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靶向性双自杀基因系统对脐静脉内皮细胞的杀伤作用被引量：3: 1; 作者黄宗海杨文宇 +2 位作者龚小卫钱勇车小燕《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2004年第2期139-143,共5页; 目的研究腺病毒介导的前药/血管内皮生长因子受体(KDR)启动子-双自杀基因系统对血管内皮细胞的杀伤作用。方法应用PCR扩增出KDR启动子、CD基因、TK基因序列,构建pKDR-CDglyTK质粒;以Adeasy-1系统为载体,采用细菌内同源重组“两步转化法... 展开更多; 关键词靶向性双自杀基因系统脐静脉内皮细胞杀伤作用血管内皮生长因子受体基因治疗 KDR启动子肿瘤; 在线阅读下载PDF 职称材料

miR-144-5p在不同体型双峰驼血浆外泌体中的表达及靶基因验证被引量：1: 2; 作者斯日古楞于雯 +3 位作者降晓薇李子怡金君健白浩宇《中国畜牧兽医》北大核心 2025年第3期1022-1032,共11页; 【目的】探讨双峰驼血浆外泌体中miR-144-5p在脂质代谢中的潜在调控机制。【方法】采用超速离心法分离不同肥瘦程度的两组双峰驼血浆外泌体后,运用透射电子显微镜和纳米颗粒跟踪分析技术对分离的外泌体进行形态学观察与鉴定。提取外泌体... 展开更多; 关键词双峰驼外泌体 miR-144-5p 脂质代谢靶基因双荧光素酶报告系统; 在线阅读下载PDF 职称材料

转录靶向性KDR启动子调控双自杀基因系统对人大细胞肺癌细胞L9981的杀伤作用被引量：1: 3; 作者车国卫刘伦旭 +6 位作者周清华王艳萍朱文付军科孙江涛王允陈晓禾《中国肺癌杂志》 CAS 2009年第6期530-534,共5页; 背景与目的研究KDR启动子转录调控双自杀基因系统(CDglyTK)对人大细胞肺癌细胞L9981的杀伤作用。方法应用分子生物学技术克隆KDR基因的启动子KDRp,构建KDR启动子调控的双自杀基因(CDglyTK)真核表达质粒pcDNA3-KDRp-CdglyTK。并将其导入L... 展开更多; 关键词转录靶向性 KDR启动子双自杀基因基因治疗肺癌; 在线阅读下载PDF 职称材料

婴儿双歧杆菌/胞嘧啶脱氨酶肿瘤靶向性基因治疗系统的构建被引量：20: 4; 作者郭志英易成 +1 位作者王树人王浩毅《中国肺癌杂志》 CAS 2004年第2期95-98,共4页; 目的　构建婴儿双歧杆菌 /胞嘧啶脱氨酶肿瘤靶向性基因治疗系统。方法　PCR扩增胞嘧啶脱氨酶 (CD)基因 ,TSS法在大肠杆菌JM 10 9中扩增 pGEX 1LambdaT质粒 ,EcoRⅠ和BamHⅠ对CD基因和pGEX 1LambdaT质粒分别进行双酶酶切。琼脂糖电泳凝... 展开更多; 关键词婴儿双歧杆菌胞嘧啶脱氨酶肿瘤靶向性基因治疗系统抗癌药 5-氟胞嘧啶; 在线阅读下载PDF 职称材料

非病毒基因递送系统的靶向性研究: 5; 作者魏秀莉吴伟徐惠南《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期368-370,376,共4页; 关键词递送系统非病毒基因靶向性研究基因治疗治疗基因基因药物调控系统基因表达表达效率毒副作用免疫原性目的基因野生型致癌性限制; 在线阅读下载PDF 职称材料

小鼠miR-151-3p靶基因筛选和鉴定被引量：1: 6; 作者魏欢李仲文沈清武《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期23-31,共9页; 采用生物信息软件系统分析miR-151-3p的保守性,并筛选出与小鼠肌肉发育和肿瘤发生相关靶基因:蛋白激酶3(serine/threonine kinase 3,Akt 3),Twist碱性螺旋-环-螺旋转录因子(twist basic helix-loophelix 1,Twist 1)和T型电压依赖性钙通... 展开更多; 关键词 miR-151-3p 靶基因双荧光素酶报告基因检测系统; 在线阅读下载PDF 职称材料

基因治疗的运载系统: 7; 作者王雪皎李万波 +1 位作者张连峰蔡有余《中国实验动物学杂志》 1995年第3期172-174,共3页; 基因治疗的运载系统王雪皎，李万波，张连峰，蔡有余（中国医学科学院实验动物研究所，北京）基因治疗是将遗传物质转移到一个体的细胞中而对该个体产生治疗效应［１］。近年来重组ＤＮＡ技术、基因转移技术、细胞移植及基因靶向性导入... 展开更多; 关键词基因治疗运载系统细胞移植基因靶向性导^技术; 在线阅读下载PDF 职称材料

