促红细胞生成素对牦牛肾间质成纤维细胞凋亡因子表达的影响

1

作者 卢增华 崔燕 +6 位作者 余四九 白雪峰 卢鸿琴 何俊峰 卢凯 翟国亮 祁正满 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期3460-3471,共12页

旨在探讨促红细胞生成素(EPO)对牦牛肾间质成纤维细胞(RIFs)中凋亡因子的影响。本研究首先分别采集3头4岁龄的健康牦牛和黄牛的肾脏组织,采用免疫组织化学方法和Western blot检测牦牛和黄牛肾脏中EPO的准确分布及其表达量。同时对牦牛R... 旨在探讨促红细胞生成素(EPO)对牦牛肾间质成纤维细胞(RIFs)中凋亡因子的影响。本研究首先分别采集3头4岁龄的健康牦牛和黄牛的肾脏组织,采用免疫组织化学方法和Western blot检测牦牛和黄牛肾脏中EPO的准确分布及其表达量。同时对牦牛RIFs进行原代培养鉴定,并对其进行不同药物处理来调控RIFs中EPO表达水平,检测EPO对凋亡相关基因Bax,Bcl-2,PCNA在mRNA和蛋白表达水平的影响。免疫组化学检测结果显示,EPO在牦牛和黄牛肾脏中集合管上皮细胞、肾小管上皮细胞和小管周间质成纤维样细胞中均呈阳性表达。qRT-PCR和Western blot结果显示,EPO在牦牛肾脏中的表达量显著高于黄牛(P<0.001)。随后对生成EPO的RIFs进行原代培养并调控EPO的表达,结果表明:激活组显著升高RIFs中Bcl-2和PCNA的表达,降低Bax的表达(P<0.001)。EPO抑制组显著降低RIFs中Bcl-2、PCNA的表达,上调Bax的表达(P<0.001)。综上表明,EPO在牦牛和黄牛肾脏中集合管上皮细胞、肾小管上皮细胞和小管周间质成纤维样细胞中均呈阳性表达,牦牛肾脏中的EPO高表达能够促进RIFs中Bcl-2和PCNA的表达,并降低Bax的表达,说明EPO可以在牦牛肾脏中起到抗凋亡的作用。 展开更多

关键词 牦牛 促红细胞生成素(EPO) 肾间质成纤维细胞(RIFs) 凋亡

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黄芪对人肾间质成纤维细胞增殖和转化生长因子-β1表达的影响 被引量：59

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作者 陈清江 杨丽 +1 位作者 王辉 刘章锁 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2005年第5期871-873,共3页

目的:探讨黄芪对肾间质纤维化改善的作用机制。方法:体外培养人肾间质成纤维细胞(KFB),传至3代后分为3组:对照组(常规培养),血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)培养组(在培养液中分别加入10-8mol/L、10-7mol/L和10-6mol/L的AngⅡ),黄芪注射液干预组(... 目的:探讨黄芪对肾间质纤维化改善的作用机制。方法:体外培养人肾间质成纤维细胞(KFB),传至3代后分为3组:对照组(常规培养),血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)培养组(在培养液中分别加入10-8mol/L、10-7mol/L和10-6mol/L的AngⅡ),黄芪注射液干预组(分别于培养液中加入10-6mol/L的AngⅡ和10mg/L、20mg/L和40mg/L黄芪注射液)。作用48h后,各组用MTT比色法测定细胞增殖情况,用ELISA法测定细胞培养上清液中TGF-β1的水平。结果:AngⅡ可促进KFB增殖,刺激TGF-β1的分泌,且呈剂量依赖性(r分别为0.612和0.723,P<0.05);黄芪注射液可抑制AngⅡ的上述作用,且呈剂量依赖性(r分别为-0.561和-0.689,P<0.05)。结论:黄芪可以通过抑制成纤维细胞增殖和TGF-β1的分泌,延缓肾间质纤维化进展。 展开更多

