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酿酒葡萄铵转运体AMT1;1基因的克隆与功能分析
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作者 曾蕊 朱骏驰 +5 位作者 徐俐琴 刘秀云 韩菲菲 唐美玲 唐艳雯 宋志忠 《中外葡萄与葡萄酒》 北大核心 2025年第5期1-9,共9页
从酿酒葡萄‘马瑟兰’中克隆获得一个铵离子(NH_(4)^(+))转运蛋白编码基因VvAMT1;1。VvAMT1;1与桃PpeAMT1;1、梨PbrAMT1;1、水稻OsAMT1;1、拟南芥AtAMT1;1、AtAMT1;2和AtAMT1;3同源蛋白的氨基酸序列一致性高达76.10%,系统发育树分析表明... 从酿酒葡萄‘马瑟兰’中克隆获得一个铵离子(NH_(4)^(+))转运蛋白编码基因VvAMT1;1。VvAMT1;1与桃PpeAMT1;1、梨PbrAMT1;1、水稻OsAMT1;1、拟南芥AtAMT1;1、AtAMT1;2和AtAMT1;3同源蛋白的氨基酸序列一致性高达76.10%,系统发育树分析表明,VvAMT1;1与桃AMT1;1在遗传进化关系上较近。VvAMT1;1基因在‘马瑟兰’果实发育不同时期中的表达量差异较大,其表达在幼果期、硬核期和转色期果实中较高,在第二次膨大期和成熟期果实中显著降低,虽然新生叶片和根中VvAMT1;1的表达量分别低于同一时期果实中的,但其表达量在‘马瑟兰’整个果实发育时期相对稳定;VvAMT1;1基因在不同砧穗组合果实的表达量存在差异,其在‘马瑟兰/SO4’嫁接苗果实中的显著高于‘马瑟兰/1103P’嫁接苗和‘马瑟兰’自根苗果实。酵母突变体功能互补和^(15)N同位素示踪吸收动力学分析表明,VvAMT1;1是一个典型的高亲和性的铵转运体,其Km为35.67μmol·L^(-1),且Vmax值为2.85μmoles·min^(-1)·μg^(-1)cells,具有吸收NH_(4)^(+)的功能。此外,甲基胺(MeA^(+))显著降低了VvAMT1;1介导NH_(4)^(+)吸收的Vmax值,且VvAMT1;1能介导酵母细胞吸收和利用微量的MeA^(+),L-甲硫氨酸亚砜亚胺(L-MSX)显著降低了VvAMT1;1介导NH_(4)^(+)吸收的Vmax值,而VvAMT1;1介导的NH_(4)^(+)吸收过程可受到体内NH_(4)^(+)的积累水平的反馈抑制。 展开更多
关键词 酿酒葡萄 铵转运体 果实发育 酵母突变体功能互补 底物反馈抑制
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空心莲子草铵转运体ApAMT1;3基因的克隆及功能鉴定 被引量:1
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作者 宋志忠 杨顺瑛 +2 位作者 郝东利 岳光振 苏彦华 《草业科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期649-657,共9页
近年来,空心莲子草(Alternanthera philoxeroides)因其对水体富营养化尤其是水体铵积累有潜在的修复能力而受到人们的关注。然而,目前对空心莲子草吸铵的分子生物学研究甚少。本研究利用简并引物和RACE技术分离了一条铵转运体cDNA,命名... 近年来,空心莲子草(Alternanthera philoxeroides)因其对水体富营养化尤其是水体铵积累有潜在的修复能力而受到人们的关注。然而,目前对空心莲子草吸铵的分子生物学研究甚少。本研究利用简并引物和RACE技术分离了一条铵转运体cDNA,命名为ApAMT1;3;实时定量结果表明,ApAMT1;3主要在地上部表达,缺铵处理显著增强了ApAMT1;3在根、茎及叶部的表达水平;酵母功能互补试验表明,ApAMT1;3是一个功能型的铵转运体。本研究结果为研究空心莲子草NH4+的吸收和利用提供了新的基因资源,同时也为研究水生植物NH4+的吸收转运及调控机制奠定了分子生物学基础。 展开更多
关键词 空心莲子草 铵转运体 ApAMT1 3基因 表达 酵母功能互补
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利用异源酵母功能互补法研究水稻铵转运体OsAMT1;1功能及调控机制 被引量:1
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作者 杨顺瑛 丛郁 +1 位作者 郝东利 苏彦华 《江苏农业科学》 北大核心 2015年第1期27-31,共5页
水稻是一种以铵态氮为主要氮素营养的重要粮食作物,存在至少12个铵转运体,对水稻铵的吸收起着至关重要的作用,其中,水稻铵转运体1;1(Oryza sativa ammonium transporter1;1,Os AMT1;1)是一个在根部和地上部相对组成型表达的基因。通过... 水稻是一种以铵态氮为主要氮素营养的重要粮食作物,存在至少12个铵转运体,对水稻铵的吸收起着至关重要的作用,其中,水稻铵转运体1;1(Oryza sativa ammonium transporter1;1,Os AMT1;1)是一个在根部和地上部相对组成型表达的基因。通过异源酵母功能互补法研究水稻铵转运体Os AMT1;1的功能及其调控机制,结果表明,Os AMT1;1是一个功能型的铵转运体,和铵的同系物甲基铵(Methylammonium,Me A+)相比,Os AMT1;1对铵具有相对较高的选择性;Os AMT1;1介导铵的吸收不依赖于外界质子,转运的底物可能是铵离子;Os AMT1;1介导吸收铵的过程是一个依赖能量的主动运输过程,对铵的吸收可能不受钙离子参与的磷酸化过程调控。 展开更多
关键词 水稻 铵转运体1 1 酵母功能互补 调控
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