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靶序列富集多重PCR技术的发展及其应用被引量：8: 1; 作者邬旭龙肖璐 +5 位作者姜睿姣王印杨泽晓姚学萍张鹏飞张博《湖南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期172-176,共5页; 靶序列富集多重PCR(target enriched multiplex PCR,Tem–PCR)作为一种新型的分子生物学高通量检测技术,通过靶序列富集、靶序列加标签以及超级引物扩增3个阶段实现对靶标序列的大量扩增。靶序列富集多重PCR具有独特的反应过程,克服了... 展开更多; 关键词靶序列富集多重pcr 高通量生物技术公共卫生; 在线阅读下载PDF 职称材料

靶序列富集多重PCR-液相芯片联合检测4种常见呼吸道病毒的初步应用被引量：7: 2; 作者王洁王卫萍 +4 位作者胡毓安孙宁杨波夏正坤李晓军《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2016年第9期958-963,共6页; 目的呼吸道病毒是引起婴幼儿呼吸道感染的最主要病原体,为快速准确诊断其感染,文中建立一种基于液相芯片系统的4种常见呼吸道病毒快速分子检测方法,为有效防控其发生和流行提供有力手段。方法采集南京总医院儿科就诊的有急性呼吸道感染... 展开更多; 关键词呼吸道病毒靶序列富集多重-聚合酶链反应液相芯片技术[; 在线阅读下载PDF 职称材料

3种食源性致病菌Tem-PCR检测方法的建立被引量：17: 3; 作者刘忠梅徐义刚 +3 位作者曲敏莫春生刘新亮李苏龙《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第4期186-190,共5页; 应用靶序列富集多重聚合酶链式反应（t arget-enriched multiplex-polymerase chain reaction,Tem-PCR）技术建立金黄色葡萄球菌、沙门氏菌和志贺氏菌3种食源性致病菌的快速检测方法。分别以金黄色葡萄球菌fem A基因、沙门氏菌inv A基... 展开更多; 关键词靶序列富集多重pcr方法沙门氏菌金黄色葡萄球菌志贺氏菌; 在线阅读下载PDF 职称材料

31个SNP位点多重PCR扩增和芯片分型技术的建立及其法医学应用被引量：10: 4; 作者李莉李荣宇 +5 位作者李成涛柳燕林源阙庭志孙美倩李瑶《法医学杂志》 CAS CSCD 2005年第2期90-95,共6页; 目的对SNP基因分型芯片在个体识别中的应用价值进行研究。方法根据SNP不同等位基因的序列设计探针,制成分型芯片。采用4个复合PCR体系,用末端标记了Cy5的引物进行复合PCR扩增,产物与寡核苷酸探针进行杂交,根据杂交产生的荧光信号值确定... 展开更多; 关键词 SNP位点 pcr扩增法医学应用分型技术芯片非父排除率多重寡核苷酸探针等位基因应用价值个体识别家系调查亲子鉴定复合pcr 灵敏度分析基因型分布序列设计基因分型末端标记统计分析方法应用光信号 lng; 在线阅读下载PDF 职称材料

多重RT-PCR快速检测禽流感病毒的研究: 5; 作者秦春圃《生物技术通报》 CAS CSCD 2007年第2期118-118,共1页; 西北农林科技大学生物工程研究所陈思怀、湖北省农科院牧医研究所乔宪凤、华文君等6位科学工作者参考H1-H5；亚型禽流感病毒（AIV）的核蛋白（NP）基因序列以及H5、H6、H9亚型AIV血凝素（HA）基因，共设计4对引物，建立了2对引物扩增AIV... 展开更多; 关键词 pcr快速检测禽流感病毒多重 RT-pcr方法西北农林科技大学 H9亚型湖北省农科院基因序列; 在线阅读下载PDF 职称材料

