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一种从非变性聚丙烯凝胶中回收小片段DNA的方法
被引量:
2
1
作者
向小华
焦禹顺
+4 位作者
吴新儒
程亚增
侯烁
刘贯山
王元英
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第5期68-72,共5页
利用高分辨率的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳是分离、纯化特异性小片段DNA的首选方法,也是开展后续多种分子生物学试验的前提。本试验比较了改良煮沸法(液氮研磨+煮沸+低温浓缩)、煮沸法及直取法回收小片段DNA,以回收样品模板进行第二次PC...
利用高分辨率的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳是分离、纯化特异性小片段DNA的首选方法,也是开展后续多种分子生物学试验的前提。本试验比较了改良煮沸法(液氮研磨+煮沸+低温浓缩)、煮沸法及直取法回收小片段DNA,以回收样品模板进行第二次PCR扩增,结果表明:改良方法回收的DNA的纯度高,特异性好,回收率与经典煮沸法相当。在保证回收产物的特异性时,用低温浓缩法替代乙醇/醋酸钠共沉淀也具有可行性及一定的创新性。
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关键词
非变性聚丙烯凝胶
DNA小片段
二次PCR
改良煮沸法
胶
回收
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职称材料
从非变性聚丙烯酰胺凝胶回收纯化DNA样本
被引量:
7
2
作者
朱玉君
樊叶杨
庄杰云
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第1期193-195,共3页
介绍一种从非变性聚丙烯酰胺凝胶中回收和纯化目标DNA片段的方法,经比较回收纯化前后PCR产物的电泳结果,表明该方法具有简单快捷和效率高的优点。
关键词
非
变性
聚丙烯
酰胺
凝
胶
回收纯化
目标DNA片段
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职称材料
从非变性聚丙烯酰胺凝胶中快速高效回收DNA片段
被引量:
2
3
作者
周颐
王忆平
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第5期194-198,共5页
获得特异性的DNA是开展多种分子生物学试验的前提,具有高分辨率的聚丙烯酰胺凝胶电泳是纯化特异性DNA的首选。借助液氮对凝胶的固化作用,介绍了通过研磨破坏聚丙烯酰胺凝胶结构回收纯化DNA的方法。将通过该方法回收纯化的DNA和采用琼脂...
获得特异性的DNA是开展多种分子生物学试验的前提,具有高分辨率的聚丙烯酰胺凝胶电泳是纯化特异性DNA的首选。借助液氮对凝胶的固化作用,介绍了通过研磨破坏聚丙烯酰胺凝胶结构回收纯化DNA的方法。将通过该方法回收纯化的DNA和采用琼脂糖凝胶电泳回收纯化的DNA,经由聚丙烯酰胺凝胶电泳的进一步检测,结果显示,该方法与琼脂糖凝胶电泳回收法相比,所获得DNA的纯度高,特异性好,且效率相当。在提高DNA特异性的同时也兼具了经济高效耗时少等优点,可以广泛应用。
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关键词
非
变性
聚丙烯
酰胺
凝
胶
琼脂糖
凝
胶
小片段DNA回收纯化
凝
胶
阻滞试验
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职称材料
一种高效省本的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳银染法的建立——以水稻为例
被引量:
8
4
作者
王运斌
江良荣
+2 位作者
黄荣裕
黄育民
郑景生
《福建稻麦科技》
2015年第3期4-8,共5页
非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳银染技术已广泛用于DNA片段检测。介绍一种本实验室改进的高效省本的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳银染方法,该法将固定和染色两步骤合并,整个银染过程只需16 min即可完成。同时,该法无需使用无水乙醇和冰乙酸,减...
非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳银染技术已广泛用于DNA片段检测。介绍一种本实验室改进的高效省本的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳银染方法,该法将固定和染色两步骤合并,整个银染过程只需16 min即可完成。同时,该法无需使用无水乙醇和冰乙酸,减少了硝酸银、氢氧化钠及甲醛的使用量。
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关键词
非
变性
聚丙烯
酰胺
凝
胶
电泳
银染
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职称材料
微卫星DNA非变性PAGE银染法的分析探讨
被引量:
6
5
作者
王光利
石培春
+2 位作者
张薇
曹连莆
李英枫
《新疆农业科学》
CAS
CSCD
2006年第6期455-458,共4页
微卫星DNA非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE),是一种常用的DNA检测手段,具有很好的分离微小差异DNA片段的能力,而银染法使该方法得到了广大科研工作者的青睐,但是,在染色过程中,常可能出现一些问题,令结果的判断难以达到满意的效果。为此...
