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锰过氧化物酶与阴离子型聚丙烯酰胺计算机分子模拟
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作者 王方略 张力雯 +3 位作者 张东晨 徐敬尧 吴学凤 邓胜松 《环境化学》 北大核心 2025年第4期1468-1477,共10页
为探究锰过氧化物酶(MnP)与阴离子型聚丙烯酰胺(HPAM)的微观相互作用,采用分子对接和分子动力学(MD)模拟研究阴离子型聚丙烯酰胺(HPAM)与MnP的结合,根据-CDOCKER Energy_score打分最高的原则,对获得最佳结合构象进行分析.结合亲和力分... 为探究锰过氧化物酶(MnP)与阴离子型聚丙烯酰胺(HPAM)的微观相互作用,采用分子对接和分子动力学(MD)模拟研究阴离子型聚丙烯酰胺(HPAM)与MnP的结合,根据-CDOCKER Energy_score打分最高的原则,对获得最佳结合构象进行分析.结合亲和力分析表明,MnP对HPAM-5有最高的亲和力,而且MnP对HPAM的亲和力随其碳链的延长逐渐升高.相互作用分析表明,MnPHPAM-2的稳定性比MnP-HPAM-3更差是由于HPAM-2分子内氢键;MnP-HPAM-4比MnP-HPAM-2和MnP-HPAM-3更稳定是由于盐桥;强氢键是MnP-HPAM-5最稳定的主要原因.MD模拟结果分析表明,MnP-HPAM-4享有最小的RMSD、RMSF和Rg,此时复合物结合是最稳定的.根据模拟及降解实验结果提出了MnP降解HPAM机理:H2O2引发MnP中Mn^(2+)氧化为Mn^(3+);Mn^(3+)从HPAM(1)和(2)攻击位点上抢夺一个电子而引发自由基链反应,在不破坏化学键下产生2种阳离子自由基,而且Mn^(3+)还原成Mn^(2+)供循环使用. 展开更多
关键词 过氧化物(mnp) 阴离子型聚丙烯酰胺(HPAM) 分子对接 分子动力学(MD) 模拟.
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一色齿毛菌锰过氧化物酶(MnP)活性检测与MnP1基因的克隆 被引量:2
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作者 于存 池玉杰 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第3期109-116,共8页
锰过氧化物酶(MnP)广泛存在于白腐菌中,是降解木质素的主要酶系。首先对采自长白山的一色齿毛菌菌株CB1降解木质素的过氧化物酶进行检测,结果表明一色齿毛菌可产生MnP,但不产生木质素过氧化物酶(LiP);Mn2+不是其产生MnP的必要因子,在LNA... 锰过氧化物酶(MnP)广泛存在于白腐菌中,是降解木质素的主要酶系。首先对采自长白山的一色齿毛菌菌株CB1降解木质素的过氧化物酶进行检测,结果表明一色齿毛菌可产生MnP,但不产生木质素过氧化物酶(LiP);Mn2+不是其产生MnP的必要因子,在LNAS培养基中加入木屑为底物的条件下,一色齿毛菌MnP最大酶活为18.4 U·L-1。在酶活检测的基础上,为了深入研究MnP降解木质素的功能,根据已知的MnP基因保守区序列设计引物,以一色齿毛菌菌株CB1的基因组DNA为模板,采用染色体步移技术,克隆到该菌株一个编码MnP1蛋白的全长DNA基因(GenBank登录号JQ782578.1),命名为Cu-mnp1。该基因DNA全长4 268 bp,含有16个外显子和15个内含子;其启动子区域含有TATA-Box,CAAT-Box,SP1,AP1,HSE,XRE等多个顺式作用元件;其cDNA基因(GenBank登录号JQ782579.1)编码区长度为1 092 bp,编码363个氨基酸。BLAST比对分析表明,在cDNA水平上Cu-mnp1与猴头菇菌株CB1的mnp2基因的相似性最高为70%。蛋白结构分析表明,Cu-MnP1含有4个二硫键属于短MnP。 展开更多
关键词 一色齿毛菌(单色下皮黑) 木质素降解 过氧化物 基因克隆 染色体步移
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锰过氧化物酶(MnP)对农药毒死蜱降解的初步研究 被引量:3
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作者 莫彩萍 赵林果 谢慧芳 《环境科学与技术》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期65-70,共6页
