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牛乳中庆大霉素间接竞争酶联免疫吸附测定法的建立
1
作者 刘颖沙 雷红梅 +1 位作者 邢维维 吕紫怡 《热带农业科学》 2025年第5期98-103,共6页
庆大霉素作为一种氨基糖苷类抗生素,常被用于禽畜疾病防治,但过量使用会导致其在牛乳中残留,威胁人体健康。文章旨在优化庆大霉素间接竞争酶联免疫吸附测定法(ELISA),建立适用于生鲜乳现场检测的最佳反应体系。通过方阵滴定法确定包被... 庆大霉素作为一种氨基糖苷类抗生素,常被用于禽畜疾病防治,但过量使用会导致其在牛乳中残留,威胁人体健康。文章旨在优化庆大霉素间接竞争酶联免疫吸附测定法(ELISA),建立适用于生鲜乳现场检测的最佳反应体系。通过方阵滴定法确定包被原和单抗最佳稀释浓度,优化包被条件、包被液、一抗孵育条件、二抗稀释度等多种反应条件,并以生鲜乳为样品进行添加回收试验、准确度和特异性研究。结果显示,最佳包被原稀释倍数为1∶40000,最佳单抗稀释倍数为1∶10000;最佳反应条件下,线性检测范围为0~5 ng/mL,生鲜乳中庆大霉素检测限为15μg/L,加标回收率在72.3%~96.5%,与其他抗生素无交叉反应,检测结果与高效液相色谱法符合率良好。本研究建立的庆大霉素间接竞争ELISA方法灵敏度高、特异性好、准确度高,为生鲜乳中庆大霉素的快速检测提供了有效手段,后续将进一步扩大样品量探究试剂盒精确度,以提升其应用价值。 展开更多
关键词 庆大霉素 间接竞争elisa法 生鲜乳 快速检测
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拉沙里菌素单克隆抗体的研制及间接竞争ELISA检测方法的建立 被引量：10
2
作者 杨小康 张绘艳 +4 位作者 顾建红 袁燕 卞建春 刘宗平 刘学忠 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第10期3049-3056,共8页
为制备拉沙里菌素(LAS)单克隆抗体,建立针对LAS的间接竞争ELISA(Ci-ELISA)方法,试验采用了活性酯法将LAS分别与BSA和OVA偶联成LAS-BSA和LAS-OVA作为免疫原和检测原,6次免疫后,取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合,最终筛选出一株能稳定分泌抗... 为制备拉沙里菌素(LAS)单克隆抗体,建立针对LAS的间接竞争ELISA(Ci-ELISA)方法,试验采用了活性酯法将LAS分别与BSA和OVA偶联成LAS-BSA和LAS-OVA作为免疫原和检测原,6次免疫后,取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合,最终筛选出一株能稳定分泌抗LAS单克隆抗体的杂交瘤细胞株C11。经鉴定,C11的抗体类型为Ig G1,轻链为κ链;所制腹水效价为1∶16 000,与莫能菌素钠、盐霉素钠、马杜霉素胺、头孢噻吩钠和硫酸链霉素均无交叉反应。用此单克隆抗体建立LAS Ci-ELISA检测方法显示,Ci-ELISA标准工作曲线为y=0.376x-0.2374(R2=0.9914),LAS在5~1 000 ng/m L时,线性关系良好,IC50为90.22 ng/m L,加标回收率为81.76%~102.41%,表明方法精确度好、灵敏度高。LAS单克隆抗体的制备和Ci-ELISA方法的建立为下一步试剂盒的研发奠定了基础。 展开更多
关键词 拉沙里菌素 半抗原 单克隆抗体 间接竞争elisa
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基于Arah6的花生间接竞争ELISA检测方法的建立 被引量：6
3
作者 闫飞 周宁菱 +4 位作者 罗春萍 鲁俊华 李欣 吴志华 陈红兵 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2012年第17期303-306,共4页
建立了基于花生主要过敏原蛋白Arah6的间接竞争酶联免疫检测法,实现了对食物中花生的定量检测。利用花生过敏原Arah6纯品免疫新西兰大白兔,制得兔抗Arah6的多克隆抗体,以Arah6纯品作为包被抗原、自制抗体为一抗、辣根过氧化物酶标记的... 建立了基于花生主要过敏原蛋白Arah6的间接竞争酶联免疫检测法,实现了对食物中花生的定量检测。利用花生过敏原Arah6纯品免疫新西兰大白兔,制得兔抗Arah6的多克隆抗体,以Arah6纯品作为包被抗原、自制抗体为一抗、辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG为二抗,确定了包被抗原质量浓度为1μg/mL,一抗最佳稀释度为1:50000,酶标二抗稀释度为1:5000。此检测方法对Arah6的定量检测范围为16.5～10000ng/mL(折合成含花生的含量,约为165ng/mL～100μg/mL),抑制方程为抑制率I=21.418lgC-6.0633(C为Arah6的质量浓度,单位ng/mL),IC50为414.6ng/mL,相关系数R2=0.9989。该检测方法灵敏度高,检测范围广,适用于食品中花生现场快速检测。 展开更多
