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玉米病程相关蛋白1基因的克隆与表达分析 被引量：9
1
作者 王静 刘丽 +2 位作者 张志明 赵茂俊 潘光堂 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期35-42,共8页
采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法从耐玉米穗粒腐病自交系R15中分离得到病程相关蛋白1(pathogenesis-related protein 1,PR1)基因的开放阅读框,命名为ZmPR1,测序结果显示该序列长为528bp,编码175个氨基酸,其蛋白质分子质量为18.7ku... 采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法从耐玉米穗粒腐病自交系R15中分离得到病程相关蛋白1(pathogenesis-related protein 1,PR1)基因的开放阅读框,命名为ZmPR1,测序结果显示该序列长为528bp,编码175个氨基酸,其蛋白质分子质量为18.7ku.利用NCBI/Blastp和Genedoc软件进行同源性比对显示,ZmPR1基因编码蛋白与水稻、小麦、拟南芥等高等植物中的PR1蛋白相似性较高,且具有相同的富含半胱氨酸蛋白(cysteine-rich secretory protein,CAP)的保守结构域.将构建的重组载体pET32a(+)-ZmPR1在宿主菌Escherichia coli BL21中经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达融合蛋白,在不同的诱导时间、诱导温度和IPTG诱导浓度下对诱导条件进行优化.十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析结果表明,ZmPR1基因的最佳诱导条件为IPTG终浓度0.6mmol爛L-1,诱导温度28℃,且诱导时间对表达量影响不大.免疫印迹(Western blot)检测证实有39ku的融合蛋白表达,表明ZmPR1基因在大肠杆菌中已成功表达,这为蛋白纯化及单克隆抗体的制备提供了一定的基础. 展开更多
关键词 玉米穗粒腐病 病程相关蛋白 原核表达 表达分析
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葛根素对2型糖尿病大鼠脂代谢及脂肪分化相关蛋白基因表达的影响 被引量：12
2
作者 孙卫 郑学芝 +2 位作者 崔荣军 张承玉 徐秋玲 《中国全科医学》 CAS CSCD 2008年第13期1161-1163,共3页
目的观察葛根素(Pue)对2型糖尿病(T2DM)大鼠脂代谢及脂肪分化相关蛋白(ADRP)基因mRNA表达的影响。方法大鼠高糖高脂饮食伴尾静脉注射小剂量链脲佐菌素(STZ)25mg/kg复制T2DM大鼠模型,将造模大鼠随机分为模型组(腹腔注射丙二醇)和3个Pue... 目的观察葛根素(Pue)对2型糖尿病(T2DM)大鼠脂代谢及脂肪分化相关蛋白(ADRP)基因mRNA表达的影响。方法大鼠高糖高脂饮食伴尾静脉注射小剂量链脲佐菌素(STZ)25mg/kg复制T2DM大鼠模型,将造模大鼠随机分为模型组(腹腔注射丙二醇)和3个Pue治疗组(腹腔注射40、80、160mg/kg的Pue),另选10只大鼠为正常对照组(腹腔注射丙二醇)。持续腹腔注射6周后,测定各组大鼠空腹血糖(FBG)、血清胰岛素(FINS)和血脂水平,并计算胰岛素敏感指数(ISI);同时以RT-PCR法检测脂肪组织ADRP基因mRNA水平。结果模型组大鼠FBG、FINS、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)、游离脂肪酸(FFA)水平及ISI与对照组比较,差别有统计学意义(P<0.05);Pue高、中剂量组大鼠FBG、FINS、TC、TG、LDL-C、FFA水平及ISI与模型组比较,差别有统计学意义(P<0.05),Pue低剂量组大鼠FBG、TC、TG、FFA水平及ISA与模型组比较,差别有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,模型组大鼠脂肪组织ADRP基因mRNA表达显著增高(P<0.01),Pue高、中剂量组大鼠ADRP基因mRNA表达较模型组下降(P<0.05)。结论Pue可通过降低T2DM大鼠脂肪组织ADRP基因mRNA表达,改善糖脂代谢紊乱和胰岛素抵抗。 展开更多
关键词 葛根素 糖尿病 2型 脂肪分化相关蛋白 血脂 基因表达
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烟草病程相关蛋白NtPR10基因克隆与表达分析 被引量：5