以广泛使用的有机磷杀虫剂毒死蜱为研究对象,利用白腐菌P.sordida YK-624菌株所产锰过氧化物酶(MnP)对其进行生物降解的初步研究。首先比较确定了MnP降解毒死蜱所需要的降解体系,即对于毒死蜱的降解,需要在有机酸(丙二酸)存在的缓冲体... 以广泛使用的有机磷杀虫剂毒死蜱为研究对象,利用白腐菌P.sordida YK-624菌株所产锰过氧化物酶(MnP)对其进行生物降解的初步研究。首先比较确定了MnP降解毒死蜱所需要的降解体系,即对于毒死蜱的降解,需要在有机酸(丙二酸)存在的缓冲体系中进行,此体系不需要表面活性剂Tween 80,但必须含有Mn2+和葡萄糖氧化酶氧化葡萄糖产生的H2O2。随后对主要影响因素的试验结果表明,MnP降解毒死蜱较好的条件是在pH 4.5的丙二酸缓冲体系中含7.5 mmol/L MnSO4、2.5 mmol/L葡萄糖以及40 U葡萄糖氧化酶,温度30℃。此时,400 U/L的MnP可将30 mg/L的毒死蜱经3 d时间降解77.51%。同时,利用GC-MS对毒死蜱酶降解后的产物进行了初步分析,得到1种可能的酶解产物O,O,O’,O’-四乙基二硫代焦磷酸酯,不同于水解和细菌降解途径,值得进行进一步研究。 展开更多
关键词 毒死蜱 过氧化物 生物降解 白腐菌 解产物
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诱导物及种间诱导对白腐菌的锰过氧化物酶(MnP)的诱导 被引量:1
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作者 钟紫旋 刘丽 +1 位作者 张勇 罗锋 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期166-170,共5页
本实验通过添加外源诱导物诱导和不同白腐菌种间相互诱导两种途径来研究Trametes versicolor、Pleurotus ostreatus、Dichomitus squalens、Bjerkandera adusta四种白腐菌产Mn P活性,发现这些白腐菌在一些诱导条件下可产生大量Mn P。结... 本实验通过添加外源诱导物诱导和不同白腐菌种间相互诱导两种途径来研究Trametes versicolor、Pleurotus ostreatus、Dichomitus squalens、Bjerkandera adusta四种白腐菌产Mn P活性,发现这些白腐菌在一些诱导条件下可产生大量Mn P。结果表明,外源诱导物中,2,5-二甲基苯胺是有效的Mn P诱导剂,对四种菌产Mn P均有不同程度的诱导作用。异丙醇能提高T.versicolor、P.ostreatus和D.squalens产Mn P活性,且诱导效果优于乙醇。Cu2+能显著提高T.versicolor和D.squalens产Mn P活性。Mn2+能显著提高P.ostreatus和B.adusta产Mn P活性。不同白腐菌相互作用时,T.versicolor、P.ostreatus和D.squalens三种菌两两共培养均有明显的Mn P种间诱导效果。本研究为大量产Mn P并将其应用于工业提供可能。 展开更多
关键词 白腐菌 过氧化物 外源诱导物 种间诱导
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锰过氧化物酶应用的研究进展 被引量:7
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作者 刘梦茹 付时雨 +1 位作者 詹怀宇 林鹿 《林产化学与工业》 EI CAS CSCD 2006年第2期112-116,共5页
介绍了锰过氧化物酶(MnP)及其产生菌的研究概况,综述了近年国内外关于MnP在纸浆的生物漂白、有机污染物的降解、染料的脱色、褐煤的生物降解、农业废弃物的处理和催化聚合反应等方面应用的研究进展。
关键词 木质素降解 白腐菌 过氧化物(mnp)
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木质素过氧化物酶和锰过氧化物酶对染料脱色的性能比较 被引量:8
6
作者 章燕芳 李华钟 +1 位作者 华兆哲 陈坚 《环境科学研究》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第5期17-21,共5页