关键词 花生过敏原 ARA h 6 多克隆抗体 间接竞争elisa 检测
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间接竞争性ELISA检测甲胺磷残留 被引量：8
4
作者 董国伟 刘贤进 +1 位作者 王沫 余向阳 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期434-437,共4页
采用制备的兔抗血清建立了甲胺磷 (methamidophos,MTP)残留的间接竞争性ELISA方法 ,证明了抗血清的特异性较好 ,并确立了测定参数 :抗血清与包被抗原的最佳工作浓度分别为 1∶30 0 0和 1∶5 0 0 0 ;最适检测范围为 0 .0 1～ 0 .1μg/ml... 采用制备的兔抗血清建立了甲胺磷 (methamidophos,MTP)残留的间接竞争性ELISA方法 ,证明了抗血清的特异性较好 ,并确立了测定参数 :抗血清与包被抗原的最佳工作浓度分别为 1∶30 0 0和 1∶5 0 0 0 ;最适检测范围为 0 .0 1～ 0 .1μg/ml;批内变异系数 7.5 6 % ,批间变异系数 5 .70 %。 展开更多
关键词 残留检测 甲胺磷 农药残留 间接竞争性elisa
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间接竞争ELISA法检测牛乳中β-乳球蛋白含量的准确性评价 被引量：16
5
作者 袁水林 熊鼎 +2 位作者 陈红兵 高金燕 李欣 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第18期100-104,共5页
研究建立了以β-乳球蛋白标准品为包被抗原、自制抗体为一抗、辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG:HRP为二抗、邻苯二胺为底物的间接竞争酶联免疫检测法(indirect competitive enzyme-linked immu nosorbent,ELISA)。同时以反相高效液相色... 研究建立了以β-乳球蛋白标准品为包被抗原、自制抗体为一抗、辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG:HRP为二抗、邻苯二胺为底物的间接竞争酶联免疫检测法(indirect competitive enzyme-linked immu nosorbent,ELISA)。同时以反相高效液相色谱法定量检测相同样品中β-乳球蛋白含量,采用t检验方法来评价间接竞争ELISA的方法定量检测β-乳球蛋白的准确性。t检验方法结果显示:在显著水平α=0.05下,该间接竞争ELISA法检测β-乳球蛋白的测量值较为准确。 展开更多
关键词 牛乳过敏 Β-乳球蛋白 间接竞争elisa法 反相高效液相色谱
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金黄色葡萄球菌B型肠毒素间接竞争ELISA检测方法的建立 被引量：9
6
作者 王小红 徐康 +3 位作者 王莹 王儒恺 史贤明 谢笔钧 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第8期227-231,共5页
以金黄色葡萄球菌B型肠毒素免疫Balb/c小鼠,待血清效价达到要求后,腹腔注射骨髓瘤细胞,制备抗金黄色葡萄球菌B型肠毒素抗体,并建立快速检测金黄色葡萄球菌B型肠毒素的间接竞争ELISA(ciELISA)方法。经方阵滴定确定B型肠毒素的最佳包被浓... 以金黄色葡萄球菌B型肠毒素免疫Balb/c小鼠,待血清效价达到要求后,腹腔注射骨髓瘤细胞,制备抗金黄色葡萄球菌B型肠毒素抗体,并建立快速检测金黄色葡萄球菌B型肠毒素的间接竞争ELISA(ciELISA)方法。经方阵滴定确定B型肠毒素的最佳包被浓度为0.31μg/ml,抗B型肠毒素抗体的稀释度为1:1.2×104,羊抗鼠IgG-HRP的稀释度为1:103。本实验建立的B型肠毒素的间接竞争ELISA检测方法的最低检测量为1ng/ml,线性检测范围为1～103ng/ml,相关系数R2=0.9951,人工污染样品的平均回收率为94.5%。 展开更多