3
作者 张玉 张增林 +5 位作者 蒋彩虹 常爱霞 杨爱国 罗成刚 王绍美 王元英 《中国烟草科学》 CSCD 北大核心 2017年第3期1-7,共7页
为鉴定烟草病程相关蛋白PR10的生物学功能,从普通烟草G28中克隆得到了Nt PR10基因,基因全长483 bp,编码160个氨基酸。基因结构分析表明,该基因编码的蛋白包含病程相关蛋白家族Bet_v_I保守域,具有与核酸酶活性相关的"P-Loop"... 为鉴定烟草病程相关蛋白PR10的生物学功能,从普通烟草G28中克隆得到了Nt PR10基因,基因全长483 bp,编码160个氨基酸。基因结构分析表明,该基因编码的蛋白包含病程相关蛋白家族Bet_v_I保守域,具有与核酸酶活性相关的"P-Loop"结构。利用TMHMM、Signal P、Prosite Scan等软件分析发现,Nt PR10不含跨膜区,无信号肽,有胞内定位特征。采用实时荧光定量PCR分别分析了TMV诱导下该基因在抗、感品种枯斑三生和G28中的表达模式。结果表明,在TMV诱导下,Nt PR10基因在感病品种G28中显著上调表达;而在抗病品种枯斑三生中,TMV侵染后6 h,Nt PR10基因显著上调表达,第12小时至第8天显著下调表达,而后至第16天逐渐升高至侵染前水平。综合以上结果,Nt PR10应答了TMV侵染过程,并且在抗、感品种中整体呈现出相反的表达趋势,暗示了Nt PR10在TMV侵染过程中具有重要功能,为深入分析Nt PR10的抗病生物学功能奠定了基础。 展开更多
关键词 烟草 病程相关蛋白 PR10 基因克隆 表达
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丹参病程相关蛋白基因PR10的克隆与表达分析 被引量：5
4
作者 赵乐 马利刚 +2 位作者 王志霜 申业 郑晓珂 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期1078-1084,共7页
病程相关蛋白(PR)的产生与积累是植物体应对生物或非生物胁迫的主要特征之一。该研究以人工培养的丹参幼苗为材料,通过分析丹参转录组数据,根据丹参病程相关蛋白基因PR10的序列设计特异性引物,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)从丹参... 病程相关蛋白(PR)的产生与积累是植物体应对生物或非生物胁迫的主要特征之一。该研究以人工培养的丹参幼苗为材料,通过分析丹参转录组数据,根据丹参病程相关蛋白基因PR10的序列设计特异性引物,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)从丹参中获得PR10基因的开放阅读框(ORF),命名为SmPR10-1(GenBank注册号KF877034),并进行原核表达和纯化。结果表明:(1)SmPR10-1基因ORF为477bp,编码158个氨基酸,其蛋白质分子质量为17.38kD。(2)通过蛋白结构预测、序列多重比对和构建进化树等生物信息学分析,发现SmPR10-1基因具有保守序列(G-X-G-G-X-G)和(K-A-X-E-X-Y),其编码蛋白与葡萄等双子叶植物中的PR10蛋白同源性较高。(3)经异丙基β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,含有表达载体pET32a-SmPR10-1的大肠杆菌(Escherichia coli BL21)可诱导表达融合蛋白;对影响蛋白表达的4个因素优化结果表明,SmPR10-1蛋白的最佳表达条件为:IPTG终浓度0.4mmol/L、起始宿主菌密度A600为0.8、诱导温度30℃、诱导时间8h,并得到纯化的SmPR10-1蛋白。该结果为进一步研究SmPR10-1基因在丹参抗病方面的生物学功能和培育丹参抗病品种奠定了基础。 展开更多
关键词 丹参 病程相关蛋白 生物信息学分析 原核表达 条件优化
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葛根素对2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗及脂肪分化相关蛋白基因表达的影响 被引量：9
5
作者 孙卫 郑学芝 +1 位作者 崔荣军 徐秋玲 《医药导报》 CAS 2008年第10期1159-1161,共3页