通过控制培养基中Mn2 +的浓度获得只含有木质素过氧化物酶 (LiP)或锰过氧化物酶 (MnP)的单一酶培养物 ,用于比较LiP和MnP对染料降解脱色的条件和能力的差异。结果表明 ,LiP对橙Ⅰ降解脱色的最佳条件为H2 O2 0 15mmol L ,pH 3 0 ,温度 ... 通过控制培养基中Mn2 +的浓度获得只含有木质素过氧化物酶 (LiP)或锰过氧化物酶 (MnP)的单一酶培养物 ,用于比较LiP和MnP对染料降解脱色的条件和能力的差异。结果表明 ,LiP对橙Ⅰ降解脱色的最佳条件为H2 O2 0 15mmol L ,pH 3 0 ,温度 4 0℃ ;MnP为H2 O2 0 15mmol L ,pH 3 5,温度 4 0℃。最佳条件下 ,考察LiP和MnP作用下染料浓度和染料类型对脱色的影响 ,发现LiP作用下脱色率明显高于MnP作用下的脱色率 ,表明LiP可作用的染料浓度比MnP高 ,可作用的染料范围比MnP大。 展开更多
关键词 黄孢原毛平革菌 木质素过氧化物 过氧化物 脱色 染料 废水处理
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红平菇木质素降解酶系统漆酶、锰过氧化物酶及木质素过氧化物酶的检测 被引量:36
7
作者 池玉杰 闫洪波 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第12期154-158,共5页
White rot fungus Pleurotus djamor H1 was stilly cultured at 28 ℃ under 4 different kinds of LNAS culture solution,the extracellular enzyme solutions were sampled at different interval,O.D.values of the solutions,repr... White rot fungus Pleurotus djamor H1 was stilly cultured at 28 ℃ under 4 different kinds of LNAS culture solution,the extracellular enzyme solutions were sampled at different interval,O.D.values of the solutions,representing manganese peroxidase(MnP),laccase and lignin peroxidase(LiP)activities,were measured spectrophotometrically by monitoring the oxidation of 2,6-DMP at 470 nm,ABTS at 420 nm and veratryl alcohol(VA)at 310 nm,the lignin-degrading enzymes of the fungus and the relationships between enzyme activities and medium composition and substrates were gained.Results indicated that Pleurotus djamor could produce MnP and laccase simultaneously,but no Lip.Substrates wood sawdust and 2,6-DMP could significantly enhanced MnP and laccase activities,the biggest Mnp and laccase activity were 5 U·L-1.and 38 U·L-1 when no substrates were added,and 69 U·L-1 and 205 U·L-1 when substrates added.The paper offered a basic ligninolytic enzymology of Pleurotus djamor for future utilization of the enzymes and further study on MnP and laccase mechanism of the fungus. 展开更多
关键词 红平菇 木质素降解系统 过氧化物 活检测
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黄孢原毛平革菌合成锰过氧化物酶的工艺 被引量:11
