随机引物聚合酶链反应在检测变形链球菌基因多态性中的应用

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作者 李伟 刘兴容 《国际口腔医学杂志》 CAS 2006年第6期423-425,共3页

随机引物聚合酶链反应(AP-PCR)是一种DNA指纹技术,已成功应用于以往不能区分的菌株间的遗传变异,可以不需预知靶基因DNA结构顺序,而获得多态性DNA指纹图。随着AP-PCR技术的不断完善,其已被广泛应用于口腔变形链球菌的基因分型研究中。... 随机引物聚合酶链反应(AP-PCR)是一种DNA指纹技术,已成功应用于以往不能区分的菌株间的遗传变异,可以不需预知靶基因DNA结构顺序,而获得多态性DNA指纹图。随着AP-PCR技术的不断完善,其已被广泛应用于口腔变形链球菌的基因分型研究中。本文就采用AP-PCR技术对变形链球菌进行基因分型的相关研究进行综述。 展开更多

关键词 随机引物聚合酶链反应 变形链球菌 基因多态性 龋齿

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序列特异引物引导的聚合酶链式反应(PCR-SSP)结合血清学在疑难血型鉴定中的应用 被引量：2

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作者 宋艳艳 张羽茜 +2 位作者 曹昕瑞 于笑难 郑伟 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期824-827,共4页

目的 探讨血型血清学与序列特异引物引导的聚合酶链式反应(PCR-SSP)基因分型在ABO疑难血型鉴定中的作用。方法 用血清学分析鉴定的ABO疑难血型标本80例,同时采用PCR-SSP法进行基因分型,结合两种方法学结果,确定血型及制定输血策略。结果... 目的 探讨血型血清学与序列特异引物引导的聚合酶链式反应(PCR-SSP)基因分型在ABO疑难血型鉴定中的作用。方法 用血清学分析鉴定的ABO疑难血型标本80例,同时采用PCR-SSP法进行基因分型,结合两种方法学结果,确定血型及制定输血策略。结果 血清学鉴定亚型40例,其他原因引起的抗原抗体缺失或减弱正常血型40例;PCR-SSP法基因分型亚型41例(3例二者结果不一致:血清学Ael型1例,基因分型O2O2;血清学O型1例,基因分型BO1;血清学A型1例,基因分型AB),正常血型39例。结论 使用血清学结合基因分型鉴定ABO疑难血型具有重要意义。 展开更多

关键词 ABO血型 血型血清学 序列特异引物引导的聚合酶链式反应(PCR-SSP) 疑难血型

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利用随机引物对PCR反应条件的筛选及优化试验 被引量：1

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作者 赵宗胜 马兵钢 +1 位作者 崔百明 王金富 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2002年第4期271-275,共5页

不同试验PCR反应的条件是不完全一致的 ,在PCR反应进行前就有必要对反应条件进行筛选和优化 ,因此 ,提出了对关键实验条件的正交筛选 ,结合反应的增强与抑制条件 ,从而筛选出适用于本实验室的最佳反应条件。

关键词 随机引物 PCR反应 正交筛选 反应条件 条件优化 聚合酶链反应 DNA复制

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中国对虾微卫星引物筛选及反应条件优化 被引量：3

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作者 孟宪红 孔杰 +1 位作者 刘萍 高焕 《海洋水产研究》 CSCD 北大核心 2006年第1期35-39,共5页

对33对中国对虾(Fenneropenaeus chinensis)微卫星引物进行筛选,确定了其中11对引物的最优PCR反应条件,包括各对引物的退火温度、反应体系中引物、Mg2+、dNTPs含量等,为建立微卫星多重PCR技术、最终使微卫星标记成为中国对虾家系识别的... 对33对中国对虾(Fenneropenaeus chinensis)微卫星引物进行筛选,确定了其中11对引物的最优PCR反应条件,包括各对引物的退火温度、反应体系中引物、Mg2+、dNTPs含量等,为建立微卫星多重PCR技术、最终使微卫星标记成为中国对虾家系识别的有效工具奠定了基础。 展开更多