关键词 B型肠毒素 抗B型肠毒素抗体 间接竞争elisa
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β2-受体激动剂类药物多残留间接竞争ELISA检测方法的建立 被引量：8
7
作者 王瑞 曹旭敏 +11 位作者 徐军 李锐 高海侠 张泽宇 苏扣 孙晓亮 李木子 秦立德 王晓茵 王淑婷 李琳 赵思俊 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2020年第7期37-43,共7页
【目的】建立β2-受体激动剂类药物多残留间接竞争ELISA检测方法,为动物食源性β2-受体激动剂类药物残留的快速检测提供技术支持。【方法】以沙丁胺醇多克隆抗体为基础,优化间接竞争ELISA的检测条件,建立一种快速检测猪尿中沙丁胺醇、... 【目的】建立β2-受体激动剂类药物多残留间接竞争ELISA检测方法,为动物食源性β2-受体激动剂类药物残留的快速检测提供技术支持。【方法】以沙丁胺醇多克隆抗体为基础,优化间接竞争ELISA的检测条件,建立一种快速检测猪尿中沙丁胺醇、卡布特罗、西布特罗、克伦特罗、溴布特罗、马布特罗、克伦潘特、可尔特罗、吡布特罗、马喷特罗、比托特罗与妥布特罗等12种β2-受体激动剂类药物的间接竞争ELISA检测方法。【结果】建立的β2-受体激动剂类药物间接竞争ELISA检测方法的最佳反应条件为:37℃,抗原以1∶10000倍包被1 h,抗体以1∶40000稀释作用40 min,酶标抗体以1∶20000稀释作用40 min。采用建立的间接竞争ELISA最佳反应条件对猪尿中的β2-受体激动剂类药物残留进行检测,结果表明12种β2-受体激动剂类药物在0.1~20μg/L范围内线性关系良好,相关系数均大于0.952;检出限为0.15μg/L,定量限为0.5μg/L;在0.5与1.0μg/L的添加浓度下,回收率为68.4%~114.2%,批内、批间RSD分别为0.4%~10.1%和0.4%~12.5%。【结论】所建立的β2-受体激动剂类药物残留ELISA检测方法操作简单、快速,灵敏度高,适用于猪尿中β2-受体激动剂药物的筛选与检测。 展开更多
关键词 Β2-受体激动剂 间接竞争elisa 多残留检测 猪尿
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氟喹诺酮类药物多残留间接竞争ELISA检测方法的建立 被引量：11
8
作者 姜金庆 杨雪峰 +3 位作者 王自良 常新耀 王三虎 刘兴友 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期887-892,共6页
为建立同时检测多种氟喹诺酮药物的免疫学分析方法,本研究以碳二亚胺(EDC)二步法合成环丙沙星人工抗原,免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,建立氟喹诺酮类药物多残留检测方法。标准曲线在PBS中的线性检测范围为0.2 ng/mL～376 ng/mL,半数... 为建立同时检测多种氟喹诺酮药物的免疫学分析方法,本研究以碳二亚胺(EDC)二步法合成环丙沙星人工抗原,免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,建立氟喹诺酮类药物多残留检测方法。标准曲线在PBS中的线性检测范围为0.2 ng/mL～376 ng/mL,半数抑制浓度(IC50)为8 ng/mL,检测限(LOD)为0.1 ng/mL;抗体对恩诺沙星、诺氟沙星和培氟沙星均能特异性识别,IC50值分别为7.3 ng/mL、10.6 ng/mL、和13.2 ng/mL;标准品稀释液中NaOH和甲醇的最高容忍度分别为10%和30%;牛奶基质中添加5 ng/mL、20 ng/mL和50 ng/mL的标准品,环丙沙星、恩诺沙星、诺氟沙星和培氟沙星的回收率分别为93%～108%、96%～110%、92.5%～104%和93%～102%。 展开更多
关键词 环丙沙星 多克隆抗体 间接竞争elisa 氟喹诺酮药物 多残留检测
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间接ELISA和竞争ELISA检测小反刍兽疫病毒抗体的比较 被引量：5
9
作者 王净 李刚 史利军 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期333-336,共4页
