1C反义RNA2(CACNA1C-AS2)通过调节上皮间质转化(EMT)对食管癌细胞恶性生物学行为的影响。方法 通过癌症基因组图谱(TCGA)数据库分析CACNA1C-AS2在癌旁组织和食管癌组织的表达;实时定量PCR检测食管癌细胞中... 目的 探讨钙电压门控通道亚基α1C反义RNA2(CACNA1C-AS2)通过调节上皮间质转化(EMT)对食管癌细胞恶性生物学行为的影响。方法 通过癌症基因组图谱(TCGA)数据库分析CACNA1C-AS2在癌旁组织和食管癌组织的表达;实时定量PCR检测食管癌细胞中CACNA1C-AS2 mRNA表达水平;在食管癌细胞中敲低和高表达CACNA1C-AS2后,采用噻唑蓝(MTT)法和细胞集落形成实验检测细胞的活力,TranswellTM小室法检测细胞的侵袭能力和纵向迁移能力,划痕愈合实验检测细胞的横向迁移能力,流式细胞术检测细胞的凋亡率;Western blot法检测神经钙黏素(N-cadherin)、波形蛋白(vimentin)和锌指转录因子snail 2(slug)蛋白表达。结果 CACNA1C-AS2在食管癌组织和细胞系中均低表达;敲低EC-9706细胞和Eca-109细胞中CACNA1C-AS2后,食管癌细胞的侵袭、迁移能力和细胞活力显著增强,细胞凋亡减少;N-cadherin、vimentin和slug表达上调。过表达CACNA1C-AS2则结果相反。结论 CACNA1C-AS2通过促进EMT增强食管癌细胞的增殖、侵袭和迁移。 展开更多
关键词 食管 长链非编码RNA(lncRNA) 钙电压门控通道亚基α1C反义RNA2(CACNA1C-AS2) 上皮转化(EMT)
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食管鳞癌多药耐药细胞建立及干性和上皮间质转化表型鉴定 被引量:3
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作者 刘其伟 晁玮霞 +3 位作者 焦叶林 张月静 刘瑞敏 齐义军 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期1717-1724,共8页
目的建立人食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)多药耐药细胞株,探讨ESCC化疗耐药的分子机制。方法采用间歇性反复冲击法筛选建立对紫杉醇(paclitaxel,PTX)、5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)和顺铂(cisplatin,CDDP)、... 目的建立人食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)多药耐药细胞株,探讨ESCC化疗耐药的分子机制。方法采用间歇性反复冲击法筛选建立对紫杉醇(paclitaxel,PTX)、5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)和顺铂(cisplatin,CDDP)、阿霉素(doxorubicin,DOX)和长春新碱(vincristine,VCR)等药物具有抗性的多药耐药细胞株EC9706/PDFC,测定EC9706/PDFC耐药指数(resistance index,RI)、增殖和侵袭能力、细胞周期、干性、上皮间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)等表型变化,分析ABCB1、ABCC1、ABCC2和ABCG2在EC9706/PDFC、EC9706/CDDP和EC9706/PTX中的mRNA表达。结果EC9706/PDFC对PTX、5-Fu、CDDP、DOX、VCR等药物的RI分别为25.8、16.85、15.2、16.85和7.27。与亲本细胞EC9706相比,EC9706/PDFC细胞呈多形性、排列松散,增殖减慢,S期细胞数明显减少,侵袭和干性成球能力增加,干性和EMT相关分子表达异常。ABCB1和ABCC1在3种不同的耐药细胞中表达升高,而ABCG2表达却降低,ABCC2升高不明显。结论ESCC多药耐药细胞获得了CSC和EMT表型,为ESCC多药耐药临床评估和耐药逆转提供了细胞模型和潜在靶向分子。 展开更多
关键词 食管 化疗 多药耐药 细胞周期 侵袭 上皮转化 肿瘤干细胞
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微小RNA663b对口腔鳞状细胞癌细胞迁移、侵袭和上皮间充质转化的影响 被引量:1
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作者 丛碧桥 刘晓萍 +2 位作者 陈嘉雯 李洪利 范欣 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期386-393,共8页