微卫星DNA非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE),是一种常用的DNA检测手段,具有很好的分离微小差异DNA片段的能力,而银染法使该方法得到了广大科研工作者的青睐,但是,在染色过程中,常可能出现一些问题,令结果的判断难以达到满意的效果。为此,对该方法进行了一系列的分析和探讨。
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关键词
微卫星DNA
PCR
非
变性
聚丙烯
酰胺
凝
胶
银染
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职称材料
大肠杆菌(Escherichia coli)体外脂肪酸合成反应的重建
被引量:
6
6
作者
冯赛祥
朱磊
+2 位作者
罗彪
孙益嵘
王海洪
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2008年第8期954-963,共10页
PCR扩增大肠杆菌参与脂肪酸合成的7个主要酶基因:fabD、fabG、fabH、fabA、fabZ、fabB和fabI,并构建相应的表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中分别诱导表达酶蛋白,并使用Ni-NTA琼脂糖纯化到7种酶蛋白.体外添加所需酶蛋白和辅因子,在不使用[...
PCR扩增大肠杆菌参与脂肪酸合成的7个主要酶基因:fabD、fabG、fabH、fabA、fabZ、fabB和fabI,并构建相应的表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中分别诱导表达酶蛋白,并使用Ni-NTA琼脂糖纯化到7种酶蛋白.体外添加所需酶蛋白和辅因子,在不使用[2-14C]丙二酸单酰CoA的条件下,成功地实现了脂肪酸合成反应的重建,另外还建立了数个鉴定有关酶蛋白功能的标准反应,并用其鉴定了丙酮丁醇梭菌FabZ的功能.
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关键词
细菌脂肪酸合成
脂酰ACP
非
变性
聚丙烯
酰胺
凝
胶
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职称材料
题名
一种从非变性聚丙烯凝胶中回收小片段DNA的方法
被引量:
2
1
作者
向小华
焦禹顺
吴新儒
程亚增
侯烁
刘贯山
王元英
机构
中国农业科学院烟草研究所中国农业科学院烟草遗传改良与生物技术重点开放实验室
中国农业科学院研究生院
青岛农业大学农学与植物保护学院
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第5期68-72,共5页
基金
公益行行业专项(201203091)
国家烟草专卖局重点项目(110201002002)
文摘
利用高分辨率的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳是分离、纯化特异性小片段DNA的首选方法,也是开展后续多种分子生物学试验的前提。本试验比较了改良煮沸法(液氮研磨+煮沸+低温浓缩)、煮沸法及直取法回收小片段DNA,以回收样品模板进行第二次PCR扩增,结果表明:改良方法回收的DNA的纯度高,特异性好,回收率与经典煮沸法相当。在保证回收产物的特异性时,用低温浓缩法替代乙醇/醋酸钠共沉淀也具有可行性及一定的创新性。
关键词
非变性聚丙烯凝胶
DNA小片段
二次PCR
改良煮沸法
胶
回收
Keywords
non-denaturing polyacrylamide gel
short DNA fragments
secondary PCR
modified boiling method
gel recovery
分类号
Q503 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
从非变性聚丙烯酰胺凝胶回收纯化DNA样本
被引量:
7
2
作者
朱玉君
樊叶杨
庄杰云
机构
中国水稻研究所国家水稻改良中心水稻生物学国家重点实验室
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第1期193-195,共3页
基金
国家转基因专项(2008ZX08001-004)
水稻生物学国家重点实验室自主研究课题(ZZKT200801)
文摘
介绍一种从非变性聚丙烯酰胺凝胶中回收和纯化目标DNA片段的方法,经比较回收纯化前后PCR产物的电泳结果,表明该方法具有简单快捷和效率高的优点。
关键词
非
变性
聚丙烯
酰胺
凝
胶
回收纯化
目标DNA片段
Keywords
Nondenaturing polyacylamide gel Recovery and purification Target DNA fragment
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
从非变性聚丙烯酰胺凝胶中快速高效回收DNA片段
被引量:
2
3
作者
周颐
王忆平
机构
北京大学生命科学学院
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第5期194-198,共5页
基金
国家自然科学基金项目(30830005)
国家杰出青年科学基金项目(39925017)
文摘
获得特异性的DNA是开展多种分子生物学试验的前提,具有高分辨率的聚丙烯酰胺凝胶电泳是纯化特异性DNA的首选。借助液氮对凝胶的固化作用,介绍了通过研磨破坏聚丙烯酰胺凝胶结构回收纯化DNA的方法。将通过该方法回收纯化的DNA和采用琼脂糖凝胶电泳回收纯化的DNA,经由聚丙烯酰胺凝胶电泳的进一步检测,结果显示,该方法与琼脂糖凝胶电泳回收法相比,所获得DNA的纯度高,特异性好,且效率相当。在提高DNA特异性的同时也兼具了经济高效耗时少等优点,可以广泛应用。
关键词
非
变性
聚丙烯
酰胺
凝
胶
琼脂糖
凝
胶
小片段DNA回收纯化
凝
胶
阻滞试验
Keywords
Non-denaturing polyacrylamide gel Agarose gel Small DNA fragment recovery and purification Electrophoretic mobility shift assay
