期刊文献+
共找到79篇文章
< 1 2 4 >
每页显示 20 50 100
紫杉醇诱导食管癌细胞的细胞周期阻断与细胞凋亡 被引量:15
1
作者 彭玮丹 张杰 +3 位作者 曹云新 惠宏襄 金明 王成济 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第5期402-406,共5页
目的研究紫杉醇对食管癌细胞的细胞周期阻断及诱导凋亡的作用。方法应用形态学观察、琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术等方法对紫杉醇诱导的食管癌细胞系Eca109进行了检测和观察。结果紫杉醇可将食管癌细胞阻断于G0/G1期及G2/M期并诱导其... 目的研究紫杉醇对食管癌细胞的细胞周期阻断及诱导凋亡的作用。方法应用形态学观察、琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术等方法对紫杉醇诱导的食管癌细胞系Eca109进行了检测和观察。结果紫杉醇可将食管癌细胞阻断于G0/G1期及G2/M期并诱导其凋亡,凋亡细胞具有典型的凋亡形态特征,流式细胞仪检测有凋亡峰出现,琼脂糖凝胶电泳显示3nmol·L-1紫杉醇作用72h便可见明显的DNA梯带。100nmol·L-1和1000nmol·L-1浓度的紫杉醇作用于细胞,在形态变化与细胞周期变化上有很大差别。紫杉醇作用短时间(<2h)去除后再培养比持续性作用更早促使细胞凋亡。结论紫杉醇不仅可以阻断食管癌细胞的分裂,而且对于间期细胞也有很大作用。细胞周期阻断并不直接诱导细胞凋亡,甚至可能抑制细胞凋亡的进程。食管癌细胞中存在多条凋亡途径。 展开更多
关键词 紫杉醇 细胞周期阻断 细胞凋亡 食管癌细胞
在线阅读 下载PDF
泛素-蛋白酶体抑制剂对食管癌细胞增殖的影响 被引量:11
2
作者 张卫国 吴清明 +4 位作者 于皆平 王小虎 谢国建 童强 刘重贞 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期355-356,共2页
关键词 泛素-蛋白酶体 食管癌细胞 P27KIP1
在线阅读 下载PDF
bcl-2核酶与Bax在诱导食管癌细胞凋亡中的协同作用 被引量:8
3
作者 彭玮丹 张杰 +3 位作者 惠宏襄 许彦鸣 杨安钢 王成济 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 2000年第6期827-831,共5页
为了同时调节二种凋亡相关蛋白的表达诱导肿瘤细胞凋亡 ,探索肿瘤基因治疗的可能性 ,同时转入可诱导表达的特异性切割 bcl- 2的核酶基因及 bax基因 ,间接免疫荧光标记法检测 Bcl- 2及Bax蛋白的表达量 ,用 TUNEL、流式细胞术及琼脂糖凝... 为了同时调节二种凋亡相关蛋白的表达诱导肿瘤细胞凋亡 ,探索肿瘤基因治疗的可能性 ,同时转入可诱导表达的特异性切割 bcl- 2的核酶基因及 bax基因 ,间接免疫荧光标记法检测 Bcl- 2及Bax蛋白的表达量 ,用 TUNEL、流式细胞术及琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡 .共转染后 Bcl- 2蛋白表达下降 ,同时 Bax蛋白表达升高 ,导致 30 %左右细胞凋亡 ,并可使细胞对紫杉醇的敏感度增加近4倍 ,使紫杉醇有效作用时间缩短近一倍 .同时调节二个凋亡相关基因可导致细胞凋亡 ,并能有效促进化疗药物诱导的凋亡 .同时校正多个基因的异常表达 ,比仅仅改变单个基因可更有效地达到治疗肿瘤的目的 . 展开更多
关键词 BCL-2 BAX 凋亡 基因治疗 食管癌细胞
在线阅读 下载PDF
顺铂通过激活p53信号通路抑制人食管癌细胞的生存 被引量:10
4
作者 古春萍 阙富昌 +2 位作者 李亦蕾 刘叔文 余乐 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期90-94,共5页
研究顺铂抑制人食管癌细胞生存的作用及其机制。细胞活力实验检测顺铂对食管癌亲代细胞EC109及耐药细胞EC109/CDDP的杀伤作用。Western blot检测顺铂处理后食管癌亲代细胞EC109及耐药细胞EC109/CDDP的p53和Phospho-p53(Ser15)的蛋白表... 研究顺铂抑制人食管癌细胞生存的作用及其机制。细胞活力实验检测顺铂对食管癌亲代细胞EC109及耐药细胞EC109/CDDP的杀伤作用。Western blot检测顺铂处理后食管癌亲代细胞EC109及耐药细胞EC109/CDDP的p53和Phospho-p53(Ser15)的蛋白表达。克隆存活实验检测顺铂单独及联合p53抑制剂Pifithrin-α对食管癌亲代细胞EC109及耐药细胞EC109/CDDP生存的影响。实验结果显示,与亲代细胞EC109比较,耐药细胞EC109/CDDP保持了对顺铂的耐药性,IC50分别是(20.4±4.4)μmol/L和(5.7±0.1)μmol/L。在亲代和耐药人食管癌细胞,顺铂不改变p53蛋白的表达,但增加了p53蛋白在Ser15位磷酸化水平。顺铂抑制了EC109及耐药细胞EC109/CDDP细胞的生存能力,而p53抑制剂Pifithrin-α在亲代细胞和耐药细胞不同程度的拮抗了顺铂的这一作用。顺铂通过激活p53信号通路,抑制了人食管癌细胞的生存。 展开更多