目的观察葛根素对实验性2型糖尿病(2-DM)大鼠胰岛素抵抗及脂肪分化相关蛋白(ADRP)基因mRNA表达的影响。方法采用高糖高脂饮食伴尾静脉注射小剂量链脲佐菌素(STZ)复制2-DM大鼠模型。将大鼠随机分为正常对照组、2-DM模型组和高、中、低剂... 目的观察葛根素对实验性2型糖尿病(2-DM)大鼠胰岛素抵抗及脂肪分化相关蛋白(ADRP)基因mRNA表达的影响。方法采用高糖高脂饮食伴尾静脉注射小剂量链脲佐菌素(STZ)复制2-DM大鼠模型。将大鼠随机分为正常对照组、2-DM模型组和高、中、低剂量药物组(分别腹腔注射葛根素注射液160,80,40 mg.kg-1.d-1)。6周后,测定空腹血糖(FPG)、血脂、血清胰岛素(FINS),并计算胰岛素敏感指数(ISI),同时以逆转录-聚合本酶链反应(RT-PCR)法检测脂肪组织ADRP基因mRNA水平。结果与2-DM模型组比较,高、中、低剂量药物组FPG、FINS、游离脂肪酸(FFA)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)含量显著降低,ISI明显升高(P<0.05或P<0.01);高和中剂量药物组大鼠脂肪组织ADRP基因mRNA表达显著降低。结论葛根素可通过下调2-DM大鼠脂肪组织ADRP基因mRNA表达,降低胰岛素抵抗水平,改善脂代谢紊乱。 展开更多
关键词 葛根素 糖尿病 2型 胰岛素抵抗 脂肪分化相关蛋白 基因表达
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植物病程相关蛋白的基因表达调控 被引量：4
6
作者 萨其拉 李文彬 孙勇如 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2001年第1期100-103,共4页
植物病程相关蛋白 (PR)的表达在植物抗病反应中具有重要意义 ,是近年来植物抗病研究领域的一个热点。
关键词 植物病程相关蛋白 基因表达 植物抗病反应 调控 分子机制
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不结球白菜病程相关蛋白基因BcPR5的克隆及表达分析 被引量：5
7
作者 肖栋 韦艳萍 +1 位作者 李英 侯喜林 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期640-646,共7页
[目的]本文旨在研究不结球白菜病程相关蛋白基因Bc PR5的结构与表达特征。[方法]通过RACE技术,从抗病品种‘苏州青’叶片克隆到Bc PR5基因的全长c DNA序列。采用RT-q PCR方法分析该基因在霜霉病菌诱导,水杨酸(SA)、茉莉酸(Me J)和脱落酸... [目的]本文旨在研究不结球白菜病程相关蛋白基因Bc PR5的结构与表达特征。[方法]通过RACE技术,从抗病品种‘苏州青’叶片克隆到Bc PR5基因的全长c DNA序列。采用RT-q PCR方法分析该基因在霜霉病菌诱导,水杨酸(SA)、茉莉酸(Me J)和脱落酸(ABA)等激素处理条件下的表达模式。SDS-PAGE技术分析该基因的原核表达特征。[结果]Bc PR5基因的c DNA全长为954 bp,其中开放阅读框长度为732 bp,共编码243个氨基酸,相对分子质量为26.1×103,理论等电点是9.3。氨基酸同源系统进化分析表明,不结球白菜Bc PR5基因与同属植物的进化关系相近,其中与大白菜第6号染色体上的基因同源性最高(100%)。RT-q PCR分析表明,抗病品种‘苏州青’和感病品种‘矮脚黄’在霜霉病菌和非生物胁迫(SA、Me J和ABA)诱导过程中,Bc PR5基因的表达量均呈先升高后降低的趋势,且抗病品种高于感病品种。原核表达结果表明,该蛋白在终浓度为1.0 mmol·L-1的IPTG诱导4 h后能实现融合蛋白的高效表达。[结论]Bc PR5在不结球白菜抗霜霉病防御反应中发挥着重要作用,研究结果为该基因的功能验证提供理论基础。 展开更多
关键词 不结球白菜 病程相关蛋白基因(PR5) 霜霉病菌 实时定量PCR 原核表达
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survivin、P53蛋白在非小细胞肺癌的表达及其相关性研究 被引量：3
8
作者 王靖华 李桂圆 +2 位作者 王晨 陈龙邦 马恒辉 《医学研究生学报》 CAS 2003年第8期566-567,579,共3页