目的探讨微小RNA663b(miR-663b)对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞迁移、侵袭和上皮间质转化(EMT)的影响。方法通过基因表达数据库(GEO)使用R Studio进行OSCC组织与癌旁正常组织的差异表达分析。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-663... 目的探讨微小RNA663b(miR-663b)对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞迁移、侵袭和上皮间质转化(EMT)的影响。方法通过基因表达数据库(GEO)使用R Studio进行OSCC组织与癌旁正常组织的差异表达分析。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-663b在组织和细胞中的表达。检测miR-663b敲除质粒的HN30细胞转染效率,Transwell法检测迁移、侵袭能力。生物信息学方法预测miR-663b的靶向mRNA,双荧光素酶实验验证结合情况。Westernblot检测EMT相关标志物的表达。结果miR-663b在OSCC组织中表达上调,在HN30、CAL27、SCC-9细胞中表达较HOEC细胞高(P<0.05)。敲除miR-663b可以抑制HN30细胞的迁移和侵袭(P<0.05),抑制EMT的发生。生信预测SH3BP2与miR-663b靶向结合,SH3BP2低表达的患者预后较差(P<0.05)。双荧光素酶实验证明miR-663b可以与SHBP2靶向结合(P<0.05)。敲除miR-663b的OSCC细胞中SH3BP2的表达增加,EMT的发生受到抑制。结论敲除miR-663b可靶向调节SH3BP2抑制OSCC细胞的迁移、侵袭和EMT。 展开更多
关键词 miR-663b SH3BP2 口腔细胞 迁移 侵袭 上皮转化
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miR-369-3p靶向MMP14调节乳头状甲状腺癌细胞侵袭、迁移和上皮间质转化的作用 被引量:7
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作者 王小清 王金莲 +3 位作者 林帅 侯令密 谢少利 青晓 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第21期2576-2581,共6页
目的:探究miR-369-3p通过靶向调控MMP14表达,对乳头状甲状腺癌细胞侵袭、迁移和上皮间质转化(EMT)的影响及作用机制。方法:将人乳头状甲状腺癌B-CPAP细胞分为B-CPAP组、mimic-NC组、miR-369-3p mimic组、pLV-MMP14组、mimic+pLV-MMP14组... 目的:探究miR-369-3p通过靶向调控MMP14表达,对乳头状甲状腺癌细胞侵袭、迁移和上皮间质转化(EMT)的影响及作用机制。方法:将人乳头状甲状腺癌B-CPAP细胞分为B-CPAP组、mimic-NC组、miR-369-3p mimic组、pLV-MMP14组、mimic+pLV-MMP14组,mimic-NC组细胞转染阴性对照mimic(mimic-NC),miR-369-3p mimic组细胞转染miR-369-3p mimic,pLV-MMP14组细胞转染MMP14过表达慢病毒,mimic+pLV-MMP14组共转染miR-369-3p mimic和MMP14过表达慢病毒,RT-PCR检测miR-369-3p和MMP14基因表达水平,荧光素酶报告实验检测miR-369-3p和MMP14的靶向关系,Transwell法检测细胞侵袭,划痕法检测细胞迁移,Western blot检测MMP14、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、Twist、EGFR、p-ERK1/2、VEGF、MMP2蛋白表达水平。结果:与B-CPAP组比较,miR-369-3p mimic组miR-369-3p表达水平升高,MMP14基因表达水平降低。同时在荧光素酶报告实验中,与MMP14 WT组比较,MMP14 WT+miR-369-3p mimic组荧光素酶活性显著降低。同时,与B-CPAP组比较,miR-369-3p mimic组侵袭和迁移能力显著降低,并且MMP14、N-cadherin、Vimentin、Twist、EGFR、p-ERK1/2、VEGF、MMP2蛋白表达水平均显著降低,E-cadherin蛋白表达水平显著升高;pLV-MMP14组侵袭和迁移能力显著升高,并且MMP14、N-cadherin、Vimentin、Twist、EGFR、p-ERK1/2、VEGF、MMP2蛋白表达水平显著升高,E-cadherin蛋白表达水平显著降低。与pLV-MMP14组比较,mimic+pLV-MMP14组侵袭和迁移能力显著降低,同时MMP14、N-cadherin、Vimentin、Twist、EGFR、p-ERK1/2、VEGF、MMP2蛋白表达水平均显著降低,E-cadherin蛋白表达水平显著升高。结论:miR-369-3p可通过沉默MMP14,阻断EGFR-ERK信号通路使VEGF、MMP2蛋白表达水平降低,进而抑制乳头状甲状腺癌细胞的侵袭、迁移和上皮间质转化。 展开更多
关键词 乳头状甲状腺癌细胞 上皮转化 miR-369-3p MMP14
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流体剪切力诱导喉鳞癌Hep2细胞上皮-间充质转化 被引量:3