关键词 中国对虾(Fenneropenaeus chinensis) 微卫星DNA 家系识别 引物 聚合酶链式反应

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随机引物PCR检测人DNA指纹条件的优化 被引量：1

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作者 童大跃 徐平 +4 位作者 区敬华 郭语彬 李芳 林达 伍新尧 《中山医科大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第3期231-234,共4页

【目的】探讨随机引物PCR检测人DNA指纹技术的最优化条件。【方法】应用随机引物PCR技术 ,用一对经筛选的短引物 ,对扩增人DNA指纹的条件进行了优化。【结果】实验结果显示 :DNA模板应新鲜 ,质量浓度在 5 0～ 5 5 0mg/L均有扩增产物。d... 【目的】探讨随机引物PCR检测人DNA指纹技术的最优化条件。【方法】应用随机引物PCR技术 ,用一对经筛选的短引物 ,对扩增人DNA指纹的条件进行了优化。【结果】实验结果显示 :DNA模板应新鲜 ,质量浓度在 5 0～ 5 5 0mg/L均有扩增产物。dNTP的浓度 0 2mmol/L最宜。Mg2 + 浓度 5 0mmol/L效果最佳。循环参数以两个三步PCR ,变性温度分别用 94℃、90℃ ,时间各为 30s,退火温度用 43℃、48℃ ,时间分别为 40s、5 0s,延伸温度用 72℃ ,时间分别为 1min、1min 2 0s。【结论】按照优化的实验条件 ,得出的DNA指纹图重复性好 ,个体特异性高 。 展开更多

关键词 AP-PCR DNA指纹法 聚合酶链反应 随机引物

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通用引物PCR方法在地表水病原菌检测中的应用 被引量：17

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作者 刘永军 张崇淼 +2 位作者 王晓昌 孙茵 薛小平 《环境科学研究》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第2期89-93,共5页

为了探索通用引物PCR方法在地表水病原细菌检测中的应用价值,利用16S rRNA基因的高度保守性,设计并合成细菌的通用引物,采用合成的引物扩增参考菌株及西安市区不同地表水样,并对PCR产物分别进行序列测定及序列同源性分析,同时检测水样... 为了探索通用引物PCR方法在地表水病原细菌检测中的应用价值,利用16S rRNA基因的高度保守性,设计并合成细菌的通用引物,采用合成的引物扩增参考菌株及西安市区不同地表水样,并对PCR产物分别进行序列测定及序列同源性分析,同时检测水样中的细菌总数和粪大肠杆菌浓度.结果显示,通用引物扩增4种参考菌株,320 bp处均可得到清晰的电泳条带,其特异性通过序列测定及同源性分析得到进一步验证;通用引物PCR可检出250 ng/L的埃希氏大肠杆菌标准菌株DNA,其PCR检测的灵敏度可达0.275 CFU/mL;用通用引物对西安市区不同地表水样进行PCR扩增,其中河、兴庆湖、大唐芙蓉园北湖、北石桥污水处理厂出水样品320 bp处都得到了清晰的电泳条带,而黑河水样没有条带;与之相对应的粪大肠杆菌群检测结果显示,只有北石桥污水处理厂出水和兴庆湖水样有粪大肠杆菌检出. 展开更多

关键词 通用引物 病原菌 聚合酶链式反应(PCR) 地表水

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藓类植物RAPD反应体系的建立 被引量：12

7

作者 沙伟 李晶 +1 位作者 曹同 苏晓明 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期482-485,共4页

本实验针对RAPD反应体系中Taq聚合酶、dNTP、模板和引物等影响较大的因素 ,设计了一组 4因素 4水平的正交试验。根据试验结果 ,筛选出了藓类植物RAPD反应体系中这 4个因素的最佳浓度配比 ,并在此基础上从 1 0 0个随机引物中筛选出了 30... 本实验针对RAPD反应体系中Taq聚合酶、dNTP、模板和引物等影响较大的因素 ,设计了一组 4因素 4水平的正交试验。根据试验结果 ,筛选出了藓类植物RAPD反应体系中这 4个因素的最佳浓度配比 ,并在此基础上从 1 0 0个随机引物中筛选出了 30条显示藓类植物遗传差异的多态性引物。 展开更多

关键词 RAPD 反应体系 遗传差异 随机引物 筛选 试验结果 藓类植物 聚合酶 多态性 水平

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荧光引物扩增AMG基因鉴定古代人骨遗骸的性别 被引量：5

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作者 刘树柏 崔银秋 +2 位作者 谢承志 朱泓 周慧 《吉林大学学报（理学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期139-142,共4页

建立一种用荧光标记引物扩增AMG基因的性染色体同源片段方法,对古代人骨遗骸进行性别鉴定.用其测定5个古代遗骸的性别,其结果与形态学结果一致.