目的 :研究survivin、P5 3蛋白在非小细胞肺癌 (NSCLC)组织的表达及其生物学意义 ,并探讨其相关性。　方法 :用免疫组化 (S P法 )染色技术对 95例NSCLC组织石蜡标本进行survivin、P5 3蛋白表达的检测和分析。　结果 :survivin、P5 3在... 目的 :研究survivin、P5 3蛋白在非小细胞肺癌 (NSCLC)组织的表达及其生物学意义 ,并探讨其相关性。　方法 :用免疫组化 (S P法 )染色技术对 95例NSCLC组织石蜡标本进行survivin、P5 3蛋白表达的检测和分析。　结果 :survivin、P5 3在肺癌细胞中阳性表达率 (6 2 .1 %、5 5 .8% )明显高于癌旁的正常肺组织 (1 4 %、7% ) (P <0 .0 1 )。survivin的表达与肿瘤病理分级、组织学分型、淋巴结转移、TNM分期无明显相关 (P >0 .0 5 ) ;P5 3表达与淋巴结转移相关 (P <0 .0 5 ) ,而与肿瘤病理分级、组织学分型、TNM分期无明显相关 (P >0 .0 5 ) ;此外 ,survivin与P5 3蛋白的表达呈显著正相关 (r =0 .5 72 ,P <0 .0 1 )。　结论 :凋亡抑制蛋白survivin与突变型P5 3蛋白在NSCLC的发生发展中可能起协同作用 ,也提示抑癌基因p5 3(野生型 )可能对survivin的表达起负反馈调节作用。survivin和P5 展开更多
关键词 SURVIVIN P53蛋白 免疫组化 非小细胞肺癌 表达 相关性
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低温诱导湖北海棠病程相关蛋白基因家族MhPRs的表达 被引量：3
9
作者 张计育 郭忠仁 《上海农业学报》 CSCD 北大核心 2013年第1期20-23,共4页
以湖北海棠组培苗为材料,利用半定量RT-PCR研究了低温4℃处理后湖北海棠MhNPR 1、MhT-GA2以及病程相关蛋白基因家族成员(MhPR 1、MhPR 5、MhPR8和Mhchit 1)基因的表达量。结果表明:低温处理可以诱导这些基因的表达,并且所有基因的表达量... 以湖北海棠组培苗为材料,利用半定量RT-PCR研究了低温4℃处理后湖北海棠MhNPR 1、MhT-GA2以及病程相关蛋白基因家族成员(MhPR 1、MhPR 5、MhPR8和Mhchit 1)基因的表达量。结果表明:低温处理可以诱导这些基因的表达,并且所有基因的表达量在48 h达到最大。可以推测:(1)低温作为一种逆境条件,可能使植物体内SA含量提高,诱导MhNPR1基因表达,使NPR1蛋白从细胞质进入细胞核,与TGA类转录因子相互作用,诱导下游病程相关蛋白基因表达;(2)低温可能直接诱导病程相关蛋白基因表达。 展开更多
关键词 湖北海棠 低温 病程相关蛋白 基因表达
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分泌型肿瘤坏死因子相关激活诱导因子融合蛋白在大肠杆菌中的表达和纯化 被引量：2
10
作者 叶传忠 关明 +3 位作者 张芳林 苏兵 张永康 陈常庆 《复旦学报（医学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2001年第4期307-310,共4页
目的　表达及纯化人分泌型肿瘤坏死因子相关激活诱导因子 (secretedformTNF relatedactivation in ducedcytokine,sTRANCE)蛋白。方法　将sTRANCE结构基因重组到含麦芽糖结合蛋白 (MBP)的融合蛋白原核表达载体 pMAL c2x中 ,在大肠杆菌... 目的　表达及纯化人分泌型肿瘤坏死因子相关激活诱导因子 (secretedformTNF relatedactivation in ducedcytokine,sTRANCE)蛋白。方法　将sTRANCE结构基因重组到含麦芽糖结合蛋白 (MBP)的融合蛋白原核表达载体 pMAL c2x中 ,在大肠杆菌中进行表达。 结果　经IPTG诱导表达出的MBP sTRANCE融合蛋白相对分子质量约 70 0 0 0 ,并经Westernblot分析证实。用直链淀粉琼脂糖凝胶 (amyloseresin)亲和层析纯化得到电泳均一的融合蛋白。结论　成功地获得sTRANCE蛋白 ,为进一步研究其生物学性能和用于肿瘤生物治疗的可能性打下了基础。 展开更多
关键词 分泌型肿瘤坏死因子相关激活诱导因子 原核表达 亲和层析 融合蛋白 STRANCE ODF 大肠杆菌
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膜型基质金属蛋白酶-1在黏着斑激酶相关非激酶调控肝星状细胞胶原代谢中的作用 被引量：2
11
作者 魏娟 张晓岚 +4 位作者 敦志娜 赵春洪 申建刚 霍晓霞 安君艳 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期2155-2158,共4页