关键词 黄芪 肾脏间质成纤维细胞 细胞增殖 转化生长因子-Β1

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PPAR-γ通过活化PTEN抑制肾间质成纤维细胞MMP2的活化 被引量：6

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作者 卢家美 刘丹 +4 位作者 张苏梅 杨艳艳 吕治安 韩锦 付荣国 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期386-391,共6页

目的探讨激活的PPAR-γ是否通过活化PTEN抑制血小板源性生长因子(PDGF)刺激的肾间质成纤维细胞MMP2活化,从而介导肾间质纤维化的发生。方法以原代分离培养的小鼠肾间质成纤维细胞为研究对象,以肾间质纤维化的主要刺激因子PDGF-AA刺激细... 目的探讨激活的PPAR-γ是否通过活化PTEN抑制血小板源性生长因子(PDGF)刺激的肾间质成纤维细胞MMP2活化,从而介导肾间质纤维化的发生。方法以原代分离培养的小鼠肾间质成纤维细胞为研究对象,以肾间质纤维化的主要刺激因子PDGF-AA刺激细胞。于PDGF-AA刺激细胞前,分别予以罗格列酮激活PPAR-γ,PI3K、PTEN、PPAR-γ特异性抑制剂LY294002、bpV(Pic)、GW9662预处理细胞,检测AKT、PTEN、PPAR-γ、MMP2的活化水平。结果成功分离并培养小鼠肾间质成纤维细胞,并证实PDGF-AA可剂量依赖性激活MMP2,而对MMP9、TIMPs无影响。特异性抑制PI3K/AKT信号通路或激活PPAR-γ显著抑制PDGF-AA刺激的AKT、MMP2活性;抑制PTEN可逆转PPAR-γ激活对PDGF-AA诱导的AKT磷酸化及MMP2活性的影响。结论 PI3K/AKT信号通路特异性介导PDGF-AA诱导的肾间质成纤维细胞MMP2的活化;激活的PPAR-γ通过活化PTEN抑制PI3K/AKT信号通路进而抑制MMP2活化。 展开更多

关键词 肾间质纤维化 肾间质成纤维细胞 血小板源性生长因子 基质金属蛋白酶-2 过氧化物酶体增殖物激活受体-Γ

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保肾片诱导大鼠肾间质成纤维细胞凋亡的实验研究 被引量：2

4

作者 朱晓雷 刘丽 王钢 《中医药学刊》 2003年第2期252-253,共2页

采用血清药理学方法 ,通过保肾片对大鼠肾间质成纤维细胞的作用研究 ,探讨中药保肾片治疗、延缓慢性肾功能衰竭进展的作用机理。目的 :研究中药保肾片对大鼠肾间质成纤维细胞是否具有诱导凋亡作用。方法 :取SD大鼠肾间质成纤维细胞进行... 采用血清药理学方法 ,通过保肾片对大鼠肾间质成纤维细胞的作用研究 ,探讨中药保肾片治疗、延缓慢性肾功能衰竭进展的作用机理。目的 :研究中药保肾片对大鼠肾间质成纤维细胞是否具有诱导凋亡作用。方法 :取SD大鼠肾间质成纤维细胞进行体外培养 ,采用血清药理学方法 ,取含药大鼠血清加入体外培养的细胞中 ,应用倒置显微镜、光镜、透射电镜及流式细胞仪等仪器观察研究保肾片对大鼠肾脏肾间质成纤维细胞的诱导凋亡作用。结果 :与正常大鼠血清对照组相比 ,含药大鼠血清能诱导成纤维细胞发生凋亡。结论 :保肾片延缓慢性肾衰进展的作用机理之一与诱导肾间质成纤维细胞发生凋亡有关。 展开更多

关键词 保肾片 肾间质成纤维细胞 细胞凋亡 研究

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PDGF-BB对人肾间质成纤维细胞CD44表达的影响

5

作者 倪兆慧 张庆怡 +3 位作者 钱家麒 王利民 许以平 童菊芳 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 1999年第S1期45-47,52,共4页