关键词 荧光标记引物 AMG基因 性别鉴定 古代人骨遗骸 聚合酶链式反应 考古学

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多重嵌合引物对四引物扩增受阻突变体系PCR的改进及在卵巢癌相关位点中的应用 被引量：4

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作者 刘颖 张晨 +1 位作者 马学军 吴希阳 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期152-155,共4页

目的:建立一种简单快速的方法,可同时检测两个卵巢癌相关单核苷酸多态性位点rs608995和rs749292。方法:采用多重嵌合引物策略改进四引物扩增受阻突变体系聚合酶链式反应(PCR),通过设计rs608995和rs749292的特异性嵌合引物,经单管一次PCR... 目的:建立一种简单快速的方法,可同时检测两个卵巢癌相关单核苷酸多态性位点rs608995和rs749292。方法:采用多重嵌合引物策略改进四引物扩增受阻突变体系聚合酶链式反应(PCR),通过设计rs608995和rs749292的特异性嵌合引物,经单管一次PCR,琼脂糖电泳分析产物长度。结果:对46份全血样本,电泳结果均与测序一致,可准确分型。结论:经多重嵌合引物策略改进的四引物扩增受阻突变体系PCR可简便、快速、准确的获得2个位点的分型结果。 展开更多

关键词 单核苷酸多态 分型 四引物扩增受阻突变体系 聚合酶链式反应 卵巢癌 多重嵌合引物

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产超广谱β内酰胺酶肺炎克雷伯菌的检测及基因分型研究 被引量：4

10

作者 李从荣 李艳 +3 位作者 蔡璇 施菁玲 李红霞 彭少华 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2002年第4期100-102,共3页

目的　对产ESBL肺炎克雷伯菌的耐药现状进行分析研究 ,对耐药株进行基因分型 ,监测耐药株的流行状况。方法　对临床分离的 195株肺炎克雷伯菌进行药敏试验和ESBL检测 ,对产ESBL菌株以随机扩增多态性DNA分型法 (RAPD)进行基因分型。结果... 目的　对产ESBL肺炎克雷伯菌的耐药现状进行分析研究 ,对耐药株进行基因分型 ,监测耐药株的流行状况。方法　对临床分离的 195株肺炎克雷伯菌进行药敏试验和ESBL检测 ,对产ESBL菌株以随机扩增多态性DNA分型法 (RAPD)进行基因分型。结果　产ESBL肺炎克雷伯菌占 2 3% ,其中 5 1%来源于重症监护病房 (ICU)。ESBL阳性细菌对 12种抗生素的耐药性远远高于ESBL阴性菌。 2 0株产ESBL肺炎克雷伯菌分为 11型。结论　本院脑外SICU、呼吸科RICU存在产ES BL肺炎克雷伯菌的流行 ,合理使用抗生素 ,加强重点病区的消毒隔离措施 ,是控制医院感染流行的重要措施。RAPD是从分子水平对耐药细菌进行流行病学研究的一种经济、快速。 展开更多

关键词 产超广谱Β内酰胺酶 肺炎克雷伯菌 随机引物聚合酶链反应 ESBLS 流行病学

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一种用于水稻点突变检测的PCR引物设计方法 被引量：1

11

作者 邱福林 邵国军 +2 位作者 Hei LEUNG 吴建利 程式华 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期215-219,共5页