8
作者 李华钟 章燕芳 +1 位作者 华兆哲 陈坚 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期48-52,共5页
研究了多种营养条件及培养条件对黄孢原毛平革菌 (Phanerochaetechrysosporium )WX2 13合成锰过氧化物酶的影响 .当培养基中葡萄糖质量浓度为 10 g/L ,酒石酸铵质量浓度为0 .2 g/L,吐温 80质量浓度为 1g/L ,MnSO4 ·H2 O为 0 .14g/... 研究了多种营养条件及培养条件对黄孢原毛平革菌 (Phanerochaetechrysosporium )WX2 13合成锰过氧化物酶的影响 .当培养基中葡萄糖质量浓度为 10 g/L ,酒石酸铵质量浓度为0 .2 g/L,吐温 80质量浓度为 1g/L ,MnSO4 ·H2 O为 0 .14g/L ,采用苯二甲酸缓冲液 ,最终pH 4 .5 ,2 5 0mL的三角瓶装液量 90mL ,接种量为 1.2× 10 6mL- 1时所获酶活较高 .经条件优化后锰过氧化物酶的活力达到 5 5 9U/L ,比未优化前提高了 36% .加入染料培养 ,发现该酶对所选用的偶氮染料、三苯甲烷类染料。 展开更多
关键词 黄孢原毛平革菌 过氧化物 脱色 染料 降解 合成工艺 摇瓶培养
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锰过氧化物酶产生菌的发酵优化及酶学性质研究 被引量:7
9
作者 吴会广 蔡宇杰 +2 位作者 苑博华 廖祥儒 张大兵 《食品与机械》 CSCD 北大核心 2008年第4期17-21,共5页
采用愈创木酚初筛平板从无锡惠山、龙山等地筛选出6株阳性菌株,通过摇瓶复筛从中得到一株产MnP活性较高的菌株SYBC-M3;同时进行部分发酵产酶条件的研究。在此基础上,对得到的MnP进行了粗酶的部分酶学性质研究。结果表明,当培养基中豆粕2... 采用愈创木酚初筛平板从无锡惠山、龙山等地筛选出6株阳性菌株,通过摇瓶复筛从中得到一株产MnP活性较高的菌株SYBC-M3;同时进行部分发酵产酶条件的研究。在此基础上,对得到的MnP进行了粗酶的部分酶学性质研究。结果表明,当培养基中豆粕20 g/L、蛋白胨10 g/L、Tween-200.5 g/L、Mn2+1.5 mmol/L,起始pH 5.0时,MnP的活力有较大程度的提高,可达1 775 U/L;其最适作用温度55℃,最适pH 5.0;同时其温度和pH稳定性也较好;pH 9.0下24 h还可保持90%以上的活性。 展开更多
关键词 白腐真菌 过氧化物 筛选 培养基优化 学性质
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木质层孔菌产锰过氧化物酶条件的优化及酶学性质研究 被引量:8
10
作者 崔艳红 韩庆功 +3 位作者 常魁珍 魏龙龙 张贝贝 胡志明 《饲料工业》 北大核心 2012年第12期55-59,共5页
试验选用白腐真菌中能产生较高锰过氧化物酶的菌株——木质层孔菌,采用单因子试验分析了木质层孔菌产锰过氧化物酶的最佳培养条件,并对其部分酶学作用特性进行了研究。试验结果表明,木质层孔菌产锰过氧化物酶的最佳培养条件是:最佳培养... 试验选用白腐真菌中能产生较高锰过氧化物酶的菌株——木质层孔菌,采用单因子试验分析了木质层孔菌产锰过氧化物酶的最佳培养条件,并对其部分酶学作用特性进行了研究。试验结果表明,木质层孔菌产锰过氧化物酶的最佳培养条件是:最佳培养温度为35℃;最佳碳源是小麦秸粉,最佳氮源是胰蛋白胨;最佳培养时间是192 h。锰过氧化物酶作用的最适反应温度是52℃;最适pH值是4.5;金属离子Zn2+和Ca2+对锰过氧化物酶的活性有促进作用;Mg2+对锰过氧化物酶的活性影响不是很大;Cu2+、Fe2+和Ag+对锰过氧化物酶活性具有抑制作用,其中Fe2+的抑制作用最强。 展开更多
关键词 过氧化物 条件 学特性
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白腐菌锰过氧化物酶对2,2’,4,4’-四溴联苯醚的降解 被引量:7
11
作者 阮久莉 王勐 +1 位作者 毛亮 高士祥 《环境科学与技术》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期20-24,共5页