目的探讨血小板衍化生长因于一BB（PDGF-BB）与肾间质成纤维细胞的相互作用。方法应用人际间质成纤维细胞体外培养，以MTT比色法和RT-PCR方法观察PDGF-BB对人肾间质成纤维细胞的增殖作用和CD44mRNA表达的影响。结票PDGF-BB可促进人野间... 目的探讨血小板衍化生长因于一BB（PDGF-BB）与肾间质成纤维细胞的相互作用。方法应用人际间质成纤维细胞体外培养，以MTT比色法和RT-PCR方法观察PDGF-BB对人肾间质成纤维细胞的增殖作用和CD44mRNA表达的影响。结票PDGF-BB可促进人野间质成纤维细胞的增殖，与PDGF-BB的浓度呈正相关；PDGF-BB可上调人肾间质成纤维细胞CD44mRNA的表达，呈一定的剂量和时间依赖效应。结论PDGF-BB与肾间质成纤维细胞的相互作用在肾间质纤维化中可能起重要作用。 展开更多

关键词 PDGF-BB 肾间质成纤维细胞 CD₄₄

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肿瘤间质成纤维细胞对体外培养唾液腺多形性腺瘤细胞生物学行为的影响

6

作者 侯亚丽 李荷香 +3 位作者 宋鹏 杨艳霄 郝亚丽 刘慧娟 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期149-156,共8页

目的探讨肿瘤间质成纤维细胞(TSF)对体外培养唾液腺多形性腺瘤(SPA)细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法采用组织块培养法培养唾液腺多形性腺瘤细胞(SPAC)、TSF和瘤旁正常成纤维细胞(NF),并通过免疫细胞化学染色法进行细胞鉴定。选取对数... 目的探讨肿瘤间质成纤维细胞(TSF)对体外培养唾液腺多形性腺瘤(SPA)细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法采用组织块培养法培养唾液腺多形性腺瘤细胞(SPAC)、TSF和瘤旁正常成纤维细胞(NF),并通过免疫细胞化学染色法进行细胞鉴定。选取对数期TSF、NF制备条件培养液,培养SPAC并命名为TSF-SPAC组和NF-SPAC组,单纯培养SPAC作为对照组(SPAC组)。采用MTT实验、Transwell实验和划痕实验分别检测3组细胞的增殖、侵袭和迁移能力;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测3组培养液中血管内皮生长因子(VEGF)的表达量。结果免疫细胞化学染色显示:波形蛋白(Vimentin)在TSF和NF中为阳性,而α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和成纤维细胞活化蛋白(FAP)在NF中为阴性,在TSF中为弱阳性。MTT结果显示:TSF-SPAC组细胞增殖与NF-SPAC组和SPAC组的差异有统计学意义(P<0.05),NF-SPAC组与SPAC组的细胞增殖的差异无统计学意义(P>0.05)。Transwell侵袭实验和迁移实验显示:3组细胞的侵袭和迁移的差异无统计学意义(P>0.05)。ELISA检测结果显示:3组VEGF的表达量的差异均无统计学意义(P>0.05)。结论TSF可能参与了SPA的生物学行为,促进体外培养的SPAC增殖,对其体外侵袭和迁移无促进作用,为SPA寻找新的治疗靶点提供了方向。 展开更多

关键词 唾液腺多形性腺瘤 肿瘤间质成纤维细胞 增殖 侵袭 迁移 交界性肿瘤

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血管紧张素-(1-7)对血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠肾间质成纤维细胞活化的影响 被引量：3

7

作者 张小翠 贺红焰 +3 位作者 夏纪毅 樊均明 欧三桃 刘建 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期2221-2224,共4页