关键词 顺铂 P53 食管癌细胞
在线阅读 下载PDF
藤梨根提取物与奥沙利铂在诱导人食管癌细胞Ec9706细胞凋亡中的协同作用 被引量:9
5
作者 党辉 关徐涛 +3 位作者 宋锐 王冰 王涛 高萍 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2017年第2期286-289,共4页
目的:观察藤梨根提取物与第三代铂类奥沙利铂(L-OHP)对人食管癌Ec9706细胞株增殖的影响。方法:分别应用藤梨根正丁醇提取物与L-OHP单独应用以及联合应用于人食管癌Ec9706细胞株,并应用MTT法检测食管癌Ec9706细胞的抑制率,并且应用显微... 目的:观察藤梨根提取物与第三代铂类奥沙利铂(L-OHP)对人食管癌Ec9706细胞株增殖的影响。方法:分别应用藤梨根正丁醇提取物与L-OHP单独应用以及联合应用于人食管癌Ec9706细胞株,并应用MTT法检测食管癌Ec9706细胞的抑制率,并且应用显微镜在镜下观察食管癌细胞株的形态变化;并且对细胞的凋亡率和细胞周期使用流式技术进行检测,且对食管癌细胞Ec9706株应用免疫细胞化学技术检测中细胞株内Bcl-2和Survivin蛋白的表达水平。结果:藤梨根提取物单用、奥沙利铂单用、以及联合应用均可对食管癌细胞Ec9706的增殖起到抑制作用。通过显微镜下观察食管癌细胞株发现Ec9706细胞的形态发生了改变,并且凋亡比率也显著增加;且藤梨根提取物与L-OHP连用后能起到协同增效的作用。而应用藤梨根提取物后食管癌细胞Ec9706中Bcl-2和Survivin蛋白的表达水平均受到了抑制。连用L-OHP后两种蛋白的阳性率表达均进一步降低。结论:藤梨根正丁醇提取物能显著抑制人食管癌细胞Ec9706细胞的增殖并且与L-OHP联用可有协同增效的作用,抑制作用明显增强,可能机制与Bcl-2和Survivin蛋白的下调有关。 展开更多
关键词 藤梨根提取物 奥沙利铂 食管癌细胞Ec9706细胞 BCL-2
在线阅读 下载PDF
NGAL蛋白诱导食管癌细胞发生自噬 被引量:4
6
作者 张丕显 方王楷 +10 位作者 许丽艳 蒋纪恺 沈忠英 杜则澎 陆晓峰 周飞 谢剑君 吴炳礼 崔有宏 谢东 李恩民 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第8期978-986,共9页
以往研究证明,中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白NGAL(neutrophil gelatinase-associated lipocalin)与食管癌密切相关,改变NGAL表达能够对癌细胞的形态结构产生明显影响,但确切的作用机制不明.在酵母细胞中表达NGAL蛋白,柱层析分离纯化.筛... 以往研究证明,中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白NGAL(neutrophil gelatinase-associated lipocalin)与食管癌密切相关,改变NGAL表达能够对癌细胞的形态结构产生明显影响,但确切的作用机制不明.在酵母细胞中表达NGAL蛋白,柱层析分离纯化.筛选NGALR(NGAL receptor)高表达与弱表达的人食管癌细胞系EC1.71和EC109作为实验细胞模型.5-FAM标记NGAL蛋白,加入到细胞培养上清中,对比研究NGAL蛋白入胞情况、细胞形态学改变、细胞自噬体产生、自噬相关基因表达、细胞内铁离子与铁蛋白水平以及相关细胞信号转导激酶的活性等.结果表明,NGAL蛋白可经由内吞途径进入食管癌细胞发挥作用,致使细胞发生典型的自噬性形态结构变化,自噬体大量产生,自噬相关基因的表达发生相应变化,ERK被激活,但细胞内的铁离子与铁蛋白未受明显影响.上述结果提示,诱导细胞发生自噬是外源性NGAL蛋白经由内吞途径进入食管癌细胞发挥作用的机制之一,与NGAL蛋白跨膜转铁未见直接关联,而ERK信号转导途径可能参与了这一过程. 展开更多
关键词 NGAL NGALR 自噬 细胞周期 蛋白质内吞 食管癌细胞
在线阅读 下载PDF
利用染色体区段混合BAC探针鉴定食管癌细胞中的染色体畸变 被引量:3
7
作者 郝佳洁 王春丽 +5 位作者 顾文跃 程潇钰 张钰 徐昕 蔡岩 王明荣 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期558-565,共8页