miR-191通过调控C/EBPβ转录影响猪前体脂肪细胞分化被引量：5: 8; 作者刘帅宁小敏 +4 位作者李美航仇杨李艳杰董培越杨公社《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2013年第2期165-176,共12页; 对实验室前期Solexa结果进行深入挖掘,结合生物信息学分析从不同发育阶段猪皮下脂肪组织差异表达的miRNAs中筛选出高丰度差异极显著的候选miR-191.采用腺病毒过表达miR-191,实时定量PCR、Western blot及双荧光素酶报告基因检测等技术方... 展开更多; 关键词 miR-191 C EBPβ 猪前体脂肪细胞表达谱靶基因预测腺病毒双荧光素酶报告基因检测系统; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名靶向性双自杀基因系统对脐静脉内皮细胞的杀伤作用被引量：3: 1; 作者黄宗海杨文宇龚小卫钱勇车小燕; 机构第一军医大学珠江医院普外科第一军医大学病理生理教研室广州军区广州总医院放射科第一军医大学珠江医院中心实验室; 出处《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2004年第2期139-143,共5页; 基金国家863计划项目(2001AA217171) 广东省自然科学基金重点资助项目(013072)~~; 文摘目的研究腺病毒介导的前药/血管内皮生长因子受体(KDR)启动子-双自杀基因系统对血管内皮细胞的杀伤作用。方法应用PCR扩增出KDR启动子、CD基因、TK基因序列,构建pKDR-CDglyTK质粒;以Adeasy-1系统为载体,采用细菌内同源重组“两步转化法”构建携带KDR启动子调控下的CD与TK的融合基因腺病毒重组质粒pAdKDR-CDglyTK,重组质粒在293细胞中包装成病毒,并进一步扩增、纯化,以不同的感染复数(MOI)体外感染脐静脉血管内皮细胞(HUVEC),利用重组病毒携带的绿色荧光蛋白(GFP)基因,荧光显微镜下观察重组腺病毒的感染效率,并给予不同浓度的GCV(ganciclovir)和/或5-FC(5-fluorocytosine),比较GCV(ganciclovir)和/或5-FC联合对转基因HUVEC细胞的杀伤作用。结果成功构建了AdKDR-CDglyTK重组病毒,并高效地转染了HUVEC,其转染效率随重组病毒的MOI增加而升高。被转染的HUVEC对GCV和5-FC高度敏感。另外,MOI一定时,细胞存活率随GCV和5-FC浓度增加递减;GCV和5-FC浓度一定时,细胞存活率随MOI升高而降低。不同前药组细胞存活率结果显示:联合应用GCV+5-FC较单用GCV或5-FC对感染细胞的杀伤作用更强(P<0.05)。结论KDR启动子-双自杀基因系统对脐静脉内皮细胞具有强烈的杀伤作用,其杀伤效率与GCV和5-FC的浓度及重组腺病毒的MOI相关,联?; 关键词靶向性双自杀基因系统脐静脉内皮细胞杀伤作用血管内皮生长因子受体基因治疗 KDR启动子肿瘤; Keywords neoplasm/therapy gene therapy suicide gene KDR promoter vascular endothelium; 分类号 R73-36 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名miR-144-5p在不同体型双峰驼血浆外泌体中的表达及靶基因验证被引量：1: 2; 作者斯日古楞于雯降晓薇李子怡金君健白浩宇; 机构内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室; 出处《中国畜牧兽医》北大核心 2025年第3期1022-1032,共11页; 基金国家自然科学基金资助项目(32160821) 内蒙古自治区自然科学基金资助项目(2023MS03021、2024MS03071)。; 文摘【目的】探讨双峰驼血浆外泌体中miR-144-5p在脂质代谢中的潜在调控机制。【方法】采用超速离心法分离不同肥瘦程度的两组双峰驼血浆外泌体后,运用透射电子显微镜和纳米颗粒跟踪分析技术对分离的外泌体进行形态学观察与鉴定。