多溴联苯醚(PBDEs)是一类在环境中普遍存在的全球性有机污染物,对这类污染物环境行为的研究虽然已有较多报道,但是微生物降解方面尤其是针对单一胞外酶降解的研究还比较少。文章以白腐菌模式菌种Phanerochaete chrysosporium为对象,研... 多溴联苯醚(PBDEs)是一类在环境中普遍存在的全球性有机污染物,对这类污染物环境行为的研究虽然已有较多报道,但是微生物降解方面尤其是针对单一胞外酶降解的研究还比较少。文章以白腐菌模式菌种Phanerochaete chrysosporium为对象,研究其分泌的胞外酶锰过氧化物酶(MnP)对环境中最常检测到的2,2’,4,4’-四溴联苯醚(BDE47)的好氧降解,考察不同β-环糊精浓度对该酶降解BDE47的影响,并初步探讨了胞内细胞色素P450的作用。结果表明,MnP能有效降解BDE47,在培养15 d后,扣除空白损失,降解率达到70%左右。低浓度和高浓度的环糊精对MnP降解BDE47无显著性影响。胞内细胞色素P450对BDE47的降解没有明显贡献。 展开更多
关键词 四溴联苯醚 过氧化物 Tween80 Β-环糊精 生物降解
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偏肿栓菌产锰过氧化物酶条件优化 被引量:9
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作者 张玉龙 池玉杰 闫洪波 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第8期88-94,共7页
采用LNAS(低氮天冬酰胺-琥珀酸)培养基用4种不同的底物处理方式,对白腐菌偏肿栓菌在28℃下进行静止培养,得到不同时间内的培养液,用紫外可见分光光度计分别检测在470,420,310nm处对于2,6-二甲氧基苯酚(2,6-DMP)、2,2’-连氮-双(3-乙基... 采用LNAS(低氮天冬酰胺-琥珀酸)培养基用4种不同的底物处理方式,对白腐菌偏肿栓菌在28℃下进行静止培养,得到不同时间内的培养液,用紫外可见分光光度计分别检测在470,420,310nm处对于2,6-二甲氧基苯酚(2,6-DMP)、2,2’-连氮-双(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)(ABTS)、藜芦醇(VA)的氧化作用后光密度值的变化情况,作为其木质素降解酶系统锰过氧化物酶(MnP)、漆酶和木质素过氧化物酶(LiP)产生的依据。结果表明:偏肿栓菌可产生MnP(必须在Mn2+存在的条件下)和漆酶(不依赖于Mn2+),但不产生LiP;在培养液内添加底物木屑和2,6-DMP后可显著提高2种酶的分泌量。在此基础上,用含Mn2+和青杨木屑的LNAS培养基对偏肿栓菌在30℃下静止培养作为初始培养条件,然后采用2次正交试验和多种单因素试验对偏肿栓菌产MnP的培养基组分和培养条件进行优化。结果表明:在试验设定的因素和水平范围内的最优组合是培养液果糖浓度为5g.L-1、酒石酸铵浓度为15mmol.L-1、锰离子浓度是200μmol.L-1、吐温-80浓度为0.25mL.L-1,MgSO4.7H2O浓度为0.35g.L-1、矿质元素溶液和维生素溶液加入量分别为10和1mL.L-1;培养液pH值4.5;培养温度27℃;150r.min-1摇瓶培养条件下装液量为110mL。酶活可达314.52U.L-1,比优化前提高8.4倍。 展开更多
关键词 偏肿栓菌 木质素降解 过氧化物 培养条件 正交试验
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白腐真菌产锰过氧化物酶的研究 被引量:10
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作者 余梅 阮小文 +1 位作者 谭丽泉 卢玉娟 《化学与生物工程》 CAS 2014年第11期40-44,共5页
以锰过氧化物酶活性为评价指标,研究各种因子对白腐真菌生长及产锰过氧化物酶的影响。结果表明:藜芦醇、苯甲醇和吐温80的添加有利于促进白腐真菌的生长及产锰过氧化物酶活性,在浓度分别为150mg·L-1、150mg·L-1、14mg·L-... 以锰过氧化物酶活性为评价指标,研究各种因子对白腐真菌生长及产锰过氧化物酶的影响。结果表明:藜芦醇、苯甲醇和吐温80的添加有利于促进白腐真菌的生长及产锰过氧化物酶活性,在浓度分别为150mg·L-1、150mg·L-1、14mg·L-1时对白腐真菌生长及产锰过氧化物酶促进作用最好;Ca2+、Fe2+对白腐真菌生长及产锰过氧化物酶活性的影响是一致的,均表现为"先促进,后抑制"的作用;Cu2+浓度小于0.4mg·L-1时能略微促进白腐真菌的生长及产锰过氧化物酶活性,大于该浓度时具有较明显的抑制作用。 展开更多