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作者 张莹莹 冯唐 +4 位作者 沈阳 刘静霞 闫志平 刘双凤 刘肖珩 《医用生物力学》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第5期384-389,共6页
目的探究流体剪切力(fluid shear stress,FSS)对喉鳞癌Hep2细胞发生上皮-间充质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)的影响。方法对Hep2细胞加载140 m Pa的FSS,观察不同时间点细胞的形态学变化;划痕实验检测力学加载后Hep2细... 目的探究流体剪切力(fluid shear stress,FSS)对喉鳞癌Hep2细胞发生上皮-间充质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)的影响。方法对Hep2细胞加载140 m Pa的FSS,观察不同时间点细胞的形态学变化;划痕实验检测力学加载后Hep2细胞迁移能力的变化;共聚焦显微镜下观察细胞骨架蛋白F-actin的分布;Western blotting检测EMT相关蛋白的表达。结果 FSS力学加载后,Hep2细胞形态由多边形向梭形转变,撤销FSS后,细胞恢复初始的多边形;Hep2细胞迁移能力的增加依赖于FSS加载时间。FSS促使细胞骨架蛋白F-actin重排,从而增强Hep2细胞的迁移行为。FSS使Hep2细胞EMT标志蛋白发生了时序性变化。结论 FSS是诱导Hep2细胞发生EMT的一个重要物理因素。 展开更多
关键词 流体剪切力 癌细胞 细胞迁移 上皮-转化
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CEACAM6介导上皮间质转化增强胰腺癌细胞侵袭能力和耐药性的研究 被引量:3
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作者 陈建敏 安勇 +4 位作者 吕楠 薛晓峰 张烨 卫积书 苗毅 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1675-1679,共5页
目的:研究CEACAM6对胰腺癌细胞株SW1990侵袭能力和耐药性的影响,并探讨上皮间质转化(EMT)在其中的作用。方法:筛选及鉴定过表达CEACAM6的稳定转染SW1990-CEACAM6细胞株,通过定量PCR和Western blot方法检测SW1990细胞株中EMT相关表型标... 目的:研究CEACAM6对胰腺癌细胞株SW1990侵袭能力和耐药性的影响,并探讨上皮间质转化(EMT)在其中的作用。方法:筛选及鉴定过表达CEACAM6的稳定转染SW1990-CEACAM6细胞株,通过定量PCR和Western blot方法检测SW1990细胞株中EMT相关表型标志物的改变。通过Transwell实验检测过表达CEACAM6对SW1990细胞株侵袭的影响,MTT法检测耐药指数(RI)。结果:定量PCR及Western blot验证过表达CEACAM6细胞株SW1990-CEACAM6成功建立,其倾向于向间质细胞转化:波形蛋白(Vimentin)表达明显上调,E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达下降。功能实验证实过表达CEACAM6具有促进SW1990胰腺癌细胞株侵袭作用,同时细胞株耐药性增强。结论:CEACAM6能够促进SW1990胰腺癌细胞株上皮间质转化,从而促进胰腺癌细胞的恶性转化。 展开更多
关键词 SW1990胰腺癌细胞 CEACAM6 上皮转化 侵袭 耐药
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骨桥蛋白对人舌鳞状细胞癌Tca-8113细胞上皮-间质转化及生物学行为的影响 被引量:3
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作者 赵志娟 袁宏伟 +2 位作者 贾永峰 韦玄 施琳 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期1365-1369,共5页
目的探讨骨桥蛋白(osteopontin,OPN)在人舌鳞状细胞癌Tca-8113细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)现象中的调控作用及其对Tca-8113细胞生物学行为的影响。方法 Tca-8113细胞稳定转染OPN,RT-PCR和Western blot技... 目的探讨骨桥蛋白(osteopontin,OPN)在人舌鳞状细胞癌Tca-8113细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)现象中的调控作用及其对Tca-8113细胞生物学行为的影响。方法 Tca-8113细胞稳定转染OPN,RT-PCR和Western blot技术检测转染效率;Western blot及免疫细胞化学法检测转染前后OPN、Snail及EMT标志物的变化;通过细胞黏附、迁移及Transwell侵袭实验,观察OPN对Tca-8113细胞黏附、迁移和侵袭等生物学行为的影响。结果 Tca-8113细胞能够稳定表达OPN;与转染前相比,转染后上皮标志物E-cadherin、β-catenin表达明显降低,而间质标志物vimentin、N-cadherin及Snail表达增加;Tca-8113细胞黏附、迁移和侵袭能力明显增加(P<0.05)。结论 OPN增强人舌鳞状细胞癌Tca-8113细胞黏附、迁移和侵袭能力,可能与其促进口腔鳞状细胞癌EMT的发生有关,Snail可能介导OPN的作用。 展开更多