旨在比较检测小反刍兽疫抗体的间接ELISA和竞争ELISA方法,通过诱导表达小反刍兽疫病毒(PPRV)N蛋白,并以此作为包被抗原,检测94份绵羊和25份山羊血清样本。结果显示间接ELISA与标准竞争ELISA试剂盒的符合率为74.8%,竞争ELISA与标准竞争EL... 旨在比较检测小反刍兽疫抗体的间接ELISA和竞争ELISA方法,通过诱导表达小反刍兽疫病毒(PPRV)N蛋白,并以此作为包被抗原,检测94份绵羊和25份山羊血清样本。结果显示间接ELISA与标准竞争ELISA试剂盒的符合率为74.8%,竞争ELISA与标准竞争ELISA试剂盒的符合率为96.6%。竞争ELISA比间接ELISA方法检测结果可信度高,适于临床推广应用。 展开更多
关键词 小反刍兽疫病毒 N蛋白 间接elisa 竞争elisa
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间接竞争ELISA检测大豆11S球蛋白和7S伴球蛋白 被引量：9
10
作者 彭楠 刘建峰 +1 位作者 梁运祥 葛向阳 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期661-664,共4页
采用酸沉淀、亲和层析(ConA-Sepharose 4B)等手段,成功地分离纯化了大豆11S球蛋白和7S伴球蛋白,SDS-PAGE检测表明2种蛋白纯度分别达到95%和90%。将纯化的11S球蛋白和7S伴球蛋白分别免疫大白兔获得抗血清,并建立起间接竞争ELISA检测大豆... 采用酸沉淀、亲和层析(ConA-Sepharose 4B)等手段,成功地分离纯化了大豆11S球蛋白和7S伴球蛋白,SDS-PAGE检测表明2种蛋白纯度分别达到95%和90%。将纯化的11S球蛋白和7S伴球蛋白分别免疫大白兔获得抗血清,并建立起间接竞争ELISA检测大豆豆粕及其深加工产品中11S和7S抗原蛋白含量的方法。 展开更多
关键词 11S球蛋白 7S伴球蛋白 亲和层析 间接竞争elisa法
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检测牛乳中三聚氰胺的间接竞争ELISA方法的建立 被引量：7
11
作者 李锋 王莉 +2 位作者 柴春彦 刘晓芳 刘国艳 《中国动物检疫》 CAS 2009年第9期47-48,53,共3页
利用戊二醛法合成的三聚氰胺—钥孔匙锥蓝蛋白(KLH)为免疫原制得三聚氰胺的多克隆抗体,并在此基础上以重氮法制备的三聚氰胺—牛血清白蛋白为包被抗原建立了检测三聚氰胺的间接竞争ELISA(ciELISA)检测方法。结果表明,理想的包被抗原质... 利用戊二醛法合成的三聚氰胺—钥孔匙锥蓝蛋白(KLH)为免疫原制得三聚氰胺的多克隆抗体,并在此基础上以重氮法制备的三聚氰胺—牛血清白蛋白为包被抗原建立了检测三聚氰胺的间接竞争ELISA(ciELISA)检测方法。结果表明,理想的包被抗原质量浓度为0.8mg/L,抗三聚氰胺抗血清的稀释倍数为1:400,最适检测范围为0.03-10mg/L,最小检测量为0.01mg/L,批内与批间变异系数分别为1.952%和6.673%,回归方程为y=-0.4239-0.0933。本实验建立的三聚氰胺含量的间接竞争酶联免疫吸附试验(ci-ELISA)方法可用于牛乳样品中三聚氰胺残留的检测。 展开更多
关键词 三聚氰胺 间接竞争elisa
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伏马菌素B1间接竞争ELISA检测方法的建立和应用 被引量：9
12
作者 陈飞 邵景东 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2007年第6期278-281,350,共5页
以人工合成的抗原OVA-FB1作为包被抗原,FB1（伏马菌素B1）为竞争抗原,两者与一定量的抗FB1单抗反应,建立检测FB1的间接竞争ELISA方法,对玉米样品进行初步检测应用。结果表明,间接竞争ELISA方法最佳抗原包被浓度为196 ng/ml,包被时间为4... 以人工合成的抗原OVA-FB1作为包被抗原,FB1（伏马菌素B1）为竞争抗原,两者与一定量的抗FB1单抗反应,建立检测FB1的间接竞争ELISA方法,对玉米样品进行初步检测应用。结果表明,间接竞争ELISA方法最佳抗原包被浓度为196 ng/ml,包被时间为4℃过夜,单抗最佳工作浓度为1∶4 000,酶标二抗最佳工作浓度为1∶2 500,最佳的抗原抗体竞争反应时间和温度为4℃过夜作用。可测最适范围为10-1 000 ng/ml,回归方程为y=1.113-0.313x,相关系数R^2为-0.990,灵敏度为90.88 ng/nl,最低检测限为7.83 ng/ml,批内和批间变异系数分别为3.24%和2.45%,平均添加回收率为94.32%。 展开更多
关键词 伏马菌素B1 间接竞争elisa 检测
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应用间接竞争ELISA检测山羊痘抗体方法的建立 被引量：2