关键词 白腐真菌 过氧化物 活性 影响因子
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Box-Behnken实验设计及响应面分析优化锰过氧化物酶培养基条件 被引量:8
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作者 赵玉萍 陈晓旺 沈鹏伟 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期207-211,共5页
以白腐真菌为出发菌株,利用Design-Expert8.05软件设计,采用三水平部分因子分析初始发酵产酶培养基中10个因子,确定麸皮、酵母膏和KH2PO4为产锰过氧化物酶(Mnp)的显著影响因子,根据Box-Benhnken的中心组合实验设计及三因素三水平的响应... 以白腐真菌为出发菌株,利用Design-Expert8.05软件设计,采用三水平部分因子分析初始发酵产酶培养基中10个因子,确定麸皮、酵母膏和KH2PO4为产锰过氧化物酶(Mnp)的显著影响因子,根据Box-Benhnken的中心组合实验设计及三因素三水平的响应面分析,通过二次多项回归模型进行方差分析和回归拟合,预测了最佳产酶培养基条件为:麸皮、酵母膏和KH2PO4的添加量分别为10.75、3.37、0.095g/L,最大Mnp酶活预测值为4.06U/mL。验证实验Mnp酶活为4.15U/mL,与预测值十分接近。优化后的酶活与优化前相比,Mnp酶活提高了58.4%。 展开更多
关键词 过氧化物 三水平部分因子分析 Box—Behnken设计 响应面分析
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锰过氧化物酶对结晶紫脱色的研究 被引量:4
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作者 吕聪 曹福祥 董旭杰 《中南林业科技大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期172-174,共3页
利用茯苓Poria cocos在液体发酵条件下产锰过氧化物酶,并对其用于染料结晶紫降解脱色,确定其最适工艺条件.结果表明:茯苓产的锰过氧化物酶对染料结晶紫的最适脱色条件为H2O2浓度0.15 mmol/L,pH5.0,反应温度40℃.
关键词 茯苓 过氧化物 结晶紫 脱色
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红平菇HP1锰过氧化物酶基因克隆及染料脱色的研究 被引量:4
16
作者 郑苗苗 张令昂 +1 位作者 焦战战 邵淑丽 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2015年第4期1757-1763,共7页
采用LNAS(低氮天冬酰胺-琥珀酸)培养基添加方式,对红平菇HP1(Pleurotus djamor)进行培养,检测不同时间培养液对不同底物的氧化作用,作为锰过氧化物酶的产生及活性测定的主要依据。在含Mn2+的培养液添加底物木屑后锰过氧化物酶最大酶活为... 采用LNAS(低氮天冬酰胺-琥珀酸)培养基添加方式,对红平菇HP1(Pleurotus djamor)进行培养,检测不同时间培养液对不同底物的氧化作用,作为锰过氧化物酶的产生及活性测定的主要依据。在含Mn2+的培养液添加底物木屑后锰过氧化物酶最大酶活为358.7 U·L-1,提取经优化筛选后的锰过氧化物酶粗酶液,对4种具有不同化学结构的染料进行了脱色试验。结果表明,对异戊二烯类番红在6 h时脱色率为82.6%。因此,显示出红平菇HP1锰过氧化物酶对番红染料脱色具有较大的应用潜力,进而对废水处理具有更好的应用前景。采用RT-PCR和RACE技术,从红平菇HP1菌株中获得编码锰过氧化物酶基因的c DNA及DNA基因的全长序列,基因组大小为1404 bp。比较该锰过氧化物酶基因的c DNA和基因组DNA的全长序列,发现该基因包含5个外显子和4个内含子。c DNA序列的全长为1199 bp,其中包含一个完整的ORF,长度为1095 bp,编码365个氨基酸。 展开更多
关键词 红平菇HP1 过氧化物 条件 染料脱色
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活性黑对黄孢原毛平革菌锰过氧化物酶的影响 被引量:4