目的:探讨黏着斑激酶相关非激酶(FRNK)对纤维连接蛋白(FN)刺激的肝星状细胞(HSC)膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)表达的影响并探讨MT1-MMP在FRNK调控HSC胶原代谢中的作用。方法:应用体外细胞培养技术,脂质体介导法进行FRNK质粒瞬时转染;... 目的:探讨黏着斑激酶相关非激酶(FRNK)对纤维连接蛋白(FN)刺激的肝星状细胞(HSC)膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)表达的影响并探讨MT1-MMP在FRNK调控HSC胶原代谢中的作用。方法:应用体外细胞培养技术,脂质体介导法进行FRNK质粒瞬时转染;采用Western blotting法测定FRNK蛋白在瞬时转染时相应的表达,鉴定转染效果;分别应用Western blotting和RT-PCR方法测定MT1-MMP在HSC中的相应表达。结果:FRNK质粒成功转染HSC,于转染48h时,FRNK蛋白表达最强,P<0·05;FRNK转染后在基因水平上:MT1-MMP mRNA表达明显增加;翻译蛋白水平上:FRNK质粒转染HSC48h后,MT1-MMP蛋白表达量显著升高。结论:脂质体介导下FRNK质粒转染,可使外源性FRNK在HSC内大量表达,FRNK可能通过上调MT1-MMP值来抑制HSC胶原合成。 展开更多
关键词 肝星状细胞 黏着斑激酶 黏着斑激酶相关非激酶 膜型基质金属蛋白酶-1 胶原 肝硬化
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非综合征型聋相关基因及其表达产物的研究进展 被引量：1
12
作者 纪育斌(综述) 王秋菊 韩东一(审校) 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期297-303,共7页
关键词 非综合征型 表达产物 相关基因 神经生理机制 听觉系统 网络系统 分子生物学 调节因子
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2型腺相关病毒转导人胎肝造血细胞及其介导的β珠蛋白基因的表达(英文)
13
作者 孙小娟 田晶 谭孟群 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第5期525-532,共8页
β地中海贫血是一种因β珠蛋白基因缺陷导致的遗传性贫血性疾病,基因治疗是唯一有望治愈该病的方法.2型腺相关病毒(adeno-associated virustype2,AAV2)是一种非致病性病毒,作为一种基因治疗载体,其应用潜力日益受到关注.目前还未见AAV2... β地中海贫血是一种因β珠蛋白基因缺陷导致的遗传性贫血性疾病,基因治疗是唯一有望治愈该病的方法.2型腺相关病毒(adeno-associated virustype2,AAV2)是一种非致病性病毒,作为一种基因治疗载体,其应用潜力日益受到关注.目前还未见AAV2转导人早期胎肝造血细胞及其介导β珠蛋白基因在动物体内表达的实验报道.有研究表明,AAV2转导人造血干细胞的效率,因各实验室包装和纯化rAAV2的方法不同而存在差异,其中辅助病毒的污染被认为是一重要原因.制备了无辅助病毒污染的rAAV2,经体外检测其滴度,纯度及功能后,再转导人早期胎肝造血细胞,将被转导的胎肝造血细胞移植入受亚致死量剂量照射的8只BALB/C裸鼠体内,检测rAAV2介导的β珠蛋白基因在裸鼠体内的表达.结果显示:制备的无辅助病毒污染的rAAV2具有较高的滴度、纯度,并能够在体外介导β基因的表达;在8只受试BALB/C裸鼠中,RT-PCR在2只BALB/C裸鼠骨髓中检测到β珠蛋白基因的表达.提示,rAAV2能够转导人早期胎肝细胞并介导β珠蛋白基因的表达,但同时也存在表达量较低的缺点,应用于β地中海贫血的基因治疗还需要对AAV2生物学特性做深入的研究. 展开更多
关键词 2型腺相关病毒 β珠蛋白基因 胎肝造血细胞 表达
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TyG指数、TyG-BMI指数和TG/HDL-C比值与绝经后女性非ST段抬高型急性冠脉综合征患者冠状动脉病变程度的相关性研究 被引量：4
14
作者 李文锋 屈宝泽 +2 位作者 刘明新 宋阳 张哲 《中国心血管杂志》 北大核心 2024年第6期547-553,共7页
目的分析绝经后女性非ST段抬高型急性冠脉综合征(NSTE-ACS)患者中三酰甘油-葡萄糖(TyG)指数、三酰甘油-葡萄糖体质指数(TyG-BMI)指数和三酰甘油/高密度脂蛋白胆固醇(TG/HDL-C)比值与Gensini评分之间的相关性并进行比较。方法回顾性研究... 目的分析绝经后女性非ST段抬高型急性冠脉综合征(NSTE-ACS)患者中三酰甘油-葡萄糖(TyG)指数、三酰甘油-葡萄糖体质指数(TyG-BMI)指数和三酰甘油/高密度脂蛋白胆固醇(TG/HDL-C)比值与Gensini评分之间的相关性并进行比较。方法回顾性研究。纳入2021年10月至2023年10月在锦州医科大学附属第一医院心内科确诊为NSTE-ACS的绝经后女性患者共489例,平均年龄(66.0±7.3)岁。