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家蚕微孢子虫Nosemabombycis抗体蛋白非特异性结合的去除研究 被引量:3
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作者 陈祖佩 崔红娟 +1 位作者 万永继 潘敏慧 《西南农业学报》 CSCD 1995年第4期84-88,共5页
Nosemabombycis(N.b)抗血清常受非特异性干扰而难于实用。本试验通过硫酸铵盐析、透析袋及SephadexG—25柱层析脱盐、DEAE纤维素柱层析、组织粉吸收等一系列纯化过程,并经PACE电泳检查表明所获... Nosemabombycis(N.b)抗血清常受非特异性干扰而难于实用。本试验通过硫酸铵盐析、透析袋及SephadexG—25柱层析脱盐、DEAE纤维素柱层析、组织粉吸收等一系列纯化过程,并经PACE电泳检查表明所获得的高纯度抗体蛋白成分具有很强的特异性。用以制成致敏炭素检液,对Nosemabombycis发生阳性反应,对SCM6、SCM7均不发生阳性凝集反应。经万余张原种实用性试验,证明其灵敏度增强50倍,误判率为0,可以准确无误地检出Nosemabombycis,具有广泛的应用前景。 展开更多
关键词 抗体蛋白 非特异性结合 去除 家蚕 微孢子虫病
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人转录因子hASH4的表达纯化及其DNA结合活性
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作者 苏琢磊 楼田甜 +1 位作者 王远东 季朝能 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期218-224,共7页
hASH4蛋白所属的HLH转录因子家族在调节基因表达,调控细胞周期,决定细胞分化中起了重要作用。有研究表明hASH4蛋白可能与皮肤的分化发育有着密切的关系,但具体机制不明。成功构建了pET28b-hASH4表达质粒,并在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表... hASH4蛋白所属的HLH转录因子家族在调节基因表达,调控细胞周期,决定细胞分化中起了重要作用。有研究表明hASH4蛋白可能与皮肤的分化发育有着密切的关系,但具体机制不明。成功构建了pET28b-hASH4表达质粒,并在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达。经过对温度、时间、IPTG浓度等表达条件的优化,确定在37℃下1 mmol/L IPTG诱导表达4 h可达到最佳表达效果,并通过亲和层析和弱阳离子交换层析纯化蛋白,得到了电泳纯的目的蛋白。通过非放射性凝胶滞留试验发现hASH4蛋白单体只具有非特异性的DNA结合活性,而不具有特异性的DNA结合活性,推进其在体内的转录因子功能可能需先形成异源二聚体或多聚体才能进一步特异性结合DNA进而作用于下游基因。研究结果为hASH4蛋白的功能和作用方式提供了线索,并为其进一步的结晶条件筛选、晶体结构解析和功能研究奠定基础。 展开更多
关键词 螺旋-环-螺旋 碱性/螺旋-环-螺旋 hASH4 DNA结合 异性结合 非特异性结合
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密码子优化的牛精蛋白基因在大肠杆菌中的表达 被引量:16
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作者 张雅丽 杨国庆 +1 位作者 郭英 陈永福 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2002年第4期42-46,共5页
以PCR的方法得到牛精蛋白基因组基因 ,去其内含子 ,得到牛精蛋白cDNA ,克隆入原核表达载体 pGEX 2T中 ,组装成表达载体 pGEX 2T PE。利用大肠杆菌偏好的编码精氨酸的密码子CGT将野生型牛精蛋白基因中编码精氨酸的稀有密码子 (AGA或A... 以PCR的方法得到牛精蛋白基因组基因 ,去其内含子 ,得到牛精蛋白cDNA ,克隆入原核表达载体 pGEX 2T中 ,组装成表达载体 pGEX 2T PE。利用大肠杆菌偏好的编码精氨酸的密码子CGT将野生型牛精蛋白基因中编码精氨酸的稀有密码子 (AGA或AGG)替换掉 ,通过基因合成得到密码子优化的牛精蛋白基因 ,将其克隆入原核表达载体pGEX 2T ,组装成表达载体pGEX 2T PS。将这两个表达载体分别转化入大肠杆菌表达菌株BL2 1中 ,经IPTG诱导 ,同样条件下 ,野生型牛精蛋白基因无法得到表达 ,密码子优化的牛精蛋白基因能够得到良好的表达 ,表达产物约占细菌总蛋白的 18%。将表达蛋白纯化 ,进行DNA—蛋白结合实验 ,发现其能与DNA发生非特异性的结合。 展开更多
关键词 密码子优化 牛精蛋白 大肠杆菌 基因表达 编码精氨酸 非特异性结合
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单壁碳纳米管无纺膜表面的PEG修饰及蛋白质吸附研究 被引量:10
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作者 郭小天 孟洁 +5 位作者 孔桦 宋礼 王超英 何朝辉 许海燕 解思深 《中国生物医学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第6期763-766,783,共5页
碳纳米管是一种纳米尺度的新型碳材料,具有独特的物理、化学性质。近年来,碳纳米管在生物医学领域的潜在应用前景已经引起科学界和产业界的极大兴趣与关注。与蛋白质分子的非特异性结合是碳纳米管应用于生物系统中必须考虑的基本问题之... 碳纳米管是一种纳米尺度的新型碳材料,具有独特的物理、化学性质。近年来,碳纳米管在生物医学领域的潜在应用前景已经引起科学界和产业界的极大兴趣与关注。与蛋白质分子的非特异性结合是碳纳米管应用于生物系统中必须考虑的基本问题之一。本研究应用扫描电镜和酶联免疫法作为评价方法,定性和定量地分析了血浆中重要凝血因子纤维蛋白原在单壁碳纳米管薄膜表面的非特异性吸附行为;同时,采用聚乙二醇(PEG)分子对单壁碳纳米管薄膜(SWNT膜)进行了表面修饰,通过X-光电子能谱(XPS)对材料表面的化学组成进行了表征,并初步探讨了PEG修饰对纤维蛋白原分子在SWNT膜表面非特异性吸附的阻止作用。实验结果表明,纤维蛋白原分子在SWNT膜表面有强烈的非特异性结合,吸附于薄膜表面的纤维蛋白原分子仍然保有自身的免疫原性。SWNT膜表面可以被PEG分子修饰,连接在薄膜表面的PEG分子可以在一定程度上抑制一定浓度范围内的纤维蛋白原分子的非特异性结合。 展开更多
关键词 碳纳米管 蛋白质分子 表面修饰 非特异性结合
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SPA的实验室制备及标记技术 被引量:4
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作者 赵培娥 刘冠章 +1 位作者 霍乃蕊 高宇 《山西农业大学学报》 CAS 1998年第1期70-71,共2页
SPA具有与IgGFC段非特异性结合的生物学特性,这一特性使其在免疫学研究中有重要的作用,根据应用目的不同,SPA制剂分为三类:菌体试剂、IgG-SPA、可溶性纯化SPA。本文将介绍这三种试剂的实验室制备方法及SPA... SPA具有与IgGFC段非特异性结合的生物学特性,这一特性使其在免疫学研究中有重要的作用,根据应用目的不同,SPA制剂分为三类:菌体试剂、IgG-SPA、可溶性纯化SPA。本文将介绍这三种试剂的实验室制备方法及SPA的FITC、HRP、125I的标记技术。 展开更多
关键词 SPS 非特异性结合 制备方法 标记技术 免疫学
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