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作者 喻云梅 刘赟 +1 位作者 黄民生 翁恩琪 《安全与环境学报》 CAS CSCD 2005年第6期4-7,共4页
观察了活性黑KN-B(Reactive Black KN-B,RB KN-B)对黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)锰过氧化物酶(MnP)酶活力和菌丝超微结构的影响以及黄孢原毛平革菌对RB KN-B的降解。于P.chrysosporium培养液MnP酶活达最高前,分别加入... 观察了活性黑KN-B(Reactive Black KN-B,RB KN-B)对黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)锰过氧化物酶(MnP)酶活力和菌丝超微结构的影响以及黄孢原毛平革菌对RB KN-B的降解。于P.chrysosporium培养液MnP酶活达最高前,分别加入质量浓度为50 mg/L,200 mg/L,350 mg/L和500 mg/L的RB KN-B。分光光度法检测培养液MnP酶活,电镜观察菌丝超微结构的影响,紫外可见光谱法检测培养液中RB KN-B的降解。结果显示,1)与对照组相比,50 mg/L RBKN-B组的MnP酶活力增强,200 mg/L3、50 mg/L和500 mg/L组的MnP酶活力均显著低于对照组;2)电镜观察显示,经RB KN-B作用后,菌丝细胞膜受损,细胞内含物减少,胞质浓缩,出现质壁分离现象,500mg/L组有大量细胞解体;3)紫外可见光谱扫描显示,RB KN-B经黄孢原毛平革菌降解,可见光波段最大吸收峰由598 nm移至525 nm和556 nm,峰值减小,紫外波段的吸收峰由315 nm移至352 nm。结果显示,黄孢原毛平革菌对RB KN-B的反应类似机体对不良环境因子的应激反应,经历了诱导、抑制及衰退的过程;RB KN-B对黄孢原毛平革菌菌丝细胞超微结构的损伤随RB KN-B浓度增高而增强,表明RBKN-B对MnP酶活的抑制与黄孢原毛平革菌结构受损密切相关;黄孢原毛平革菌对RB KN-B具有一定的降解能力,其中MnP作为关键酶起了重要的作用。 展开更多
关键词 环境生物学 黄孢原毛平革菌 活性黑KN-B 过氧化物 超微结构
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偏肿革裥菌锰过氧化物酶酶学性质和染料脱色 被引量:3
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作者 张玉龙 池玉杰 冯连荣 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第9期73-80,共8页
【目的】研究白腐菌偏肿革裥菌(Lenzites gibbosa)所产锰过氧化物酶(MnP)纯酶的序列特征、酶学性质及其对染料的脱色能力,为其应用于木质素降解、染料脱色奠定基础。【方法】将纯化后的样品经SDS-PAGE检测后获得的唯一L.gibbosa MnP条... 【目的】研究白腐菌偏肿革裥菌(Lenzites gibbosa)所产锰过氧化物酶(MnP)纯酶的序列特征、酶学性质及其对染料的脱色能力,为其应用于木质素降解、染料脱色奠定基础。【方法】将纯化后的样品经SDS-PAGE检测后获得的唯一L.gibbosa MnP条带切割,采用Nano液相色谱-电喷雾串联质谱法联用(Nano LC-ESI-MS/MS)多肽测序技术对蛋白氨基酸序列进行测定。利用该SDS-PAGE图谱,建立蛋白分子量与迁移率的标准直线,从标准直线上求出MnP纯酶样品的表观分子量;参照酶活测定方法检测最适反应温度及温度稳定性、最适反应p H值及p H稳定性;采用lineweaver-Burk双倒数作图法求解米氏动力学常数Km值。研究L.gibbosa菌种培养液和MnP纯酶液对蒽醌类的茜素红、偶氮类的刚果红、杂环类的中性红和三苯基甲烷类的结晶紫等4种不同类型染料的脱色能力。【结果】串联质谱扫描出2条MnP的保守序列肽段,与克隆到的基因Lg-mnp1编码的Lg-MnP1(Gen Bank登录号:ACO92620)序列完全吻合,表明其所代表的酶蛋白Lg-MnP1就是唯一电泳带中主要的蛋白。Lg-MnP1的表观分子量为45.39 k Da,最适反应温度为35℃,在低于40℃的条件下都具有一定的催化能力,但温度超过50℃后迅速失活;其最适反应pH值为3.5,p H超过4.5反应程度就迅速下降,在p H为2~3时最稳定;在以2,6-DMP为底物时,在21℃条件下其米氏常数Km为6.124 mmol·L^(-1)。