目的:观察血管紧张素-(1-7)[Ang-(1-7)]对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的大鼠肾间质成纤维细胞活化及细胞外基质分泌的影响并初步探讨其机制。方法:体外培养正常大鼠肾间质成纤维细胞(NRK-49F),分为对照组和Ang-(1-7)组、AngⅡ组和Ang-(1-7)... 目的:观察血管紧张素-(1-7)[Ang-(1-7)]对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的大鼠肾间质成纤维细胞活化及细胞外基质分泌的影响并初步探讨其机制。方法:体外培养正常大鼠肾间质成纤维细胞(NRK-49F),分为对照组和Ang-(1-7)组、AngⅡ组和Ang-(1-7)+AngⅡ组,培养72 h后,细胞免疫化学染色法检测细胞活化标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子β1(TGF-β1)和胰岛素样生长因子I(IGF-I)表达;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测上清液中TGF-β1、IGF-I及细胞外基质成分Ⅰ型胶原(ColⅠ)的含量。结果:对照组仅有基础水平的α-SMA表达,几无Col I、TGF-β1和IGF-I表达,Ang-(1-7)组与之类似;AngⅡ组细胞α-SMA及ColⅠ、TGF-β1、IGF-I表达较对照组显著增加(P<0.05);AngⅡ+Ang-(1-7)组与AngⅡ组比较,细胞α-SMA及Col I、TGF-β1、IGF-I表达明显减少(P<0.05)。结论:Ang-(1-7)可抑制AngⅡ诱导的肾间质成纤维细胞活化,减少细胞外基质成分ColⅠ的合成,其机制可能是通过下调致纤维化细胞因子TGF-β1和IGF-I的表达。 展开更多

关键词 血管紧张素-(1-7) 血管紧张素Ⅱ 肾间质成纤维细胞活化

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低氧下牦牛、黑白花牛肾间质成纤维细胞PDK1、Smad2、Caspase3等因子表达差异研究 被引量：2

8

作者 姚一凡 张伊阳 +5 位作者 董仕慧 李睿 张兰 周熳琳 乔自林 杨琨 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期1335-1343,共9页

为了比较低氧条件下不同海拔牛种肾间质成纤维细胞(RIFs)内PDK1、Smad2、Caspase3等因子的表达差异及细胞增殖差异,并进一步探究牦牛肾脏的高原低氧适应性特点,本研究采用牦牛和黑白花牛RIFs作为研究对象,低氧(1%O2)处理后,通过实时荧... 为了比较低氧条件下不同海拔牛种肾间质成纤维细胞(RIFs)内PDK1、Smad2、Caspase3等因子的表达差异及细胞增殖差异,并进一步探究牦牛肾脏的高原低氧适应性特点,本研究采用牦牛和黑白花牛RIFs作为研究对象,低氧(1%O2)处理后,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹(WB)法检测细胞内PDK1等因子表达差异。波形蛋白(Vimentin)免疫组化染色鉴定结果显示,两种牛的原代RIFs纯度较高,可用于后续试验。低氧处理后,两种牛的RIFs内PDK1、Smad2及Caspase3的mRNA和蛋白表达均存在不同程度上调,且种属间存在显著差异(P<0.05),牦牛HIF-1α、PDK1、Smad2及Caspase3等基因表达量于24 h达到峰值,之后下调,而黑白花牛基因则随时间呈递增趋势,且牦牛RIFs低氧下增殖能力低于黑白花牛。综上所述,低氧诱导的相关转录因子表达存在差异,两种牛RIFs的增殖能力存在差异,这可能是导致低氧下黑白花牛肾纤维化程度的加深,从而产生肾源性高原疾病的原因之一。本研究为比较不同海拔牛种肾脏的低氧适应性研究提供了基础数据,为探索牦牛肾脏高原低氧适应机制提供了一定的理论依据。 展开更多

关键词 牦牛 黑白花牛 肾间质成纤维细胞 低氧 增殖

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宫颈及宫颈癌间质成纤维细胞的分离、鉴定与衰老检测研究 被引量：3