分子鉴别诊断领域的革命性技术——Tem-PCR 被引量：7: 6; 作者韩卫宁韩健《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期184-186,共3页; 分子鉴别诊断由于其高效、快速的特点,在公共卫生领域和个体化医疗中将发挥越来越重要的作用。分子鉴别诊断需要敏感、特异、可靠的多重扩增技术作为支撑,靶序列富集多重PCR(Tem-PCR)正是这样一项技术,能在一个反应体系中同时对多种靶... 展开更多; 关键词靶序列富集多重pcr 分子鉴别诊断公共卫生; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名靶序列富集多重PCR技术的发展及其应用被引量：8: 1; 作者邬旭龙肖璐姜睿姣王印杨泽晓姚学萍张鹏飞张博; 机构四川农业大学动物医学院动物疫病与人类健康四川省重点实验室; 出处《湖南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期172-176,共5页; 基金 "十二.五"国家科技支撑计划项目(2013BAD12B04); 文摘靶序列富集多重PCR(target enriched multiplex PCR,Tem–PCR)作为一种新型的分子生物学高通量检测技术,通过靶序列富集、靶序列加标签以及超级引物扩增3个阶段实现对靶标序列的大量扩增。靶序列富集多重PCR具有独特的反应过程,克服了常规多重PCR扩增条件不兼容、扩增具有偏爱性等缺点,实现了对同一反应体系多种病原的同步检测,为临床病原鉴别诊断、基因分型、耐药基因等领域的研究提供了新思路,具有较大的发展前景。笔者对Tem–PCR的研究背景、反应原理、技术应用及试剂盒开发等进行综述,旨在为Tem–PCR的研究和发展提供参考依据,为中国应对公共卫生危机提供新思路。; 关键词靶序列富集多重pcr 高通量生物技术公共卫生; Keywords target enriched multiplex pcr（Tem–pcr） high-throughput biotechnology public health; 分类号 Q752 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名靶序列富集多重PCR-液相芯片联合检测4种常见呼吸道病毒的初步应用被引量：7: 2; 作者王洁王卫萍胡毓安孙宁杨波夏正坤李晓军; 机构南京军区南京总医院中心实验科南京军区南京总医院儿科; 出处《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2016年第9期958-963,共6页; 基金全军医学科技"十二五"科研项目(CWS129811298) 南京军区医学科技重大专项(14ZX17); 文摘目的呼吸道病毒是引起婴幼儿呼吸道感染的最主要病原体,为快速准确诊断其感染,文中建立一种基于液相芯片系统的4种常见呼吸道病毒快速分子检测方法,为有效防控其发生和流行提供有力手段。方法采集南京总医院儿科就诊的有急性呼吸道感染症状的患儿咽拭子标本120例及30例正常对照标本,分别纳入患儿组和对照组。针对A型流感病毒(Flu A)、B型流感病毒(Flu B)、呼吸道合胞病毒A型(RSVA)和B型(RSVB)的保守区序列分别设计并合成了特异性引物、探针和通用引物,构建4种病原体阳性参比品,通过对扩增和杂交条件的优化,建立了靶序列富集多重PCR(Tem-PCR)和Luminex液相芯片(x MAP)技术相结合的检测系统,并对该检测系统进行了特异性、灵敏度评价。收集以急性上呼吸道感染为主要表现的患儿咽拭子标本,用上述建立的方法进行检测分析,分别与单病毒基因荧光定量PCR检测方法及x TAG液相芯片法进行比对检测。结果建立了Flu A、Flu B、RSVA和RSVB4种呼吸道病毒的特异性快速分子检测方法且灵敏度可达10拷贝/μL。用快速分子检测方法和单病毒基因荧光定量PCR法对120例疑似患儿咽拭子标本进行检测,快速法阳性检出率为31.7%(38/120),荧光定量法阳性检出率为29.2%(35/120)。经一致性检验分析提示2种方法一致性较强(k>0.7)。部分标本同时采用x TAG液相芯片试剂盒进行检测,经一致性检验分析提示2种方法一致性较好(k>0.6)。结论临床的初步应用证实了4种常见呼吸道病毒快速分子检测方法具备灵敏、特异、快速等优点,为临床早期、准确判断呼吸道感染的病原体提供实验依据。; 关键词呼吸道病毒靶序列富集多重-聚合酶链反应液相芯片技术[; Keywords Respiratory viruses Target enriched multiplex pcr Luminex method; 分类号 R725.6 [医药卫生—儿科]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名3种食源性致病菌Tem-PCR检测方法的建立被引量：17: 3; 作者刘忠梅徐义刚曲敏莫春生刘新亮李苏龙; 机构黑龙江出入境检验检疫局哈尔滨商业大学食品工程学院; 出处《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第4期186-190,共5页; 基金公益性行业(质检)科研专项(201310126); 文摘应用靶序列富集多重聚合酶链式反应（t arget-enriched multiplex-polymerase chain reaction,Tem-PCR）技术建立金黄色葡萄球菌、沙门氏菌和志贺氏菌3种食源性致病菌的快速检测方法。分别以金黄色葡萄球菌fem A基因、沙门氏菌inv A基因和志贺氏菌ipa H基因为靶基因,设计3对特异性引物,并与通用引物连接组成Tem-PCR引物,通过反应条件优化,建立了Tem-PCR检测方法。结果显示,建立的Tem-PCR方法特异性强,对沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和志贺氏菌的检测灵敏度分别为1.1×10^3、2×10^3 CFU/m L和1.2×10^3 CFU/m L。