染色体畸变是恶性肿瘤细胞的重要遗传学特征,文章旨在应用BAC DNA克隆鉴定食管癌细胞中的染色体臂和染色体区段的畸变。针对染色体各区段选取5~10个1 Mb BAC DNA,分别混合制备成特定染色体区段的BAC DNA混合克隆,然后将染色体臂上覆盖... 染色体畸变是恶性肿瘤细胞的重要遗传学特征,文章旨在应用BAC DNA克隆鉴定食管癌细胞中的染色体臂和染色体区段的畸变。针对染色体各区段选取5~10个1 Mb BAC DNA,分别混合制备成特定染色体区段的BAC DNA混合克隆,然后将染色体臂上覆盖所有区段的上述混合克隆进一步混合制备成特定染色体臂BAC DNA混合克隆。利用简并寡核苷酸引物聚合酶链反应(Degenerate oligonucleotide primed PCR, DOP-PCR)标记染色体臂探针,利用切口平移法(Nick translation)标记染色体区段探针,并对食管癌细胞中期染色体进行荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization, FISH)分析。正常人外周血淋巴细胞中期染色体FISH结果显示,上述方法标记的探针具有较高的特异性。进一步利用染色体臂混合探针,确定了多个食管癌细胞中的染色体重排所涉及的特定染色体臂;利用染色体区段混合探针,鉴定出KYSE140的t(1q;7q)衍生染色体中1q上的断点范围位于1q32-q41。文章成功建立了1 Mb BAC DNA混合克隆探针标记技术,并鉴定出多个食管癌细胞中的染色体臂和染色体区段畸变,不仅为利用 M-FISH 技术鉴定肿瘤细胞中的染色体畸变提供了更为准确的方法,而且还可能进一步将该法推广应用于恶性血液病的核型分析以及产前诊断。 展开更多
关键词 染色体畸变 BAC DNA 染色体臂和区段 荧光原位杂交 食管癌细胞
在线阅读 下载PDF
蟾毒灵抑制NF-κB引起人食管癌细胞凋亡 被引量:6
8
作者 王晶晶 王巍东 +1 位作者 康小红 寇小格 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第17期2784-2787,共4页
目的:观察蟾毒灵对人食管癌ECA109细胞生长的影响,探讨蟾毒灵抑制食管癌细胞抗肿瘤作用的可能机制。方法:CCK-8法测定蟾毒灵对人食管癌ECA109细胞增殖的影响;流式细胞术检测蟾毒灵对细胞凋亡的影响;Western blot法检测蟾毒灵作用于人食... 目的:观察蟾毒灵对人食管癌ECA109细胞生长的影响,探讨蟾毒灵抑制食管癌细胞抗肿瘤作用的可能机制。方法:CCK-8法测定蟾毒灵对人食管癌ECA109细胞增殖的影响;流式细胞术检测蟾毒灵对细胞凋亡的影响;Western blot法检测蟾毒灵作用于人食管癌ECA109后,NF-κBp65,ERK,P-ERK1/2及Caspase-3、Cleaved Caspase-3,PARP、Cleaved PARP蛋白表达的变化情况。结果:蟾毒灵对人食管癌ECAl09细胞有明显抑制增殖的作用,并呈现出时间和浓度依赖性;蟾毒灵能诱导ECA109细胞凋亡;蟾毒灵能使ECA109细胞中凋亡相关蛋白Cleaved Caspas-3及Cleaved PARP蛋白表达随着药物浓度的增加而明显增加,p-ERK1/2,NF-κBp65蛋白的表达随着药物浓度的增加而减少。结论 :蟾毒灵可显著抑制人食管癌ECA109细胞的增殖,促使肿瘤细胞凋亡,其作用机制可能与抑制ERK/NF-κB通路有关。 展开更多
关键词 蟾毒灵 食管癌细胞 NF-ΚB 细胞凋亡
在线阅读 下载PDF
SMC4在人食管癌组织中的表达及对食管癌细胞增殖、侵袭和转移的作用机制研究 被引量:5
9
作者 张冉 石长林 +1 位作者 苟小军 何鸿晏 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期1339-1345,共7页
目的:探讨SMC4在人食管癌(EC)组织中的表达及其对EC细胞增殖、侵袭和转移的作用机制。方法:收集2018年5月至2019年4月我院手术切除的EC组织标本及其癌旁正常组织标本各114例,免疫组化法检测人EC组织和正常食管组织中SMC4表达,并分析其... 目的:探讨SMC4在人食管癌(EC)组织中的表达及其对EC细胞增殖、侵袭和转移的作用机制。方法:收集2018年5月至2019年4月我院手术切除的EC组织标本及其癌旁正常组织标本各114例,免疫组化法检测人EC组织和正常食管组织中SMC4表达,并分析其与食管癌临床病理学参数的关系,采用细胞转染技术构建稳定下调SMC4的KYSE170和Eca-109细胞(KYSE170-siSMC4组/Eca-109-siSMC4组),以未经处理的KYSE170和Eca-109细胞(Control组)转染siNC的KYSE170/Eca-109细胞(KYSE170-siNC组/Eca-109-siNC组)作为对照,MTT法检测KYSE170和Eca-109细胞增殖;Transwell小室法检测转染后KYSE170和Eca-109细胞侵袭;划痕实验检测转染后KYSE170和Eca-109细胞迁移;IFA检测SMC4对上皮间质转化(EMT)相关分子N-cadherin表达的影响,Western blot检测细胞中PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt蛋白表达。