提取外泌体总RNA后,进行高通量测序,鉴定筛选出在两组双峰驼血浆外泌体中差异表达的miRNA。应用TargetScan和miRWalk在线软件预测差异表达miRNA的靶基因,并利用DAVID和KEGG在线分析系统对靶基因进行GO功能和KEGG通路富集分析。构建含靶位点的野生型载体和突变型表达质粒载体,通过miR-144-5p与293T细胞共转染进行双荧光素酶相对活性检测,验证miR-144-5p与其候选基因的作用关系,探讨其在脂质代谢调控中的作用机制。【结果】双峰驼血浆外泌体呈杯状或圆形,直径约100 nm,粒径分布范围为30~150 nm;两组双峰驼外泌体间共有40个差异表达miRNAs,miR-144-5p是差异最显著的miRNA(P<0.01);miR-144-5p序列在不同物种间高度保守;预测其靶基因是过氧化物酶体增殖受体γ辅激活因子α(PGC-1α),该基因主要参与胆固醇平衡和脂质磷酸化等过程,富集于甘油酯代谢、胆固醇代谢和动脉粥样硬化等信号通路;miR-144-5p对野生型PGC-1α-3′-UTR载体的荧光素酶相对活性具有极显著抑制作用(P<0.01),而在突变型PGC-1α重组质粒组中,转染后48 h时,miR-144-5p的荧光素酶活性与阴性对照组相比无显著差异(P>0.05),表明miR-144-5p通过结合PGC-1α基因种子序列来抑制PGC-1α的表达。【结论】本研究揭示了miR-144-5p在不同体型双峰驼血浆外泌体中的表达差异,并证实其通过调控PGC-1α在脂质代谢中发挥重要作用。; 关键词双峰驼外泌体 miR-144-5p 脂质代谢靶基因双荧光素酶报告系统; Keywords Bactrian camels exosome miR-144-5p lipid metabolism target gene dual-luciferase reporter assay system; 分类号 S852.2 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名转录靶向性KDR启动子调控双自杀基因系统对人大细胞肺癌细胞L9981的杀伤作用被引量：1: 3; 作者车国卫刘伦旭周清华王艳萍朱文付军科孙江涛王允陈晓禾; 机构四川大学华西医院胸心血管外科天津医科大学总医院肺部肿瘤外科; 出处《中国肺癌杂志》 CAS 2009年第6期530-534,共5页; 文摘背景与目的研究KDR启动子转录调控双自杀基因系统(CDglyTK)对人大细胞肺癌细胞L9981的杀伤作用。方法应用分子生物学技术克隆KDR基因的启动子KDRp,构建KDR启动子调控的双自杀基因(CDglyTK)真核表达质粒pcDNA3-KDRp-CdglyTK。并将其导入L9981和人肝癌细胞HepG2中。给予不同的前药(GCV和/或5-FC)处理后,应用MTT法检测各组细胞的存活率。并应用流式细胞仪检测各组细胞的细胞周期和凋亡。结果成功的克隆KDR启动子和构建pcDNA3-KDRp-CdglyTK质粒。pcDNA3-KDRp-CdglyTK转染后,L9981细胞中均可检测到CD和TKmRNA,而HepG2细胞中则无。联合应用5-FC+GCV处理对转双自杀基因细胞(L9981)的杀伤作用显著高于单独应用5-FC或GCV(P<0.05),且二者显示了良好的药物协同作用。结论KDR基因启动子调控双自杀基因系统可以靶向性杀伤人肺癌细胞。; 关键词转录靶向性 KDR启动子双自杀基因基因治疗肺癌; Keywords Transcriptional targeted KDR promotor Double suicide gene Gene therapy Lung cancer; 分类号 R734.2 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名婴儿双歧杆菌/胞嘧啶脱氨酶肿瘤靶向性基因治疗系统的构建被引量：20: 4; 作者郭志英易成王树人王浩毅; 机构四川大学华西医学中心病理生理教研室四川大学华西医院肿瘤中心化疗科; 出处《中国肺癌杂志》 CAS 2004年第2期95-98,共4页; 基金 CMB(MERF 2 0 0 2 )资助~~; 文摘目的　构建婴儿双歧杆菌 /胞嘧啶脱氨酶肿瘤靶向性基因治疗系统。