Tem-PCR检测方法有效地解决了传统多重PCR引物扩增效率不均衡的问题。; 关键词靶序列富集多重pcr方法沙门氏菌金黄色葡萄球菌志贺氏菌; Keywords Tem-pcr assay Salmonella Staphyloc occus aureus Shigella; 分类号 Q789 [生物学—分子生物学] R155.5 [医药卫生—营养与食品卫生学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名31个SNP位点多重PCR扩增和芯片分型技术的建立及其法医学应用被引量：10: 4; 作者李莉李荣宇李成涛柳燕林源阙庭志孙美倩李瑶; 机构司法部司法鉴定科学技术研究所上海博星基因芯片有限公司; 出处《法医学杂志》 CAS CSCD 2005年第2期90-95,共6页; 基金国家科技部"十五"攻关项目(2001BA801B03); 文摘目的对SNP基因分型芯片在个体识别中的应用价值进行研究。方法根据SNP不同等位基因的序列设计探针,制成分型芯片。采用4个复合PCR体系,用末端标记了Cy5的引物进行复合PCR扩增,产物与寡核苷酸探针进行杂交,根据杂交产生的荧光信号值确定样品在各SNP位点的基因型。将这一方法应用于109份样本的分型,根据基因型分布统计分析31个SNP位点的法医学应用价值。同时,进行家系调查和方法灵敏度分析。结果方法的灵敏度为1ng;所检测的31个SNP位点的累积个体识别率为0.9999999999979(偶合率为2.13×10-12),二联体亲子鉴定中累积非父排除率为0.9609,三联体亲子鉴定中累积非父排除率为0.9970。家系调查的结果表明,这些位点等位基因由亲代向子代的传递符合孟德尔遗传定律。结论上述31个SNP位点为中高信息量位点,适用于法医学个体识别,可作为当前STR系统的补充。; 关键词 SNP位点 pcr扩增法医学应用分型技术芯片非父排除率多重寡核苷酸探针等位基因应用价值个体识别家系调查亲子鉴定复合pcr 灵敏度分析基因型分布序列设计基因分型末端标记统计分析方法应用光信号 lng; Keywords forensic science genotyping SNP microarray; 分类号 R394 [医药卫生—医学遗传学] R89 [医药卫生—法医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名多重RT-PCR快速检测禽流感病毒的研究: 5; 作者秦春圃; 出处《生物技术通报》 CAS CSCD 2007年第2期118-118,共1页; 文摘西北农林科技大学生物工程研究所陈思怀、湖北省农科院牧医研究所乔宪凤、华文君等6位科学工作者参考H1-H5；亚型禽流感病毒（AIV）的核蛋白（NP）基因序列以及H5、H6、H9亚型AIV血凝素（HA）基因，共设计4对引物，建立了2对引物扩增AIV的NP、HA基因的多重RT-PCR方法。应用此法分别对H5、H6、H9亚型AIV尿囊液RT-PCR。电泳。回收预期片段进行测序，并同Genebank的注册序列进行同源性分析。同时还对NDV、IBV、IBDV尿囊液以及3种亚型AIV尿囊液的2倍系列稀释样品进行检测。; 关键词 pcr快速检测禽流感病毒多重 RT-pcr方法西北农林科技大学 H9亚型湖北省农科院基因序列; 分类号 S854.43 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名分子鉴别诊断领域的革命性技术——Tem-PCR 被引量：7: 6; 作者韩卫宁韩健; 机构苏州市疾病预防控制中心美国Hudson Alpha生物科技研究院; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期184-186,共3页; 基金江苏省预防医学科研课题(YZ2006003); 文摘分子鉴别诊断由于其高效、快速的特点,在公共卫生领域和个体化医疗中将发挥越来越重要的作用。分子鉴别诊断需要敏感、特异、可靠的多重扩增技术作为支撑,靶序列富集多重PCR(Tem-PCR)正是这样一项技术,能在一个反应体系中同时对多种靶基因高度敏感和特异的扩增,为分子鉴别诊断在应对公共卫生危机、食品安全、病毒分型、细菌耐药性分析和个体独特型遗传背景检测等方面的应用带来革命性变化。; 关键词靶序列富集多重pcr 分子鉴别诊断公共卫生; 分类号 R446.6 [医药卫生—诊断学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	靶序列富集多重PCR技术的发展及其应用	邬旭龙肖璐姜睿姣王印杨泽晓姚学萍张鹏飞张博	《湖南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2016	8	在线阅读下载PDF 职称材料
2	靶序列富集多重PCR-液相芯片联合检测4种常见呼吸道病毒的初步应用	王洁王卫萍胡毓安孙宁杨波夏正坤李晓军	《医学研究生学报》 CAS 北大核心	2016	7	在线阅读下载PDF 职称材料
3	3种食源性致病菌Tem-PCR检测方法的建立	刘忠梅徐义刚曲敏莫春生刘新亮李苏龙	《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心	2016	17	在线阅读下载PDF 职称材料
4	31个SNP位点多重PCR扩增和芯片分型技术的建立及其法医学应用	李莉李荣宇李成涛柳燕林源阙庭志孙美倩李瑶	《法医学杂志》 CAS CSCD	2005	10	在线阅读下载PDF 职称材料
5	多重RT-PCR快速检测禽流感病毒的研究	秦春圃	《生物技术通报》 CAS CSCD	2007	0	在线阅读下载PDF 职称材料
6	分子鉴别诊断领域的革命性技术——Tem-PCR	韩卫宁韩健	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2009	7	在线阅读下载PDF 职称材料