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
一种高效省本的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳银染法的建立——以水稻为例
被引量:
8
4
作者
王运斌
江良荣
黄荣裕
黄育民
郑景生
机构
厦门大学生命科学学院
出处
《福建稻麦科技》
2015年第3期4-8,共5页
基金
福建省自然科学基金计划项目(2012J01153)
福建省高校产学合作重大科技计划项目(2011N5013)
福建省科技重大专项(2013NZ0002-2)
文摘
非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳银染技术已广泛用于DNA片段检测。介绍一种本实验室改进的高效省本的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳银染方法,该法将固定和染色两步骤合并,整个银染过程只需16 min即可完成。同时,该法无需使用无水乙醇和冰乙酸,减少了硝酸银、氢氧化钠及甲醛的使用量。
关键词
非
变性
聚丙烯
酰胺
凝
胶
电泳
银染
Keywords
non-denaturant polyacrylamide gel
electrophoresis
silver staining
分类号
Q94-33 [生物学—植物学]
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职称材料
题名
微卫星DNA非变性PAGE银染法的分析探讨
被引量:
6
5
作者
王光利
石培春
张薇
曹连莆
李英枫
机构
石河子大学农学院
出处
《新疆农业科学》
CAS
CSCD
2006年第6期455-458,共4页
文摘
微卫星DNA非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE),是一种常用的DNA检测手段,具有很好的分离微小差异DNA片段的能力,而银染法使该方法得到了广大科研工作者的青睐,但是,在染色过程中,常可能出现一些问题,令结果的判断难以达到满意的效果。为此,对该方法进行了一系列的分析和探讨。
关键词
微卫星DNA
PCR
非
变性
聚丙烯
酰胺
凝
胶
银染
Keywords
Microsatellite DNA
PCR
non - denaturant polyacrylamide gel eletrophoresis
silvers raining
分类号
S132 [农业科学—农业基础科学]
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职称材料
题名
大肠杆菌(Escherichia coli)体外脂肪酸合成反应的重建
被引量:
6
6
作者
冯赛祥
朱磊
罗彪
孙益嵘
王海洪
机构
华南农业大学生命科学学院
出处
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2008年第8期954-963,共10页
基金
华南农业大学校长基金资助项目~~
文摘
PCR扩增大肠杆菌参与脂肪酸合成的7个主要酶基因:fabD、fabG、fabH、fabA、fabZ、fabB和fabI,并构建相应的表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中分别诱导表达酶蛋白,并使用Ni-NTA琼脂糖纯化到7种酶蛋白.体外添加所需酶蛋白和辅因子,在不使用[2-14C]丙二酸单酰CoA的条件下,成功地实现了脂肪酸合成反应的重建,另外还建立了数个鉴定有关酶蛋白功能的标准反应,并用其鉴定了丙酮丁醇梭菌FabZ的功能.
关键词
细菌脂肪酸合成
脂酰ACP
非
变性
聚丙烯
酰胺
凝
胶
Keywords
fatty acid synthesis of bacteria, acyl-ACP, native polyacrylamide gels
分类号
Q93 [生物学—微生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
一种从非变性聚丙烯凝胶中回收小片段DNA的方法
向小华
焦禹顺
吴新儒
程亚增
侯烁
刘贯山
王元英
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2015
2
在线阅读
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职称材料
2
从非变性聚丙烯酰胺凝胶回收纯化DNA样本
朱玉君
樊叶杨
庄杰云
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2010
7
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
从非变性聚丙烯酰胺凝胶中快速高效回收DNA片段
周颐
王忆平
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2013
2
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职称材料
4
一种高效省本的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳银染法的建立——以水稻为例
王运斌
江良荣
黄荣裕
黄育民
郑景生
《福建稻麦科技》
2015
8
在线阅读
下载PDF
职称材料
5
微卫星DNA非变性PAGE银染法的分析探讨
王光利
石培春
张薇
曹连莆
李英枫
《新疆农业科学》
CAS
CSCD
2006
6
在线阅读
下载PDF
职称材料
6
大肠杆菌(Escherichia coli)体外脂肪酸合成反应的重建
冯赛祥
朱磊
罗彪
孙益嵘
王海洪
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2008
6
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职称材料
已选择
0
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引证文献
统计分析
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