9

作者 陈玮 陈亚萍 杨恭 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期258-265,共8页

背景与目的:宫颈癌作为最常见的妇科恶性肿瘤之一,近年来发病呈年轻化趋势。目前认为人类乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)的感染,特别是高危型HPV感染是其发生的主要因素。已有研究证实,在肿瘤发生的微环境中,间质成纤维细胞衰老... 背景与目的:宫颈癌作为最常见的妇科恶性肿瘤之一,近年来发病呈年轻化趋势。目前认为人类乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)的感染,特别是高危型HPV感染是其发生的主要因素。已有研究证实,在肿瘤发生的微环境中,间质成纤维细胞衰老可能促进上皮性肿瘤的发生,但宫颈癌的发生是否也伴有间质成纤维细胞的衰老鲜见报道。本研究拟对正常宫颈和宫颈癌间质成纤维细胞进行特异性研究,以揭示慢性炎症诱导宫颈癌发生的机制,旨在为宫颈癌的诊治提供新的理论依据。方法:分离纯化正常宫颈成纤维细胞(normal fi broblasts,NFs)和宫颈癌相关成纤维细胞(cancer-associated fi broblasts,CAFs),通过ELISA法检测细胞因子白介素-6(interleukin-6,IL-6)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的分泌水平;并用衰老相关β-半乳糖甘酶染色(senescence-associatedβ-galactosidas e,SA-β-gal)、细胞计数和蛋白质印记法(Western blot)分别鉴定细胞衰老、绘制细胞生长曲线和检测NFs与CAFs中p16蛋白表达。结果:CAFs分泌的细胞因子IL-6和VEGF比NFs高2倍以上(P<0.05);CAFs中SA-β-gal的活性比NFs高;而CAFs中p16水平的表达水平比NFs中高。结论:间质成纤维细胞衰老可能与宫颈癌的发生和HPV密切相关,研究细胞因子介导的宫颈癌间质衰老可能有助于宫颈癌的预防、诊断和治疗。 展开更多

关键词 宫颈癌 间质成纤维细胞 细胞衰老 上皮肿瘤细胞

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miR-23b-3p调控肾间质成纤维细胞成骨样分化参与Randall斑形成的机制研究 被引量：1

10

作者 雷波 邱明星 刘健男 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第12期2064-2072,共9页

目的探究miR-23b-3p对肾间质成纤维(hRIFs)细胞成骨样分化和Randall斑形成的影响及其可能机制。方法采用qRT-PCR技术检测草酸钙(CaOx)结石患者Randall斑组织(RP)和接受肾切除术的肾肿瘤患者正常乳头状组织(nRP)的miR-23b-3p和肌细胞特... 目的探究miR-23b-3p对肾间质成纤维(hRIFs)细胞成骨样分化和Randall斑形成的影响及其可能机制。方法采用qRT-PCR技术检测草酸钙(CaOx)结石患者Randall斑组织(RP)和接受肾切除术的肾肿瘤患者正常乳头状组织(nRP)的miR-23b-3p和肌细胞特异性增强子因子2C(MEF2C)、成骨标志物人骨钙蛋白(OCN)、骨桥蛋白(OPN)、Runt相关转录因子2(Runx2)的mRNA表达水平;体外分离、培养hRIFs细胞,将miR-23b-3p过表达质粒pSi-miR-23b-3p及空载质粒pSi-NC和MEF2C慢病毒过表达质粒Lv-MEF2C及空载质粒Lv-NC转染至hRIFs细胞中,并诱导细胞成骨分化14 d;ELISA法检测细胞碱性磷酸酶(ALP)活性;茜素红染色观察各组细胞矿化结节形成情况;qRT-PCR检测细胞中miR-23b-3p和MEF2C、OCN、OPN、Runx2 mRNA表达水平;Western blot检测细胞中MEF2C蛋白表达水平;双荧光素酶报告基因实验验证miR-23b-3p与MEF2C的靶向关系。结果①与nRP组比较,RP组中miR-23b-3p低表达,而MEF2C、OCN、OPN和Runx2 mRNA高表达;②hRIFs成骨诱导14 d后,细胞中ALP活性升高,矿化结节形成能力增强,miR-23b-3p表达水平降低,而MEF2C、OCN、OPN和Runx2 mRNA表达水平及MEF2C蛋白表达水平升高;③miR-23b-3p过表达降低成骨诱导后hRIFs细胞中ALP活性,抑制细胞矿化结节形成能力,下调细胞中OCN、OPN、Runx2 mRNA表达水平;④MEF2C过表达可逆转miR-23b-3p过表达对hRIFs细胞成骨分化的抑制作用;⑤MEF2C是miR-23b-3p下游靶基因。结论miR-23b-3p在RP组织及hRIFs细胞成骨样分化过程中低表达,上调miR-23b-3p可抑制hRIFs细胞的成骨样分化,其作用机制可能与靶向沉默MEF2C有关。 展开更多