结果:SMC4在食管癌组织中的阳性表达率高于正常食管黏膜组织(P<0.001);SMC4与肿瘤直径、TNM临床分期、浸润程度、淋巴结转移及组织分化程度密切相关(P<0.05);与Control组和KYSE170-siNC组相比,KYSE170-siSMC4组细胞在第4、5和6天增殖能力明显下降(P<0.05),Eca-109-siSMC4组4 d、5 d和6 d增殖能力明显低于Control组和Eca-109-siNC组(P<0.05);KYSE170-siSMC4组穿膜细胞数显著少于Control组和KYSE170-siNC组(P<0.05),Eca-109-siSMC4组穿膜细胞数明显少于Control组和Eca-109-siNC组(P<0.05);KYSE170-siSMC4组细胞迁移率明显低于Control组和KYSE170-siNC组(P<0.05),Eca-109-siSMC4组细胞迁移率明显低于Control组和Eca-109-siNC组(P<0.05);共聚焦显微镜观察发现,下调SMC4后,与Control组和KYSE170-siNC相比,KYSE170-siSMC4细胞N-cadherin表达明显下降(P<0.05);KYSE170-siSMC4组p-PI3K和p-Akt表达明显低于Control组和KYSE170-siNC组(P<0.05)。结论:下调SMC4表达可抑制人EC细胞增殖、侵袭和转移,并通过降低EMT相关分子N-cadherin表达抑制EMT,其作用机制可能与PI3K/AKT信号通路有关。 展开更多
关键词 染色体结构维持蛋白4 食管癌细胞 增殖 侵袭 转移
在线阅读 下载PDF
食管癌细胞NGAL基因-152~-60区段存在TPA反应元件 被引量:3
10
作者 许丽艳 李恩民 +5 位作者 牛永东 蔡唯佳 袁华敏 常静霞 沈忠英 曾毅 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第2期140-148,共9页
以往研究发现,在TPA诱导永生化食管上皮细胞癌变中中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(neutrophilgelatinase-associatedlipocalin,NGAL)基因过表达,但过表达机制不明.最近研究提示,食管癌细胞NGAL启动子及其邻近区域可能存在着TPA反应元件.... 以往研究发现,在TPA诱导永生化食管上皮细胞癌变中中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(neutrophilgelatinase-associatedlipocalin,NGAL)基因过表达,但过表达机制不明.最近研究提示,食管癌细胞NGAL启动子及其邻近区域可能存在着TPA反应元件.为了对NGAL的这一TPA反应元件进行更准确定位,采用PCR法结合嵌套缺失实验从食管癌细胞中克隆了NGAL5′侧翼区-152~+84、-140~+84、-78~+84、-59~+84、-50~+84、-41~+84、-37~+84、-29~+84和-10~+84等片段,并定向插入pGLB、pGLP或pGLE等萤火虫荧光素酶报告基因表达载体中,构建了pGLB-152、pGLP-152、pGLE-152、pGLB-140、pGLB-78、pGLB-59、pGLB-50、pGLB-41、pGLB-37、pGLB-29和pGLB-10等系列报告基因表达载体.将上述报告基因表达载体分别同pRL-TK共转染食管癌细胞EC109,并用TPA刺激,检测TPA刺激转染EC109的相对荧光素酶活力,综合判定NGAL-152~+84区不同长度片段的TPA反应性,对NGAL启动子区的TPA反应元件给予进一步分段定位.结果表明,NGAL启动子区的TPA反应元件位于-152~-60区段,而且应答TPA刺激的反应能力很强.生物信息学分析结果显示,NGAL启动子区所存在的TPA反应元件很可能是一种新结构类型.研究说明,NGAL在DNA序列上有应答TPA刺激的结构基础,将有助于深入到分子水平揭示TPA诱导永生化食管上皮细胞癌变中NGAL过表达机制,也有助于进一步认识TPA信号细胞内传递途径网络在肿瘤发生发展中的作用. 展开更多
关键词 中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白基因 食管癌细胞 基因表达调控 TPA反应元件
在线阅读 下载PDF
转录因子Sp1和Sp3对食管癌细胞ezrin基因的表达调控作用 被引量:3
11
作者 高书颖 李恩民 +2 位作者 杜则澎 陆晓峰 许丽艳 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期695-698,共4页