方法　PCR扩增胞嘧啶脱氨酶 (CD)基因 ,TSS法在大肠杆菌JM 10 9中扩增 pGEX 1LambdaT质粒 ,EcoRⅠ和BamHⅠ对CD基因和pGEX 1LambdaT质粒分别进行双酶酶切。琼脂糖电泳凝胶分离并切取其中 4.9kb和 1.3kb两个片段长度的凝胶。凝胶DNA提取试剂盒提取其中所含的DNA片段 ,T4DNA连接酶连接这两个片段 ,最后用电穿孔法将重组片段转染婴儿双歧杆菌 ,并挑选阳性菌落 ,提取质粒双酶切后进行琼脂糖凝胶电泳检测。结果　应用电穿孔法转染婴儿双歧杆菌 ,获得含 6.2kbp重组质粒的阳性转染婴儿双歧杆菌。结论　成功构建婴儿双歧杆菌 /胞嘧啶脱氨酶肿瘤靶向性基因治疗系统。; 关键词婴儿双歧杆菌胞嘧啶脱氨酶肿瘤靶向性基因治疗系统抗癌药 5-氟胞嘧啶; Keywords Bifidobacterium Infantis Cytosine deaminase Tumor Gene therapy; 分类号 R73-36 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名非病毒基因递送系统的靶向性研究: 5; 作者魏秀莉吴伟徐惠南; 机构复旦大学药学院药剂学教研室; 出处《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期368-370,376,共4页; 基金上海市科委纳米专项基金 (0 2 43nm0 67)资助项目; 关键词递送系统非病毒基因靶向性研究基因治疗治疗基因基因药物调控系统基因表达表达效率毒副作用免疫原性目的基因野生型致癌性限制; 分类号 R392-33 [医药卫生—免疫学] R978.7 [医药卫生—药品]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名小鼠miR-151-3p靶基因筛选和鉴定被引量：1: 6; 作者魏欢李仲文沈清武; 机构西北农林科技大学动物科技学院; 出处《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期23-31,共9页; 基金西北农林科技大学人才引进基金(Z111021006); 文摘采用生物信息软件系统分析miR-151-3p的保守性,并筛选出与小鼠肌肉发育和肿瘤发生相关靶基因:蛋白激酶3(serine/threonine kinase 3,Akt 3),Twist碱性螺旋-环-螺旋转录因子(twist basic helix-loophelix 1,Twist 1)和T型电压依赖性钙通道α1g亚基(calcium channel,voltage-dependent,T type,alpha 1g subunit,Cacna1g)。采用实时定量PCR及双荧光素酶报告基因检测技术对以上靶基因进行初步验证,结果表明,超表达miR-151-3p显著抑制Akt 3mRNA表达,而Twist 1和Cacna1g mRNA表达变化不显著;双荧光素酶报告系统分析发现,miR-151-3p显著抑制野生型Akt 3报告载体相对荧光素酶活性,突变Akt 3 3′UTR与miR-151-3p结合的位点后,相对荧光素酶活性得到恢复,而Twist 1和Cacna1g基因双荧光素酶报告载体无此现象,结果证实Akt 3是miR-151-3p的靶基因。; 关键词 miR-151-3p 靶基因双荧光素酶报告基因检测系统; Keywords miR-151-3p Target genes Dual-luciferase reporter system; 分类号 Q75 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名基因治疗的运载系统: 7; 作者王雪皎李万波张连峰蔡有余; 机构中国医学科学院实验动物研究所; 出处《中国实验动物学杂志》 1995年第3期172-174,共3页; 文摘基因治疗的运载系统王雪皎，李万波，张连峰，蔡有余（中国医学科学院实验动物研究所，北京）基因治疗是将遗传物质转移到一个体的细胞中而对该个体产生治疗效应［１］。近年来重组ＤＮＡ技术、基因转移技术、细胞移植及基因靶向性导入技术的发展，使基因治疗成为现实。