关键词 口腔肿瘤 细胞 骨桥蛋白 上皮-转化 SNAIL
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黏着斑激酶抑制剂TAE226对人口腔鳞状细胞癌细胞上皮间质转化的影响 被引量:2
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作者 邹湘渝 曾琴 +1 位作者 刘萍 聂敏海 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期17-22,共6页
目的探究黏着斑激酶抑制剂TAE226对人口腔鳞状细胞癌细胞上皮间质转化(EMT)过程的影响。方法不同浓度(0、1、5、10μmol·L-1)的TAE226作用于人口腔鳞状细胞癌HSC-3和HSC-4细胞24、48、72 h后,实时定量聚合酶链反应检测EMT标志物E-... 目的探究黏着斑激酶抑制剂TAE226对人口腔鳞状细胞癌细胞上皮间质转化(EMT)过程的影响。方法不同浓度(0、1、5、10μmol·L-1)的TAE226作用于人口腔鳞状细胞癌HSC-3和HSC-4细胞24、48、72 h后,实时定量聚合酶链反应检测EMT标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)的mRNA表达;蛋白质印迹法检测E-cadherin、Vimentin在TAE226作用48 h后的蛋白表达。结果实时定量聚合酶链反应检测表明,随着TAE226作用时间和浓度的增加,E-cadherin mRNA的表达增加,Vimentin mRNA的表达降低(P<0.05)。蛋白质印迹法检测表明,随着TAE226浓度的增加,E-cadherin蛋白的表达增加,Vimentin蛋白的表达降低(P<0.05)。结论TAE226能有效抑制人口腔鳞状细胞癌细胞株的EMT进程,有望成为治疗口腔鳞状细胞癌的有效药物之一。 展开更多
关键词 黏着斑激酶抑制剂TAE226 上皮转化 口腔细胞
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SIRT1通过调控Snail表达参与食管癌EC-9706和Eca-109细胞的上皮间质的转化 被引量:5
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作者 吴宇翔 辛道 +1 位作者 刘灿 王峰 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期1325-1330,共6页
目的探讨沉默信息调节因子1(SIRT1)诱导食管癌EC-9706和Eca-109细胞上皮间质转化(EMT)发生中的作用和机制。方法转染3条化学合成SIRT1 siRNA入食管癌EC-9706和Eca-109细胞,以空白细胞和转染阴性对照siRNA细胞作为对照,real-time PCR和we... 目的探讨沉默信息调节因子1(SIRT1)诱导食管癌EC-9706和Eca-109细胞上皮间质转化(EMT)发生中的作用和机制。方法转染3条化学合成SIRT1 siRNA入食管癌EC-9706和Eca-109细胞,以空白细胞和转染阴性对照siRNA细胞作为对照,real-time PCR和western blot检测转染效果。Transwell侵袭小室和划痕实验检测各组细胞的侵袭转移能力变化。Real-time PCR和Western blot检测各组细胞上皮间质转化相关分子E-cadherin和vimentin的表达变化,同时进一步检测E-cadherin转录抑制因子Snail、twist1和ZEB的表达变化。结果与空白组和阴性对照组细胞相比,转染SIRT1 siRNA1和SIRT1 siRNA3的EC-9706和Eca-109细胞SIRT1 mRNA和蛋白表达均明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。Transwell侵袭小室和划痕实验结果显示转染SIRT1 siRNA1和SIRT1 siRNA3组EC-9706和Eca-109细胞穿膜细胞数和划痕愈合能力较空白组和阴性对照组细胞下降,差异有统计学意义(P<0.05)。转染SIRT1 siRNA1和SIRT1 siRNA3组EC-9706和Eca-109细胞E-cadherin表达明显升高,而vimentin表达下降,与空白组和阴性对照组细胞相比差异有统计学意义(P<0.05)。转染SIRT1 siRNA1和SIRT1siRNA3组EC-9706细胞Snail表达下降,与空白组和阴性对照组细胞相比差异有统计学意义(P<0.01)。转染SIRT1 siRNA1和SIRT1 siRNA3组Eca-109细胞Snail和twist1表达下降,与空白组和阴性对照组细胞相比差异有统计学意义(P<0.01)。结论SIRT1有可能通过调控Snail表达诱导EMT发生从而在食管癌细胞侵袭转移中发挥作用。 展开更多