目的:明确转录因子Sp1和Sp3对食管癌细胞ezrin基因的表达调控作用。方法:将转录因子表达载体CMV-Sp1和CMV-Sp3分别转染食管癌EC109细胞,采用定量RT-PCR和Western blot技术检测过表达转录因子Sp1和Sp3对ezrinmR-NA和蛋白表达的影响;将ez... 目的:明确转录因子Sp1和Sp3对食管癌细胞ezrin基因的表达调控作用。方法:将转录因子表达载体CMV-Sp1和CMV-Sp3分别转染食管癌EC109细胞,采用定量RT-PCR和Western blot技术检测过表达转录因子Sp1和Sp3对ezrinmR-NA和蛋白表达的影响;将ezrin基因启动子驱动的报告基因表达载体与内参照质粒pRL-TK和转录因子表达载体共转染EC109细胞,采用双荧光素酶报告基因分析系统检测转录因子Sp1和Sp3对ezrin基因启动子的激活作用以及这种激活作用是否依赖于ezrin基因的Sp1结合位点-75/-69。结果:过表达转录因子Sp1和Sp3显著提高EC109细胞ezrinmRNA和蛋白表达水平以及启动子活性。Sp1和Sp3增强ezrin基因启动子活性的作用位点不同,只有Sp1通过-75/-69位点调控ezrin基因启动子活性。结论:转录因子Sp1和Sp3可调控EC109细胞ezrin基因的表达。 展开更多
关键词 EZRIN基因 食管癌细胞 转录因子 双荧光素酶报告基因分析系统
在线阅读 下载PDF
六君子汤对食管癌细胞株EC9706致血管生成的影响 被引量:9
12
作者 周凌 尹素改 +2 位作者 吴耀松 王慧慧 陈玉龙 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期1165-1169,共5页
目的研究六君子汤对食管癌血管生成的影响。方法 MTT法检测六君子汤醇提物对食管癌细胞株EC9706生长抑制作用,收集其500μg/m L质量浓度的EC9706细胞条件培养基用于鸡胚绒毛尿囊膜的血管生成、人脐静脉内皮细胞增殖、迁移和小管形成的... 目的研究六君子汤对食管癌血管生成的影响。方法 MTT法检测六君子汤醇提物对食管癌细胞株EC9706生长抑制作用,收集其500μg/m L质量浓度的EC9706细胞条件培养基用于鸡胚绒毛尿囊膜的血管生成、人脐静脉内皮细胞增殖、迁移和小管形成的观察。ELISA法检测EC9706细胞和人脐静脉内皮细胞培养基上清中VEGF和IL-6含有量。结果六君子汤醇提物可明显抑制EC9706细胞增殖,具一定剂量依赖性,其IC50值为505.28μg/m L。六君子汤醇提物可减少EC9706细胞条件培养基所致鸡胚绒毛尿囊膜血管生成、人脐静脉内皮细胞增殖、迁移和小管形成。六君子汤醇提物可减少EC9706细胞和内皮细胞IL-6及内皮细胞VEGF分泌。结论六君子汤醇提物可能通过干预EC9706细胞信号通路从而抑制血管生成的效应。 展开更多
关键词 六君子汤 食管癌细胞株EC9706 人脐静脉内皮细胞 鸡胚绒毛尿囊膜 血管生成 VEGF IL-6
在线阅读 下载PDF
一氧化氮诱导食管癌细胞线粒体DNA编码基因过表达 被引量:2
13
作者 李恩民 许丽艳 +2 位作者 杨帆 袁兰 陈跃 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第3期378-384,共7页
以人食管癌细胞系EC10 9作为驱赶方 (driver) ,以被一氧化氮 (nitricoxid ,NO)诱导的EC10 9作为实验方 (tester) ,应用抑制消减杂交 (suppressionsubtractivehybridization ,SSH)、反向mRNA斑点印迹和RNA印迹等技术手段研究了NO诱导的... 以人食管癌细胞系EC10 9作为驱赶方 (driver) ,以被一氧化氮 (nitricoxid ,NO)诱导的EC10 9作为实验方 (tester) ,应用抑制消减杂交 (suppressionsubtractivehybridization ,SSH)、反向mRNA斑点印迹和RNA印迹等技术手段研究了NO诱导的食管癌细胞中基因的过表达情况 .然后对过表达基因的表达序列标签 (expressedsequencetag ,EST)实施序列测定 ,并与GenBank进行BLAST同源性比较和序列突变分析 .结果先后两次从 6 9个SSH阳性克隆中共鉴定出 6个线粒体DNA (mitochondrialDNA ,mtDNA)编码的基因 ,即ND 4L、ND 4、COX 2、Lys tRNA、ATP 8和ATP 6 .表明NO可以诱导食管癌细胞mtDNA编码的基因过表达 .另外 ,在ND 4L/ND 4基因的片段 (10 736~ 114 4 9)上发现了三处同型单核苷酸置换 (10 872T→C ,110 0 1A→G ,11346A→G) ,在COX 2 /Lys tRNA/ATP 8/ATP 6基因片段 (80 11~ 85 89)上发现了一处单核苷酸缺失(8380A) .氨基酸序列分析表明 ,在NO诱导的EC10 9中可能存在着一种结构异常的ATP 8肽链 (一条在N端被截短的只有 11个氨基酸残基的肽链 ,而正常的ATP 8肽链为 6 8个氨基酸残基 ) . 展开更多