根据Gensini评分中位数,将患者分为低分组(Gensini评分<32分,241例)和高分组(Gensini评分≥32分,248例);根据患者慢性病种类,分为糖尿病亚组(138例)及非糖尿病亚组(351例)、高血压亚组(322例)及非高血压亚组(167例)、非ST段抬高型心肌梗死(NSTEMI)亚组(141例)及不稳定型心绞痛(UA)亚组(348例)。收集患者一般临床资料和入院后次日空腹状态下相关化验指标。采用单因素和多因素logistic回归分析Ty G指数、TyG-BMI指数和TG/HDL-C比值与Gensini评分之间的相关性,并进行亚组分析。绘制受试者工作特征曲线,分析并比较3个指标对冠状动脉病变程度的预测能力。采用Spearman秩相关分析比较3个指标与Gensini评分的线性关系。结果多因素logistic回归分析表明,TyG指数(OR=2.879,P=0.002)和TG/HDL-C比值(OR=1.168,P=0.005)是Gensini评分≥32分的独立危险因素,其中Ty G指数在不同亚组人群中仍是Gensini评分≥32分的独立危险因素,糖尿病亚组(OR=3.121,P=0.001)、高血压亚组(OR=3.120,P<0.001)、NSTEMI亚组(OR=3.622,P=0.006)、UA亚组(OR=2.728,P<0.001)。Ty G指数对Gensini评分≥32分的预测能力优于Ty G-BMI指数(P<0.05),但相较于TG/HDL-C比值,预测能力差异无统计学意义(P>0.05)。Ty G指数(r=0.436)、TyG-BMI指数(r=0.170)和TG/HDL-C比值(r=0.406)与Gensini评分均呈线性正相关(均为P<0.001)。Ty G指数和TG/HDL-C比值与Gensini评分的相关程度相似,但两者均优于Ty G-BMI指数。结论在绝经后女性NSTE-ACS患者中,TyG指数和TG/HDL-C比值是冠状动脉病变程度的独立危险因素。TyG指数和TG/HDL-C比值对Gensini评分≥32分的预测能力以及二者与Gensini评分的相关程度相似。 展开更多
关键词 冠心病 女性 非ST段抬高型心肌梗死 急性冠脉综合征 三酰甘油-葡萄糖指数 三酰甘油-葡萄糖体质指数 三酰甘油/高密度脂蛋白胆固醇比值 相关性
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三七病程相关蛋白基因PnPR1的表达特性以及功能分析 被引量：7
15
作者 张应鹏 陈虹均 +4 位作者 郑锂蕾 王自娥 崔秀明 葛锋 刘迪秋 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期2000-2007,共8页
该实验采用定量逆转录PCR(Quantitative reverse transcription-PCR)方法分析三七[Panax notoginseng(Burk)F.H.Chen]病程相关蛋白(pathogensis related protein,PR)基因PnPR1的表达谱,并构建PnPR1的植物超表达载体,通过根癌农杆菌介导... 该实验采用定量逆转录PCR(Quantitative reverse transcription-PCR)方法分析三七[Panax notoginseng(Burk)F.H.Chen]病程相关蛋白(pathogensis related protein,PR)基因PnPR1的表达谱,并构建PnPR1的植物超表达载体,通过根癌农杆菌介导转入烟草(Nicotiana tabacum)中过量表达。结果表明:(1)外源茉莉酸甲酯预处理三七根部,能显著提高茄腐镰刀菌(Fusarium solani)侵染过程中PnPR1基因的表达量。(2)4种信号分子茉莉酸甲酯、水杨酸、过氧化氢和乙烯利处理均能够不同程度地提高PnPR1基因在三七根中的表达水平,但3种信号分子抑制剂处理三七根部后PnPR1的表达量下调。(3)PnPR1在T_(2)代转基因烟草中稳定表达,并且转基因烟草株系对茄腐镰刀菌的抗性显著提高。研究认为,PnPR1基因在转录水平上响应茄腐镰刀菌的侵染,并受茉莉酸甲酯等信号分子的诱导,在烟草中过表达PnPR1基因可增强对茄腐镰刀菌的抗性,表明PnPR1是三七应对根腐病菌防卫反应中的抗病基因。 展开更多
关键词 三七 病程相关蛋白 过表达 抗性 茄腐镰刀菌
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信号分子与叶锈菌诱导下小麦病程相关蛋白1基因的表达分析 被引量：3
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作者 栗小英 刘景坤 +2 位作者 张艳俊 王海燕 刘大群 《江苏农业科学》 北大核心 2015年第9期28-31,共4页