L.gibbosa培养液对染料在1 h的脱色率分别为茜素红100%、中性红22.17%、刚果红19.09%,对结晶紫的脱色率很低,在36 h脱色率仅为0.018%。纯化后的Lg-MnP1溶液对染料的最大脱色率在2 h分别为中性红100%、刚果红95.55%、茜素红75.85%和结晶紫36.57%。【结论】SDS-PAGE得到的唯一一条电泳带中的MnP是Lg-MnP1。Lg-MnP1是一种中温性、偏酸性的酶,与2,6-DMP的亲和力较大。L.gibbosa含有菌丝的培养液对茜素红具有彻底的降解效果,但Lg-MnP1纯酶液对中性红、刚果红和结晶紫的降解效率要远高于同时含有菌丝、漆酶和MnPs的培养液。 展开更多
关键词 偏肿革裥菌 过氧化物 纯化 学性质 染料脱色
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Lenzites gibbosa锰过氧化物酶1基因启动子序列的克隆 被引量:3
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作者 吴书景 池玉杰 闫洪波 《东北林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期107-109,127,共4页
根据已克隆到的Lenzites gibbosa锰过氧化物酶1cDNA全长基因Lg-mnp1,在5'端设计了3个巢式特异性引物,利用染色体步移技术克隆得到了其上游1 568 bp的启动子序列。采用Signal Scan进行了启动子序列分析。结果表明,在起始密码子上游-9... 根据已克隆到的Lenzites gibbosa锰过氧化物酶1cDNA全长基因Lg-mnp1,在5'端设计了3个巢式特异性引物,利用染色体步移技术克隆得到了其上游1 568 bp的启动子序列。采用Signal Scan进行了启动子序列分析。结果表明,在起始密码子上游-92~-43 bp区域为Lg-mnp1启动子的基础启动子区;在-52 bp处有一个转录起始位点,-83 bp处有1个TATAAA-box,-119、-196 bp有2个反向CCAAT-box(ATTGG)。启动子区也存在多个顺式作用元件,包括转录因子SP-1(GGGCGG)、转录因子AP-2(CCCMNSSS)、热激元件HSE(NTTCNNGAAN)及6个推定的金属响应元件MRE(TGCRCNC)等。 展开更多
关键词 Lenzitesgibbosa 过氧化物 启动子 染色体步移 序列分析
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三株白腐菌产锰过氧化物酶活性及其对多环芳烃的降解 被引量:3
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作者 丁娟 罗坤 +1 位作者 周娟 高士祥 《环境污染与防治》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期656-660,共5页
比较研究了β-环糊精(β-CD)对3株黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)CGMCC5.776、GIM3.383和GIM3.393产锰过氧化物酶(MnP)和降解多环芳烃(PAHs)的影响。结果表明:3株菌都能分泌出高活性的MnP,β-CD能显著提高MnP的... 比较研究了β-环糊精(β-CD)对3株黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)CGMCC5.776、GIM3.383和GIM3.393产锰过氧化物酶(MnP)和降解多环芳烃(PAHs)的影响。结果表明:3株菌都能分泌出高活性的MnP,β-CD能显著提高MnP的活性,加入2.0 g/Lβ-CD的体系培养到第12天时,酶活性最高达到2 912.5 U/L;而且β-CD能显著提高PAHs的降解率,两者之间存在较好的相关性,加入1.0 g/Lβ-CD的体系对比不加β-CD的体系,PAHs的降解率提高了1~2倍。PAHs的降解同时受到MnP活性、PAHs表观溶解度和分子结构稳定性等因素的影响。 展开更多
关键词 黄孢原毛平革菌 过氧化物 多环芳烃 Β-环糊精
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