关键词 一氧化氮 诱导 食管癌细胞 线粒体DNA编码基因 基因过表达 抑制消减杂交
在线阅读 下载PDF
转染IL-27基因的食管癌细胞在裸鼠体内的抗肿瘤作用 被引量:2
14
作者 刘丽华 单保恩 +2 位作者 邵丽丽 艾军 王士杰 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期119-122,共4页
目的:将小鼠IL-27基因转染人食管癌细胞株,研究其在裸鼠体内的抗肿瘤活性。方法:以逆转录病毒为载体,将IL-27基因转染人食管癌细胞株Eca109,获得表达IL-27的阳性细胞克隆(Eca109/IL-27),用ELISA法检测细胞IL-27的分泌。将Eca109/IL-27... 目的:将小鼠IL-27基因转染人食管癌细胞株,研究其在裸鼠体内的抗肿瘤活性。方法:以逆转录病毒为载体,将IL-27基因转染人食管癌细胞株Eca109,获得表达IL-27的阳性细胞克隆(Eca109/IL-27),用ELISA法检测细胞IL-27的分泌。将Eca109/IL-27移植裸鼠腹腔,观察瘤细胞的成瘤性和裸鼠的生存期。用RT-PCR检测IL-27基因在裸鼠体内瘤组织中的表达,用流式细胞仪检测CD204表达、细胞周期和细胞凋亡变化。结果:成功建立了表达IL-27基因的人食管癌细胞株Eca109/IL-27,该细胞培养上清中IL-27含量为(137.73±7.00)pg/ml,而Eca109/LXSN和Eca109细胞培养上清中未检出IL-27(P<0.01),但Eca109/IL-27与Eca109/LXSN和Eca109细胞周期和细胞凋亡率无明显差异(P>0.05)。将Eca109/IL-27、Eca109/LXSN和Eca109细胞分别接种裸鼠腹腔15天后,各组裸鼠均于腹腔形成多数瘤结节,Eca109/IL-27组明显少于Eca109/LXSN和Eca109细胞组(P<0.05);Eca109/IL-27组裸鼠的生存期(35天时均无死亡)明显长于Eca109/LXSN和Eca109细胞组[分别为(23.33±1.52)、(24.00±1.37)天](P<0.01);Eca109/IL-27组肿瘤组织中有p28和EBI3亚基基因表达,而Eca109/LXSN和Eca109细胞组瘤组织中未见表达(P<0.01);其CD204表达水平、细胞凋亡率也明显高于接种Eca109/LXSN与Eca109细胞组(P<0.05);G0/G1和G2/M期细胞增多,S期细胞明显减少,与接种Eca109/LXSN和Eca109细胞组比较均有显著差异(P<0.05)。结论:IL-27可于体内促进肿瘤细胞凋亡,阻滞细胞周期发展,提高CD204的表达,延长生存期,发挥抗肿瘤免疫活性。 展开更多
关键词 IL-27 食管癌细胞 裸鼠 抗肿瘤活性
在线阅读 下载PDF
大蒜素及前药对人食管癌细胞Eca9706的增殖抑制及其凋亡基因表达的影响 被引量:11
15
作者 常全娥 苟萍 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期1117-1124,共8页
目的研究大蒜素和它的前药(蒜氨酸+蒜氨酸酶)对食管癌细胞Eca 9706的增殖抑制及对凋亡基因表达的影响。方法用大蒜素和大蒜素前药处理食管癌细胞Eca 9706,采用MTT法检测癌细胞的增殖抑制作用,实时定量RT-PCR检测凋亡基因的表达。结果大... 目的研究大蒜素和它的前药(蒜氨酸+蒜氨酸酶)对食管癌细胞Eca 9706的增殖抑制及对凋亡基因表达的影响。方法用大蒜素和大蒜素前药处理食管癌细胞Eca 9706,采用MTT法检测癌细胞的增殖抑制作用,实时定量RT-PCR检测凋亡基因的表达。结果大蒜素及其前药对食管癌细胞增殖抑制呈现时间和剂量相关性,大蒜素前药的抑制效果优于大蒜素。实时定量RT-PCR表明大蒜素和它的前药上调了癌细胞bax和caspase-3 mRNA的表达,下调survivin、突变型p53和bcl-2 mRNA的表达。结论大蒜素及其前药抑制食管癌细胞增殖和诱导凋亡可能是通过线粒体通路实现。 展开更多
关键词 大蒜素 大蒜素前药 食管癌细胞 细胞增殖 细胞凋亡
在线阅读 下载PDF
转染NF-κB抑制物基因对食管癌细胞系生物活性的影响 被引量:4
16
作者 李健 杜芳 +2 位作者 齐义军 冯常炜 王立东 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2006年第19期1094-1097,共4页