介绍了一种用于水稻点突变检测的PCR引物设计方法。利用该方法根据12个候选基因序列设计了12对引物,其中10对引物可以正常工作,能从基因组中扩增出特异性条带,合格率为83%,并且成功地在突变体中检测到点突变。这一方法不仅可以用于水稻... 介绍了一种用于水稻点突变检测的PCR引物设计方法。利用该方法根据12个候选基因序列设计了12对引物,其中10对引物可以正常工作,能从基因组中扩增出特异性条带,合格率为83%,并且成功地在突变体中检测到点突变。这一方法不仅可以用于水稻,也可以用于其他动植物。同时,对引物设计过程中常见问题进行了讨论并给出了解决办法。 展开更多

关键词 水稻 定向诱导基因组局部突变 点突变检测 引物设计 聚合酶链式反应

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应用随机PCR技术制备靶基因文库随机片段

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作者 吕永强 杜桂鑫 童贻刚 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第20期1878-1880,共3页

目的　用随机PCR技术制备构建靶基因文库的随机基因片段。方法　先扩出靶基因 (HIV1Envgp160 )片段 ,然后设计两条引物 ,1条为锚定随机引物用于扩出靶基因的随机片段 ,另 1条为锚定特异引物用于对随机片段进行扩增 ,得到大量的随机片段 ... 目的　用随机PCR技术制备构建靶基因文库的随机基因片段。方法　先扩出靶基因 (HIV1Envgp160 )片段 ,然后设计两条引物 ,1条为锚定随机引物用于扩出靶基因的随机片段 ,另 1条为锚定特异引物用于对随机片段进行扩增 ,得到大量的随机片段 ;优化模板量、dNTP浓度、反应时间、温度和DNA聚合酶等反应条件 ,扩出靶基因的随机片段。结果　得到用于建库的理想靶基因随机片段。结论　随机PCR是制备靶基因文库随机片段的一个简便有效方法。 展开更多

关键词 靶基因 随机PCR 文库 HIV 扩增 制备 基因片段 dNTP浓度 DNA聚合酶 随机引物

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用荧光双链引物特异扩增并定量核酸 被引量：2

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作者 郭秋平 李庆阁 +1 位作者 栾国彦 梁基选 《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期108-111,共4页

描述了一种利用特殊的双链引物———突触引物 ,用于核酸扩增的特异定量检测 .在传统的引物的 5’端标记荧光物质 ,而在引物的互补序列的 3’端标记荧光淬灭剂以封闭其延伸 .二者杂交即成双链突触引物 .在制备PCR反应混合物阶段以及加... 描述了一种利用特殊的双链引物———突触引物 ,用于核酸扩增的特异定量检测 .在传统的引物的 5’端标记荧光物质 ,而在引物的互补序列的 3’端标记荧光淬灭剂以封闭其延伸 .二者杂交即成双链突触引物 .在制备PCR反应混合物阶段以及加热的初期 ,突触引物保持稳定的双链结构而不能引导扩增 ,在退火阶段 ,突触引物部分解链导致引物延伸 ,荧光物质与淬灭剂分开而产生荧光 .利用人 β珠蛋白基因对此方法进行了验证 .这种可自行退火的荧光引物不仅简单地实现了实时扩增 。 展开更多

关键词 突触引物 定量检测 荧光双链引物 核酸 聚合酶链式反应 特异扩增

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啤酒有害乳酸菌PCR引物的设计与验证 被引量：4

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作者 杨波 潘丽晶 《中国酿造》 CAS 北大核心 2006年第10期42-45,共4页

根据乳酸菌16SrDNA序列的特征,设计合成了针对啤酒有害乳酸菌的通用引物,在16SrDNA基因水平上采用聚合酶链式反应(PCR)技术鉴定了啤酒中59株有害乳酸菌的种类。同时根据鉴定结果设计了8种乳酸菌的特异引物,PCR技术验证结果表明该8种特... 根据乳酸菌16SrDNA序列的特征,设计合成了针对啤酒有害乳酸菌的通用引物,在16SrDNA基因水平上采用聚合酶链式反应(PCR)技术鉴定了啤酒中59株有害乳酸菌的种类。同时根据鉴定结果设计了8种乳酸菌的特异引物,PCR技术验证结果表明该8种特异引物能够准确鉴定乳酸菌。 展开更多