13
作者 何光志 周颖 +6 位作者 田维毅 王平 王文佳 韩洁 安永如 简昌友 崔小东 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第35期20125-20127,共3页
[目的]为山羊痘疫苗接种山羊后产生的抗体效价检测和山羊痘的诊断奠定基础。[方法]采用Vero-E6传代细胞分离山羊痘病毒抗原,建立检测山羊痘抗体的间接竞争ELISA方法。[结果]检测山羊痘抗体的间接竞争ELISA的最佳工作条件:最佳抗原包被... [目的]为山羊痘疫苗接种山羊后产生的抗体效价检测和山羊痘的诊断奠定基础。[方法]采用Vero-E6传代细胞分离山羊痘病毒抗原,建立检测山羊痘抗体的间接竞争ELISA方法。[结果]检测山羊痘抗体的间接竞争ELISA的最佳工作条件:最佳抗原包被浓度为1μg/ml,兔抗高免血清最佳稀释度为1∶16 000,待检血清的工作浓度为1∶400,阳性血清的临界值为45.19%,阴性血清的临界值为38.89%。用该试验建立的ELISA方法检测3 000份接种山羊痘疫苗的山羊血清,阳性检出率为83.33%,琼脂扩散试验检出率为77.33%,竞争抑制ELISA方法较琼脂扩散试验方法敏感。[结论]该方法具有特异性高、快速、敏感等特点,适合检测山羊痘抗体。 展开更多
关键词 山羊痘 间接竞争elisa 山羊痘抗体
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间接竞争ELISA检测TGEV方法的建立 被引量：3
14
作者 钟涛 唐丽杰 +3 位作者 李一经 师东方 王术德 高慧江 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2007年第12期20-21,共2页
关键词 elisa检测 猪传染性胃肠炎病毒 TGEV 竞争 间接 冠状病毒科 VIRUS 病毒粒子
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达氟沙星间接竞争ELISA检测方法的建立 被引量：3
15
作者 李振华 斯坎达尔.买合木提 +1 位作者 魏东 张乃生 《中国畜牧兽医》 CAS 2007年第6期79-81,共3页
将达氟沙星（danofloxacin,DFLX）与牛血清白蛋白（BSA）、卵清白蛋白（OVA）偶联分别作为免疫原与包被原,达氟沙星为竞争的半抗原,建立间接竞争ELISA检测方法。试验结果表明,理想的包被抗原浓度为1.25μg/L,多抗（DFLX-PcAb）工作浓度... 将达氟沙星（danofloxacin,DFLX）与牛血清白蛋白（BSA）、卵清白蛋白（OVA）偶联分别作为免疫原与包被原,达氟沙星为竞争的半抗原,建立间接竞争ELISA检测方法。试验结果表明,理想的包被抗原浓度为1.25μg/L,多抗（DFLX-PcAb）工作浓度为1∶10000,酶标二抗的工作浓度为1∶4000,最适检测范围为0.1~10 ng/L,最低检测限为0.2 ng/L,批内和批间变异系数分别为3.81%和6.25%。得到回归方程y=0.7975-0.125x（R2=0.989）和标准曲线,从而建立了DFLX的快速检测残留的间接竞争酶联免疫吸附试验（ci-ELISA）。 展开更多
关键词 达氟沙星 残留检测 间接竞争elisa
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软骨藻酸间接竞争ELISA检测方法的研究 被引量：1
16
作者 刘元嫄 高利利 +2 位作者 程金平 王茜 王文华 《环境化学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期1192-1196,共5页
为研究满足海产品日常分析的免疫检测法,采用自行制备的软骨藻酸多抗隆抗体,建立间接竞争ELISA检测方法,分别摸索了抗原、一抗、二抗的最佳使用浓度及温育温度与时间,并用该方法测定了贝类样品中的DA含量.结果表明,该方法最低检测限约为... 为研究满足海产品日常分析的免疫检测法,采用自行制备的软骨藻酸多抗隆抗体,建立间接竞争ELISA检测方法,分别摸索了抗原、一抗、二抗的最佳使用浓度及温育温度与时间,并用该方法测定了贝类样品中的DA含量.结果表明,该方法最低检测限约为18 ng·mL-1,贝类样品测定的加标回收率在47.2%—94.2%之间.RSD在12.3%—17.0%之间.所购买3种的贝类样品中均无DA检出. 展开更多
关键词 软骨藻酸 间接竞争elisa 多克隆抗体
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猪表皮生长因子间接竞争ELISA检测方法的建立 被引量：2