目的:将NF-κB抑制物基因pcDNA3/mIκBαS32A/S36A转染食管癌细胞株EC1,观察对NF-κB因子活性及对细胞生长的影响。方法:采用脂质体转染法将pcDNA3/mIκBαS32A/S36A质粒转染入EC1细胞进行瞬时表达,检测其对EC1细胞的影响,用Westernblot... 目的:将NF-κB抑制物基因pcDNA3/mIκBαS32A/S36A转染食管癌细胞株EC1,观察对NF-κB因子活性及对细胞生长的影响。方法:采用脂质体转染法将pcDNA3/mIκBαS32A/S36A质粒转染入EC1细胞进行瞬时表达,检测其对EC1细胞的影响,用Westernblot和RT-PCR方法检测转染前后NF-κBp65、NF-κBp50蛋白和mRNA表达水平的变化。结果:与转染pcDNA3.0质粒和未转染质粒组比较,转染pcDNA3.0/mIκBαS32A/S36A质粒EC1细胞的生长速度受到明显抑制,P<0.05。转染pcDNA3/mIκBαS32A/S36A质粒的EC1细胞,在0、24、48、96小时未见NF-κBp65、NF-κBp50蛋白和mRNA表达,而转染pcDNA3.0质粒EC1细胞可见核内NF-κBp65和NF-κBp50蛋白表达。结论:转染NF-κB抑制物基因IκBα后可抑制EC1细胞的生长,并抑制细胞NF-κBp65、NF-κBp50基因的表达,该结果提示调节NF-κB的表达可能是食管癌基因治疗的靶点。 展开更多
关键词 核转录因子NF—kB 食管癌细胞 质粒转染
在线阅读 下载PDF
Rock2和Wnt11在食管癌细胞系中的表达及意义 被引量:4
17
作者 宁超 马遇庆 杜靖 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2017年第1期10-13,共4页
目的早期食管癌临床症状常不明显,肿瘤标志物的深入研究对食管癌早期诊断极为重要。文中通过研究体外特定细胞株[Eca-109及人食管正常上皮细胞(HEEC)]中Rock2和Wnt11蛋白表达量,分析各蛋白的表达与食管癌的关系。方法培养Eca-109和HEEC... 目的早期食管癌临床症状常不明显,肿瘤标志物的深入研究对食管癌早期诊断极为重要。文中通过研究体外特定细胞株[Eca-109及人食管正常上皮细胞(HEEC)]中Rock2和Wnt11蛋白表达量,分析各蛋白的表达与食管癌的关系。方法培养Eca-109和HEEC细胞株,RT-q PCR和Western blot技术检测Rock2和Wnt11在细胞株中的表达水平。结果RT-q PCR检测结果显示,与HEEC相比,Eca-109中Rock2 mRNA、Wnt11 mRNA表达水平明显升高[(1.000±0.000)vs(4.955±0.539),(1.000±0.000)vs(2.925±0.230),P<0.01]。Western blot检测显示Rock2和Wnt11蛋白在Eca-109中的表达较HEEC均升高[(955.000±21.628)vs(778.844±102.193),(2 175.316±145.623)vs(1 312.233±50.734),P<0.05]。结论 Rock2和Wnt11表达增高可能是食管鳞状细胞癌转移的标志。 展开更多
关键词 食管癌细胞 ROCK2 Wnt11
在线阅读 下载PDF
TRAF4沉默对食管癌细胞Eca-109增殖、凋亡及细胞周期的影响 被引量:2
18
作者 蒋鸣 翟祥军 +1 位作者 徐池 周国仁 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期389-393,401,共6页
目的探讨小干扰RNA(siRNA)靶向沉默肿瘤坏死因子受体相关因子4(TRAF4)基因表达对人食管癌细胞恶性行为的影响。方法选取对数生长期Eca-109细胞并行脂质体法高效转染2条靶向沉默TRAF4的siRNA(siTRAF4-1、siTRAF4-2),采用实时定量PC... 目的探讨小干扰RNA(siRNA)靶向沉默肿瘤坏死因子受体相关因子4(TRAF4)基因表达对人食管癌细胞恶性行为的影响。方法选取对数生长期Eca-109细胞并行脂质体法高效转染2条靶向沉默TRAF4的siRNA(siTRAF4-1、siTRAF4-2),采用实时定量PCR检测转染后的TRAF4 mRNA水平以筛选沉默效果较好的siRNA为沉默组,同时设阴性对照组(转染阴性siRNA序列)和空白对照组。采用噻唑蓝(MTT)法检测转染24、48、72、96h的吸光度值以计算各组增殖抑制率,AnnexinⅤ-FITC/PI双染、Caspase-3FITC单染或PI单染流式细胞术检测转染后的凋亡率、Caspase-3活化率和细胞周期分布情况。结果靶向沉默TRAF4 24-96h内,转染siTRAF4-1、siTRAF4-2的Eca-109细胞中TRAF4mRNA水平均低于未转染或转染对照siRNA的细胞,且转染siTRAF4-1、siTRAF4-2后的沉默率均高于转染对照siRNA的细胞(均P〈0.05);后续试验选取沉默率较高的siTRAF4-1进行研究。与空白对照组和阴性对照组相比,沉默组的增殖抑制率、凋亡率及Caspase-3活化率均升高,差异有统计学意义(均P〈0.05);沉默组转染96h的G0/G1期细胞比例高于空白对照组和阴性对照组,而S、G2/M期细胞比例低于其余两组,以上差异均有统计学意义(均P〈0.05);空白对照组和阴性对照组以上指标的差异均无统计学意义(均P〉0.05)。结论通过siRNA靶向沉默TRAF4基因表达的效果较好,可抑制细胞增殖并诱导凋亡、Caspase-3活化和细胞周期G0/G1期阻滞,为食管癌靶向治疗提供了方法学基础。 展开更多