病程相关蛋白1(pathogenesis-related proteins1,PR1)是一类以基因家族形式存在的重要病程相关蛋白,在前期研究中,在小麦抗叶锈病近等基因系材料Ta Lr35中成功获得了1个小麦病程相关蛋白1基因Ta Lr35PR1,具有植物防御体系中的SCP保守结... 病程相关蛋白1(pathogenesis-related proteins1,PR1)是一类以基因家族形式存在的重要病程相关蛋白,在前期研究中,在小麦抗叶锈病近等基因系材料Ta Lr35中成功获得了1个小麦病程相关蛋白1基因Ta Lr35PR1,具有植物防御体系中的SCP保守结构域。利用生物信息学方法进一步明确,该基因含有信号肽,定位于细胞间隙,可能含有跨膜结构域,相对分子量为17.3 ku,与多个植物病程相关蛋白1序列具有较高同源性;利用半定量RT-PCR方法结合genetools、SPSS软件分析Ta Lr35PR1基因表达模式,结果表明,信号分子水杨酸(salicylic acid,SA)、脱落酸(abscisic acid,ABA)明显诱导该基因表达,且用信号分子预处理后接种叶锈菌,基因表达量明显增加;构建了Ta Lr35PR1基因的原核表达载体p EASY-PR1,在大肠杆菌中高效表达分子量约为17 ku的融合蛋白,明确其最佳诱导条件为在0.8 mmol/L IPTG下于25℃诱导8 h。 展开更多
关键词 叶锈菌 信号分子 病程相关蛋白1 表达分析 原核表达
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肿瘤高表达细胞周期相关蛋白在非小细胞肺癌中的表达及临床意义 被引量：3
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作者 李维妙 夏靖华 +5 位作者 冯征 王雪娇 文苗苗 邢昊 程庆书 张志培 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期668-671,共4页
目的研究肿瘤高表达细胞周期相关蛋白(CREPT)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织及相应癌旁组织中的表达,探讨其在肺癌中的作用及临床意义。方法收集271例NSCLC组织,采用免疫组织化学方法检测NSCLC组织以及癌旁组织中CREPT的表达。结果 CREPT在N... 目的研究肿瘤高表达细胞周期相关蛋白(CREPT)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织及相应癌旁组织中的表达,探讨其在肺癌中的作用及临床意义。方法收集271例NSCLC组织,采用免疫组织化学方法检测NSCLC组织以及癌旁组织中CREPT的表达。结果 CREPT在NSCLC组织中表达阳性率为96.1%,明显高于在癌旁组织的表达率(30.4%);CREPT表达与年龄、肿瘤大小无关,CREPT在低分化肿瘤组织表达增强;CREPT在总NSCLC样本的不同临床分期间表达有显著性差异;在总NSCLC、有淋巴结转移的腺癌组织中,CREPT表达明显增强;鳞癌CREPT的表达与淋巴结转移无明显关联。结论CREPT在NSCLC不同病理分级间表达存在差异,有淋巴结转移的腺癌组织CREPT表达增强。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 肿瘤高表达细胞周期相关蛋白 免疫组织化学技术 Wnt细胞通路
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费尔干猪毛菜病程相关蛋白SfPR1a基因的异源表达增强了烟草对干旱、盐及叶斑病的抗性 被引量：4
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作者 衡友强 游西龙 王艳 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期503-512,共10页
为明确一年生草本盐生植物费尔干猪毛菜(Salsola ferganica Drob.)病程相关蛋白基因SfPR1a (GenBank登录号为JQ670917)是否参与了植物对逆境胁迫的响应,采用qRT-PCR检测了该基因在不同组织部位和脱落酸(ABA)、茉莉酸(JAs)、乙烯合成直... 为明确一年生草本盐生植物费尔干猪毛菜(Salsola ferganica Drob.)病程相关蛋白基因SfPR1a (GenBank登录号为JQ670917)是否参与了植物对逆境胁迫的响应,采用qRT-PCR检测了该基因在不同组织部位和脱落酸(ABA)、茉莉酸(JAs)、乙烯合成直接前体(ACC)等相关激素胁迫及NaCl处理下的表达规律,同时对转基因烟草在盐、旱及丁香假单胞菌等胁迫下的抗性进行了鉴定。结果显示, SfPR1a基因在费尔干猪毛菜根中的表达量显著高于茎叶中,且受到ABA、JAs、ACC、NaCl的积极诱导;干旱胁迫下,转基因烟草的丙二醛(MDA)含量显著低于野生型烟草,显示出较强的抗旱表型;盐胁迫下,异源表达SfPR1a的转基因烟草幼苗生长显著优于野生型烟草;丁香假单胞菌攻毒后的转基因烟草叶片呈现严重的坏死反应,但植株的整体抗性表型显著优于野生型烟草;亚细胞定位结果显示该蛋白定位于植物细胞质外体空间。以上结果表明,费尔干猪毛菜病程相关蛋白SfPR1a基因参与了植物对非生物及生物胁迫的抗性。 展开更多