在...; 关键词基因治疗运载系统细胞移植基因靶向性导^技术; 分类号 R456 [医药卫生—治疗学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名miR-191通过调控C/EBPβ转录影响猪前体脂肪细胞分化被引量：5: 8; 作者刘帅宁小敏李美航仇杨李艳杰董培越杨公社; 机构西北农林科技大学动物科技学院动物脂肪沉积与肌肉发育实验室; 出处《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2013年第2期165-176,共12页; 基金国家自然科学基金(31072014) 西北农林科技大学"创新团队建设计划"资助项目~~; 文摘对实验室前期Solexa结果进行深入挖掘,结合生物信息学分析从不同发育阶段猪皮下脂肪组织差异表达的miRNAs中筛选出高丰度差异极显著的候选miR-191.采用腺病毒过表达miR-191,实时定量PCR、Western blot及双荧光素酶报告基因检测等技术方法,初步研究miR-191对猪前体脂肪细胞分化的影响.结果发现,miR-191随着猪前体脂肪细胞的分化表达量逐渐增加.与对照组相比,过表达miR-191的猪前体脂肪细胞中miR-191转录本显著增加,并引起CCAAT增强子结合蛋白β(C/EBPβ)、PPARγ和aP2的mRNA水平降低,抑制了猪前体脂肪细胞分化.同时,Western blot结果显示,与对照组相比过表达miR-191的猪前体脂肪细胞在48 h C/EBPβ蛋白水平下降了55%.更重要的是,通过TargetScan等算法正向筛选以及MicroInspector反向筛选联合获得miR-191候选靶基因,经双荧光素酶报告基因检测结果证实,miR-191可直接作用于C/EBPβ3′UTR,从而降低萤火虫荧光素酶活性.综上所述,miR-191可能通过抑制脂肪细胞分化早期标志基因C/EBPβ的表达,从而抑制了猪前体脂肪细胞的分化.; 关键词 miR-191 C EBPβ 猪前体脂肪细胞表达谱靶基因预测腺病毒双荧光素酶报告基因检测系统; Keywords miR-191 C/EBPβ porcine preadipocyte profiling target genes forecast adenovirus dual-luciferase reporter assay system; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学] S82 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	靶向性双自杀基因系统对脐静脉内皮细胞的杀伤作用	黄宗海杨文宇龚小卫钱勇车小燕	《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心	2004	3	在线阅读下载PDF 职称材料
2	miR-144-5p在不同体型双峰驼血浆外泌体中的表达及靶基因验证	斯日古楞于雯降晓薇李子怡金君健白浩宇	《中国畜牧兽医》北大核心	2025	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	转录靶向性KDR启动子调控双自杀基因系统对人大细胞肺癌细胞L9981的杀伤作用	车国卫刘伦旭周清华王艳萍朱文付军科孙江涛王允陈晓禾	《中国肺癌杂志》 CAS	2009	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	婴儿双歧杆菌/胞嘧啶脱氨酶肿瘤靶向性基因治疗系统的构建	郭志英易成王树人王浩毅	《中国肺癌杂志》 CAS	2004	20	在线阅读下载PDF 职称材料
5	非病毒基因递送系统的靶向性研究	魏秀莉吴伟徐惠南	《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2005	0	在线阅读下载PDF 职称材料
6	小鼠miR-151-3p靶基因筛选和鉴定	魏欢李仲文沈清武	《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心	2014	1	在线阅读下载PDF 职称材料
7	基因治疗的运载系统	王雪皎李万波张连峰蔡有余	《中国实验动物学杂志》	1995	0	在线阅读下载PDF 职称材料
8	miR-191通过调控C/EBPβ转录影响猪前体脂肪细胞分化	刘帅宁小敏李美航仇杨李艳杰董培越杨公社	《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心	2013	5	在线阅读下载PDF 职称材料