关键词 小干扰RNA 肿瘤坏死因子受体相关因子4 食管癌细胞Eca-109 增殖 凋亡
在线阅读 下载PDF
吡唑啉酮衍生物镉(Ⅱ)配合物诱导食管癌细胞凋亡与Bax和Bcl-2的关系 被引量:1
19
作者 吴婷 张富春 +1 位作者 刘浪 孙素荣 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期1294-1297,共4页
目的研究吡唑啉酮衍生物镉(Ⅱ)配合物(Ls-17)对人食管癌细胞(Eca-109)的凋亡诱导作用及对细胞Bax和Bcl-2蛋白表达的影响。方法MTT法检测Ls-17对Eca-109细胞的增殖抑制作用,流式细胞术检测细胞凋亡、周期分布变化及线粒体膜电位的改变,ca... 目的研究吡唑啉酮衍生物镉(Ⅱ)配合物(Ls-17)对人食管癌细胞(Eca-109)的凋亡诱导作用及对细胞Bax和Bcl-2蛋白表达的影响。方法MTT法检测Ls-17对Eca-109细胞的增殖抑制作用,流式细胞术检测细胞凋亡、周期分布变化及线粒体膜电位的改变,caspase活性法检测caspase-3和9的变化,Western blot法分析Bax和Bcl-2蛋白的表达。结果Ls-17对Eca-109细胞增殖抑制的IC50值为25.12 mg·L^(-1),使细胞周期阻滞在G2/M期而导致细胞凋亡;能降低线粒体膜电位水平并激活caspase-3和9,使Bax/Bcl-2的比值增大。结论Ls-17能够抑制Eca-109细胞增殖和诱导细胞凋亡,其机制可能与下调Bcl-2的表达,使Bax/Bcl-2的比值升高有关。 展开更多
关键词 吡唑啉酮衍生物 食管癌细胞 细胞增殖 细胞凋亡 CASPASE BAX BCL-2
在线阅读 下载PDF
共培养体系中IL-15通过激活NK细胞ULBP1/NKG2D信号抑制食管癌细胞的迁移和侵袭 被引量:1
20
作者 董良 李洪霖 +4 位作者 杨清 段铮 孙明月 许彦超 马纯政(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期466-471,477,共7页
目的:探讨IL-15对食管癌细胞和自然杀伤(NK)细胞共培养体系中NK细胞活性以及对食管癌细胞迁移和侵袭的影响和机制。方法:qRT-PCR和Western blot检测人正常食管上皮细胞(HEEC)和食管癌细胞系TE-1中IL-15水平。TE-1与NK细胞共培养,共培养... 目的:探讨IL-15对食管癌细胞和自然杀伤(NK)细胞共培养体系中NK细胞活性以及对食管癌细胞迁移和侵袭的影响和机制。方法:qRT-PCR和Western blot检测人正常食管上皮细胞(HEEC)和食管癌细胞系TE-1中IL-15水平。TE-1与NK细胞共培养,共培养体系分为对照组(无处理)、IL-15组(0.2、0.4、0.8μg/ml的IL-15)、IL-15+anti-NKG2D组[UL16结合蛋白/自然杀伤组蛋白2D(ULBP1/NKG2D)的阻断剂anti-NKG2D联合IL-15(0.8μg/ml)]、anti-NKG2D组、IL-15+anti-ASIALO-GM1组[NK细胞抑制剂anti-ASIALO-GM1联合IL-15(0.8μg/ml)]及anti-ASIALO-GM1组。细胞划痕愈合实验和Transwell侵袭实验检测TE-1细胞的迁移和侵袭能力,CCK-8法检测NK细胞增殖率,Western blot检测各组NK细胞表面ULBP1/NKG2D表达,免疫共沉淀技术检测NKG2D与ULBP1的相互作用。结果:TE-1细胞中IL-15水平低于HEEC细胞(P<0.05)。0.2、0.4、0.8μg/ml IL-15处理共培养体系提高NK细胞增殖率,但降低TE-1细胞的迁移率和侵袭率(均P<0.05)。在TE-1与NK细胞的共培养体系中,IL-15组(0.8μg/ml)NK细胞膜蛋白ULBP1和NKG2D水平较对照组上调(均P<0.05);anti-NKG2D抑制了NKG2D表达,并抑制了NKG2D与ULBP1的相互作用,与IL-15(0.8μg/ml)组相比,IL-15+anti-NKG2D组NKG2D表达水平和NK细胞增殖率均降低(均P<0.05),但TE-1细胞的迁移率和侵袭率升高(均P<0.05),且NK细胞抑制剂anti-ASIALO-GM1与anti-NKG2D的作用效果一致。结论:IL-15通过激活细胞表面ULBP1/NKG2D信号促进NK细胞活性,从而抑制食管癌细胞的迁移和侵袭。 展开更多
关键词 白介素-15 食管癌细胞 迁移 侵袭 自然杀伤细胞 自然杀伤组2成员D蛋白/配体1
在线阅读 下载PDF
上一页 1 2 4 下一页 到第
使用帮助 返回顶部