关键词 食管 SIRT1 上皮转化 侵袭转移 SNAIL
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吡咯喹啉醌对舌鳞状细胞癌细胞上皮间质转化的抑制作用研究 被引量:2
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作者 吴南 李斌 《国际口腔医学杂志》 CAS CSCD 2020年第4期406-412,共7页
目的探讨吡咯喹啉醌(PQQ)对舌鳞状细胞癌细胞CAL27上皮间质转化(EMT)的抑制作用及可能机制。方法采用MTT法检测PQQ对CAL27细胞增殖作用的影响;Transwell和划痕实验检测PQQ对CAL27细胞侵袭及迁移能力的影响;电子荧光显微镜下检测PQQ对CA... 目的探讨吡咯喹啉醌(PQQ)对舌鳞状细胞癌细胞CAL27上皮间质转化(EMT)的抑制作用及可能机制。方法采用MTT法检测PQQ对CAL27细胞增殖作用的影响;Transwell和划痕实验检测PQQ对CAL27细胞侵袭及迁移能力的影响;电子荧光显微镜下检测PQQ对CAL27细胞内产生活性氧(ROS)水平的影响。分别采用PQQ、ROS清除剂N-乙酰基-L-半胱氨酸(NAC)和核因子-κB(NF-κB)激动剂佛波醇酯(PMA)处理细胞,Western blot检测EMT相关蛋白(上皮钙黏蛋白、波形蛋白、锌指转录因子Snail)和NF-κB通路活化水平的变化。结果 PQQ作用CAL27细胞24 h后,随着PQQ浓度的增加,CAL27细胞增殖受抑制,24 h的半数抑制浓度为6.69 μmol·L^-1。2 μmol·L^-1 PQQ作用CAL27细胞24 h后,细胞的侵袭及迁移能力明显受到抑制(P<0.05)。2 μmol·L^-1 PQQ可有效诱导细胞内ROS的产生,上调上皮钙黏蛋白的表达,下调波形蛋白和Snail的表达,抑制NF-κB活化水平(P<0.001)。NAC可以减弱PQQ对EMT相关蛋白的调控作用,降低PQQ对NF-κB通路的抑制作用(P<0.01);PMA同样可以减弱PQQ对EMT相关蛋白的调控作用(P<0.05)。结论 PQQ能够抑制CAL27细胞的EMT进程,ROS和NF-κB信号通路可能在该进程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 细胞 吡咯喹啉醌 上皮转化 活性氧 核因子-ΚB
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抑癌基因PTEN对舌鳞状细胞癌侵袭性及上皮-间质转化相关蛋白表达的影响 被引量:2
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作者 郭婷婷 张斌 +2 位作者 刘佳柏 刘硕硕 董肖婷 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期70-73,197,共4页
目的:探讨第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物基因(PTEN)对舌鳞状细胞癌侵袭性的影响,阐明PTEN与舌鳞状细胞癌上皮间质转化(EMT)的关系。方法:舌鳞状细胞癌SCC-4细胞株分为未转染组(SCC-4细胞)、转染组(稳定转染了PTEN的SCC-4细... 目的:探讨第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物基因(PTEN)对舌鳞状细胞癌侵袭性的影响,阐明PTEN与舌鳞状细胞癌上皮间质转化(EMT)的关系。方法:舌鳞状细胞癌SCC-4细胞株分为未转染组(SCC-4细胞)、转染组(稳定转染了PTEN的SCC-4细胞)和空载体组(转染了空载体的SCC-4细胞)。用Transwell侵袭实验测定3组SCC-4细胞的侵袭能力;Western blotting法检测与EMT相关的E-cad、vimentin和snail蛋白的表达。结果:未转染组、空载体组和转染组SCC-4细胞在Transwell侵袭小室中培养36h后穿膜细胞数分别为82±5、80±4和42±5,其中未转染组与空载体组比较差异无统计学意义(P>0.05),转染组与未转染组比较差异有统计学意义(P<0.001)。与未转染组比较,转染组SCC-4细胞中E-cad、vimentin和snail蛋白表达差异有统计学意义(P<0.05),E-cad表达上调,vimentin和snail表达下调;空质粒组与未转染组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:PTEN可能是通过抑制舌鳞状细胞癌SCC-4细胞株的EMT过程来降低其侵袭能力。 展开更多
关键词 第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物基因 细胞 上皮-转化 侵袭性
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