关键词 miR-23b-3p 人肾间质成纤维细胞 肌细胞增强因子2C 成骨样分化 Randall斑 草酸钙结石

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扶肾降浊方含药血清对肾小管间质损害大鼠成纤维细胞TGF-β_1/Smads信号转导通路的影响 被引量：9

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作者 李春雨 苏玮莲 +1 位作者 魏晓露 李国霞 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期2043-2047,共5页

目的:探讨扶肾降浊方对系膜增生性肾小球肾炎(Ms PGN)大鼠肾小管间质损害的疗效机制。方法:采用扶肾降浊方水溶液灌胃干预Wistar大鼠常规制备含药血清;在Ms PGN动物模型基础上,延长造模时间至20周,使其自然发展为肾小管间质损害模型,体... 目的:探讨扶肾降浊方对系膜增生性肾小球肾炎(Ms PGN)大鼠肾小管间质损害的疗效机制。方法:采用扶肾降浊方水溶液灌胃干预Wistar大鼠常规制备含药血清;在Ms PGN动物模型基础上,延长造模时间至20周,使其自然发展为肾小管间质损害模型,体外培养12、16和20周模型大鼠间质成纤维细胞;采用real-time PCR和Western blotting法检测扶肾降浊方含药血清对病理状态间质成纤维细胞转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smad3和Smad7 mRNA及蛋白表达的影响。结果:Ms PGN大鼠间质成纤维细胞TGF-β1和Smad3 mRNA和蛋白表达上调,Smad7 mRNA和蛋白表达下调。扶肾降浊方含药血清随着给药周期的延长可部分逆转Ms PGN间质损害造成的上述mRNA和蛋白表达异常。结论:扶肾降浊方含药血清对Ms PGN大鼠间质成纤维细胞保护作用可能与调节TGF-β1/Smads信号转导通路有关。 展开更多

关键词 扶肾降浊方 肾间质成纤维细胞 血清药理法

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扶肾降浊方含药血清对肾小管间质损害大鼠成纤维细胞抗纤维化因子HGF和BMP-7的影响 被引量：4

12

作者 李春雨 魏晓露 +1 位作者 苏玮莲 李国霞 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期76-80,共5页

目的:探讨扶肾降浊方对系膜增生性肾小球肾炎(Ms PGN)大鼠肾小管间质损害的疗效及机制。方法:采用扶肾降浊方水溶液灌胃Wistar大鼠常规制备含药血清,在Ms PGN动物模型的基础上,延长造模时间至20周,使其自然发展为肾小管间质损害模型,体... 目的:探讨扶肾降浊方对系膜增生性肾小球肾炎(Ms PGN)大鼠肾小管间质损害的疗效及机制。方法:采用扶肾降浊方水溶液灌胃Wistar大鼠常规制备含药血清,在Ms PGN动物模型的基础上,延长造模时间至20周,使其自然发展为肾小管间质损害模型,体外培养造模12、16和20周末大鼠间质成纤维细胞,采用real-time PCR和Western blotting法检测扶肾降浊方含药血清对病理状态间质成纤维细胞中抗纤维化因子肝细胞生长因子(HGF)、骨形态发生蛋白-7(BMP-7)mRNA及蛋白表达的影响。结果:病理状态间质成纤维细胞中抗纤维化因子HGF、BMP-7 mRNA和蛋白表达下调,扶肾降浊方含药血清随着给药周期的延长可部分逆转间质损害造成的上述mRNA和蛋白表达异常。结论:扶肾降浊方含药血清对Ms PGN大鼠间质成纤维细胞的保护作用可能与调节抗纤维化因子HGF、BMP-7 mRNA和蛋白表达有关。 展开更多