关键词 乳酸菌 16S RDNA 聚合酶链式反应(PCR) 引物

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随机扩增多态性DNA(RAPD)技术不适合烟草品种的鉴定

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作者 LucaRossi 赵百东 《中国烟草学报》 EI CAS CSCD 1999年第4期28-28,共1页

关键词 烟草品种 多态性DNA 随机扩增 RAPD 分子标记 烤烟品种 聚合酶链式反应 遗传多样性 基因组 反应条件的影响

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喉癌组织中环氧化酶-2（COX-2）基因表达的实时定量PCR研究

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作者 龚树生 丁娟 常青 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期547-547,共1页

测定环氧化酶-2（COX-2）mRNA在喉鳞癌组织中的含量，并分析COX-2 mRNA与喉鳞癌临床分期及组织分化程度的关系。用序列特异性引物和荧光染料SYBR greenⅠ聚合酶链式反应（PCR）方法，检测30例原发性喉鳞癌和癌旁组织中COX-2mRNA表达，采... 测定环氧化酶-2（COX-2）mRNA在喉鳞癌组织中的含量，并分析COX-2 mRNA与喉鳞癌临床分期及组织分化程度的关系。用序列特异性引物和荧光染料SYBR greenⅠ聚合酶链式反应（PCR）方法，检测30例原发性喉鳞癌和癌旁组织中COX-2mRNA表达，采用GAPDH作对照。结果，30份标本的扩增产物经熔解曲线分析及DNA琼脂糖凝胶电泳，证实均为COX-2。COX-2mRNA在喉鳞癌中的阳性率是100％，而在癌旁组织阳性率为40％（12／30例），NCOX分别为（16．54±13．27）、（9．24±6．91），两者之间差异有显著性意义（P〈0．05），且喉癌组织中的COX-2mRNA表达水平与喉癌组织分化程度及临床分期密切相关。结果表明，应用荧光染料SYBR greenⅠ的实时定量PCR技术能够对COX-2基因表达水平进行定量分析，COX-2基因表达的上调与喉癌的发生有关，且可以作为一种有效的喉癌分子标志。 展开更多

关键词 环氧化酶-2(COX-2) 实时定量PCR技术 基因表达水平 喉癌组织 PCR研究 聚合酶链式反应(PCR) DNA琼脂糖凝胶电泳 mRNA表达 COX-2MRNA 序列特异性引物

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广西道地药材肉桂及阴香的DNA分子鉴定研究 被引量：5

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作者 李立 吴桂凡 +3 位作者 罗轶 李丽莉 凌婕 马双成 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期191-196,203,共7页

建立一种能够准确鉴别肉桂及阴香的特异性聚合酶链式反应方法,以保障肉桂用药的安全性和有效性。通过对比分析肉桂及阴香的psbA-trnH序列差异找到特异性单核苷酸多态性位点,设计特异性引物,通过优化退火温度、循环次数,评估不同聚合酶... 建立一种能够准确鉴别肉桂及阴香的特异性聚合酶链式反应方法,以保障肉桂用药的安全性和有效性。通过对比分析肉桂及阴香的psbA-trnH序列差异找到特异性单核苷酸多态性位点,设计特异性引物,通过优化退火温度、循环次数,评估不同聚合酶种类和不同基因扩增仪等扩增条件对不同来源的肉桂及阴香进行特异性扩增,根据特异性扩增条带进行鉴别。结果表明退火温度为54℃,循环次数为35次时,肉桂经肉桂特异性引物扩增后在100~200 bp处出现特异性条带,阴香无条带;退火温度为56℃,循环次数为40次时,阴香经阴香引物扩增后在200~300 bp处出现特异性条带,肉桂无条带。该研究所建立的特异性PCR方法可以快速准确鉴别出肉桂及阴香,为控制肉桂的质量安全提供参考。 展开更多

关键词 肉桂 阴香 特异性聚合酶链式反应 特异性引物 质量安全

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马乳酒样乳杆菌马乳酒样亚种real-time PCR检测方法的建立与应用 被引量：1

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作者 吕厚姣 李欣媛 +3 位作者 白小佳 贾龙刚 耿伟涛 王艳萍 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第9期102-108,共7页