17
作者 张万江 王秀梅 杨桂香 《动物医学进展》 CSCD 2008年第3期25-28,共4页
为建立酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测猪血清或尿液中猪表皮生长因子(porcinee pidermal growth factor,pEGF)的含量,以pEGF为包被原,人表皮生长因子(hu-mane pidermal growth factor,hEGF)为竞争抗原... 为建立酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测猪血清或尿液中猪表皮生长因子(porcinee pidermal growth factor,pEGF)的含量,以pEGF为包被原,人表皮生长因子(hu-mane pidermal growth factor,hEGF)为竞争抗原,两者与一定量的抗pEGF多抗反应。结果表明,理想的包被抗原浓度为0.625μg/mL,抗pEGF工作浓度为1∶64000,酶标二抗工作浓度为1∶20000,可检测的最适范围为0.4ng/mL^32ng/mL,最低检测限为1ng/mL,批内和批间变异系数分别为3.50%和5.22%。得到回归方程y=-34.53x+76.06(R2=0.993)和标准曲线,从而建立了快速定量测定pEGF含量的酶联免疫吸附试验方法。 展开更多
关键词 猪表皮生长因子 多克隆抗体 间接竞争elisa
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奶牛孕酮间接竞争ELISA检测方法的建立 被引量：1
18
作者 邵谱 杨正涛 +1 位作者 张乃生 周虚 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第18期7653-7654,7776,共3页
[目的]为孕酮检测试剂盒的研制奠定基础。[方法]采用二环己基碳化二亚胺法制备检测抗原，建立了检测奶牛孕酮含量的间接竞争EHSA方法。[结果]检测奶牛孕酮的间接竞争EHSA的最佳反应条件确定为：最佳包被浓度为100ng／ml，碳酸盐缓冲液... [目的]为孕酮检测试剂盒的研制奠定基础。[方法]采用二环己基碳化二亚胺法制备检测抗原，建立了检测奶牛孕酮含量的间接竞争EHSA方法。[结果]检测奶牛孕酮的间接竞争EHSA的最佳反应条件确定为：最佳包被浓度为100ng／ml，碳酸盐缓冲液的包被效果较好，以4℃过夜＋37℃2h佳，最佳封闭液为2％山羊血清，酶标抗体的工作浓度为0．13μg/ml。建立的标准曲线方程为y=-1．8444x-0．1401（R^2=0．9817），检测范围为0～20ng／ml，最低检测限为0．58ng／ml。该标准曲线的批内变异系数和批间变异系数分别为2．22％和2．37％。[结论]该研究建立了定量检测奶牛孕酮的间接竞争EHSA方法。 展开更多
关键词 奶牛孕酮 间接竞争elisa 定量检测
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腹泻性贝毒大田软海绵酸间接竞争ELISA检测方法的建立 被引量：1
19
作者 胡乐琴 柳俊秀 +2 位作者 王权 田晓玲 何培民 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2010年第6期31-33,共3页
关键词 elisa检测方法 大田软海绵酸 腹泻性贝毒 腹泻性贝类毒素 竞争 间接 中毒事件 食物中毒
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土壤中乙草胺残留的间接竞争ELISA检测方法研究 被引量：1
20
作者 惠小敏 梅平 王雄 《化学与生物工程》 CAS 2008年第9期72-74,共3页
建立了一种用于检测土壤中乙草胺残留量的间接竞争酶联免疫分析（EUSA）方法。结果表明，该方法的最低检测限为0．1μg·L^-1，线性检测范围为0．2～10μg·L^-1,土壤样品中乙草胺添加水平在5～50μg·kg^-1范围内的回收率... 建立了一种用于检测土壤中乙草胺残留量的间接竞争酶联免疫分析（EUSA）方法。结果表明，该方法的最低检测限为0．1μg·L^-1，线性检测范围为0．2～10μg·L^-1,土壤样品中乙草胺添加水平在5～50μg·kg^-1范围内的回收率在81．20％～93．27％之间，批次内、批次间变异系数均低于7．50％。经高效液相色谱（HPLC）确证，其准确度、精密度都符合残留分析的要求。 展开更多
关键词 土壤 乙草胺残留 间接竞争elisa
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