关键词 病程相关蛋白基因SfPR1a 表达规律 转基因烟草 抗性功能 亚细胞定位
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粗枝云杉病程相关蛋白基因PaPR10的克隆及表达分析 被引量：1
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作者 梁芳 刘利娟 +3 位作者 李成松 赵炜栋 刘应高 杨春琳 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期1450-1459,共10页
为了探究粗枝云杉(Picea asperata)病程相关蛋白PR10的核糖核酸酶活性,该研究以粗枝云杉一年生针叶为材料,以响应云杉落针病菌(Lophodermium piceae)侵染而显著上调的一个PR10基因(PaPR10)序列为研究对象,设计特异性引物,采用RT-PCR技... 为了探究粗枝云杉(Picea asperata)病程相关蛋白PR10的核糖核酸酶活性,该研究以粗枝云杉一年生针叶为材料,以响应云杉落针病菌(Lophodermium piceae)侵染而显著上调的一个PR10基因(PaPR10)序列为研究对象,设计特异性引物,采用RT-PCR技术克隆获得PaPR10基因的cDNA序列全长,使用生物信息学软件预测该基因编码蛋白的序列特征,将该基因进行原核表达和纯化,利用底物法检测纯化蛋白的核糖核酸酶活性,为解析PR10基因的抗菌活性机理奠定基础。结果表明:(1)成功克隆到PaPR10基因(GenBank登录号为OM743228)的ORF长456 bp,编码151个氨基酸序列,相对分子量为16.52 kD,理论等电点为5.73。(2)PaPR10蛋白无信号肽、不含跨膜区、定位在细胞质中,具有典型的病程相关蛋白Bet_v_1家族保守结构域和一个富含甘氨酸环(P-Loop)的保守结构域,但PaPR10蛋白的P-Loop结构域存在一个碱基突变;PaPR10蛋白与北美云杉等多种裸子植物和部分苔藓植物的PR10蛋白相似性较高。(3)IPTG诱导下,PaPR10蛋白以可溶性蛋白和包涵体的形式并存,且以终浓度为0.8 mmol/L的IPTG在30℃下诱导10 h时表达量最佳,但纯化后的PaPR10可溶性蛋白没有核糖核酸酶活性。研究发现,PaPR10蛋白不具备核糖核酸酶活性。 展开更多
关键词 粗枝云杉 病程相关蛋白 克隆表达 生物信息学分析 核糖核酸酶活性
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青花菜病程相关蛋白基因BoPR2的克隆与表达 被引量：2
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作者 金魏佳 何佳 +5 位作者 章燕如 范灵希 唐露静 叶佳燕 郑颖 蒋明 《广东农业科学》 CAS 2018年第12期76-81,174,共7页
病程相关蛋白基因以家族形式存在于植物中,在抗病反应中起着重要作用。以青花菜为试材,利用PCR法克隆到1个PR2基因,定名为BoPR2。测序结果表明,BoPR2基因组全长1188bp,具1个内含子,编码区全长1092bp,编码351个氨基酸;序列比对和系统发... 病程相关蛋白基因以家族形式存在于植物中,在抗病反应中起着重要作用。以青花菜为试材,利用PCR法克隆到1个PR2基因,定名为BoPR2。测序结果表明,BoPR2基因组全长1188bp,具1个内含子,编码区全长1092bp,编码351个氨基酸;序列比对和系统发育分析结果显示,BoPR2与野甘蓝、甘蓝型油菜和白菜PR2的相似度最高,在发育树上聚为一组,与亚麻荠、荠菜的相似度最低,亲缘关系最远;实时定量PCR结果表明,BoPR2的表达受芸薹根肿菌诱导,在10d时的相对表达量最大,约为对照的6倍;但BoPR2的表达不受核盘菌的诱导。BoPR2基因的克隆与表达分析,为青花菜抗病机理研究及开展分子育种奠定了基础。 展开更多
关键词 青花菜 病程相关蛋白 BoPR2 克隆 表达分析
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