本研究建立了一种特异性实时聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)检测方法,根据模式菌株马乳酒样乳杆菌马乳酒样亚种ZW3的16S rDNA序列和全基因组序列设计筛选特异性引物,采用SYBR Green I荧光染料建立r... 本研究建立了一种特异性实时聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)检测方法,根据模式菌株马乳酒样乳杆菌马乳酒样亚种ZW3的16S rDNA序列和全基因组序列设计筛选特异性引物,采用SYBR Green I荧光染料建立real-time PCR方法,并对方法的特异性、灵敏度、重复性和混合体系等进行检测。结果表明,本研究所建立的方法特异性强、灵敏度高、重复性好,建立real-time PCR的标准曲线,其决定系数R2为0.965,具有良好的线性关系,且在马乳酒样乳杆菌马乳酒样亚种及混合体系中可以特异性检出。综上,本研究建立的real-time PCR法可以快速、准确地检测马乳酒样乳杆菌马乳酒样亚种,为马乳酒样乳杆菌的特异性定性定量检测提供了一种新的方法。 展开更多

关键词 马乳酒样乳杆菌马乳酒样亚种 实时聚合酶链式反应 特异性引物

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采用RAPD分析臭鼻克雷伯菌临床菌株的基因型 被引量：1

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作者 马佳毓 张文莉 +1 位作者 付英梅 叶杨芹 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2004年第5期106-107,共2页

臭鼻克雷伯菌是重要的条件致病菌 ,常引起老人及婴幼儿重症护理病房的交叉感染及爆发流行 ,对其进行流行病学监测有重要的医学意义。用随机引物聚合酶链式反应 (RAPD)对 37株臭鼻克雷伯菌临床菌株基因组DNA进行分型 ,分析扩增产物的指... 臭鼻克雷伯菌是重要的条件致病菌 ,常引起老人及婴幼儿重症护理病房的交叉感染及爆发流行 ,对其进行流行病学监测有重要的医学意义。用随机引物聚合酶链式反应 (RAPD)对 37株臭鼻克雷伯菌临床菌株基因组DNA进行分型 ,分析扩增产物的指纹图谱。实验结果表明 ,37株臭鼻克雷伯菌RAPD后可出现不同的指纹图谱 ,根据特异泳带C ,J ,F ,Q的有无 ,可将其分 7型 (I～VII)。RAPD可用于检测臭鼻克雷伯菌基因组DNA的异质性 ,是医院内感染分子流行病学研究的好方法。 展开更多

关键词 臭鼻克雷伯菌 随机引物聚合酶链式反应

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北京油鸡和矮脚鸡心脏型、脂肪型脂肪酸结合蛋白基因多态性的研究 被引量：32

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作者 叶满红 曹红鹤 +3 位作者 文杰 李宏滨 陈继兰 赵桂萍 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期422-426,共5页

根据不同物种间同一基因核苷酸序列的保守性及相似性,设计特异性引物,利用聚合酶链式反应技术(PCR),扩增鸡心脏型脂肪酸结合蛋白(H FABP)基因第二内含子序列;根据已经发表的鸡脂肪型脂肪酸结合蛋白(A FABP)基因mRNA序列,设计特异性引物... 根据不同物种间同一基因核苷酸序列的保守性及相似性,设计特异性引物,利用聚合酶链式反应技术(PCR),扩增鸡心脏型脂肪酸结合蛋白(H FABP)基因第二内含子序列;根据已经发表的鸡脂肪型脂肪酸结合蛋白(A FABP)基因mRNA序列,设计特异性引物,扩增鸡A FABP基因第三内含子序列。选用HhaⅠ、HaeⅢ、HinfⅠ、BamHⅠ、EcoRⅠ、PstⅠ、XmnⅠ和HindⅢ8种限制性内切酶对扩增产物分别进行单酶切,发现H FABP基因第二内含子HhaⅠPCR RFLP及A FABP基因第三内含子HinfⅠPCR RFLP。 展开更多

关键词 北京油鸡 矮脚鸡 心脏型 脂肪型 脂肪酸 蛋白基因 多态性 聚合酶链式反应 特异性引物 内切酶

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