关键词 扶肾降浊方 肾间质成纤维细胞 血清药理学方法 肝细胞生长因子 骨形态发生蛋白-7

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瞬时转染SARS-CoVM基因对大鼠肺成纤维细胞生长特性及生物学功能的影响

13

作者 刘乾 陈琦 +3 位作者 蒋涛 王震 闫明霞 许祖德 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期595-599,共5页

目的通过观察转染SARS-CoV M基因的大鼠肺间质成纤维细胞(fibrob last,FB)生长及功能的改变,初步探讨SARS病毒通过肺组织损伤而引发肺纤维化的可能机制和途径。方法碱裂解法扩增纯化质粒,酶消化法分离大鼠肺间质成纤维细胞;采用脂质体... 目的通过观察转染SARS-CoV M基因的大鼠肺间质成纤维细胞(fibrob last,FB)生长及功能的改变,初步探讨SARS病毒通过肺组织损伤而引发肺纤维化的可能机制和途径。方法碱裂解法扩增纯化质粒,酶消化法分离大鼠肺间质成纤维细胞;采用脂质体介导的方法瞬时转染M基因入FB;采用RT-PCR法和W estern b lot鉴定转染结果;四唑盐(MTT)比色法和流式细胞技术(FCM)检测转染后的大鼠肺成纤维细胞的生长情况;采用半定量RT-PCR和Realtim e PCR检测转染后基质金属蛋白酶-2(MMP-2)基因转录水平的变化。结果与转染空载体的成纤维细胞相比,转染M基因的成纤维细胞在转染48 h时生长明显增强,G0/G1期比例下降,S期比例增高;转染M基因后MMP-2的转录明显增强。结论成功地将携带有M基因的真核表达质粒瞬时转染入大鼠肺间质成纤维细胞,目的基因在肺间质成纤维细胞中表达并具有与SARS-CoV M相似的抗原性;SARS-CoV M蛋白可能促进肺间质成纤维细胞生长;并促进MMP-2的表达。 展开更多

关键词 SARS-CoVM蛋白 瞬时转染 基质金属蛋白酶-2 肺间质成纤维细胞 肺纤维化 大鼠

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间质细胞衰老诱导上皮细胞癌变的研究进展 被引量：2

14

作者 谷圣美 吴炅 杨恭 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期60-63,共4页

细胞衰老是根据永久性细胞周期阻滞而定义的。普遍认为,细胞衰老具有保护机体避免癌变的进化优势。然而,间质细胞的衰老却可以显著加快上皮肿瘤的发生,这种促瘤效应很可能是由衰老成纤维细胞激活的炎症网络造成的。对该调节机制的深入了... 细胞衰老是根据永久性细胞周期阻滞而定义的。普遍认为,细胞衰老具有保护机体避免癌变的进化优势。然而,间质细胞的衰老却可以显著加快上皮肿瘤的发生,这种促瘤效应很可能是由衰老成纤维细胞激活的炎症网络造成的。对该调节机制的深入了解,可为研究细胞衰老在肿瘤发生中的作用提供理论基础,同时也可为肿瘤的治疗提供新思路。 展开更多

关键词 上皮肿瘤形成 肿瘤微环境 上皮基质作用 细胞衰老 间质成纤维细胞 炎症网络 旁分泌信号

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